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时间分辨荧光免疫层析技术在PRRS检测中的应用
1
作者 原小燕 许珈琛 +3 位作者 耿玉静 吴彬 杨高磊 郎洪武 《河南畜牧兽医》 2023年第19期7-9,28,共4页
采用荧光免疫层析技术,以时间分辨荧光微球作为标记物,研制出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)荧光微球抗体检测试纸。对检测试纸的敏感性、特异性、重复性及符合率进行了试验研究。结果表明,研制出的猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光微球抗体... 采用荧光免疫层析技术,以时间分辨荧光微球作为标记物,研制出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)荧光微球抗体检测试纸。对检测试纸的敏感性、特异性、重复性及符合率进行了试验研究。结果表明,研制出的猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光微球抗体检测试纸灵敏度高、特异性好,与IDEXX公司酶免试剂盒比较,符合率可达到92.5%。适用于临床样本的快速检测. 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析技术 猪繁殖与呼吸综合征病毒 抗体 荧光微球 检测试纸
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农产品中黄曲霉毒素的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术研究 被引量：30
2
作者 张兆威 李培武 +1 位作者 张奇 丁小霞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第18期3668-3674,共7页
【目的】黄曲霉毒素严重污染农产品,威胁人畜生命健康,是政府重视、社会关注的一大焦点问题,因此亟需研究建立黄曲霉毒素高灵敏高快速检测方法。目前已研制出高特异性高灵敏度黄曲霉毒素单克隆抗体,本研究旨在应用该抗体,建立黄曲霉毒... 【目的】黄曲霉毒素严重污染农产品,威胁人畜生命健康,是政府重视、社会关注的一大焦点问题,因此亟需研究建立黄曲霉毒素高灵敏高快速检测方法。目前已研制出高特异性高灵敏度黄曲霉毒素单克隆抗体,本研究旨在应用该抗体,建立黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析快速检测技术,为农产品质量监管、风险评估提供技术支持。【方法】本研究通过将黄曲霉毒素抗体与乳胶铕进行偶联标记,利用自主研制的黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条进行黄曲霉毒素检测,通过检测线T信号值与质控线C信号值的比值和标准溶液浓度的自然对数值实现定量。针对花生、稻米、植物油等不同农产品,研究建立样品粉碎均质提取一体化技术。对铕标记时间分辨荧光免疫层析检测技术进行方法学考核,以花生、稻米、植物油等为例,进行实际样品检测,并与HPLC法进行结果比对。【结果】在花生、稻米、植物油等农产品实际样品检测中,本研究建立的时间分辨荧光免疫层析检测技术检测黄曲霉毒素B1得到检测限均为0.3μg·kg-1,线性范围分别为0.8—25、0.8—15和0.8—30μg·kg-1。上述3种农产品对应的标准曲线的线性方程分别为y=0.238x+0.654(R2=0.992)、y=0.321x+0.811(R2=0.990)和y=0.146x+0.173(R 2=0.993),标准偏差分别为0.024、0.039和0.021。该方法的批内准确度和精密度添加回收试验结果表明,添加回收率在81.0%—113.0%,变异系数在7.2%—14.2%;批间准确度和精密度试验结果显示,添加回收率在75.8%—114.9%,变异系数在7.7%—15.3%。说明该检测技术批内、批间均具有良好的准确度和精密度。该方法与HPLC法检测结果相比,相对误差小于10%,说明黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析技术与行业标准方法检测结果具有良好的一致性。【结论】时间分辨荧光免疫层析检测技术灵敏度高、线性范围宽,重复性和稳定性好,是一种适合中国国情的实用快速检测技术,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 时间分辨荧光免疫层析 农产品 快速检测
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时间分辨荧光免疫层析试纸条在油料饼粕黄曲霉毒素B_1检测中的应用 被引量：18
3
作者 李静 李培武 +3 位作者 张奇 丁小霞 张文 张兆威 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期256-262,共7页
采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品... 采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品瓶建立的检测技术。时间分辨荧光速测仪可内置标准曲线,直接输出检测结果。对6种油料饼粕做黄曲霉毒素B1添加回收率实验,回收率在70%~120%之间,批间、批内变异系数〈15%。在实际样品的检测中,时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术与液相色谱-串联质谱法相比,检测结果相对误差〈15%。时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术测定快速、准确,技术稳定、可靠,设备经济、小型,适用于大批量油料饼粕样品的快速检测和风险评估。 展开更多
关键词 油料饼粕 黄曲霉毒素B1 时间分辨荧光免疫层析试纸条 时间分辨荧光速测仪 定量检测
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谷物中玉米赤霉烯酮高灵敏时间分辨荧光免疫层析定量法的建立
4
作者 瞿超杰 苗银萍 +7 位作者 赵光升 赵林萍 娄亚坤 任宝红 曾小宇 李宁 许洪超 付燕峰 《粮食与饲料工业》 CAS 2023年第4期73-79,共7页
建立了一种快速检测谷物中玉米赤霉烯酮的时间分辨免疫层析定量检测方法。对荧光微球与抗体制备过程、抗原抗体反应比例、样本前处理过程等实验条件进行优化,在最佳实验条件下,评价试纸条的检测限、准确度、重复性、特异性及稳定性。试... 建立了一种快速检测谷物中玉米赤霉烯酮的时间分辨免疫层析定量检测方法。对荧光微球与抗体制备过程、抗原抗体反应比例、样本前处理过程等实验条件进行优化,在最佳实验条件下,评价试纸条的检测限、准确度、重复性、特异性及稳定性。试纸条最佳研制条件:活化缓冲液为pH5.0 MES,标记缓冲液为pH7.2 HEPES,EDC用量为100μg,抗体标记量为100μg,膜T线0.6 mg/ml,C线0.25 mg/ml包被,微球偶联物稀释6倍。确定60%甲醇水和样本按质量体积比1∶5混匀提取时间5 min。通过Logistic曲线四参数拟合,R^(2)均为0.99,在5~200 ng/g范围内具有较好的线性关系,玉米、小麦、小米、大米样本的检出限分别为4.24、1.28、1.63、1.49 ng/g。回收率在82.00%~113%,变异系数均小于15%。与其他真菌毒素的交叉反应率均小于1%,37℃放置21 d基本稳定。选择20份样本与仪器确证方法比较,结果一致性好。所制备的试纸条具有较好准确性、重复性、特异性及热稳定性,该方法操作简单、快速,结果准确、可视化,适合于大批量样本的快速筛查。 展开更多
关键词 谷物 玉米赤霉烯酮 时间分辨免疫层析 定量
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牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立 被引量：5
5
作者 张正英 崔乃元 +4 位作者 高海燕 刘海珍 黄文颖 郝云晴 马立才 《肉类研究》 北大核心 2020年第8期57-62,共6页
为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T... 为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T)和质控线(C),制备免疫层析试纸条;利用牦牛肉样本阿维菌素添加量和对应的T线与C线荧光信号峰值比值(T/C)拟合得到四参数标准曲线,建立牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法,并对所建立方法的灵敏度、准确度、特异性、精密度和稳定性等进行评价,用液相色谱-串联质谱方法对所建立方法的性能进行确证。结果表明:本方法对牦牛肉中阿维菌素的定量限为1.0μg/kg,加标回收率为86.9%~105.2%,与阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素及依普菌素的交叉反应率分别为100.0%、73.1%、42.6%和97.5%,批内变异系数为5.4%~9.5%,批间变异系数为7.5%~11.2%,该方法准确度、精密度、灵敏度均较高,且性能稳定。 展开更多
关键词 牦牛肉 阿维菌素 时间分辨荧光免疫层析
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青海牦牛肉中四环素药物残留时间分辨荧光免疫层析测定方法的研究 被引量：3
6
作者 张正英 崔乃元 +3 位作者 王云平 张汉青 赵维章 马立才 《兽医导刊》 2021年第15期135-136,共2页
本研究通过用时间分辨荧光定量免疫层析法测定青海牦牛肉中四环素药物残留含量,建立起一种快速、简单、灵敏度高的四环素类药物残留含量快速检测方法。根据北京维德维康公司提供的时间分辨荧光免疫定量分析方法,对青海牦牛肉中四环素类... 本研究通过用时间分辨荧光定量免疫层析法测定青海牦牛肉中四环素药物残留含量,建立起一种快速、简单、灵敏度高的四环素类药物残留含量快速检测方法。根据北京维德维康公司提供的时间分辨荧光免疫定量分析方法,对青海牦牛肉中四环素类药物残留进行测定,并对测定方法的灵敏度、准确度、精密度等进行评价,并将其与LC-MS/MS方法进行对比。本试验方法的定量限为10ug/kg,添加平均回收率80.0~120.0%之间,平均RSD值为11~15%,该方法可在30 min内完成样本的前处理,10 min完成定性定量检测。由此说明,时间分辨荧光免疫层析法操作简便,准确度、灵敏度均较高,可用于基层实验室对牦牛肉中四环素药物残留含量检测,具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 青海牦牛肉 四环素 时间分辨荧光免疫层析
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时间分辨荧光免疫层析法检测酥油中黄曲霉毒素M1的研究 被引量：1
7
作者 魏娜 张飞龙 《西藏农业科技》 2019年第4期37-39,共3页
为寻求酥油中黄曲霉毒素M1快速准确检测方法,本研究利用时间分辨荧光免疫层析法测定酥油中黄曲霉毒素M1含量,结果表明:该检测方法样品加标回收率为77. 6%89. 6%,RSD <15%,与免疫亲和柱净化-HPLC法相比,相对误差<12%,该法具有简便... 为寻求酥油中黄曲霉毒素M1快速准确检测方法,本研究利用时间分辨荧光免疫层析法测定酥油中黄曲霉毒素M1含量,结果表明:该检测方法样品加标回收率为77. 6%89. 6%,RSD <15%,与免疫亲和柱净化-HPLC法相比,相对误差<12%,该法具有简便快速、灵敏度高、重现性好等特点,可用于酥油中黄曲霉毒素M1的快速检测。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析法 黄曲霉毒素M1 酥油 快速检测
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时间分辨荧光免疫层析法定量检测谷物中黄曲霉毒素B_(1)和玉米赤霉烯酮残留 被引量：14
8
作者 王序 卢迪莎 +5 位作者 曾道平 黄健欣 吴颖 许小炫 谭庶 杨金易 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2021年第4期252-261,291,共11页
建立了一种快速定量检测谷物产品中黄曲霉毒素(Aflatoxin B1,AFB1)和玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的时间分辨荧光免疫层析方法。采用时间分辨荧光微球标记黄曲霉毒素B1抗体和玉米赤霉烯酮抗体,研究了如p H值、标记抗体浓度、荧光探针... 建立了一种快速定量检测谷物产品中黄曲霉毒素(Aflatoxin B1,AFB1)和玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的时间分辨荧光免疫层析方法。采用时间分辨荧光微球标记黄曲霉毒素B1抗体和玉米赤霉烯酮抗体,研究了如p H值、标记抗体浓度、荧光探针使用量、检测T线包被原浓度、质控C线羊抗鼠Ig G浓度、样品前处理方法等因素对时间分辨荧光免疫层析方法灵敏度的影响。结果表明:AFB1的检出限为0.80 ng/mL,线性范围(IC20~IC80)为0.81~5.67 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为2.15 ng/mL。在ZEN检出限为4.58 ng/mL,线性范围(IC20~IC80)为4.76~85.60 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为20.19 ng/mL。方法特异性良好,与T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、伏马毒素、赭曲霉毒素A多种真菌毒素交叉率小于10%。通过选择玉米、麦麸、大豆、小麦进行添加回收试验,AFB1的添加回收率在97.1%~108.7%之间,ZEN的添加回收率在92.8%~109.1%之间,相对标准偏差小于15%。选取经HPLC-MS/MS检测过的FAPAS标准质控样本进行测试,检测结果与其结果一致。在实际产品检测对比中,与市售胶体金免疫层析卡,ELISA试剂盒的检测结果基本一致。本方法操作简单快速、可定量,检测过程约25 min,适用于谷物样品中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的现场快速筛。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 玉米赤霉烯酮 时间分辨荧光免疫层析 谷物
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时间分辨荧光免疫层析法检测大米中黄曲霉毒素B_1的不确定度分析 被引量：5
9
作者 袁毅 张一平 +3 位作者 董曼佳 熊晓辉 严艺琳 张东升 《生物加工过程》 CAS 2018年第2期93-101,共9页
对采用时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)测定大米中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量的不确定度进行分析,找出影响不确定度的主要分量。根据CNAS GL06—2006《化学分析中不确定度的评估指南》中提供的方法,建立数学模型,分析测定过程中各不确定度... 对采用时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)测定大米中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量的不确定度进行分析,找出影响不确定度的主要分量。根据CNAS GL06—2006《化学分析中不确定度的评估指南》中提供的方法,建立数学模型,分析测定过程中各不确定度分量的来源,并对其进行量化和评定。结果表明,相对标准合成不确定度为3.703%、相对标准总不确定度为7.406%,大米中黄曲霉毒素B_1含量为(5.235 2±0.387 7)μg/kg(k=2)。不确定度主要来源于标准曲线拟合、重复性检测和样品提取,分别占比20.82%、23.27%和19.35%。测定过程中,应首先制备准确且稳定的标准曲线,并增加平行样的测定次数,提高提取操作的准确度。本文所建立的不确定度评定方法可用于TRFIA法测定大米中黄曲霉毒素B_1含量结果的评定。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析法 黄曲霉毒素B1 大米 不确定度 食品安全
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时间分辨荧光免疫层析法检测小麦中呕吐毒素的研究 被引量：9
10
作者 谢婷婷 《粮食与食品工业》 2018年第3期61-63,66,共4页
以小麦为原料,分别采用高效液相色谱法及时间分辨荧光免疫层析法检测其呕吐毒素含量并探讨时间分辨荧光免疫层析方法的适用性。结果表明,时间分辨荧光免疫层析法作为快速检测小麦中呕吐毒素的技术具有较高的准确性和稳定性。
关键词 时间分辨荧光免疫层析法 小麦 呕吐毒素
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时间分辨荧光免疫层析法定量检测稻谷中的镉 被引量：1
11
作者 张海涛 祁苏娴 +2 位作者 董曼佳 陆廷瑾 杨婷婷 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期170-173,共4页
本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL... 本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL,标准曲线线性范围为0.1~5.0 ng/mL,检出限和定量限分别为0.026 mg/kg和0.064 mg/kg,对有证标准物质的正确度在81.0%~91.7%,对实际样本的检测与ICP-MS检测结果一致性较高。该法重复性较好,变异系数在10%以内。结果显示,该法灵敏度高、操作简便、成本低廉,因此,非常适合基层单位大量样本的快速初步筛查。 展开更多
关键词 镉 稻谷 时间分辨荧光免疫层析法 快速定量检测
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呕吐毒素/玉米赤霉烯酮一体式时间分辨荧光免疫层析定量卡的制备及应用 被引量：2
12
作者 张海涛 张居清 +3 位作者 祁苏娴 朱亚俊 于婷 杨婷婷 《粮食与食品工业》 2021年第6期47-51,共5页
本文研究制备了一种建立在竞争抑制原理上的小麦和玉米中同时检测出DON毒素和ZEN毒素的时间分辨荧光免疫层析定量检测试纸条。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗DON的单抗、ZEN的单抗,建立免疫层析定量方法并对其进行方法学优化及考核,... 本文研究制备了一种建立在竞争抑制原理上的小麦和玉米中同时检测出DON毒素和ZEN毒素的时间分辨荧光免疫层析定量检测试纸条。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗DON的单抗、ZEN的单抗,建立免疫层析定量方法并对其进行方法学优化及考核,DON的平均回收率在93.5%~106.5%,ZEN的平均回收率在88.9%~108.7%之间。DON/ZEN快速定量检测二联卡具有灵敏度高、稳定性好、操作简单便捷,可以同时检测小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮等技术特点,因此适用于大量样本的快速初步筛查。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 呕吐毒素 时间分辨荧光免疫层析法 快速定量检测 二联卡
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时间分辨荧光免疫层析法测定粮食中的黄曲霉毒素B_(1) 被引量：4
13
作者 张少波 邓常继 +1 位作者 张海涛 朱启思 《粮食科技与经济》 2021年第6期80-82,110,共4页
采用时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的荧光定量分析仪,对粮食中黄曲霉毒素B_(1)的快速检测进行了研究。结果表明,该方法的检出限为0.8μg/kg,定量限为2.6μg/kg,不同水平的加标回收率在94%~108%。选取标准质控样品进行测试,液相色谱... 采用时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的荧光定量分析仪,对粮食中黄曲霉毒素B_(1)的快速检测进行了研究。结果表明,该方法的检出限为0.8μg/kg,定量限为2.6μg/kg,不同水平的加标回收率在94%~108%。选取标准质控样品进行测试,液相色谱法检测结果与该方法结果基本一致。该方法准确可靠,操作简便,适用于粮食中黄曲霉毒素B_(1)的快速检测。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析法 黄曲霉毒素B_(1) 粮食
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时间分辨荧光免疫层析法同时定量检测粮食中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素 被引量：3
14
作者 张少波 邓常继 +1 位作者 张海涛 朱启思 《粮食科技与经济》 2022年第1期80-84,共5页
建立同时测定粮食中玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)含量的时间分辨荧光免疫层析定量检测方法。结果表明,ZEN的检出限为7.92μg/kg,定量限为15.10μg/kg;DON的检出限为71.90μg/kg,定量限为146.10μg/kg;不同水平的加标回收率在91%~10... 建立同时测定粮食中玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)含量的时间分辨荧光免疫层析定量检测方法。结果表明,ZEN的检出限为7.92μg/kg,定量限为15.10μg/kg;DON的检出限为71.90μg/kg,定量限为146.10μg/kg;不同水平的加标回收率在91%~106%,批内与批间变异系数均小于20%。选取标准质控样品进行测试,液相色谱法检测结果与试验建立的方法结果具有较好的相关性。该方法准确可靠,操作简便,适用于粮食中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的快速定量检测。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析 玉米赤霉烯酮 呕吐毒素 粮食
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时间分辨荧光免疫层析法定量检测粮谷中重金属铅的研究
15
作者 蒋雁 张居清 +2 位作者 朱亚俊 于婷 杨婷婷 《粮食与食品工业》 2021年第5期59-63,共5页
本研究制备了一种基于竞争抑制原理的粮谷物中铅快速检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Pb-EDTA的单克隆抗体,从而建立了免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0... 本研究制备了一种基于竞争抑制原理的粮谷物中铅快速检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Pb-EDTA的单克隆抗体,从而建立了免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.61 ng/mL,标曲线性范围为1~16 ng/mL,检出限和定量限分别为8.70μg/kg和22.39μg/kg,对有证标准物质的检测回收率在93.2%~104.0%。该法精密度较好,变异系数在10%以内。结果显示,该法灵敏度高、操作简便、成本低廉,因此,非常适合基层单位,便于大量样本的快速初步筛查。 展开更多
关键词 重金属铅 粮谷 时间分辨荧光免疫层析法 快速定量检测
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同时检测玉米中黄曲霉毒素B_(1)和赭曲霉毒素A的时间分辨荧光免疫层析试纸条的研制 被引量：13
16
作者 卢迪莎 王序 +2 位作者 杨金易 罗林 肖治理 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第2期346-354,共9页
研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB_(1)和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标... 研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB_(1)和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标记的抗体浓度、荧光探针使用量、检测线包被原浓度、质控线羊抗鼠IgG浓度、样品前处理条件等因素。结果表明:检测AFB_(1)和OTA的IC_(50)分别为1.58、3.91μg/kg,线性范围分别为0.26~9.73、1.14~13.29μg/kg,肉眼检测限分别为3.70、5.55μg/kg;与黄曲霉毒素类似物交叉率为12%~62%,与赭曲霉毒素B交叉率为58%,与其他真菌毒素无明显交叉反应;选择玉米样品进行添加回收实验,2种毒素回收率在92%~103%之间,变异系数小于15%;对实际样品的检测与高效液相色谱法和市售胶体金试纸检测结果一致;且该试纸条可在4℃稳定保存5个月以上,稳定性较好。本研究所制备的时间分辨荧光免疫层析试纸条具有灵敏、准确、快速和简便等特点,非常适用于玉米等食品和农产品中AFB_(1)和OTA的现场快速筛查。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 赭曲霉毒素A 时间分辨 荧光免疫层析试纸条
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呕吐毒素时间分辨荧光免疫层析法的建立与评价 被引量：5
17
作者 张东升 严艺琳 +3 位作者 熊晓辉 董曼佳 游京晶 张一平 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期233-239,共7页
构建并评价了呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)。以Eu^(3+)螯合物的纳米微球为荧光探针标记抗DON单抗,采用竞争抑制建立免疫层析定量方法,优化了微球与抗体标记量,检测的环境温度、反应时间、加样体积及缓冲... 构建并评价了呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)。以Eu^(3+)螯合物的纳米微球为荧光探针标记抗DON单抗,采用竞争抑制建立免疫层析定量方法,优化了微球与抗体标记量,检测的环境温度、反应时间、加样体积及缓冲体系;研究了方法的灵敏度、精密度及准确度。结果表明,每100μL荧光微球结合纯单抗50μg,最佳划膜浓度为1.0 mg/m L,最佳测定条件为室温(25±2)℃,10 min,加样体积100μL,PBS (0.01 mol/L,pH7.2)的缓冲体系,方法的灵敏度为0.25 ng/m L,线性范围为0.5~25.0 ng/m L,玉米、小麦阴性样本(加标浓度200、500、1000、2000μg/kg)平均加标回收率为91.4%~109.3%,6种典型样本经TRFIA与免疫亲和净化-高效液相色谱法(IAC-HPLC)同时测定DON含量,相关系数r达0.9754。TRFIA具有灵敏度高、速度快、定量准等技术特点,适用于谷物及制品中DON的快速定量。 展开更多
关键词 呕吐毒素 时间分辨荧光微球 免疫层析法 评价 检测
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降钙素原时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立及性能评价 被引量：6
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作者 黄德智 应昊俊 +1 位作者 刘飞 蒲晓允 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期581-586,共6页
目的建立一种时间分辨荧光免疫层析定量降钙素原(procalcitonin, PCT)的检测方法并评价其性能。方法利用双抗体夹心法原理,以时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析技术建立PCT免疫检测方法,并对该方法进行线性、灵敏度、... 目的建立一种时间分辨荧光免疫层析定量降钙素原(procalcitonin, PCT)的检测方法并评价其性能。方法利用双抗体夹心法原理,以时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析技术建立PCT免疫检测方法,并对该方法进行线性、灵敏度、精密度、特异性、相关性等性能指标的测定。结果本检测方法线性良好,线性范围为0.05～100 ng/mL,方程为Y=0.074 7X+0.524 6,R^2=0.990 4,灵敏度为0.03 ng/mL,批内精密度CV≤5.42%,批间精密度CV≤6.86%,与AE-180全自动化学发光免疫分析仪结果一致性较好,阳性符合率96.61%,阴性符合率94.44%,假阳性率5.56%,假阴性率3.39%和诊断符合率95.53%。结论本研究建立了PCT时间分辨免疫层析检测方法,该方法简便、经济、快速、并可以定量,各项性能参数均达到临床检测要求,可用于临床血清PCT浓度的检测。 展开更多
关键词 降钙素原 时间分辨荧光微球 免疫层析
原文传递
JWA蛋白时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立
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作者 孙康俊 王晓颖 +2 位作者 徐瑞彤 李爱萍 周建伟 《药学与临床研究》 2018年第5期331-334,共4页
目的:建立时间分辨荧光免疫层析法检测JWA蛋白的体系,并对该法进行评价。方法:运用EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)-NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)活化时间分辨荧光微球,活化的时间分辨荧光微球按100μg Ab∶1 mg微球标记JWA单... 目的:建立时间分辨荧光免疫层析法检测JWA蛋白的体系,并对该法进行评价。方法:运用EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)-NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)活化时间分辨荧光微球,活化的时间分辨荧光微球按100μg Ab∶1 mg微球标记JWA单克隆抗体7C3;将荧光标记的抗体运用于免疫层析检测。结果:时间分辨荧光微球成功标记JWA单克隆抗体,荧光标记的7C3可以准确识别JWA多肽;测量范围可从20 ng·mL^(-1)至1500 ng·mL^(-1),线性范围可达100 ng·mL^(-1)～1000 ng·mL^(-1),回收率在95%以上,高、中、低浓度的重复性检测离散度(CV)均小于10%,加速稳定性亦较好,同时可以检测出胃癌细胞中的JWA蛋白。结论:本研究建立的时间分辨免疫荧光层析法测定JWA蛋白,各项分析性能良好,且便捷准确、快速经济,为检测JWA蛋白提供了一种高效的新途径。 展开更多
关键词 JWA 时间分辨荧光微球 免疫层析
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应用时间分辨荧光免疫层析技术建立HBP定量检测的方法
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作者 郭金双 赵玉川 +1 位作者 刘凤林 夏文龙 《临床医学进展》 2022年第5期4337-4344,共8页
本文建立了一种肝素结合蛋白(Heparin-binding protein, HBP)的定量检测方法,并检验该方法的性能。主要通过以时间分辨荧光纳米微球作为荧光标记物,结合双抗体夹心法原理和免疫层析技术,实现HBP的定量检测。本检测方法在5~1000 ng/mL线... 本文建立了一种肝素结合蛋白(Heparin-binding protein, HBP)的定量检测方法,并检验该方法的性能。主要通过以时间分辨荧光纳米微球作为荧光标记物,结合双抗体夹心法原理和免疫层析技术,实现HBP的定量检测。本检测方法在5~1000 ng/mL线性范围内线性关系良好,方程为y = 0.0324x − 0.0971,R2 = 0.9975。本试剂的批内精密度CV ≤ 5.21%,批间精密度CV ≤ 7.06%。本试剂与中翰盛泰生物技术股份有限公司的肝素结合蛋白测定试剂盒(免疫荧光干式定量法)相关性较好,二者的阳性符合率与阴性符合率分别为96.23%和95.0%,本试剂的假阳性率和假阴性率分别为5.0%和3.77%,诊断符合率为94.52%。本研究建立了HBP定量检测方法,并且该方法具有操作简单、检测快速、结果准确的优点。 展开更多
关键词 肝素结合蛋白 时间分辨荧光纳米微球 免疫层析法 双抗体夹心法
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