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杨树腐烂病菌表观特征及遗传多样性分析 被引量:2
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作者 张俊娥 范鑫磊 +1 位作者 梁英梅 田呈明 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期76-86,共11页
为探究杨树腐烂病菌的表观特征、遗传多样性以及它们与不同寄主杨树派别和病原菌地理来源的关系,本文收集来自我国14个省份的106份杨树腐烂病标本,纯培养观察记录菌落生长状况,分析菌株培养形态多样性,并从中选取背景信息差异较大的菌... 为探究杨树腐烂病菌的表观特征、遗传多样性以及它们与不同寄主杨树派别和病原菌地理来源的关系,本文收集来自我国14个省份的106份杨树腐烂病标本,纯培养观察记录菌落生长状况,分析菌株培养形态多样性,并从中选取背景信息差异较大的菌株34份,采用SRAP和ISSR两种标记方法分析其遗传多样性。结果显示:杨树腐烂病菌同一菌株在不同条件下的培养性状稳定;不同菌株的培养形态差异明显,且各类别间菌株的培养性状与寄主植物、地理来源没有明显相关性。利用获得多态性良好的12对SRAP引物和20条ISSR引物分析得出群体的Nei's多样性指数为0.31(SRAP)、0.28(ISSR),各菌株间存在较大的遗传差异;并从寄主角度分析其群体遗传结构,得出群体总的遗传多样性为0.27,群体内的遗传多样性为0.23,可以解释总体多样性的87%,遗传分化系数(GST)为0.13,遗传变异主要存在于群体内。从地理角度分析得出,总的群体遗传多样性为0.28,群体内的遗传多样性为0.13,可以解释总体多样性的48%,GST为0.52,来自群体内和群体间的多样性差异相当,而地理群体间的迁移对总体的遗传分化产生了较大的影响,各群体的遗传多样性水平表现为从西到东依次降低的趋势。 展开更多
关键词 杨树腐烂病菌 培养形态 SRAP ISSR 多样性
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杨树腐烂病菌胞外分泌复合体亚基CcExo70的功能 被引量:1
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作者 李雪燕 熊典广 田呈明 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第8期82-93,共12页
【目的】对杨树腐烂病菌金黄壳囊孢胞外分泌复合体亚基CcExo70进行功能分析,探究其在杨树腐烂病菌生长发育及致病过程中的生物学功能,为深入了解杨树腐烂病菌致病机制以及制定病害防控策略提供科学依据。【方法】1)利用PCR技术克隆得到C... 【目的】对杨树腐烂病菌金黄壳囊孢胞外分泌复合体亚基CcExo70进行功能分析,探究其在杨树腐烂病菌生长发育及致病过程中的生物学功能,为深入了解杨树腐烂病菌致病机制以及制定病害防控策略提供科学依据。【方法】1)利用PCR技术克隆得到CcExo70基因的DNA序列;2)通过生物信息软件对其编码的氨基酸序列进行特征分析并构建其同源基因的系统发育树;3)通过PEG介导的遗传转化法得到CcExo70基因的敲除突变体及回补菌株;4)通过PDA平板生长试验和PDB摇培试验,分析敲除CcExo70基因对该病菌生长发育、菌丝形态及H2O2胁迫响应的影响;通过对1年生欧美杨健康枝条烫伤接种的方法,测定CcExo70基因对该病菌致病性的影响;5)利用荧光增白剂(CFW)、二氨基联苯胺(DAB)和FM4-64染剂探究各菌株中几丁质沉积、活性氧积累及内吞作用情况;6)通过蛋白质组测序分析,筛选可能受CcExo70调控分泌的外泌蛋白。【结果】1)在杨树腐烂病菌中克隆得到了一个CcExo70基因,该基因全长1992 bp,包含1个内含子,编码636个氨基酸。2)系统发育和序列比对分析表明,CcExo70与其他病原真菌的同源基因在进化上是高度保守的。3)利用遗传转化法筛选得到2个敲除突变体(ΔCcExo70-8、ΔCcExo70-9),并获得了回补菌株(ΔCcExo70/C)。4)表型分析发现,与野生型和回补菌株相比,CcExo70敲除突变体在菌丝生长、形态发生、氧化应激反应和致病力等方面存在显著的缺陷。5)CFW染色观察显示,野生型和回补菌株菌丝尖端存在明显的几丁质沉积,而敲除突变体菌丝尖端未见明显的几丁质沉积但菌丝隔膜异常增加。此外,共聚焦显微镜观察发现,与野生型和回补菌株相比,CcExo70敲除突变体的内吞作用显著延迟。6)蛋白组测序分析发现,8个候选的外泌蛋白在CcExo70敲除突变体胞外培养滤液中的含量显著低于在野生型胞外培养滤液中的含量(降低了50%以上),其中有4个候选的外泌蛋白(CcSP2、CcSP3、CcSP6、CcSP7)在胞外培养滤液中的含量显著高于其对应菌株的胞内含量,其中包括1个候选的效应分子(CcSP2)和2个糖苷水解酶(CcSP6和CcSP7),表明这4个外泌蛋白的分泌受到了CcExo70的调控。【结论】胞外分泌复合体亚基CcExo70在杨树腐烂病菌的生长、胁迫响应、内吞作用和致病性等方面起着重要的调控作用。 展开更多
关键词 杨树腐烂病菌 胞外分泌复合体 CcExo70 内吞作用 致病性
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杨树腐烂病菌与不同寄主互作后致病力分化研究 被引量:3
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作者 严海璘 张王斌 +3 位作者 朱宗财 仪子博 王飞亚 岳娟 《林业科技》 2018年第2期20-24,共5页
将DSYS菌株接种到新疆杨、银白杨、胡杨和灰杨枝条及叶片上进行发病率、显症时间、产孢体出现时间、病斑扩展速度的研究结果表明,DSYS菌株均能使4种不同寄主健康的枝条发病,在胡杨和灰杨枝条上第3 d开始显症,显症时间最早;在新疆杨枝条... 将DSYS菌株接种到新疆杨、银白杨、胡杨和灰杨枝条及叶片上进行发病率、显症时间、产孢体出现时间、病斑扩展速度的研究结果表明,DSYS菌株均能使4种不同寄主健康的枝条发病,在胡杨和灰杨枝条上第3 d开始显症,显症时间最早;在新疆杨枝条上第10 d开始显症,显症时间最晚,且产孢体形成需要时间最长达到14 d;在银白杨枝条上病斑扩展速度最快,为1.46 cm/d。DSYS菌株经历不同寄主培养后,继代菌株在病斑扩展速度和发病特征上发生明显分化现象,在新疆杨和灰杨连续培养3代后病斑扩展速度呈增加趋势且达到显著性差异,在胡杨连续培养3代后病斑扩展速度没有达到显著性差异,在银白杨上连续培养后病斑扩展速度在继2代与继1代和继3代表现上有显著性差异。 展开更多
关键词 杨树腐烂病菌 致病性 抗病性 扩展速度 产孢体
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新疆地区梨树与白杨树腐烂病病菌的交叉侵染 被引量:5
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作者 赵延存 刘坤 +2 位作者 孙连波 钱国良 刘凤权 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第24期85-88,共4页
在新疆库尔勒地区,梨树腐烂病严重发生的梨园周围往往伴随有严重的白杨树腐烂病发生,推测这2种树木上的腐烂病病菌可能存在交叉侵染现象。为验证这一假设,从梨树样品上分离得到8株梨树腐烂病病菌(Valsa mali var. pyri),从白杨树样品上... 在新疆库尔勒地区,梨树腐烂病严重发生的梨园周围往往伴随有严重的白杨树腐烂病发生,推测这2种树木上的腐烂病病菌可能存在交叉侵染现象。为验证这一假设,从梨树样品上分离得到8株梨树腐烂病病菌(Valsa mali var. pyri),从白杨树样品上分离到11株白杨树腐烂病病菌(Valsa sordida)及9株柳树腐烂病病菌(Cytospora translucens)。将3种病原菌进行交叉接种,发现梨树腐烂病病菌对白杨树枝条的侵染成功率仅为8.9%,而白杨树及柳树腐烂病病菌对梨树枝条的侵染成功率分别为45.8%、63.0%。将3种病原菌分别接种到梨树的叶片和果实上,发现菌株的致病力表现为梨树腐烂病病菌>柳树腐烂病病菌>白杨树腐烂病病菌。将白杨树和柳树腐烂病病菌在梨树果实上继代接种3代后,2种病原菌的致病力均有所上升。因此,白杨树腐烂病病原菌对梨树具有较强的交叉侵染能力。 展开更多
关键词 库尔勒香梨 梨树腐烂病菌 杨树腐烂病菌 柳树腐烂病菌 交叉侵染 致病性
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杨树内生菌球毛壳抗生物质的培养基优化、检测和动力学 被引量:4
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作者 高建锋 刘晓光 +3 位作者 高克祥 刘璇 李超 王庆华 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第2期82-88,共7页
以杨树内生真菌球毛壳ND35为供试菌株,采用L16(45)正交试验法对液体培养基进行优化;利用pH纸色谱、捷克八溶剂系统纸色谱方法及紫外-可见光谱扫描法对该内生菌的抗生物质进行理化性质初步分析;用薄层层析、高效液相色谱及平板抑菌法检... 以杨树内生真菌球毛壳ND35为供试菌株,采用L16(45)正交试验法对液体培养基进行优化;利用pH纸色谱、捷克八溶剂系统纸色谱方法及紫外-可见光谱扫描法对该内生菌的抗生物质进行理化性质初步分析;用薄层层析、高效液相色谱及平板抑菌法检测分析该菌粗提液的活性成分及对杨树腐烂病菌的抑菌效果;对抗生物质液体培养的主要动力学指标进行分析。结果表明:优化后培养基配方为:1%葡萄糖,1%蔗糖,0.5%牛肉膏,0.02%硫酸亚铁,0.01%维生素B1,pH值为7。球毛壳ND35菌株的抑菌作用分为活菌体的抑菌作用和代谢活性物质的抑菌作用,液体培养后的菌丝胞内和胞外均产生抗生物质,并具有较好的热稳定性。该抗生物质pH值为7,易溶于有机溶剂,难溶于水。球毛壳ND35抗生物质在221nm处有最大的吸收峰,该抗生物质有4个组分,均对杨树腐烂病菌有抑菌活性。生长动力学表明,在液体发酵培养过程中,球毛壳ND35抗生物质的产量、吸光值、pH及其抑菌率是连续变化的。 展开更多
关键词 内生真菌 球毛壳ND35 抗生物质 培养基优化 杨树腐烂病菌 生长动力学
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松焦油防治树木腐烂病
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《林业科技通讯》 1976年第10期21-21,共1页
在毛主席“绿化祖国”的伟大教导指引下,我局营造了大片的用材林、栽植了上万株苹果树,但近年来发现林木和果树发生了腐烂病,导致大片死亡。为确保林木速生丰产,苹果丰收,我们组成了“三结合”的防治试验小组,深入生产第一线,进行试验... 在毛主席“绿化祖国”的伟大教导指引下,我局营造了大片的用材林、栽植了上万株苹果树,但近年来发现林木和果树发生了腐烂病,导致大片死亡。为确保林木速生丰产,苹果丰收,我们组成了“三结合”的防治试验小组,深入生产第一线,进行试验研究。经过反复实践,从松焦油中分馏出对防治树木腐烂病有显著疗效的新农药——馏分270℃以后的松焦油。经试验抑菌效果达95%以上。 展开更多
关键词 松焦油 馏分 柴河 化工单元操作 杨树腐烂病菌 腐烂
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