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核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体-成纤维细胞生长因子19通路、枯否细胞极化的影响
1
作者 颜成果 闪海霞 +2 位作者 吴玉卓 卢瑞杰 温泉 《解剖学杂志》 CAS 2023年第5期390-394,共5页
目的 :探究核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体(FXR)-成纤维细胞生长因子19(FGF19)通路、枯否细胞极化的影响。方法 :选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、核苷(酸)类似物(核苷酸)组、聚乙二醇干... 目的 :探究核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体(FXR)-成纤维细胞生长因子19(FGF19)通路、枯否细胞极化的影响。方法 :选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、核苷(酸)类似物(核苷酸)组、聚乙二醇干扰素(干扰素)组、联合组。除正常组外,均采用腹腔注射乙型肝炎病毒进行慢性乙型肝炎建模。建模成功后,对核苷酸组灌胃10 mg/kg拉米夫定,对干扰素组皮下注射5μg/kg聚乙二醇干扰素,对联合组给予拉米夫定联合聚乙二醇干扰素治疗,正常组、模型组同期灌胃同体积生理盐水。酶联免疫吸附法检测血清病毒,全自动生化分析仪检测肝功能,H-E染色法检测肝组织病理形态,免疫印迹法检测FXRFGF19通路蛋白表达,免疫组织化学法检测枯否细胞极化。结果 :与正常组相比,模型组血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎E抗原(HBeAg)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)含量、iNOS、CD163阳性表达率显著升高,肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著降低。与模型组相比,核苷酸组、干扰素组、联合组血清HBsAg、HBeAg、ALT、AST、TBIL含量、iNOS、CD163阳性表达率显著降低。肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著升高,联合组比干扰素组降低显著。结论 :核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素,可显著激活FXR-FGF19通路,并抑制枯否细胞M1极化,促进枯否细胞M2极化,对慢性乙型肝炎大鼠具有改善作用。 展开更多
关键词 核苷(酸)类似物 聚乙二醇干扰素 慢性乙型肝炎 法尼醇X受体-成纤维细胞生长因子19通路 枯否细胞 大鼠
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小鼠肝枯否细胞和肝星状细胞分离提取方法的比较及优化
2
作者 马文萌 吴昊 +2 位作者 闫昱彤 孙逊 郑倩倩 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期68-74,共7页
目的 探讨小鼠肝枯否细胞和肝星状细胞的提取及纯化方法,为小鼠原代肝非实质细胞分离提取方法学提供参考和建议。方法 以体内胶原酶灌注消化为基础,使用Percoll、OptiPrep等不同的试剂和浓度梯度分别提取C57BL/6小鼠的肝枯否细胞和肝星... 目的 探讨小鼠肝枯否细胞和肝星状细胞的提取及纯化方法,为小鼠原代肝非实质细胞分离提取方法学提供参考和建议。方法 以体内胶原酶灌注消化为基础,使用Percoll、OptiPrep等不同的试剂和浓度梯度分别提取C57BL/6小鼠的肝枯否细胞和肝星状细胞,并通过流式细胞仪、免疫荧光等方法验证纯化细胞的纯度。结果 两层Percoll法提取枯否细胞和两层OptiPrep法提取肝星状细胞可行,纯度可达90%以上,细胞得率为1~2×10~7/肝,细胞存活率在90%以上。细胞原代培养48 h后,枯否细胞F4/80阳性细胞、肝星状细胞α-SMA阳性细胞均达90%以上。结论 小鼠肝中枯否细胞和肝星状细胞的分离提取方法完善可靠且具有成本效益和可重复性。 展开更多
关键词 枯否细胞 肝星状细胞 灌注 原代细胞 纯度
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大鼠肝枯否细胞分离培养与免疫活性的研究 被引量：4
3
作者 韩伟 成令忠 顾云娣 《解剖学杂志》 CAS 1988年第2期71-74,143,共5页
应用胶原酶与链霉蛋白酶消化和分解破坏大鼠肝细胞的方法,获得非肝细胞;再经贴壁培养,成功地获得大量高纯度的枯否细胞。枯否细胞获得率为8.3×10^(6)个/每克肝组织,胞质内均含有在体吞噬的墨汁颗粒。培养成活的枯否细胞呈典型巨噬... 应用胶原酶与链霉蛋白酶消化和分解破坏大鼠肝细胞的方法,获得非肝细胞;再经贴壁培养,成功地获得大量高纯度的枯否细胞。枯否细胞获得率为8.3×10^(6)个/每克肝组织,胞质内均含有在体吞噬的墨汁颗粒。培养成活的枯否细胞呈典型巨噬细胞形态,电镜观察下表而有发达的伪足和微绒毛等结构,胞质内含大量溶酶体。以绵羊红细胞(SRBC)检测枯否细胞免疫活性,90%以上的细胞在特异抗体介导下形成SRBC花环,并能活跃吞噬SRBC。电镜观察了枯否细胞花环和吞噬功能。本实验国内首次分离培养成功大鼠肝枯否细胞,并证明具有良好的免疫活性,这对进一步研究枯否细胞的功能,尤其是它对肿瘤的免疫监视作用有实际意义。 展开更多
关键词 枯否细胞 枯否细胞培养 免疫方法
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苦参碱对细菌脂多糖诱导大鼠枯否细胞释放肿瘤坏死因子及白细胞介素-6的影响 被引量：68
4
作者 林文 张俊平 +1 位作者 胡振林 钱定华 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期93-96,共4页
目的是研究苦参碱对细菌脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｈｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）诱导经卡西霉素（ｃａｌｃｉｍｙｃｉｎ，Ｃａｌ）预激活的大鼠枯否细胞分泌肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）、白细胞介... 目的是研究苦参碱对细菌脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｈｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）诱导经卡西霉素（ｃａｌｃｉｍｙｃｉｎ，Ｃａｌ）预激活的大鼠枯否细胞分泌肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）、白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ６）的影响以及对小鼠体内产生ＴＮＦ和ＩＬ６的影响。结果，苦参碱１２５，２５０及５００ｍｇ·Ｌ－１剂量依赖性抑制大鼠枯否细胞分泌ＴＮＦ和ＩＬ６；苦参碱５０及１００ｍｇ·ｋｇ－１降低小鼠体内ＴＮＦ和ＩＬ６的水平。提示苦参碱的抗炎作用可能与其抑制ＴＮＦ及ＩＬ６的产生有关。 展开更多
关键词 苦参碱 枯否细胞 TNF 白细胞介素6 细菌脂多糖
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内毒素肝损伤过程中枯否细胞NF-κB和AP-1活性变化及其生物学意义 被引量：10
5
作者 王永堂 鲁秀敏 +3 位作者 蒋建新 李关荣 伍亚民 李春穴 《生命科学研究》 CAS CSCD 2002年第3期224-229,共6页
为探讨内毒素肝损伤过程中 ,枯否细胞 (Kupffercells,KCs)内主要转录因子Nuclearfactor kappaB(NF κB)、Activatorprotein 1 (AP 1 )活性的动态变化规律 ,采用健康昆明种小鼠 ,随机分组如下 :Lipopolysaccharide(LPS)尾静脉注射 3h的... 为探讨内毒素肝损伤过程中 ,枯否细胞 (Kupffercells,KCs)内主要转录因子Nuclearfactor kappaB(NF κB)、Activatorprotein 1 (AP 1 )活性的动态变化规律 ,采用健康昆明种小鼠 ,随机分组如下 :Lipopolysaccharide(LPS)尾静脉注射 3h的量效关系 :正常对照组和低 ( 1mg kg)、中 ( 5mg kg)、高 ( 1 0mg kg) 3个内毒素剂量组 ;注射 5mg kgLPS的时效关系 :正常对照、0 .5、1、3、5、8h组 .Electrophoreticmobilityshiftassay(EMSA)法检测KCs中NF κB、AP 1活性 .结果发现 ,内毒素肝损伤过程中 ,KCs中NF κB、AP 1在不同时效和量效均不同程度活化 .提示 ,二者的活化与炎症反应的调控机制紧密相关 。 展开更多
关键词 内毒素 肝损伤过程 枯否细胞 NF-κB AP-1 活性变化
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LPS对体外枯否细胞吞噬功能的影响 被引量：16
6
作者 贠克明 韩德五 +1 位作者 许瑞玲 赵元昌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期795-798,T006,共5页
目的 :探讨LPS对体外培养枯否细胞吞噬功能的影响和机制。方法 :胶原酶灌流消化肝脏 ,密度梯度离心分离枯否细胞。在不同剂量脂多糖作用不同时间 ,分别用聚苯乙烯乳珠吞噬实验、荧光染色法、荧光光度法和流式细胞分析检测枯否细胞的吞... 目的 :探讨LPS对体外培养枯否细胞吞噬功能的影响和机制。方法 :胶原酶灌流消化肝脏 ,密度梯度离心分离枯否细胞。在不同剂量脂多糖作用不同时间 ,分别用聚苯乙烯乳珠吞噬实验、荧光染色法、荧光光度法和流式细胞分析检测枯否细胞的吞噬功能、微丝和微管表达及凋亡情况。结果 :小剂量短时间作用时 ,LPS显著增强体外培养枯否细胞吞噬能力 ,但随作用时间延长和剂量的增加 ,吞噬能力反而下降 ;LPS使枯否细胞微丝和微管表达增强 ,肌动蛋白含量和微管荧光灰度显著增加 ,但剂量过大表达反而减弱 ;大剂量LPS可导致枯否细胞凋亡。结论 :LPS可以增强体外培养枯否细胞的吞噬能力 ,但剂量过大、时间过长反而抑制其吞噬能力。这可能与枯否细胞微丝、微管的变化和凋亡有关。 展开更多
关键词 脂多糖类 吞噬作用 枯否细胞 微丝 微管 细胞凋亡
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大鼠肝脏枯否细胞分离、培养与鉴定 被引量：9
7
作者 冯俊明 史景泉 +2 位作者 刘友生 辛榕 章蓉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期223-224,共2页
目的　研究大鼠肝Kupffer细胞 (KC)分离、培养和鉴定。方法　用Ⅳ型胶原酶离体灌注、差速离心分离大鼠KC ,再经贴壁培养 ,并应用免疫组织化学、吞噬功能实验、电镜等方法进行鉴定。结果　此法能成功地获得较高纯度的KC ,KC的获得率为每... 目的　研究大鼠肝Kupffer细胞 (KC)分离、培养和鉴定。方法　用Ⅳ型胶原酶离体灌注、差速离心分离大鼠KC ,再经贴壁培养 ,并应用免疫组织化学、吞噬功能实验、电镜等方法进行鉴定。结果　此法能成功地获得较高纯度的KC ,KC的获得率为每只大鼠 ( 7～ 10 )× 10 6 ,贴壁后细胞呈典型的星形或多角形 ,免疫组织化学染色显示lysozyme阳性 ,胞浆内见吞噬的latexbeads颗粒 ,电镜观察显示细胞表面伪足及微绒毛发达 ,胞浆内含有大量的溶酶体及吞噬的latexbeads颗粒。结论　该方法简单易行 ,细胞纯度较高 。 展开更多
关键词 肝脏枯否细胞 分离 培养 鉴定
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大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞和肝窦内皮细胞的同步分离与培养 被引量：12
8
作者 李洋 蔡双明 +1 位作者 张莉莉 李旭 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期532-537,共6页
目的探索和建立同步分离大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞和肝窦内皮细胞,并进一步鉴定和培养的方法。方法联合应用原位灌注、离体灌注、梯度密度离心和差速贴壁等分离方法,获取4种大鼠肝内原代细胞,采用形态学观察、免疫荧光染色和... 目的探索和建立同步分离大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞和肝窦内皮细胞,并进一步鉴定和培养的方法。方法联合应用原位灌注、离体灌注、梯度密度离心和差速贴壁等分离方法,获取4种大鼠肝内原代细胞,采用形态学观察、免疫荧光染色和墨汁吞噬实验等方法对所分离的各种原代细胞进行纯度鉴定。结果通过原位灌注结合离体灌注、密度梯度离心结合差速贴壁等分离手段,成功实现了大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞以及肝窦内皮细胞的同步分离,且所得原代细胞得率、活力及纯度等指标均符合后续细胞实验要求。结论通过简易方法同步分离大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞以及肝窦内皮细胞是可行的。 展开更多
关键词 原代培养 肝细胞 星状细胞 枯否细胞 肝窦内皮细胞 原位灌注 密度梯度离心
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胰弹性蛋白酶对内毒素诱导的肝枯否细胞TNF-α、IL-1β表达的影响 被引量：6
9
作者 黎冬暄 田伏洲 +3 位作者 李红 李旭 罗皓 向珂 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期801-802,共2页
目的　探讨胰弹性蛋白酶对内毒素诱导的肝枯否细胞 (KC)炎症介质表达的影响。方法　原代培养的肝枯否细胞分为A组(对照组 )、B组 (内毒素脂多糖诱导组)、C组(胰弹性蛋白酶干预组 ) ,实验后取细胞行RT PCR检测KC的TNF α、IL 1 βmRNA表... 目的　探讨胰弹性蛋白酶对内毒素诱导的肝枯否细胞 (KC)炎症介质表达的影响。方法　原代培养的肝枯否细胞分为A组(对照组 )、B组 (内毒素脂多糖诱导组)、C组(胰弹性蛋白酶干预组 ) ,实验后取细胞行RT PCR检测KC的TNF α、IL 1 βmRNA表达水平、取培养上清液行ELISA测定TNF α、IL 1 β蛋白水平。结果　不论是mRNA水平还是蛋白水平 ,脂多糖诱导 (B组 )可造成KC的TNF α及IL 1 β表达增高 ,与对照组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1 ) ;当用胰弹性蛋白酶干预后 (C组 ) ,KC的TNF α及IL 1 β表达增高更加显著 ,与B组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1 )。结论　胰弹性蛋白酶等胰酶可显著增加枯否细胞受脂多糖诱导后对炎症因子的表达量。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 枯否细胞 全身炎症反应综合征 TNF-α IL-1Β
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酒精刺激对枯否细胞清除LPS功能的影响 被引量：9
10
作者 陈贤明 马学惠 +2 位作者 许瑞龄 赵元昌 韩德五 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期381-384,共4页
目的和方法：应用免疫荧光及免疫电镜技术，对慢性酒精投与之实验大鼠及重症酒精性肝炎患者肝脏枯否细胞对ＬＰＳ的清除功能进行了观察。结果：经门静脉注射ＬＰＳ１０ｍｉｎ后，Ｌｉｅｂｅｒ’ｓ酒精饮食投与６周之大鼠肝脏枯否细胞内... 目的和方法：应用免疫荧光及免疫电镜技术，对慢性酒精投与之实验大鼠及重症酒精性肝炎患者肝脏枯否细胞对ＬＰＳ的清除功能进行了观察。结果：经门静脉注射ＬＰＳ１０ｍｉｎ后，Ｌｉｅｂｅｒ’ｓ酒精饮食投与６周之大鼠肝脏枯否细胞内抗ＬＰＳ荧光显色低于正常大鼠，电镜下枯否细胞内抗ＬＰＳ阳性颗粒少见，而肝窦壁内皮细胞及肝细胞内抗ＬＰＳ阳性物增多。重症酒精性肝炎患者肝穿组织枯否细胞内抗ＬＰＳ荧光显色亦显著低于正常对照。结论：酒精刺激后肝脏枯否细胞对ＬＰＳ的清除功能降低。 展开更多
关键词 肝炎 酒精性肝炎 脂多糖类 枯否细胞
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p38MAPK在重症急性胰腺炎大鼠枯否细胞分泌促炎细胞因子中的作用 被引量：10
11
作者 任洪波 李兆申 +4 位作者 许国铭 屠振兴 贾一韬 施新岗 龚燕芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期923-926,共4页
目的 :探讨p38MAPK信号转导通路在重症急性胰腺炎 (SAP)大鼠枯否细胞 (KCs)分泌促炎细胞因子TNF -α和IL - 1β中的作用。 方法 :30只SD大鼠随机分为 :①假手术对照 (SO)组 ;②SAP组 ;③SAP +CNI - 14 93(p38MAPK抑制剂 )组。SAP模型通... 目的 :探讨p38MAPK信号转导通路在重症急性胰腺炎 (SAP)大鼠枯否细胞 (KCs)分泌促炎细胞因子TNF -α和IL - 1β中的作用。 方法 :30只SD大鼠随机分为 :①假手术对照 (SO)组 ;②SAP组 ;③SAP +CNI - 14 93(p38MAPK抑制剂 )组。SAP模型通过胰胆管逆行注射 5 %牛磺胆酸钠诱导。假手术或造模后 12h处死动物分离出KCs,采用实时定量PCR方法检测KCs内TNF -α和IL - 1βmRNA的表达 ,采用Westernblot法检测p38MAPK活化情况 ,并用ELISA法检测血浆的TNF -α和IL - 1β含量。结果 :SAP大鼠KCs内TNF -α和IL - 1βmRNA的表达明显强于假手术组 ,p38MAPK活性显著高于SO组 ,同时血浆TNF -α和IL - 1β含量明显高于SO组 ,使用CNI - 14 93的SAP大鼠上述指标均显著低于SAP组。结论 :p38MAPK信号转导通路介导了SAP大鼠的KCs促炎细胞因子TNF -α和IL- 1β的分泌 。 展开更多
关键词 胰腺炎 急性坏死性 枯否细胞 有丝分裂素激活蛋白激酶类
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五灵胶囊对LPS诱导枯否细胞释放细胞因子的影响 被引量：9
12
作者 王胜春 张英志 +2 位作者 胡咏武 李晓玮 田卫斌 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第21期1947-1951,共5页
目的 :探讨五灵胶囊对枯否细胞 (Kupffercells,KC)释放细胞因子介导肝细胞 (hepatocellularcells,HC)损伤的作用 .方法 :分离并纯化HC与KC并建立LPS及D GlaN损伤肝细胞模型 ,观察五灵胶囊对 2种损伤模型的作用以及对LPS诱导KC释放细胞... 目的 :探讨五灵胶囊对枯否细胞 (Kupffercells,KC)释放细胞因子介导肝细胞 (hepatocellularcells,HC)损伤的作用 .方法 :分离并纯化HC与KC并建立LPS及D GlaN损伤肝细胞模型 ,观察五灵胶囊对 2种损伤模型的作用以及对LPS诱导KC释放细胞因子介导肝细胞损伤的作用 .结果 :五灵胶囊 2个剂量能有效地阻滞LPS ,D GlaN损伤肝细胞以及降低LPS诱导KC释放TNF α,IL 6 ,IL 8水平 ,抑制KC释放细胞因子损伤肝细胞 .结论 :五灵胶囊遏制KC大量释放细胞因子是治疗慢性肝炎作用机制之一 . 展开更多
关键词 五灵胶囊 枯否细胞 细胞因子 脂多糖
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大鼠枯否细胞的分离、鉴定以及LPS刺激诱导TNF-α的表达 被引量：9
13
作者 叶长根 梁冬雨 +4 位作者 赵亮 于芳苹 孙水林 张吉翔 刘亮明 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2013年第4期307-312,共6页
目的:分离、培养和鉴定枯否细胞,并探讨LPS刺激对细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达和分泌的影响.方法:采用在体原位灌注、密度梯度离心和早期细胞换液等方法分离纯化大鼠肝枯否细胞(kupffer cell,KC),并采用墨汁... 目的:分离、培养和鉴定枯否细胞,并探讨LPS刺激对细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达和分泌的影响.方法:采用在体原位灌注、密度梯度离心和早期细胞换液等方法分离纯化大鼠肝枯否细胞(kupffer cell,KC),并采用墨汁吞噬和ED2染色试验对分离培养的细胞进行鉴定.TNF-α表达和分泌采用RT-PCR和酶联免疫技术(enzyme-linked immunosorbent,ELISA)检测.结果:成功分离和纯化大鼠肝KC,并经墨汁吞噬和ED2染色试验鉴定证实;LPS刺激KC细胞内TNF-α mRNA的表达较非刺激细胞(PBS处理细胞)显著升高(1.10±0.02vs0.09±0.01,P<0.001).另外,LPS刺激较非刺激KC培养上清液TNF-α蛋白的水平也显著升高(487.10pg/mL±5.56pg/mLvs39.41pg/mL±15.30pg/mL,P<0.001).结论:原位灌注和密度梯度离心法能有效分离纯化大鼠KC,LPS刺激可诱导其表达和分泌大量TNF-α. 展开更多
关键词 枯否细胞 培养 脂多糖 肿瘤坏死因子-Α
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丹参化学成分及丹参提取物对脂多糖刺激大鼠肝脏枯否细胞内P38和NF-κB信号通路蛋白表达的影响 被引量：12
14
作者 李俊杰 沈敏 +1 位作者 李霄 岳树强 《解放军医药杂志》 CAS 2013年第8期6-9,14,共5页
目的探讨丹参化学成分及丹参提取物对脂多糖(LPS)刺激大鼠肝脏枯否细胞(KC)内P38和核转录因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达的影响。方法采用胶原酶消化法自SD大鼠肝脏中分离、培养KC。60 ng/mlLPS作用原代培养的KC 12 h后,加入丹参提... 目的探讨丹参化学成分及丹参提取物对脂多糖(LPS)刺激大鼠肝脏枯否细胞(KC)内P38和核转录因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达的影响。方法采用胶原酶消化法自SD大鼠肝脏中分离、培养KC。60 ng/mlLPS作用原代培养的KC 12 h后,加入丹参提取物及分离纯化的丹参化学成分——丹参新醌乙、丹参新酮、丹参醇A、丹参酮Ⅰ、异丹参酮Ⅰ、丹参新醌甲、隐丹参酮、丹参酮ⅡA、丹参酚酸B各100μg/ml,以及NF-κB信号通路蛋白特异性阻断剂PDTC、P38通路特异性阻断剂SB239063各100μg/ml,加上阴性对照组及LPS组共14组。继续培养12 h后,提取各组细胞总蛋白,免疫印记法(Western Blot)检测NF-κB65、磷酸化NF-κB65(p-NF-κB65)、NF-κB抑制蛋白(IκB)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)、磷酸化P38MAPK(p-P38MAPK)和c-fos等蛋白的表达。结果与LPS组相比,PDTC可下调活化KC内p-P38MAPK和p-NF-κBp65的表达,上调NF-κBp65和IκB的表达,而对c-fos和P38MAPK的表达无明显影响;SB239063可下调活化KC内P38MAPK、p-NF-κBp65和c-fos的表达,上调NF-κBp65和IκB的表达,而对p-P38MAPK的表达无明显影响。所有丹参成分和丹参提取物均能不同程度下调活化KC内p-P38MAPK、p-NF-κB65和c-fos的表达,其中以丹参新酮、丹参醇A、丹参酮Ⅰ、异丹参酮Ⅰ、丹参新醌甲和隐丹参酮的抑制作用最为明显。结论对于LPS激活的KC,丹参化学成分和丹参全提取物均可不同程度下调其P38和NF-κB信号通路蛋白的活性,该作用可能是丹参控制肝内炎症反应的主要机制之一。 展开更多
关键词 丹参 枯否细胞 大鼠 SPRAGUE-DAWLEY 肝 P38 核转录因子-κB
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UⅡ/UT系统对LPS刺激枯否细胞固有免疫炎症信号通路TLR4-IRF3的影响 被引量：5
15
作者 涂文娟 汪小庭 +4 位作者 刘亮明 朱彤 梁冬雨 杨志文 高得勇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1313-1319,共7页
目的:探讨UrotensinⅡ(UⅡ)/UT系统对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激枯否细胞(Kupffer cell,KC)固有免疫炎症信号通路Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-干扰素调节因子3(Interferon regulatory factor 3,IRF3)的影响。方法... 目的:探讨UrotensinⅡ(UⅡ)/UT系统对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激枯否细胞(Kupffer cell,KC)固有免疫炎症信号通路Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-干扰素调节因子3(Interferon regulatory factor 3,IRF3)的影响。方法:体外分离培养大鼠肝KCs,KCs培养上清液促炎性细胞因子IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平采用ELISA分析检测,细胞表面TLR4的表达采用流式细胞技术分析,IRF3基因和蛋白表达情况分别采用real-time PCR和Western blot分析方法检测。结果:LPS刺激后,KCs培养上清液IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平、细胞表面TLR4表达阳性细胞率及细胞内IRF3 mRNA表达水平均显著升高,UT拮抗剂urantide预处理抑制了LPS刺激诱导KCs对上述分子的上调表达;LPS的应用也造成了KCs胞核内IRF3蛋白表达水平升高,而使胞浆内IRF3蛋白表达水平降低,urantide预处理后,抑制了LPS诱导KCs核内IRF3蛋白上调和胞浆水平下调。结论:UⅡ/UT系统通过对TLR4-IRF3通路的正性调控作用,介导了或至少部分介导了LPS刺激KCs的免疫性炎症分泌效应。 展开更多
关键词 枯否细胞 炎症 脂多糖 UrotensinⅡ URANTIDE Toll样受体4 干扰素调节因子3
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姬松茸多糖对大鼠肝枯否细胞免疫活性的影响 被引量：7
16
作者 李英信 张庆镐 +2 位作者 李红花 魏成淑 孟繁平 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1175-1176,共2页
目的观察姬松茸多糖对大鼠损伤肝枯否细胞的免疫活性的影响。方法将W istar系大鼠肝枯否细胞体外培养,并分为正常组、损伤组和实验组,除正常组以外均以四氯化碳损伤细胞,实验组再加姬松茸水提取物精制多糖。测定枯否细胞的花环形成和吞... 目的观察姬松茸多糖对大鼠损伤肝枯否细胞的免疫活性的影响。方法将W istar系大鼠肝枯否细胞体外培养,并分为正常组、损伤组和实验组,除正常组以外均以四氯化碳损伤细胞,实验组再加姬松茸水提取物精制多糖。测定枯否细胞的花环形成和吞噬绵羊红细胞能力,计算花环形成率和吞噬率。结果姬松茸多糖可提高损伤肝枯否细胞的花环形成率和吞噬率。结论姬松茸多糖可提高枯否细胞的免疫活性。 展开更多
关键词 姬松茸 枯否细胞 免疫活性
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大鼠肝贮脂细胞、枯否细胞的同时分离和培养 被引量：11
17
作者 宋少刚 杨雁 陈敏珠 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2000年第4期351-353,共3页
关键词 肝贮脂细胞 枯否细胞 分离 培养
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封闭枯否细胞和脾切除对急性肝损伤影响的实验性研究 被引量：7
18
作者 赵严 刘近春 +1 位作者 韩德五 许瑞龄 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期2076-2078,共3页
目的 :探讨封闭枯否细胞与脾切除对肠源性内毒素血症形成及肝实质细胞损伤的影响。方法 :采用硫代乙酰胺 (TAA)给大鼠灌胃 ,同时分别采用GdCl3 封闭枯否细胞及脾脏切除作为实验组 ,观察吞噬指数、ALT、TNF-α、内毒素等指标。结果 :GdC... 目的 :探讨封闭枯否细胞与脾切除对肠源性内毒素血症形成及肝实质细胞损伤的影响。方法 :采用硫代乙酰胺 (TAA)给大鼠灌胃 ,同时分别采用GdCl3 封闭枯否细胞及脾脏切除作为实验组 ,观察吞噬指数、ALT、TNF-α、内毒素等指标。结果 :GdCl3 封闭及脾脏切除组吞噬指数下降 ,内毒素水平明显升高 (P <0 0 5 ) ,TNF -α水平减少 (P <0 0 5 ) ,ALT、TB水平明显下降 (P <0 0 5 )。结论 :抑制枯否细胞功能与脾切除均可使肠源性内毒素水平升高 ,由于分泌功能同时受到抑制 ,使TNF -α水平下降 。 展开更多
关键词 内毒素血症 枯否细胞 脾切除术 肝
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生物免疫制剂对大鼠枯否细胞释放过氧化氢的影响 被引量：6
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作者 白咸勇 顾云娣 +2 位作者 朱继红 钟翠平 成令忠 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期331-334,共4页
从正常Wistar大鼠肝中分离出大量高纯度的枯否细胞(KC),体外培养并以干扰素(IFNα—2b)、卡介苗(BCG)或二者联用处理枯否细胞,用荧光法检测免疫制剂对枯否细胞释放H_2O_2的影响.结果显示,IFNα-2b或BCG均可增强枯否细胞释放H_2O_2量,分... 从正常Wistar大鼠肝中分离出大量高纯度的枯否细胞(KC),体外培养并以干扰素(IFNα—2b)、卡介苗(BCG)或二者联用处理枯否细胞,用荧光法检测免疫制剂对枯否细胞释放H_2O_2的影响.结果显示,IFNα-2b或BCG均可增强枯否细胞释放H_2O_2量,分别使释放量提高约1.6倍和1倍;IFNα-2b和BCG协同作用的效果更强,使枯否细胞释放H_2O_2量提高2倍以上.文章讨论了免疫制剂增强枯否细胞的H_2O_2释放量与其提高KC抗肝癌作用的关系及相关机制. 展开更多
关键词 大鼠 枯否细胞 生物免疫制剂
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小鼠肝枯否细胞的分离、培养与鉴定 被引量：9
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作者 孙晓东 周志伟 +4 位作者 万德森 王国强 方淯靖 卢震海 陈功 《中国现代医生》 2007年第06X期22-23,10,F0003,共4页
目的研究BALB/c鼠肝枯否细胞分离、培养和鉴定。方法选用健康雌性8￣10w龄鼠,麻醉无菌取肝,D-Hank’s液注射冲洗去血并剪去部分结缔组织,剪碎肝组织,加入链霉蛋白酶E和I型胶原酶,水浴振荡消化,再加入DNaseI,共同消化。不锈钢筛网滤过,用... 目的研究BALB/c鼠肝枯否细胞分离、培养和鉴定。方法选用健康雌性8￣10w龄鼠,麻醉无菌取肝,D-Hank’s液注射冲洗去血并剪去部分结缔组织,剪碎肝组织,加入链霉蛋白酶E和I型胶原酶,水浴振荡消化,再加入DNaseI,共同消化。不锈钢筛网滤过,用0.005%DNaseⅠ的1640液清洗细胞液,加Tris-NH4CL溶解红细胞。30%￣70%Percoll梯度离心,用含10%FCS的RPMI-1640贴壁培养4￣6h洗去非贴壁细胞。通过吞噬墨水实验鉴定枯否细胞。结果枯否细胞的数量为(1.07±0.87)×107/g,贴壁率40.3%,用0.4%台盼蓝染色鉴定,细胞存活率在95%以上,吞噬实验发现90%的贴壁细胞具有吞噬功能,即KC的纯度可达90%。贴壁的枯否细胞的形态多样,已经完全伸出了伪足并且伸展贴壁,呈多边形、多角形或者梭形等不规则形状,并且胞浆内可见吞噬的微粒状物质。结论酶消化水浴振荡法结合梯度离心和贴壁培养是分离BALB/c鼠枯否细胞的可靠方法,为进一步实验打下了基础。 展开更多
关键词 枯否细胞 分离 培养 鉴定
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