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AB-8大孔树脂-C18柱联用分离干腌牛肉抗氧化肽的研究
1
作者 张迎阳 陈文涛 +4 位作者 徐莹 孙承骏 邹林玲 邹平 满在伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期171-179,共9页
该文利用盐酸提取法提取了干腌牛肉多肽,借助AB-8型大孔树脂及C18球形硅胶柱的分离纯化出4种抗氧化肽,利用分子对接模拟了4种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的结合位点。利用盐酸提取法提取了抗氧化肽并测试其在1... 该文利用盐酸提取法提取了干腌牛肉多肽,借助AB-8型大孔树脂及C18球形硅胶柱的分离纯化出4种抗氧化肽,利用分子对接模拟了4种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的结合位点。利用盐酸提取法提取了抗氧化肽并测试其在1、2、3、4、5 mg/mL的抗氧化能力,发现在5 mg/mL时,DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和超氧阴离子自由基(·O_(2)^(-))清除率分别为86.24%、35.62%和54.34%。对比了AB-8、D101、S-8、X-S、HPD-500、NKA-9的吸附率与解吸率,AB-8的吸附率与解吸率最好,分别为92.55%和82.88%。研究优化了AB-8的上样流速、上样量、乙醇洗脱浓度和洗脱流速,在4 BV/h上样流速、39 mL上样量、75%(体积分数)乙醇溶液洗脱剂和1 mL/min洗脱流速时,可以分离出3个组分(A、B和C),测试3个组分的抗氧化能力,B组分的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和·O_(2)^(-)清除能力最高,分别为73.33%、21.01%和63.33%。对B组分进行C18柱分离,分离出4个抗氧化肽:FDGDF、TGPGPW、FLSDH和KPFDAK。与SOD(PDB ID;1E9O)进行分子对接,发现FDGDF、TGPGPW、FLSDH和KPFDAK均可以与SOD形成氢键,结合能分别为-6.7、-6.55、-6.6、-7.35 kcal/mol,1 mg/mL的FDGDF可以有效增加SOD活力11.64%,酶活力单位增加697 U/mL,研究结果为干腌牛肉制品的开发提供理论基础。 展开更多
关键词 干腌牛肉 抗氧化肽 大孔树脂 分离纯化 分子对接
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橄榄仁抗氧化肽的分离鉴定及分子对接
2
作者 张迎阳 董亚云 +1 位作者 邹平 郑文武 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期189-198,共10页
该研究利用酶解法结合凝胶色谱柱从橄榄仁中分离纯化得到6个抗氧化肽,采用分子对接模拟6种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的结合机制。采用酶解法从橄榄仁中提取抗氧化活性肽,以水解度、DPPH自由基清除率为指标,... 该研究利用酶解法结合凝胶色谱柱从橄榄仁中分离纯化得到6个抗氧化肽,采用分子对接模拟6种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的结合机制。采用酶解法从橄榄仁中提取抗氧化活性肽,以水解度、DPPH自由基清除率为指标,从6种商用酶中筛选出最适蛋白酶为木瓜蛋白酶,以底物浓度、酶底比、酶解时间、温度进行单因素试验,选取影响酶解反应的3个因素(酶底比>温度>时间)进行响应面法优化得出最佳工艺条件为底物质量浓度50 g/L、酶底比为3.3%(质量分数)、温度20℃、时间88 min。对最优条件下的粗肽液进行SephadexG-25和SephadexG-15分离纯化得到6个具有良好活性的抗氧化肽,分别为WLSF、TSVLR、LVYLVR、AGGKPFQ、YYPFKGFA、AFNVDERLAR。TSVLR显示出最高的DPPH自由基清除活性81.07%和羟自由基清除能力42.48%。分子对接研究表明,纯化的肽通过疏水效应和氢键与抗氧化相关的关键蛋白SOD有效结合。结果表明,橄榄仁可作为天然食物来源制取功能性食品的一个新的探究方向。 展开更多
关键词 橄榄仁 抗氧化肽 响应面优化 分离鉴定 分子对接
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英国红芸豆抗氧化肽对氧化应激斑马鱼的保护作用研究
3
作者 李琳 陈丹 +2 位作者 范晓禹 郑喜群 崔素萍 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期70-79,共10页
为探究英国红芸豆抗氧化肽组分(BRKBPAPC)的体内抗氧化作用,利用2,2′-偶氮二异丁基脒二盐酸盐诱导建立氧化应激斑马鱼模型,研究BRKBPAPC对氧化应激斑马鱼的影响。结果表明:BRKBPAPC能显著提高(P<0.05)斑马鱼体内过氧化氢酶(CAT)、... 为探究英国红芸豆抗氧化肽组分(BRKBPAPC)的体内抗氧化作用,利用2,2′-偶氮二异丁基脒二盐酸盐诱导建立氧化应激斑马鱼模型,研究BRKBPAPC对氧化应激斑马鱼的影响。结果表明:BRKBPAPC能显著提高(P<0.05)斑马鱼体内过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力和总抗氧化能力(T-AOC),显著降低(P<0.05)丙二醛(MDA)含量;同时BRKBPAPC还具有调节斑马鱼脂代谢的能力,随着处理浓度的增加斑马鱼脂代谢指标逐渐恢复正常水平;高剂量BRKBPAPC可使斑马鱼行为轨迹增多,高速运动次数、时间、距离显著上升。高剂量抗氧化肽处理21 d时,CAT、SOD、T-AOC、GSH-Px分别增至(28.29±3.29)、(126.59±6.39)、(2.07±0.18)、(84.75±7.77)U/mg prot,MDA含量降至(3.35±0.29)nmol/mg prot。由此可见,BRKBPAPC具有较好的体内抗氧化作用及脂代谢调节能力。 展开更多
关键词 英国红芸豆 抗氧化肽 氧化应激 脂代谢 斑马鱼 行为
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青刺果抗氧化肽的分离纯化、结构鉴定及其分子对接解析
4
作者 于梦怡 刘世林 +3 位作者 黄志远 董文明 范江平 王雪峰 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期109-119,共11页
采用超滤、强阴离子交换层析法分离并纯化青刺果蛋白酶解物,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为评价指标,筛选具有较好抗氧化活性的肽组分。通过L C-MS/MS鉴定肽序列,结合生物信息学方法分... 采用超滤、强阴离子交换层析法分离并纯化青刺果蛋白酶解物,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为评价指标,筛选具有较好抗氧化活性的肽组分。通过L C-MS/MS鉴定肽序列,结合生物信息学方法分析其理化特性,并进一步利用红外光谱、分子对接技术解析其二级结构特征及与Keap1蛋白的对接位点。研究结果表明,分离得到的4个组分中F-1组分具有更好的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率达到27.67%。选择活性更高,且分子质量小于1 kDa的肽组分,测定得到的3条肽(TALDVPPPR、TLSDAGVGGL和DLINGGKDA)的DPPH自由基清除率,其IC 50值分别为0.43、0.83、0.51 mg/mL,其中TALDVPPPR的抗氧化活性相对较高。二级结构分析结果表明,3条抗氧化肽均由α-螺旋、β-折叠和β-转角构成,其中TALDVPPPR的α-螺旋含量相对较低,使其更易与自由基结合。分子对接结果显示,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA以氢键和疏水作用与Keap1蛋白紧密结合,释放Nrf2进入细胞核,并激活一系列具有抗氧化和细胞保护作用的蛋白质表达,即激活Keap 1-Nrf2/ARE通路而发挥抗氧化作用。因此,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA可作为新型抗氧化剂,研究旨在为青刺果功能性肽的开发利用提供理论参考。 展开更多
关键词 青刺果 抗氧化肽 二级结构 Keap 1-Nrf2/ARE 分子对接
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澳洲坚果抗氧化肽的分离纯化及肽段鉴定
5
作者 付镓榕 马尚玄 +3 位作者 魏元苗 徐文婷 郭刚军 贺熙勇 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第6期91-99,共9页
为研究澳洲坚果抗氧化肽的抗氧化活性和氨基酸组成,以复配蛋白酶水解澳洲坚果粕制备粗多肽,利用超滤、大孔树脂纯化技术制备了抗氧化活性最佳的分子量小于1000 Da的多肽,采用Sephadex G-15凝胶对其分离并评价各组分对DPPH、羟基、ABTS+... 为研究澳洲坚果抗氧化肽的抗氧化活性和氨基酸组成,以复配蛋白酶水解澳洲坚果粕制备粗多肽,利用超滤、大孔树脂纯化技术制备了抗氧化活性最佳的分子量小于1000 Da的多肽,采用Sephadex G-15凝胶对其分离并评价各组分对DPPH、羟基、ABTS+自由基的清除能力与还原能力,筛选出抗氧化活性最强组分,利用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography and tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行鉴定并分析。结果表明,葡聚糖凝胶柱层析分离出G1、G2、G3组分,其中G3具有最佳的抗氧化活性,其羟基自由基清除能力半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))6.18 mg/mL与还原能力IC_(50)2.19 mg/mL优于谷胱甘肽,DPPH自由基清除能力IC_(50)0.50 mg/mL,ABTS+自由基清除能力IC_(50)0.02 mg/mL;通过液相色谱-串联质谱鉴定G3含有46个肽段,肽段长度均小于10个氨基酸,匹配得分大于200分的9条肽段分子量为631~920 Da,均无毒性;筛选获得高抗氧化活性肽HLLPK、KEFFP、KEFFPA,其分子量分别为606.84、666.83、737.92 Da。本研究初步揭示了澳洲坚果抗氧化肽组成,深化了澳洲坚果抗氧化肽的研究,为澳洲坚果抗氧化肽的开发利用提供了理论参考。 展开更多
关键词 澳洲坚果 抗氧化肽 抗氧化活性 分离纯化 肽段鉴定
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干腌火腿抗氧化肽的研究进展
6
作者 谢锐鸿 肖珊 +1 位作者 王波 王际辉 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第4期250-259,共10页
自由基过量累积会导致人体许多慢性疾病的产生,如衰老、慢性炎症、心血管疾病等,目前常规的解决方法是使用抗氧化剂。然而人工合成的抗氧化剂对人体有潜在危害,因此无毒副作用的抗氧化肽成为了当今研究的热点。作为发酵肉制品之一的干... 自由基过量累积会导致人体许多慢性疾病的产生,如衰老、慢性炎症、心血管疾病等,目前常规的解决方法是使用抗氧化剂。然而人工合成的抗氧化剂对人体有潜在危害,因此无毒副作用的抗氧化肽成为了当今研究的热点。作为发酵肉制品之一的干腌火腿,因其蛋白质含量丰富,且在发酵过程中受到内源酶和微生物的影响,会对蛋白质进行分解,从而产生具有抗氧化活性的小肽。大量的研究表明,来源于干腌火腿的肽具有极强的抗氧化活性。因此,干腌火腿作为天然抗氧化肽的潜在来源,备受研究人员的关注。本文综述了干腌火腿中抗氧化肽研究的最新进展,主要包括抗氧化肽的形成、制备、纯化鉴定及抗氧化机制4个方面,其中特别指出外源微生物对抗氧化肽形成的影响,以期为干腌火腿抗氧化肽的进一步研究提供理论基础。 展开更多
关键词 干腌火腿 抗氧化肽 抗氧化性 内源酶 微生物
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基于分子模拟技术筛选牛乳清蛋白源抗氧化肽
7
作者 马寅龙 郭锐斌 +2 位作者 于雁松 马隆凯 许晓曦 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期11-31,共21页
传统抗氧化肽的筛选往往需要经过酶解、纯化、分离、鉴定及体外试验验证,时间和物力花费较大。本研究以生物信息学为理论基础,利用计算机虚拟消化、相关活性预测与评价、药物代谢动力学及分子模拟技术对牛乳清蛋白源抗氧化肽进行依次筛... 传统抗氧化肽的筛选往往需要经过酶解、纯化、分离、鉴定及体外试验验证,时间和物力花费较大。本研究以生物信息学为理论基础,利用计算机虚拟消化、相关活性预测与评价、药物代谢动力学及分子模拟技术对牛乳清蛋白源抗氧化肽进行依次筛选,对其可能发生的Keap1-Nrf2-ARE抗氧化途径进行分析、解释,分析其分子反应过程中构象的稳定性。应用PeptideRanker程序对生物活性进行预测评分,筛选得到137条评分大于0.4的肽段,同时采用ToxinPred、Innovagen、Expasy-compute及Pepdraw程序进一步分析肽段的理化性质,并通过药物代谢动力学ADMET、TOPKAT分析对肽段进行筛选,得到14条无毒、无致敏性、无致突变性、无致癌性及水溶性良好的多肽,然后将其与Keap1受体进行分子对接。将分子对接评分前4位的多肽与Keap1的最优结合复合物进行构象作用机制分析,最终通过复合物构象分子间作用力评价CDEF序列最具抗氧化活性的潜力,并将CDEF-Keap1受体复合物进行分子动力学模拟,结果显示动力学模拟过程中构象变化较稳定,因此CDEF抗氧化肽可在人体中较好地发挥抗氧化活性。与传统酶解方法相比,本方法可快速、高效筛选抗氧化肽,为天然食品源抗氧化肽的快速筛选提供了新思路。 展开更多
关键词 乳清蛋白 抗氧化肽 生物活性肽 分子对接
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纳豆抗氧化肽对H2O2诱导HEK293细胞氧化应激损伤的保护作用
8
作者 李思涵 倪庆圆 +1 位作者 耿相玉 李秀凉 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第6期161-169,共9页
目的评价纳豆肽的抗氧化能力以及对对H_(2)O_(2)诱导HEK293细胞氧化应激损伤的保护作用。方法首先以1,1-二苯基-2-三硝基苯(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基(DPPH·)、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,... 目的评价纳豆肽的抗氧化能力以及对对H_(2)O_(2)诱导HEK293细胞氧化应激损伤的保护作用。方法首先以1,1-二苯基-2-三硝基苯(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基(DPPH·)、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]阳离子自由基(ABTS^(+)·)、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(·O^(2-))清除能力以及总还原能力为指标,测定酶解得到纳豆肽粗品的抗氧化能力。利用超滤技术对纳豆肽进行分离,测定分离后各组分在不同浓度下对DPPH·及ABTS^(+)·清除活性。将活性最强的两个组分作为纳豆抗氧化肽,测定其对H_(2)O_(2)诱导氧化损伤HEK293细胞抗氧化酶含量的影响,评价其对氧化损伤HEK293细胞的保护效果。结果纳豆肽粗品在8.00 mg/mL时具有良好的DPPH·、ABTS^(+)·、·OH和·O^(2-)清除能力以及总还原能力。超滤后得到了相对分子质量分别大于30、10~30、3~10、小于3 kDa的4个纳豆肽组分,其对DPPH·及ABTS^(+)·清除活性均随着质量浓度的增加呈现上升趋势,特别是在8 mg/mL时,相对分子质量为3~10 kDa和小于3 kDa组分表现出最强的抗氧化活性,后续的细胞试验表明,这两个组分能够显著提高氧化应激下HEK293细胞的存活率。在300μg/mL的剂量范围内,小于3 kDa组分的纳豆抗氧化肽可使细胞存活率恢复至未损伤时的水平,而3~10 kDa组分也使损伤细胞的存活率提高了40.8%。同时,纳豆抗氧化肽均能提高氧化损伤HEK293细胞中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GPX)和过氧化氢酶(catalase,CAT)等抗氧化酶的含量,<3 kDa组分和3~10 kDa组分的纳豆抗氧化肽分别使SOD含量提高了49.52%和50.80%,GPX含量提高了49.52%和50.81%,CAT含量提高了93.64%和91.97%。结论纳豆肽具有抗氧化潜力,纳豆抗氧化肽可以有效地缓解H_(2)O_(2)诱导的HEK293细胞的氧化应激损伤,为纳豆抗氧化肽在功能食品中的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 纳豆抗氧化肽 超滤 HEK293细胞 氧化损伤 保护作用
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风味蛋白酶酶解桑葚制备抗氧化肽的工艺研究
9
作者 戴梦萍 段涵怡 +1 位作者 陈晓萌 杨雪 《粮食与油脂》 北大核心 2024年第2期116-120,共5页
利用风味蛋白酶酶解桑葚粉制备抗氧化肽。以多肽得率和DPPH·清除率为指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化酶解工艺。结果表明:最佳酶解条件为酶解温度54℃、pH 6.95、酶解时间4.25 h、酶添加量8%(以桑葚蛋白质量计)、料液... 利用风味蛋白酶酶解桑葚粉制备抗氧化肽。以多肽得率和DPPH·清除率为指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化酶解工艺。结果表明:最佳酶解条件为酶解温度54℃、pH 6.95、酶解时间4.25 h、酶添加量8%(以桑葚蛋白质量计)、料液比30∶1(g/L),在此条件下桑葚多肽得率为16.76%±0.58%、DPPH·清除率为62.45%±0.93%,制得的桑葚抗氧化肽具有较好的抗氧化活性。 展开更多
关键词 桑葚 风味蛋白酶 酶解工艺 抗氧化肽
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观赏海棠果抗氧化肽制备及其对油脂抗氧化作用研究
10
作者 刘晓伟 崔淼 +1 位作者 王萌蕾 牛恒林 《粮食与油脂》 北大核心 2024年第5期43-48,83,共7页
以观赏海棠果蛋白粉为原料,通过超声辅助酶解制备观赏海棠果抗氧化肽。在单因素试验的基础上,以抗氧化肽得率和DPPH自由基清除率的总评归一值为指标,通过响应面法优化制备工艺,并评价观赏海棠果抗氧化肽对油脂的抗氧化作用。结果表明:... 以观赏海棠果蛋白粉为原料,通过超声辅助酶解制备观赏海棠果抗氧化肽。在单因素试验的基础上,以抗氧化肽得率和DPPH自由基清除率的总评归一值为指标,通过响应面法优化制备工艺,并评价观赏海棠果抗氧化肽对油脂的抗氧化作用。结果表明:最佳工艺条件为加酶量4000 U/g、(以观赏海棠果蛋白粉质量计)pH 6.5、木瓜蛋白酶与中性蛋白酶质量比2∶1、底物质量分数9%、酶解时间1.4 h、酶解温度51℃、超声时间19 min、超声功率250 W,在此条件下观赏海棠果抗氧化肽得率为50.71%,其对DPPH自由基的清除率为87.92%,总评归一值为0.998;抗氧化试验表明,观赏海棠果抗氧化肽对油脂具有较强的抗氧化作用。 展开更多
关键词 观赏海棠果 抗氧化肽 复合酶 抗氧化性
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响应面法优化辣椒籽抗氧化肽的酶解制备工艺
11
作者 刘聪 尹乐斌 +3 位作者 罗鑫阳 李德芳 邹文广 贺超 《粮食与油脂》 北大核心 2024年第2期111-115,共5页
以辣椒籽蛋白质为原料,采用酶法制备辣椒籽抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为评价指标,在单因素试验基础上,通过响应面法优化辣椒籽抗氧化肽的酶解制备工艺。结果表明:碱性蛋白酶为最适蛋白酶,最优酶解工艺参数为酶添加量0.11 g(以0.30 g... 以辣椒籽蛋白质为原料,采用酶法制备辣椒籽抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为评价指标,在单因素试验基础上,通过响应面法优化辣椒籽抗氧化肽的酶解制备工艺。结果表明:碱性蛋白酶为最适蛋白酶,最优酶解工艺参数为酶添加量0.11 g(以0.30 g辣椒籽蛋白质质量计)、pH 9.0、酶解温度55℃、酶解时间3.75 h,在此条件下,DPPH自由基清除率达到37.71%±0.83%。 展开更多
关键词 辣椒籽蛋白质 碱性蛋白酶 响应面法 抗氧化肽
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益生菌发酵制备金针菇抗氧化肽的研究 被引量：2
12
作者 王广慧 魏雅冬 +2 位作者 于德涵 张腾霄 王斌 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第4期95-100,共6页
试验旨在获得高活性的金针菇抗氧化肽,优化益生菌发酵制备金针菇抗氧化肽的条件。试验以金针菇为发酵基质,以抗氧肽对2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除率为指标,对枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉3种益生... 试验旨在获得高活性的金针菇抗氧化肽,优化益生菌发酵制备金针菇抗氧化肽的条件。试验以金针菇为发酵基质,以抗氧肽对2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除率为指标,对枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉3种益生菌进行了筛选,使用pH值沉淀法分离抗氧化肽的最适pH值,采用单因素和响应面试验对发酵条件(液料比、发酵时间、发酵温度、金针菇用量)进行考察。结果显示,枯草芽孢杆菌适合发酵金针菇制备抗氧化肽;沉淀抗氧肽的最适pH值为6;最佳发酵条件为液料比4.50 mL/g、发酵时间30 h、发酵温度35℃、金针菇用量40.00 g,此条件下金针菇抗氧化肽对ABTS自由基清除率预测值为95.60%,实测值为96.75%,实测值与预测值相差很小,表明此响应面法优化的工艺可靠,截留分子量小于3 kD的抗氧肽活性最强。研究表明,通过此法制备的金针菇抗氧肽具有很强的抗氧化性,为金针菇产品的开发利用提供了参考。 展开更多
关键词 益生菌发酵 金针菇抗氧化肽 响应面 超滤法
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食源抗氧化肽的制备与活性筛选 被引量：1
13
作者 张李伟 张铂瑾 +3 位作者 姜岩 崔永泉 殷佳艺 张英华 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第13期152-158,共7页
过多的活性氧自由基会导致细胞凋亡甚至组织损伤,引发慢性疾病,采用食源性活性肽辅助疾病的预防和治疗具有一定的开发潜力。该研究选择α-乳白蛋白、酪蛋白、米糠蛋白、麦谷蛋白和火麻仁蛋白,进行碱性蛋白酶单酶水解、胃蛋白酶与胰液素... 过多的活性氧自由基会导致细胞凋亡甚至组织损伤,引发慢性疾病,采用食源性活性肽辅助疾病的预防和治疗具有一定的开发潜力。该研究选择α-乳白蛋白、酪蛋白、米糠蛋白、麦谷蛋白和火麻仁蛋白,进行碱性蛋白酶单酶水解、胃蛋白酶与胰液素双酶解两种方式制备抗氧化肽,并测定水解产物的抗氧化活性。结果表明,碱性蛋白酶水解条件下的样品活性更高,α-乳白蛋白、酪蛋白、米糠蛋白和麦谷蛋白水解样的抗氧化活性相近且显著高于火麻蛋白(P<0.05)。将4种抗氧化活性较高的蛋白的水解样品进行凝胶色谱分离纯化,测定活性后发现,分子质量越小的分离组分活性越高。利用液相色谱-质谱联用对抗氧化肽进行序列鉴定,获得6条三肽和5条四肽,其中WVC、LFY和YWL具有抗氧化活性潜力。 展开更多
关键词 食源蛋白 抗氧化肽 水解产物 分离纯化 液相色谱-质谱联用
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牦牛血抗氧化肽发酵制备工艺优化及结构分析研究 被引量：1
14
作者 周雨 施丽芬 +1 位作者 朱捷 马路凯 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第6期270-278,共9页
目的优化牦牛血抗氧化肽的发酵制备工艺并分析其结构。方法在单因素实验的基础上,开展牦牛血抗氧化肽制备的响应面优化实验。采用液相色谱-串联质谱法(liquidchromatography-tandemmass spectrometry,LC-MS/MS)对经冷冻干燥处理后的牦... 目的优化牦牛血抗氧化肽的发酵制备工艺并分析其结构。方法在单因素实验的基础上,开展牦牛血抗氧化肽制备的响应面优化实验。采用液相色谱-串联质谱法(liquidchromatography-tandemmass spectrometry,LC-MS/MS)对经冷冻干燥处理后的牦牛血抗氧化肽的肽段组成及其序列进行检测。结果牦牛血抗氧化肽制备的最佳工艺条件为:底物质量浓度65g/L、接种量2.0%、发酵时间71h。在此条件下,牦牛血抗氧化肽的羟基自由基清除率为88.21%。根据其氨基酸组成、肽段序列、分子量大小筛选出可能具有较好抗氧化活性的肽段20条,其所匹配的蛋白为A0A6B0QV06、A0A6B0QW84。经蛋白质数据库Uniprot鉴定分析,此两类蛋白质已形成由两条α链和两条β链组成的异四聚体结构,可促进动物肺脏器官中的氧气运输到其他脏器组织中,具有抗缺氧的作用。结论采用枯草芽孢杆菌液态发酵法制备牦牛血抗氧化肽,可增大牦牛血的利用率,减少资源的浪费。 展开更多
关键词 牦牛血 发酵 抗氧化肽 蛋白质 结构
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超滤联用中压柱层析分离咸鸭蛋清抗氧化肽
15
作者 谢亮亮 李晶晶 蔡为荣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第13期159-164,共6页
为了提高咸鸭蛋清的综合利用,制备咸鸭蛋清抗氧化肽。该研究以脱盐咸鸭蛋清粉为原料,以自由基清除能力为指标,筛选出最适蛋白酶并确定水解条件。再通过超滤联用中压柱层析技术依次对水解粗肽进行分级和纯化。最后,鉴定所得活性肽纯度及... 为了提高咸鸭蛋清的综合利用,制备咸鸭蛋清抗氧化肽。该研究以脱盐咸鸭蛋清粉为原料,以自由基清除能力为指标,筛选出最适蛋白酶并确定水解条件。再通过超滤联用中压柱层析技术依次对水解粗肽进行分级和纯化。最后,鉴定所得活性肽纯度及序列。结果表明酸性蛋白酶为最适蛋白酶,其水解最优条件为酶解温度45℃、底物质量浓度为30 g/L、酶添加量为2×10^(4) U/g、水解时间为6 h。该条件下水解液DPPH自由基清除率达94.23%,水解度达33.52%。水解液经超滤和中压柱层析得最优组分UF-43,纯度达91.97%,其自由基清除能力较未分离的水解液提高约5倍。经高效液相串联二级质谱测定,其氨基酸序列为Phe-Gly-Ser-Val,分子质量为408 Da。因此,利用超滤联用中压柱层析技术可实现小分子活性肽分级和纯化。 展开更多
关键词 咸鸭蛋清 抗氧化肽 中压柱层析 分离纯化 序列鉴定
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发酵紫苏粕制备抗氧化肽的工艺优化及抗氧化性
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作者 陈林林 王玲 +3 位作者 郑凤鸣 张海鹏 郝熙 辛嘉英 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2023年第18期116-124,共9页
以脱脂后的紫苏炼油副产物紫苏粕为原料,选取酵母菌为发酵菌种,通过单因素和响应面试验探究紫苏粕发酵工艺对饼粕中蛋白质含量的影响,得到的优化条件为发酵液pH3.4、液料比5.0∶1(mL/g)、接菌量为8.5%(质量分数)、发酵时间24 h,此条件... 以脱脂后的紫苏炼油副产物紫苏粕为原料,选取酵母菌为发酵菌种,通过单因素和响应面试验探究紫苏粕发酵工艺对饼粕中蛋白质含量的影响,得到的优化条件为发酵液pH3.4、液料比5.0∶1(mL/g)、接菌量为8.5%(质量分数)、发酵时间24 h,此条件下蛋白质含量为0.679 mg/g。以最优条件下发酵后的紫苏粕酶解制备抗氧化肽,研究酶种类与酶用量对发酵后紫苏粕抗氧化性的影响。结果表明,发酵后紫苏粕蛋白经碱性蛋白酶水解后,其抗氧化能力强于胰蛋白酶水解后的酶解液,且当碱性蛋白酶的用量在5.0%(800 U/g)时,酶解液对DPPH自由基、羟基自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基清除能力达到最佳。 展开更多
关键词 紫苏粕 抗氧化肽 发酵 酶解 抗氧化性
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量子化学计算及分子对接技术对豌豆蛋白源抗氧化肽YLVN、TFY的抗氧化作用机制研究
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作者 赵丹 刘晓兰 郑喜群 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第7期131-138,共8页
目的 探究豌豆蛋白源抗氧化肽YLVN、TFY的抗氧化机制。方法 利用量子化学理论计算构建抗氧化肽的优势构象,前线轨道分布及能级差(ΔE)和福井函数(Fukui)中的f0(r)对二者活性位点进行了推测;分子对接技术对抗氧化肽与1,1-二苯基-2-三硝... 目的 探究豌豆蛋白源抗氧化肽YLVN、TFY的抗氧化机制。方法 利用量子化学理论计算构建抗氧化肽的优势构象,前线轨道分布及能级差(ΔE)和福井函数(Fukui)中的f0(r)对二者活性位点进行了推测;分子对接技术对抗氧化肽与1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2-diazo-di(3-ethyl-benzothiazol-6-sulfonic acid)diamiammonium salt,ABTS]自由基的清除作用机制进行了探究,并通过体外自由基清除实验验证肽的活性,将理论计算和实验测定进行分析比对。结果 前线分子轨道中的最高占据分子轨道(highest occupied molecular orbital, HOMO)及轨道能级确定酪氨酸(Tyr)残基是肽YLVN、TFY重要的活性位点,与Fukui函数f^(0)(r)推断肽YLVN中Tyr的酚羟基O14-H47和肽TFY中Tyr的酚羟基O_(2)6-H52是重要的活性位点基本一致。同时,进一步对Fukui函数确定的活性位点处的Mulliken电荷分析,推测酚羟基的-OH键通过释放H原子与自由基结合中断自由基的链式反应;分子对接结果表明YLVN、TFY可以分别与DPPH和ABTS自由基通过形成氢键相互作用具有较强的自由基清除能力,理论预测与体外化学实验结果基本一致。结论 豌豆蛋白源抗氧化肽YLVN、TFY具有较强的自由基清除能力,本研究为抗氧化肽的结构机制和抗氧化机制探究提供了理论基础。 展开更多
关键词 抗氧化肽 量子化学计算 分子对接 抗氧化机制
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酶解北芪菇蛋白抗氧化肽制备及其抗氧化活性研究
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作者 缪文玉 程继安 +2 位作者 陈超 张娜郡 秦楠 《食品与药品》 CAS 2023年第5期390-396,共7页
目的研究制备北芪菇蛋白抗氧化肽的最佳条件,并探究其抗氧化活性。方法以浓度为2%的北芪菇蛋白液作底物,通过测定抗氧化肽的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)清除率和北芪菇蛋白的水解度,确定复合酶的加酶方式与比例,然后进行单因... 目的研究制备北芪菇蛋白抗氧化肽的最佳条件,并探究其抗氧化活性。方法以浓度为2%的北芪菇蛋白液作底物,通过测定抗氧化肽的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)清除率和北芪菇蛋白的水解度,确定复合酶的加酶方式与比例,然后进行单因素试验确定酶解时间、加酶量、酶解温度、pH值的最佳范围。在此基础上以DPPH·清除率为响应值进行响应面法优化分析。结果确定最佳工艺为:中性蛋白酶:碱性蛋白酶=1:1,酶解时间1.5 h,复合酶添加量5100 U/g,温度40℃,pH 7.5,在此工艺条件下,DPPH·清除率达到58.20%±0.23%,2,2’-联氨双(3-乙苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS·^(+))清除能力达到81.13%±1.09%,总还原能力达到0.3393±0.0023。结论酶解得到的北芪菇蛋白抗氧化肽具有一定的抗氧化活性。 展开更多
关键词 北芪菇 蛋白酶 复合酶解 抗氧化肽 抗氧化活性
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金针菇蛋白源抗氧化肽精准制备条件优化
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作者 张玉 李雪 +2 位作者 王伟 白丽萍 王君虹 《浙江农业科学》 2023年第9期2256-2261,共6页
为获得制备金针菇蛋白源抗氧化肽的最佳酶解条件,以金针菇蛋白为原料,通过酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶对其进行酶解,以抑制羟自由基能力为评价指标,筛选具有最佳抑制羟自由基能力的蛋白酶。通过酶底比、... 为获得制备金针菇蛋白源抗氧化肽的最佳酶解条件,以金针菇蛋白为原料,通过酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶对其进行酶解,以抑制羟自由基能力为评价指标,筛选具有最佳抑制羟自由基能力的蛋白酶。通过酶底比、水底比、酶解温度、pH值和酶解时间选出最佳单因素酶解条件,再通过响应面优化法进一步优化酶解温度、pH值和酶解时间3个因素。结果显示,最佳金针菇蛋白源抗氧化肽制备实际条件:碱性蛋白酶,酶底比3%,水底比15 mL·g^(-1),酶解温度44.2℃,pH值8.32,酶解时间4.13 h。所得酶解肽质量浓度在5.0 mg·mL^(-1)时,抑制羟自由基能力为72.9 U·mL^(-1),总抗氧化能力为9.6 U·mL^(-1)。 展开更多
关键词 金针菇 抗氧化肽 制备 响应面法
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大鲵皮胶原抗氧化肽的制备及分离纯化
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作者 周艳华 郏修齐 +2 位作者 李涛 王建文 罗庆华 《肉类研究》 2023年第12期1-6,共6页
为高效利用大鲵加工副产物大鲵皮,对大鲵皮胶原抗氧化肽的制备及分离纯化进行研究。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为评价指标评价其抗氧化活性,研究大鲵皮胶原抗氧化肽的制备工艺,确定最... 为高效利用大鲵加工副产物大鲵皮,对大鲵皮胶原抗氧化肽的制备及分离纯化进行研究。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为评价指标评价其抗氧化活性,研究大鲵皮胶原抗氧化肽的制备工艺,确定最适工艺条件,即酶添加量8000 U/g、酶解pH 9.0、酶解温度55℃、酶解时间4 h。在此工艺条件下,大鲵皮胶原抗氧化肽DPPH自由基清除率为40.2%。采用超滤分离得到分子质量不同的3个组分,即P1(>6 kDa)、P2(3~6 kDa)、P3(<3 kDa),其中P3具有较强的抗氧化活性,DPPH自由基清除率为56.7%。在此基础上,进一步采用凝胶色谱技术分离,通过Sephadex G-25分离纯化P3,得到不同分子质量的3个组分(SP1、SP2、SP3),其中SP3具有较强的抗氧化活性,DPPH自由基清除率为72.3%。最后采用氨基酸自动分析仪技术进一步分析SP3的氨基酸组成,探寻大鲵皮胶原肽抗氧化活性与其氨基酸组成之间的内在联系。结果表明:大鲵皮胶原抗氧化肽氨基酸组成中,甘氨酸、脯氨酸含量较高,胱氨酸含量较低,这一特征符合胶原抗氧化肽的氨基酸组成特征;除甘氨酸、脯氨酸含量较高外,大鲵皮胶原蛋白抗氧化肽中还含有较高含量的具有明显抗氧化活性的丙氨酸、精氨酸、谷氨酸、亮氨酸等氨基酸,这可能是大鲵皮胶原抗氧化肽SP3具有较高抗氧化活性的原因。 展开更多
关键词 中国大鲵 大鲵皮 胶原蛋白 抗氧化肽 分离纯化
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