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一种在体标记小鼠精原细胞新生蛋白合成的方法
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作者 邹乾兴 梁媛媛 +3 位作者 沈开元 黄萍 罗平 曲晓力 《实验动物科学》 2024年第1期7-11,共5页
目的 哺乳动物精子发生是一种由一系列生精细胞组成的连续细胞增殖和分化并最终产生精子的过程。然而,生精细胞的蛋白稳态分析仍缺乏有效手段。本研究的目的是探索一种在体标记并检测生精细胞新生蛋白合成的方法。方法 利用氨基酰tRNAs... 目的 哺乳动物精子发生是一种由一系列生精细胞组成的连续细胞增殖和分化并最终产生精子的过程。然而,生精细胞的蛋白稳态分析仍缺乏有效手段。本研究的目的是探索一种在体标记并检测生精细胞新生蛋白合成的方法。方法 利用氨基酰tRNAs结构类似物——嘌呤霉素(Puromycin,Puro)以65 mg/kg小鼠体质量的剂量腹腔注射小鼠,1.5 h后,处死小鼠,分离两侧睾丸,其中一侧睾丸用于总蛋白提取,另一侧睾丸用于石蜡切片制备,随后利用Puro特异性抗体分别通过Western blot和免疫荧光检测样品中Puro的含量及定位。结果 Western blot结果显示Puro能够标记总体新生蛋白合成情况;免疫荧光共定位显示Puro在小鼠睾丸中特异性标记的是精原细胞。结论 Puro能够用于小鼠精原细胞新生蛋白质的在体标记,并可通过相应免疫学技术定量分析新生蛋白合成水平。 展开更多
关键词 嘌呤霉素 精子发生 精原细胞 新生蛋白合成
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DEHP对新生雄性仔鼠毒性作用的实验研究 被引量：5
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作者 郑海红 陈祥义 +5 位作者 陈玲 吴亮 陈三妹 方周溪 葛仁山 陈国荣 《医学研究杂志》 2012年第1期28-33,共6页
目的探讨邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对新生雄性仔鼠毒性作用及机制。方法 DEHP分别以低、中、高3组剂量[10、100、750mg/(kg.d)]灌胃作用于怀孕12天到产后21天(GD12～PND21)的SD母鼠,观察DEHP对产后1天(PND1)及产后21天(PND21)雄性... 目的探讨邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对新生雄性仔鼠毒性作用及机制。方法 DEHP分别以低、中、高3组剂量[10、100、750mg/(kg.d)]灌胃作用于怀孕12天到产后21天(GD12～PND21)的SD母鼠,观察DEHP对产后1天(PND1)及产后21天(PND21)雄性仔鼠体重、睾丸重量、肛生殖器距离(AGD)和其对胚胎Leydig细胞形态结构、促黄体生成素受体(LHR)及类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)的蛋白表达水平的影响。结果 PND1中、高剂量组雄仔鼠的体重下降明显,分别与对照组和低剂量组相比较均有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸重量下降明显,与对照组相比较有显著性差异(P<0.05);中、高剂量组雄仔鼠的AGD均有不同程度缩短,与对照组和低剂量组相比缩短均有显著性差异(P<0.01)。PND21中、高剂量组雄仔鼠的体重下降明显,分别与对照组和低剂量组相比均有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸重量下降明显,与对照组相比有显著性差异(P<0.01);中、高剂量组雄仔鼠的AGD缩短明显,分别与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。光镜下低剂量组可见胚胎Leydig细胞(FLC)聚集呈簇分布,中剂量组与高剂量组均可见胚胎Leydig细胞呈瘤样增生。电镜示低剂量组Leydig细胞椭圆形、长梭形,脂质颗粒减少,线粒体、滑面内质网丰富。中、高剂量组Leydig细胞呈梭形或椭圆形,大小不一,核大、圆,胞质丰富,细胞聚集一起,胞质内可见丰富的脂质颗粒,脂质颗粒染色深,滑面内质网及线粒体扩张。中、高剂量组睾丸FLC的LHR蛋白表达明显减弱,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸FLC的StAR蛋白表达减弱明显,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论 DEHP对新生雄性仔鼠具有毒性作用,其可能机制是DEHP宫内暴露后,抑制睾丸FLC的LHR蛋白和StAR蛋白的表达从而影响睾丸的发育。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二乙基己基酯新生胚胎Leydig细胞类固醇激素合成急性调节蛋白 黄体生成素受体大鼠
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