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文山高峰牛朊蛋白基因(PRNP)23 bp和12 bp插入/缺失多态性分析研究
1
作者 种玉晴 和晓明 +8 位作者 邓文宝 农胜虎 方云霞 梁昌兴 何祖春 刘萍丹 岳丹 邓卫东 席冬梅 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第4期15-21,共7页
为探讨文山高峰牛朊蛋白基因(prion protein gene,PRNP)启动子区23 bp和第一内含子区12 bp插入/缺失多态性特征,本研究采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和琼脂糖凝胶电泳的方法对文山高峰牛PRNP基因23 bp和12 bp位点... 为探讨文山高峰牛朊蛋白基因(prion protein gene,PRNP)启动子区23 bp和第一内含子区12 bp插入/缺失多态性特征,本研究采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和琼脂糖凝胶电泳的方法对文山高峰牛PRNP基因23 bp和12 bp位点进行基因分型,得出其多态性数据;通过与文献所报道的牛PRNP数据进行比较分析,得出文山高峰牛对疯牛病抗病性的强弱。结果表明:文山牛PRNP基因启动子区23 bp等位基因频率以缺失型为主(0.654);第一内含子区12 bp等位基因频率分别为插入型0.913,缺失型0.087;缺失型单倍型频率极低(0.082);与德国、英国以及瑞士3个国家所报道的患BSE病牛和健康牛相比较存在显著差异(P<0.05),12 bp等位基因插入/缺失频率与水牛不存在显著差异(P>0.05)。由此可见,较高的12 bp插入型等位基因和极低的缺失型单倍(23 bp插入-12 bp缺失)频率,使得文山高峰牛对BSE疾病具有较好抗病力,通过抗病育种分析能够有效预防疯牛病的发生;对中国地方牛种质资源进行相关抗病性评估,有利于为牛的抗病分子选育提供数据支撑。 展开更多
关键词 文山高峰牛 朊蛋白基因(PRNP) 疯牛病(BSE) 多态性
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与朊毒体相关的鱼类朊蛋白研究概况
2
作者 兰邹然 王志亮 张学成 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期115-121,共7页
疯牛病(mad cow disease),即牛传染性海绵状脑病(bovine transmissible spongiform encephalopathy,BSE)的俗称,是一种慢性消耗性、致死性、中枢神经系统退行性疾病。疯牛病被认为与朊毒体(Prion)有关,朊毒体是由正常朊蛋白(Prion prote... 疯牛病(mad cow disease),即牛传染性海绵状脑病(bovine transmissible spongiform encephalopathy,BSE)的俗称,是一种慢性消耗性、致死性、中枢神经系统退行性疾病。疯牛病被认为与朊毒体(Prion)有关,朊毒体是由正常朊蛋白(Prion protein,或者PrPC)发生构象改变后形成的异常蛋白(PrPSc)。疯牛病的发生引起了世界各国政府和科学界的高度重视,PrP的起源及其功能研究已成为研究热点。鱼类PrP相关蛋白的研究正在展开中,由于鱼类PrP相关蛋白与朊蛋白的结构相似,鱼类感染TSE类似病存在理论上的风险。本文全面地综述了疯牛病的概况、朊毒体的特性、朊毒体与哺乳动物朊蛋白、鱼类PrP相关蛋白(PrP1、PrP2和PrP3)及鱼类其他PrP相关蛋白的研究情况,为国内水生动物PrP相关蛋白研究提供参考。 展开更多
关键词 鱼类 朊毒体 细胞朊蛋白 痒病朊蛋白 朊蛋白1 朊蛋白2 朊蛋白3
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朊蛋白基因家族及其在传染性海绵样脑病(TSEs)中的作用 被引量：2
3
作者 彭坤 张少丽 +2 位作者 魏振宇 李洁 蓝贤勇 《家畜生态学报》 北大核心 2018年第9期77-82,共6页
朊蛋白基因家族包括4个基因:PRNP(PrP的编码基因),PRND(Doppel的编码基因),PRNT(Prt的编码基因)和SPRN(Shadoo的编码基因)。其中,PRNP,PRND和PRNT3个基因位于同一个55kb的区域内(PRNP-20kb-PRND-3kb-PRNT),而SPRN基因位于另一条染色体... 朊蛋白基因家族包括4个基因:PRNP(PrP的编码基因),PRND(Doppel的编码基因),PRNT(Prt的编码基因)和SPRN(Shadoo的编码基因)。其中,PRNP,PRND和PRNT3个基因位于同一个55kb的区域内(PRNP-20kb-PRND-3kb-PRNT),而SPRN基因位于另一条染色体上。这4个基因被称为"朊蛋白基因复合体"(Prion gene complex),在不同种属之间相当保守。传染性海绵样脑病(TSEs)的发生不仅受到PRNP基因的调控,朊蛋白基因家族的其它3个基因在定位、结构、表达及其编码产物上与PRNP基因存在很多相似性,提示其它3个基因很可能作为TSEs研究的候选基因。文章从朊蛋白基因家族的结构特征、编码产物的结构及其相互关系、朊蛋白基因家族在TSEs中发挥的作用等三方面进行综述,以期为研究TSEs致病机制提供新的思路。 展开更多
关键词 朊蛋白基因复合体 朊蛋白基因 叠朊蛋白基因 睾丸特异性基因 类朊蛋白基因 传染性海绵样脑病
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三种哺乳动物朊蛋白基因的克隆与分析 被引量：5
4
作者 张杰 刘永生 +4 位作者 陈豪泰 姜海霞 路伟 朱小玲 谢庆阁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期193-198,共6页
以外周血液的总DNA为模板,运用PCR方法克隆了汉族人、秦川黄牛和甘肃土种绵羊的Prnp基因,运用分子生物学软件对这些序列进行了分析比较。结果表明,获得的3种哺乳动物的Prnp基因均位于1个单一的外显子内,与GenBank中登录的相应序列具有... 以外周血液的总DNA为模板,运用PCR方法克隆了汉族人、秦川黄牛和甘肃土种绵羊的Prnp基因,运用分子生物学软件对这些序列进行了分析比较。结果表明,获得的3种哺乳动物的Prnp基因均位于1个单一的外显子内,与GenBank中登录的相应序列具有高度同源性,达99.0%。牛与绵羊Prnp基因同源性为97.3%,推导氨基酸序列同源性为96.5%。人Prnp基因与黄牛和绵羊Prnp基因的同源性分别为86.7%和87.1%,其氨基酸序列的同源性均为90.0%。3种Prnp基因均有富含G-C的重复区,编码的PrP蛋白均由氨基端的信号肽、中间的成熟蛋白和羧基端的GPⅠ锚结合位点组成。基因型分析表明,秦川黄牛和甘肃土种绵羊可能存在感染海绵状脑病的风险。 展开更多
关键词 海绵状脑病 朊蛋白基因 朊病毒 细胞型朊蛋白 秦川牛 绵羊 人
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梅花鹿朊蛋白基因(PRNP)的克隆及序列分析 被引量：2
5
作者 孟丽平 赵德明 +2 位作者 杨建民 徐广贤 马李颖 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期637-638,641,共3页
根据GenBank中鹿朊蛋白基因序列设计特异性扩增引物,采用PCR方法从中国梅花鹿基因组中扩增得到梅花鹿的朊蛋白基因,采用PCR产物直接测序,并将其克隆到pGEM-TEasy载体中测序进行进一步确认,通过分析表明所克隆的梅花鹿朊蛋白基因的ORF基... 根据GenBank中鹿朊蛋白基因序列设计特异性扩增引物,采用PCR方法从中国梅花鹿基因组中扩增得到梅花鹿的朊蛋白基因,采用PCR产物直接测序,并将其克隆到pGEM-TEasy载体中测序进行进一步确认,通过分析表明所克隆的梅花鹿朊蛋白基因的ORF基因片段包含771bp,编码256个氨基酸的前体蛋白,相对分子质量约为28200。与已报道的其他品种鹿朊蛋白基因序列进行对比分析,核苷酸及氨基酸序列的同源性均在98%以上。本试验为进一步研究中国梅花鹿朊蛋白的多态性提供了数据。 展开更多
关键词 梅花鹿 朊蛋白 朊蛋白基因 序列分析
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朊蛋白的细胞生物学研究 被引量：4
6
作者 张东威 南善姬 赵节绪 《生命科学》 CSCD 2004年第2期96-100,共5页
朊蛋白病是人和牛羊等哺乳动物所患的致命性的神经系统变性疾病,它是由机体内正常的朊蛋白改变构象后所引起的疾病。本综述对朊蛋白在细胞生物学领域的认知和理解进行了归纳总结,阐述了正常和异常朊蛋白的翻译、表达、定位、裂解、转化... 朊蛋白病是人和牛羊等哺乳动物所患的致命性的神经系统变性疾病,它是由机体内正常的朊蛋白改变构象后所引起的疾病。本综述对朊蛋白在细胞生物学领域的认知和理解进行了归纳总结,阐述了正常和异常朊蛋白的翻译、表达、定位、裂解、转化等一系列过程,是对疾病本质的有益探索。 展开更多
关键词 朊蛋白 细胞生物学 朊蛋白病
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处理重组牛朊蛋白对接种金黄地鼠脑组织朊蛋白的效应 被引量：1
7
作者 宁章勇 赵德明 +4 位作者 杨建民 周向梅 于博 孔小明 尹晓敏 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2006年第12期21-23,共3页
将纯化的重组牛朊蛋白经理化因子处理后,脑内接种金黄地鼠。临床观察200天后,对大脑、小脑和脑干,进行蛋白酶抗性朊蛋白的WesternBlot检测和朊蛋白基因表达绝对定量。结果表明,处理的重组牛朊蛋白对金黄地鼠脑组织检测部位的基因表达有... 将纯化的重组牛朊蛋白经理化因子处理后,脑内接种金黄地鼠。临床观察200天后,对大脑、小脑和脑干,进行蛋白酶抗性朊蛋白的WesternBlot检测和朊蛋白基因表达绝对定量。结果表明,处理的重组牛朊蛋白对金黄地鼠脑组织检测部位的基因表达有特定的影响;接种后在检测时间内处理重组牛朊蛋白没有导致金黄地鼠脑内酶抗性朊蛋白的出现。研究结果为重组朊蛋白的生物学提供了基础数据。 展开更多
关键词 牛朊蛋白 金黄地鼠 脑 基因表达 酶抗性朊蛋白
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朊蛋白在神经系统作用机制研究进展 被引量：4
8
作者 孙文珊 徐运 《国际神经病学神经外科学杂志》 2021年第1期86-89,共4页
细胞型朊蛋白(PrP~C)作为一种跨膜糖蛋白在哺乳动物中广泛存在。基因敲除的研究显示PrP~C在神经系统的活动中的关键作用包括周围神经髓鞘的形成以及对神经毒素刺激的保护。PrP~C在不同的细胞类型中也有不同的生物学作用。如PrP~C模块化... 细胞型朊蛋白(PrP~C)作为一种跨膜糖蛋白在哺乳动物中广泛存在。基因敲除的研究显示PrP~C在神经系统的活动中的关键作用包括周围神经髓鞘的形成以及对神经毒素刺激的保护。PrP~C在不同的细胞类型中也有不同的生物学作用。如PrP~C模块化结构、多种结合伴侣以及与脂质筏的密切关联的特性,使其具有组装多组分复合物的能力,从而触发不同的信号通路,调节细胞分化。PrP~C在大脑中参与的病理性作用仍然没有一致的定论,其错误折叠产生的异构体PrP~(SC)是朊病毒疾病的主要致病因素。但有证据指出PrP~C在朊病毒疾病中发挥的致病作用独立于羊瘙痒病朊蛋白亚型(PrP~(SC)),在朊病毒感染过程中,朊病毒疾病的临床和神经病理症状与大脑中PrP~C而不是PrP~(SC)的表达水平成正比。另外,PrP~C可能还是一种与神经退行性病变相关的蛋白,参与β淀粉样蛋白(Aβ)等聚集性蛋白的神经毒素信号转导,还充当α-突触核蛋白的细胞受体,促进其在细胞吸收以及大脑中传播。虽然朊病毒的研究已经取得很大的进展,但PrP~C在大脑中的作用仍然没有明确,因此探索PrP~C在细胞中作用具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 神经退行性疾病 朊蛋白 细胞型朊蛋白 羊瘙痒病朊蛋白亚型
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朊蛋白病 被引量：1
9
作者 李晓红 迟兆富 《国际神经病学神经外科学杂志》 2005年第5期455-458,共4页
人类朊蛋白病(PrDs)是一类既表现为神经退行性病变又具有感染性的少见疾病,虽然发病率较低,但是近年来由于对疯牛病及其它可感染人类的动物源性PrDs危险性的高度重视,人类PrDs受到了广泛的关注。本文综述了PrDs临床和病理的主要表现及... 人类朊蛋白病(PrDs)是一类既表现为神经退行性病变又具有感染性的少见疾病,虽然发病率较低,但是近年来由于对疯牛病及其它可感染人类的动物源性PrDs危险性的高度重视,人类PrDs受到了广泛的关注。本文综述了PrDs临床和病理的主要表现及目前的诊断方法,同时提及一些帮助人们认识这类疾病相关的发病机制和朊蛋白(PrP)可感染性的重要特征。 展开更多
关键词 朊蛋白病 朊蛋白 感染 痴呆 神经变性疾病 神经退行性病变 感染人类 少见疾病 动物源性 诊断方法
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朊蛋白及朊蛋白疾病
10
作者 刘雯 左伋 《中国优生与遗传杂志》 1997年第6期1-3,共3页
关键词 朊蛋白 朊蛋白疾病 蛋白质因子
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朊蛋白在物种内、物种间的致病机理
11
作者 潘传英 于姣 +1 位作者 蓝贤勇 陈宏 《黄牛杂志》 2005年第5期19-22,共4页
朊蛋白(prion)是传染性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathy，TSE)的唯一致病因子。在细胞内存在两种形式的朊蛋白，即正常形式PrP^c和致病形式PrP^(sc)(PrP^(res))。PrP^(sc)的出现是TSE发生的关键因素。本文阐述了朊... 朊蛋白(prion)是传染性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathy，TSE)的唯一致病因子。在细胞内存在两种形式的朊蛋白，即正常形式PrP^c和致病形式PrP^(sc)(PrP^(res))。PrP^(sc)的出现是TSE发生的关键因素。本文阐述了朊蛋白的发现与意义及其在物种内、物种间的致病机理。 展开更多
关键词 朊蛋白 朊蛋白基因 TSE
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马麝朊蛋白基因的克隆与原核表达 被引量：1
12
作者 王辉太 吴润 +2 位作者 张小丽 姜中毅 陈豪泰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1074-1079,共6页
为了解马麝朊蛋白基因的结构特征和其细胞型朊蛋白的性质,应用分子克隆和DNA重组技术进行了马麝朊蛋白基因的克隆、序列分析及其原核表达。序列分析表明,马麝朊蛋白基因编码区是包含在单一外显子内的完整开放阅读框,全长为771 bp,与马... 为了解马麝朊蛋白基因的结构特征和其细胞型朊蛋白的性质,应用分子克隆和DNA重组技术进行了马麝朊蛋白基因的克隆、序列分析及其原核表达。序列分析表明,马麝朊蛋白基因编码区是包含在单一外显子内的完整开放阅读框,全长为771 bp,与马鹿、白尾鹿以及乳牛和绵羊朊蛋白基因相比,核苷酸序列和推导氨基酸序列的同源性分别为97.3%-98.1%和97.7%-98.8%,说明朊蛋白基因在同科和不同科的反刍动物间是保守的 成功构建了马麝重组朊蛋白（85-233 aa）原核表达载体pGEX-MuPrP（85-233）,并转化E.coliBL21（DE3）,获得重组表达菌E.coliGST-MuPrP（85-233）,该重组菌可产生预期大小约为42.4ku的融合蛋白GST-MuPrP（85-233）,在优化表达条件下,可产生占细菌总蛋白量30%以上的融合蛋白,免疫印迹检测显示表达蛋白可与抗牛单克隆抗体4C11反应,表明该基因的各氨基酸突变并未影响其单抗4C11的识别表位。 展开更多
关键词 马麝 朊蛋白基因 克隆 重组朊蛋白 原核表达
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小麦谷朊蛋白的特性与应用研究综述 被引量：23
13
作者 邓敏 付时雨 詹怀宇 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期146-152,共7页
小麦谷朊蛋白(面筋蛋白)是从小麦淀粉中提取出来的天然蛋白,是植物代谢产生的天然植物蛋白,一种生物可降解、可再生的天然高分子。因其独特的黏弹性、延伸性、吸水性、吸脂乳化性、薄膜成型性和热凝固性等,越来越受到人们的重视。不仅... 小麦谷朊蛋白(面筋蛋白)是从小麦淀粉中提取出来的天然蛋白,是植物代谢产生的天然植物蛋白,一种生物可降解、可再生的天然高分子。因其独特的黏弹性、延伸性、吸水性、吸脂乳化性、薄膜成型性和热凝固性等,越来越受到人们的重视。不仅作为添加剂在食品工业中广泛应用,还可作为价格适宜、性能优良的高分子材料应用于其他领域。较全面地对有关谷朊蛋白的组成,以及近年来国内外谷朊蛋白在食品工业、化工、材料等领域内的研究现状进行了综述。 展开更多
关键词 小麦谷朊蛋白 综合利用 食品工业 化学工业 材料
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牛朊蛋白(bPrP^C)基因的克隆和序列分析 被引量：7
14
作者 吴润 谢庆阁 +1 位作者 刘湘涛 陈豪泰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期318-323,共6页
分别从9头牛(3头牦牛、3头荷斯坦牛和3头秦川黄牛)全血中提取基因组总DNA,用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPC)基因,并克隆到pMD18-T载体。序列分析表明所克隆的牛PrPC的片段大小为795bp,包含了牛朊蛋白基因的完整编... 分别从9头牛(3头牦牛、3头荷斯坦牛和3头秦川黄牛)全血中提取基因组总DNA,用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPC)基因,并克隆到pMD18-T载体。序列分析表明所克隆的牛PrPC的片段大小为795bp,包含了牛朊蛋白基因的完整编码区序列,为含单一外显子的完整开放阅读框,与国内外报道的已知序列基本相同。本次所报道的牛PrP(bPrPC)基因含6个短而富含G-C的元件,可编码八肽Pro-His-Gly-Gly-Gly-Trp-Gly-Gln/Arg或九肽Pro-Gln/His-Gly-Gly-Gly-Gly-Trp/Arg-Gly-Gln。这些bPrPC基因序列相比较,其核苷酸和氨基酸同源性分别在99.0%～100.0%和99.2%～100.0%之间。在整个18个碱基替换中,多数替换是保守的,为同义突变,仅有5个替换引起氨基酸突变,分别为HN200302的W60R、HN200303的S154N、MN200301的A129V、NN200302的Q234R和NN200303的Q94R突变。发现牦牛朊粒基因在126(A→G)、234(G→A)和678(T→C)位的特征性核苷酸替换,但均为同义码替换。 展开更多
关键词 牛 朊蛋白 基因克隆 序列分析 神经变性疾病 疯牛病 朊病毒
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朊蛋白在结肠癌中高表达及意义 被引量：7
15
作者 郑彦涛 黄宗海 +2 位作者 罗宇维 何懿 刘斌 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1132-1134,共3页
目的检测朊蛋白(PrPC)在正常结肠及结肠癌组织中的表达情况,并分析其在结肠癌组织表达水平与患者临床参数的相关性。方法应用免疫组织化学方法检测PrPC在59例结肠癌及29例正常结肠组织中表达差异,并分析其在结肠癌组织中表达强度与性别... 目的检测朊蛋白(PrPC)在正常结肠及结肠癌组织中的表达情况,并分析其在结肠癌组织表达水平与患者临床参数的相关性。方法应用免疫组织化学方法检测PrPC在59例结肠癌及29例正常结肠组织中表达差异,并分析其在结肠癌组织中表达强度与性别、分化及Dukes分期等临床病理资料之间的关系。结果 PrPC在结肠癌组织中表达率为84.7%(50/59),明显高于正常结肠组织的27.6%(8/29)(P<0.05),其在男性患者及女性患者表达率分别为84.4%(27/32)及85.2%(23/27)(P>0.05);在高、中、低分化癌组织的表达率分别为70.0%(14/20)、90.0%(18/20)及94.7%(18/19)(P<0.05);在Dukes分期A+B及C+D期癌组织表达率分别为78.1%(25/32)及92.6%(25/27)(P<0.05)。结论 PrPC在结肠癌中高表达与其发生发展、分化及Dukes分期密切相关,有望作为早期诊断及靶向治疗的分子标记。 展开更多
关键词 朊蛋白 结肠癌 免疫组化 DUKES分期
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2例致死性家族性失眠症的临床特点、脑影像和朊蛋白基因分析 被引量：7
16
作者 周珏倩 王倩 +9 位作者 李洵桦 高玉娟 陈定邦 方子妍 郭汝宁 黎艾 陈操 周伟 董小平 曾进胜 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期413-417,共5页
目的探讨致死性家族性失眠症(fatal familial insomnia,FFI)的临床和生物学特征。方法总结2例FFI患者的临床表现、治疗与转归特点,并追踪至死亡;对患者进行了较详细的生物学检查,包括生化、电生理、头颅MRI和PET-CT检查及朊蛋白(Prion P... 目的探讨致死性家族性失眠症(fatal familial insomnia,FFI)的临床和生物学特征。方法总结2例FFI患者的临床表现、治疗与转归特点,并追踪至死亡;对患者进行了较详细的生物学检查,包括生化、电生理、头颅MRI和PET-CT检查及朊蛋白(Prion Protein,PrP)基因测序。结果 2例FFI患者的共性:阳性家族史,临床主要表现睡眠紊乱伴精神、行为异常;影像检查示全脑轻度萎缩(额叶略明显),对称性顶、额叶及丘脑葡萄糖代谢降低;PrP基因532位碱基G突变为A和129MM纯合子变异。例1病情进展相对缓慢,死亡时总病程3年余,以运动系统损害突出,脑脊液14-3-3蛋白阴性;例2的病情进展迅速,死亡时总病程仅半年,以内分泌功能障碍突出,脑脊液14-3-3蛋白阳性,PrP基因173位碱基T-C变异。结论 2例FFI患者临床特点存在差异,可能与PrP基因突变及脑脊液14-3-3蛋白检测结果有关,有待进一步证实。 展开更多
关键词 致死性家族性失眠症 临床表现 朊蛋白 基因突变
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普通菜豆抗炭疽病地方品种的朊蛋白标记分析 被引量：5
17
作者 王坤 王晓鸣 +2 位作者 朱振东 张晓艳 王述民 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期169-174,共6页
普通菜豆在长期驯化过程中形成了安第斯和中美两个基因库,研究基因库来源对于抗病育种中抗病亲本的选配具有重要意义。本研究利用菜豆朊蛋白标记分析了54份抗炭疽病菜豆地方品种的基因库来源,基本上明确了我国抗炭疽病菜豆种质的基因源... 普通菜豆在长期驯化过程中形成了安第斯和中美两个基因库,研究基因库来源对于抗病育种中抗病亲本的选配具有重要意义。本研究利用菜豆朊蛋白标记分析了54份抗炭疽病菜豆地方品种的基因库来源,基本上明确了我国抗炭疽病菜豆种质的基因源,为抗病育种奠定了基础。 展开更多
关键词 普通菜豆 炭疽病 朊蛋白 标记 基因库
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羊朊蛋白基因的克隆和序列分析 被引量：4
18
作者 吴润 谢庆阁 +1 位作者 刘湘涛 陈豪泰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期794-799,共6页
分别从6只羊(3只藏绵羊和3只山羊)全血中提取基因组总DNA,用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPC)基因,并克隆到pMD18-T载体。序列分析表明所克隆的羊PrP基因片段大小为771bp,包含了羊朊蛋白基因的完整编码区序列,为包... 分别从6只羊(3只藏绵羊和3只山羊)全血中提取基因组总DNA,用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPC)基因,并克隆到pMD18-T载体。序列分析表明所克隆的羊PrP基因片段大小为771bp,包含了羊朊蛋白基因的完整编码区序列,为包含在单一外显子内的完整开放阅读框,其与国外报道的已知序列基本相同。所克隆的羊PrP基因含5个短而富含G-C的元件,可编码八肽Pro-His-Gly-Gly-Gly-Trp-Gly-Gln或九肽Pro-Gln/His-Gly-Gly-Gly-Gly-Trp-Gly-Gln。这些PrP基因序列相比较,其核苷酸序列和推导氨基酸序列同源性分别在99.0%~100.0%和98.1%~100.0%之间。共发现17个碱基替换,其中6个为同义码替换、11个为异义突变。异义突变中,除SY200301~SY200303的S240P和MY200301的M112T外,其余均位于PrP氨基酸125~228的C-端球形结构区,分别为MY200301的G129S突变、MY200302的T191R突变、MY200303的G127S突变及SY200302和SY200303的H143R和R211G。6个羊PrP基因均为密码子136、154和171的PrPARQ等位基因。 展开更多
关键词 藏绵羊 山羊 朊蛋白基因 DNA克隆 序列分析
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人朊蛋白基因的克隆与原核表达 被引量：6
19
作者 姜海霞 刘永生 +4 位作者 杨孝朴 陈豪泰 朱小玲 张杰 谢庆阁 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第3期11-15,共5页
以人血液中提取的总DNA为模板,克隆朊蛋白(prion protein,PrP)基因Prnp户的开放阅读框(ORF),与pMD -18T载体连接后转入E．coli JM109,用Blast软件比较重组质粒序列,结果表明获得的人Prnp的ORF与Genbank登录的相应核苷酸序列最高同源性... 以人血液中提取的总DNA为模板,克隆朊蛋白(prion protein,PrP)基因Prnp户的开放阅读框(ORF),与pMD -18T载体连接后转入E．coli JM109,用Blast软件比较重组质粒序列,结果表明获得的人Prnp的ORF与Genbank登录的相应核苷酸序列最高同源性为99．6％,推导的氨基酸序列同源性为99．8％,将编码人成熟PrP的基因定向克隆到 pET-30a(+)表达载体,将重组质粒pET-homPrP转化E．coli BL21(DE3),在37℃下用1．0 mmol／L IPTG诱导,重组融合蛋白获得高效表达,SDS-PAGE显示表达产物以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的20％～25％．用Ni-NTA 树脂亲和层析纯化了表达产物．Western-blotting分析表明,融合蛋白被抗PrP的单克隆抗体特异识别．因此,在大肠杆菌中表达的人成熟PrP融合蛋白可以作为制备PrP抗体的免疫原． 展开更多
关键词 人 朊蛋白基因 克隆 原核表达
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牛羊朊蛋白基因(PRNP)多态性与抗病性的研究进展 被引量：5
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作者 席冬梅 刘情 +3 位作者 于虹漫 杨玉艾 毛华明 邓卫东 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期418-425,共8页
朊蛋白(PRNP)是近年来造成人和部分哺乳动物传染性海绵状脑病(TSE)的主要根源,该基因的多态性显著影响了人和动物对TSE的易感性或抗病性。本文分析了朊蛋白基因及其编码蛋白的结构与功能;简要介绍了绵羊基因编码区突变与致病性的关系;... 朊蛋白(PRNP)是近年来造成人和部分哺乳动物传染性海绵状脑病(TSE)的主要根源,该基因的多态性显著影响了人和动物对TSE的易感性或抗病性。本文分析了朊蛋白基因及其编码蛋白的结构与功能;简要介绍了绵羊基因编码区突变与致病性的关系;系统分析了牛科动物启动子区域内23 bp的插入/缺失、第一内含子区域内12 bp的插入/缺失及其与疯牛病(BSE)抗病性的作用机制;全面总结了全球已经报道的牛科动物12和23 bp插入/缺失的等位基因与单倍体频率,评价了其发病的可能性。该研究将为牛的分子育种提供指导。 展开更多
关键词 朊蛋白基因(PRNP) 插入/缺失多态 疯牛病抗性
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