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时间分辨荧光免疫层析试纸条在油料饼粕黄曲霉毒素B_1检测中的应用 被引量：18
1
作者 李静 李培武 +3 位作者 张奇 丁小霞 张文 张兆威 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期256-262,共7页
采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品... 采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品瓶建立的检测技术。时间分辨荧光速测仪可内置标准曲线,直接输出检测结果。对6种油料饼粕做黄曲霉毒素B1添加回收率实验,回收率在70%~120%之间,批间、批内变异系数〈15%。在实际样品的检测中,时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术与液相色谱-串联质谱法相比,检测结果相对误差〈15%。时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术测定快速、准确,技术稳定、可靠,设备经济、小型,适用于大批量油料饼粕样品的快速检测和风险评估。 展开更多
关键词 油料饼粕 黄曲霉毒素B1 时间分辨荧光免疫层析试纸条 时间分辨荧光速测仪 定量检测
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同时检测玉米中黄曲霉毒素B_(1)和赭曲霉毒素A的时间分辨荧光免疫层析试纸条的研制 被引量：20
2
作者 卢迪莎 王序 +2 位作者 杨金易 罗林 肖治理 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第2期346-354,共9页
研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB_(1)和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标... 研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB_(1)和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标记的抗体浓度、荧光探针使用量、检测线包被原浓度、质控线羊抗鼠IgG浓度、样品前处理条件等因素。结果表明:检测AFB_(1)和OTA的IC_(50)分别为1.58、3.91μg/kg,线性范围分别为0.26~9.73、1.14~13.29μg/kg,肉眼检测限分别为3.70、5.55μg/kg;与黄曲霉毒素类似物交叉率为12%~62%,与赭曲霉毒素B交叉率为58%,与其他真菌毒素无明显交叉反应;选择玉米样品进行添加回收实验,2种毒素回收率在92%~103%之间,变异系数小于15%;对实际样品的检测与高效液相色谱法和市售胶体金试纸检测结果一致;且该试纸条可在4℃稳定保存5个月以上,稳定性较好。本研究所制备的时间分辨荧光免疫层析试纸条具有灵敏、准确、快速和简便等特点,非常适用于玉米等食品和农产品中AFB_(1)和OTA的现场快速筛查。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 赭曲霉毒素A 时间分辨 荧光免疫层析试纸条
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应用时间分辨荧光免疫层析法快速定量检测玉米及其副产物中的伏马毒素
3
作者 肖蕴祺 汪劲能 +1 位作者 邱良祝 施寿荣 《中国饲料》 北大核心 2025年第3期116-122,共7页
实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进... 实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进行偶联标记,制备FB_(1)荧光免疫层析试纸条,以检测线T信号值与质控线C信号值的比值为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,建立定量标准曲线。通过优化抗体标记过程中混匀转速和复溶液pH,及改变样品垫的处理方式,以提升FB_(1)-TRFIA试纸条的稳定性和精密度。结果显示:FB_(1)-TRFIA试纸条的最低检测限为50.75μg/kg,定量限为100.10μg/kg;组内CV分别为4.83%(FB_(1)1 mg/kg)、2.86%(FB_(1)15 mg/kg)、4.88%(FB_(1)50 mg/kg);组间CV分别为4.90%、3.11%、5.32%,FB_(1)添加回收率为98.33%~102.87%;阳性样本检测结果与LC-MS/MS方法一致;试纸条在4℃和37℃放置14 d,T/C基本不变。本研究建立的FB_(1)-TRFIA试纸条性能良好,适用于玉米及其副产物中FB_(1)含量的快速定量检测。 展开更多
关键词 伏马毒素 时间分辨荧光免疫层析法 玉米 定量快检
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大田软海绵酸和鳍藻毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条的研制与应用 被引量：3
4
作者 韩蕾 赵芮 +4 位作者 刘昭 贾宝林 姜祖林 冯少姝 梁玉波 《海洋环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期783-790,共8页
腹泻性贝类毒素主要包括大田软海绵酸(okadaic acid,OA)、鳍藻毒素-1(dinophysis toxin-1,DTX-1)和鳍藻毒素-2(dinophysis toxin-2,DTX-2)。被贝类毒素污染的海产品可对食用者的健康构成危害。在我国近岸海域OA常有检出,DTX-1和DTX-2偶... 腹泻性贝类毒素主要包括大田软海绵酸(okadaic acid,OA)、鳍藻毒素-1(dinophysis toxin-1,DTX-1)和鳍藻毒素-2(dinophysis toxin-2,DTX-2)。被贝类毒素污染的海产品可对食用者的健康构成危害。在我国近岸海域OA常有检出,DTX-1和DTX-2偶有检出。本文用荧光免疫微球标记抗OA单克隆抗体,利用牛血清白蛋白合成高偶联比的包被抗原,以硝酸纤维素膜为载体,运用免疫层析技术,研制了能够同时快速准确检测OA、DTX-1和DTX-2的时间分辨荧光免疫层析试纸条,定量限分别为90.6μg/kg、115.4μg/kg和69.8μg/kg。实验验证结果表明:本文研制的时间分辨荧光免疫层析试纸条对含有OA、DTX-1和DTX-2中的一种、两种或三种组分的毒素样品检测结果,与液相色谱-串联质谱法检测结果的相关性良好。该时间分辨荧光免疫层析试纸条灵敏、准确、操作简便,成本低,在我国海洋环境监测及海产品食用安全检测中,应用前景良好。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析试纸条 快速检测技术 腹泻性贝类毒素
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啶虫脒、涕灭威、噻虫嗪三联时间分辨荧光快速定量检测卡的研发与应用
5
作者 刘玉珍 蒋童 +4 位作者 张翔 任楠 孟二翠 谈婷 肖理文 《粮食加工》 2025年第2期104-109,共6页
研究时间分辨荧光免疫层析法同时检测果蔬中啶虫脒、涕灭威、噻虫嗪残留量的适用性。考察时间分辨荧光免疫层析法同时检测啶虫脒、涕灭威、噻虫嗪在不同基质中的灵敏度,验证其样本回收率。结果啶虫脒的检出限为0.087 mg/kg,定量限为0.23... 研究时间分辨荧光免疫层析法同时检测果蔬中啶虫脒、涕灭威、噻虫嗪残留量的适用性。考察时间分辨荧光免疫层析法同时检测啶虫脒、涕灭威、噻虫嗪在不同基质中的灵敏度,验证其样本回收率。结果啶虫脒的检出限为0.087 mg/kg,定量限为0.232 mg/kg,在0.25~10 mg/kg检测范围内线性关系良好;涕灭威的检出限为0.005 mg/kg,定量限为0.011mg/kg,在0.01~5mg/kg检测范围内线性关系良好;噻虫嗪的检出限为0.091mg/kg,定量限为0.237mg/kg,在0.25~10 mg/kg检测范围内线性关系良好,可以满足国家标准对果蔬中这些农药的限量要求。对韭菜、大白菜、马铃薯、番茄等不同样本进行加标实验,回收率与均一性均良好。除吡虫啉、环氧虫啶有一些交叉反应外,啶虫脒、涕灭威、噻虫嗪与大部分农药均无交叉反应。该方法操作快速、准确、灵敏、简便,适用于果蔬中啶虫脒、涕灭威、噻虫嗪的同时检测。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析 啶虫脒 涕灭威 噻虫嗪 果蔬
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量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测恶性疟原虫 被引量：32
6
作者 段宏 陈雪岚 +4 位作者 江湖 沈骏 董胜明 熊勇华 Andrew Wang 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期338-343,共6页
以羧基化Cd Te/Zn Se量子点荧光微球为荧光标记物,采用1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺（EDC）法偶联抗恶性疟原虫富组氨酸蛋白（Pf）单克隆抗体制备荧光探针;以羊抗恶性疟原虫组氨酸多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维膜,... 以羧基化Cd Te/Zn Se量子点荧光微球为荧光标记物,采用1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺（EDC）法偶联抗恶性疟原虫富组氨酸蛋白（Pf）单克隆抗体制备荧光探针;以羊抗恶性疟原虫组氨酸多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维膜,形成试纸条检测线和质控线,建立了免疫层析试纸条定量检测血清中恶性疟原虫的方法。所使用的羧基化量子点荧光微球的荧光强度为单个量子点的2800倍。实验结果表明,该荧光试纸条定量检测血清中恶性疟原虫线性范围为5.8-8010 Parasite/μL,最低灵敏度达到5.8 Parasite/μL,单个样品检测时间只需15 min。加标回收实验显示,试纸条批内回收率为93.0%-111.8%,批间回收率为98.3%-115.1%,且批内、批间的相对标准偏差均小于5%。 展开更多
关键词 量子点荧光微球 免疫层析试纸条 恶性疟原虫 定量检测
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荧光微球时间分辨免疫层析技术定量检测甲胎蛋白的研究 被引量：18
7
作者 郭明明 周衍 +4 位作者 周剑波 俞静文 陈燕 范俊 黄飚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期897-901,共5页
目的建立荧光微球时间分辨免疫层析技术检测血清中甲胎蛋白（AFP）的反应体系并对该法进行评价。方法以包裹有Eu螯合物的荧光微球作为标记物,共价偶联抗AFP的单克隆抗体AC18#,将抗AFP单克隆抗体AC17#和羊抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜上... 目的建立荧光微球时间分辨免疫层析技术检测血清中甲胎蛋白（AFP）的反应体系并对该法进行评价。方法以包裹有Eu螯合物的荧光微球作为标记物,共价偶联抗AFP的单克隆抗体AC18#,将抗AFP单克隆抗体AC17#和羊抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,制作免疫层析试纸条。结果标准曲线经Log-Log B函数处理,检测AFP的线性范围为0.03~1 000 U/ml,批内和批间变异系数（CV）分别为5.35%和8.94%,平均回收率为98.45%。该法检测100例健康人员的AFP水平为（2.04±1.92）U/ml,正常参考值为5.80 U/ml,与时间分辨免疫分析法（TRFIA）检测AFP有较好的相关性,r=0.978（P〈0.05）。结论本研究建立的荧光微球时间分辨免疫层析具有快速、灵敏、简便、经济、可单人份操作等优点,为检测AFP提供了一种高效的新途径,符合我国国情,便于临床推广。 展开更多
关键词 荧光微球 时间分辨 免疫层析 甲胎蛋白
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大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制 被引量：14
8
作者 解泉源 赖卫华 +6 位作者 刘春梅 孙吉昌 邓省亮 刘成伟 魏华 游兴勇 熊勇华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期353-357,共5页
目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双... 目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条。结果:通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液,抗体偶联微球量为100μg/mg,试纸条可在加样5min后判读结果。制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157:H7进行检测,肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL,借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL。试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外,与实验室保存的30株细菌无交叉反应。结论:大肠杆菌O157:H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点,为该菌的检测提供了一种新型的手段。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 H7 荧光微球 免疫层析法 试纸条
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农产品中黄曲霉毒素的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术研究 被引量：30
9
作者 张兆威 李培武 +1 位作者 张奇 丁小霞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第18期3668-3674,共7页
【目的】黄曲霉毒素严重污染农产品,威胁人畜生命健康,是政府重视、社会关注的一大焦点问题,因此亟需研究建立黄曲霉毒素高灵敏高快速检测方法。目前已研制出高特异性高灵敏度黄曲霉毒素单克隆抗体,本研究旨在应用该抗体,建立黄曲霉毒... 【目的】黄曲霉毒素严重污染农产品,威胁人畜生命健康,是政府重视、社会关注的一大焦点问题,因此亟需研究建立黄曲霉毒素高灵敏高快速检测方法。目前已研制出高特异性高灵敏度黄曲霉毒素单克隆抗体,本研究旨在应用该抗体,建立黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析快速检测技术,为农产品质量监管、风险评估提供技术支持。【方法】本研究通过将黄曲霉毒素抗体与乳胶铕进行偶联标记,利用自主研制的黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条进行黄曲霉毒素检测,通过检测线T信号值与质控线C信号值的比值和标准溶液浓度的自然对数值实现定量。针对花生、稻米、植物油等不同农产品,研究建立样品粉碎均质提取一体化技术。对铕标记时间分辨荧光免疫层析检测技术进行方法学考核,以花生、稻米、植物油等为例,进行实际样品检测,并与HPLC法进行结果比对。【结果】在花生、稻米、植物油等农产品实际样品检测中,本研究建立的时间分辨荧光免疫层析检测技术检测黄曲霉毒素B1得到检测限均为0.3μg·kg-1,线性范围分别为0.8—25、0.8—15和0.8—30μg·kg-1。上述3种农产品对应的标准曲线的线性方程分别为y=0.238x+0.654(R2=0.992)、y=0.321x+0.811(R2=0.990)和y=0.146x+0.173(R 2=0.993),标准偏差分别为0.024、0.039和0.021。该方法的批内准确度和精密度添加回收试验结果表明,添加回收率在81.0%—113.0%,变异系数在7.2%—14.2%;批间准确度和精密度试验结果显示,添加回收率在75.8%—114.9%,变异系数在7.7%—15.3%。说明该检测技术批内、批间均具有良好的准确度和精密度。该方法与HPLC法检测结果相比,相对误差小于10%,说明黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析技术与行业标准方法检测结果具有良好的一致性。【结论】时间分辨荧光免疫层析检测技术灵敏度高、线性范围宽,重复性和稳定性好,是一种适合中国国情的实用快速检测技术,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 时间分辨荧光免疫层析 农产品 快速检测
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赭曲霉毒素A时间分辨荧光侧流层析试纸条的研究 被引量：1
10
作者 白福军 郑梦瑶 +7 位作者 陈晋莹 赵皖 丁丽 谈婷 肖理文 叶金 王松雪 刘洪美 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第12期4021-4027,共7页
目的构建一种基于时间分辨荧光纳米微球的赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)侧流层析试纸条。方法基于免疫层析原理,以时间分辨荧光纳米微球为信号探针,降低非特异性荧光的干扰,提高检测灵敏度,并通过优化样品提取液和样品稀释液,进一步提... 目的构建一种基于时间分辨荧光纳米微球的赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)侧流层析试纸条。方法基于免疫层析原理,以时间分辨荧光纳米微球为信号探针,降低非特异性荧光的干扰,提高检测灵敏度,并通过优化样品提取液和样品稀释液,进一步提高现场检测OTA的灵敏度和准确性。结果OTA在1.0~50.0μg/kg范围内,T线和C线荧光强度比值与OTA浓度的对数线性关系良好,相关系数r 2为0.9981~0.9998。不同基质中OTA的检出限和定量限分别为0.401~0.614μg/kg和0.973~1.617μg/kg,加标回收率为89.53%~118.37%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)小于12%(n=3),且与将呕吐毒素、伏马菌素B1、黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的交叉反应率均小于5%,特异性良好。OTA侧流层析试纸条基于荧光定量快速检测技术平台可在8 min内快速准确地定量测定出待测样本中OTA含量。结论本研究所制备的时间分辨荧光侧流层析试纸条可实现玉米、小麦和饲料中OTA的快速定量检测,并具有成本低、灵敏度高、操作简便、准确高、重复性好、特异性好的优点,可满足国内外OTA检测的技术要求,为真菌毒素的快检技术的发展提供了技术支撑。 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A 时间分辨荧光纳米微球 荧光定量免疫层析 快速定量检测
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猪流行性腹泻病毒时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立 被引量：8
11
作者 王华俊 赵雪丽 +5 位作者 闫若潜 谢彩华 刘光辉 马震原 王淑娟 房大学 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期40-45,共6页
为建立一种快速、定量检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)时间分辨荧光免疫层析检测方法(TRFIA),本研究采用杂交瘤技术制备了抗PEDV N蛋白特异性单克隆抗体(MAb)5E6和1B7,将MAb 5E6与荧光微球偶联包被结合垫,将MAb 1B7和兔抗鼠IgG抗体分别包被... 为建立一种快速、定量检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)时间分辨荧光免疫层析检测方法(TRFIA),本研究采用杂交瘤技术制备了抗PEDV N蛋白特异性单克隆抗体(MAb)5E6和1B7,将MAb 5E6与荧光微球偶联包被结合垫,将MAb 1B7和兔抗鼠IgG抗体分别包被硝酸纤维素膜作为检测线和质控线制备PEDV荧光微球免疫层析试纸条。优化了标记MAb 5E6、包被MAb 1B7的反应条件,并对其性能进行评价。结果显示,10μL 1%浓度的荧光微球标记MAb 5E6的量为18μg,MAb 1B7的包被浓度为1.2 mg/mL,最佳检测时间为点样后15 min;该方法与CSFV、PRRSV、TGEV、PDCoV及PRV Batha-K61株等均无交叉反应,特异性强;对PEDV的检测下限为389699.7 TCID50/0.1 mL,敏感性较高;对PEDV检测的线性范围为24940778.9 TCID50/0.1 mL~389699.7 TCID50/0.1 mL,线性范围较宽;批内和批间变异系数分别为8.76%、10.53%,重复性较好;试纸条在4℃和室温至少保存8个月,37℃则可保存10d,稳定性较好。该TRFIA试纸条与PEDV荧光定量PCR(FQ-PCR)平行检测160份疑似发病猪肛门拭子或小肠内容物样品。结果显示,该试纸条检测出76份阳性样品,84份阴性样品;FQ-PCR法检测出81份阳性样品,79份阴性样品,二者的总符合率为90.63%;经SPSS 22统计软件分析结果显示,K值为0.813,二者检测结果的一致性较高。本研究建立了一种简单、快速、灵敏和特异的基于MAb的TRFIA,为PEDV的现场检测提供了一种新方法。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 荧光微球免疫层析 单克隆抗体 试纸条
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基于免疫层析技术的时间分辨荧光免疫分析仪研究 被引量：23
12
作者 任冰强 黄立华 黄惠杰 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1330-1335,共6页
基于时间分辨荧光免疫分析和免疫层析技术的原理,研制了一种新型的时间分辨荧光免疫分析仪。与现有的时间分辨荧光分析仪不同,它所检测的是以Eu3+离子及其螯合物为标记物的免疫层析试纸条。通过测量免疫反应后试纸条检测带上Eu3+螯合物... 基于时间分辨荧光免疫分析和免疫层析技术的原理,研制了一种新型的时间分辨荧光免疫分析仪。与现有的时间分辨荧光分析仪不同,它所检测的是以Eu3+离子及其螯合物为标记物的免疫层析试纸条。通过测量免疫反应后试纸条检测带上Eu3+螯合物的含量,参照标准浓度曲线就可以定量得到待测样品溶液的浓度。实验表明,仪器的最低检测浓度可达到ng/mL量级,测量的相对标准偏差小于3%,在5～103ng/mL浓度范围内具有良好的线性响应特性,相关系数R2=0.9997。 展开更多
关键词 传感器技术 标记免疫学 时间分辨荧光免疫分析仪 免疫层析技术
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3种β_2-受体激动剂荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究 被引量：9
13
作者 李丹妮 黄华 +2 位作者 张婧 王学生 顾依雯 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第8期2437-2442,共6页
本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)、莱克多巴胺(ractopamine,RAC)和沙丁胺醇(salbutamol,SAL)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,并对该试纸条的检测范围、检测限、准确度、精确度、假阳性、假阴性及其与仪器方法的符... 本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)、莱克多巴胺(ractopamine,RAC)和沙丁胺醇(salbutamol,SAL)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,并对该试纸条的检测范围、检测限、准确度、精确度、假阳性、假阴性及其与仪器方法的符合率进行评价。结果显示,克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条标准曲线范围分别为0~3.2、0~6.4、0~8.0μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条检测下限分别可达0.2、0.4和0.5μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇与其他8种同类药物交叉反应均成阴性,特异性良好;各批添加回收率在60%~120%之间,准确度达到要求;不同克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇浓度下变异系数(CV)均小于15%,符合精密度标准;猪尿中假阳性率和假阴性率均为0;此外与仪器方法的符合率为100%。试纸条适用于猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺残留快速检测,具有灵敏度高、稳定性好和特异性强的特点。 展开更多
关键词 克伦特罗 莱克多巴胺 沙丁胺醇 荧光免疫层析法 试纸条 快速检测
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克伦特罗荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究 被引量：10
14
作者 李静宇 何小维 +2 位作者 刘晓云 李文美 邓建超 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第10期2606-2611,共6页
本研究旨在制备性能优异的克伦特罗（clenbuterol,CLB）荧光免疫层析快速定量检测试纸条,为实现其产业化应用奠定基础。采用荧光胶乳微粒为标记物,以抗原包被浓度、膜干燥时间、混匀反应时间、反应温度及层析时间为单因素优化制备了CLB... 本研究旨在制备性能优异的克伦特罗（clenbuterol,CLB）荧光免疫层析快速定量检测试纸条,为实现其产业化应用奠定基础。采用荧光胶乳微粒为标记物,以抗原包被浓度、膜干燥时间、混匀反应时间、反应温度及层析时间为单因素优化制备了CLB荧光免疫层析试纸条,并对该试纸条的检测限、特异性、临床准确度及添加回收率、精密度和稳定性进行了评价。最佳制备条件：抗原包被浓度2.0mg/mL,膜干燥时间5d,混匀反应时间1min,反应温度25℃,层析时间15min。评价结果显示,试纸条检测限可达0.35μg/L;CLB与其他8种同类药物交叉反应率均小于0.8%,特异性良好;各批添加回收率在80%-120%之间,准确度达到要求;不同CLB浓度下变异系数（CV）均小于5%,符合精密度标准;此外,稳定性试验验证了该试纸条稳定性良好。 展开更多
关键词 克伦特罗 荧光免疫层析法 试纸条 快速检测
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时间分辨荧光微球免疫层析技术定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ的实验研究 被引量：3
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作者 周衍 范俊 +4 位作者 蒋叶华 张珏 张艺 傅利新 黄飚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第18期1803-1807,共5页
目的研制快速定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogensⅠ,PGⅠ)试纸,并评价试纸性能。方法以包裹有时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析试纸技术,研制PGⅠ检测试纸;考察试纸的检测线性、灵敏度、精密度、与对比试剂的符... 目的研制快速定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogensⅠ,PGⅠ)试纸,并评价试纸性能。方法以包裹有时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析试纸技术,研制PGⅠ检测试纸;考察试纸的检测线性、灵敏度、精密度、与对比试剂的符合率。结果试纸定量检测的线性良好,方程为Y=0.027 9+0.004 8X,r=0.997 8;灵敏度为0.27μg/L;批内CV小于10%,批间CV11.03%;与市售PGⅠ试剂平行检测489份血清样本,有良好的相关性(YTRFIA=0.856 6Xstrip+7.545 6,R2=0.989 1,P<0.01)。结论 PGⅠ时间分辨荧光纳米微球免疫层析试纸操作简单、快速、经济、可定量,满足临床检测血清PGⅠ的需求。 展开更多
关键词 胃蛋白酶原Ⅰ 时间分辨荧光纳米微球 免疫层析
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牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立 被引量：6
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作者 张正英 崔乃元 +4 位作者 高海燕 刘海珍 黄文颖 郝云晴 马立才 《肉类研究》 北大核心 2020年第8期57-62,共6页
为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T... 为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T)和质控线(C),制备免疫层析试纸条;利用牦牛肉样本阿维菌素添加量和对应的T线与C线荧光信号峰值比值(T/C)拟合得到四参数标准曲线,建立牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法,并对所建立方法的灵敏度、准确度、特异性、精密度和稳定性等进行评价,用液相色谱-串联质谱方法对所建立方法的性能进行确证。结果表明:本方法对牦牛肉中阿维菌素的定量限为1.0μg/kg,加标回收率为86.9%~105.2%,与阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素及依普菌素的交叉反应率分别为100.0%、73.1%、42.6%和97.5%,批内变异系数为5.4%~9.5%,批间变异系数为7.5%~11.2%,该方法准确度、精密度、灵敏度均较高,且性能稳定。 展开更多
关键词 牦牛肉 阿维菌素 时间分辨荧光免疫层析
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S100B时间分辨荧光免疫检测试剂盒的制备及性能评价 被引量：2
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作者 冯东青 徐部灼 +6 位作者 罗树红 吴峪楠 张卓 唐浩 翁一鸣 黄若磐 宋旭东 《医疗卫生装备》 CAS 2024年第1期47-55,共9页
目的:制备一种快捷、准确、定量检测血清中S100B蛋白浓度的时间分辨荧光免疫检测试剂盒,并对其进行性能评价。方法:使用时间分辨荧光微球标记的抗S100B多克隆抗体及兔IgG抗体、标记垫、样品垫、S100B硝酸纤维素膜板、吸水纸制备试纸条,... 目的:制备一种快捷、准确、定量检测血清中S100B蛋白浓度的时间分辨荧光免疫检测试剂盒,并对其进行性能评价。方法:使用时间分辨荧光微球标记的抗S100B多克隆抗体及兔IgG抗体、标记垫、样品垫、S100B硝酸纤维素膜板、吸水纸制备试纸条,组装卡壳得到S100B时间分辨荧光免疫层析试剂盒。通过标准曲线、准确度、最低检测限、线性区间、特异度、重复性、稳定性等检测对该试剂盒进行性能评估。采用该试剂盒对某地区199例健康者血清及血浆样本的参考区间进行研究,并采用同步盲法测试该试剂盒与罗氏Elecsys S100检测试剂盒的临床应用性能,评估2种试剂盒对于142例样本检测结果的一致性。结果:该试剂盒所得标准曲线方程为y=(1.13302+1.75224)/[1+(x/1.08220)×(-0.60352)]-1.75224,R2=0.99908,线性范围为[0.05,30]ng/mL。该试剂盒可满足准确度相对偏差在±15%内、最低检测限≤0.05 ng/mL、特异度相对偏差在±15%内、批内差和批间差的变异系数均<15%的产品设计要求。稳定性检测结果标明该试剂盒可在2~30℃条件下有效保存12个月。同时,通过该试剂盒测得血清及血浆样本参考区间均<0.3 ng/mL。临床验证结果表明该试剂盒与罗氏Elecsys S100检测试剂盒的测定结果具有高度一致性(Kappa=0.9061>0.80),符合标准。结论:该试剂盒可快捷、准确、定量检测血清中S100B蛋白浓度,为神经类疾病、自身免疫病性疾病、脑血管疾病等的诊断与治疗提供了参考。 展开更多
关键词 S100B蛋白 时间分辨荧光微球 荧光免疫层析法 定量检测 时间分辨荧光免疫层析法
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禽流感病毒荧光免疫层析检测试纸条的研制 被引量：3
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作者 孙洁 陈兵 +8 位作者 杨春华 吴峰 陈雨 郑晓聪 王津津 陶虹 丁晶 于力 秦智锋 《上海畜牧兽医通讯》 2019年第4期2-7,共6页
禽流感是重要的人兽共患病,建立现场快速灵敏的检测方法是防控其发生和流行的前提和基础。本研究采用不同亚型流感毒株交叉免疫小鼠法来免疫小鼠,通过多个亚型的NP表达蛋白来筛选杂交瘤阳性细胞株,获得分泌针对NP蛋白单克隆抗体的杂交... 禽流感是重要的人兽共患病,建立现场快速灵敏的检测方法是防控其发生和流行的前提和基础。本研究采用不同亚型流感毒株交叉免疫小鼠法来免疫小鼠,通过多个亚型的NP表达蛋白来筛选杂交瘤阳性细胞株,获得分泌针对NP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞4株。通过抗体的两两配对,基于荧光量子点作为免疫层析抗体的标记探针,借助免疫层析试纸条双抗夹心法原理,筛选出了适用于免疫层析的两株单克隆抗体,研制了禽流感病毒(Avian influenza virus, AIV )荧光免疫层析检测试纸条[A lateral-flow immunoassay strip with quantum dots(QDs)against AIV , AIV -QD-LFIA],并对该试纸条进行了特异性、敏感性、可重复性及可靠性分析。试验结果显示:本研究所建立的 AIV -QD-LFIA试纸条检测禽流感标准抗原H5N1-HK的敏感性达到104 EID50 ,检测标准抗原H9N2-HK的灵敏度为102 EID50 ,比商品化的禽流感病毒抗原检测卡灵敏度高100倍,比国家标准实时荧光RT-PCR(rRT-PCR)灵敏度低约100倍;可特异性地检测出H5亚型、H7亚型、H9亚型、H1亚型、H3亚型等A型流感病毒,与 IBV 、 NDV 等常见禽呼吸道传染病病原无交叉反应,且经过了国家流感中心标准样本盘的样品测试,特异性强;同时该法具有良好重复性,连续4周检测20个样品重复结果均为阳性;小规模田间试验显示该法用于禽流感病毒的普查监测结果可靠。可见本研究所建立的 AIV -QD-LFIA试纸条可满足禽流感病毒快速、高灵敏的检测需求,具有广阔的应用空间。 展开更多
关键词 禽流感病毒 荧光免疫层析检测试纸条 检测
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青海牦牛肉中四环素药物残留时间分辨荧光免疫层析测定方法的研究 被引量：5
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作者 张正英 崔乃元 +3 位作者 王云平 张汉青 赵维章 马立才 《兽医导刊》 2021年第15期135-136,共2页
本研究通过用时间分辨荧光定量免疫层析法测定青海牦牛肉中四环素药物残留含量,建立起一种快速、简单、灵敏度高的四环素类药物残留含量快速检测方法。根据北京维德维康公司提供的时间分辨荧光免疫定量分析方法,对青海牦牛肉中四环素类... 本研究通过用时间分辨荧光定量免疫层析法测定青海牦牛肉中四环素药物残留含量,建立起一种快速、简单、灵敏度高的四环素类药物残留含量快速检测方法。根据北京维德维康公司提供的时间分辨荧光免疫定量分析方法,对青海牦牛肉中四环素类药物残留进行测定,并对测定方法的灵敏度、准确度、精密度等进行评价,并将其与LC-MS/MS方法进行对比。本试验方法的定量限为10ug/kg,添加平均回收率80.0~120.0%之间,平均RSD值为11~15%,该方法可在30 min内完成样本的前处理,10 min完成定性定量检测。由此说明,时间分辨荧光免疫层析法操作简便,准确度、灵敏度均较高,可用于基层实验室对牦牛肉中四环素药物残留含量检测,具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 青海牦牛肉 四环素 时间分辨荧光免疫层析
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四环素类药物时间分辨荧光层析检测试纸条的研制
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作者 万宇平 崔海峰 +2 位作者 王兆芹 宋灏 丛倩千 《食品安全导刊》 2019年第1期60-64,共5页
本试验建立了一种检测四环素类药物的时间分辨荧光免疫层析技术,并在动物源性食品中对其检测性能进行了研究。实验结果显示,对猪肉、鸡肉等动物组织样品中四环素类药物的检测限为:四环素30μg/kg、金霉素60μg/kg、土霉素40μg/kg、强... 本试验建立了一种检测四环素类药物的时间分辨荧光免疫层析技术,并在动物源性食品中对其检测性能进行了研究。实验结果显示,对猪肉、鸡肉等动物组织样品中四环素类药物的检测限为:四环素30μg/kg、金霉素60μg/kg、土霉素40μg/kg、强力霉素80μg/kg;对100ppb的磺胺二甲基嘧啶、恩诺沙星、氯霉素等药物无交叉反应,特异性较好;变异系数小于6%,精密度高;试纸条对高、低温不敏感,稳定性强。 展开更多
关键词 四环素类药物 时间分辨荧光免疫层析技术 快速检测
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