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蚜虫共生细菌多重PCR检测体系的建立
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作者 李彤 蒋月丽 +4 位作者 连红梅 武予清 苗进 巩中军 段云 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期158-163,共6页
蚜虫中具有多种共生菌,使用常规PCR对它们进行检测,耗时耗力,而多重PCR可以更加高效地进行多种细菌的检测。沃尔巴克氏菌Wolbachia pipientis、杀雄菌属共生菌Arsenophonus和蚜虫U型共生菌Regiella insecticola是蚜虫中常见的3种共生菌... 蚜虫中具有多种共生菌,使用常规PCR对它们进行检测,耗时耗力,而多重PCR可以更加高效地进行多种细菌的检测。沃尔巴克氏菌Wolbachia pipientis、杀雄菌属共生菌Arsenophonus和蚜虫U型共生菌Regiella insecticola是蚜虫中常见的3种共生菌。本研究针对沃尔巴克氏菌、杀雄菌属共生菌和蚜虫U型共生菌,分别选择以wsp基因、yaeT基因和gltA基因作为靶标,进行了多重PCR引物的设计和扩增体系的优化。结果显示,本研究建立的多重PCR体系在检测3种蚜虫常见共生菌时,具有较高的扩增特异性、准确性和直观性及较高的检测灵敏度,共生菌的最低检测浓度为104拷贝/μL,远低于共生菌在蚜虫1龄若虫总DNA中的浓度(108拷贝/μL),可以完全满足蚜虫共生菌检测工作的需要。 展开更多
关键词 沃尔巴克氏菌 杀雄菌属共生菌 蚜虫U型共生菌 多重PCR
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白蜡虫体内杀雄菌属(Arsenophonus)共生菌的分子检测 被引量：10
2
作者 刘魏魏 杨璞 +3 位作者 阮永明 陈晓鸣 徐冬丽 李燕飞 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1002-1010,共9页
【目的】研究白蜡虫体内杀雄菌属(Arsenophonus)共生菌的含量与白蜡虫性比之间的关系。【方法】采用16S rDNA文库的方法对白蜡虫雄虫体内的共生菌进行分析,利用杀雄菌属特异的2条16S rDNA引物以及23S rDNA引物进行PCR检测。对昭通、昆... 【目的】研究白蜡虫体内杀雄菌属(Arsenophonus)共生菌的含量与白蜡虫性比之间的关系。【方法】采用16S rDNA文库的方法对白蜡虫雄虫体内的共生菌进行分析,利用杀雄菌属特异的2条16S rDNA引物以及23S rDNA引物进行PCR检测。对昭通、昆明、金口河、杭州、长春、江华6个不同地理种群白蜡虫体内的杀雄菌属共生菌进行半定量分析,并采用荧光定量PCR对昭通、昆明、金口河白蜡虫体内的杀雄菌属共生菌进行绝对定量分析。【结果】在白蜡虫体内首次发现杀雄菌属共生菌。在白蜡虫雌雄虫体内均扩增出杀雄菌属的两条不同长度的16S rDNA序列,分别为445bp和1462bp,并扩增得到长度为582bp的23S rDNA序列。杭州和江华地理种群白蜡虫的一些个体不含杀雄菌属共生菌。昭通地理群的杀雄菌属共生菌含量显著高于金口河和昆明,而昆明和金口河白蜡虫的杀雄菌属含量无显著差异。【结论】白蜡虫体内杀雄菌属共生菌的含量与白蜡虫性比无关。 展开更多
关键词 白蜡虫 杀雄菌属共生菌 16S RDNA 性比 绝对定量
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