背景:目前临床上尚未发现完全治愈脊髓损伤,使其达到结构及功能恢复的治疗方法。已有的神经营养因子治疗方法促进神经细胞再生的效果有限,而干细胞移植治疗可能是现阶段修复脊髓损伤的有效方法之一。目的:无血清悬浮分离培养法培养胎鼠...背景:目前临床上尚未发现完全治愈脊髓损伤,使其达到结构及功能恢复的治疗方法。已有的神经营养因子治疗方法促进神经细胞再生的效果有限,而干细胞移植治疗可能是现阶段修复脊髓损伤的有效方法之一。目的:无血清悬浮分离培养法培养胎鼠脊髓源性神经干细胞,采用形态学、免疫荧光技术和多向分化能力进行神经干细胞鉴定。方法:应用悬浮分离培养法,培养纯化孕13.5 d C57BL/6胎鼠的脊髓源性神经干细胞。倒置显微镜观察细胞形态学变化;CCK-8法检测细胞的增殖能力。免疫荧光技术检测Nestin和Sox2表达;使用自然分化法验证第4代脊髓源性神经干细胞多向分化特性,明确其分化能力。结果与结论:采用无血清悬浮分离培养法可以顺利获取脊髓源性神经干细胞。培养的脊髓源性神经干细胞增殖活性良好,高表达Nestin和Sox2,且两种标记物与DAPI核染高度均匀吻合,说明细胞纯度高。进一步诱导分化显示,细胞可以向GFAP和Tuj1阳性细胞分化,证明脊髓源性神经干细胞分化潜能较好。该实验可建立一套体外培养脊髓源性神经干细胞分离、培养、纯化及鉴定体系,为后续神经干细胞的应用研究奠定基础。展开更多
背景:间充质干细胞是多能成体干细胞,对间充质干细胞来源、分离、培养的研究无论从观念上、研究方法上还是研究结果均不尽相同。目的:综述间充质干细胞分离、培养研究的新进展。方法:由作者应用计算机检索2007至2011年PubMed数据库,在...背景:间充质干细胞是多能成体干细胞,对间充质干细胞来源、分离、培养的研究无论从观念上、研究方法上还是研究结果均不尽相同。目的:综述间充质干细胞分离、培养研究的新进展。方法:由作者应用计算机检索2007至2011年PubMed数据库,在英文标题和摘要中以"mesenchymal stem cells"和"source,isolation or culture"检索,选择内容与间充质干细胞应用相关的文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章,共纳入43篇文献。结果与结论:间充质干细胞的规范化培养需要建立一套标准化的培养体系来实现间充质干细胞的分离、大量增殖。因此,需要进一步深入开展间充质干细胞的基础研究,建立体外扩增和向不同细胞定向诱导分化体系,开展间充质干细胞及转基因后移植的体内效应研究等均具有重要的意义。展开更多
文摘背景:目前临床上尚未发现完全治愈脊髓损伤,使其达到结构及功能恢复的治疗方法。已有的神经营养因子治疗方法促进神经细胞再生的效果有限,而干细胞移植治疗可能是现阶段修复脊髓损伤的有效方法之一。目的:无血清悬浮分离培养法培养胎鼠脊髓源性神经干细胞,采用形态学、免疫荧光技术和多向分化能力进行神经干细胞鉴定。方法:应用悬浮分离培养法,培养纯化孕13.5 d C57BL/6胎鼠的脊髓源性神经干细胞。倒置显微镜观察细胞形态学变化;CCK-8法检测细胞的增殖能力。免疫荧光技术检测Nestin和Sox2表达;使用自然分化法验证第4代脊髓源性神经干细胞多向分化特性,明确其分化能力。结果与结论:采用无血清悬浮分离培养法可以顺利获取脊髓源性神经干细胞。培养的脊髓源性神经干细胞增殖活性良好,高表达Nestin和Sox2,且两种标记物与DAPI核染高度均匀吻合,说明细胞纯度高。进一步诱导分化显示,细胞可以向GFAP和Tuj1阳性细胞分化,证明脊髓源性神经干细胞分化潜能较好。该实验可建立一套体外培养脊髓源性神经干细胞分离、培养、纯化及鉴定体系,为后续神经干细胞的应用研究奠定基础。
文摘背景:间充质干细胞是多能成体干细胞,对间充质干细胞来源、分离、培养的研究无论从观念上、研究方法上还是研究结果均不尽相同。目的:综述间充质干细胞分离、培养研究的新进展。方法:由作者应用计算机检索2007至2011年PubMed数据库,在英文标题和摘要中以"mesenchymal stem cells"和"source,isolation or culture"检索,选择内容与间充质干细胞应用相关的文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章,共纳入43篇文献。结果与结论:间充质干细胞的规范化培养需要建立一套标准化的培养体系来实现间充质干细胞的分离、大量增殖。因此,需要进一步深入开展间充质干细胞的基础研究,建立体外扩增和向不同细胞定向诱导分化体系,开展间充质干细胞及转基因后移植的体内效应研究等均具有重要的意义。
