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日本沼虾表皮Serpin基因克隆及免疫功能的初步研究
1
作者 宁黔冀 彭彦新 +1 位作者 岳凯迪 李亦君 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第2期123-129,I0006,I0007,共9页
丝氨酸蛋白酶级联反应介导的黑化是甲壳动物重要的免疫反应,丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine proteinase inhibitor,Serpin)是黑化反应的重要调节因子,而甲壳动物表皮Serpin的有关研究较少.为了探索表皮Serpin在日本沼虾(Macrobrachium nippo... 丝氨酸蛋白酶级联反应介导的黑化是甲壳动物重要的免疫反应,丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine proteinase inhibitor,Serpin)是黑化反应的重要调节因子,而甲壳动物表皮Serpin的有关研究较少.为了探索表皮Serpin在日本沼虾(Macrobrachium nipponense)免疫反应中的功能,基于前期转录组数据,利用PCR、RACE和生物信息学从日本沼虾表皮克隆并鉴定了1个新的Serpin基因,命名为MnSerpin,利用RT-qPCR和RNAi等方法,研究了该基因时空表达模式、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒后表皮MnSerpin的转录水平以及日本沼虾死亡率的变化.结果显示,MnSerpin cDNA全长2181 bp,编码419个氨基酸,具有Serpin结构域.MnSerpin在腹背部表皮、鳃、血细胞、胃、心、肝胰腺等多种组织均有表达;表皮MnSerpin的表达与蜕皮周期有关,与蜕皮间期(C期)相比,在蜕皮后早期(A期)最高,增加6.06倍(P<0.01).嗜水气单胞菌攻毒后,表皮MnSerpin的相对表达量在6 h达到了峰值,比对照组增加3.77倍(P<0.01).在腹背部第二节的关节膜内注射3μg dsRNA溶液,每12 h注射1次,共注射3次,最后一次注射后12 h,干扰效率最高,表皮MnSerpin的相对表达量同比下降58%(P<0.01).在干扰效率最高的时间点攻毒,120 h内,干扰组虾的累计死亡率比未干扰组增加16%(P<0.01).结果表明,日本沼虾表皮MnSerpin是重要的免疫因子,MnSerpin的表达存在组织以及蜕皮周期不同阶段的差异,该基因表达下调能显著增加嗜水气单胞菌感染虾的死亡率. 展开更多
关键词 日本沼虾(macrobrachium nipponense) 表皮 MnSerpin RNAI
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日本沼虾高效生态养殖技术浅析
2
作者 石丰运 李华坤 张海涛 《山东畜牧兽医》 2024年第7期45-48,共4页
市场上日本沼虾的需求量不断增加,但目前日本沼虾亩产量已处于瓶颈阶段。面对不断增长的市场需求量,如何提高日本沼虾亩产量成了日本沼虾养殖的首要问题。本文通过对日本沼虾养殖的初步研究和对养殖户的随机调研等方法,研究当地的养殖... 市场上日本沼虾的需求量不断增加,但目前日本沼虾亩产量已处于瓶颈阶段。面对不断增长的市场需求量,如何提高日本沼虾亩产量成了日本沼虾养殖的首要问题。本文通过对日本沼虾养殖的初步研究和对养殖户的随机调研等方法,研究当地的养殖流程及病害防治手段。结果发现,当地日本沼虾池塘养殖中存在近亲育苗从而导致种质退化严重、日常饲养管理过程中缺少预防意识而盲目用药、捕捞时使用溴氰菊酯赶捕等问题。针对以上问题,本研究针对性地提出了引进优质苗种、采取套养模式、树立以防为主的意识合理用药、采用轮捕与集中捕捞相结合替代赶捕等解决对策。 展开更多
关键词 日本沼虾 苗种 池塘管理 病害防治
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饲料中添加白术提取物对日本沼虾生长、健康和抗病力的影响 被引量：1
3
作者 白茹雪 花罗海 +8 位作者 刘昊昆 张月星 朱晓鸣 杨云霞 韩冬 金俊琰 张志敏 田继业 解绶启 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期86-98,共13页
文章研究了饲料中添加不同水平的白术提取物(Extraction of Atractylodes macrocephala Koidz,EAMK)对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)生产性能、器官指数、血液生化指标、抗氧化能力、消化系统健康和抗病力的影响。实验以初始体重... 文章研究了饲料中添加不同水平的白术提取物(Extraction of Atractylodes macrocephala Koidz,EAMK)对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)生产性能、器官指数、血液生化指标、抗氧化能力、消化系统健康和抗病力的影响。实验以初始体重为(0.21±0.05)g的日本沼虾为研究对象,设置6个饲料处理,白术提取物添加量为0、100、200、400、600和1200 mg/kg(Control、A100、A200、A400、A600和A1200)。每个饲料处理设6个重复,每个养殖缸放入60尾虾,实验周期为75d,每天记录采食量。养殖实验期间监测水体温度为(20±3)℃,pH为7.8—8.2,亚硝酸盐为0.16—0.2 mg/L,氨氮为0.02—0.1 mg/L,溶氧>6.0 mg/L。在实验结束后,分析日本沼虾生长性能、血清生化指标、肠道消化酶和免疫指标及肝胰腺抗氧化能力,观察日本沼虾的组织结构,用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行攻毒并记录存活率。结果表明:饲料中添加200 mg/kg的白术提取物可以显著提高日本沼虾的增重率(WGR)和特定生长率(SGR),并显著降低饲料系数(FC;P<0.05)。各处理组间的肝体比、出肉率和体成分均无显著性差异(P>0.05);A100组的血清葡萄糖(Glu)含量显著高于对照组(P<0.05),并能显著降低谷丙转氨酶(ALT)活性(P<0.05);各白术提取物处理组的血清甘油三酯(TG)和总胆固醇含量(TC)均显著低于对照组(P<0.05);A400组的肝胰腺GSH-Px活性显著高于A100组和对照组(P<0.05),A600组的肝胰腺CAT活性显著高于其他各组(P<0.05),A200和400组的肠道iNOS的活性显著高于对照组(P<0.05);A400组的日本沼虾肠绒毛显著高于对照组(P<0.05),并且减轻了肝细胞的空泡化,促进了鳃的完整性;A100处理组的嗜水气单胞菌攻毒后存活率显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,白术提取物可以提高日本沼虾的生长性能和抗氧化能力,提高抗病力,在日本沼虾饲料中适宜添加量为100—400 mg/kg。 展开更多
关键词 白术提取物 生长性能 免疫 肠道健康 日本沼虾
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日本沼虾StAR基因克隆及其低氧胁迫下表达分析 被引量：1
4
作者 郑诚 薛程 +1 位作者 赵倩倩 孙盛明 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期64-75,共12页
为了研究类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein, StAR)在日本沼虾应答低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验应用c DNA末端快速扩增(RACE)PCR技术克隆了日本沼虾StAR全长cDNA序列,并利用在线软件对其序列特征... 为了研究类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein, StAR)在日本沼虾应答低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验应用c DNA末端快速扩增(RACE)PCR技术克隆了日本沼虾StAR全长cDNA序列,并利用在线软件对其序列特征进行生物信息学分析,采用半定量RT-PCR方法分析StAR在日本沼虾不同组织的分布情况,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与免疫印迹(Western blot)技术对其在不同低氧胁迫阶段中的表达规律进行检测,观察低氧胁迫下精巢组织中StAR蛋白免疫组化定位。结果显示,日本沼虾StAR其cDNA全长3 361 bp (NCBI登录号:MW263908),包括5′-UTR 323 bp,3′-UTR 2 129 bp,开放阅读框909 bp,编码302个氨基酸。氨基酸序列比对及系统进化分析结果显示,日本沼虾StAR基因与三疣梭子蟹等甲壳动物StAR聚类一支,具有最近的亲缘关系。半定量RT-PCR检测结果显示,StAR在日本沼虾不同组织中均有表达,其表达量在肝胰腺和心脏组织中最低,在精巢组织中表达处于较高水平。使用qRT-PCR技术检测日本沼虾精巢中StAR在低氧胁迫下时空表达情况,结果表明,与对照组相比,低氧处理组精巢中StAR基因表达量在1~48 h均显著上调,而在低氧处理组96 h显著降低。此外,本实验对StAR进行了原核表达及抗血清制备,采用Western blot检测StAR蛋白表达丰度基本与基因表达模式相似,免疫组化结果显示,StAR蛋白在精细胞与间质细胞中均有表达。综上所述,长期低氧胁迫显著降低了StAR基因的转录表达水平,并且该基因可能在类固醇合成路径及精子发生过程中均发挥重要作用。本研究结果为进一步解析日本沼虾类固醇激素合成分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 日本沼虾 STAR 克隆 低氧 表达分析
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日本沼虾Bax基因克隆及其在低氧胁迫过程中的作用 被引量：1
5
作者 赵倩倩 孙西超 +2 位作者 郑诚 薛程 孙盛明 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期65-78,共14页
为探究细胞凋亡相关基因Bax(B-cell lymphoma-2 associated X protein)在日本沼虾低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验采用cDNA末端快速扩增(RACE)PCR技术获得日本沼虾细胞凋亡相关基因Bax的cDNA全长序列,采用半定量RT-PCR与实时荧光定量PC... 为探究细胞凋亡相关基因Bax(B-cell lymphoma-2 associated X protein)在日本沼虾低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验采用cDNA末端快速扩增(RACE)PCR技术获得日本沼虾细胞凋亡相关基因Bax的cDNA全长序列,采用半定量RT-PCR与实时荧光定量PCR(qPCR)分析其在日本沼虾不同组织、不同低氧阶段的表达情况,同时采用Western blot与免疫组化分析了低氧下日本沼虾Bax蛋白的表达与定位。日本沼虾Bax基因cDNA全长2287 bp(NCBI登录号:MZ823353),包括5'非编码区(UTR)为42 bp,3'UTR为814 bp,开放阅读框(ORF)1431 bp,编码476个氨基酸。通过软件和生物信息网站对其序列进行分析,氨基酸相似度比对显示,日本沼虾细胞凋亡基因Bax富含高度保守的BH1、BH2及BH3结构域。系统进化树分析显示,日本沼虾Bax基因与斑节对虾等甲壳动物Bax聚为一支,具有最近的亲缘关系。RT-PCR结果表明,日本沼虾Bax基因在肝胰腺中表达量最高,在脑中表达量最低。在低氧胁迫1~96 h时,日本沼虾鳃和肝胰腺组织Bax基因表达量均显著高于对照组,这与日本沼虾Bax蛋白表达丰度基本相似。通过构建原核表达载体获得体外重组蛋白Bax,并将纯化重组蛋白免疫兔子获得抗血清。免疫组化结果显示,鳃和肝胰腺Bax蛋白阳性信号主要定位在鳃上皮细胞和肝细胞中。最后,采用流式细胞仪分析表明,日本沼虾血细胞凋亡率在低氧胁迫96 h时显著高于对照组,这与日本沼虾Bax基因转录水平和蛋白表达丰度相吻合。研究表明,日本沼虾Bax基因在日本沼虾不同组织应答低氧胁迫分子过程中均具有促凋亡作用。本研究可为探明日本沼虾不耐低氧的分子机制提供理论参考。 展开更多
关键词 日本沼虾 BAX 细胞凋亡 低氧 原核表达
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日本沼虾表皮酚氧化酶原激活因子基因的克隆及功能
6
作者 彭彦新 岳凯迪 +1 位作者 杜娟 宁黔冀 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期57-65,共9页
为了探索表皮酚氧化酶原激活因子(prophenoloxiase activating factors,PPAFs)在甲壳动物免疫反应中的功能,基于前期转录组数据,本实验利用PCR和RACE技术从日本沼虾表皮克隆并鉴定了一个新的PPAF基因,命名为MnPPAF1 (GenBank登录号为OP7... 为了探索表皮酚氧化酶原激活因子(prophenoloxiase activating factors,PPAFs)在甲壳动物免疫反应中的功能,基于前期转录组数据,本实验利用PCR和RACE技术从日本沼虾表皮克隆并鉴定了一个新的PPAF基因,命名为MnPPAF1 (GenBank登录号为OP784577),利用生物信息学、实时荧光定量PCR (qPCR)和RNA干扰(RNAi)等方法,研究了该基因序列特征、时空表达模式、嗜水气单胞菌攻毒后表皮MnPPAF1的转录水平、酚氧化酶(phenoloxidase,PO)活性以及日本沼虾死亡率的变化。结果显示,MnPPAF1 cDNA全长1 718 bp,编码460个氨基酸,具有夹子结构域丝氨酸蛋白酶(clip-domain serine proteinases,Clip-SPs)和胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶(trypsin-like serine proteases,Tryp-SPs)结构域。MnPPAF1在腹背部的表皮、血细胞、鳃、胃、心脏、肝胰腺等多种组织均有表达;表皮MnPPAF1的表达与蜕皮周期有关,与蜕皮间期(C期)相比,蜕皮前晚期(D4期) MnPPAF1表达量增加857%。嗜水气单胞菌攻毒后,表皮MnPPAF1表达水平在6 h达到了峰值,较对照组增加227%,而表皮PO活性在12 h达到峰值,同比增加24%。在腹背部第2节注射3μg dsRNA溶液,每12小时注射1次,共注射3次,最后1次注射后12 h,干扰效率最高,表皮MnPPAF1表达同比下降71.79%,至24 h,表皮PO活性降低72.31%。在干扰效率最高的时间点攻毒,在120 h,攻毒+干扰组虾的累计死亡率比攻毒+未干扰组增加26%。结果表明,MnPPAF1是表皮重要的免疫因子,参与调节酚氧化酶原系统的激活,该基因表达下调能显著增加嗜水气单胞菌感染虾的死亡率。本研究为阐明表皮在甲壳动物免疫系统中的作用积累了资料。 展开更多
关键词 日本沼虾 表皮 MnPPAF1 RNAI 嗜水气单胞菌
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超高效液相色谱-串联质谱法定量检测日本沼虾不同组织中氨基脲含量
7
作者 徐磊 孙博怿 +3 位作者 王俊 吴琦芳 高晟 周冬仁 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第2期83-92,共10页
目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定日本沼虾(Macrobrachium nipponense)不同组织部位中不同形态氨基脲(semicarbazide,SEM)的检测方法。方法样品用... 目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定日本沼虾(Macrobrachium nipponense)不同组织部位中不同形态氨基脲(semicarbazide,SEM)的检测方法。方法样品用66.7%甲醇溶液洗脱后,经盐酸酸化水解,2-硝基苯甲醛过夜衍生,调pH至7.3~7.4后,用乙酸乙酯提取,分析物采用UPLC-MS/MS定性检测,稳定同位素内标法进行定量测定。结果SEM在0.25~20.00μg/kg范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,肌肉、头壳、背壳、头足胸、眼柄和鳃6个组织的方法检出限为0.25μg/kg(S/N≥3),定量限为0.50μg/kg(S/N≥10),肝胰腺的方法检出限为0.5μg/kg,定量限为1.0μg/kg,相对标准偏差不大于5.20%。虾壳中SEM含量最高,肌肉中含量最低,肌肉中SEM主要以游离态形式存在,虾壳中SEM主要以结合态形式存在。结论本方法灵敏度高、重现性好,可用于日本沼虾不同组织中不同形态SEM的定量测定。日本沼虾不同组织中SEM的存在形态与含量均存在巨大差异。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联质谱法 日本沼虾 氨基脲
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放养模式对日本沼虾生长性状与肌肉营养成分的影响
8
作者 唐金玉 覃宝利 +1 位作者 叶建勇 戴杨鑫 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期254-263,共10页
对3种放养处理[T1,与中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)和少量鱼类共养;T2,与沙塘鳢(Odontobutis obscura)共养;T3,与鳙(Aristichthys nobilis)共养]条件下日本沼虾(Macrobrachium nipponense)虾体的生长性状和肌肉营养成分进行分析与比较... 对3种放养处理[T1,与中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)和少量鱼类共养;T2,与沙塘鳢(Odontobutis obscura)共养;T3,与鳙(Aristichthys nobilis)共养]条件下日本沼虾(Macrobrachium nipponense)虾体的生长性状和肌肉营养成分进行分析与比较,以期为淡水经济虾类养殖模式的优化提供参考。结果发现:日本沼虾的全长、头胸甲长、体长和体重在不同放养模式下差异显著(P<0.05),肌肉中的粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和水分含量分别为16.54%~17.97%、1.86%~2.25%、0.95%~1.12%和78.69%~80.56%,粗灰分含量在各处理间差异显著。共检出氨基酸17种,其中,必需氨基酸7种,必需氨基酸指数为70.88~73.13,不同处理间丙氨酸含量差异显著;共检出脂肪酸16种,不同处理间脂肪酸种类组成和C18:2 n-6、多不饱和脂肪酸的含量差异显著;检测的9种矿物质元素(Na、K、Ca、Mg、Fe、Cu、Zn、Mn、Cr)中,Na、Mn、Fe、Zn含量在不同处理间差异显著。研究表明,放养模式对日本沼虾的生长性状和肌肉营养具有显著影响,可能与不同放养结构和管理措施造成的养殖环境和食物资源差异有关,生产中需根据放养模式调节营养成分的添加。相较之下,日本沼虾与中华绒螯蟹和少量鱼类共养时,虾肉的鲜美程度、营养价值和保健价值相对更高,可选择该模式来改善养殖虾的营养品质。 展开更多
关键词 日本沼虾 放养模式 生长性状 肌肉营养组成 营养价值
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饲料中添加过氧化氢酶对日本沼虾生长性能、抗氧化能力、免疫性能和肠道菌群结构的影响
9
作者 李姗姗 王俊保 +5 位作者 简永慧 宋嘉欣 周东生 郑金仙 孔有琴 丁志丽 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期464-477,共14页
本试验旨在研究饲料中添加不同水平过氧化氢酶(CAT)对日本沼虾生长性能、抗氧能力、免疫性能和肠道菌群结构的影响。试验共配制6种饲料,分别在基础饲料中添加0(CAT1,对照组)、75(CAT2组)、150(CAT3组)、300(CAT4组)、600(CAT5组)和1200 ... 本试验旨在研究饲料中添加不同水平过氧化氢酶(CAT)对日本沼虾生长性能、抗氧能力、免疫性能和肠道菌群结构的影响。试验共配制6种饲料,分别在基础饲料中添加0(CAT1,对照组)、75(CAT2组)、150(CAT3组)、300(CAT4组)、600(CAT5组)和1200 U/kg(CAT6组)的CAT,饲喂1080只初始体重为(0.10±0.03)g的日本沼虾,每组3个重复,每个重复60只虾。试验期为8周。结果显示:1)各试验组日本沼虾的存活率未受到饲料CAT添加水平的显著影响(P>0.05),但当饲料添加150 U/kg CAT时,日本沼虾的增重率显著高于对照组(P<0.05)。2)各试验组日本沼虾肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)活性均无显著差异(P>0.05);CAT2、CAT3和CAT4组肝胰腺丙二醛(MDA)含量显著低于其余各组(P<0.05);随着饲料中CAT添加水平的增加,肝胰腺CAT活性呈现出先上升后下降的趋势,并在CAT2组其活性达到最高。同时,日本沼虾肝胰腺中多酚氧化酶(PPO)活性随着饲料中CAT添加水平呈先增加后降低趋势,CAT3和CAT4组肝胰腺PPO活性显著高于CAT5组(P<0.05);肝胰腺碱性磷酸酶(AKP)活性具有一定的波动,CAT3组肝胰腺AKP活性显著高于CAT1、CAT2和CAT4组(P<0.05)。3)日本沼虾各组之间肠道菌群的α多样性均无显著差异(P>0.05)。对日本沼虾肠道菌群进行β多样性分析发现,在门水平上,日本沼虾肠道菌群优势菌门为变形菌门、厚壁菌门和蓝藻菌门,CAT3和CAT4组中变形菌门的相对丰度显著低于对照组(P<0.05),而厚壁菌门相对丰度显著高于对照组(P<0.05);在属水平上,日本沼虾肠道菌群优势菌属为Tyzzerella、气单胞菌属和不动杆菌属,CAT4组中Tyzzerella相对丰度显著高于对照组(P<0.05),而CAT3、CAT4和CAT5组中气单胞菌属相对丰度显著低于对照组(P<0.05)。综上所述,饲料中添加150~300 U/kg的CAT可提高日本沼虾生长性能、抗氧化能力和免疫性能,增加肠道有益菌群的丰度,促进日本沼虾的健康养殖。 展开更多
关键词 过氧化氢酶 日本沼虾 肠道菌群 抗氧化
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四川省不同流域日本沼虾群体遗传多样性分析
10
作者 张露 周剑 +7 位作者 柯红雨 黄志鹏 赵仲孟 赵瀚 段元亮 牟成艳 李华东 李强 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期1124-1130,共7页
【目的】四川省河流众多,野生日本沼虾资源丰富,深入了解四川省日本沼虾种质资源现状,开展不同流域日本沼虾遗传多样性评估具有重要意义。【方法】基于线粒体Cytb序列,对四川省巴河(BH)、涪江(FJ)、嘉陵江(JLJ)、岷江(MJ)和思蒙河(SMH)... 【目的】四川省河流众多,野生日本沼虾资源丰富,深入了解四川省日本沼虾种质资源现状,开展不同流域日本沼虾遗传多样性评估具有重要意义。【方法】基于线粒体Cytb序列,对四川省巴河(BH)、涪江(FJ)、嘉陵江(JLJ)、岷江(MJ)和思蒙河(SMH)5个日本沼虾野生群体的遗传多样性进行分析。【结果】所有群体的201尾日本沼虾中共检测出36种单倍型,单倍型多样性(H_(d))值为0.345~0.959,Hd均值为0.802,其中JLJ群体的Hd值最高(0.959),而MJ、SMH和BH群体的Hd值相对较低,H_(d)值均小于0.5。所有群体的核苷酸多样性(P_(i))值为0.00225~0.01547,P_(i)均值为0.01583,其中JLJ群体的P_(i)值最高(0.01547),BH群体的P_(i)值最低(0.00225)。日本沼虾的遗传变异主要来自群体间(68.20%),群体间存在显著的遗传分化,系统发育树分析显示所有群体呈现3个较明显分支。单倍型MJ网络图显示所有单倍型也呈现3个明显谱系,其中谱系A包含优势单倍型Hap 14,谱系B包含优势单倍型Hap 16,谱系C包含优势单倍型Hap 1。【结论】日本沼虾群体遗传多样性总体上处于较高水平,但不同流域的群体间遗传多样性水平差异较大,其中MJ、BH和SMH群体的遗传多样性相对较低,对这些流域内日本沼虾种质资源的保护有待进一步加强。本研究为四川省日本沼虾种质资源的保护与合理开发利用提供了参考依据,有利于促进四川省日本沼虾产业的可持续发展。 展开更多
关键词 日本沼虾 细胞色素B基因 遗传多样性
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日本沼虾桩蛋白基因的克隆与镉胁迫对其表达的影响
11
作者 彭佳诚 吴越 +3 位作者 徐洁皓 夏美文 齐天鹏 徐海圣 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期247-253,共7页
镉(Cd)是蓄积性和毒性较强的生物非必需重金属元素之一,会对水生生物造成较大的危害。为更好地了解镉对日本沼虾的分子毒性作用,为水环境镉污染的生态风险预警和评估提供生物标志物,克隆了日本沼虾(Macrobrachium nipponenes)桩蛋白(pax... 镉(Cd)是蓄积性和毒性较强的生物非必需重金属元素之一,会对水生生物造成较大的危害。为更好地了解镉对日本沼虾的分子毒性作用,为水环境镉污染的生态风险预警和评估提供生物标志物,克隆了日本沼虾(Macrobrachium nipponenes)桩蛋白(paxillin)基因MnPXN,并检测了镉胁迫对其表达的影响。MnPXN基因全长为3655 bp,包含1491 bp的编码区,编码496个氨基酸;MnPXN蛋白具有6个低复杂区域和3个保守的LIM结构域,与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)聚成一支,与家蚕(Bombyx mori)、赤拟谷盗(Tribolium castaneum)等昆虫的亲缘关系较近,与线虫(Nematoda)亲缘关系最远。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,MnPXN在日本沼虾的肝胰腺、胃、鳃中表达水平较高,在心脏和肌肉中表达水平较低。在0.2427 mg·L^(-1)CdCl_(2)中暴露24 h,肝胰腺中MnPXN基因表达水平较对照组均显著升高,0.0200 mg·L^(-1)CdCl_(2)胁迫6 h后MnPXN基因表达水平显著升高,24 h表达量达到最大值,96 h恢复至起始水平。RNA干扰能显著(P<0.05)降低MnPXN在肝胰腺中的表达水平,显著(P<0.001)增加日本沼虾的死亡率,表明MnPXN基因能够降低镉胁迫对日本沼虾的毒性作用,其作用机理尚需进一步研究。 展开更多
关键词 镉胁迫 日本沼虾 桩蛋白 基因表达 RNA干扰
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四川省日本沼虾养殖现状综述
12
作者 肖杨 《四川农业科技》 2024年第4期86-88,共3页
日本沼虾味道鲜美,营养丰富,深受广大消费者喜爱,是我国重要的淡水名优品种。据《2021年中国渔业统计年鉴》统计,2020年全国有24个省(自治区、直辖市)进行日本沼虾养殖,全国养殖年总产量22.88万t,已成为我国淡水养殖的主要品种之一,在... 日本沼虾味道鲜美,营养丰富,深受广大消费者喜爱,是我国重要的淡水名优品种。据《2021年中国渔业统计年鉴》统计,2020年全国有24个省(自治区、直辖市)进行日本沼虾养殖,全国养殖年总产量22.88万t,已成为我国淡水养殖的主要品种之一,在促进农业增效、农民增收方面发挥着重要作用。近十年来,尤其是2020年自然流域十年禁捕政策的正式实施,显著带动了日本沼虾的消费量,消费者数量和人均消费量持续增长。在养殖产量逐年增加的情况下,日本沼虾市场价格仍长期坚挺并呈现上升之势。本文就四川省日本沼虾产业发展状况、存在问题及其对策建议作一概述。 展开更多
关键词 日本沼虾 四川省 养殖现状
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不同群体日本沼虾的线粒体COI基因序列分析 被引量：3
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作者 黄辉 刘凯 +3 位作者 王宇希 郭炜 马恒甲 谢楠 《湖北农业科学》 2023年第5期179-182,189,共5页
采集钱塘江(QT)、武义(WY)、高塘湖(GT)、肇庆(ZQ)和南宁(NN)5个不同群体的日本沼虾(Macrobrachium nipponense)样本,并对每个群体的线粒体COI基因进行测序和分析,以此了解各群体间的遗传差异。结果表明,日本沼虾COI基因序列中,保守位点... 采集钱塘江(QT)、武义(WY)、高塘湖(GT)、肇庆(ZQ)和南宁(NN)5个不同群体的日本沼虾(Macrobrachium nipponense)样本,并对每个群体的线粒体COI基因进行测序和分析,以此了解各群体间的遗传差异。结果表明,日本沼虾COI基因序列中,保守位点420个,变异位点222个,简约信息位点123个,碱基缺失或插入位点27个,平均转换与颠换比值2.78。COI基因序列中(A+T)的含量明显高于(G+C)的含量,碱基组成具有明显的AT偏倚性。在67个个体中定义了65种单倍型,来自NN群体和QT群体的单倍型形成了2个主要分支。基于遗传距离构建的系统发育树和聚类树表明,QT群体和GT群体遗传距离较近,与ZQ群体和NN群体相比遗传距离较远,WY群体与QT、GT群体的遗传距离较小。研究结果可为日本沼虾种质资源的合理开发利用提供分子生物学依据。 展开更多
关键词 日本沼虾(macrobrachium nipponense) 线粒体 遗传差异
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罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)致病性豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)的分离鉴定及其特性分析 被引量：1
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作者 王雨辰 雷宁 +6 位作者 郝贵杰 周冬仁 王锋 黄爱霞 崔雁娜 孙博怿 林锋 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期866-874,共9页
近年来细菌性疾病因病原菌种类繁多、覆盖区域广而影响了其养殖业的健康发展,造成较大的经济损失。从体表具有黑斑、肢体残损症状的罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)肝胰腺组织中分离得到1株病原菌,通过形态学观察、生理生化特性鉴... 近年来细菌性疾病因病原菌种类繁多、覆盖区域广而影响了其养殖业的健康发展,造成较大的经济损失。从体表具有黑斑、肢体残损症状的罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)肝胰腺组织中分离得到1株病原菌,通过形态学观察、生理生化特性鉴定、16S rRNA序列和特定毒力基因检测鉴定,以及人工回归感染试验和药敏试验分析其致病性和耐药性。结果表明,该菌为豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae),含有aer、lip、gcat、ser和OMPA I等毒力基因;药敏试验显示其对头孢曲松、氯霉素等7种抗生素高度敏感,对恩诺沙星、阿米卡星及复方新诺明3种抗生素中度敏感,对四环素、环丙沙星等10种抗生素具有耐药性;人工回归感染实验表明该菌具有较高的致病性,对罗氏沼虾的半致死浓度为6.54×10~5 CFU/mL。豚鼠气单胞菌作为水产养殖中的条件性致病菌,研究结果揭示了该菌株的部分生物学特性,有利于丰富豚鼠气单胞菌属的基础数据,同时也为罗氏沼虾养殖过程中的病害防控提供了一定参考依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾(macrobrachium rosenbergii) 豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae) 药敏试验 毒力基因
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咪唑类物质KK-42对日本沼虾表皮矿化的影响 被引量：1
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作者 杜娟 张俊芳 +3 位作者 岳凯迪 彭彦新 杨洪 宁黔冀 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第1期144-148,共5页
甲壳动物为了生长必须周期性地褪去旧表皮,新表皮的形成及矿化与蜕皮周期密切相关.前期研究发现,KK-42能够缩短日本沼虾蜕皮周期、加速表皮的形成.为了进一步探究KK-42对表皮矿化的影响,以矿化相对稳定的蜕皮间期(C期)头胸甲表皮为参照... 甲壳动物为了生长必须周期性地褪去旧表皮,新表皮的形成及矿化与蜕皮周期密切相关.前期研究发现,KK-42能够缩短日本沼虾蜕皮周期、加速表皮的形成.为了进一步探究KK-42对表皮矿化的影响,以矿化相对稳定的蜕皮间期(C期)头胸甲表皮为参照,选择蜕皮后3,6,12 h的头胸甲,采用扫描电镜/能谱仪法(SEM/EDX),在超微水平初步研究了表皮的矿化进程及KK-42处理对表皮矿化的影响.结果显示,对照组头胸甲表皮中钙、镁、磷信号在蜕皮后3 h开始出现,6 h钙、磷信号在上/外表皮的边缘处密集分布,此后逐渐向表皮内侧延伸.镁信号一直呈弥散状分布.半定量数据分析显示,与蜕皮后3 h相比,6,12 h及C期表皮中,钙原子比例分别提高了67.86%(P<0.01),402.78%(P<0.01),2191.67%(P<0.01);镁原子比例分别提高了95.92%(P<0.05),122.45%(P<0.05),165.31(P<0.05);磷原子比例分别提高了82.46%(P<0.05),205.26%(P<0.01),591.23(P<0.01).在KK-42处理组,蜕皮后3,6,12 h,表皮中的钙、磷信号分布一直呈离散状,钙原子比例分别比对照组降低了16.67%(P>0.05),45.54%(P<0.05),52.5%(P<0.01),磷原子比例分别比对照组降低了15.79%(P>0.05),45.19%(P<0.05),50%(P<0.01);C期表皮中的钙、磷信号出现密集现象,但信号强度比相应对照组分别低31.88%(P<0.01)和5.08%(P>0.05).KK-42处理后镁信号的分布和强度与对照组均无明显差异.结果表明:日本沼虾表皮的矿化始于蜕皮后3 h,KK-42处理能明显抑制日本沼虾头胸甲表皮的矿化,表皮中钙、磷的沉积显著降低. 展开更多
关键词 日本沼虾 表皮 扫描电镜/能谱仪法 矿化 KK-42
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基于测序分型方法开发日本沼虾微卫星分子标记
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作者 刘凯 谢楠 +1 位作者 王宇希 刘新轶 《渔业研究》 2023年第6期537-543,共7页
利用无参考基因组SSR开发方法筛选微卫星序列并结合测序分型方法对分离的微卫星序列进行基因分型。利用两个样本的全基因组测序数据,通过ebwt2InDel软件从这两个样本的测序数据中寻找包含InDel标记的序列。基于包含InDel标记的序列,利用... 利用无参考基因组SSR开发方法筛选微卫星序列并结合测序分型方法对分离的微卫星序列进行基因分型。利用两个样本的全基因组测序数据,通过ebwt2InDel软件从这两个样本的测序数据中寻找包含InDel标记的序列。基于包含InDel标记的序列,利用MISA软件搜索包含SSR的序列并删除非SSR型InDel标记的序列,最终得到包含完美型SSR的序列111条。利用测序分型软件SSRgenotyper对30尾日本沼虾(Macrobrachium nipponense)测序样本进行多态性分析,111条含SSR的序列中,共有19个SSR可以成功分型,分型成功率为17.12%。分型成功的19个SSR位点均为3碱基重复4~6次,其中以ATC/ATG为单位的重复序列占比最多,为6个(31.58%)。19个SSR中,低度信息含量的标记2个,中度信息含量的标记17个。本研究制备的19个微卫星标记可用于评估日本沼虾种群的遗传参数,为日本沼虾种质资源的开发提供有用的遗传标记。 展开更多
关键词 日本沼虾 微卫星 测序分型 多态性
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饲料中铬过量对罗氏沼虾生长、糖代谢、氧化应激及免疫应答的影响
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作者 成钰 于鹏 +6 位作者 张成硕 马晶晶 陈永成 何冲霄 蔡立旺 王凯 李红阳 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2024年第4期66-76,共11页
本实验旨在研究饲料中铬过量对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)生长、糖代谢、氧化应激及免疫应答的影响。以吡啶甲酸铬(Cr-Pic)为铬源,配制铬含量分别为0 mg/kg(Cr0)、20 mg/kg(Cr20)、40 mg/kg(Cr40)和50 mg/kg(Cr50)的4种实验饲... 本实验旨在研究饲料中铬过量对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)生长、糖代谢、氧化应激及免疫应答的影响。以吡啶甲酸铬(Cr-Pic)为铬源,配制铬含量分别为0 mg/kg(Cr0)、20 mg/kg(Cr20)、40 mg/kg(Cr40)和50 mg/kg(Cr50)的4种实验饲料,选取初始体质量为(3.48±0.12)g的罗氏沼虾幼虾,随机分成4组,每组4个重复,每个重复放25尾虾,进行为期28 d的养殖实验。养殖实验结束后,每组取实验虾10尾左右(40 g/L),禁食24 h后开展拥挤胁迫实验。结果表明:(1)与Cr0组相比,铬过量组罗氏沼虾终末体长、终末体质量和成活率(SR)均显著下降,Cr50组特定生长率(SGR)、肥满度(CF)显著降低;拥挤胁迫96 h后,各组累积死亡率随铬含量增加而上升。(2)肝胰腺中糖酵解相关酶活性随铬含量增加呈逐渐下降趋势,14 d时Cr40和Cr50组己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)活性均显著低于Cr0组,28 d时Cr50组磷酸果糖激酶(PFK)活性显著最低;14 d时,铬过量组乳酸脱氢酶(LDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性显著降低;随铬含量增加,磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性逐渐下降,28 d时Cr40和Cr50组显著低于Cr0组;肌肉中糖代谢相关酶活性在14 d时随铬含量增加逐渐升高,但28 d时受到抑制。(3)28 d时,Cr20组过氧化氢酶(CAT)活性显著下降,Cr40组CAT、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性显著下降;Cr50组养殖过程中总超氧化物歧化酶(SOD)、CAT和GSH-PX活性均显著降低;与Cr0组相比,Cr20和Cr40组丙二醛(MDA)含量显著升高;乙酰胆碱酯酶活性(AchE)随铬含量增加逐渐降低,28 d时铬过量组均显著低于Cr0组。(4)Cr50组14 d时酸性磷酸酶(ACP)和28 d时溶菌酶(LZM)及碱性磷酸酶(ACP)活性显著低于Cr0组。综上所述,饲料中铬过量对罗氏沼虾生长、糖代谢、抗氧化能力及免疫功能均有抑制作用。 展开更多
关键词 罗氏沼虾(macrobrachium rosenbergii) 铬 生长 糖代谢 氧化应激 免疫
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日本沼虾(Macrobrachium nipponensis)形态性状对体重的影响效应 被引量：52
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作者 王志铮 吴一挺 +1 位作者 杨磊 朱卫东 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期612-618,共7页
选取日本沼虾5月龄同生群雌、雄虾各90尾,分别测量其体重、体长、头胸甲长、胸宽、胸高、腹节长、腹节宽、腹节高、尾节长、尾节宽、尾节高、眼窝距、额剑长等13个表型性状,并采用相关分析、通径分析和偏回归分析等方法定量研究了雌、... 选取日本沼虾5月龄同生群雌、雄虾各90尾,分别测量其体重、体长、头胸甲长、胸宽、胸高、腹节长、腹节宽、腹节高、尾节长、尾节宽、尾节高、眼窝距、额剑长等13个表型性状,并采用相关分析、通径分析和偏回归分析等方法定量研究了雌、雄个体形态性状对体重的影响效应。结果表明:(1)雌、雄测定群体各形态性状测量值间均存在显著的性别差异(P<0.05),虽各性状与体重间的相关系数均达到极显著水平(P<0.01),但雄性均明显大于对应的雌性;(2)经通径分析,雄性被保留的3个形态性状与体重的复相关指数为0.952,它们对体重的直接作用呈体长>头胸甲长>胸宽,雌性被保留的4个形态性状对体重的复相关指数为0.772,它们对体重的直接作用呈头胸甲长>胸宽>体长>胸高;(3)经多元回归分析,用于估算雄性体重回归方程的回归截距和自变量体长、头胸甲长、胸宽的回归系数依次为-4.394、0.069、0.152、0.109,雌性体重回归方程的回归截距和自变量头胸甲长、胸宽、体长和胸高的回归系数则依次为-2.448、0.029、0.065、0.121、0.105。 展开更多
关键词 日本沼虾 同生群 形态性状 体重 性别差异 多元分析
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日本沼虾(Macrobrachium nipponensis)池养越冬抱卵亲虾表型性状对个体繁殖力的影响效应 被引量：13
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作者 王志铮 杨磊 +2 位作者 施建军 朱卫东 任夙艺 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期166-173,共8页
采用多元分析方法定量研究了日本沼虾池养越冬抱卵亲虾体重(BW)、净重(NW)、体长(BL)、头胸甲长(CL)、胸宽(CW)、胸高(CH)、腹节长(AL)、额剑长(RL)、尾节长(TL)等11项表型性状对其个体繁殖力的影响效应。结果表明:(1)实验对象所测各表... 采用多元分析方法定量研究了日本沼虾池养越冬抱卵亲虾体重(BW)、净重(NW)、体长(BL)、头胸甲长(CL)、胸宽(CW)、胸高(CH)、腹节长(AL)、额剑长(RL)、尾节长(TL)等11项表型性状对其个体繁殖力的影响效应。结果表明:(1)实验对象所测各表型性状间均呈极显著相关(P<0.01),它们在对个体繁殖力各评价指标的影响上具较好的区分度;(2)影响个体绝对繁殖力(FJ)、体重相对繁殖力(FW)和体长相对繁殖力(FL)的关键表型性状及其直接作用强弱排序分别为BW>BL>CH>RL>AL>NW,BW>CL>RL>CH>TL>NW和BW>CL>CH>RL>NW,相关指数依次为0.810、0.621和0.798,其中BW-NW组合和CH-RL组合分别为决定个体繁殖力的核心变量和公共从属变量;(3)适用于估算个体繁殖力的回归方程分别为:FJ=5087.802BW-6599.877NW+200.927CH+114.774RL+211.878BL-154.965AL-6266.840,FW=1140.538BW-2018.663NW+85.217CH+70.852RL+78.694CL+74.623TL-1152.576,FL=105.453BW-134.613NW+4.307CH+2.709RL+3.623CL-61.737;(4)W(♀)=0.029BL+0.065CL+0.121CW+0.105CH-2.448可精确估算其净重值。 展开更多
关键词 日本沼虾 同生群 越冬抱卵亲虾 表型性状 个体繁殖力 多元分析
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日本鳗鲡(Anguilla japonica)对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)的捕食效应 被引量：8
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作者 王志铮 杨磊 +2 位作者 朱卫东 王海强 施建军 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期107-113,共7页
采用捕食者-猎物间捕食效应研究方法,研究了日本鳗鲡对3种体长规格日本沼虾的捕食效应。结果表明:(1)日本鳗鲡与日本沼虾的主要活动时段均为17:00至翌日5:00,期间日本沼虾的活动量随其体长规格的增大而减少,日本鳗鲡的主要捕食时段为0:0... 采用捕食者-猎物间捕食效应研究方法,研究了日本鳗鲡对3种体长规格日本沼虾的捕食效应。结果表明:(1)日本鳗鲡与日本沼虾的主要活动时段均为17:00至翌日5:00,期间日本沼虾的活动量随其体长规格的增大而减少,日本鳗鲡的主要捕食时段为0:00—5:00,其对体长2.4cm左右的日本沼虾有较强的追捕行为;(2)日本鳗鲡对日本沼虾的捕食选择性仅表露于同一实验容器单元内日本沼虾体长规格组成差异较为悬殊的组别中,且对其中体长规格明显偏小的个体具较强的捕食选择性;(3)日本鳗鲡捕食日本沼虾的功能反应属Holling-Ⅱ型,日本沼虾总体被捕食情形与各实验体长规格间无显著差异,其功能反应、种内干扰反应和种间相互干扰反应模型依次为Na=(0.1104×N0/1+0.0048×N0)、E=0.0998×P-0.8582和Na=(0.143×p0.0664×N0/1+0.0048×N0)。 展开更多
关键词 日本鳗鲡 日本沼虾 体长 捕食作用
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