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氧糖剥离预处理通过保护线粒体减轻PC12细胞氧糖剥离/再灌注损伤
1
作者 黄丽 许娜 杨朝鲜 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期1763-1771,共9页
目的研究氧糖剥离预处理(oxygen-glucose deprivation preconditioning,OGDPC)对氧糖剥离/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)损伤PC12细胞的保护作用及机制。方法简单随机抽样将PC12细胞分为Control、OGDPC、OGD/R... 目的研究氧糖剥离预处理(oxygen-glucose deprivation preconditioning,OGDPC)对氧糖剥离/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)损伤PC12细胞的保护作用及机制。方法简单随机抽样将PC12细胞分为Control、OGDPC、OGD/R和OGDPC+OGD/R共4组。透射电镜观察线粒体的超微结构,Mito-tracker染色观察线粒体数量,Western blot检测OGDH、PDHA1、COX4、HSP60的表达,JC-1和ATP试剂盒评估线粒体膜电位及ATP水平,TUNEL染色观察细胞凋亡情况,并与AIF、EndoG的免疫荧光染色进行共定位。结果与OGD/R组相比,OGDPC+OGD/R组PC12细胞线粒体超微结构损伤较轻;OGDH、PDHA1和COX4的表达增多(P<0.05),HSP60的表达减少(P<0.05);线粒体膜电位及ATP水平提高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),且AIF、EndoG向TUNEL染色阳性的细胞核聚集减少(P<0.05)。结论OGDPC减轻OGD/R引起的PC12细胞损伤,其机制可能与改善线粒体结构和功能、减少线粒体途径引起的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 氧糖剥离预处理 氧糖剥离/再灌注 线粒体 PC12细胞
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体外诱导SH-SY5Y细胞凋亡的氧糖剥离再灌注模型的建立及评价 被引量：4
2
作者 刘守跃 张影 +2 位作者 胡林森 罗毅男 关文明 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期658-664,604,共7页
目的:通过体外模拟缺血-再灌注损伤(I/R)诱导细胞凋亡的氧糖剥离再灌注(OGD/R)模型的建立与评价,探讨成功诱导神经元凋亡发生的可靠时间窗,为进一步阐明神经元凋亡机制奠定基础。方法:选用人神经母细胞瘤系SH-SY5Y细胞分为对照组和实验... 目的:通过体外模拟缺血-再灌注损伤(I/R)诱导细胞凋亡的氧糖剥离再灌注(OGD/R)模型的建立与评价,探讨成功诱导神经元凋亡发生的可靠时间窗,为进一步阐明神经元凋亡机制奠定基础。方法:选用人神经母细胞瘤系SH-SY5Y细胞分为对照组和实验组,实验组给予不同的OGD/R时间,通过MTT法计算细胞存活率,选定再灌注24h存活率接近50%的OGD10h/R组和对照组细胞,通过光镜、荧光显微镜及电镜观察细胞形态学改变,采用试剂盒检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平、胞浆内丙二醛(MDA)含量及细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果:MTT法结果显示,细胞存活率随OGD时间延长显著降低,OGD10h/R24h组为对照组的(44.91±1.21)%,不同OGD/R时间组间细胞存活率比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。倒置显微镜及HE染色显示,OGD10h/R组细胞密度减低,形态多样性,核固缩;AO/EB荧光染色可见凋亡小体形成,电镜显示核内异染色质凝集、趋边等凋亡的改变。实验组培养液内LDH水平及胞浆内MDA含量随再灌注时间延长而增加,LDH水平于再灌注24h达峰值,MDA含量于再灌注24h接近平台期,胞浆内SOD活性随再灌注时间延长呈现先降低后回升的趋势,与相同时间对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。流式细胞术检测细胞周期显示,随再灌注时间延长,OGD10h/R组G0/G1期细胞比例逐渐增加,24h达峰值(74.09±2.62)%,其后有所降低,G2/M期细胞比例再灌注0h时最高达(26.85±1.35)%,此后逐渐降低,24h前均显著高于同时间对照组细胞,S期细胞比例逐渐降低,24h最低达(19.2±1.58)%,此后逐渐升高,与同时间对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:体外模拟I/R模型的OGD10h/R组能够成功诱导SH-SY5Y细胞凋亡的发生,可进一步应用于凋亡机制的研究。 展开更多
关键词 氧糖剥离/再灌注 SH-SY5Y细胞 细胞凋亡
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人参皂苷Rg2及其立体异构体对氧糖剥离/再灌注细胞模型的影响 被引量：6
3
作者 皮明山 茹琴 +4 位作者 龚晓康 吴日辉 田香 熊琪 李超英 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期333-338,共6页
目的观察不同浓度的人参皂苷Rg2(ginsenoside-Rg2)及其立体异构体[20(R)-Rg2和20(S)-Rg2]对氧糖剥离/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)细胞模型的保护作用,探讨其作用机制并比较天然型Rg2、20(R)-Rg2和20(S)-Rg2... 目的观察不同浓度的人参皂苷Rg2(ginsenoside-Rg2)及其立体异构体[20(R)-Rg2和20(S)-Rg2]对氧糖剥离/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)细胞模型的保护作用,探讨其作用机制并比较天然型Rg2、20(R)-Rg2和20(S)-Rg2作用效果的差异性。方法将培养7天的皮层神经元分成5组:对照组、模型组、Rg2组、20(R)-Rg2组及20(S)-Rg2组,Rg2组、20(R)-Rg2组及20(S)-Rg2组分别加入浓度为20、40、80μmol/L的Rg2、20(R)-Rg2和20(S)-Rg2预先处理24 h,然后制备OGD/R模型;24 h后检测细胞存活率、凋亡因子Caspase-3的活性、胞内Ca2+浓度以及超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果与对照组比较,模型组细胞的存活率、SOD活力明显降低,Caspase-3的活性、Ca2+荧光灰度值及MDA含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,20、40、80μmol/L浓度时Rg2、20(R)-Rg2和20(S)-Rg2组细胞存活率、SOD活力均显著升高,Caspase-3活性、Ca2+荧光灰度值及MDA含量均显著降低(P<0.05);与20(S)-Rg2组比较,20、40、80μmol/L浓度时Rg2和20(R)-Rg2组的细胞存活率升高、MDA含量降低(P<0.05),80μmol/L浓度时20(R)-Rg2组及40、80μmol/L浓度时Rg2组的Caspase-3活性降低、SOD活力升高(P<0.05),40、80μmol/L浓度时Rg2和20(R)-Rg2组的Ca2+荧光灰度值降低(P<0.05);与20(R)-Rg2组比较,80μmol/L浓度时Rg2组的Ca2+荧光灰度值降低(P<0.05),40、80μmol/L浓度时Rg2组的SOD活力升高(P<0.05),20、40、80μmol/L浓度时Rg2组的MDA含量降低(P<0.05)。结论人参皂苷Rg2及其立体异构体预处理可以提高OGD/R条件下的细胞活力,其机制可能与提高细胞抗凋亡、抗氧化能力及减少Ca2+内流有关,并且20(R)-Rg2的作用效果优于20(S)-Rg2却低于天然型Rg2。 展开更多
关键词 人参皂苷RG2 人参皂苷立体异构体 氧糖剥离/再灌注 皮层神经元
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人参皂苷Rg2立体异构体对皮层神经元抗凋亡作用的研究 被引量：2
4
作者 皮明山 茹琴 +4 位作者 龚晓康 田香 黎炎梅 唐利军 李超英 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第15期37-43,共7页
先前的研究已经证明人参皂苷Rg2(ginsenoside-Rg2,Rg2)对人类健康有许多益处,包括抗休克,预防或治疗冠心病和预防多梗塞性痴呆等。另外,Rg2包含2个立体异构体:20(R)-人参皂苷Rg2[20(R)-Rg2]和20(S)-人参皂苷Rg2[20(S)-Rg2]。然而,目前Rg... 先前的研究已经证明人参皂苷Rg2(ginsenoside-Rg2,Rg2)对人类健康有许多益处,包括抗休克,预防或治疗冠心病和预防多梗塞性痴呆等。另外,Rg2包含2个立体异构体:20(R)-人参皂苷Rg2[20(R)-Rg2]和20(S)-人参皂苷Rg2[20(S)-Rg2]。然而,目前Rg2对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia and reperfusion injury,CIRI)诱导神经元凋亡的影响以及这种影响是否具有立体异构性尚未见报道。因此,研究使用大脑皮层神经元建立常用于体外模拟CIRI的氧糖剥离/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)的细胞模型来探索Rg2立体异构体对OGD/R诱导的皮层神经元凋亡的影响。结果显示与模型组相比,20(R)-Rg2和20(S)-Rg2的3种剂量(20、40、80μmol/L)预处理均显著增加细胞存活率(P<0.05),显著降低胱天蛋白酶-3(Caspase-3)的活性(P<0.05)和凋亡率(P<0.05);40、80μmol/L剂量组均显著提高缺氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor,HIF-1α)-促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)信号通路活化(P<0.05)。20(R)-Rg2的这种抗凋亡作用显著大于20(S)-Rg2。这些结果表明20(R)-Rg2和20(S)-Rg2均能降低由OGD/R诱导的皮层神经元凋亡,并且20(R)-Rg2具有更好的预防作用。20(R)-Rg2有潜力被用作预防CIRI的功能性食品中的有效成分之一。 展开更多
关键词 人参皂苷Rg2立体异构体 皮层神经元 氧糖剥离/再灌注 脑缺血再灌注 细胞凋亡
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