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先天性心脏病非编码核糖核酸研究进展
1
作者 鲍迁 刘爱军 苏俊武 《心肺血管病杂志》 CAS 2024年第2期211-214,共4页
先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)由于先天性的心脏和大血管发育异常出现的解剖畸形,是新生儿最常见的先天性畸形之一,在中国,每1 000名新生儿就有9例患病[1]。随着外科手术技术的提高,大大改善的危重症CHD患者的预后;但是,... 先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)由于先天性的心脏和大血管发育异常出现的解剖畸形,是新生儿最常见的先天性畸形之一,在中国,每1 000名新生儿就有9例患病[1]。随着外科手术技术的提高,大大改善的危重症CHD患者的预后;但是,CHD患者成年后不良健康事件,如癌症,心力衰竭,心律失常较于正常人明显增加[2]。CHD已成为影响儿童身心健康及人口生命质量的重大公共卫生问题,给社会和家庭造成严重的经济和精神方面的负担[3]。目前研究结果显示,先天性心脏病发病机制复杂、影响因素众多。 展开更多
关键词 先天性心脏病 非编码核糖核酸 微小核糖核酸 长链非编码核糖核酸
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金属抗菌肽SIF_(4)对大肠杆菌拓扑异构酶活性及胞内核酸合成的影响
2
作者 李玉珍 肖怀秋 +4 位作者 周慧恒 李篮 匡燕 刘淼 赵谋明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期149-154,共6页
为系统阐明金属抗菌肽SIF_(4)基于DNA拓扑异构酶靶点的非细胞质膜抑菌机理,以大肠杆菌为模式菌株,研究了金属抗菌肽SIF_(4)与基因组DNA的结合方式、对DNA拓扑异构酶I/II活性以及胞内核酸生物合成的影响机理。研究发现,金属抗菌肽SIF_(4... 为系统阐明金属抗菌肽SIF_(4)基于DNA拓扑异构酶靶点的非细胞质膜抑菌机理,以大肠杆菌为模式菌株,研究了金属抗菌肽SIF_(4)与基因组DNA的结合方式、对DNA拓扑异构酶I/II活性以及胞内核酸生物合成的影响机理。研究发现,金属抗菌肽SIF_(4)可能以类似溴化乙锭嵌插方式与基因组DNA结合,对拓扑异构酶I有较强抑制活性,但对拓扑异构酶II影响较小,可通过影响DNA负超螺旋解链和RNA聚合酶结合催化RNA转录过程发挥抑菌活性。研究还发现,经金属抗菌肽SIF_(4)处理12 h后,大肠杆菌胞内总DNA和总RNA生物合成量均受到不同程度的抑制,且呈现良好的量-效关系,1/2最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)组与对照组(0 MIC)相比,胞内DNA和RNA生物量差异不显著(P>0.05),MIC和2 MIC组与对照组相比,胞内DNA和RNA生物量差异显著(P<0.05)。实验结果可为金抗肽SIF_(4)在食源性大肠杆菌生物防控中的应用提供理论支持。 展开更多
关键词 金属抗菌肽 大肠杆菌 拓扑异构酶 核酸 抗菌剂
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核酸提取试剂盒对饲料中牛羊源性成分检测的影响
3
作者 李泰 朱英才 +5 位作者 骆璐 彭强 凌洪权 廖星杰 王钦 张承双 《粮食与饲料工业》 CAS 2024年第1期70-71,共2页
实时荧光聚合酶链反应法(荧光PCR法)是目前饲料中牛羊源性成分的定性检测中常用方法之一。为了熟练操作和掌握这个方法,使得实验室工作人员在做饲料中牛羊源性成分定性这类检测时能有一个清晰的认识,通过核酸提取试剂盒的选取及平行实... 实时荧光聚合酶链反应法(荧光PCR法)是目前饲料中牛羊源性成分的定性检测中常用方法之一。为了熟练操作和掌握这个方法,使得实验室工作人员在做饲料中牛羊源性成分定性这类检测时能有一个清晰的认识,通过核酸提取试剂盒的选取及平行实验比对,对此进行了阐释。 展开更多
关键词 荧光PCR法 牛羊源性成分 检测分析 核酸提取试剂盒
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早期香蕉枯萎病Foc4双探针核酸纸基检测传感器研制
4
作者 杨洲 区湘颖 +4 位作者 张志宏 罗宇康 何俊宇 欧俊辰 段洁利 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第5期38-46,共9页
为实现对早期香蕉枯萎病4号生理小种(fusarium oxysporum f.sp.cubense 4, Foc4)的准确检测,该研究提出一种基于胶体金的双探针纸基传感器。该传感器将2种不同粒径的胶体金分别与检测探针和信号增强探针结合,利用DNA探针代替抗原和抗体... 为实现对早期香蕉枯萎病4号生理小种(fusarium oxysporum f.sp.cubense 4, Foc4)的准确检测,该研究提出一种基于胶体金的双探针纸基传感器。该传感器将2种不同粒径的胶体金分别与检测探针和信号增强探针结合,利用DNA探针代替抗原和抗体,形成双探针体系,通过增加信号增强探针降低检测限。基于目标序列与双探针体系的碱基互补配对形成“金标探针-目标序列-T线探针”复合物并在传感器的测试区被捕获,10 min内形成肉眼可见的目标产物,通过分析测试条带得到光强度峰面积并代入标准曲线中,实现Foc4定量检测。试验结果表明,双探针纸基传感器的检测限达到0.001 nmol/L,是传统纸基传感器的100倍,提高了检测灵敏度;在0.001~1 000.000 nmol/L范围内,Foc4浓度与测试线光强度峰面积呈线性关系;使用高浓度非互补探针进行试验干扰,发现非互补序列对检测效果基本无影响,表明该传感器具有较好的特异性;香蕉叶片Foc4检测的平均回收率为77.6%~102.3%,相对标准偏差为7.4%~7.7%。与传统形态学观察等检测方法相比,该研究提出的双探针核酸纸基检测传感器可以及时、快速、准确地判断早期Foc4的存在,具有良好的推广性和实际应用价值。 展开更多
关键词 传感器 检测 Foc4 双探针 胶体金 核酸侧向层析
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CRISPR/Cas系统在核酸检测中的应用和挑战
5
作者 张钧 张路 孔莹莹 《浙江医学》 CAS 2024年第3期225-233,250,共10页
成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关基因(Cas)系统是古菌和细菌适应性免疫系统,最初被发现用来进行基因编辑,近年其特异识别和切割特性以及可编程性使其在核酸和非核酸靶标检测中崭露头角。目前基于CRISPR/Cas系统的核... 成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关基因(Cas)系统是古菌和细菌适应性免疫系统,最初被发现用来进行基因编辑,近年其特异识别和切割特性以及可编程性使其在核酸和非核酸靶标检测中崭露头角。目前基于CRISPR/Cas系统的核酸检测系统主要与核酸扩增技术如PCR、链置换扩增(SDA)、滚环扩增(RCA)和EXPAR等恒温扩增技术结合,以提高灵敏度;多项研究也在尝试开发基于CRISPR/Cas的无预扩增核酸检测系统;另外也有研究尝试通过生物祖体(包括适体、DNAzymes和抗原-抗体反应)特异性识别靶物质实现非核酸信号转换为核酸信号,实现基于CRISPR/Cas的蛋白质、小分子、细胞等非核酸物质的检测。但仍存在一些挑战,其中目标中痕量原始浓度的信号转换和放大是分析系统的关键挑战;其他挑战包括CRISPR/Cas存在一定背景活性,CRISPR RNA和单链DNA/单链RNA信号报告序列有降解风险等。随着技术的逐渐成熟,CRISPR/Cas系统将在生物靶标检测中发挥更大作用。本文就CRISPR/Cas系统在核酸检测这一领域的最新发展方向作一述评。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas系统 检测 诊断 核酸
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追踪隔离措施与核酸检测力度对南京新型冠状病毒肺炎疫情影响的分析与评估
6
作者 王凯 李慧霞 +1 位作者 李云 赵洪涌 《工程数学学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期217-231,共15页
2021年7月,南京市爆发由德尔塔变异毒株引起的新型冠状病毒肺炎疫情(COVID-19)。依据南京市卫生健康委员会公布的实际数据,建立符合疫情发展的时间依赖COVID-19传播动力学模型,将实时数据应用于模型参数估计和有效再生数计算,分析和评... 2021年7月,南京市爆发由德尔塔变异毒株引起的新型冠状病毒肺炎疫情(COVID-19)。依据南京市卫生健康委员会公布的实际数据,建立符合疫情发展的时间依赖COVID-19传播动力学模型,将实时数据应用于模型参数估计和有效再生数计算,分析和评估了此次疫情采取的隔离防控措施和核酸检测强度。结论表明:隔离力度和核酸检测强度对疫情防控有重要影响。该研究结果在一定程度上促进了新型冠状病毒肺炎传播动力学建模与分析工作的研究,对未来应对突发性传染病有一定借鉴意义。 展开更多
关键词 COVID-19 传染病动力学模型 有效再生数 参数估计 隔离措施和核酸检测
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基于蔬菜核酸检测实验的探究性实验教学设计
7
作者 刘金钏 严慧玲 +1 位作者 郭新波 向楠 《实验室科学》 2024年第1期58-61,65,共5页
以蔬菜中维生素C积累相关基因的检测为例,探索将操作难度相对较高的RNA相关的核酸检测实验应用于本科实验教学中。实践结果表明,学生们可顺利掌握蔬菜中核糖核酸(RNA)的提取、反转录合成互补DNA(cDNA)、PCR扩增检验目的基因表达等RNA相... 以蔬菜中维生素C积累相关基因的检测为例,探索将操作难度相对较高的RNA相关的核酸检测实验应用于本科实验教学中。实践结果表明,学生们可顺利掌握蔬菜中核糖核酸(RNA)的提取、反转录合成互补DNA(cDNA)、PCR扩增检验目的基因表达等RNA相关的实验操作技能,达到了预期的教学目标。本实验项目的实施促进了学生们对多门学科知识的融会贯通,有助于其提高发现问题和解决问题的能力并形成探索精神和创新思维。这对培养具有创新创业实践能力的复合型人才具有重要的作用。 展开更多
关键词 实验教学 RNA提取 反转录PCR 核酸检测
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不同核酸提取方法对HBV-DNA检测性能验证情况分析
8
作者 周文娟 林真 徐建萍 《现代医药卫生》 2024年第4期575-580,共6页
目的评估2种乙型肝炎病毒(HBV)-DNA提取方法及2家检测试剂的性能,有助于选择优化提取试剂和检测试剂。方法2023年4月采用达安全自动核酸提取仪提取法(磁珠法)和手工提取法(一步法),并用达安和圣湘2种HBV-DNA试剂检测,对其进行精密度、... 目的评估2种乙型肝炎病毒(HBV)-DNA提取方法及2家检测试剂的性能,有助于选择优化提取试剂和检测试剂。方法2023年4月采用达安全自动核酸提取仪提取法(磁珠法)和手工提取法(一步法),并用达安和圣湘2种HBV-DNA试剂检测,对其进行精密度、正确度、线性范围、检出限及抗干扰能力等性能进行验证和评价。结果达安全自动核酸提取仪提取达安试剂检测、手工提取达安试剂检测和手工提取圣湘试剂检测在精密度、正确度、线性范围、检出限方面验证结果均达标;达安全自动核酸提取仪提取圣湘试剂检测在低值检测中变异系数大于5%,最低检测限验证不合格;抗干扰能力方面,全自动核酸提取仪提取的2.0 g/dL血红蛋白浓度的样本用达安和圣湘试剂检测结果均不受影响。手工提取甘油三酯浓度达3000 mg/dL的样本用达安和圣湘试剂检测的结果均不受影响。结论不同厂家的提取和检测试剂避免混用,达安和圣湘试剂对HBV-DNA定量检测的结果均符合要求。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒-DNA定量检测 全自动核酸提取仪法 手工提取法 性能验证
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微小核糖核酸-451a在人参养荣汤治疗鼻咽癌放射性黏膜损伤中的机制研究
9
作者 鲁志兵 李瑞娟 +1 位作者 吴志清 肖永娟 《临床医药实践》 2024年第4期243-247,共5页
目的:通过检测微小核糖核酸-451a(miR-451a)和富含半胱氨酸的分泌性酸性蛋白(SPARC)mRNA的表达,推断人参养荣汤治疗鼻咽癌(NPC)放射性黏膜损伤的疗效及作用机制。方法:选择2022年3月—2023年5月收治的鼻咽癌放射性口腔黏膜损伤患者30例... 目的:通过检测微小核糖核酸-451a(miR-451a)和富含半胱氨酸的分泌性酸性蛋白(SPARC)mRNA的表达,推断人参养荣汤治疗鼻咽癌(NPC)放射性黏膜损伤的疗效及作用机制。方法:选择2022年3月—2023年5月收治的鼻咽癌放射性口腔黏膜损伤患者30例作为观察组,选择同期健康者30例作为对照组。采用辨证论治拟人参养荣汤加减治疗,比较观察组治疗前后患者中医症候积分量表和口干程度、口咽疼痛程度、黏膜损伤程度。检测治疗前后患者血清miR-451a和SPARC mRNA表达水平。结果:人参养荣汤可以有效降低患者主症和次症严重程度、Ⅲ级和Ⅳ级口腔黏膜损伤程度、口咽疼痛程度以及口干程度,使患者血清中miR-451a表达下降,促进SPARC mRNA蛋白翻译增强(P<0.05)。治疗前后,miR-451a与中医症候积分均呈正相关(P<0.05)。结论:人参养荣汤对鼻咽癌放射性黏膜损伤具有一定的临床疗效,可降低miR-451a表达水平,升高SPARC mRNA表达水平;miR-451a抑制了SPARC mRNA的翻译,可为将来的中西医结合治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 微小核糖核酸-451a 人参养荣汤 鼻咽癌放射性黏膜损伤 富含半胱氨酸的分泌性酸性蛋白 机制研究
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玉屏风颗粒联合卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹的效果分析
10
作者 李丽 《中国社区医师》 2024年第7期62-64,共3页
目的:探讨玉屏风颗粒联合卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹的效果。方法:选取2021年7月—2023年7月滨州市中心医院收治的慢性荨麻疹患者96例作为研究对象,随机分为试验组和对照组,各48例。对照组采用卡介菌多糖核酸治疗,试验组在对照组基... 目的:探讨玉屏风颗粒联合卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹的效果。方法:选取2021年7月—2023年7月滨州市中心医院收治的慢性荨麻疹患者96例作为研究对象,随机分为试验组和对照组,各48例。对照组采用卡介菌多糖核酸治疗,试验组在对照组基础上采用玉屏风颗粒治疗。比较两组治疗效果。结果:治疗后,试验组瘙痒程度、风团数目、每日风团发作次数、风团最大直径、匹兹堡睡眠质量指数、皮肤病生活质量指数评分,白细胞介素-4、白细胞介素-10、CD8^(+)水平,复发率均低于对照组,白细胞介素-2、CD3^(+)、CD4^(+)水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:玉屏风颗粒联合卡介菌多糖核酸治疗慢性荨麻疹的效果良好,能够改善患者临床症状、睡眠质量与生活质量,减轻炎性反应,提高免疫功能,减少复发,且安全性较高。 展开更多
关键词 玉屏风颗粒 卡介菌多糖核酸 慢性荨麻疹
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后疫情时代城市核酸检测基地平–战时期医院感染管理
11
作者 叶维建 傅开烟 《护理学》 2024年第3期261-265,共5页
做好城市核酸检测基地平战时期医院感染管理,通过制定人员管理、工作管理方法和措施,消毒效果评价,达成城市核酸检测基地院感管理目标,在突发疫情期间和疫情常态化防控期间医护人员无一人感染,顺利完成城市核酸检测基地任务,有效保证城... 做好城市核酸检测基地平战时期医院感染管理,通过制定人员管理、工作管理方法和措施,消毒效果评价,达成城市核酸检测基地院感管理目标,在突发疫情期间和疫情常态化防控期间医护人员无一人感染,顺利完成城市核酸检测基地任务,有效保证城市核酸检测基地的持续发展和服务质量的提升。 展开更多
关键词 后疫情时代 城市核酸检测基地 医院感染 管理
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核酸适配体传感器在常见食源性致病菌检测中的应用及发展
12
作者 王晓颖 黄键 +3 位作者 王晓惠 孙雪婷 高雪梅 施锦辉 《农业工程》 2024年第2期102-108,共7页
食源性致病菌是食源性疾病的重要诱因,早期的筛查技术已不能满足对食源性致病菌的快速、准确检测要求。核酸适配体因其小尺寸、易修饰、亲和性高和热稳定等优点而被广泛应用,研究人员运用核酸适配体传感器开发了针对食源性致病菌的众多... 食源性致病菌是食源性疾病的重要诱因,早期的筛查技术已不能满足对食源性致病菌的快速、准确检测要求。核酸适配体因其小尺寸、易修饰、亲和性高和热稳定等优点而被广泛应用,研究人员运用核酸适配体传感器开发了针对食源性致病菌的众多检测方法,用于快速筛查食源性致病菌。基于食源性致病菌的常用检测方法,总结归纳了核酸适配体的筛选程序,列举了核酸适配体传感器在食源性致病菌检测中的应用,分析了其在应对样品的快速高效检测要求时的发展趋势,以求为食源性致病菌的检测方法改进提供更多思路。 展开更多
关键词 食源性致病菌 快速检测 核酸适配体 适配体筛选 核酸适配体传感器
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非洲马瘟病毒(AV1311株)核糖核酸标准物质的研制
13
作者 苏佳 张敏 +5 位作者 白洪旭 张兵 赵炜 薛青红 杨承槐 陈晓春 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期308-315,共8页
标准物质是分子生物学诊断技术的金标准。针对国内无非洲马瘟病毒标准物质的现状,以其AV1311株为原料,通过病毒培养、灭活、分装、特性检验等,成功制备非洲马瘟病毒(AV1311株)核糖核酸标准物质。同时,建立数字PCR方法,对标准物质进行均... 标准物质是分子生物学诊断技术的金标准。针对国内无非洲马瘟病毒标准物质的现状,以其AV1311株为原料,通过病毒培养、灭活、分装、特性检验等,成功制备非洲马瘟病毒(AV1311株)核糖核酸标准物质。同时,建立数字PCR方法,对标准物质进行均匀性评估、稳定性考察及9家实验室联合定值,并进行临床试用。结果显示,组内和组间无统计学差异,样品均匀;-20℃保存可稳定6个月,4℃保存可稳定7 d,25℃保存可稳定24 h,可冻融5次,需干冰运输;标准物质认定值为(6.9±1.1)×10^(3)copis/μL;临床试用显示,所制备的标准物质与临床样品互通性良好;最终通过全国标准物质管理委员会评审,获得国家二级标准物质证书[GBW(E)091272]。综上,本标准物质定值准确,均匀性好,量值稳定,为做好国内非洲马瘟防范工作提供了物质基础。 展开更多
关键词 非洲马瘟病毒 核糖核酸标准物质 检测 定值 数字PCR
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水貂阿留申病毒核酸标准物质的研制
14
作者 王春霞 商金源 +9 位作者 吴顺 闫曼平 冯二凯 罗国良 易立 叶京飞 赵宗正 高华 程悦宁 王振军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期26-33,共8页
为研制均匀、稳定的水貂阿留申病毒(AMDV)核酸标准物质,选择水貂阿留申病毒AMDV-G株接种CRFK细胞进行病毒繁殖,经灭活后,制备水貂阿留申病毒核酸检测标准物质。利用微滴式数字PCR方法对制备的核酸标准物质进行均匀性检验、稳定性评估及... 为研制均匀、稳定的水貂阿留申病毒(AMDV)核酸标准物质,选择水貂阿留申病毒AMDV-G株接种CRFK细胞进行病毒繁殖,经灭活后,制备水貂阿留申病毒核酸检测标准物质。利用微滴式数字PCR方法对制备的核酸标准物质进行均匀性检验、稳定性评估及联合8家实验室进行合作定值。均匀性检验结果:F=1.56<Fa(F(0.05,14,30)=2.04),表明本标准物质组内和组间无统计学差异。稳定性评估结果表明:本标准物质在-20℃环境中可稳定保存6个月、在4℃环境中可稳定保存9 d、在-20℃环境下可稳定冻融4次。经8家有实验室检测资质认证的实验室合作定值及不确定度评定,最后得到本标准物质的定值为1.05×10^(4)copies/μL,扩展不确定度为0.14×10^(4)copies/μL。本标准物质定值准确、均匀性好、量值稳定,可用于水貂阿留申病毒核酸检测等相关实验,有利于水貂阿留申病的诊断和防控。 展开更多
关键词 水貂阿留申病毒 核酸标准物质 微滴式数字PCR
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基于稳定性同位素核酸探针技术的同化利用玉米秸秆碳微生物群落演替研究
15
作者 陈霄龙 郭腾飞 +6 位作者 张倩 岳克 张珂珂 宋晓 丁世杰 张水清 黄绍敏 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期430-440,共11页
[目的]研究秸秆分解过程中同化利用秸秆碳源的微生物生态演替过程,明确参与秸秆分解的主要微生物类群,为秸秆高效利用提供科学依据。[方法]采用^(13)C标记高丰度玉米秸秆。微宇宙室内培养试验的供试土壤为华北平原石灰性潮土。共设置3... [目的]研究秸秆分解过程中同化利用秸秆碳源的微生物生态演替过程,明确参与秸秆分解的主要微生物类群,为秸秆高效利用提供科学依据。[方法]采用^(13)C标记高丰度玉米秸秆。微宇宙室内培养试验的供试土壤为华北平原石灰性潮土。共设置3个处理:不添加秸秆(soil)、添加自然丰度秸秆(soil+^(12)C-straw)和添加13C标记秸秆(soil+^(13)C-straw)。培养30天时,结合同位素示踪与高通量测序等技术,测定秸秆添加对土壤有机碳的激发效应,分析利用秸秆碳源的细菌、真菌群落结构及其与土壤胞外酶活性的关系。[结果](1)秸秆添加显著提高了土壤CO^(2)排放,添加秸秆对土壤有机碳的激发效应在培养第1天达到峰值,土壤和秸秆CO^(2)排放比例均在培养第3天达到峰值。(2)整个培养时期共发现参与秸秆碳同化利用的细菌微生物操作分类单元(operational taxonomic units,OTU_(s))238个,真菌OTU_(s)24个。细菌OTU_(s)主要属于细菌变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)与绿弯菌门(Chloroflexi),真菌OTU_(s)主要为子囊菌门中的粪壳菌纲(Sordariomycetes)。(3)秸秆分解不同时期的微生物群落结构存在显著差异,在整个培养时期,以热单胞菌属(Thermomonas)与溶杆菌属(Lysobacter)为代表的7个细菌属快速响应秸秆添加,以假黄单胞菌属(Pseudoxanthomonas)与土生单胞菌属(Terrimonas)为代表的6个细菌属延迟响应;两个真菌属枝鼻菌属(Cladorrhinum)与葡萄穗霉属(Stachybotrys)表现为对秸秆添加的快速响应,新赤壳属(Neocosmospora)与unclassified_f_Halosphaeriaceae为延迟响应。(4)曼特尔分析表明,细菌热单胞菌属(Thermomonas)、溶杆菌属(Lysobacter)、绿弯菌门(Chloroflexi)以及真菌裂壳菌属(Schizothecium)与碳氮转化相关土壤胞外酶活性呈显著正相关关系。[结论]外源秸秆添加对土壤有机碳产生正激发效应,显著增加了土壤CO^(2)排放。同化秸秆碳源的微生物随培养时间延长发生群落演替,细菌的热单胞菌属(Thermomonas)、溶杆菌属(Lysobacter)、绿弯菌门(Chloroflexi)以及真菌的裂壳菌属(Schizothecium)在玉米秸秆分解过程中具有重要作用,可为秸秆高效腐熟菌剂的研发提供依据。 展开更多
关键词 ^(13)C玉米秸秆 DNA稳定同位素核酸探针 微生物类群 群落演替
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用于小鼠遗传质量评价的核酸标准样品的制备与稳定性验证
16
作者 赵蓝 魏杰 +6 位作者 王洪 刘巍 张心妍 周佳琪 李欢 付瑞 岳秉飞 《实验动物科学》 2024年第1期1-6,共6页
目的制备用于BALB/c、C57BL/6两种小鼠遗传质量评价的核酸标准样品及引物,并对其完整性和稳定性进行验证。方法使用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法测定混合核酸标准样品的纯度和浓度。并按照抽样原则进行存放稳定性和运输稳定性验证。... 目的制备用于BALB/c、C57BL/6两种小鼠遗传质量评价的核酸标准样品及引物,并对其完整性和稳定性进行验证。方法使用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法测定混合核酸标准样品的纯度和浓度。并按照抽样原则进行存放稳定性和运输稳定性验证。存放稳定性以4℃、室温(RT)和37℃这3个温度为观测纵坐标,1、2、3、7和14 d为观测横坐标进行抽样验证;采用保温箱、冰袋和温度计模拟运输条件,分别进行1、3和7 d的运输稳定性验证。结果所制备的BALB/c和C57BL/6两种核酸标准样品A260/A280比值均在1.7~1.9,平均浓度分别为37.53和35.03 ng/μL;稳定性实验表明,两种核酸标准样品及引物在4℃和室温(RT)两种温度下可以稳定存放14 d,且在运输环境中7 d内也能保持稳定。结论BALB/c、C57BL/6两种类型的核酸样品完整性和稳定性良好,可以用于小鼠遗传质量评价。 展开更多
关键词 小鼠 遗传 核酸标准样品 稳定性
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一种可用于OBI检测的高灵敏度核酸提取方法的建立与验证
17
作者 高文博 何博 +4 位作者 杜荣松 廖芬芳 谢君谋 王敏 王淏 《中国输血杂志》 CAS 2024年第2期185-189,共5页
目的 建立和验证1种可用于隐匿性HBV感染(OBI)检测的大体积高灵敏度核酸提取方法,并将其应用于低病毒载量OBI标本的定量检测。方法 参考罗氏核酸检测试剂盒核酸提取方法,建立1种大体积核酸提取方法。将HBV标准品分别配置成10 000 IU/mL... 目的 建立和验证1种可用于隐匿性HBV感染(OBI)检测的大体积高灵敏度核酸提取方法,并将其应用于低病毒载量OBI标本的定量检测。方法 参考罗氏核酸检测试剂盒核酸提取方法,建立1种大体积核酸提取方法。将HBV标准品分别配置成10 000 IU/mL、1 000 IU/mL、100 IU/mL、10 IU/mL和1 IU/mL浓度,采用磁珠法从10 mL相应浓度的标准品中提取核酸,采用荧光定量PCR法检测各浓度的CT值,每个浓度梯度进行平行双份检测,以病毒浓度的对数为X轴,2次检测CT值的平均值为Y轴,构建荧光定量标准曲线和回归方程。通过3次重复实验验证该方法的稳定性。应用本方法提取低病毒载量OBI标本核酸并进行荧光定量。结果 3次HBV病毒荧光定量标准曲线扩增效率(E)均在90%~105%,回归方程(R2)均>0.99。不同浓度标准品CT值的变异系数(CV)分别为0.63%、0.78%、1.52%、1.36%和0.78%。本方法可以提取出病毒载量低至1 IU/mL的OBI标本核酸并进行定量。结论 本方法HBV核酸定量检测系统检测下限可达1 IU/mL,并且具有较强稳定性和灵敏度,可用于低病毒载量OBI的定量检测。 展开更多
关键词 HBV 大体积核酸提取 荧光定量PCR 低病毒载量 隐匿性HBV感染
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CRISPR-Cas系统在病原核酸检测中的研究进展
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作者 杜瑶 高宏丹 +4 位作者 刘家坤 刘孝荣 邢志浩 张涛 马东礼 《合成生物学》 CSCD 北大核心 2024年第1期202-216,共15页
CRISPR-Cas系统作为原核生物获得性免疫系统,由簇状规则间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)和CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins,Cas)构成,因其识别和切割特定DNA或RNA序... CRISPR-Cas系统作为原核生物获得性免疫系统,由簇状规则间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)和CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins,Cas)构成,因其识别和切割特定DNA或RNA序列,而成为分子诊断领域研究的热点。研究人员利用Cas蛋白(Cas12、Cas13、Cas14、Cas3等)结合信号放大和转化技术(荧光法、电位法、比色法、侧向流动技术等),开发了许多高灵敏度、高特异性、低成本的诊断平台,为病原核酸检测提供了新途径。本文介绍了CRISPR-Cas系统的生物学机制及分类,总结现有的基于Cas蛋白反式切割活性开发的病原核酸检测技术,描述其特点、功能和应用场景,并对该系统的未来应用前景进行展望,期望CRISPR-Cas系统成为包括核酸检测在内的多靶标的理想检测平台。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas系统 Cas12和Cas13 病原体 核酸检测 生物传感
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一种有效采集核酸气溶胶的方法
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作者 孙世雄 焉鑫 +6 位作者 孙翔翔 孙明军 高玉斌 孙静 张培培 王毓秀 孙淑芳 《中国动物检疫》 CAS 2024年第3期102-106,共5页
本试验旨在确定一种有效采集核酸气溶胶的方法,用于实验室核酸气溶胶污染的监测。将100μL pBR322质粒DNA均匀喷洒在体积为23 m^(3)的房间内,模拟核酸气溶胶污染。分别于喷洒后0 d(即喷洒当天)、5 d,在6个采样点上同时以对照组和试验组... 本试验旨在确定一种有效采集核酸气溶胶的方法,用于实验室核酸气溶胶污染的监测。将100μL pBR322质粒DNA均匀喷洒在体积为23 m^(3)的房间内,模拟核酸气溶胶污染。分别于喷洒后0 d(即喷洒当天)、5 d,在6个采样点上同时以对照组和试验组方法采样,然后用实时荧光定量PCR检测样品。对照组用装有超纯水的离心管进行采样,试验组用气体采样泵连接过滤吸头进行采样。结果显示:在喷洒后0d采样检测时,试验组6个采样点的Ct平均值为22.732,低于对照组的25.027;在喷洒后5 d采样检测时,对照组只有3个采样点检测到Ct值,且皆高于相应试验组数据。在对布鲁氏菌分子生物学实验室核酸气溶胶的日常监测中,试验组方法同样显示出较高的敏感性。结果表明,试验组方法具有较高的采样效率,适用于实验室核酸气溶胶污染的监测。本研究为实验室核酸气溶胶污染监测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 核酸气溶胶 气体采样泵 实时荧光定量PCR 污染监测
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