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构树叶总黄酮对人永生化表皮细胞的防护效果 被引量:8
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作者 杨雪莹 何瑞 +1 位作者 王亭 曹玉广 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期794-795,共2页
目的 探讨构树叶总黄酮 (totalflzvonoidsofBroussonetiapapyrifera,TFBP)对铅、砷引起的人永生化表皮细胞活性损伤和氧化损伤的防护效果。方法 采集构树叶并利用聚酰胺柱洗脱法提取构树叶总黄酮。用不同剂量的铅和砷处理细胞 ,加入... 目的 探讨构树叶总黄酮 (totalflzvonoidsofBroussonetiapapyrifera,TFBP)对铅、砷引起的人永生化表皮细胞活性损伤和氧化损伤的防护效果。方法 采集构树叶并利用聚酰胺柱洗脱法提取构树叶总黄酮。用不同剂量的铅和砷处理细胞 ,加入不同浓度的构树叶总黄酮 ,采用噻唑蓝 (MTT)染色法检测细胞活性变化 ,采用丙二醛 (MDA)试剂盒测MDA的变化。结果  0 1~ 1 0mmol/L的醋酸铅对细胞的活性有抑制作用。低浓度亚砷酸钠 (0 5~ 1 0μmol/L)对人永生化表皮细胞有增值作用 ,高于 5 0 μmol/L的亚砷酸钠对表皮细胞生长有抑制作用。添加大于 10 0mg/LTFBP后与对照组比较 ,MTT值明显升高 ,MDA的含量明显降低 ,有显著性差异。结论 醋酸铅和亚砷酸钠对人永生化表皮细胞有活性损伤和氧化损伤 ,构树叶总黄酮TFBP能降低这种氧化损伤 ,对细胞有防护功能。 展开更多
关键词 醋酸铅 亚砷酸钠 构树叶总黄酮(TFBP)
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构树叶总黄酮调控Bcl-2与Bax蛋白表达及caspase-3活性诱导HepG-2细胞凋亡的研究 被引量:14
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作者 朱开梅 陈丹 +3 位作者 李美波 许有瑞 刘建楠 顾生玖 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2014年第19期128-133,共6页
目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用体外细胞培养方法,取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFB... 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用体外细胞培养方法,取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,应用MTT法检测TFBP对人肝癌细胞HepG-2生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察各浓度TFBP作用细胞48 h后的细胞的形态变化;通过免疫细胞化学SP法检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;比色法检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性。结果:TFBP在体外对人肝癌细胞HepG-2有较强的浓度依赖性和时间依赖性抑制作用,9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可分别达52.46%,64.72%,与对照组具有显著性差异(P<0.01),可诱导细胞凋亡,质量浓度9,12 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞48 h后就可出现典型的凋亡小体,TFBP可升高caspase-3活性,并具有浓度效应,同时还可下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2/Bax。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-2/Bax以及增强caspase-3的活性有关。 展开更多
关键词 构树叶总黄酮 HepG-2细胞株 细胞凋亡 B细胞淋巴瘤/白血病2 Bcl-2相关X蛋白 半胱氨酸蛋白酶-3
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构树叶总黄酮诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制探讨 被引量:5
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作者 朱开梅 李美波 +2 位作者 许有瑞 刘建楠 顾生玖 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第18期1413-1418,共6页
目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用MTT法检测浓度分别为3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞24、48和72h后对细胞生长的影响;Hoechst33342荧光染色法... 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用MTT法检测浓度分别为3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞24、48和72h后对细胞生长的影响;Hoechst33342荧光染色法观察3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞48h后细胞形态学的变化;免疫细胞化学检测3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞48h后凋亡相关基因Bcl-2及Bax蛋白表达;比色法检测3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞48h后Caspase-3活性。结果:随着药物浓度的增大,TFBP抑制HepG-2细胞增殖的作用逐渐增强,呈剂量依赖性,在3、6、9和12g/L的TFBP作用于HepG-2细胞24h后,HepG-2细胞增殖抑制率分别为7.63%、11.86%、19.02%和21.81%,F=5.16,P=0.034;48h后分别为20.20%、29.44%、39.21%和43.96%,F=11.28,P=0.003;72h后分别为27.24%、34.70%、52.46%和64.72%,F=86.78,P<0.001。Hoechst33342荧光染色法可见,随着药物浓度的增大,细胞的生长变慢,胞质变疏松,细胞核皱缩,深染,出现典型的细胞凋亡形态。免疫细胞化学检测可见,经不同浓度TFBP处理HepG-2细胞48h后,HepG-2细胞Bcl-2蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变浅,Bax蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变深,Bcl和Bax蛋白的阳性表达率与对照组比较差异均有统计学意义,F值分别为6.563和30.883,P值分别为0.012和0.001。比色法检测Caspase-3活性显示,对照组与3、6、9和12g/L的TFBP对HepG-2细胞作用48h后,Caspase-3酶活性分别为(1.38±2.13)、(3.58±2.21)、(4.95±3.61)、(5.25±1.41)和(5.75±2.24)U/mg,随着TFBP浓度的增加,Caspase-3酶活性显著增高,当TFBP浓度为6、9和12g/L时,各实验组与对照组比较差异有统计学意义,F=5.42,P=0.003。结论:TFBP在体外对肝癌HepG-2细胞有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白表达以及增强Caspase-3的活性有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 构树叶总黄酮 细胞凋亡 BCL-2 BAX CASPASE-3
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构树叶总黄酮对人肝癌细胞HepG-2增殖和凋亡的作用及其机制研究 被引量:7
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作者 朱开梅 姚丽新 +2 位作者 刘建楠 桂劲松 顾生玖 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第6期270-273,共4页
目的:探讨构树叶总黄酮(TFBP)对人肝癌细胞(HepG-2)增殖和凋亡的作用。方法:采用细胞增殖实验(MTT法),取对数生长期HepG-2,随机分为药物组和对照组,用3,6,9,12 g.L-1不同质量浓度构树叶总黄酮作用HepG-2,分别干预24,48,72 h。通过流式... 目的:探讨构树叶总黄酮(TFBP)对人肝癌细胞(HepG-2)增殖和凋亡的作用。方法:采用细胞增殖实验(MTT法),取对数生长期HepG-2,随机分为药物组和对照组,用3,6,9,12 g.L-1不同质量浓度构树叶总黄酮作用HepG-2,分别干预24,48,72 h。通过流式细胞仪检测在以上质量浓度下作用细胞48 h后的细胞凋亡率,Western blont法检测以上质量浓度构树叶总黄酮作用细胞48 h后Bcl-2基因、促凋亡基因Bax表达的情况。结果:各质量浓度构树叶总黄酮对HepG-2的生长有显著的抑制作用,呈明显的时间和剂量依赖性,经不同质量浓度的构树叶总黄酮作用48 h后HepG-2凋亡率显著增加,药物组与对照组比较为(0.478±0.085 vs 0.498±0.014;0.354±0.004 vs 0.498±0.014;0.218±0.075 vs 0.498±0.014)有显著性差异,P<0.05,抑癌基因Bcl-2表达量呈逐渐下降的趋势,促凋亡基因Bax表达量随着质量浓度的升高表达量呈现上升趋势。结论:构树叶总黄酮可以有效的抑制HepG-2的生长,诱导细胞凋亡,其诱导该细胞凋亡的作用可能是通过下调抑癌基因Bcl-2的表达,可为肝癌的生物学治疗提供新的方法。 展开更多
关键词 构树叶总黄酮 肝癌 增殖 凋亡
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构树叶总黄酮提取物诱导人肝癌细胞HepG2细胞凋亡及机制 被引量:3
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作者 朱开梅 李美波 +2 位作者 骆彩珍 刘建楠 顾生玖 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期1763-1767,共5页
目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)对人肝癌细胞HepG2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT法检测细胞生长抑制率;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察细胞的形态变化;流式细... 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)对人肝癌细胞HepG2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT法检测细胞生长抑制率;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;RT-PCR法检测基因Bcl-2、Bax mRNA的表达;免疫细胞化学SP法检测基因Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:MTT结果显示,TFBP对HepG2有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系;Hoechst 33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等细胞凋亡特征;流式细胞仪结果显示,细胞出现凋亡形态改变,且细胞被阻滞于G2/M期,随浓度增加,凋亡率逐渐增加;RT-PCR和SP结果显示,随着TFBP浓度增加Bcl-2 mRNA和蛋白表达逐渐减弱,Bax mRNA和蛋白的表达逐渐增强。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 HEPG2细胞株 构树叶总黄酮 细胞凋亡 BCL-2 BAX
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构树叶总黄酮对人肝癌HepG-2细胞增殖及其细胞周期的影响 被引量:4
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作者 朱开梅 李美波 +2 位作者 骆彩珍 刘建楠 顾生玖 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期153-156,共4页
目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质... 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,采用MTT法检测细胞生长抑制率;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察细胞的形态变化并用流式细胞仪检测细胞的周期及细胞凋亡率。结果:MTT结果显示,各质量浓度3,6,9,12 g·L-1的TFBP对HepG-2有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系,3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细48 h后,细胞增殖抑制率分别为20.2%,29.44%,39.21%,43.96%;9 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可达52.46%,与对照组具有显著性差异(P<0.05);Hoechst 33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等典型细胞凋亡特征及凋亡小体;流式细胞仪结果显示,随着TFBP作用浓度的增加,加药组细胞凋亡率加药组凋亡率与对照组相,有显著差异(P<0.01),G0/G1期细胞逐渐减少,G2/M期细胞数逐渐增多,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),细胞周期被阻滞在G2/M期。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用,其抑制机制可能和诱导细胞凋亡与阻滞细胞周期有关。 展开更多
关键词 HepG一2细胞株 构树叶总黄酮 细胞凋亡
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