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核心蛋白聚糖的分离、纯化及活性鉴定 被引量：9
1
作者 王国华 柴玉波 +3 位作者 何鹏 陈南春 陈志阳 刘新平 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1999年第6期312-323,共12页
为研究、开发治疗肺、肝等纤维化疾病的一种天然白蛋白多糖——核心蛋白聚糖（Ｄｅｃｏｒｉｎ），综合归纳了国外研制Ｄｅｃｏｒｉｎ的技术、方法，供从事Ｄｅｃｏｒｉｎ研究及有兴趣开发Ｄｅｃｏｒｉｎ新药的科技人员或制药公司参考。
关键词 核心蛋白聚糖 博来霉素 胶原蛋白 分离 鉴定
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重组腺相关病毒介导核心蛋白聚糖基因转染对SiHa细胞周期和凋亡的影响 被引量：6
2
作者 赵春霞 赵荫涛 +2 位作者 汪培华 肖啸 汪道文 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第1期28-32,共5页
背景与目的:核心蛋白聚糖(decorin,DCN)是一种多效性分子,具有许多重要功能。本研究旨在通过重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virusv ector,rAAV)载体介导DCN基因转染宫颈癌细胞(SiHa),观察其在SiHa细胞的表达及其对细胞... 背景与目的:核心蛋白聚糖(decorin,DCN)是一种多效性分子,具有许多重要功能。本研究旨在通过重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virusv ector,rAAV)载体介导DCN基因转染宫颈癌细胞(SiHa),观察其在SiHa细胞的表达及其对细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:根据GenBank报道的DCN基因cDNA序列,克隆含开放读码框的DCN基因片段,测序后克隆至质粒UF1(UF1·DCN),通过磷酸钙鄄DNA沉淀法共转染293细胞,产生高滴度的含DCN基因的重组腺相关病毒(rAAV·DCN)。用rAAV·DCN转染处于对数生长期的SiHa细胞,并以rAAV·LacZ转染和非转染细胞作对照。通过Westernblot分析DCN的表达,PI染色流式细胞仪分析细胞周期的变化及DCN对细胞凋亡的影响。结果:获得了含开放读码框的人DCN基因片段(1080bp)。成功包装至重组腺相关病毒载体获得高滴度的rAAV·DCN重组体,转染SiHa细胞后能有效表达DCN并使细胞周期发生明显变化,G1期细胞百分率[(72.3±2.3)%vs.(59.5±2.5)%]明显增加,S期[(11.9±1.9)%vs.(17.8±0.8)%]和G2期[(13.4±1.1)%vs.(21.5±0.9)%]细胞百分率明显降低;对细胞凋亡无明显影响。结论:DCN高表达对SiHa细胞增殖周期有明显阻滞作用。 展开更多
关键词 宫颈癌细胞 核心蛋白聚糖 克隆 细胞周期 凋亡
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核心蛋白聚糖对肝细胞和肝星形细胞体外增殖的影响 被引量：5
3
作者 王桂琴 郭彩虹 +5 位作者 孔宪涛 仲人前 李莉 张玲珍 刘涛 王红蓓 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期721-723,共3页
目的 :探讨核心蛋白聚糖 (decorin)在肝纤维化形成机制中的作用。方法 :在正常人肝细胞株 L - 0 2及大鼠肝星形细胞株 HSC- T6体外培养体系中 ,分别加入不同质量浓度 (0 .0 1,5 ,10μg/ m l) decorin共培养不同时间后 ,进行细胞计数以及... 目的 :探讨核心蛋白聚糖 (decorin)在肝纤维化形成机制中的作用。方法 :在正常人肝细胞株 L - 0 2及大鼠肝星形细胞株 HSC- T6体外培养体系中 ,分别加入不同质量浓度 (0 .0 1,5 ,10μg/ m l) decorin共培养不同时间后 ,进行细胞计数以及 3H- Td R和 3H- L eu掺入量测定。结果 :实验组经 0 .0 1μg/ m l decorin作用 4d或 6 d后 ,HSC- T6和 L- 0 2细胞增殖数量以及 3H- Td R和 3H- L eu掺入量均显著高于对照组 (P<0 .0 1,P<0 .0 5 )。而 5 ,10μg/ m l decorin作用 4d或 6 d后 ,HSC- T6和 L -0 2细胞增殖数量以及 3H- Td R掺入量均显著低于对照组 (P<0 .0 1,P<0 .0 5 )。 结论 :decorin对细胞体外增殖有双重调节作用 ; 展开更多
关键词 肝纤维化 肝细胞 肝星形细胞 细胞增殖 核心蛋白聚糖
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核心蛋白聚糖对肺腺癌细胞生长作用及其机制初探 被引量：4
4
作者 梁硕 胡成平 +2 位作者 何碧秀 周东坡 夏莹 《中国肺癌杂志》 CAS 2007年第1期9-13,共5页
背景与目的核心蛋白聚糖(decorin)是在微环境肿瘤外基质中存在的一些小分子蛋白聚糖,与肿瘤的发生、发展、生长密切相关。本研究初步探讨decorin对肺腺癌细胞生长的影响及机制。方法以人肺腺癌细胞株A549为研究对象,利用MTT法检测不同... 背景与目的核心蛋白聚糖(decorin)是在微环境肿瘤外基质中存在的一些小分子蛋白聚糖,与肿瘤的发生、发展、生长密切相关。本研究初步探讨decorin对肺腺癌细胞生长的影响及机制。方法以人肺腺癌细胞株A549为研究对象,利用MTT法检测不同浓度不同时间decorin对A549细胞的杀伤活性,流式细胞仪检测分析decorin对A549细胞周期及凋亡的影响,RT-PCR检测decorin干预后对自身肿瘤细胞的decorin mRNA表达的影响,Westernblot法检测decorin干预对P21蛋白表达的影响,ELISA法检测decorin对TGF-β蛋白表达的调节作用。结果Decorin在体外能明显抑制A549肿瘤细胞增殖,且这种增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性。decorin在体外能明显诱导A549肿瘤细胞凋亡,该作用与剂量和时间有关。decorin在体外能明显上调自身decorin mRNA,下调TGF-β表达,上调P21表达,阻滞细胞周期于G1期。结论decorin在体外能够抑制肺腺癌A549肿瘤细胞生长,诱导其凋亡。其作用机制可能为通过上调自身decorin mRNA,下调TGF-β表达,上调P21表达,阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡等途径抑制A549肿瘤细胞生长。 展开更多
关键词 肺腺癌细胞 核心蛋白聚糖 TGF-Β P21 细胞周期
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核心蛋白聚糖对翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响 被引量：9
5
作者 周清 郭娴吟 +1 位作者 杨筱曦 陈剑 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期919-923,共5页
目的:观察核心蛋白聚糖(DCN)对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增殖的影响,并对照观察丝裂霉素C(MMC)对HPF的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉复发的新途径。方法:(1)取患者的翼状胬肉体部组织,采用组织块贴壁培养法原代培养HPF。(2)... 目的:观察核心蛋白聚糖(DCN)对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增殖的影响,并对照观察丝裂霉素C(MMC)对HPF的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉复发的新途径。方法:(1)取患者的翼状胬肉体部组织,采用组织块贴壁培养法原代培养HPF。(2)用0.01、0.1、1、5、10 mg/L DCN及MMC分别作用于体外培养的HPF,24 h、48 h、72 h后观察2种药物对HPF形态的改变,2种药物不同浓度分别作用12 h、24 h、48 h后MTT法比较2种药物的作用效果,不同浓度的DCN作用48 h后免疫组织化学染色增殖细胞核抗原(PCNA)法检测细胞生长活性,流式细胞术测定细胞周期时相变化。结果:10 mg/L DCN或1 mg/L MMC在12 h后均能显著抑制HPF的增殖(P<0.05),呈剂量和时间依赖性。1～10 mg/L DCN作用48 h使G0/G1期细胞百分比上升(P<0.05),5～10 mg/L DCN作用48 h使G2/M期和S期百分比(G2/M%+S%)显著下降(P<0.05),实验组和对照组均未检测到终末期凋亡细胞。1～10 mg/L DCN能浓度依赖性地抑制细胞表达PCNA(P<0.05)。结论:核心蛋白聚糖能抑制HPF的增殖,阻滞细胞在DNA合成前期。 展开更多
关键词 翼状胬肉 成纤维细胞 核心蛋白聚糖 丝裂霉素
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核心蛋白聚糖在乳腺癌中表达的探讨 被引量：5
6
作者 操海萍 舒振波 +1 位作者 王维忠 张桂珍 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第19期1105-1108,共4页
目的:探讨核心蛋白聚糖(DCN)在乳腺癌中的表达。方法:采用原位杂交和免疫组织化学方法研究DCNmRNA及蛋白在38例乳腺癌及9例相对正常乳腺组织中的表达。结果:在乳腺癌癌细胞内可见DCNmRNA表达,阳性率为88.00%(22/25),正常乳腺腺细胞内未... 目的:探讨核心蛋白聚糖(DCN)在乳腺癌中的表达。方法:采用原位杂交和免疫组织化学方法研究DCNmRNA及蛋白在38例乳腺癌及9例相对正常乳腺组织中的表达。结果:在乳腺癌癌细胞内可见DCNmRNA表达,阳性率为88.00%(22/25),正常乳腺腺细胞内未见DCNmRNA表达,差异具有非常显著性(P<0.01)。DCN蛋白在38例乳腺癌中表达阳性率为55.26%(21/38),相对正常乳腺腺细胞内未见DCN蛋白表达,差异具有非常显著性(P<0.01)。在乳腺癌间质DCN蛋白表达较相对正常乳腺组织增高,差异具有非常显著性(P<0.01)。结论:DCNmRNA及蛋白在乳腺癌癌细胞及间质表达均较相对正常乳腺组织增高。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 原位杂交 乳腺癌 免疫组织化学
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肾组织核心蛋白聚糖和转化生长因子-β_1的表达与肾间质纤维化的关系 被引量：19
7
作者 王伟铭 陈楠 董德长 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2002年第2期124-128,共5页
目的 :探讨转化生长因子 β1 (TGF β1 )及核心蛋白聚糖 (DCN)表达与肾间质纤维化之间的关系 ,及α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)和单核巨噬细胞浸润在肾脏疾病中的变化。　 方法 :收集 30例不同肾脏病肾活检患者的临床和病理资料 ,应用免... 目的 :探讨转化生长因子 β1 (TGF β1 )及核心蛋白聚糖 (DCN)表达与肾间质纤维化之间的关系 ,及α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)和单核巨噬细胞浸润在肾脏疾病中的变化。　 方法 :收集 30例不同肾脏病肾活检患者的临床和病理资料 ,应用免疫组织化学染色方法 ,检测TGF β1 及DCN在肾间质内的表达 ,以及α SMA和CD68的表达。并分析它们的表达与肾间质纤维化之间的关系。　 结果 :肾间质病变严重程度与血清肌酐、肾内TGF β1 和DCN表达程度成正相关 ,与内生肌酐清除率成负相关。肾间质浸润的巨噬细胞主要见于间质大量炎性细胞浸润的部位及纤维化间质和病变肾小球周围 ;α SMA表达可见于血管壁、纤维化间质、增厚的肾小球囊壁或病变肾小球周围以及变性萎缩的肾小管管周 ,它们的表达与肾间质纤维化程度呈正相关。　 结论 :随着肾间质纤维化程度的加重 ,DCN和TGF β1 的表达逐渐增加 ,同时伴有间质单核巨噬细胞的浸润和间质细胞的激活 。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 转化生长因子Β1 肾间质纤维化
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分泌型核心蛋白聚糖真核表达载体的构建及鉴定 被引量：3
8
作者 张玉成 杜珍武 +3 位作者 王雅丽 卜丽莎 吕俊峰 张桂珍 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期354-356,共3页
目的:构建分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体,为研究DCN的生物学功能奠定基础。方法:利用特异性引物,应用PCR技术扩增DCN全长基因cDNA片段,与pcDNA3.1载体进行连接,并转化到大肠杆菌JM109中扩增以获得重组载体,应用双酶切、PCR以及... 目的:构建分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体,为研究DCN的生物学功能奠定基础。方法:利用特异性引物,应用PCR技术扩增DCN全长基因cDNA片段,与pcDNA3.1载体进行连接,并转化到大肠杆菌JM109中扩增以获得重组载体,应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体。结果:获得了约1080bp大小的特异性DNA片段;PCR产物与真核表达载体进行连接,经过双酶切、PCR以及测序鉴定证实分泌型DCNcDNA片段正确插入真核表达载体pcDNA3.1中。结论:成功克隆了分泌型DCNcDNA,并且构建了真核表达载体pcDNA3.1-DCN。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 聚合酶链反应 克隆 基因表达
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重组核心蛋白聚糖转染对肝癌HepG2细胞周期、caspase-3影响的研究 被引量：3
9
作者 王雅丽 张玉成 +3 位作者 吴晓冬 曹风莉 杨绍娟 张桂珍 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期808-811,共4页
目的将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体转染到肝癌HepG2细胞中并检测其表达,同时探讨DCN抗肿瘤作用的机制。方法实验分为对照组细胞和转染组细胞;脂质体介导核心蛋白聚糖真核表达载体及质粒pcDNA3.1分别转染到肝癌HepG... 目的将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体转染到肝癌HepG2细胞中并检测其表达,同时探讨DCN抗肿瘤作用的机制。方法实验分为对照组细胞和转染组细胞;脂质体介导核心蛋白聚糖真核表达载体及质粒pcDNA3.1分别转染到肝癌HepG2细胞中,经G418筛选建立稳定转染的细胞株,采用RT-PCR、免疫组化和Western印迹法检测DCN表达;同时检测细胞周期、caspase-3酶活性。结果与对照组细胞比较,转染组细胞DNCmRNA及蛋白质表达均明显增高(P<0.05);细胞生长缓慢,G0/G1期细胞显著增多,S期细胞明显降低(P<0.05);caspase-3酶活性显著增多(P<0.05)。结论成功建立了稳定转染DCN的HepG2细胞株,并证实DCN能抑制细胞生长、阻滞细胞周期、提高caspase-3酶活性。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 CASPASE-3 HEPG2 转染
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核心蛋白聚糖抑制兔屈趾肌腱术后粘连的实验研究 被引量：11
10
作者 熊雁 张正治 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期251-255,共5页
目的探讨核心蛋白聚糖(decorin,DCN)抑制兔屈趾肌腱术后粘连的效果。方法日本大耳白兔18只,其后肢第2趾供实验用,将伸屈趾肌腱横断,作改良的Kessler缝合,不缝合腱鞘,右侧腱鞘内肌腱缝合位点直接注射DCN100μl(0.25mg/ml)作为实验趾;左... 目的探讨核心蛋白聚糖(decorin,DCN)抑制兔屈趾肌腱术后粘连的效果。方法日本大耳白兔18只,其后肢第2趾供实验用,将伸屈趾肌腱横断,作改良的Kessler缝合,不缝合腱鞘,右侧腱鞘内肌腱缝合位点直接注射DCN100μl(0.25mg/ml)作为实验趾;左侧直接注射PBS100μl作对照趾。术后2、4及8周取材,行大体观察、生物力学检测和组织学观察。结果大体观察,术后各时间点实验趾的粘连程度明显小于对照趾。生物力学检测显示各时间点实验趾肌腱滑移距离和关节总屈曲度明显大于对照趾,差异有统计学意义(P<0.05)。组织学观察见实验趾术后2周成纤维细胞增生不明显,4周增生明显,8周胶原纤维排列规则,直径大小均一;对照趾2周成纤维细胞增生,4周成纤维细胞增生减少,8周胶原纤维排列不规则,直径大小不一。结论核心蛋白聚糖能明显减少屈趾肌腱损伤的术后粘连,调节胶原纤维的形成,促进肌腱愈合。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 肌腱粘连 愈合 兔
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核心蛋白聚糖对兔肌腱细胞增殖及细胞周期的影响 被引量：6
11
作者 熊雁 张正治 傅晓岚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第17期1761-1764,共4页
目的观察核心蛋白聚糖(decorin,DCN)对兔肌腱细胞体外增殖和细胞周期的影响,以探讨decorin在肌腱愈合中对肌腱细胞的作用。方法原代培养兔肌腱细胞,分别加入不同浓度(0.25、1.25、2.5、5μg/ml)的decorin;培养12、24、48h用二甲基噻唑... 目的观察核心蛋白聚糖(decorin,DCN)对兔肌腱细胞体外增殖和细胞周期的影响,以探讨decorin在肌腱愈合中对肌腱细胞的作用。方法原代培养兔肌腱细胞,分别加入不同浓度(0.25、1.25、2.5、5μg/ml)的decorin;培养12、24、48h用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法测定细胞增殖速度;镜下观察低浓度DCN作用24h后对兔肌腱细胞增殖的影响;低浓度DCN培养24h后用流式细胞仪检测细胞周期。结果0.25、1.25、2.5μg/ml浓度decorin作用12h后对兔肌腱细胞增殖有着减少的趋势,但是24h后却明显地促进其增殖(P<0.05),但是48h后差异不显著。而5μg/ml浓度组作品12h对兔肌腱细胞增殖有着增加的趋势,24h后促进增殖作用显著(P<0.05),48h后却抑制兔肌腱细胞的增殖。0.25μg/ml低浓度decorin作用兔肌腱细胞24h后镜下观察和流式细胞分析,细胞增殖明显增强,S期增加,PI明显大于对照组(P<0.05)。结论低、中浓度decorin对兔肌腱细胞的增殖起着先延迟后促进的作用,提示在肌腱愈合中如果在肌腱和腱鞘之间运用DCN,可能起到早期隔离TGF-β对腱鞘成纤维细胞的作用,而后期增强TGF-β对腱内膜细胞的作用,从而促进内源性愈合,减少外源性愈合,达到减少粘连的效果。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 肌腱细胞 细胞周期
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核心蛋白聚糖对TGFβ1诱导的人肾小管上皮细胞产生胶原的影响 被引量：3
12
作者 成学琴 鲍华英 +3 位作者 潘小勤 费莉 黄松明 张维真 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1157-1159,共3页
目的:探讨核心蛋白聚糖对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法:将体外培养的HK-2细胞分为:(1)阴性对照组;(2)10μg/LTGFβ1组;(3)TGFβ1(10μg/L)+(10μg/L)核心蛋白聚糖组;(4)TGFβ1... 目的:探讨核心蛋白聚糖对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法:将体外培养的HK-2细胞分为:(1)阴性对照组;(2)10μg/LTGFβ1组;(3)TGFβ1(10μg/L)+(10μg/L)核心蛋白聚糖组;(4)TGFβ1(10μg/L)+(100μg/L)核心蛋白聚糖组。倒置显微镜下观察加入刺激因子48h后肾小管上皮细胞的细胞形态学改变;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察不同浓度的核心蛋白聚糖对HK-2细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达变化的影响。结果:加入刺激因子48h后,(1)组细胞形态与正常HK-2细胞形态基本一致,大部分仍为椭圆形;(2)组细胞形态发生明显的变化,大部分细胞由椭圆形拉长为长梭形;(3)和(4)组,梭形样细胞明显减少,尤其是(4)组梭形样细胞减少更为明显。(2)组HK-2细胞Ⅰ型胶原mRNA表达上升到(1)组的27.86倍,Ⅲ型胶原mRNA的表达上升到(1)组的21.83倍。(3)和(4)组与(2)组相比,Ⅰ型胶原mRNA的表达分别下降了36.39%、53.36%,Ⅲ型胶原mRNA的表达分别下降了26.35%、47.96%(P<0.05),但仍未下降到正常水平。结论:核心蛋白聚糖能抑制TGFβ1诱导的人近端肾小管上皮细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,可能是核心蛋白聚糖抑制肾间质纤维化的原因之一。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 转化生长因子Β1 胶原 肾小管上皮细胞
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核心蛋白聚糖抑制人软骨细胞MMP13基因表达的体外研究 被引量：3
13
作者 陈亮 熊雁 +1 位作者 王子明 王爱民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期719-722,共4页
目的体外原代细胞培养人正常关节软骨细胞,观察不同浓度的外源性核心蛋白聚糖(decorin,DCN)对软骨细胞基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteases 13,MMP13)表达的影响。方法采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶结合消化法分离培养人透明软骨细胞... 目的体外原代细胞培养人正常关节软骨细胞,观察不同浓度的外源性核心蛋白聚糖(decorin,DCN)对软骨细胞基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteases 13,MMP13)表达的影响。方法采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶结合消化法分离培养人透明软骨细胞,观察体外培养的软骨细胞形态,阿尔新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化鉴定透明软骨细胞,从基因水平(实时定量PCR)检测不同浓度的外源性DCN(对照组:0,A组:2.5μg/ml,B组:25μg/ml,C组:250μg/ml)作用下透明软骨细胞对MMP13、X型胶原(Collagen X)表达的影响。结果①正常透明软骨细胞培养呈多角型,扁平状,换液培养5 d时,细胞呈多边形、星形等,排列紧密呈"铺石板"样。②本法分离培养的原代透明软骨细胞的阿尔新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化均为阳性。③随着外源性DCN浓度(0～250μg/ml)的不断增大,Collagen X的表达明显降低(P<0.01),且成剂量依赖关系(A:0.78±0.03,B:0.71±0.04,C:0.63±0.01),MMP13的表达则在DCN高浓度组(250μg/ml)时明显降低(0.85±0.02,P<0.01)。结论外源性DCN抑制透明软骨细胞的Collagen X的表达且成剂量依赖关系,高浓度(250μg/ml)对MMP13的表达起明显抑制作用。表明外源性DCN可能通过抑制透明软骨细胞肥大化抑制软骨细胞MMP13的表达。 展开更多
关键词 透明软骨细胞 核心蛋白聚糖 细胞外基质 基因表达
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核心蛋白聚糖mRNA及其蛋白在结直肠癌中的表达 被引量：4
14
作者 操海萍 舒振波 张桂珍 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期316-318,共3页
目的:研究核心蛋白聚糖(DCN)mRNA及其蛋白在结直肠癌中的表达。方法:采用原位杂交及免疫组织化学方法检测DCN mRNA及其蛋白在30例结直肠癌及20例相对正常大肠组织中的表达。结果:30例结直肠癌患者,DCN mRNA表达阳性率为66.67%(20/30);2... 目的:研究核心蛋白聚糖(DCN)mRNA及其蛋白在结直肠癌中的表达。方法:采用原位杂交及免疫组织化学方法检测DCN mRNA及其蛋白在30例结直肠癌及20例相对正常大肠组织中的表达。结果:30例结直肠癌患者,DCN mRNA表达阳性率为66.67%(20/30);20例相对正常大肠腺细胞中,DCN mRNA表达阳性率为85.00%(17/20),两者比较差异无显著性(P>0.05)。在30例结直肠癌癌细胞及20例相对正常大肠腺细胞内未发现DCN蛋白表达。结论:DCN mRNA在结直肠癌癌细胞及相对正常大肠腺细胞中均有表达。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 核心蛋白聚糖 原位杂交 免疫组织化学/方法
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核心蛋白聚糖对HuH7细胞增殖的影响及机制 被引量：2
15
作者 上官建营 窦科峰 +4 位作者 李霄 胡小军 张福琴 雍召生 遆振宇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期780-782,共3页
目的:探讨核心蛋白聚糖(decorin,DCN)对HuH7细胞系体外增殖的影响及机制。方法:加入不同浓度(0、25、50、75、100、125、150、200μg/L)的DCN培养HuH7细胞系不同时间(12、24、48、72h和2周),用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法及克隆实... 目的:探讨核心蛋白聚糖(decorin,DCN)对HuH7细胞系体外增殖的影响及机制。方法:加入不同浓度(0、25、50、75、100、125、150、200μg/L)的DCN培养HuH7细胞系不同时间(12、24、48、72h和2周),用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法及克隆实验测定细胞增殖速度和活力,流式细胞术测定细胞周期和凋亡情况。结果:DCN浓度增加及作用时间延长,细胞增殖速度减慢、活力减低,G1期细胞增多,凋亡增加。结论:DCN可能为一种负性调控蛋白,可通过调节细胞周期,抑制肝癌细胞的增殖,促进其凋亡。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 HUH7 细胞周期 凋亡
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激活法尼酯X受体上调核心蛋白聚糖表达对肾小管上皮细胞转分化的作用 被引量：3
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作者 谢燕 周宝尚 +1 位作者 喻秀丽 童立纺 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期600-603,619,共5页
目的研究激活法尼酯X受体(FXR)对核心蛋白聚糖(decorin)表达的变化及其对肾小管上皮细胞-间充质转分化的影响。方法 (1)采用不同浓度的FXR特异性激动剂CDCA及拮抗剂Guggulsterones处理肾小管上皮细胞(HK-2),观察decorin的mRNA和蛋白表... 目的研究激活法尼酯X受体(FXR)对核心蛋白聚糖(decorin)表达的变化及其对肾小管上皮细胞-间充质转分化的影响。方法 (1)采用不同浓度的FXR特异性激动剂CDCA及拮抗剂Guggulsterones处理肾小管上皮细胞(HK-2),观察decorin的mRNA和蛋白表达的变化;(2)将HK-2细胞分为对照组,TGF-β1诱导组(20 ng/ml),TGF-β1诱导加CDCA组(100μmol/L)和TGF-β1诱导加CDCA、Guggulsterones共处理组,48 h后观察各组细胞的形态变化,检测各组decorin、E-cadherin和α-SMA的mRNA和蛋白表达的情况。结果 (1)CDCA激活HK-2细胞FXR,decorin的mRNA和蛋白表达升高,且呈剂量依赖。在100μmol/L CDCA和不同浓度Guggulsterones共处理HK-2细胞,随着Guggulsterones浓度升高,decorin的mRNA和蛋白表达逐渐减低;(2)RT-PCR和Western blot显示,decorin在对照组、TGF-β1组无表达,在TGF-β1+CDCA组明显上调(与TGF-β1组比,P<0.05),在TGF-β1+CDCA+Guggulsterones组表达显著下降;E-cadherin在对照组高表达,在TGF-β1组显著下调,在TGF-β1+CDCA组显著上调(与TGF-β1组比,P<0.05),在TGF-β1+CDCA+Guggulsterones组表达显著下降;α-SMA在对照组无表达,在TGF-β1组显著上调,在TGF-β1+CDCA组显著下调(与TGF-β1组比,P<0.05),在TGF-β1+CDCA+Guggulsterones组表达显著上调。结论 CDCA激活肾小管上皮细胞FXR能够通过上调decorin的表达,从而抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞-间充质转分化。 展开更多
关键词 法尼酯X受体 核心蛋白聚糖 转化生长因子-Β1 转分化 肾间质纤维化
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鼠肌核心蛋白聚糖的研制 被引量：3
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作者 陈志阳 王国华 +2 位作者 柴玉波 刘新平 药立波 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2000年第5期237-239,共3页
目的 :从动物组织中提取纯化核心蛋白聚糖 (Decorin) ,检测其活性。方法 :以大鼠肌肉为原料 ,采用匀浆、透析、层析等步骤分离、纯化Decorin ,经SDS PAGE检测其分子量和纯度 ,并经细胞株A5 49检测生物学活性结果 :Decorin在SDS PAGE显... 目的 :从动物组织中提取纯化核心蛋白聚糖 (Decorin) ,检测其活性。方法 :以大鼠肌肉为原料 ,采用匀浆、透析、层析等步骤分离、纯化Decorin ,经SDS PAGE检测其分子量和纯度 ,并经细胞株A5 49检测生物学活性结果 :Decorin在SDS PAGE显示分子量约为 37～ 38kD两条带 ,得率约为 2mg/g组织 ,对A5 49具有明显的抑制生长活性 ,抑制率 >5 0 %。结论 :此法获得的Decorin将有可能作为天然药物用于治疗肿瘤。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 转化生长因子-Β 溴化四唑蓝 研制
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重组核心蛋白聚糖转染对HepG2细胞周期、凋亡以及P21表达的影响 被引量：2
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作者 张玉成 王雅丽 +3 位作者 杜珍武 赵虹 吕俊峰 张桂珍 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期241-243,共3页
目的将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体转染到HepG2中并检测其表达同时研究其抗肿瘤作用的机制。方法脂质体介导分泌型DCN真核表达载体转染HepG2细胞,经G418筛选建立稳定转染的细胞株,采用RT-PCR、免疫组化检测其表达... 目的将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体转染到HepG2中并检测其表达同时研究其抗肿瘤作用的机制。方法脂质体介导分泌型DCN真核表达载体转染HepG2细胞,经G418筛选建立稳定转染的细胞株,采用RT-PCR、免疫组化检测其表达。MTT检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期,RT-PCR方法检测P21WAF1/CIP1mRNA表达情况。结果RT-PCR可见转染组细胞DCN mRNA表达明显增多,免疫组化可见转染组细胞DCN蛋白表达明显增高。细胞生长曲线显示转染组细胞生长缓慢;G1期细胞显著增多;P21WAF1/CIP1mRNA表达增高。结论本研究成功建立稳定转染DCN的HepG2细胞株,证实DCN通过阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡和提高P21WAF1/CIP1蛋白抑制HepG2的生长。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 P21^WAF1/CIP1 细胞周期 转染 HEPG2
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急性缺血性卒中患者血浆中核心蛋白聚糖浓度降低及其临床意义 被引量：2
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作者 徐远志 杨志刚 +2 位作者 张永巍 洪波 刘建民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期654-658,共5页
目的初步探讨急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血浆核心蛋白聚糖(decorin,DCN)浓度的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定102例发病在7 d内的急性缺血性卒中患者及120例体检者(对照组)血浆中DCN浓度,分... 目的初步探讨急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血浆核心蛋白聚糖(decorin,DCN)浓度的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定102例发病在7 d内的急性缺血性卒中患者及120例体检者(对照组)血浆中DCN浓度,分析DCN在卒中亚型(TOAST法)间的浓度差异以及其对缺血性卒中的诊断价值及影响。结果急性缺血性卒中的血浆DCN浓度明显低于对照组(P<0.001),且大动脉粥样硬化性卒中组DCN浓度低于同水平各组。受试者工作特征曲线(ROC)显示DCN浓度用于诊断缺血性卒中的发生有显著意义(P<0.001),选取DCN<8 500 pg/ml作为诊断缺血性卒中的诊断界值点时,敏感度为79.4%,特异度为62.8%。Logistic回归曲线分析提示DCN<8 500 pg/ml是缺血性卒中的独立危险因素(OR=4.8;95%CI:2.1～11.1;P<0.001)。结论急性缺血性卒中患者血浆中DCN浓度显著降低,其浓度变化可以对缺血性卒中的诊断、治疗提供帮助。 展开更多
关键词 核心蛋白聚糖 基质金属蛋白酶类 卒中 细胞外基质
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