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流式细胞仪样品预处理系统的设计与实现
1
作者 栾永胜 刘佳琳 +3 位作者 刘萍 吴学丽 周娜 栾传磊 《分析测试技术与仪器》 CAS 2024年第1期23-27,共5页
根据流式细胞仪对样品“均一化”的需求,研制了一套基于微流控细胞分选技术的流式细胞仪样品预处理系统,装置可以实现对粒径小于100µm细胞或微粒的驱动和分选.系统主要包含微流控分选芯片和样品驱动模块两部分,通过聚焦不同位置,... 根据流式细胞仪对样品“均一化”的需求,研制了一套基于微流控细胞分选技术的流式细胞仪样品预处理系统,装置可以实现对粒径小于100µm细胞或微粒的驱动和分选.系统主要包含微流控分选芯片和样品驱动模块两部分,通过聚焦不同位置,实现了对不同粒径细胞/颗粒的有效分离.系统无需对细胞进行标记处理,经分选的细胞便于后续流式细胞仪检测.经验证,系统能够有效去除牡蛎血淋巴细胞样品中的大粒子杂质,提高细胞样品的稳定性和均一性,增加流式细胞仪检测结果的准确性. 展开更多
关键词 流式细胞仪 样品预处理 微流控 细胞分选
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流式细胞仪共享平台建设与标准化管理探索
2
作者 陈云凤 龙钊 +3 位作者 吴映霞 许佳玲 罗剑文 张以顺 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2023年第4期171-174,249,共5页
生物学国家级实验教学示范中心利用现代化预约管理系统,将学院的流式细胞仪纳入统一管理,探讨流式细胞仪共享平台建设及其标准化管理。实践表明,流式细胞仪数据的准确性和可重复性得到有力保障,仪器利用率提升和使用寿命延长,有助于学... 生物学国家级实验教学示范中心利用现代化预约管理系统,将学院的流式细胞仪纳入统一管理,探讨流式细胞仪共享平台建设及其标准化管理。实践表明,流式细胞仪数据的准确性和可重复性得到有力保障,仪器利用率提升和使用寿命延长,有助于学生掌握流式技术和研究方法,充分发挥了流式细胞仪对科研和教学的支撑作用。 展开更多
关键词 流式细胞仪 共享平台 建设与管理 维护
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流式细胞仪检测香花油茶、越南油茶基因组大小方法的建立及应用 被引量：1
3
作者 吴方圆 蔡娅 +4 位作者 郝丙青 贾艳霞 叶航 张照远 马锦林 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第8期1542-1550,共9页
为香花油茶(Camellia osmantha)、越南油茶(C. vietnamensis)优良品系基因组大小遗传多样性分析及特异种质筛选、倍性差异分析提供参考,针对解离液种类、内参植物、试验材料组织器官等关键环节,以细胞核解离情况、次生代谢物质降解情况... 为香花油茶(Camellia osmantha)、越南油茶(C. vietnamensis)优良品系基因组大小遗传多样性分析及特异种质筛选、倍性差异分析提供参考,针对解离液种类、内参植物、试验材料组织器官等关键环节,以细胞核解离情况、次生代谢物质降解情况、细胞峰出峰稳定情况、主峰清晰程度、主杂峰分离程度、取材容易程度、内参与待测样品基因组大小差异情况、基因组大小测定准确性及变异系数等方面为评价指标,构建基于香花油茶良种义禄(Camellia osmantha var. Yilu)、越南油茶优良品系鸿鸪23(C. vietnamensis var. Hongu 23)为试材的流式细胞术基因组大小检测技术体系,并用于香花油茶、越南油茶优良品系的测定。结果表明:研究发现4种常见的解离液WPB、Tris-MgCl2、OTTO、mGb中WPB、mGb解离效果较好,内参植物以豌豆、玉米为优先,试验材料组织器官以嫩叶或根尖为宜;香花油茶优良品系基因组大小在5.12~9.31 Gb之间变化,均值为7.60 Gb,1号、37号、45号种质在基因组大小分布上存在极端性,推测其存在倍性差异或其亲本间存在种间杂交;越南油茶优良品系基因组大小在9.17~9.85Gb之间变化,均值为9.47 Gb。香花油茶与越南油茶优良品系群体间在基因组大小上存在明显差异。 展开更多
关键词 油茶 基因组大小 流式细胞仪
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基于注册审评的流式细胞仪配套检测试剂的临床评价概述
4
作者 毛勇 鄢峰 +1 位作者 李平 吴丹 《药品评价》 CAS 2023年第5期531-533,共3页
从体外诊断试剂注册技术审评角度出发,以流式细胞仪配套检测试剂为例,从法规依据、临床评价的分类及要求、临床评价的主要关注点等方面进行了阐述,尤其对临床评价的样本量要求、评价指标、对比试剂的选择、临床试验的监查与质控等方面... 从体外诊断试剂注册技术审评角度出发,以流式细胞仪配套检测试剂为例,从法规依据、临床评价的分类及要求、临床评价的主要关注点等方面进行了阐述,尤其对临床评价的样本量要求、评价指标、对比试剂的选择、临床试验的监查与质控等方面进行了重点介绍,旨在为注册申请人对该类产品进行临床评价提供技术指导,同时为技术审评部门对临床评价资料的技术审评提供参考。 展开更多
关键词 药物评价 流式细胞仪 体外诊断试剂 临床试验 注册审评
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流式细胞仪在细胞绝对计数方法中的应用及其进展
5
作者 王圣民 王明月 金光弼 《青岛医药卫生》 2023年第1期67-71,共5页
细胞绝对计数是一项重要的实验参数,对于医学研究以及临床检验等方面具有重要的作用。细胞绝对计数的发展从使用血细胞计数板到应用流式细胞仪,已衍生出多种方法。本文将阐述不同的细胞绝对计数方法,比较不同方法的原理及优缺点,为医学... 细胞绝对计数是一项重要的实验参数,对于医学研究以及临床检验等方面具有重要的作用。细胞绝对计数的发展从使用血细胞计数板到应用流式细胞仪,已衍生出多种方法。本文将阐述不同的细胞绝对计数方法,比较不同方法的原理及优缺点,为医学研究以及临床检验等方面选择适宜的绝对细胞计数方法提供参考。 展开更多
关键词 细胞计数 流式细胞仪 全自动细胞计数仪
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自配试剂在COULTER流式细胞仪检测HLA-B27中的应用探讨 被引量：3
6
作者 李山 秦雪 +1 位作者 黄军强 林发全 《广西预防医学》 2005年第3期164-165,共2页
目的探讨美国COULTER流式细胞仪试剂国产化问题。方法将自配全血溶解试剂、鞘液及清洗液的理化性质、精密度、准确度与原装试剂进行对比分析。结果自配试剂与原装试剂理化性质一致,采用自配试剂连续10天测定20份病人标本HLA-B27并与原... 目的探讨美国COULTER流式细胞仪试剂国产化问题。方法将自配全血溶解试剂、鞘液及清洗液的理化性质、精密度、准确度与原装试剂进行对比分析。结果自配试剂与原装试剂理化性质一致,采用自配试剂连续10天测定20份病人标本HLA-B27并与原装试剂对比,结果两者呈高度正相关r>0.98。结论自配美国COULTER流式细胞仪试剂完全可以代替原装进口试剂进行HLA-B27的检测。 展开更多
关键词 自配试剂 流式细胞仪检测 B27 HLA COULTER流式细胞仪 理化性质 对比分析 进口试剂 国产化 清洗液 精密度 准确度 正相关 美国
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利用流式细胞仪计数微型浮游生物的方法 被引量：23
7
作者 李胜男 王秀娟 +2 位作者 周建 孔繁翔 史小丽 《湖泊科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第5期757-766,共10页
微型浮游生物(细胞粒径<20μm)在水生生态系统的物质循环和能量流动中起着重要的作用,对其丰度的准确测定是进一步研究微型浮游生物在不同水生生态系统中作用的重要基础.相对于传统的显微镜检测技术,流式细胞术不仅具有分析速度快、... 微型浮游生物(细胞粒径<20μm)在水生生态系统的物质循环和能量流动中起着重要的作用,对其丰度的准确测定是进一步研究微型浮游生物在不同水生生态系统中作用的重要基础.相对于传统的显微镜检测技术,流式细胞术不仅具有分析速度快、灵敏度和准确度高等优点,而且可以同时测量单个细胞的多个生理参数.不同类型微型浮游生物流式细胞术的应用原理是不同的.对于自养型浮游藻类,主要根据藻体内色素的自发荧光对其进行分辨和计数;而对于异养型细菌、原生动物及浮游病毒等,还需借助外源荧光染料对细胞核酸染色后再进行分析.目前流式细胞术已成为浮游藻类和异养细菌丰度检测的常规方法,但是,由于原生动物具有更大的细胞体积且在自然水体中丰度较低;而浮游病毒粒径又太小,甚至低于光源激发波长,因此流式细胞术应用一直受到限制,直到近10年来才有相关报道.本文对运用流式细胞术计数浮游藻类、浮游细菌、原生动物和浮游病毒的具体原理、方法和进展进行综述,并对流式细胞仪在未来水生微生物学领域的应用进行展望. 展开更多
关键词 流式细胞仪 浮游植物 异养细菌 原生动物 病毒 色素 荧光染料
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利用流式细胞仪研究温度对两种藻竞争的影响 被引量：20
8
作者 谭啸 孔繁翔 +3 位作者 曹焕生 史小丽 于洋 张民 《湖泊科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期419-424,共6页
为研究温度对微囊藻优势形成的影响,本试验利用流式细胞仪研究了不同温度时铜绿微囊藻(Microcystis aerugi- nosa)与蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)间的竞争关系,在单独培养和混合培养条件下分别对两种藻细胞密度比值和细胞内叶绿... 为研究温度对微囊藻优势形成的影响,本试验利用流式细胞仪研究了不同温度时铜绿微囊藻(Microcystis aerugi- nosa)与蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)间的竞争关系,在单独培养和混合培养条件下分别对两种藻细胞密度比值和细胞内叶绿素a(Chla)荧光强度进行了测定．结果表明在本试验条件下,随着温度的升高(18℃,25℃和32℃),混合培养组中微囊藻优势逐渐明显,小球藻Chla荧光强度随着温度的升高而升高,微囊藻Chla荧光强度随着温度的升高却有所降低．说明在光照适宜、高营养盐的水体中,较高的温度对铜绿微囊藻成为优势种具有明显的促进作用,进而影响着微囊藻水华的形成． 展开更多
关键词 流式细胞仪 温度 铜绿微囊藻 蛋白核小球藻 竞争
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用流式细胞仪鉴定中华猕猴桃的多倍体 被引量：33
9
作者 朱道圩 杨宵 +3 位作者 郅玉宝 易明林 理莎莎 符真珠 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期905-908,共4页
中华猕猴桃叶中酚类物质多而黏性较大,对流式细胞仪检测多有不便。文章参照已有方法,改进细胞核提取液配方和提取方法,建立了快速、准确鉴定秋水仙素诱导中华猕猴桃多倍体的方法,效果较好。
关键词 秋水仙素 中华猕猴桃 流式细胞仪 倍性鉴定
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流式细胞仪鉴定猕猴桃倍性技术研究 被引量：24
10
作者 施春晖 徐兰兰 +1 位作者 王晓庆 骆军 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期845-849,共5页
利用流式细胞仪(Flow cytometer,FCM)对不同倍性猕猴桃DNA的相对含量进行测定,建立一套简易、快速的鉴定猕猴桃倍性方法。以二倍体"红阳"猕猴桃为对照,‘81-5'、‘皖翠'猕猴桃为试材,通过筛选最优鉴定叶片部位;改良... 利用流式细胞仪(Flow cytometer,FCM)对不同倍性猕猴桃DNA的相对含量进行测定,建立一套简易、快速的鉴定猕猴桃倍性方法。以二倍体"红阳"猕猴桃为对照,‘81-5'、‘皖翠'猕猴桃为试材,通过筛选最优鉴定叶片部位;改良解离液配方;提高滤膜的目数;过滤次数;增加离心次数等优化鉴定技术。结果表明,露地栽培条件下,茎尖下初展叶是倍性鉴定的最佳部位;两次离心;解离液中2%PVP-30;500目滤膜抽滤两次可以有效解决仪器堵管现象,有效去除杂质峰并获得清晰样品峰。通过优化后的鉴定技术可实现同时测定2个以上倍性的猕猴桃混合样品。 展开更多
关键词 流式细胞仪 猕猴桃 倍性鉴定 峰值
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使用流式细胞仪分离精子进行仔猪性别控制的研究 被引量：12
11
作者 曾有权 陆阳清 +3 位作者 杨小淦 卢晟盛 张明 卢克焕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1163-1169,共7页
本研究旨在探索流式细胞仪分离精子在猪性别控制中的应用。使用流式细胞仪分离猪XY精子,而后通过母猪输卵管授精生产"预知"性别的仔猪,并使用吖啶橙染色法检测粗分离对精子核酸含量的影响。结果,成功利用分离获得的猪X和Y精... 本研究旨在探索流式细胞仪分离精子在猪性别控制中的应用。使用流式细胞仪分离猪XY精子,而后通过母猪输卵管授精生产"预知"性别的仔猪,并使用吖啶橙染色法检测粗分离对精子核酸含量的影响。结果,成功利用分离获得的猪X和Y精子对母猪进行输卵管授精,母猪怀孕率、产仔率均为100%;输Y精子母猪产仔雄性率100%(♂6/6),对照母猪产仔雄性率57.14%(♂8/14);3头输X精子母猪产母仔率91.67%(♀11/12),对照母猪产雌性仔猪40%(♀2/5);使用性别分离精子不影响母猪的怀孕率、产仔率,但窝产仔数较低;吖啶橙染色法检测结果表明,流式细胞仪粗分离对猪精子核酸含量没有显著影响(P>0.05)。本研究结果提示,使用流式细胞仪分离精子授精可以有效改变仔猪的性别比例。本研究结果为猪分离精子性别控制技术的推广应用奠定了基础。 展开更多
关键词 流式细胞仪 分离精子 性别控制 仔猪 核酸
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外周血循环中肺癌细胞的流式细胞仪定量分析 被引量：12
12
作者 董强刚 江晓丰 +3 位作者 沙慧芳 李鲁萍 乔生军 许凯黎 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期31-34,共4页
目的　运用流式细胞仪定量分析外周血循环中肺癌细胞。方法　外周血经Ficoll梯度离心分离单核细胞组分,后者用CD45、细胞角蛋白(CK)及肺癌特异性单抗(2F7/S5A)染色后,应用流式细胞仪检测CD45- CK+ 2F7/S5A+ 细胞。然后计算每升血中上述... 目的　运用流式细胞仪定量分析外周血循环中肺癌细胞。方法　外周血经Ficoll梯度离心分离单核细胞组分,后者用CD45、细胞角蛋白(CK)及肺癌特异性单抗(2F7/S5A)染色后,应用流式细胞仪检测CD45- CK+ 2F7/S5A+ 细胞。然后计算每升血中上述细胞含量。结果　(1)外周血单核细胞的表型为CD45+ CK- 2F7/S5A- ,而小细胞和非小细胞肺癌细胞系均为CD45- CK+ 2F7/S5A+ 。因此,应用此方法能从106 白细胞中检测到1个肺癌细胞,敏感性达到每毫升血中检测到5 个肺癌细胞;(2)15 例正常人及7 例肺部良性疾患外周血中CD45- CK+ 2F7/S5A+ 细胞均为阴性,而40例肺癌患者外周血14 例发现阳性细胞,阳性率达35 % ,阳性细胞含量平均为1×105 /L。结论　本方法具有较好的敏感性和特异性。 展开更多
关键词 肺癌 外周血 流式细胞仪 定量分析
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利用流式细胞仪快速鉴定桑树细胞的染色体倍数性 被引量：16
13
作者 韩莎 李四军 +2 位作者 许晓东 苏超 焦锋 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1042-1048,共7页
用化学和物理的方法诱导桑树染色体加倍通常发生于分生组织的部分细胞,形成的无性繁殖个体多为混倍体。为了快速、准确鉴定桑树混倍体及倍数性细胞比率,利用流式细胞仪,以细胞群体为检测对象,从DNA水平对供试桑树诱变株系的叶、芽、茎3... 用化学和物理的方法诱导桑树染色体加倍通常发生于分生组织的部分细胞,形成的无性繁殖个体多为混倍体。为了快速、准确鉴定桑树混倍体及倍数性细胞比率,利用流式细胞仪,以细胞群体为检测对象,从DNA水平对供试桑树诱变株系的叶、芽、茎3个部位的细胞进行染色体倍数性鉴定。经染色体压片法鉴定为二倍体或三倍体的供试植株,用流式细胞仪检测的倍数性结果完全一致;经染色体压片法鉴定为四倍体的供试植株,用流式细胞仪检测仅有编号为403-1的诱变材料为四倍体,而编号为403-9的诱变材料为三倍体,其余的材料则均以二倍体、四倍体细胞构成的混倍体形式存在,且倍数性细胞比率在株系和部位间存在差异。采用流式细胞仪能准确检测桑树细胞的染色体倍数性,可促进桑树混倍体形成机制和多倍体无性分离纯化规律的研究,加快优良单株筛选,提高桑树多倍体育种效率。 展开更多
关键词 桑树 染色体倍数性 流式细胞仪 混倍体
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基于灰色预测恢复算法的流式细胞仪多参数提取 被引量：12
14
作者 张文昌 祝连庆 +2 位作者 娄小平 孟晓辰 刘超 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1660-1665,共6页
针对流式细胞仪测控系统由于脉冲信号信息不完整导致多参数提取存在误差的问题,提出了一种基于灰色预测恢复算法的多参数提取方法。利用基于GM(1,1)模型的灰色预测梯形递推信号恢复算法对脉冲信号进行高精度恢复,提高信号的信息完整性... 针对流式细胞仪测控系统由于脉冲信号信息不完整导致多参数提取存在误差的问题,提出了一种基于灰色预测恢复算法的多参数提取方法。利用基于GM(1,1)模型的灰色预测梯形递推信号恢复算法对脉冲信号进行高精度恢复,提高信号的信息完整性。同时,对直流恢复模块进行了优化设计,通过高速数字信号处理芯片对脉冲信号模拟偏移量及直流恢复进行反馈,提高直流恢复精度及信号信噪比。最后,搭建了测控系统实验环境,对该系统进行了验证。实验结果表明,多参数提取精度均在±1.5%范围内;同时可以将流式细胞仪检测细胞的速度提高到10万个/s。 展开更多
关键词 流式细胞仪 多参数提取 信号恢复 GM(1 1)模型 直流恢复
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流式细胞仪测定成人与儿童中性粒细胞功能 被引量：16
15
作者 俞晔珩 朱文胜 王晓川 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期101-104,共4页
目的 建立评价中性粒细胞吞噬和氧化功能的流式细胞仪方法。方法 取健康成人、儿童外周血,佛波 脂(PMA)刺激中性粒细胞活化后吞噬并氧化二氢若丹明123(DHR)为可发出绿色荧光的若丹明123,用流式细胞 仪检测阳性细胞以评价中性粒细胞吞噬... 目的 建立评价中性粒细胞吞噬和氧化功能的流式细胞仪方法。方法 取健康成人、儿童外周血,佛波 脂(PMA)刺激中性粒细胞活化后吞噬并氧化二氢若丹明123(DHR)为可发出绿色荧光的若丹明123,用流式细胞 仪检测阳性细胞以评价中性粒细胞吞噬和氧化功能。结果10μg／mL佛波脂(PMA)可有效刺激中性粒细胞吞噬 和氧化功能。20例健康成人无刺激时中性粒细胞活化率<10％[(4±3)％],10μg／mL PMA刺激后中性粒细胞活 化率均>90％[(96±3)％];19例健康儿童无刺激时中性粒细胞活化率<10％[(5±4)％],10μg／mL PMA刺激后 中性粒细胞活化率均>90％[(95±4)％];8例足月儿脐带血无刺激时中性粒细胞活化率为(7±4)％,10μg／mL PMA刺激后中性粒细胞活化率(89±6)％。采用刺激指数(SI),PMA刺激与对照荧光强度几何均数,也可用于评 价中性粒细胞刺激后活化情况,但变异较大。结论 流式细胞仪-DHR分析可用于临床评价成人与儿童中性粒 细胞吞噬和氧化功能。 展开更多
关键词 中性粒细胞活化 刺激 吞噬 流式细胞仪 PMA 健康成人 胞吞 荧光强度 变异 脐带血
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应用流式细胞仪检测CD34^+细胞方法学评价 被引量：10
16
作者 韩晓红 石远凯 +2 位作者 刘鹏 王军 冯奉仪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期153-154,共2页
关键词 外周血 造血干细胞 CD34^+细胞 流式细胞仪
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流式细胞仪分离精子法的研究进展 被引量：32
17
作者 陆阳清 张明 卢克焕 《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第3期26-30,共5页
以X精子和Y精子的DNA含量差别为基础的流式细胞仪分离精子技术是有效的哺乳动物性别控制方法。目前,流式细胞仪分离精子的速度与上世纪90年代初期相比已提高了30多倍,以3000个/秒的常规速度分离X精子或Y精子的准确率可达到85%～90%。迄... 以X精子和Y精子的DNA含量差别为基础的流式细胞仪分离精子技术是有效的哺乳动物性别控制方法。目前,流式细胞仪分离精子的速度与上世纪90年代初期相比已提高了30多倍,以3000个/秒的常规速度分离X精子或Y精子的准确率可达到85%～90%。迄今,用分离精子人工授精已产下了数万头的动物后代,而分离人的精子也开始应用到了避免X染色体连锁遗传疾病的生殖医学工程中。 展开更多
关键词 流式细胞仪 分离方法 精子 哺乳动物 性别控制 动物繁殖技术
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用流式细胞仪检测活体鲍倍性 被引量：11
18
作者 丁君 张国范 +1 位作者 宋坚 巩宁 《水产科学》 CAS 北大核心 2000年第6期14-16,共3页
分别取皱纹盘鲍 (Haliotisdiscushannai)足肌和血液制样 ,经DAPI染色后 ,用PartecPAS -Ⅲ型流式细胞仪测定其倍性 ,试验证明三倍体鲍的DNA相对含量是二倍体的 1 5倍 ,切足法和抽取血液法两种制样方法均能得到满意结果 。
关键词 皱纹盘鲍 倍性检测 流式细胞仪 活体检测
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流式细胞仪在果树作物倍性鉴定上的应用 被引量：19
19
作者 朱道圩 杨宵 +2 位作者 理莎莎 符真珠 毛俊 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第24期6480-6482,共3页
综述了流式细胞仪的发展历史、工作原理、使用方法及其在果树作物倍性鉴定上的应用进展,并对存在问题及今后的研究提出了建议。
关键词 流式细胞仪 果树作物 倍性鉴定
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流式细胞仪在免疫学研究中的应用 被引量：18
20
作者 刘涛 张巍 +2 位作者 王凤阳 杜丽 成鹰 《动物医学进展》 CSCD 2008年第3期102-105,共4页
随着现代激光技术、电子检测技术和电子计算机技术等的迅速发展,流式细胞仪(FCM)在免疫学、生物学、遗传学、血液学、临床检验等领域中得到了更加广泛的应用。在免疫学研究领域,FCM以快速、灵活及定量等特点被广泛地应用于基础研究和临... 随着现代激光技术、电子检测技术和电子计算机技术等的迅速发展,流式细胞仪(FCM)在免疫学、生物学、遗传学、血液学、临床检验等领域中得到了更加广泛的应用。在免疫学研究领域,FCM以快速、灵活及定量等特点被广泛地应用于基础研究和临床治疗的各个方面,尤其是与单克隆抗体技术的结合,使其在免疫分型、分选、免疫监测、免疫细胞的系统发生及特性研究等方面发挥了重要的作用,成为现代免疫学研究不可缺少的工具。该文对近年来流式细胞仪在免疫学研究中的应用进展进行了综述。 展开更多
关键词 流式细胞仪 免疫学 检测
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