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绵羊前体脂肪细胞分化过程中关键基因时序表达特征研究 被引量:1
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作者 杨广军 廖媛 +2 位作者 张志超 钟荣珍 段子渊 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期100-108,共9页
为分析绵羊前体脂肪细胞在成脂分化过程中关键基因的表达规律及特点,以3T3-L1细胞系为参照,选取出生20 d的呼伦贝尔羊母羔羊,利用组织块消化法从其尾部脂肪组织中分离前体脂肪细胞,建立原代细胞系。利用鸡尾酒法分别对3T3-L1细胞系和绵... 为分析绵羊前体脂肪细胞在成脂分化过程中关键基因的表达规律及特点,以3T3-L1细胞系为参照,选取出生20 d的呼伦贝尔羊母羔羊,利用组织块消化法从其尾部脂肪组织中分离前体脂肪细胞,建立原代细胞系。利用鸡尾酒法分别对3T3-L1细胞系和绵羊前体脂肪细胞系进行诱导分化,采用实时荧光定量PCR检测诱导分化过程中关键基因的时序表达。结果显示,绵羊前体脂肪细胞成脂分化用时更长,诱导分化16 d后依然有部分细胞具有分化能力。基因时序表达分析表明,DLK1、SREBP1、ACC1、FASN基因的时序表达趋势在2类细胞中基本一致;ZFP423、ADIPOQ、C/EBPα基因的表达时序在2类细胞系中高度相似;而PPARγ、FABP4、LPL、HSL基因在2类细胞系中的时序表达趋势差异较大。相比3T3-L1细胞系,绵羊前体脂肪细胞中ZFP423、ADIPOQ、C/EBPα、FABP4的相对表达量在诱导分化中、后期仍然处于较高水平,PPARγ、LPL、HSL的相对表达量呈现持续增长趋势,表明绵羊前体脂肪细胞的成脂分化具有自身特点。根据基因表达情况推测,绵羊前体脂肪细胞诱导分化16 d后通过外界环境摄取脂肪酸合成甘油三酯并沉积于细胞,这种较强的吸收外界环境脂肪酸的能力可能是本土绵羊皮下脂肪过度沉积的原因之一。综上所述,对绵羊脂肪代谢的相关研究以绵羊脂肪细胞为模型更加合理,为绵羊脂肪代谢研究提供了可靠的试验模型。 展开更多
关键词 绵羊 前体脂肪细胞 成脂分化 基因时序表达
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九香虫脂肪酸合酶基因克隆、生物信息学分析及时序表达谱研究
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作者 冯芷汀 尹志勇 郭建军 《山地农业生物学报》 2024年第3期15-20,共6页
九香虫Aspongopus chinensis Dallas,1851是中国传统药食两用资源昆虫,其需求量日增。然其存在严格的生殖滞育现象,脂肪酸合酶(Fatty Acid Synthase,FASN)与昆虫滞育关系密切。本文根据九香虫转录组数据设计了FASN特异性引物,提取九香虫... 九香虫Aspongopus chinensis Dallas,1851是中国传统药食两用资源昆虫,其需求量日增。然其存在严格的生殖滞育现象,脂肪酸合酶(Fatty Acid Synthase,FASN)与昆虫滞育关系密切。本文根据九香虫转录组数据设计了FASN特异性引物,提取九香虫总RNA,利用PCR技术克隆出九香虫脂肪酸合酶基因(AcFASN),利用生物信息学软件对其进行了生物信息学和同源进化树分析,并通过实时荧光定量试验获取了AcFASN在九香虫中的时序表达图谱。结果显示:九香虫AcFASN基因全长7092 bp,编码2363个氨基酸;九香虫AcFASN是亲水性蛋白质,亚细胞主要定位于细胞质,是一种无信号肽、非跨膜、非分泌型蛋白。同源进化树分析表明,AcFASN氨基酸序列与茶翅蝽Halyomorpha halys的FASN氨基酸序列进化关系较近。时序表达谱显示AcFASN基因在滞育期表达量较高,预示着AcFASN基因极可能通过改变九香虫体内AcFASN的表达量来影响九香虫滞育等生命活动。 展开更多
关键词 脂肪酸合酶 九香虫 基因克隆 时序表达
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锦鲤N-乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸转移酶α/β亚基(GNPTAB)的生物信息学分析及其组织分布和时序表达
3
作者 温思怡 韩卓然 孙敬锋 《天津农学院学报》 CAS 2024年第5期52-58,共7页
论文旨在研究锦鲤(Cyprinus carpio var. koi)GNPTAB(alpha/beta subunits of N-acetylglucosamine-1-phosphotransferase)基因的分子生物学特征及对维氏气单胞菌感染的应答规律。对锦鲤GNPTAB基因CDS区进行生物信息学分析,利用实时荧... 论文旨在研究锦鲤(Cyprinus carpio var. koi)GNPTAB(alpha/beta subunits of N-acetylglucosamine-1-phosphotransferase)基因的分子生物学特征及对维氏气单胞菌感染的应答规律。对锦鲤GNPTAB基因CDS区进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR技术研究GNPTAB基因的组织分布和维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)感染机体后的时序表达规律。结果显示,GNPTAB基因CDS区片段长度为3 747 bp,推测编码1 248个氨基酸,含有4个结构域。实时荧光定量PCR分析显示,GNPTAB基因在健康锦鲤各组织中均有表达,在肝脏表达量最高,其次是肌肉、肠道、脾脏、皮肤、中肾、头肾。维氏气单胞菌人工感染锦鲤6~72 h,GNPTAB基因在肠道组织主要呈现上调表达,在肝脏、头肾、脾脏、皮肤、肌肉组织中主要呈现下调表达。维氏气单胞菌感染锦鲤后,GNPTAB基因在这些组织中出现表达差异,推测GNPTAB参与了机体的病理生理过程或免疫应答反应。 展开更多
关键词 锦鲤 生物信息学分析 组织分布 时序表达 N-乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸转移酶α/β亚基
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马氏珠母贝Dmrt5基因的克隆及时序表达模式分析 被引量:9
4
作者 于非非 桂建芳 +2 位作者 周莉 王梅芳 余祥勇 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期844-850,共7页
Dmrt(Double sex and Mab-3 related transcription factor)基因是一类含有高度保守的DM(Double sex and Mab-3)结构域的基因家族,该基因家族的很多成员都参与了性别决定和分化过程的调控。目前已研究了很多物种的Dmrt基因,但对于具有... Dmrt(Double sex and Mab-3 related transcription factor)基因是一类含有高度保守的DM(Double sex and Mab-3)结构域的基因家族,该基因家族的很多成员都参与了性别决定和分化过程的调控。目前已研究了很多物种的Dmrt基因,但对于具有重要进化地位和经济价值的贝类,却鲜见相关报道。Dmrt5作为Dmrt基因家族的重要成员,是否也参与了动物的性别决定与分化的调控,至今为止没有定论。采用RACE-PCR技术,从马氏珠母贝(Pinctadamatensii,Dunker)精巢的SMARTcDNA中克隆了Dmrt5基因的全长cDNA序列。同源性比对显示,pmDmrt5编码的氨基酸序列与海胆、线虫、青鳉、斑马鱼、爪蟾和小鼠的Dmrt5基因的一致性分别为17.2%、26.7%、24.8%、18.7%、20.8%和15.8%。虽然各个物种间同源性并不高,但他们的DM结构域是高度保守的。RT-PCR结果表明,pmDm-rt5基因在雄性性腺中的表达量显著高于鳃、外套膜、闭壳肌、消化盲囊和雌性性腺;在早期雄性性腺、成熟期雄性性腺中的表达量显著高于性腺发育其他时期。这意味着pmDmrt5基因可能参与了马氏珠母贝性别发育的调控。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 Dmrt5 性别发育 时序表达模式
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白桦BpSOC1基因的克隆及时序表达分析 被引量:10
5
作者 刘菲菲 李慧玉 +1 位作者 王姗 刘桂丰 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期1-4,共4页
根据NCBI中已注册的近缘树种的SOC1同源基因序列设计引物,采用RT-PCR技术在4年生白桦茎尖中分离得到1条SOC1-like cDNA序列,命名为BpSOC1。该序列编码区长660 bp,编码220个氨基酸,蛋白质相对分子质量为25 367.77 D,理论等电点为9.32。... 根据NCBI中已注册的近缘树种的SOC1同源基因序列设计引物,采用RT-PCR技术在4年生白桦茎尖中分离得到1条SOC1-like cDNA序列,命名为BpSOC1。该序列编码区长660 bp,编码220个氨基酸,蛋白质相对分子质量为25 367.77 D,理论等电点为9.32。蛋白结构预测分析表明,BpSOC1具有典型的MADS-box结构域和K-box结构域,同时具有多处DNA结合位点、糖基化位点和磷酸化作用位点,属于MADS家族转录因子。系统发育分析表明,BpSOC1属于MADS-box家族的SOC1/TM3亚家族。采用实时定量PCR技术研究不同树龄白桦BpSOC1从5月初至9月在茎尖的时序表达规律,结果显示:BpSOC1无论在2年生苗期的营养生长阶段还是进入3、4年生的生殖生长阶段均有表达,表达高峰均在7月初和9月初。但2年生苗期的BpSOC1表达量最高的7月初和9月初间无显著差异,而进入生殖生长期后9月初的BpSOC1表达量显著高于7月初的表达量,表明Bp-SOC1既参与白桦的营养生长,又参与生殖生长。 展开更多
关键词 白桦 BpSOC1 基因克隆 时序表达
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猪脂肪组织发育过程中Wnt/β-catenin信号通路相关基因及脂肪转录因子的时序表达 被引量:8
6
作者 罗肖 李惠侠 杨公社 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期746-753,共8页
为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪脂肪组织发育的影响,并探讨其可能的作用机制,以1-120日龄长白猪脂肪组织为试验材料,采用SQRT-PCR法检测Wnt信号通路中相关基因β-catenin、GSK3β、Fz1及主要的脂肪转录因子PPARγ、C/EBPα和分化早... 为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪脂肪组织发育的影响,并探讨其可能的作用机制,以1-120日龄长白猪脂肪组织为试验材料,采用SQRT-PCR法检测Wnt信号通路中相关基因β-catenin、GSK3β、Fz1及主要的脂肪转录因子PPARγ、C/EBPα和分化早期标志基因LPL mRNA的表达变化;石蜡切片免疫组化方法定性检测β-catenin在脂肪组织发育中的时序表达变化。SQRT-PCR结果显示,β-catenin mRNA在猪出生第1天有高水平表达,随着个体日龄的增长,其表达量逐渐降低,60日龄后维持在一个较低水平。GSK3β和Fz1mRNA的表达量也伴随脂肪组织的发育而逐渐降低。而LPL、PPARγ和C/EBPα的mRNA表达量随着个体日龄的增长而逐渐升高,60日龄后仍保持高水平的表达。石蜡切片免疫组化结果显示,随着脂肪组织的发育,β-catenin蛋白的表达也随之降低,并且β-catenin蛋白的表达部位逐渐由细胞核和细胞质共表达变为只在细胞质中表达。上述基因表达的时序变化规律提示,β-catenin在维持前体脂肪细胞的未分化状态,抑制脂肪组织发育中具有重要作用,其作用机制可能是通过对脂肪细胞转录因子PPARγ、C/EBPα及分化早期标志基因LPL mRNA的调控来进行的。 展开更多
关键词 WNT/Β-CATENIN 脂肪发育 时序表达
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马氏珠母贝Sox11基因的克隆及时序表达模式分析 被引量:3
7
作者 于非非 王梅芳 +2 位作者 桂建芳 周莉 余祥勇 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期71-75,共5页
为探究Sox(SRY-related HMG-box genes)基因家族在马氏珠母贝个体发育及性别分化中的作用,研究首先利用兼并引物从马氏珠母贝基因组中克隆到一个HMG框(high mobility group box),利用RACE-PCR技术从SMART c DNA文库中克隆到一个Sox基因... 为探究Sox(SRY-related HMG-box genes)基因家族在马氏珠母贝个体发育及性别分化中的作用,研究首先利用兼并引物从马氏珠母贝基因组中克隆到一个HMG框(high mobility group box),利用RACE-PCR技术从SMART c DNA文库中克隆到一个Sox基因的c DNA全长,通过Clustal X和MEGA 4软件对该序列进行比对分析并构建系统进化树;通过荧光定量PCR技术对该基因在不同组织及发育不同时期性腺中的表达情况进行分析。结果显示,马氏珠母贝该Sox基因的c DNA全长为1579 bp,其中开放阅读框(ORF)为1008 bp,编码336个氨基酸,5′非编码区为126 bp,3′非编码区为445 bp。同源性分析表明,马氏珠母贝Sox基因与太平洋牡蛎Sox11基因的同源性(Identity)最高,为80%,故命名为pm Sox11;系统进化树分析也显示pm Sox11与太平洋牡蛎Sox11基因的亲缘关系最近。荧光定量PCR分析组织表达特异性显示,pm Sox11在马氏珠母贝神经节分布较多的组织如外套膜、鳃、足、消化盲囊等大量表达,在神经节相对较少的闭壳肌和卵巢中表达量较少;时序表达图谱显示,pm Sox11在3月龄幼贝性腺和1年龄发育早期精巢中表达量最高,在2年龄成熟精巢和2年龄性转换性腺中表达量降低,而在2年龄卵巢中表达量最低。研究表明,pm Sox11基因可能在马氏珠母贝早期神经系统发育和性别发育的调控方面起到重要作用。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 pmSox11 基因克隆 时序表达模式
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ox-LDL诱导巨噬细胞TNF-α的时序表达 被引量:3
8
作者 林秋雄 余细勇 +2 位作者 单志新 林曙光 Huiyao Lan 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1552-1553,共2页
关键词 OX-LDL诱导 巨噬细胞 TNF-Α 时序表达 肿瘤坏死因子A 氧化型低密度脂蛋白 动脉粥样硬化
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不同病原菌刺激下三疣梭子蟹主要组织LGBP基因的时序表达 被引量:2
9
作者 王锡波 金珊 +3 位作者 陈寅儿 赵青松 彭程远 王春琳 《生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第6期5-9,共5页
脂多糖-β-1,3-葡聚糖结合蛋白(lipopolysaccharide-β-1,3-glucan binding protein,LGBP)作为一种模式识别受体能够识别革兰氏阴性菌和真菌的细胞壁多糖成分脂多糖和β-1,3-葡聚糖,在甲壳动物的免疫系统中占有重要地位,为了解LGBP在蟹... 脂多糖-β-1,3-葡聚糖结合蛋白(lipopolysaccharide-β-1,3-glucan binding protein,LGBP)作为一种模式识别受体能够识别革兰氏阴性菌和真菌的细胞壁多糖成分脂多糖和β-1,3-葡聚糖,在甲壳动物的免疫系统中占有重要地位,为了解LGBP在蟹类动物抗菌免疫应答中的作用,采用SYBR Green I实时荧光定量PCR方法,对分别经溶藻弧菌,酵母菌,溶-酵混合菌、金黄色葡萄球菌刺激6 h、12 h、24 h、48 h的三疣梭子蟹血细胞、肝胰腺、肌肉3种组织LGBP基因的相对表达量进行了检测。结果显示,LGBP基因在3种组织中的时序表达量总体趋势基本一致,呈现"上升-下降-再上升-下降"的趋势,各实验组在实验6 h时表达量均达到了峰值;不同病原菌刺激下LGBP基因在梭子蟹肝胰腺和血细胞中的表达量明显高于肌肉,且溶-酵混合菌刺激组织LGBP的表达量最高,酵母菌和溶藻弧菌刺激组次之,金黄色葡萄球菌组最低,说明LGBP主要参与蟹类抵抗革兰氏阴性菌和真菌侵入的免疫防御反应,但对革兰氏阳性菌也有一定的作用。 展开更多
关键词 三疣梭子蟹 LGBP 荧光定量PCR 时序表达
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巴哈雀稗PnDREB2基因克隆及时序表达图谱构建 被引量:1
10
作者 张宇君 王普昶 +4 位作者 赵丽丽 曾庆飞 张雄 陈超 董瑞 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期7-15,共9页
脱水反应元件结合蛋白(DREBs)在植物非生物逆境胁迫中可调节下游一系列抗逆基因的表达。为探究巴哈雀稗DREB2基因在逆境胁迫下的功能,本研究采用RNA-Seq结合RT-PCR技术从巴哈雀稗中获得一个DREB2基因CDS区全序列,命名为PnDREB2(GenBank... 脱水反应元件结合蛋白(DREBs)在植物非生物逆境胁迫中可调节下游一系列抗逆基因的表达。为探究巴哈雀稗DREB2基因在逆境胁迫下的功能,本研究采用RNA-Seq结合RT-PCR技术从巴哈雀稗中获得一个DREB2基因CDS区全序列,命名为PnDREB2(GenBank登录号:MH150946)。核苷酸序列分析表明,该基因开放阅读框全长774 bp,编码257个氨基酸,相对分子质量为28.09 kD,理论等电点为5.25;该植物蛋白中具有DREB类基因家族典型的保守域AP2结构域,属于DREB2类转录因子A类中A2亚类的亚型1。进化和聚类分析结果表明,巴哈雀稗PnDREB2基因与高粱、割手密、玉米、谷子及牛鞭草亲缘关系较近,氨基酸序列同源性分别为91.10%、89.50%、88.20%、87.60%和87.60%。RT-qPCR和生物信息学分析表明,PnDREB2基因在茎中表达量最高,幼穗次之,叶最低;表达产物定位于细胞质中,具有26个磷酸化位点,并具有结构和功能的特异性。PnDREB2表达量受干旱(PEG-6000,20%)和高温(40℃)的强烈诱导,同时也受到高盐(NaCl,300 mmol·L^(-1))、低温(4℃)、脱落酸(ABA,100μmol·L^(-1))和赤霉素(GA,100μmol·L^(-1))等非生物胁迫和激素的不同程度诱导,随着处理时间的延长,整体上均呈先增加后降低的趋势。本试验为巴哈雀稗抗逆分子机理研究与抗性增强的转基因材料培育奠定了理论基础。 展开更多
关键词 巴哈雀稗 非生物胁迫 RNA-SEQ RT-QPCR 时序表达
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MyHC基因在C2C12成肌细胞分化过程中的时序表达 被引量:2
11
作者 林亚秋 张明 +2 位作者 邬杨楠 李瑞文 郑玉才 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2014年第3期350-353,共4页
以体外培养的C2C12成肌细胞为研究对象,然后利用荧光定量PCR检测肌球蛋白重链(myosin heavy chains,MyHC)的3种亚型MyHC1、MyHC2x和MyHC2b在成肌诱导分化中(0-8 d)中的时序表达规律.结果表明,MyHC1基因在诱导分化的0-4 d表达呈上升趋势,... 以体外培养的C2C12成肌细胞为研究对象,然后利用荧光定量PCR检测肌球蛋白重链(myosin heavy chains,MyHC)的3种亚型MyHC1、MyHC2x和MyHC2b在成肌诱导分化中(0-8 d)中的时序表达规律.结果表明,MyHC1基因在诱导分化的0-4 d表达呈上升趋势,4-8 d又呈下降趋势,在第4 d和第6 d的表达水平显著高于其他天数(p<0.05).MyHC2x基因在诱导分化的0-6 d表达呈上升趋势,但在第8 d又开始下降.MyHC2b在诱导分化的0-8 d中表达一直呈上升趋势,第6 d和第8 d表达水平显著高于其他天数(p<0.05). 展开更多
关键词 肌球蛋白重链基因 C2C12成肌细胞 时序表达
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藏鸡FST基因组织表达谱及时序表达谱的研究 被引量:1
12
作者 王英明 林亚秋 +2 位作者 李志雄 何世明 徐亚欧 《中国家禽》 北大核心 2019年第5期7-10,共4页
研究旨在揭示卵泡抑素(FST)基因在藏鸡不同组织及发育阶段中的表达特性。选取1、42、70、120、150日龄藏鸡公母各5只,分别采集垂体、下丘脑、胸肌、腿肌组织样本,利用qRT-PCR技术,对FST基因在所选组织中的表达水平进行测定,构建组织表... 研究旨在揭示卵泡抑素(FST)基因在藏鸡不同组织及发育阶段中的表达特性。选取1、42、70、120、150日龄藏鸡公母各5只,分别采集垂体、下丘脑、胸肌、腿肌组织样本,利用qRT-PCR技术,对FST基因在所选组织中的表达水平进行测定,构建组织表达谱及时序表达谱并进行分析。结果显示:FST基因主要在藏鸡垂体组织中表达,发育前期公鸡中的表达水平较高,发育后期母鸡中的表达水平高于公鸡;与下丘脑、胸肌以及腿肌时序表达特性不同,FST基因在藏鸡垂体组织中的时序表达特性具有性别差异。研究结果为进一步了解FST基因的功能及物种多样性提供了参考,也为藏鸡的遗传育种提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 藏鸡 FST基因 组织表达 时序表达
原文传递
猪ADSCs的成脂分化及HH通路关键基因和脂肪转录因子的时序表达
13
作者 范彩云 张运海 +4 位作者 王菊花 王尚 朱飞 赵男 程建波 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期541-546,共6页
为了探讨HH信号通路在脂肪细胞分化过程中的作用机制,以猪脂肪间充质干细胞(ADSCs)为材料,经成脂诱导后,利用油红O染色观察脂肪细胞的形态变化,并检测诱导分化不同时期HH信号通路关键基因Smo、Ptc1、Gli1、Gli2以及成脂关键转录因子C/EB... 为了探讨HH信号通路在脂肪细胞分化过程中的作用机制,以猪脂肪间充质干细胞(ADSCs)为材料,经成脂诱导后,利用油红O染色观察脂肪细胞的形态变化,并检测诱导分化不同时期HH信号通路关键基因Smo、Ptc1、Gli1、Gli2以及成脂关键转录因子C/EBPα、PPARγ的表达情况。结果显示,在ADSCs细胞成脂分化过程中,脂肪细胞的数量逐渐增加,脂滴变大;Smo、Gli1、Gli2基因从第4天开始随诱导天数的增加表达量逐渐降低,而Ptc1的变化趋势与之相反;且C/EBPα、PPARγ的表达从第4天开始逐渐增加。结果表明,ADSCs细胞成脂诱导第4天HH信号通路的活性被全面启动,且随诱导天数的增加其活性逐渐降低。 展开更多
关键词 ADSCS 成脂分化 HH信号通路 时序表达
原文传递
HCMV IE1和pp65在人神经胶质瘤U_(251)细胞中的时序表达
14
作者 李建华 傅鹰 +3 位作者 陈利玉 戴橄 罗敏华 杨滔 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期551-556,共6页
目的:研究人神经胶质瘤U251细胞对人巨细病毒(human cytomegalovirus,HCMV)的容许性,并探讨病毒蛋白IE1及pp65的时序表达特点。方法:HCMV感染U251细胞,以透射电镜观察U251细胞的形态学改变,以PCR方法检测HCMV核酸,于不同的时间点分别用... 目的:研究人神经胶质瘤U251细胞对人巨细病毒(human cytomegalovirus,HCMV)的容许性,并探讨病毒蛋白IE1及pp65的时序表达特点。方法:HCMV感染U251细胞,以透射电镜观察U251细胞的形态学改变,以PCR方法检测HCMV核酸,于不同的时间点分别用抗蛋白IE1及蛋白pp65单克隆抗体进行免疫细胞化学染色,检测IE1及pp65的表达水平。结果:受染的U251细胞出现了明显的形态学改变,并用PCR方法检测到了HCMV核酸。免疫细胞化学染色表明,蛋白IE1在感染后30min~2h无表达,4h开始表达,14h达高峰,随后下降;蛋白pp65在感染后1h为入侵型pp65,4~96h一直呈低水平表达,至120h表达急剧升高。结论:U251细胞是HCMV的容许细胞,HCMV在其中的表达具有时序性,但是其时序表达较在人成纤维细胞中延迟。 展开更多
关键词 人巨细病毒 人神经胶质瘤 U251细胞 IE1 PP65 时序表达
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三叉神经痛模型大鼠三叉神经节中P2Y1受体的时序表达分析
15
作者 刘悦雁 李峰 +2 位作者 吴剑峰 余宏 解敏 《皖南医学院学报》 CAS 2018年第4期317-320,共4页
目的:探讨P2Y1受体在三叉神经痛大鼠三叉神经节神经元内的时序表达。方法:雄性SD大鼠68只,随机分成3组。正常对照组(4只)未做任何处理;假手术组(32只)暴露眶下神经但不做结扎;手术组(32只)暴露眶下神经并结扎右侧。假手术组和手术组按... 目的:探讨P2Y1受体在三叉神经痛大鼠三叉神经节神经元内的时序表达。方法:雄性SD大鼠68只,随机分成3组。正常对照组(4只)未做任何处理;假手术组(32只)暴露眶下神经但不做结扎;手术组(32只)暴露眶下神经并结扎右侧。假手术组和手术组按照术后各时间点(每时间点4只)取出三叉神经节。行为学观察、HE染色评价动物模型,免疫组化检测并分析TG中P2Y1受体的表达情况。结果:正常对照组中P2Y1受体在TG神经元中表达较弱。手术侧各时间点P2Y1受体的表达均增加。手术侧与假手术组各时间点的P2Y1受体表达量变化存在差异。手术侧P2Y1受体的表达先增加后逐渐回落,手术侧该受体各时间点的表达量均高于假手术组。手术侧与手术对侧各时间点的P2Y1受体表达量变化差异较小。结论:P2Y1受体在CCI-ION模型大鼠的TG神经元内的表达出现不同程度的波动,可能在神经痛中具有一定的作用,且手术侧的痛觉神经传导对对侧TG产生了影响。 展开更多
关键词 P2Y1受体 时序表达 慢性压迫性损伤 三叉神经痛
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斑马鱼中snrpc基因的发育时序表达分析
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作者 王红莹 《安徽农学通报》 2016年第8期14-15,共2页
为了深入研究鱼类snrpc基因的作用机制,通过分析斑马鱼snrpc的发育时序表达,来探讨snrpc基因在斑马鱼中的功能机理。从斑马鱼的胚胎中提取RNA,进行反转录、PCR、克隆等,得到snrpc基因在胚胎发育不同时期的表达水平。结果表明,在斑马鱼... 为了深入研究鱼类snrpc基因的作用机制,通过分析斑马鱼snrpc的发育时序表达,来探讨snrpc基因在斑马鱼中的功能机理。从斑马鱼的胚胎中提取RNA,进行反转录、PCR、克隆等,得到snrpc基因在胚胎发育不同时期的表达水平。结果表明,在斑马鱼胚胎发育初期,snrpc表达量较高,随着胚胎的不断发育,snrpc的m RNA表达量有所下降,到后期表达量又上升。因此,snrpc表达量的变化可能预示着snrpc发挥功能的关键时期,对snrpc的克隆和表达分析,为后续进一步研究其相关功能奠定了基础。 展开更多
关键词 斑马鱼 时序表达 snrpc
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牦牛TNFAIP6基因克隆及其在卵巢活动中的时序表达 被引量:1
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作者 马鸿程 熊显荣 +3 位作者 穆松银 海卓 秦文昌 李键 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期46-54,共9页
旨在探讨牦牛TNFAIP6基因的序列特征,比较分析其在牦牛不同组织以及发情周期卵巢中的时序表达差异性。采集健康雌性牦牛的心脏、肺脏、脾脏、肾脏、肝脏、子宫、小肠、胃、肌肉和不同发情期的卵巢组织,提取各组织总RNA和总蛋白,通过RT-... 旨在探讨牦牛TNFAIP6基因的序列特征,比较分析其在牦牛不同组织以及发情周期卵巢中的时序表达差异性。采集健康雌性牦牛的心脏、肺脏、脾脏、肾脏、肝脏、子宫、小肠、胃、肌肉和不同发情期的卵巢组织,提取各组织总RNA和总蛋白,通过RT-PCR技术克隆获得牦牛TNFAIP6基因序列并对其进行生物信息学分析,用半定量PCR检测其在牦牛不同组织中的表达水平,Western blot和qRT-PCR法分别检测其在不同发情期牦牛卵巢中的蛋白和mRNA表达水平,并进行统计学分析。克隆获得牦牛TNFAIP6基因CDS区全长830 bp,共编码279个氨基酸。蛋白质分析显示,TNFAIP6蛋白为亲水酸性稳定蛋白,无跨膜结构但有信号肽,其中包含Link和CUB两个结构域,其二级结构和三级结构主要由无规卷曲和α-螺旋组成。通过同源性比对分析,发现牦牛TNFAIP6基因与野牦牛和黄牛的同源性较高。半定量PCR结果显示,TNFAIP6基因在牦牛各组织中均有表达,其中在卵巢、子宫、脾脏和肌肉组织中表达显著高于其他组织。qRT-PCR结果显示,TNFAIP6基因在卵泡期卵巢中的表达水平极显著高于其他两个时期(P<0.01),而红体期与黄体期的表达水平差异不显著(P>0.05)。Western blot结果与qRT-PCR结果基本一致。提示TNFAIP6基因可能参与牦牛卵巢活动调控,为进一步探讨TNFAIP6基因在牦牛卵巢活动中的作用机制提供基础资料。 展开更多
关键词 牦牛 卵巢 TNFAIP6 时序表达
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牛PLIN1基因CDS区扩增及时序表达 被引量:8
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作者 雷召雄 魏大为 +2 位作者 汪书哲 杨梦丽 马云 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1472-1478,共7页
PLIN1(Perilipin1)基因是调控脂类代谢的“分子开关”,其编码的脂滴包被蛋白是脂滴表面含量最丰富的蛋白,在脂肪沉积中起关键作用。采用RT-PCR方法扩增牛PLIN1基因编码区序列,利用组织块法和消化法分离培养牛前体脂肪细胞,进一步利用qPC... PLIN1(Perilipin1)基因是调控脂类代谢的“分子开关”,其编码的脂滴包被蛋白是脂滴表面含量最丰富的蛋白,在脂肪沉积中起关键作用。采用RT-PCR方法扩增牛PLIN1基因编码区序列,利用组织块法和消化法分离培养牛前体脂肪细胞,进一步利用qPCR技术检测PLIN1在牛皮下前体脂肪细胞诱导分化过程中(0、2、4、6、10 d)mRNA的相对表达水平。结果表明,牛PLIN1基因CDS区长为1551 bp,共编码517个氨基酸;细胞时序表达结果显示,诱导分化的第0天PLIN1不表达,随着分化时间的推移,其表达量呈上升趋势,与分化的第2天相比,在第6天和第10天表达量上升最快,PPARγ在分化的第0天有少量表达,表达趋势与PLIN1一致,在第6天和第10天显著升高。表明PLIN1在牛脂肪组织生成过程中起重要作用,在前体脂肪细胞分化阶段依赖于PPARγ的表达而表达。 展开更多
关键词 PLIN1 基因克隆 时序表达
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从microarray时序表达数据识别周期表达基因
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作者 周到 何东 周艳红 《生物信息学》 2008年第2期68-70,共3页
根据周期表达基因的周期性和峰值特点,提出了一种将microarray时序表达数据划分为若干个基因表达周期,并对周期内的峰值特点进行评估以识别周期表达基因的方法,能有效减小microarray实验时的噪声干扰。选取了三组广泛使用的时序表达数... 根据周期表达基因的周期性和峰值特点,提出了一种将microarray时序表达数据划分为若干个基因表达周期,并对周期内的峰值特点进行评估以识别周期表达基因的方法,能有效减小microarray实验时的噪声干扰。选取了三组广泛使用的时序表达数据和一组可靠的周期表达基因集合对该方法的效果进行了测试,并与三种典型的周期表达基因识别方法的效果进行了比较。该方法能有效地从各种microarray时序表达数据中识别周期表达基因。 展开更多
关键词 周期表达基因 表达周期 micmarmy 时序表达 峰值特性
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半滑舌鳎黏蛋白样蛋白基因克隆及其组织分布和时序表达
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作者 金歌 费金鹏 +3 位作者 胡秀彩 谭静 吕爱军 孙敬锋 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2022年第4期19-26,共8页
以创伤弧菌(Vibrio vulnificus)ST-6菌株腹腔注射半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象,采用RT-PCR方法扩增、克隆半滑舌鳎黏蛋白样蛋白(CsMLP)基因及其序列,利用实时荧光定量PCR技术研究CsMLP基因的组织分布和创伤弧菌感染后在... 以创伤弧菌(Vibrio vulnificus)ST-6菌株腹腔注射半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象,采用RT-PCR方法扩增、克隆半滑舌鳎黏蛋白样蛋白(CsMLP)基因及其序列,利用实时荧光定量PCR技术研究CsMLP基因的组织分布和创伤弧菌感染后在皮肤中的时序表达水平。结果表明:CsMLP基因片段长度为2989 bp,推测编码996氨基酸(aa),含有VWD(98~273 aa)、C8(318~379 aa)和CK(908~982 aa)3个黏蛋白特异性结构域。氨基酸序列同源性分析结果表明,半滑舌鳎CsMLP与黄金鲈(Perca flavescens)、石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)、斑马鱼(Danio rerio)、非洲爪蟾(Xenopus laevis)和人(Homo sapiens)的序列同源性分别为56.18%、44.07%、33.15%、26.91%和22.63%。CsMLP基因在鳃和皮肤表达水平较高,在脾脏、肠道和肝脏中表达水平较低;CsMLP在创伤弧菌感染皮肤12 h后显著性上调表达,36 h后显著性下调表达。本结果为半滑舌鳎黏蛋白功能及其黏膜免疫应答机制研究提供参考。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 MLP 基因克隆 组织分布 时序表达
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