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巴西苏木素对MRSA丙氨酸消旋酶抑制作用的初步研究
1
作者 黎瑞 陈泽慧 +3 位作者 周小仙 余孟飞 杨智芳 李明哲 《遵义医科大学学报》 2024年第1期47-52,61,共7页
目的 探讨巴西苏木素(BN)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)丙氨酸消旋酶(Alr)的抑制作用。方法 PCR扩增MRSA丙氨酸消旋酶基因Alr,通过使用酶切和连接技术构建重组表达质粒pET-28a-Alr,然后将其转化至E.coil BL21(DE3)中,利用IPTG诱导表... 目的 探讨巴西苏木素(BN)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)丙氨酸消旋酶(Alr)的抑制作用。方法 PCR扩增MRSA丙氨酸消旋酶基因Alr,通过使用酶切和连接技术构建重组表达质粒pET-28a-Alr,然后将其转化至E.coil BL21(DE3)中,利用IPTG诱导表达Alr,并通过镍离子亲和层析法进行纯化;试验分为对照组MOCK(不作任何处理)、不同浓度BN组(8、16、32、64μg/mL),分别测定不同浓度BN对Alr活性的影响;通过细胞热位移分析(CETSA)实验测定BN对Alr蛋白热稳定性的影响;利用软件AutoDock Vina将BN与Alr进行分子对接,预测两者之间的结合模式。结果 成功诱导表达纯化Alr蛋白,且其具备将L-丙氨酸外消旋为D-丙氨酸的活性。与对照组相比,不同浓度的BN均能够抑制Alr的活性,其中在64μg/mL BN作用下,抑制率达到50%(P<0.0001)。CETSA实验结果显示,在55.9~59.5℃下BN处理后的Alr蛋白热稳定性明显高于Mock组(P<0.0001)。分子对接结果显示BN与Alr之间的结合能为-8.0 kcal/mol,与Alr活性位点内的Gly221、Phe169、Arg219、Ser204、Ile222和Tyr43形成氢键,与其活性位点通道的Ile352、Tyr354形成π-π键及疏水作用,与Asn203形成疏水作用。结论 BN对Alr的活性具有抑制作用,可能是因为BN与Alr蛋白活性位点处的结合能力相关。 展开更多
关键词 巴西苏木素 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 丙氨酸消旋酶 分子对接
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血清前列腺特异性抗原和α-甲酰辅酶A消旋酶水平对前列腺癌根治术后患者预后的预测价值 被引量：2
2
作者 郭晓翔 朱海松 +1 位作者 张超 刘起 《新乡医学院学报》 CAS 2023年第11期1056-1060,共5页
目的探讨血清前列腺特异性抗原(PSA)、α-甲酰辅酶A消旋酶(AMACR)水平在前列腺癌根治术前后的变化及其对预后的预测价值。方法选择2017年1月至2020年1月驻马店市中心医院收治的128例前列腺癌患者为研究对象。患者均行前列腺癌根治术治疗... 目的探讨血清前列腺特异性抗原(PSA)、α-甲酰辅酶A消旋酶(AMACR)水平在前列腺癌根治术前后的变化及其对预后的预测价值。方法选择2017年1月至2020年1月驻马店市中心医院收治的128例前列腺癌患者为研究对象。患者均行前列腺癌根治术治疗,根据其预后情况分为预后良好组(n=97)和预后不良组(n=31)。收集患者的年龄、体质量指数(BMI)、肿瘤最大径、前列腺体积、病理类型、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度、Gleason评分、切缘等基本资料。分别于术前及术后7 d,抽取患者空腹静脉血5 mL,1500 r·min^(-1)离心10 min,留取血清,采用酶联免疫吸附法测定血清PSA、AMACR水平。比较患者手术前后的血清PSA、AMACR水平,采用单因素分析影响前列腺癌根治术后患者预后的相关因素,logistic回归分析影响前列腺癌根治术后患者预后的危险因素,受试者操作特征(ROC)曲线分析血清PSA、AMACR水平对前列腺癌根治术后患者预后不良的预测价值。结果前列腺癌患者根治术后的血清PSA、AMACR水平显著低于术前(P<0.05)。预后不良组与预后良好组患者的年龄、BMI、肿瘤最大径、前列腺体积、病理类型比较差异无统计学意义(P>0.05);预后不良组患者TNM分期Ⅲ~Ⅳ期占比、淋巴结转移占比、低分化占比、Gleason评分≥7分占比、切缘阳性占比及术前血清PSA、AMACR水平显著高于预后良好组(P<0.05);logistic分析结果显示,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、低分化程度、高Gleason评分、切缘阳性及高血清PSA、AMACR水平是影响前列腺癌根治术后患者预后不良的危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清PSA、AMACR水平预测前列腺癌根治术后患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.796、0.824,二者联合预测前列腺癌根治术后患者预后不良的AUC为0.916;血清PSA与AMACR水平联合预测前列腺癌根治术后患者预后不良的AUC显著大于血清PSA和AMACR水平单独预测(P<0.05)。结论血清PSA、AMACR水平异常升高是前列腺癌根治术后患者预后不良的危险因素,二者联合检测对前列腺癌根治术后患者预后不良有较高的预测价值。 展开更多
关键词 前列腺特异性抗原 α-甲酰辅酶A消旋酶 前列腺癌根治术 预后
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人类丝氨酸消旋酶的同源模建及其与多肽类抑制剂的分子对接 被引量：7
3
作者 赵勇山 郑清川 +2 位作者 张红星 楚慧郢 孙家钟 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第3期417-422,共6页
利用同源模建和分子动力学模拟方法构建了人类丝氨酸消旋酶(hSR)的三维结构,并利用profile-3D和procheck方法评估了模型的可靠性.在此基础上用分子对接程序(affinity)将多肽类抑制剂A和B分别与hSR进行对接,获得了其复合物结构的理论模型... 利用同源模建和分子动力学模拟方法构建了人类丝氨酸消旋酶(hSR)的三维结构,并利用profile-3D和procheck方法评估了模型的可靠性.在此基础上用分子对接程序(affinity)将多肽类抑制剂A和B分别与hSR进行对接,获得了其复合物结构的理论模型.通过配体与受体之间相互作用能和结构分析给出了此类抑制剂与hSR的具体结合方式,明确了hSR与此类抑制剂结合时起重要作用的氨基酸残基,为基于人类丝氨酸消旋酶三维结构的药物设计提供重要的参考信息. 展开更多
关键词 人类丝氨酸消旋酶 分子动力学模拟 分子对接 同源模建
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恶臭假单胞菌丙氨酸消旋酶基因的克隆、序列分析及表达 被引量：2
4
作者 曹芹 赵智 +2 位作者 张英姿 王宇 丁久元 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期80-84,共5页
从恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)200的基因组出发,用PCR方法克隆到两个独立作用的丙氨酸消旋酶基因,称之为dadX和alr。DadX编码357个氨基酸长的多肽,计算分子量为38.82kDa,alr编码409个氨基酸长的多肽,计算分子量为44.182kDa。序列... 从恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)200的基因组出发,用PCR方法克隆到两个独立作用的丙氨酸消旋酶基因,称之为dadX和alr。DadX编码357个氨基酸长的多肽,计算分子量为38.82kDa,alr编码409个氨基酸长的多肽,计算分子量为44.182kDa。序列分析显示,DadX的氨基酸序列与Pseudomonas putidaKT2440,铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)和大肠杆菌(Escherichia coli)的DadX比较,相似性分别为96.64%、71.99%、44.88%和47.37%。Alr的氨基酸序列与Pseudomonas putidaKT2440比较,同源性为94.38%,而与铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)、鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)和大肠杆菌(E.coli)的Alr比较,同源性均较低,分别为22.89%、25.72%和26.44%。在P.putida200的DadX和Alr氨基酸序列中部发现有对于酶活性至关重要的保守区域,如磷酸吡哆醛(PLP)结合位点。DadX和alr在大肠杆菌中得到表达,DadX丙氨酸消旋酶只对丙氨酸有消旋作用,而Alr丙氨酸消旋酶可以作用于丙氨酸和丝氨酸两种底物,且对丝氨酸特异性更高。Alr的表达不依赖于外源启动子,说明在其结构基因上游存在启动子结构。 展开更多
关键词 恶臭假单胞菌 丙氨酸消旋酶 基因克隆 表达
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丙氨酸消旋酶的研究进展 被引量：3
5
作者 张彩凤 徐书景 +4 位作者 李艳红 薛张伟 马宁 赵宝华 鞠建松 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第15期8836-8839,共4页
简要介绍了丙氨酸消旋酶的分类、结构特征和催化机制。
关键词 丙氨酸消旋酶 催化机制 D-丙氨酸 5'-磷酸吡哆醛
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抗菌药物治疗疾病的新靶位--丙氨酸消旋酶 被引量：4
6
作者 刘晓琴 石亚伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期104-108,共5页
丙氨酸消旋酶是以磷酸吡哆醛为辅酶,催化L-丙氨酸与D-丙氨酸相互转化的一种酶,它广泛分布在低等生物,而不存在于人类等高等真核生物中.来自不同物种的丙氨酸消旋酶一级结构同源性较高,其大多功能单位为同源二聚体,拥有2个相同的活性中心... 丙氨酸消旋酶是以磷酸吡哆醛为辅酶,催化L-丙氨酸与D-丙氨酸相互转化的一种酶,它广泛分布在低等生物,而不存在于人类等高等真核生物中.来自不同物种的丙氨酸消旋酶一级结构同源性较高,其大多功能单位为同源二聚体,拥有2个相同的活性中心,每个活性中心均是由来自不同亚基的2个保守残基共同组成.丙氨酸消旋酶催化生成的产物D-丙氨酸是合成细菌细胞壁肽聚糖的重要成分,也是调节细菌孢子萌芽的关键因子.因而丙氨酸消旋酶与由细菌引起的肺结核、炭疽热、中耳炎等疾病密切相关.近年来丙氨酸消旋酶已成为设计抗菌药物的又一理想靶位.本文从丙氨酸消旋酶的结构、功能、作用机理、抑制剂以及其与疾病的关系等方面进行了阐述. 展开更多
关键词 丙氨酸消旋酶 结构 作用机理 功能 疾病
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肿瘤标志物α-甲基酰基辅酶A消旋酶在前列腺疾病诊断中的价值 被引量：2
7
作者 戴文斌 钱伟庆 +2 位作者 徐俊 孙忠全 宋建达 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期278-281,F0002,共5页
目的观察α-甲基酰基辅酶A消旋酶(P504S)在前列腺病变组织中的表达,以评价其在前列腺疾病中的鉴别诊断价值。方法200例前列腺疾病组织及部分相关转移灶标本,其中前列腺癌(PCa)组织标本77例,前列腺小细胞癌(SCCP)1例,不典型小腺体增生(AS... 目的观察α-甲基酰基辅酶A消旋酶(P504S)在前列腺病变组织中的表达,以评价其在前列腺疾病中的鉴别诊断价值。方法200例前列腺疾病组织及部分相关转移灶标本,其中前列腺癌(PCa)组织标本77例,前列腺小细胞癌(SCCP)1例,不典型小腺体增生(ASAP)2例,良性前列腺增生(BPH)118例,前列腺上皮内瘤变(HGPIN)2例。应用免疫组织化学EnVision二步法检测P504S在各类病变组织中的表达,此外部分标本还同时检测细胞角蛋白(CK)34βE12及前列腺基底细胞核染色的标记物p63的水平。分析Gleason评分与P504S表达水平的关系、手术方式对P504S表达水平的影响。结果PCa组织标本的P504S阳性率为91.2%(73/80),BPH组织标本的阳性率为0,2例HGPIN组织标本均示P504S+。不同Gleason评分PCa组织标本的P504S阳性率的差异有统计学意义(x^2=35.052,P<0.01),不同手术方式获取的PCa组织标本中P504S阳性率的差异也有统计学意义(x^2=18.882,P<0.05)。BPH组织标本中,绝大多数腺体均具有完整的基底层,34βE12的阳性率达98.3%;PCa组织标本中,70例典型缺乏基底层,10例可见不完整基底层。2例HGPIN组织标本的腺体基底细胞34βE12也呈阳性表达,但相对BPH组织标本强度有所减弱。本研究中仅83例组织标本进行p63标记,所有BPH组织标本(39例)都呈阳性表达;而44例PCa组织标本中,39例呈阴性表达,5例呈阳性表达。结论检测P504S蛋白表达有助于辅助PCa的病理诊断,特别适用于体积较小的前列腺穿刺标本的良、恶性鉴别。P504S与34βE12、p63联合应用则更有帮助,为临床早期发现、早期治疗PCa提供了有力的理论依据。 展开更多
关键词 α-甲基酰基辅酶A消旋酶 前列腺癌 细胞角蛋白 细胞核染色
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铜绿假单胞菌中丙氨酸消旋酶的酶学特性及菌株检测 被引量：2
8
作者 牛晓平 韩卿卿 +2 位作者 何广正 鞠建松 徐书景 《河北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2019年第1期67-75,共9页
铜绿假单胞菌为条件致病菌,是目前各种医院内感染最广泛、最严重的致病菌之一.以分离自公共场所洗手液的菌株6-3为研究对象,其16S rRNA基因与Pseudomonas aeruginosa DSM 50071的16S rRNA基因的一致性为99.8%,初步确定其为铜绿假单胞菌... 铜绿假单胞菌为条件致病菌,是目前各种医院内感染最广泛、最严重的致病菌之一.以分离自公共场所洗手液的菌株6-3为研究对象,其16S rRNA基因与Pseudomonas aeruginosa DSM 50071的16S rRNA基因的一致性为99.8%,初步确定其为铜绿假单胞菌;根据同源蛋白的核苷酸序列设计菌株6-3中丙氨酸消旋酶的扩增引物,通过PCR从6-3菌株中克隆获得了丙氨酸消旋酶基因(alrPa),基因序列与P. aeruginosa PAO1中丙氨酸消旋酶Alr_(PAO1)的氨基酸同源率为98.9%,存在4个不一致的氨基酸位点;经原核表达、Ni-NTA亲和层析法纯化获得了蛋白PaAlr,酶学特性分析表明,重组蛋白PaAlr的最适反应温度为40℃,最适反应pH=10.0;最适底物是L-Ala,具有严格的底物特异性,K_(m,L-Ala)=10.96mmol/L,V_(max,L-Ala)=1 562μmol/(L·min),K_(m,D-Ala)=8.45mmol/L,V_(max,D-Ala)=881.9μmol/(L·min),其最大反应速率约为Alr_(PAO1)的7倍;以铜绿假单胞菌中丙氨酸消旋酶为检测对象,以PCR和Western-blotting 2种方法对铜绿假单胞菌进行检测,实验发现,在目的基因序列已知的前提下,采用PCR法具有较好的检测灵敏性和专一性. 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 丙氨酸消旋酶 16S RRNA基因 菌株检测
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D-serine合成相关丝氨酸消旋酶在大鼠和癫痫患者海马的分布与细胞定位 被引量：1
9
作者 马铁 张颖 +3 位作者 史亮 白洁 陈良为 刘永红 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期723-728,共6页
目的:观察D-serine合成相关的丝氨酸消旋酶(SR)在大鼠和癫痫病人海马组织的分布与细胞定位特点。方法:成年和幼龄SD大鼠灌流固定、冰冻切片癫痫患者海马硬化石蜡切片,进行SR、SR/NeuN、SR/GFAP免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜观察和计... 目的:观察D-serine合成相关的丝氨酸消旋酶(SR)在大鼠和癫痫病人海马组织的分布与细胞定位特点。方法:成年和幼龄SD大鼠灌流固定、冰冻切片癫痫患者海马硬化石蜡切片,进行SR、SR/NeuN、SR/GFAP免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜观察和计数分析。结果:在成年和幼龄大鼠海马的CA1-3和齿状回内均分布有大量SR免疫阳性细胞分布,SR免疫阳性反应主要定位于神经元和星形胶质细胞;与成年相比,幼龄大鼠海马内SR免疫阳性的神经元数量相似,但SR/GFAP阳性星形胶质细胞的数量较多;SR阳性细胞在癫痫患者海马内也有大量分布,其数量明显多于脑出血患者。结论:SR定位于大鼠和癫痫患者海马神经元和星形胶质细胞,其数量分布与发育年龄和癫痫疾病状态呈现一定的相关性,提示D-serine的产生可能参与海马的发育和癫痫疾病过程。 展开更多
关键词 丝氨酸消旋酶 右旋丝氨酸 癫痫 海马 大鼠
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以丙氨酸消旋酶为靶点的高通量抗结核药物筛选模型的建立及应用 被引量：3
10
作者 周爽 蒙建洲 +3 位作者 关艳 胡辛欣 司书毅 肖春玲 《中国医药生物技术》 2014年第2期116-123,共8页
目的建立以结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶为靶点的新型高通量抗结核药物筛选模型，筛选丙氨酸消旋酶的抑制剂，获得以丙氨酸消旋酶为靶点的新型抗结核药物先导物。 方法以结核分枝杆菌 H37Rv 基因组为模板，pET28a表达质粒为载体，将 alr ... 目的建立以结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶为靶点的新型高通量抗结核药物筛选模型，筛选丙氨酸消旋酶的抑制剂，获得以丙氨酸消旋酶为靶点的新型抗结核药物先导物。 方法以结核分枝杆菌 H37Rv 基因组为模板，pET28a表达质粒为载体，将 alr 基因克隆至 pET28a ，构建pET28a：alr 重组表达质粒，表达并纯化得到重组结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶；通过测定反应产物 NADH 在340 nm处光密度变化速率，检测酶反应活性，构建并优化该酶抑制剂的高通量筛选模型；应用该模型对化合物库进行筛选；测定活性化合物 IC50以及对结核分枝杆菌的 MIC。 结果成功构建了结核分枝杆菌 alr 基因的表达载体；得到了纯度较高的重组丙氨酸消旋酶，测得该酶的比活力为13.53 kU/mg；所建立的丙氨酸消旋酶高通量筛选模型稳定性高，符合高通量筛选的要求；通过对70000个化合物进行筛选，得到了5个活性较高的化合物，其中，IMB-XZ5对结核分枝杆菌的 MIC 为4-8μg/ml，且对结核分枝杆菌的作用具有较高的特异性。 结论建立了稳定性好、灵敏度较高的结核分枝杆菌丙氨酸消旋酶抑制剂高通量筛选模型，应用该模型筛选得到了具有较好抗结核活性的丙氨酸消旋酶抑制剂。 展开更多
关键词 丙氨酸消旋酶 抗结核药 酶抑制剂 高通量筛选
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α-甲酰-CoA消旋酶在乳腺癌中的表达及其意义 被引量：1
11
作者 刘德纯 赵云霞 +2 位作者 吴礼高 承泽农 冯振中 《蚌埠医学院学报》 CAS 2009年第4期284-286,共3页
目的:探讨α-甲酰-CoA消旋酶(AMACR/p504S)在乳腺癌中的表达状况及其临床病理意义。方法:选取73例乳腺癌及36例乳腺良性增生性病变,用免疫组化技术(S-P法)标记AMACR和ER、PR、c-erbB-2,光镜观察其表达情况并进行统计学处理。结果:AMACR... 目的:探讨α-甲酰-CoA消旋酶(AMACR/p504S)在乳腺癌中的表达状况及其临床病理意义。方法:选取73例乳腺癌及36例乳腺良性增生性病变,用免疫组化技术(S-P法)标记AMACR和ER、PR、c-erbB-2,光镜观察其表达情况并进行统计学处理。结果:AMACR在乳腺癌中表达的阳性率为86.3%,良性病变中为55.6%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。AMACR在乳腺癌中的表达与组织学类型、分级以及ER、PR、c-erbB-2免疫表型等均无明显关系(P>0.05)。结论:AMACR不仅是前列腺癌的生物学标记,亦可作为乳腺癌病理诊断的参考。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 免疫组织化学 α-甲酰-CoA消旋酶 前列腺肿瘤 病理学
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胃腺癌组织α-甲基酰辅酶A消旋酶的表达
12
作者 刘强 朱建善 +1 位作者 许燕萍 林鸿翔 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期34-35,F0004,共3页
目的研究α甲基酰辅酶A消旋酶(AMACR)在正常胃黏膜上皮和胃腺癌组织中的表达。方法制作正常胃黏膜和胃腺癌组织微阵列。应用免疫组织化学方法,观察13例正常胃黏膜和131例胃腺癌组织AMACR和P53蛋白表达。结果13例正常胃黏膜上皮AMACR和P5... 目的研究α甲基酰辅酶A消旋酶(AMACR)在正常胃黏膜上皮和胃腺癌组织中的表达。方法制作正常胃黏膜和胃腺癌组织微阵列。应用免疫组织化学方法,观察13例正常胃黏膜和131例胃腺癌组织AMACR和P53蛋白表达。结果13例正常胃黏膜上皮AMACR和P53蛋白表达均为阴性。131例胃腺癌中,AMACR阳性43例(32.8%),P53蛋白阳性61例(46.6%),两者间的表达有一定关联。100例中高分化腺癌中,AMACR阳性40例(40%);31例低分化腺癌中,AMACR阳性仅3例(10%),两者的差异有显著性(P<0.005)。结论AMACR高表达与部分胃腺癌的发生有关,且与肿瘤组织分化程度相关。 展开更多
关键词 α-甲基酰辅酶A消旋酶 P53 胃腺癌
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α-甲酰辅酶A消旋酶与胸腺素β_(15)对前列腺癌早期诊断的临床价值
13
作者 李志鹏 李泽惠 刘志明 《医学综述》 2012年第6期919-921,共3页
目的检测前列腺癌和非前列腺癌患者前列腺液中α-甲酰辅酶A消旋酶(α-MACR)、胸腺素β15的浓度,比较各指标对前列腺癌早期诊断的临床价值。方法用前列腺按摩的方法获取64例前列腺癌患者(试验组)和24例非前列腺癌患者(对照组)的前列腺液... 目的检测前列腺癌和非前列腺癌患者前列腺液中α-甲酰辅酶A消旋酶(α-MACR)、胸腺素β15的浓度,比较各指标对前列腺癌早期诊断的临床价值。方法用前列腺按摩的方法获取64例前列腺癌患者(试验组)和24例非前列腺癌患者(对照组)的前列腺液。采用双抗体夹心酶联免疫反应(ELISA)检测标本α-MACR、胸腺素β15的浓度。结果α-MACR在对照组中的浓度为(3.98±0.56)μg/L,灵敏度为4.9%,在试验组患者中浓度为(84.35±0.46)μg/L,灵敏度为96.9%,试验组浓度是对照组患者的近20倍,两者比较差异有统计学意义(t=4.583,P<0.01)。胸腺素β15在对照组的浓度为(8.07±0.36)μg/L,灵敏度为17.5%,试验组患者中的浓度为(40.65±0.34)μg/L,灵敏度为87.5%,试验组浓度是对照组的近5倍,两者比较差异具有统计学意义(t=3.732,P<0.05)。结论α-MACR和胸腺素β15与前列腺癌的发生、发展密切相关,对前列腺癌的诊断具有一定的临床价值,且α-MACR对前列腺癌的早期诊断具有更高的敏感性。 展开更多
关键词 前列腺癌 诊断 α-甲酰辅酶A消旋酶 胸腺素β15
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丙氨酸消旋酶的纯化及活性测定方法 被引量：1
14
作者 张彩凤 《河北渔业》 2011年第12期38-39,共2页
丙氨酸消旋酶广泛分布于原核生物中,在人和其他高等生物中没有它的存在。丙氨酸消旋酶用于催化L-丙氨酸和D-丙氨酸的相互转化,归为5′-磷酸吡哆醛依赖型酶,属于异构酶家族。
关键词 丙氨酸消旋酶 纯化 活性
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α-甲酰辅酶A消旋酶和高分子量细胞角蛋白在前列腺中的表达及其意义
15
作者 陈军 林政 任吉忠 《武警医学院学报》 CAS 2009年第10期838-841,共4页
【目的】通过对可能的前列腺癌的诊断指标进行全面的回顾性分析,以明确对前列腺癌的诊断和鉴别诊断有临床意义的指标。【方法】自2002年1月-2005年12月,收集病理标本的各类前列腺手术病例358例,包括前列腺癌60例,前列腺上皮内瘤(PIN)38... 【目的】通过对可能的前列腺癌的诊断指标进行全面的回顾性分析,以明确对前列腺癌的诊断和鉴别诊断有临床意义的指标。【方法】自2002年1月-2005年12月,收集病理标本的各类前列腺手术病例358例,包括前列腺癌60例,前列腺上皮内瘤(PIN)38例,良性前列腺增生(BPH)260例,所有病例均经术后病理确诊。对分析资料中前列腺癌的临床分期、前列腺癌的病理分级、PIN的病理分级以及相关病理免疫组化指标等因素,使用SAS统计软件进行统计学处理。用Cochran-Mantel-Haenszel检验对免疫组化指标与前列腺癌的诊断之间的关系进行统计分析。同时对免疫组化指标AMACR、HCK对前列腺癌诊断的敏感度、特异度及Kappa系数等进行统计分析。【结果】AMACR在前列腺癌、PIN和BPH中表达的阳性率分别为90.2%、39.47%和0,差异具有统计学意义。HCK在前列腺癌、PIN和BPH中表达的阳性率分别为18.97%、86.84%和90%,差异具有统计学意义。AMACR诊断前列腺癌的敏感度为90.20%,特异度为94.97%,Kappa系数为0.7876。HCK作为阴性指标诊断前列腺癌的敏感度为81.03%,特异度为89.60%,Kappa系数为0.2795。【结论】AMACR、HCK均是较好的前列腺癌的诊断指标;两者联合诊断具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 前列腺癌 诊断 免疫组织化学 分子标记物 α-甲酰辅酶A消旋酶 前列腺特异性抗原
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变异链球菌丙氨酸消旋酶基因表达纯化及活性测定 被引量：4
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作者 郭笑 邱伟 +2 位作者 周学东 程磊 李明云 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第6期597-600,共4页
变异链球菌是口腔主要的龋病病原菌。丙氨酸消旋酶通过合成右旋丙氨酸(D-alanine,D-ala)参与细菌细胞壁肽聚糖的生物合成过程,与细菌性疾病密切相关,近年来成为抗菌药物的又一理想靶位。D-环丝氨酸(D-cycloserine,DCS)是丙氨酸消旋酶不... 变异链球菌是口腔主要的龋病病原菌。丙氨酸消旋酶通过合成右旋丙氨酸(D-alanine,D-ala)参与细菌细胞壁肽聚糖的生物合成过程,与细菌性疾病密切相关,近年来成为抗菌药物的又一理想靶位。D-环丝氨酸(D-cycloserine,DCS)是丙氨酸消旋酶不可逆性抑制剂。本研究通过聚合酶链反应克隆变异链球菌UA159的smu.1834c基因,经过酶切、连接,构建重组表达质粒pET-smu.1834c,诱导表达重组,纯化蛋白。测定DCS对丙氨酸消旋酶活性的抑制作用。成功诱导表达纯化smu.1834c基因编码蛋白,具有体外催化L-丙氨酸生成D-丙氨酸的活性。发现DCS能够抑制该蛋白的活性。本研究证实变异链球菌smu.1834c基因编码丙氨酸消旋酶。DCS能够抑制其活性,并且呈现一定的剂量相关性。 展开更多
关键词 变异链球菌 丙氨酸消旋酶 右旋丙氨酸 D-环丝氨酸
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丙氨酸消旋酶的研究进展 被引量：4
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作者 邱伟 周学东 李明云 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期228-232,共5页
丙氨酸消旋酶(ALR)是以吡哆醛磷酸为辅酶,催化L-丙氨酸与D-丙氨酸相互转化的一类酶,广泛分布于低等生物,与由细菌引起的疾病密切相关。近年来ALR已成为设计抗菌药物的又一理想靶位。变异链球菌是口腔龋病主要致病菌,产酸耐酸、黏附能力... 丙氨酸消旋酶(ALR)是以吡哆醛磷酸为辅酶,催化L-丙氨酸与D-丙氨酸相互转化的一类酶,广泛分布于低等生物,与由细菌引起的疾病密切相关。近年来ALR已成为设计抗菌药物的又一理想靶位。变异链球菌是口腔龋病主要致病菌,产酸耐酸、黏附能力和合成细胞内外多糖能力是其主要的致龋毒力。本文对ALR的分类、结构特征、生理功能及实际应用等方面进行系统阐述,为进一步研究ALR与变异链球菌致病毒力的关系,发展龋病抗菌药物候选靶标提供理论基础。 展开更多
关键词 丙氨酸消旋酶 致龋毒力 生理功能
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α-甲基酰基辅酶A消旋酶在喉癌中的表达 被引量：1
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作者 吴建烽 吴正虎 吴祖良 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2006年第3期168-170,174,共4页
目的研究α-甲基酰基辅酶A消旋酶(AMACR)在喉癌中的表达,初步探讨AMACR在喉鳞癌生物学行为中的意义。方法用免疫组织化学EliVisionTMplus二步法(福州迈新)检测40例原发喉鳞癌、20例声带息肉及10例癌旁组织中AMACR的表达情况。结果40例... 目的研究α-甲基酰基辅酶A消旋酶(AMACR)在喉癌中的表达,初步探讨AMACR在喉鳞癌生物学行为中的意义。方法用免疫组织化学EliVisionTMplus二步法(福州迈新)检测40例原发喉鳞癌、20例声带息肉及10例癌旁组织中AMACR的表达情况。结果40例喉癌中13例(32.5%)存在不同程度的AMACR表达,在20例声带息肉和10例正常喉组织中无AMACR表达,差异有统计学意义(P<0.01)。AMACR在高分化鳞癌和中、低分化鳞癌中表达的阳性率分别为50%、15%,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期喉癌AMACR阳性率无统计学意义,AMACR表达与性别、肿瘤部位、颈淋巴结转移无统计学意义(P>0.05)。结论AMACR在喉鳞癌中有阳性表达,其表达可能与分化有关,与性别、部位、临床分期、颈淋巴结转移无明显相关性。 展开更多
关键词 喉肿瘤/病理学 癌 鳞状细胞倩理学 α-甲基酰基辅酶A消旋酶
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地衣芽孢杆菌谷氨酸消旋酶基因克隆、原核表达及生物信息学分析 被引量：1
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作者 邬旭龙 杨敏 +5 位作者 肖璐 张婧 杨苗 谢礼 安微 林华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第8期114-118,138,共6页
为了进一步分析谷氨酸消旋酶的结构和生物信息功能,试验以γ-PGA生产菌株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)DY136为材料,PCR扩增其谷氨酸消旋酶基因(racE),纯化racE基因进行原核表达,并运用多种在线生物信息学分析软件对该基因编码... 为了进一步分析谷氨酸消旋酶的结构和生物信息功能,试验以γ-PGA生产菌株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)DY136为材料,PCR扩增其谷氨酸消旋酶基因(racE),纯化racE基因进行原核表达,并运用多种在线生物信息学分析软件对该基因编码蛋白质的理化性质、亲/疏水性、信号肽、结构域等进行分析。结果表明:PCR扩增racE基因条带大小为819 bp,对racE基因进行大肠杆菌原核表达,通过构建表达载体和优化表达条件,成功表达了大小为30.15 ku的重组融合蛋白。racE蛋白编码272个氨基酸,氨基酸序列与NCBI中公布的地衣芽孢孢杆菌racE蛋白(GenBank登录号为KAA0845975.1)氨基酸同源性为99.62%。racE蛋白理化性质稳定,是亲水蛋白,无跨膜结构域,不含有信号肽,α-螺旋是其主要的二级结构,主要定位于细胞质中(73.90%)。说明racE基因保守且相对稳定,在谷氨酸的合成中发挥重要作用。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 谷氨酸消旋酶 racE基因 克隆 原核表达 生物信息学分析
原文传递
以丙氨酸消旋酶为靶标的中药抗菌成分的初步筛选 被引量：2
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作者 王敏兰 石亚伟 《现代医药卫生》 2013年第7期966-967,970,共3页
目的从89种具有抗菌、消炎作用的药材中筛选能够抑制丙氨酸消旋酶活性的中药。方法利用旋光仪测定丙氨酸消旋酶在有无中药材浸出物情况下酶活性,从而对89种中药进行初步筛选。结果 89种中药中有25种能够不同程度地抑制丙氨酸消旋酶活性... 目的从89种具有抗菌、消炎作用的药材中筛选能够抑制丙氨酸消旋酶活性的中药。方法利用旋光仪测定丙氨酸消旋酶在有无中药材浸出物情况下酶活性,从而对89种中药进行初步筛选。结果 89种中药中有25种能够不同程度地抑制丙氨酸消旋酶活性,其中6种具有明显的抑制作用(抑制率大于35%)。结论虎杖、黄芩、麻黄、吴茱萸、栀子、鸡屎藤6种中药能明显抑制丙氨酸消旋酶活性。 展开更多
关键词 丙氨酸外消旋酶 中草药 抗菌 抑制剂 筛选
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