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麦根腐长蠕孢毒素对小麦苯丙氨酸氨裂解酶活性的影响 被引量:1
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作者 高必达 《湖南农学院学报》 CSCD 1994年第5期479-484,共6页
在根腐毒素浸黄化苗根和离体苗试验中,感病品种PAL比活力显著高于对照,在一定范围内酶活性与毒素浓度成正相关,而抗病品种PAL比活力变化不大。在旗叶圆片试验中,感病品种处理后12h,PAL比活力明显低于对照,24h后回... 在根腐毒素浸黄化苗根和离体苗试验中,感病品种PAL比活力显著高于对照,在一定范围内酶活性与毒素浓度成正相关,而抗病品种PAL比活力变化不大。在旗叶圆片试验中,感病品种处理后12h,PAL比活力明显低于对照,24h后回升,接近对照的水平;抗病品种PAL活性除个别场合外变化不大。在酶波中直接加毒素波几乎可以完全抑制感病品种PAL活性,对抗病品种PAL活性也有强烈抑制作用。认为在浸根试验中未直接接触毒素的叶组织中PAL活性变化的差异能反映品种的抗感差异,PAL活性的相对稳定性与小麦抗根腐病有关。 展开更多
关键词 小麦 根腐病 毒素 苯丙氨裂解 抗病性
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HAZOP分析技术在氨裂解工艺中的应用
2
作者 刘凯 《中国新技术新产品》 2018年第22期51-53,共3页
目前我国核燃料循环企业使用液氨高温裂解的方式制取氢气。本文对危险和可操作性研究(HAZOP)分析技术进行了详细阐述,并用此方法对氨裂解反应单元进行了隐患分析和辨识,指出了可能造成的后果及应采取的合理可行的安全对策措施。
关键词 HAZOP 氨裂解 制氢
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氨裂解变压吸附制氢装置在木糖醇工艺上的应用
3
作者 姚兴山 《石家庄化工》 1999年第4期25-26,共2页
关键词 木糖醇 氨裂解 变压吸附 制氢装置 工艺
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氨裂解变压吸附制氢装置在木糖醇工艺上的应用
4
作者 姚兴山 《轻工环保》 1997年第1期21-22,24,共3页
关键词 木糖醇 制取工艺 氨裂解 变压吸附 制氢装置
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丹麦公司商业化通过氨裂解为燃料电池供氢技术
5
作者 王熙庭 《天然气化工—C1化学与化工》 CSCD 北大核心 2017年第2期27-27,共1页
丹麦的一家初创公司正在商业化从氨生成低成本,高纯度的氢气用于燃料电池的技术。RenCat是丹麦技术大学(TU Denmark)最近的分支机构,由Ib Chorkendorff和Debasish Chakraborty创立。RenCat系统声称通过用铁镍合金代替传统的钌基催... 丹麦的一家初创公司正在商业化从氨生成低成本,高纯度的氢气用于燃料电池的技术。RenCat是丹麦技术大学(TU Denmark)最近的分支机构,由Ib Chorkendorff和Debasish Chakraborty创立。RenCat系统声称通过用铁镍合金代替传统的钌基催化剂来降低“裂解”工艺的成本。 展开更多
关键词 燃料电池 氨裂解 商业化 技术 丹麦 氢气 钌基催化剂 CAT系统
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用苯丙氨酸氨裂解酶DNA的RFLP分析来表达日本绿茶品种的分化
6
作者 陈宗懋 《中国茶叶》 2003年第5期37-37,共1页
关键词 苯丙氨裂解酶DNA RFLP分析 日本绿茶品种 分化
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La_((1-x))Sr_(x)NiO_(3)钙钛矿型催化剂的制备及其用于氨催化裂解产氢的研究
7
作者 张颢玉 张振东 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S02期190-196,共7页
采用凝胶溶胶法制备了Sr^(2+)掺杂的La_((1-x))Sr_(x)NiO_(3)(x分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8)的钙钛矿型催化剂,Sr^(2+)掺杂可以通过增强催化剂碱性和碱性位点数量、改善催化剂氧化还原行为提升催化剂活性。气相色谱分析结果表明,当x=0.... 采用凝胶溶胶法制备了Sr^(2+)掺杂的La_((1-x))Sr_(x)NiO_(3)(x分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8)的钙钛矿型催化剂,Sr^(2+)掺杂可以通过增强催化剂碱性和碱性位点数量、改善催化剂氧化还原行为提升催化剂活性。气相色谱分析结果表明,当x=0.4时,催化剂活性最高,在裂解温度为650℃、NH_(3)流速37500 mL/(h·g)的100%NH_(3)中,NH_(3)转换率可达100%,较LaNiO_(3)催化作用下的NH_(3)转换率提高了5.12%。利用Design Expert软件对La_(0.6)Sr_(0.4)NiO_(3)进行合成条件优化发现,在煅烧温度为700℃、煅烧时间为3.39 h、柠檬酸与硝酸盐的物质的量的比为1.2时催化剂催化活性最高,600℃下NH_(3)转换率达到95.548%。 展开更多
关键词 钙钛矿型催化剂 氨裂解制氢 Sr掺杂
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草生欧文氏菌中酪氨酸酚裂解酶的体外定向进化及结构模拟
8
作者 郭小雷 《化学与生物工程》 CAS 2023年第7期34-39,44,共7页
以来源于草生欧文氏菌(Erwinia herbicola)的酪氨酸酚裂解酶(Eh-TPL)为目的基因,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,利用高通量筛选方法获得了比酶活提高的突变体S20C和E202R,再通过定点突变得到突变体S20C/E202R/N161S。经摇瓶发... 以来源于草生欧文氏菌(Erwinia herbicola)的酪氨酸酚裂解酶(Eh-TPL)为目的基因,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,利用高通量筛选方法获得了比酶活提高的突变体S20C和E202R,再通过定点突变得到突变体S20C/E202R/N161S。经摇瓶发酵培养发现,突变体S20C/E202R/N161S比野生型Eh-TPL的比酶活提高了30.61%;酶学性质研究结果表明,突变体S20C/E202R/N161S的最适温度仍为37℃,最适pH值从8.2升至8.5,热稳定性、pH稳定性均得到明显提高;结构模拟结果表明,突变体S20C/E202R/N161S的三维结构无明显变化,突变位点附近氢键和表面电势有所变化。体外定向进化技术能有效提高Eh-TPL的催化效率,对酶法生产L-酪氨酸具有重要应用价值。 展开更多
关键词 易错PCR 定向进化 草生欧文氏菌 酸酚 L-酪
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剑麻苯丙氨酸裂解酶基因的鉴定及表达分析 被引量:3
9
作者 黄兴 习金根 +4 位作者 陈涛 覃旭 谭施北 陈河龙 易克贤 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1082-1089,共8页
剑麻是热带地区重要的纤维作物,但其分子生物学研究基础薄弱,纤维发育机制尚未明确。苯丙氨酸裂解酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)是纤维重要组分木质素生物合成的起始酶,近年来转录组测序技术快速发展,使开展剑麻PAL基因相关研究... 剑麻是热带地区重要的纤维作物,但其分子生物学研究基础薄弱,纤维发育机制尚未明确。苯丙氨酸裂解酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)是纤维重要组分木质素生物合成的起始酶,近年来转录组测序技术快速发展,使开展剑麻PAL基因相关研究更为便利。本文根据已报道转录组数据成功鉴定出2个含完整编码序列的剑麻PAL基因,其在剑麻叶片发育过程中的表达模式与前人报道的PAL在纤维发育过程中的活性变化规律一致,表明其与木质素生物合成密切相关。遗传进化分析结果显示,剑麻和番麻PAL基因进化关系更近,选择压力分析结果显示,剑麻和番麻PAL基因序列选择压力一致且高于太匮龙舌兰PAL基因,这一现象可能由剑麻和番麻纤维性状的趋同进化引起。此外,剑麻PAL基因在铜铅胁迫后差异表达不显著,其可能在重金属胁迫后受到转录后调控。值得一提的是,在烟草疫霉侵染后,剑麻PAL基因表达水平上调倍数较高,其可能同时参与苯丙烷类代谢途径中抗病相关次生代谢产物的合成和细胞壁介导的免疫机制。因此开展剑麻PAL基因功能解析可加深对剑麻纤维发育机制和抗病机制的理解,对培育高产、优质、多抗剑麻新品种具有重要意义。 展开更多
关键词 剑麻 苯丙酶基因 遗传进化 选择压力 表达模式 逆境胁迫
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蛋氨酸裂解酶的基因克隆及序列分析 被引量:10
10
作者 马百坤 唐晓莹 +1 位作者 黄惠臣 时永辉 《医学研究生学报》 CAS 2006年第12期1063-1066,共4页
目的:克隆蛋氨酸裂解酶(METase)中阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶(TVMGL1)基因,探讨重组METase(rMETase)对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法:从培养的阴道毛滴虫提取总RNA,以此为模板,利用RT-PCR获取TVMGL1基因,琼脂糖电泳分离纯化所得目的基因并... 目的:克隆蛋氨酸裂解酶(METase)中阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶(TVMGL1)基因,探讨重组METase(rMETase)对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法:从培养的阴道毛滴虫提取总RNA,以此为模板,利用RT-PCR获取TVMGL1基因,琼脂糖电泳分离纯化所得目的基因并克隆至T-Vector,AB I 3730自动序列分析仪分析所得基因序列。结果:PCR产物经琼脂糖电泳,目的基因片段大小与预期大小相符;序列分析所得基因序列为1 191 bp,与国外报导的序列相符。结论:从培养的阴道毛滴虫中成功克隆出TVMGLV1基因,为METase抗肿瘤作用的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 基因克隆 反转录PCR
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响应面法优化超声波辅助提取香菇中半胱氨酸亚砜裂解酶的工艺 被引量:5
11
作者 刘莹 袁岩 +2 位作者 雷霄宇 黄文 王益 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第10期31-34,共4页
以新鲜香菇为原料,采用响应面法对超声波辅助提取半胱氨酸亚砜裂解酶的工艺进行优化。结果表明:影响半胱氨酸亚砜裂解酶提取率的工艺因素按主次顺序排列为提取功率>提取时间>液料比,最佳工艺条件为提取时间21.5min、提取功率100.0... 以新鲜香菇为原料,采用响应面法对超声波辅助提取半胱氨酸亚砜裂解酶的工艺进行优化。结果表明:影响半胱氨酸亚砜裂解酶提取率的工艺因素按主次顺序排列为提取功率>提取时间>液料比,最佳工艺条件为提取时间21.5min、提取功率100.0W、液料比15:1(mL/g)。在此最优条件下,半胱氨酸亚砜裂解酶的提取率为48.76U/g,接近模型预测值。 展开更多
关键词 香菇 半胱酸亚砜 超声波 响应面
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重组酪氨酸酚裂解酶全细胞催化合成L-酪氨酸 被引量:11
12
作者 常俊俊 刘均忠 +1 位作者 刘茜 焦庆才 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1112-1116,1137,共6页
利用基因工程手段重组表达了弗氏柠檬酸杆菌来源的酪氨酸酚裂解酶(TPL),以丙酮酸和L-丝氨酸为底物全细胞催化合成L-酪氨酸,考察了pH、温度、表面活性剂、金属离子、铵盐种类和氯化铵浓度等因素对L-酪氨酸合成的影响,并比较了两种底物合... 利用基因工程手段重组表达了弗氏柠檬酸杆菌来源的酪氨酸酚裂解酶(TPL),以丙酮酸和L-丝氨酸为底物全细胞催化合成L-酪氨酸,考察了pH、温度、表面活性剂、金属离子、铵盐种类和氯化铵浓度等因素对L-酪氨酸合成的影响,并比较了两种底物合成L-酪氨酸的转化率。结果表明,TPL的最适反应条件是45℃,pH=8.0,4mmol/L PLP,氯化铵浓度350 mmol/L。1 mmol/L triton-x 100对TPL酶活有促进作用,金属离子对TPL酶活都有明显的抑制作用。0.1 mol/L丙酮酸的转化率约是L-丝氨酸的1.8倍。 展开更多
关键词 酸酚 L-酪 丙酮酸 L-丝 生物工程
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蛋氨酸裂解酶基因在大肠杆菌中的高效表达 被引量:8
13
作者 马百坤 王红兵 《医学研究生学报》 CAS 2008年第4期353-355,359,共4页
目的:使来源于人阴道毛滴虫的蛋氨酸裂解酶基因在大肠杆菌中高效表达;纯化表达产物获得重组蛋氨酸裂解酶。方法:用蛋氨酸裂解酶基因片段克隆至pGEX4T-2,转化大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导下体外表达重组蛋白,亲和层析纯化重组... 目的:使来源于人阴道毛滴虫的蛋氨酸裂解酶基因在大肠杆菌中高效表达;纯化表达产物获得重组蛋氨酸裂解酶。方法:用蛋氨酸裂解酶基因片段克隆至pGEX4T-2,转化大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导下体外表达重组蛋白,亲和层析纯化重组蛋白。结果:表达产物经SDS-PAGE,显示在相对分子质量68000处出现高浓度的GST融合蛋白,其相对分子质量与预期的GST-重组蛋氨酸裂解酶大小相符;薄层扫描显示重组蛋白占总菌量的34%。结论:人阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶基因在大肠杆菌中成功地获得高效表达。 展开更多
关键词 基因克隆 逆转录PCR 体外表达 蛋白纯化
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酪氨酸酚裂解酶及其在L-酪氨酸酶法合成中的应用 被引量:4
14
作者 韦平和 彭加平 营佳 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期695-697,共3页
L-酪氨酸是目前仍采用酸水解法生产的少数氨基酸之一,应用酶法取代水解法生产L-酪氨酸是近年来氨基酸工业的研究热点之一。本文对酪氨酸酚裂解酶的结构、机制及应用进行了综述,为酶法生产L-酪氨酸及其衍生物提供参考。
关键词 酸酚 L-酪 合成 结构 机制
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L-蛋氨酸γ-裂解酶的研究进展 被引量:4
15
作者 夏立亮 于源华 +1 位作者 薛冉 王保学 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期70-74,共5页
L-蛋氨酸γ-裂解酶是一种磷酸吡哆醛依赖型多功能酶,属于γ-蛋白家族。它能催化L-蛋氨酸及同型半胱氨酸的α,γ-裂解反应,被应用于肿瘤治疗及同型半胱氨酸血症的诊断。综述了蛋氨酸γ-裂解酶的来源,酶学性质,基因克隆与表达,酶的空间结... L-蛋氨酸γ-裂解酶是一种磷酸吡哆醛依赖型多功能酶,属于γ-蛋白家族。它能催化L-蛋氨酸及同型半胱氨酸的α,γ-裂解反应,被应用于肿瘤治疗及同型半胱氨酸血症的诊断。综述了蛋氨酸γ-裂解酶的来源,酶学性质,基因克隆与表达,酶的空间结构、活性位点及其应用,并对其在制备及应用中存在的问题和前景作了分析与展望。 展开更多
关键词 酸γ-酶酶学性质基因工程抗肿瘤药物 同型半胱酸血症
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精氨琥珀酸裂解酶及合成酶在人胃癌组织中表达的意义 被引量:1
16
作者 陆岽 庄则豪 王承党 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2010年第2期138-140,共3页
目的探讨精氨琥珀酸裂解酶(ASL)及精氨琥珀酸合成酶(ASS)mRNA在人胃癌组织中的表达。方法收集胃癌组织15例及相应癌旁正常组织12例,采用RT-PCR方法分别检测其中ASL及ASSmRNA的表达,了解胃癌组织与癌旁正常组织中可能存在的ASS及ASL表达... 目的探讨精氨琥珀酸裂解酶(ASL)及精氨琥珀酸合成酶(ASS)mRNA在人胃癌组织中的表达。方法收集胃癌组织15例及相应癌旁正常组织12例,采用RT-PCR方法分别检测其中ASL及ASSmRNA的表达,了解胃癌组织与癌旁正常组织中可能存在的ASS及ASL表达差异。结果胃癌组织中ASSmRNA的表达低于正常组织,具有统计学差异(P<0.05);但ASL的表达与正常组织相比无显著性差异。结论胃癌组织中ASSmRNA表达水平下降,提示了精氨酸耗竭原理用于胃癌治疗的可行性。 展开更多
关键词 琥珀酸酶(ASL) 琥珀酸合成酶(ASS) 胃癌
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H-蛋白中Asp-68和Tyr-70定向突变对甘氨酸裂解酶系整体酶活的调控
17
作者 张涵 李宇辰 +2 位作者 聂晶磊 任杰 曾安平 《北京化工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期48-56,共9页
还原甘氨酸途径被认为是最有前景的C1 (one carbon)合成途径,其核心酶系是甘氨酸裂解酶系。在前期研究中,我们在甘氨酸裂解酶系H-蛋白"解开自保护"过程的研究中初步锁定了H-蛋白空腔内的潜在关键氨基酸残基为Ser-67、Asp-68和... 还原甘氨酸途径被认为是最有前景的C1 (one carbon)合成途径,其核心酶系是甘氨酸裂解酶系。在前期研究中,我们在甘氨酸裂解酶系H-蛋白"解开自保护"过程的研究中初步锁定了H-蛋白空腔内的潜在关键氨基酸残基为Ser-67、Asp-68和Tyr-70,并且证明Ser-67位点对甘氨酸酶系的整体酶活有重要影响。本文对H-蛋白的Asp-68和Tyr-70位点进行了侧链带正电突变(H-D68K、H-D68H、H-D68R和H-Y70K、H-Y70H、H-Y70R突变体),以及侧链非极性突变(H-D68G、H-D68V、H-D68M、H-D68L和H-Y70G、H-Y70V、H-Y70M、H-Y70L突变体),并测定了各突变体在甘氨酸裂解方向上的酶活。结果发现,Asp-68位带正电突变倾向降低甘氨酸酶系的整体酶活,Asp-68位非极性突变、Tyr-70位带正电突变及非极性突变在总体上倾向于维持或提升整体酶活。其中,相对野生型H-蛋白,H-D68R突变体的酶活下降了90.2%,H-Y70R、H-D68G和H-Y70L突变体的酶活分别提高了75.6%、53.6%和146%。硫辛酰胺与H-蛋白空腔内的氨基酸相互作用的分析结果表明,甘氨酸裂解酶系整体酶活的变化是由于H-蛋白的68和70位残基的突变阻碍或促进硫辛酰胺的释放。 展开更多
关键词 C1合成 还原甘酸途径 酶系 H-蛋白
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重组同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的表达纯化及表征
18
作者 王利群 孙培培 +2 位作者 曹利民 奚学志 王炜煜 《医药导报》 CAS 2015年第S01期4-7,共4页
目的研究以包涵体形式表达的重组同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的表达、纯化,对其活性进行检测并对其酶学性质进行表征.方法将同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的重组表达载体pET-15 b/rHCYase转化大肠埃希菌BL21中,进行优化大量表达.使用Ni^(2+)... 目的研究以包涵体形式表达的重组同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的表达、纯化,对其活性进行检测并对其酶学性质进行表征.方法将同型半胱氨酸α,γ-裂解酶的重组表达载体pET-15 b/rHCYase转化大肠埃希菌BL21中,进行优化大量表达.使用Ni^(2+)亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,再通过His-Trap脱盐柱脱盐,采用MBTH法检测目的蛋白活性,并对该酶进行了表征.结果重组蛋白在大肠埃希菌中可以高效表达,产量为204 mg·L^(-1),比活约206 U·mg^(-1).相对分子质量为45200.重组酶的最适反应温度为35℃,酶活性稳定的温度范围为20~35℃.重组酶的最适反应pH为7.5,4℃下在pH7.5的缓冲溶液中保温5h酶稳定性最高.结论成功克隆和表达了rHCYase蛋白,并得到高产高酶活的可溶性蛋白,对同型半胱氨酸检测试剂的开发有一定的潜在应用价值. 展开更多
关键词 同型半胱酸α γ- 表达纯化 表征
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重组蛋氨酸裂解酶的表达、复性及活性研究 被引量:6
19
作者 孔晨虹 夏立亮 +3 位作者 徐顺利 于源华 蒋琴 杨佳新 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期189-193,共5页
探索以包涵体形式表达的重组蛋氨酸裂解酶的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。将阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶重组表达载体PET-15b-mgl1转化大肠杆菌BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,并对表达条件进行优化,获得大量表达。通过... 探索以包涵体形式表达的重组蛋氨酸裂解酶的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。将阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶重组表达载体PET-15b-mgl1转化大肠杆菌BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,并对表达条件进行优化,获得大量表达。通过对包涵体的纯化及复性研究,检测重组蛋氨酸裂解酶的免疫活性及酶活性。Western blotting结果表明,重组蛋氨酸裂解酶免疫小鼠制备的多抗可以和从阴道毛滴虫中提取的天然蛋氨酸裂解酶发生特异性反应。活性检测结果显示复性蛋氨酸裂解酶有活性,复性效率达到25%左右。以包涵体形式表达的蛋氨酸裂解酶经变性、纯化及复性后,获得大量有活性的酶,为深入了解其结构、功能及酶学性质,开展其在临床检测中的应用研究奠定基础。 展开更多
关键词 同型半胱 基因表达 包涵体 复性
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高密度发酵产酪氨酸酚裂解酶及催化合成L-DOPA 被引量:4
20
作者 徐冰冰 雷庆子 +3 位作者 曾伟主 未雅楠 黄科峰 周景文 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期7-14,共8页
为了提高酪氨酸酚裂解酶(tyrosine phenol-lyase,TPL)的表达量和酶活,使之更高效地催化合成左旋多巴(3,4-2-dihydroxylphenylalanine,L-DOPA),在摇瓶优化的基础上,研究了溶氧控制策略、补料策略、诱导温度和诱导策略对菌体生长、TPL酶活... 为了提高酪氨酸酚裂解酶(tyrosine phenol-lyase,TPL)的表达量和酶活,使之更高效地催化合成左旋多巴(3,4-2-dihydroxylphenylalanine,L-DOPA),在摇瓶优化的基础上,研究了溶氧控制策略、补料策略、诱导温度和诱导策略对菌体生长、TPL酶活和L-DOPA产量的影响。结果表明,在5 L发酵罐中25℃诱导条件下,采用DO-stat补料策略控制罐内溶氧的体积分数为20%,菌体浓度、TPL酶活和催化合成L-DOPA产量较分批培养分别提高了17.9%、57.7%和27.8%。诱导后控制溶氧体积分数在40%相比于20%更利于TPL的表达,酶活相比于20%的DO的提高了33.8%。通过优化起始诱导时间,在菌体生长的对数前期(OD 600=7)诱导,细胞浓度提高到51.2 g/L,酶活提高到2.43 U/mL,L-DOPA产量为56.58 g/L,较分批培养分别提高了64.1%、170%和209.2%。初步实现了重组大肠杆菌高密度培养生产TPL,为L-DOPA产业化研究奠定了基础。 展开更多
关键词 酸酚 L-DOPA 溶氧 DO-start 诱导策略
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