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改良组织块结合胶原酶消化法培养食管癌细胞
1
作者 王晓慧 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2013年第4期362-365,共4页
目的:探讨食管癌细胞体外分离培养方法,建立合理、高效的食管癌细胞原代培养模式。方法:应用改良的培养方法,即先将组织用机械法剪碎后再用胶原酶进行消化,对13例新鲜的食管癌组织进行体外培养,观察人食管癌细胞生长情况。结果:改良方... 目的:探讨食管癌细胞体外分离培养方法,建立合理、高效的食管癌细胞原代培养模式。方法:应用改良的培养方法,即先将组织用机械法剪碎后再用胶原酶进行消化,对13例新鲜的食管癌组织进行体外培养,观察人食管癌细胞生长情况。结果:改良方法培养的细胞生长率为61%,污染率为15%。结论:改良组织块结合胶原酶消化法成功建立了较为合理、高效的食管癌细胞原代培养模式。 展开更多
关键词 原代培养 食管癌细胞 改良组织块结合胶原酶消化法
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绒山羊附睾上皮细胞培养方法的建立及其生长特性 被引量：8
2
作者 范晓梅 张通 +2 位作者 栗瑞兰 边小娜 张家新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1212-1220,共9页
本研究旨在建立一种简单易行、获取细胞纯度高的绒山羊附睾上皮细胞体外培养体系。10~12月龄绒山羊附睾头部分别采用酶消化法和改良组织块消化法进行原代培养,利用免疫细胞化学染色法和免疫荧光化学法对细胞进行鉴定,同时利用流式细胞仪... 本研究旨在建立一种简单易行、获取细胞纯度高的绒山羊附睾上皮细胞体外培养体系。10~12月龄绒山羊附睾头部分别采用酶消化法和改良组织块消化法进行原代培养,利用免疫细胞化学染色法和免疫荧光化学法对细胞进行鉴定,同时利用流式细胞仪和CCK法分别检测细胞纯度和增殖情况,在电镜下观察细胞超微结构。结果表明,两种培养方法所获的细胞均呈岛屿状克隆生长和较好的增殖能力,具有活跃的分泌和代谢功能;上皮细胞特异性的角蛋白18和附睾特异性的谷胱甘肽过氧化物酶5(GPx5)的表达以及流式细胞仪结果显示,两种方法所获细胞均为纯度较高的附睾上皮细胞,但改良组织块消化法获得原代细胞需要的时间长,酶消化法获得原代细胞时间短,获得的细胞量大。本研究结果为进一步研究绒山羊附睾上皮功能提供了良好的基础。 展开更多
关键词 细胞培养 附睾上皮细胞 酶消化法 改良组织块消化法
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三种方法培养慢性阻塞性肺疾病大鼠气道平滑肌细胞的比较 被引量：2
3
作者 杨诚 梁瑞韵 +1 位作者 黄林洁 江山平 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第50期9448-9452,共5页
背景:原代培养方法被广泛应用于正常和哮喘大鼠气道平滑肌细胞的培养,但少见用于慢性阻塞性肺疾病大鼠气道平滑肌细胞培养的报道。目的:建立大鼠慢性阻塞性肺疾病模型,比较组织块法、酶消化法和改良组织块消化法原代培养模型大鼠气道平... 背景:原代培养方法被广泛应用于正常和哮喘大鼠气道平滑肌细胞的培养,但少见用于慢性阻塞性肺疾病大鼠气道平滑肌细胞培养的报道。目的:建立大鼠慢性阻塞性肺疾病模型,比较组织块法、酶消化法和改良组织块消化法原代培养模型大鼠气道平滑肌细胞生长情况的差异。方法:将16只清洁级雄性健康SD大鼠随机分成2组,对照组正常饲养,慢性阻塞性肺疾病组用熏烟法建立大鼠慢性阻塞性肺疾病模型,显微镜下观察大鼠肺组织病理学特点。分别应用上述3种方法原代培养慢性阻塞性肺疾病大鼠气道平滑肌细胞,相差显微镜下观察细胞形态,用α-平滑肌肌动蛋白免疫组织化学染色鉴定细胞类型。结果与结论:经病理学证实成功构建慢性阻塞性肺疾病大鼠模型。在倒置相差显微镜下见培养的细胞表现为典型的"谷-峰状"生长。经免疫细胞化学染色后,可见胞质呈棕色阳性反应,所培养的细胞有94%以上为气道平滑肌细胞。3种方法在耗时和细胞质量方面均无明显差别,但组织块法更经济、稳定可靠和简单。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 大鼠 动物模型 气道平滑肌细胞 原代培养 组织块法 酶消化法 改良组织块消化法 细胞形态 α-平滑肌肌动蛋白 组织构建
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