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E.coli表达HEV ORF2编码蛋白第112～607氨基酸片段的免疫原性及其诱生抗体的病毒中和活性 被引量：2
1
作者 李洪钊 冮宏映 +5 位作者 刘晓 张光明 孙强明 李燕 马雁冰 孙茂盛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期264-266,共3页
目的 探讨E.coli表达的戊型肝炎病毒(HEV)ORF2编码蛋白第112～607氨基酸片段(pORF2-56K)的免疫原性及其诱生抗体的病毒中和活性。方法 pORF2-56K免疫小鼠和豚鼠,用ELISA检测血清抗体效价。将HEV毒种与高效价豚鼠灭活血清在体外孵育后,... 目的 探讨E.coli表达的戊型肝炎病毒(HEV)ORF2编码蛋白第112～607氨基酸片段(pORF2-56K)的免疫原性及其诱生抗体的病毒中和活性。方法 pORF2-56K免疫小鼠和豚鼠,用ELISA检测血清抗体效价。将HEV毒种与高效价豚鼠灭活血清在体外孵育后,接种于2BS细胞,用RT-PCR检测病毒RNA的复制情况。结果E.coli表达的pORF2-56K可诱导机体产生高水平的HEV特异性抗体和强烈的免疫记忆。该抗体可在体外有效中和HEV,使之失去在2BS细胞中有效复制的能力。结论 E-coli表达的pORF2-56K具有良好的免疫原性,且其诱生抗体具有中和HEV的能力,可作为HEV重组疫苗的候选抗原。 展开更多
关键词 表达 HEVORF2编码蛋白 氨基酸片段 免疫原性 诱生抗体 中和活性 戊型肝炎病毒
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非洲猪瘟病毒p30蛋白氨基酸序列分段表达及反应原性分析
2
作者 周俊明 倪艳秀 +5 位作者 范宝超 祝昊丹 朱雪蛟 王丹丹 胡屹屹 李彬 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第10期1875-1881,共7页
为比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白氨基酸序列中不同片段的反应原性,探究p30蛋白氨基酸序列中可能的抗原优势片段。本研究通过PCR、克隆技术将p30蛋白氨基酸序列中不同片段的编码基因分别插入表达质粒pET32a,... 为比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白氨基酸序列中不同片段的反应原性,探究p30蛋白氨基酸序列中可能的抗原优势片段。本研究通过PCR、克隆技术将p30蛋白氨基酸序列中不同片段的编码基因分别插入表达质粒pET32a,经IPTG诱导、Ni柱纯化、透析后,获得p30蛋白氨基酸序列中8~101 aa片段(P-1#)、58~101 aa片段(P-2#)、101~158 aa片段(P-3#)、8~194 aa片段(P-4#),用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析p30蛋白氨基酸序列中不同片段与p30蛋白免疫兔血清和ASFV阳性猪血清的反应原性。结果显示,上述片段均获得诱导表达及纯化,表达形式有可溶性表达(P-1#、P-3#)和包涵体表达(P-2#、P-4#)。各片段以1.0 mg/L包被时,p30免疫兔血清与p30蛋白氨基酸序列中4种片段均能发生免疫反应,ASFV阳性猪血清与P-4#、P-1#反应较佳,与P-3#反应中等,与P-2#反应最弱。综上,p30蛋白氨基酸序列中不同片段反应原性的差异为认识p30抗原优势区域提供了数据,这将有助于非洲猪瘟血清学诊断抗原的科学筛选。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p30蛋白 氨基酸序列片段 反应原性
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人DAO氨基酸序列片段B-细胞表位的多参数预测 被引量：32
3
作者 陈兴 王更银 +2 位作者 丛爱丽 张立 许素菊 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期232-234,共3页
目的预测人二氨氧化酶 ( DAO)氨基酸序列片段 ( aa No.5 2 4- 6 18)的 B-细胞表位。方法应用 6种参数和方法进行综合分析 ,包括 Hopp & Woods亲水性参数、抗原性参数、可及性参数、β-转角、万氏及吴氏综合预测方法。结果显示 B-细... 目的预测人二氨氧化酶 ( DAO)氨基酸序列片段 ( aa No.5 2 4- 6 18)的 B-细胞表位。方法应用 6种参数和方法进行综合分析 ,包括 Hopp & Woods亲水性参数、抗原性参数、可及性参数、β-转角、万氏及吴氏综合预测方法。结果显示 B-细胞识别的表位可能在 5 43- 5 5 3和 5 6 9- 5 95残基或其附近 ,5 6 9- 5 95残基 4种参数和方法的预测值均高于 5 43- 5 5 3残基 ,这两个被预测的表位均含有β-转角和不规则卷曲结构。结论本研究为应用合成肽抗原制备抗人 展开更多
关键词 二氨氧化酶 B-细胞表位 氨基酸序列片段
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氯虫苯甲酰胺衍生物的合成及杀虫活性 被引量：1
4
作者 杜晓华 方佳琪 楼佳明 《浙江工业大学学报》 CAS 北大核心 2022年第1期44-49,54,共7页
为了开发新的杀虫化合物,以氯虫苯甲酰胺为先导,通过引入氨基酸片段合成了12个新化合物,通过^(1)H NMR,^(13)C NMR和HRMS等手段进行结构表征。室内杀虫活性初步测试结果表明:在500 mg/L测试质量浓度下,多数目标化合物对黏虫(Oriental ar... 为了开发新的杀虫化合物,以氯虫苯甲酰胺为先导,通过引入氨基酸片段合成了12个新化合物,通过^(1)H NMR,^(13)C NMR和HRMS等手段进行结构表征。室内杀虫活性初步测试结果表明:在500 mg/L测试质量浓度下,多数目标化合物对黏虫(Oriental armyworm)有着较高的杀虫活性,其中化合物b在20,4 mg/L质量浓度下对黏虫分别有90%和80%的杀虫活性,化合物f在20,4 mg/L质量浓度下对黏虫分别有80%和70%的杀虫活性。 展开更多
关键词 氯虫苯甲酰胺衍生物 氨基酸片段 杀虫活性
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HSP70-TKD诱导NK细胞对胰腺癌细胞杀伤作用及其机制的探讨 被引量：3
5
作者 陈蓉明 龚福生 +2 位作者 应敏刚 谢云青 郑秋红 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期181-184,共4页
目的:探讨从人外周血单核细胞(PBMC)由干细胞培养基扩增得到的NK细胞,在热休克蛋白70短肽(HSP70-TKD)刺激下杀伤细胞膜HSP70表达阳性胰腺癌细胞的机制。方法:用干细胞培养基从健康人PBMC中高效扩增得到CD3-CD56+NK细胞,ELISA方法测定HSP... 目的:探讨从人外周血单核细胞(PBMC)由干细胞培养基扩增得到的NK细胞,在热休克蛋白70短肽(HSP70-TKD)刺激下杀伤细胞膜HSP70表达阳性胰腺癌细胞的机制。方法:用干细胞培养基从健康人PBMC中高效扩增得到CD3-CD56+NK细胞,ELISA方法测定HSP70-TKD诱导的NK细胞分泌IFN-γ的水平;ELISPOT方法分析其颗粒酶-B的表达情况;用MTT法测定HSP70-TKD诱导的NK细胞,对细胞膜HSP70表达阳性的胰腺癌细胞Colo+和表达阴性的胰腺癌细胞Colo-杀伤活性;从而分析其杀伤活性与IFN-γ分泌和颗粒酶-B表达的相关性。结果:由外周血扩增NK细胞在2.0μg/mL的HSP70-TKD刺激下,其IFN-γ分泌从刺激前的(8.9±0.7)ng/mL增加到(30.2±1.3)ng/mL,差异有统计意义,P<0.05;而颗粒酶-B的表达从(3.2±0.3)%增加到(21.2±0.6)%,差异有统计意义,P<0.05。HSP70-TKD诱导的NK细胞对Colo-杀伤活性低,与未经诱导的NK细胞比较差异无统计学意义;而对Colo+杀伤活性高,诱导组与未诱导组之间差异有统计学意义;当TKD浓度为2.0μg/mL时,杀伤活性最高为(60.1±2.8)%,而未诱导的NK细胞杀伤活性为(27.8±2.6)%。结论:NK细胞在2.0μg/mL的HSP70-TKD诱导下,其IFN-γ分泌、颗粒酶-B的表达和对Colo+杀伤活性达到最高,推断HSP70-TKD诱导NK对细胞膜HSP70表达阳性细胞的杀伤可能与其IFN-γ分泌和颗粒酶-B的表达有关。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 热激蛋白氨基酸片段 自然杀伤细胞 细胞系 肿瘤 比色法
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Alphastatin体外抑制血管内皮细胞血管生成的实验研究 被引量：3
6
作者 李涛 陈凛 +2 位作者 李荣 卫勃 唐云 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期780-781,共2页
关键词 抗肿瘤血管生成制剂 人血管内皮细胞 体外抑制 实验研 抑制肿瘤生长 血管生成抑制剂 转移过程 人纤维蛋白原 氨基酸片段 拟血管生成
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应更新对散发性脑淀粉样血管病的认识 被引量：1
7
作者 李新 王纪佐 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第27期2103-2105,共3页
散发性脑淀粉样血管病（sporadiccerebralamyl—oidangiopathy，sCAA或CAA）是老年人常见的脑小血管病，病理特征为进展性淀粉样蛋白．B（A[5）沉积在脑微小血管及毛细血管的血管壁上，与阿尔茨海默病不同，CAA的AB主要由更可溶的、40... 散发性脑淀粉样血管病（sporadiccerebralamyl—oidangiopathy，sCAA或CAA）是老年人常见的脑小血管病，病理特征为进展性淀粉样蛋白．B（A[5）沉积在脑微小血管及毛细血管的血管壁上，与阿尔茨海默病不同，CAA的AB主要由更可溶的、40个氨基酸片段（A[340）组成。过去临床上认为CAA只表现为脑叶出血，目前随着先进的结构和（或）分子影像学技术的应用，对CAA的病理生理及临床表现的认识有了划时代的发展，但神经科医生对它的认识仍不足和滞后，故也缺乏其患病率和发病率的资料。 展开更多
关键词 脑淀粉样血管病 散发性 分子影像学技术 sCAA 阿尔茨海默病 临床表现 淀粉样蛋白 氨基酸片段
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H5N1血凝素蛋白切割位点的序列研究 被引量：1
8
作者 郭晓莉 朱贻盛 +5 位作者 李亦学 石萍 周豪魁 姚劲松 黄振德 魏冬青 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第16期1908-1912,共5页
血凝素(hemagglutinin,HA)能否被切割成HA1和HA2是决定禽流感病毒高致病性的重要因素.分析切割位点的序列,研究其进化规律可以让我们更深入地了解H5N1的高致病性.本研究先通过元胞自动机的方法将HA的基因序列转化为图形,并在图上找到了... 血凝素(hemagglutinin,HA)能否被切割成HA1和HA2是决定禽流感病毒高致病性的重要因素.分析切割位点的序列,研究其进化规律可以让我们更深入地了解H5N1的高致病性.本研究先通过元胞自动机的方法将HA的基因序列转化为图形,并在图上找到了一段H5N1亚型仅有的特征基因片段.这个特征基因片段包含30个碱基,主要由A和G组成,其对应的氨基酸主要是带正电荷的碱性氨基酸.这个特征氨基酸片段正好处于HA的酶切位点上.通过3D结构的同源模拟,发现H5N1 HA蛋白的切割位点较为暴露,非常有利于各种酶对其进行剪切.本研究还构建了切割位点的分子表面,以进一步分析可能的氨基酸突变将如何影响表面的电荷分布.结果表明,某些突变较大地改变了电荷的表面分布,可能使病毒失去高致病性.H5N1特征氨基酸片段突变情况的统计表明,在时间上,2005年突变案例的比例比前几年上升了许多;而在地域上,中国大陆的突变病毒案例占了绝大比例.这些结果都有助于我们研究病毒高致病力的进化情况. 展开更多
关键词 H5N1血凝素 切割位点 元胞自动机 特征氨基酸片段 同源模拟
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