姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)下调Wnt5a表达抑制A549人肺癌细胞增殖

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作者 马丽 马童童 +3 位作者 周文静 李娟 李玉云 徐慧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期15-20,共6页

目的探讨姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)对A549肺癌细胞株生物学功能的影响及可能的分子机制。方法沉默或过表达A549人肺癌细胞的PDS5B后,噻唑蓝(MTT)法及集落形成实验检测肺癌细胞的增殖情况;划痕实验及TranswellTM检测... 目的探讨姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)对A549肺癌细胞株生物学功能的影响及可能的分子机制。方法沉默或过表达A549人肺癌细胞的PDS5B后,噻唑蓝(MTT)法及集落形成实验检测肺癌细胞的增殖情况;划痕实验及TranswellTM检测细胞迁移的情况;Western blot法检测A549细胞PDS5B及无翅基因5a(Wnt5a)的蛋白表达;共同转染PDS5B小干涉RNA(siRNA)及Wnt5a siRNA,TranswellTM检测细胞迁移的情况。结果与转染阴性对照组相比,转染PDS5B siRNA后,PDS5B蛋白表达明显下降且A549细胞增殖能力、细胞集落形成率、迁移能力均明显提高,Wnt5a的表达升高;过表达PDS5B后,则结果相反;共转实验显示Wnt5a可以抵抗PDS5B对A549细胞的抑制作用。结论PDS5B通过下调Wnt5a表达抑制肺癌细胞增殖。 展开更多

关键词 姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B) A549肺癌细胞 无翅基因5a(wnt5a) 癌细胞生物学

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Wnt5a基因在血液病及白血病细胞株中的表达 被引量：10

2

作者 李招权 司维柯 +2 位作者 潘静 袁媛 邹全明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期927-930,共4页

本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础。用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达。结果表明:... 本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础。用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达。结果表明:5例AML中4例均为阴性或弱阳性,仅1例完全缓解的病例表达呈强阳性。K562、HL-60细胞的Wnt5a表达也为阴性,Jurkat细胞的Wnt5a表达阳性。6例CML的Wnt5a表达均为阴性。4例ALL中3例为表达阳性或弱阳性,1例表达为阴性;2例CLL为阴性表达;2例MM中Wnt5a表达1例为弱阳性,1例为阴性;3例淋巴瘤中有1例为弱阳性,2例为阴性;2例AA、2例IDA、3例ITP、1例ET及PVWnt5a表达均为阳性或弱阳性。结论:在31例血液病标本及髓系白血病细胞株中,除ALL外,有明显的Wnt5a表达缺失或降低,而非恶性血液病例中Wnt5a表达普遍呈阳性,提示Wnt5a的表达下调可能与髓系白血病的发生有关。 展开更多

关键词 wnt5a 血液病 白血病细胞株 基因表达

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海蜇(Rhopilema esculentum)Wnt5基因：cDNA克隆、基因组结构与表达 被引量：9

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作者 周春娅 朱玲 +4 位作者 潘滢 谢明松 杨傲傲 陈四清 庄志猛 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期1115-1122,共8页

采用转录组454 GS FLX测序和RACE技术,首次解析了海蜇Wnt5基因的cDNA和基因组结构。结果表明,Re-Wnt5基因的cDNA全长1647bp,其中编码区长1059bp,编码了353个氨基酸的多肽;Re-Wnt5基因组含有4个外显子和3个内含子。SMART分析表明,Re-Wnt... 采用转录组454 GS FLX测序和RACE技术,首次解析了海蜇Wnt5基因的cDNA和基因组结构。结果表明,Re-Wnt5基因的cDNA全长1647bp,其中编码区长1059bp,编码了353个氨基酸的多肽;Re-Wnt5基因组含有4个外显子和3个内含子。SMART分析表明,Re-Wnt5具有Wnt家族共同的结构特征,包括一个由20个氨基酸组成的信号肽,2个N-糖基化位点和24个保守的参与二硫键形成的半胱氨酸。多序列比对和系统进化分析表明,Re-Wnt5基因与来自刺胞动物、无脊椎动物和脊索动物的Wnt5、脊椎动物的Wnt5a和Wnt5b具有高度相似性,Wnt5a和Wnt5b两个进化分支发生在脊索动物文昌鱼之后。实时荧光定量PCR显示,Re-Wnt5基因在海蜇四个发育阶段均有表达,其中横裂体阶段的表达量最高,分别是螅状体、碟状体和水母体表达量的12.38、9.99和13.01倍。 展开更多

关键词 海蜇 wnt5 CDNA 基因组结构 实时荧光定量PCR

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环境暴露和FGF18、WNT5A基因多态性与NSCL/P的关系 被引量：3

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作者 俞辉明 程宏宇 房进 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期588-590,共3页

目的探讨淮安及周边地区环境暴露、FGF18、WNT5A基因多态性及其交互作用与非综合征性唇腭裂(NSCL/P)的关系。方法选择80例NSCL/P患儿(病例组)和80例非NSCL/P儿童(对照组),调查环境因素与遗传因素,用PCR-RFLP检测FGF18基因rs4043716位点... 目的探讨淮安及周边地区环境暴露、FGF18、WNT5A基因多态性及其交互作用与非综合征性唇腭裂(NSCL/P)的关系。方法选择80例NSCL/P患儿(病例组)和80例非NSCL/P儿童(对照组),调查环境因素与遗传因素,用PCR-RFLP检测FGF18基因rs4043716位点、WNT5A基因rs566926位点基因型,进行单因素2分析和多因素logistic回归分析。结果分析显示父亲文化、母亲孕早期感染史、孕早期服药史、母亲孕早期补充叶酸、WNT5A基因rs566926位点多态性与NSCL/P有相关性(P<0.05)。FGF18基因rs4043716位点多态性与NSCL/P无相关性(P>0.05)。结论孕早期感染史、孕早期服药史、WNT5A基因rs566926位点多态性与NSCL/P发生有关,孕早期服药史与WNT5A基因rs566926之间存在一定的交互作用。父亲文化、母亲孕早期补充叶酸是NSCL/P的保护因素。 展开更多

关键词 非综合征性唇腭裂 基因多态性 FGF wnt5a

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Wnt5a基因在急性髓细胞白血病病例中的表达分析 被引量：1

5

作者 赵宸 杨宗林 +5 位作者 司维柯 邓刚 牛长春 袁媛 李招权 潘静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1034-1037,共4页

目的检测Wnt5a基因在良性血液病、急性髓细胞白血病及缓解病例骨髓中的表达情况,探讨Wnt5a在急性髓细胞白血病发生中的作用。方法RT-PCR方法检测18例良性血液病病例,30例急性髓细胞白血病初诊病例和25例缓解病例骨髓中Wnt5amRNA的表达情... 目的检测Wnt5a基因在良性血液病、急性髓细胞白血病及缓解病例骨髓中的表达情况,探讨Wnt5a在急性髓细胞白血病发生中的作用。方法RT-PCR方法检测18例良性血液病病例,30例急性髓细胞白血病初诊病例和25例缓解病例骨髓中Wnt5amRNA的表达情况;免疫细胞化学法检测对应骨髓中Wnt5a蛋白的表达情况。结果Wnt5a mRNA在良性血液病、急性髓细胞白血病病例和缓解病例中的阳性表达率分别为88.9%(16/18)、30%(9/30)和68.0%(17/25),半定量值分别为(0.3826±0.1908)、(0.1041±0.0590)和(0.2606±0.1466)。统计学分析Wnt5a mRNA在初诊病例中的表达明显低于缓解病例(P<0.05),缓解病例与良性血液病之间无明显差异(P>0.05);Wnt5a蛋白在良性血液病中阳性表达,在急性髓细胞白血病初诊病例中低表达或表达缺失,在缓解病例中表达恢复。结论Wnt5a基因在急性髓细胞白血病初诊病例中表达缺失而在治疗缓解病例中表达恢复,提示急性髓系白血病的发生可能与Wnt5a基因表达缺失或下调有关,Wnt5a可以作为一个髓系白血病诊断、指导治疗和疗效评价的指标。 展开更多

关键词 wnt5a 基因表达 急性髓细胞白血病 血液病

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Wnt5a基因在骨关节炎中作用机制的研究进展 被引量：1

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作者 褚云峰 于红燕 +3 位作者 杨琪 彭艳斌 陈仲 于斐 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1518-1521,1555,共5页

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是由于关节软骨退变丢失导致的一种临床常见慢性退行性疾病,给患者及国家带来沉重医疗负担,对其机制深入研究有利于临床加强对OA的治疗。近年研究发现,无翅型MMTV整合位点家族成员5A(Wnt5a)基因在OA的发病... 骨关节炎(osteoarthritis,OA)是由于关节软骨退变丢失导致的一种临床常见慢性退行性疾病,给患者及国家带来沉重医疗负担,对其机制深入研究有利于临床加强对OA的治疗。近年研究发现,无翅型MMTV整合位点家族成员5A(Wnt5a)基因在OA的发病及进展中有重要作用,其可以影响OA的独立发病因素如衰老、代谢所致肥胖、创伤等参与OA的发病,并可以通过经典(Wnt/β-catenin)及非经典(Wnt/Ca^(2+)和Wnt/Planar polarity等)Wnt通路参与OA的调控。本文就Wnt5a基因在OA中的作用及机制作一综述,为相关研究提供便利。 展开更多

关键词 wnt5a基因 骨关节炎 wnt通路 作用机制

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中药护心康对TLR4基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型Wnt5a表达的影响 被引量：4

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作者 董晓斐 丁小玉 +1 位作者 贺佳幸 屈波 《临床和实验医学杂志》 2019年第2期122-125,共4页

目的探讨TLR4基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型Wnt5a表达的变化及中药护心康的干预作用。方法SPF级TLR4基因敲除小鼠共68只,随机取10只为对照组,予以普通饲料喂养;其余58只予以高脂饲料建立动脉粥样硬化模型,喂养13周后从造模动物中随机选... 目的探讨TLR4基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型Wnt5a表达的变化及中药护心康的干预作用。方法SPF级TLR4基因敲除小鼠共68只,随机取10只为对照组,予以普通饲料喂养;其余58只予以高脂饲料建立动脉粥样硬化模型,喂养13周后从造模动物中随机选取5只解剖观察其胸主动脉,光镜下发现粥样斑块为造模成功。造模成功动物随机分为模型组、护心康组、阿托伐他汀组,Wnt抑制剂WIF组,每组12只,分别予以相应处理。正常组不做处理,模型组予以生理盐水灌胃并腹腔注射,其余各组均予相应药物灌胃和腹腔注射处理,灌胃容积均为0. 5 ml、腹腔注射容积均为0. 3 ml,每日1次。治疗8周后处死小鼠,心脏采血,酶比色法检测血脂;取胸主动脉,光镜下观察动脉粥样硬化形成情况;免疫组化法检测斑块中Wnt5a蛋白的表达。结果 (1)血脂检测:造模后动物胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白水平比正常组明显升高(P <0. 05);阿托伐他汀和护心康可以降低胆固醇和低密度脂蛋白水平(P<0. 05),WIF对二者的降低作用不明显;三种药物对甘油三酯和高密度脂蛋白的影响相对较小。(2)光镜观察:正常组无斑块形成,模型组可见内膜增厚,大量斑块明显形成,血管腔明显减小;各药物干预组斑块病变相对较轻。(3)Wnt5a蛋白表达:模型组中Wnt5a蛋白表达明显高于正常组(P <0. 01);与模型组相比,三种药物均能降低Wnt5a,Wnt抑制剂WIF降低作用较强(P <0. 01),护心康组和阿托伐他汀组也有明显的降低作用(P <0. 05); WIF降低Wnt5a的作用较阿托伐他汀强(P <0. 05)。结论 TLR4基因敲除小鼠动脉粥样硬化时Wnt5a表达明显升高,中药护心康能降低血脂和Wnt5a在动脉粥样硬化中的表达,从而可以减轻动脉粥样硬化的形成。 展开更多

关键词 小鼠 TOLL样受体4基因敲除 护心康 动脉粥样硬化 wnt5a

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Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤中的表达分析 被引量：3

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作者 邓刚 司维柯 +2 位作者 潘静 赵宸 李招权 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1832-1835,共4页

目的检测Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤患者骨髓中的表达,探讨Wnt5a基因与淋巴细胞系恶性肿瘤发生的关系。方法采用氯化氨试剂裂解红细胞收集有核细胞;半定量RT-PCR方法检测19例淋巴细胞系恶性肿瘤、11例治疗缓解淋巴细胞系恶性肿瘤、2... 目的检测Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤患者骨髓中的表达,探讨Wnt5a基因与淋巴细胞系恶性肿瘤发生的关系。方法采用氯化氨试剂裂解红细胞收集有核细胞;半定量RT-PCR方法检测19例淋巴细胞系恶性肿瘤、11例治疗缓解淋巴细胞系恶性肿瘤、27例正常人骨髓标本和10例脐带血CD34+细胞中Wnt5a mRNA的表达;免疫细胞化学法检测部分标本中Wnt5a蛋白表达。结果Wnt5a mRNA在正常人、淋巴细胞系恶性肿瘤病例、治疗缓解病例和脐带血CD34+细胞中的阳性表达率分别为88.9%(24/27)、10.5%(2/19)、72.7%(8/11)、100%(10/10),半定量均值分别为(0.4015±0.150)、(0.1139±0.048)、(0.3570±0.141)、(0.2475±0.095)。经统计学分析Wnt5a mRNA在淋巴细胞系恶性肿瘤病例中的表达明显低于正常人(P<0.05);治疗缓解病例与正常人间没有显著性差异(P>0.05),而与未缓解病例间有差异(P<0.05);在脐带血CD34+细胞中的表达低于正常人(P<0.05)但高于淋巴细胞系恶性肿瘤病例(P<0.05);Wnt5a蛋白在正常人中阳性表达,而在淋巴细胞系恶性肿瘤病例中低表达或表达缺失。结论Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤病例中表达缺失而在治疗缓解病例中表达恢复,提示淋巴细胞系恶性肿瘤的发生可能与Wnt5a基因表达缺失或下调有关,Wnt5a可以作为一个淋巴细胞系恶性肿瘤诊断与疗效评价的指标。 展开更多

关键词 wnt5a 淋巴细胞系恶性肿瘤 基因表达

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WNT5B基因与人类神经管畸形(NTDs)的相关性 被引量：2

9

作者 周翔宇 杨雪艳 +3 位作者 聂晨霞 陈瑛 王红艳 李红 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期18-24,共7页

目的探讨WNT5B基因序列变异与人类神经管畸形(neural tube defects,NTDs)发生的相关性。方法应用PCR-Sequencing和SNaPshot技术在163例NTDs患者和357例对照人群中进行WNT5B基因突变扫描和关联分析。结果在NTDs患者的WNT5B基因中共检测到... 目的探讨WNT5B基因序列变异与人类神经管畸形(neural tube defects,NTDs)发生的相关性。方法应用PCR-Sequencing和SNaPshot技术在163例NTDs患者和357例对照人群中进行WNT5B基因突变扫描和关联分析。结果在NTDs患者的WNT5B基因中共检测到3个新发现的序列变异位点:c.-57-123G>A、c.622-38G>A和c.622-99C>T。其中,c.-57-123G>A位点变异在357例对照人群中未检测到,其为NTDs患者所特有的变异位点。对rs2270036(c.329-16T>C)、rs6489313(c.329-84G>A)和rs58317077(c.329-122T>C)这3个SNP位点的关联分析结果表明:在显性遗传模式下,rs58317077位点的C等位基因与NTDs的发生显著相关,携带C/C或C/T基因型的个体的患病风险是携带T/T基因型的个体的1.62倍(OR=1.62,95%CI=1.05～2.52,P=0.028);生物信息学预测结果表明:rs58317077位点的C等位基因会改变转录因子NF-kap和MZF1对该区域的结合。结论 c.-57-123G>A和rs58317077位点的C等位基因是人类NTDs发生的遗传性风险因子。 展开更多

关键词 神经管畸形(NTDs) 平面细胞极性信号通路 wnt5B基因 变异位点 突变

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沉默Sp5对mEPMCs中Wnt信号通路相关因子及增殖能力的影响

10

作者 柏宇 兰雪娇 +3 位作者 唐璟 文雨 吕明敏 宋庆高 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第12期1314-1321,共8页

目的 探讨沉默转录因子特异蛋白5(Sp5)对小鼠胚胎腭突间充质细胞(m EPMCs)中Wnt信号通路相关因子及增殖能力的影响。方法 体外分离并培养孕14.5 d C57BL/6J小鼠的mEPMCs,细胞免疫荧光染色鉴定细胞来源;利用慢病毒转染技术沉默mEPMCs中Sp... 目的 探讨沉默转录因子特异蛋白5(Sp5)对小鼠胚胎腭突间充质细胞(m EPMCs)中Wnt信号通路相关因子及增殖能力的影响。方法 体外分离并培养孕14.5 d C57BL/6J小鼠的mEPMCs,细胞免疫荧光染色鉴定细胞来源;利用慢病毒转染技术沉默mEPMCs中Sp5基因的表达,Western blot验证转染效率。后续实验设空白对照组、空载病毒组、沉默组(Sp5-shRNA组)。各组细胞转染72 h后,采用Western blot及RT-qPCR法分别检测β-连环蛋白(β-catenin)、丝氨酸/苏氨酸激酶(GSK-3β)、Wnt家族成员3a(Wnt3a)、特异性周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白及m RNA的表达;CCK-8法检测细胞增殖能力;免疫荧光法检测5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)阳性细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期。结果 成功分离mEPMCs并沉默Sp5的表达。Western blot及RT-qPCR结果显示,Sp5-shRNA组β-catenin、GSK-3β、Wnt3a、CyclinD1蛋白及mRNA表达水平均高于空白对照组和空载病毒组(P<0.05);Sp5-shRNA组细胞增殖能力和EdU阳性细胞增殖率均高于空白对照组和空载病毒组(P<0.05);Sp5-shRNA组mEPMCs处于S期的细胞比例高于空白对照组和空载病毒组(P<0.05)。结论 沉默m EPMCs中Sp5可通过对Wnt信号通路的调控来参与腭的发育,促进mEPMCs的增殖。 展开更多

关键词 Sp转录因子类 wnt信号通路 细胞增殖 腭突间充质细胞 Sp5基因

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WNT信号抑制基因SFRP5 mRNA表达与胃癌的关系 被引量：1

11

作者 钱征 王林 《国外医学（医学地理分册）》 CAS 2017年第4期366-369,共4页

目的为了探讨WNT信号通路抑制基因SFRP5mRNA表达水平与胃癌发生及临床病理之间的关系。方法课题组前期收集了35例胃癌及癌旁样本,通过real-time PCR(Taqman探针法)检测该基因mRNA表达水平,利用2^(-ΔCt)及2^(-ΔΔCt)公式对表达数据进... 目的为了探讨WNT信号通路抑制基因SFRP5mRNA表达水平与胃癌发生及临床病理之间的关系。方法课题组前期收集了35例胃癌及癌旁样本,通过real-time PCR(Taqman探针法)检测该基因mRNA表达水平,利用2^(-ΔCt)及2^(-ΔΔCt)公式对表达数据进行处理,然后将表达数据与临床信息进行据统计分析。结果最终研究发现:(1)SFRP5基因在胃癌组织中表达水平较癌旁组织明显降低(P=0.000 2),说明该基因的表达下调,在胃癌发生中起着重要作用;(2)表达数据与临床信息统计后发现该基因的表达水平与患者的淋巴结转移密切相关。结论 SFRP5基因的异常表达在胃癌进展中可能也起着重要作用。 展开更多

关键词 胃癌 wnt抑制基因 SFRP5 MRNA表达

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Wnt5a基因与AECOPD患者中医证型相关性研究 被引量：4

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作者 杨思情 周进 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第3期895-900,共6页

目的通过检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期(Acute Exacerbation of Chronicobstr-Uctive Pulmonary Disease,AECOPD)患者血液中的Wnt5a基因表达量,比较AECOPD患者不同中医证型血液中Wnt5a基因表达量差异,尝试探讨Wnt5a基因与AECOPD部分... 目的通过检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期(Acute Exacerbation of Chronicobstr-Uctive Pulmonary Disease,AECOPD)患者血液中的Wnt5a基因表达量,比较AECOPD患者不同中医证型血液中Wnt5a基因表达量差异,尝试探讨Wnt5a基因与AECOPD部分中医相关证型的关系,尝试为COPD中医证型诊断提供客观标准。方法收集慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者45例,参考肺胀证型诊断标准,将慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者分为痰浊壅肺证、痰热郁肺证、肺肾气虚证三个组;患者入院时同步进行肺功能检测及抽取静脉血,运用RT-PCR检测AECOPD各中医证型患者血液中Wnt5a的表达量,并选取15例健康人作为对照组进行对比观察。结果痰浊壅肺组、痰热郁肺组、肺肾气虚组AECOPD患者血液中Wnt5a基因表达量分别为1.45±0.54、1.70±0.71、2.11±0.92,均高于正常组(1±0.05),P <0.01,具有显著统计学意义;三组证型间Wnt5a基因表达量:痰浊壅肺<痰热郁肺<肺肾气虚(P <0.01),具有显著统计学意义。Wnt5a基因mRNA相对表达量与COPD中医证型之间存在直线线性相关关系,且呈正性相关(P <0.01)。结论Wnt5a基因mRNA的相对表达量在AECOPD中医证型中存在显著差异,能够给慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的中医证型诊断提供一定的客观标准,并揭示其疾病严重程度。 展开更多

关键词 wnt5a基因 AECOPD 中医证型 相关性研究

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miR-139-5p靶向PAK5基因通过Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞侵袭和迁移的影响 被引量：4

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作者 何璠 郑伟伟 +1 位作者 陈冰冰 曾耀明 《世界华人消化杂志》 CAS 2021年第4期174-181,共8页

背景胃癌(Gastric cancer,GC)是人类消化系统最常见的癌症类型,发生局部或全身转移是导致患者预后差的主要原因.微小RNA(microRNA,miRNA)是胃癌发生发展的重要调控因子.然而,miR-139-5p对胃癌细胞侵袭和转移的影响及机制尚不清楚.目的探... 背景胃癌(Gastric cancer,GC)是人类消化系统最常见的癌症类型,发生局部或全身转移是导致患者预后差的主要原因.微小RNA(microRNA,miRNA)是胃癌发生发展的重要调控因子.然而,miR-139-5p对胃癌细胞侵袭和转移的影响及机制尚不清楚.目的探究miR-139-5p靶向p21活化的激酶5(PAK5)基因调控Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞侵袭和迁移的影响.方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot分别检测永生化胃黏膜细胞GES1和不同胃癌细胞SGC-7901、AGS和BGC-823中miR-139-5p和PAK5的表达情况;在胃癌SGC-7901细胞中转染miR-139-5p mimics,qRT-PCR检测转染效果;Transwell侵袭和划痕实验检测过表达miR-139-5p对SGC-7901细胞侵袭和迁移能力的影响;双荧光素酶报告基因实验和Western blot检测miR-139-5p对PAK5的靶向调控关系;Western blot检测过表达miR-139-5p对Wnt/β-catenin信号通路激活的影响.结果胃癌细胞中miR-139-5p的表达水平明显低于正常胃黏膜细胞(P<0.05),而PAK5 mRNA和蛋白表达水平均明显高于正常胃黏膜细胞(P<0.05);转染miR-139-5p mimics能够上调SGC-7901细胞中miR-139-5p的表达;过表达miR-139-5p可明显抑制SGC-7901细胞侵袭和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验和Western blot检测结果显示,miR-139-5p可靶向负调控PAK5的表达;过表达miR-139-5p后,SGC-7901细胞中Wnt3a、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白表达均明显下调.结论miR-139-5p靶向PAK5并通过阻断Wnt/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞侵袭和迁移能力. 展开更多

关键词 miR-139-5p PAK5基因 wnt/Β-CATENIN信号通路 胃癌细胞 侵袭 迁移

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慢性粒细胞白血病患者Wnt5a基因及NPM1基因的表达及其意义 被引量：1

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作者 王良妥 张湘兰 +1 位作者 司徒健瑜 黄远颖 《海南医学院学报》 CAS 2015年第10期1399-1401,1404,共4页

目的:通过检测慢性粒细胞白血病的骨髓细胞中Wnt5a基因及NPM1基因的表达,探讨其相关性及意义。方法:选择在本院住院的慢性粒细胞白血病患者60例作为实验组,包括急变期、加速期、慢性期各20例,良性血液病患者60例作为对照组,培养骨髓细胞... 目的:通过检测慢性粒细胞白血病的骨髓细胞中Wnt5a基因及NPM1基因的表达,探讨其相关性及意义。方法:选择在本院住院的慢性粒细胞白血病患者60例作为实验组,包括急变期、加速期、慢性期各20例,良性血液病患者60例作为对照组,培养骨髓细胞,通过RT-PCR方法进行检测,分析Wnt5a基因及NPM1基因的表达及其意义。结果:实验组三个亚组与对照组比较,Wnt5amRNA半定量均值、阳性率均较低,NPM1mRNA阳性率、中位表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05);实验组三个亚组中,急变期与加速期、慢性期间比较,Wnt5amRNA半定量均值、阳性率均较低,NPM1mRNA阳性率、中位表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05);Wnt5a、NPM1的表达水平与患者的白细胞计数、骨髓原始细胞数相关,差异有统计学意义(P<0.05);与年龄、血红蛋白含量、血小板计数无关,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Wnt5a基因及NPM1基因与慢性粒细胞白血病的发生、发展有一定的相关性,Wnt5a基因可能抑制其发生,而NPM1基因阳性促进其进展,这可能成为慢性粒细胞白血病诊断、治疗、分析预后的新方式,为临床提供理论依据。 展开更多

关键词 慢性粒细胞白血病 wnt5a基因 NPM1基因

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绵羊WNT5A基因克隆及其组织表达分析

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作者 郝志云 王继卿 +3 位作者 罗玉柱 胡江 刘秀 李少斌 《家畜生态学报》 北大核心 2021年第2期25-31,共7页

WNT5A(Wnt family member 5A)参与了多种细胞的增殖、凋亡和分化等生物学过程,在乳腺形态发生、毛囊发育等方面发挥了重要作用。该试验利用RT-PCR获得绵羊WNT5A基因的CDS区,分析WNT5A蛋白的结构特征并利用RT-qPCR检测WNT5A基因在9个组... WNT5A(Wnt family member 5A)参与了多种细胞的增殖、凋亡和分化等生物学过程,在乳腺形态发生、毛囊发育等方面发挥了重要作用。该试验利用RT-PCR获得绵羊WNT5A基因的CDS区,分析WNT5A蛋白的结构特征并利用RT-qPCR检测WNT5A基因在9个组织中的表达情况。绵羊WNT5A基因的CDS区全长1062 bp,编码353个氨基酸。该蛋白的二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,β转角、延伸链贯穿于整个蛋白质结构中。String分析结果表明,WNT5A与卷曲蛋白受体、低密度脂蛋白相关蛋白和受体酪氨酸激酶有相互作用。RT-qPCR研究结果表明,WNT5A基因表达具有组织特异性及品种特异性。WNT5A基因在绵羊心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、卵巢、背最长肌、乳腺和皮肤9个组织中均广泛表达,其中在皮肤中的表达量高于其他组织(P<0.05),而在脾脏中表达量较低。它在甘肃高山细毛羊皮肤、乳腺、背最长肌、肾脏、肺脏、脾脏和肝脏中的表达量高于小尾寒羊(P<0.05),而在甘肃高山细毛羊卵巢中的表达量低于小尾寒羊(P<0.05),在心脏中该基因的表达量无差异(P>0.05)。该结果为深入研究绵羊WNT5A基因的功能提供了重要依据,同时也丰富了绵羊基因组内容。 展开更多

关键词 wnt5a基因 绵羊 克隆 组织表达

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Wnt5a在肺鳞癌和腺癌中的表达及意义 被引量：3

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作者 黄英 刘国祥 +2 位作者 章波 杨和平 熊玮 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第21期2179-2181,2184,共4页

目的探讨Wnt5a基因及蛋白在肺鳞癌和腺癌中的表达水平及其临床意义。方法用Northern blot及Westernblot分析对43例肺鳞癌和腺癌癌组织及10例非肺癌正常肺组织的Wnt5a基因及蛋白的表达进行检测。结果Wnt5a在肺癌组织中的表达高于正常肺组... 目的探讨Wnt5a基因及蛋白在肺鳞癌和腺癌中的表达水平及其临床意义。方法用Northern blot及Westernblot分析对43例肺鳞癌和腺癌癌组织及10例非肺癌正常肺组织的Wnt5a基因及蛋白的表达进行检测。结果Wnt5a在肺癌组织中的表达高于正常肺组织,有淋巴结转移的肺癌组织Wnt5a表达高于无转移的肺癌组织。结论Wnt5a与肺鳞癌和腺癌的转移与恶化密切相关。 展开更多

关键词 肺癌 wnt5a基因 NORTHERN BLOT WESTERN BLOT

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卵巢上皮性癌组织中SFRP5基因启动子区甲基化与β-catenin蛋白表达检测 被引量：5

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作者 贾冬丽 李红雨 秦巧红 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期355-358,共4页

目的:检测卵巢上皮性癌组织中SFRP5基因启动子区甲基化与β-catenin蛋白的表达。方法:应用甲基化特异性PCR法和免疫组织化学SP法分别检测20例正常卵巢上皮组织、20例卵巢交界性上皮性肿瘤组织以及40例卵巢上皮性癌组织中SFRP5基因启动... 目的:检测卵巢上皮性癌组织中SFRP5基因启动子区甲基化与β-catenin蛋白的表达。方法:应用甲基化特异性PCR法和免疫组织化学SP法分别检测20例正常卵巢上皮组织、20例卵巢交界性上皮性肿瘤组织以及40例卵巢上皮性癌组织中SFRP5基因启动子区甲基化状态以及β-catenin蛋白的表达。结果:在正常卵巢上皮、卵巢交界性上皮性肿瘤以及卵巢上皮性癌组织中,SFRP5基因启动子区甲基化率分别为0.0%、10.0%、67.5%,差异有统计学意义(P<0.001);β-catenin蛋白的异常表达率分别为5.0%、40.0%、72.5%,差异有统计学意义(χ2=24.962,P<0.001)。卵巢上皮性癌组织中β-catenin蛋白的异常表达与SFRP5基因启动子区甲基化有关联(rP=0.468,P<0.001)。结论:SFRP5基因启动子区甲基化可能导致β-catenin蛋白异常表达,并可能通过激活Wnt/β-catenin信号传导通路促进卵巢上皮性癌的发生发展。 展开更多

关键词 卵巢上皮性癌 SFRP5基因 甲基化 wnt β-catenin信号传导通路

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Lgr5-Wnt/β-catenin信号通路与胃癌干细胞的研究进展 被引量：9

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作者 牛磊 郗洪庆 陈凛 《解放军医学院学报》 CAS 2014年第12期1268-1272,共5页

随着基础研究领域的不断拓展和深入,胃癌的难治性逐渐被归因于胃癌干细胞的存在和信号通路的异常表达,其中最具代表性的当属Wnt/β-catenin信号通路。Lgr5作为Wnt/β-catenin通路的受体蛋白亦被认为是众多恶性肿瘤干细胞潜在的分子标记... 随着基础研究领域的不断拓展和深入,胃癌的难治性逐渐被归因于胃癌干细胞的存在和信号通路的异常表达,其中最具代表性的当属Wnt/β-catenin信号通路。Lgr5作为Wnt/β-catenin通路的受体蛋白亦被认为是众多恶性肿瘤干细胞潜在的分子标记物。我们将就Lgr5-Wnt/β-catenin信号通路与胃癌干细胞之间的相互关系,结合目前研究进展进行综述。 展开更多

关键词 胃癌干细胞 wnt基因 B-连环蛋白 富含亮氨酸G蛋白偶联受体5

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慢病毒介导HMGN5基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制研究 被引量：15

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作者 孙娟 信艳萍 +2 位作者 张国梅 田晓娜 刘会敏 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第6期485-490,共6页

目的观察慢病毒介导的高迁移率族核小体结合域5(HMGN5)基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并对其机制进行初步探讨。方法RT qPCR法检测人卵巢上皮细胞株IOSE及4株不同卵巢癌细胞中HMGN5的表达情况,将HMGN5 shRNA慢病毒载体转... 目的观察慢病毒介导的高迁移率族核小体结合域5(HMGN5)基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并对其机制进行初步探讨。方法RT qPCR法检测人卵巢上皮细胞株IOSE及4株不同卵巢癌细胞中HMGN5的表达情况,将HMGN5 shRNA慢病毒载体转染至人卵巢癌细胞SKOV3中,RT qPCR和Western blot检测SKOV3细胞中HMGN5 mRNA和蛋白表达情况,MTT法检测沉默HMGN5基因对细胞增殖能力的影响,划痕实验检测沉默HMGN5基因对细胞迁移能力的影响,Tran swell实验检测沉默HMGN5基因对细胞侵袭能力;Western blot检测SKOV3细胞中PCNA、MMP 9、Wnt1和β 连环蛋白(β catenin)蛋白表达水平。结果与卵巢上皮细胞株IOSE相比,HMGN5在卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、HO 8910、Caov3中的表达明显升高(P<0.05)。与Blank组和NC组相比,sh HMGN5组SKOV3细胞中HMGN5 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显下降(P<0.05),细胞中PCNA、MMP 9、Wnt1和β catenin蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论沉默HMGN5可能通过阻碍Wnt/β catenin信号通路的激活抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 HMGN5基因 卵巢癌细胞 增殖 迁移 侵袭 wnt/β catenin信号通路

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Wnt5a 修饰的bMSCs 对白血病小鼠造血及白血病细胞生长的影响 被引量：1

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作者 沈亚莉 徐酉华 顾晓艳 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期811-816,共6页

目的: 探讨Wnt5a基因修饰的骨髓间充质干细胞(bMSCs)对急性髓系白血病小鼠体内造血和白血病细胞生长的影响。方法:外周血瑞氏染色、骨髓流式细胞仪鉴定移植性HL60人白血病重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠模型。造模成功的SCID小鼠,随机分为... 目的: 探讨Wnt5a基因修饰的骨髓间充质干细胞(bMSCs)对急性髓系白血病小鼠体内造血和白血病细胞生长的影响。方法:外周血瑞氏染色、骨髓流式细胞仪鉴定移植性HL60人白血病重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠模型。造模成功的SCID小鼠,随机分为实验组(A组:Ad5-Wnt5a-bMSCs+模型小鼠);对照组(B组:Ad5-GFP-bMSC+模型小鼠;C组:bMSC+模型小鼠;D组:模型小鼠)。RT-PCR检测外源性Wnt5a基因经骨髓腔移植入白血病小鼠模型后的定植情况。骨髓MSC及CFU-Mix培养、流式细胞仪、组织细胞化学及组织病理检测白血病小鼠移植前后各组外周血、骨髓、肝、脾、肾中的白血病细胞以及骨髓造血的变化。结果:成功建立急性髓性白血病模型;外源性Wnt5a基因转染人bMSCs,转染率达37.38%。外源性Wnt5a基因成功定植于受体骨髓中。Wnt5a基因修饰bMSCs移植后,与对照组比较,实验组SCID小鼠生存率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);外周血有核细胞及瘤细胞计数明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);CFU-Mix和MSC集落生长恢复较快,集落数明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);小鼠骨髓、肺、肝、脾、肾CD33阳性率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Wnt5a基因修饰的bMSCs在体内能有效地抑制白血病细胞生长,支持骨髓造血。 展开更多

关键词 wnt5a基因修饰的bMSCs 骨髓移植 白血病动物模型 HL60

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