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一种灵芝菌种液氮保藏方法的研究
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作者 蔡凌 贺黎铭 +2 位作者 谢欣 刘林秋 罗霞 《北方园艺》 CAS 北大核心 2024年第10期92-98,共7页
以“药灵芝1号”为试材,采用三因素三水平的液氮保藏正交实验,对萌发率、恢复时间、菌丝生长速率、菌丝体干质量4个指标进行保藏效果综合评价,以期建立一种灵芝菌种液氮保藏方法,再以10个不同灵芝菌种使用该保藏方法进行保藏效果的验证... 以“药灵芝1号”为试材,采用三因素三水平的液氮保藏正交实验,对萌发率、恢复时间、菌丝生长速率、菌丝体干质量4个指标进行保藏效果综合评价,以期建立一种灵芝菌种液氮保藏方法,再以10个不同灵芝菌种使用该保藏方法进行保藏效果的验证。结果表明:最优保藏方案为采用-80℃液氮的降温方式,10%甘油作为保护剂,常温解冻复苏。10个不同灵芝菌种应用该保藏方法后均可萌发,恢复时间范围在1~7 d,80%菌种菌丝生长速率保藏前后无显著变化、100%菌种菌丝体干质量保藏前后无显著变化,ISSR共扩增出611条片段,大小范围在300~3000 bp,保藏前菌种和保藏后菌种在相同引物下的扩增条带一致,未发现变异现象。因此,该研究的液氮保藏方法可保障保藏菌种的萌发率、恢复时间、菌丝生长速率、菌丝体干质量等指标,适用于多种灵芝菌种的保藏,普适性强,应用范围广,且操作简便,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 灵芝 液氮保藏 ISSR
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液氮保藏菌种对平菇菌丝体和子实体的影响 被引量:5
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作者 韩芹芹 王金宁 +3 位作者 李国庆 聂凡 陈静娴 蔡永萍 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1003-1007,共5页
以皖平菇1号为试验材料,对菌种液氮保藏过程中的降温方式、保护剂、解冻3个关键环节设计三因素三水平正交试验。结果表明,正交试验9个不同的处理中对菌种萌发率影响最小的条件处理组合为不加保护剂直接放入液氮,38~40℃水浴解冻;对菌... 以皖平菇1号为试验材料,对菌种液氮保藏过程中的降温方式、保护剂、解冻3个关键环节设计三因素三水平正交试验。结果表明,正交试验9个不同的处理中对菌种萌发率影响最小的条件处理组合为不加保护剂直接放入液氮,38~40℃水浴解冻;对菌丝生长速度影响最小的处理组合为-70℃-液氮逐步降温,10%的二甲基亚砜作保护剂,38~40℃水浴解冻;对子实体平均产量影响最小的处理组合为4℃--20℃--70℃分别放置2 h的逐步降温法,10%的蔗糖水溶液作保护剂,38~40℃水浴解冻。保护剂和解冻方式的选择对菌种影响较大,结合成本等其他因素综合考虑,不加保护剂直接将菌种放入液氮,38~40℃水浴快速解冻的处理方式为最佳选择。 展开更多
关键词 平菇 液氮保藏 保护剂 降温 解冻
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香菇菌种液氮保藏技术研究 被引量:7
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作者 刘新锐 叶夏 +3 位作者 王玉青 宋秀高 陈传明 谢宝贵 《热带作物学报》 CSCD 2011年第7期1360-1363,共4页
液氮适合菌种的保藏。以香菇菌种为材料,从降温速率、保护剂浓度、解冻温度、培养基质和菌龄方面进行液氮保藏技术研究。研究结果表明:在4℃以下,以1℃/min的速率降至-40℃、添加10%甘油、35℃下解冻、木屑作培养基质和取生长旺盛的菌... 液氮适合菌种的保藏。以香菇菌种为材料,从降温速率、保护剂浓度、解冻温度、培养基质和菌龄方面进行液氮保藏技术研究。研究结果表明:在4℃以下,以1℃/min的速率降至-40℃、添加10%甘油、35℃下解冻、木屑作培养基质和取生长旺盛的菌块作为香菇菌种的液氮保藏效果最好。 展开更多
关键词 香菇 液氮保藏 萌发率 生长速度
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谷氨酸产生菌──短杆菌(Brevibacterium sp.)的液氮保藏 被引量:2
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作者 方呈祥 张珞珍 +5 位作者 岳莹玉 陶天申 段乃先 徐春华 徐文 郑静 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期18-21,共4页
以甘油作保护剂,用程序控制降温仪控制降温速率,对谷氨酸产生菌短杆菌(Bre-vibacteriumsp.)F9114衍生菌株进行液氮保藏。分别取保藏3~5个月的菌种进行形态观察,未见明显改变。经液氮保藏的菌种和按常规... 以甘油作保护剂,用程序控制降温仪控制降温速率,对谷氨酸产生菌短杆菌(Bre-vibacteriumsp.)F9114衍生菌株进行液氮保藏。分别取保藏3~5个月的菌种进行形态观察,未见明显改变。经液氮保藏的菌种和按常规分纯的菌种进行发酵生产的比较,结果表明液氮保藏的菌种较常规的菌种发酵周期短1.47%,产酸水平和转化率分别高2%和3.9%。由于液氮保藏能使菌种的主要特性稳定,不需再次分纯,保证随时提供优良菌种用于发酵生产。同时,这种方法避免了因传代过多菌种退化之弊病。 展开更多
关键词 谷氨酸生产菌 短杆菌 程控降温 液氮保藏 谷氨酸
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金福菇菌种液氮保藏条件的优化研究 被引量:2
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作者 陈志宏 陈炳智 +1 位作者 谢宝贵 刘新锐 《食药用菌》 2013年第1期30-31,共2页
金福菇(Tricholoma lobayense Heim)是一种高温型食用菌,适合夏季出菇。它与草菇、灵芝、毛木耳等高温型或中高温型食用菌一样,菌种在低温(4℃)下保藏,经常出现菌种死亡问题,而在室温下保藏则易出现菌种老化。菌种保藏的目的是保持良种... 金福菇(Tricholoma lobayense Heim)是一种高温型食用菌,适合夏季出菇。它与草菇、灵芝、毛木耳等高温型或中高温型食用菌一样,菌种在低温(4℃)下保藏,经常出现菌种死亡问题,而在室温下保藏则易出现菌种老化。菌种保藏的目的是保持良种的优良种性,它是良种保护的重要环节。一般地,菌种处于生长状态,易出现老化,也易发生变异。 展开更多
关键词 金福菇 液氮保藏 降温速率 解冻温度 保藏温度
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黑木耳菌种液氮保藏新技术引进与初探 被引量:1
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作者 路颓彦 刘昆 《丽水农业科技》 2014年第1期8-10,共3页
比较研究了保护剂、预处理等因素对液氮冷冻保藏黑木耳菌种的影响。结果表明:选取木屑培养基保藏,防冻剂为10%甘油,使用程序降温以1℃/min降温到-80℃后保藏到液氮中,保藏后取出以25℃—30℃的水浴中解冻活化,这个液氮冷冻保藏... 比较研究了保护剂、预处理等因素对液氮冷冻保藏黑木耳菌种的影响。结果表明:选取木屑培养基保藏,防冻剂为10%甘油,使用程序降温以1℃/min降温到-80℃后保藏到液氮中,保藏后取出以25℃—30℃的水浴中解冻活化,这个液氮冷冻保藏程序的效果好。 展开更多
关键词 黑木耳菌种 液氮保藏 菌种保存
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影响啤酒酵母液氮保藏因素的探讨
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作者 王萍 《啤酒科技》 2015年第6期11-14,共4页
啤酒酵母保藏过程中,如果保藏方法不适当,很容易引起酵母的变异、退化,严重影响啤酒质量和风味稳定性。在-196℃温度条件下,酵母几乎完全处于体眠状态,这就使液氮保藏法成为酵母菌种最有效的保藏方法之一。本文通过试验总结了液氮... 啤酒酵母保藏过程中,如果保藏方法不适当,很容易引起酵母的变异、退化,严重影响啤酒质量和风味稳定性。在-196℃温度条件下,酵母几乎完全处于体眠状态,这就使液氮保藏法成为酵母菌种最有效的保藏方法之一。本文通过试验总结了液氮保藏过程中保护剂浓度和降温方式的不同对保藏后酵母菌种死亡率的影响。 展开更多
关键词 液氮保藏 啤酒酵母 死亡率
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不同菌种保藏方法对香菇产量的影响 被引量:15
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作者 蔡令仪 谭琦 +4 位作者 曹晖 郭立刚 汪昭月 尚晓东 汪虹 《食用菌学报》 2003年第4期52-54,共3页
分别采用液氮和4℃冰箱保藏香菇(Lentinulaedodes)菌种,并通过栽培试验比较了二种保藏方法对香菇产量的影响。
关键词 菌种保藏 香菇 产量 液氮保藏 冰箱保藏 食用菌
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不同保藏方法对金针菇“上研1号”栽培特性的影响 被引量:7
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作者 王瑞娟 尚晓冬 +5 位作者 杨慧 刘建雨 张丹 徐珍 宋春艳 章炉军 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期11-17,共7页
针对金针菇(Flammulina velutipes)菌种在保藏中难以保持遗传性能相对稳定的问题,以金针菇新品种"上研1号"为供试菌株,采用继代培养法(C)、液体石蜡法(P)、液氮法(N)和蒸馏水法(W)保藏两年后,观测活化菌丝的生长、液体菌种性... 针对金针菇(Flammulina velutipes)菌种在保藏中难以保持遗传性能相对稳定的问题,以金针菇新品种"上研1号"为供试菌株,采用继代培养法(C)、液体石蜡法(P)、液氮法(N)和蒸馏水法(W)保藏两年后,观测活化菌丝的生长、液体菌种性能及工厂化栽培性状,比较不同保藏方法对金针菇栽培特性的影响。研究结果表明:液氮法保藏处理和继代培养保藏处理中,活化菌丝生长速度快,菌落浓白、均一;液体菌种成球度、菌球大小和密度等方面均表现优异,液体菌种终止pH在5.9~6.0之间;菌丝分支能力强,锁状联合明显且数量较多。在工厂化栽培中,液氮法保藏处理子实体整齐度好、产量高(每瓶372.67 g);液氮法和继代培养法保藏处理的A级商品菇比例相近,商品性状优良。液氮法与继代培养法保藏处理在两年内均可维持金针菇新品种的栽培特性,但液氮保藏法操作更为便捷,是保藏金针菇品种的稳定、可靠、省力的方法。 展开更多
关键词 继代培养保藏 液体石蜡保藏 液氮保藏 蒸馏水保藏 菌种特性
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食用菌菌种保藏方法的研究进展 被引量:12
10
作者 刘远超 梁晓薇 +4 位作者 莫伟鹏 卓丽君 胡惠萍 黄龙花 谢意珍 《中国食用菌》 北大核心 2018年第5期1-6,共6页
食用菌菌种是食用菌产业发展的重要基石,菌种质量直接影响着食用菌子实体的产量和品质,因此菌种保藏历来都受到食用菌生产及科研人员的重视。目前食用菌菌种保藏方法,常用的有控制温度的继代培养低温保藏法和超低温(液氮)保藏法,现已将... 食用菌菌种是食用菌产业发展的重要基石,菌种质量直接影响着食用菌子实体的产量和品质,因此菌种保藏历来都受到食用菌生产及科研人员的重视。目前食用菌菌种保藏方法,常用的有控制温度的继代培养低温保藏法和超低温(液氮)保藏法,现已将分子生物学技术运用于菌种保藏研究,对菌种保藏方法和进展进行了综述。 展开更多
关键词 食用菌 退化 液氮保藏
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活化处理双孢蘑菇液氮菌种对产量的影响 被引量:3
11
作者 蔡令仪 郭倩 +6 位作者 曹晖 陈明杰 汪虹 杨刚 冯爱萍 贺冬梅 楚鹰 《食用菌学报》 2005年第4期50-52,共3页
分别采用液氮和4℃冰箱保藏双孢蘑菇(Agaricus bisporus)菌种,并对液氮菌种进行活化处理,通过栽培试验比较各处理对双孢蘑菇产量的影响。结果表明,液氮法保藏双孢蘑菇菌种的产量较理想;液氮菌种经活化处理后的产量明显提高。
关键词 菌种保藏 双孢蘑菇 液氮保藏 冰箱保藏 活化处理
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淋球菌低温液氮保存法 被引量:1
12
作者 唐书谦 叶庆佾 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期162-162,共1页
随着性病(STD)的传播,实验室诊断则是一个重要环节,其中淋病在国内性传播疾病中占居首位。淋病的病原菌是淋菌,由于保存菌种是实验研究的基础,所以本文简介在淋菌菌种的收集过程中对淋菌菌种的保存方法。 1 材料与方法 1.1 材料 (1)液体... 随着性病(STD)的传播,实验室诊断则是一个重要环节,其中淋病在国内性传播疾病中占居首位。淋病的病原菌是淋菌,由于保存菌种是实验研究的基础,所以本文简介在淋菌菌种的收集过程中对淋菌菌种的保存方法。 1 材料与方法 1.1 材料 (1)液体氮;(2)液氮生物容器;(3) 展开更多
关键词 淋病奈氏球菌 液氮保藏 低温保藏
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微藻冷冻保藏的研究 被引量:3
13
作者 项文钰 吴玉梁 沈颂东 《水利渔业》 北大核心 2004年第3期23-24,共2页
将小球藻和蛋白核小球藻都分别加入10%、20%、30%的DMSO以及20%、35%和50%的甘油,保存在-20℃、-75℃和-196℃的液氮中,再各取一些不加任何防冻剂保存在20℃的培养箱里。3个月后取出培养,观察颜色变化并测量其中的叶绿素含量。结果表明... 将小球藻和蛋白核小球藻都分别加入10%、20%、30%的DMSO以及20%、35%和50%的甘油,保存在-20℃、-75℃和-196℃的液氮中,再各取一些不加任何防冻剂保存在20℃的培养箱里。3个月后取出培养,观察颜色变化并测量其中的叶绿素含量。结果表明:浓缩的藻液可以在20℃下长期保存;小球藻浓缩藻液添加20%的甘油在各种不同的温度下保存效果都很好,其次是10%的DMSO;而衣藻则加入10%的DMSO在各种温度下保存都较好,加入20%的甘油,在液氮中保存的效果最好。浓度大于10%的DMSO和大于20%的甘油对微藻细胞的保藏效果不佳。 展开更多
关键词 微藻 冷冻保藏 DMSO 甘油 液氮保藏 颜色 叶绿素含量
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Preservation efficiency of new cryoprotectant used for Acidithiobacillus ferrooxidans in liquid nitrogen
14
作者 吴学玲 胡琪 +5 位作者 侯冬梅 辛小红 苗博 王洋洋 刘学端 申丽 《Transactions of Nonferrous Metals Society of China》 SCIE EI CAS CSCD 2013年第3期818-823,共6页
The efficiency of a new cryoprotectant,GP,for the preservation of Acidithiobacillus ferrooxidans(A.ferrooxidans) strain DC in liquid nitrogen was investigated.The optimal concentration of this new cryoprotectant for... The efficiency of a new cryoprotectant,GP,for the preservation of Acidithiobacillus ferrooxidans(A.ferrooxidans) strain DC in liquid nitrogen was investigated.The optimal concentration of this new cryoprotectant for the maximal viable cell recovery and the highest ferrous ion oxidation activity was determined.The results show that 30%(volume fraction) GP is optimal for the cryopreservation with 84.4% of cells surviving,completely oxidizing ferrous ions within 120 h,and growing to a final density of 5.8×107 cell/mL after 6 d in the culture.Furthermore,the optimal residual GP concentration for viable cell recovery after culture of thawed cells in 9K medium for 6 d is 0.6%(volume fraction).At this concentration,strain DC completely oxidizes ferrous ions within 108 h and grows to a final cell density of 6.8×107 mL-1.Thus,GP is a simple,effective cryoprotectant for the preservation of A.ferrooxidans strain DC in liquid nitrogen. 展开更多
关键词 Acidithiobacillus ferrooxidans CRYOPROTECTANT liquid nitrogen freezing preservation efficiency
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论大罐酵母的管理
15
作者 晏荣 《啤酒科技》 2000年第4期16-18,共3页
露天大罐酿造啤酒给啤酒生产带来了巨大的变化,同时也冲击了传统的啤酒生产工艺。起初,人们轻视它的存在,并从传统工艺以及经济性方面否定它。但是不久人们就认识到锥型罐工艺的优越性和经济性。的确,科学研究结果已无可辩驳地证明:传... 露天大罐酿造啤酒给啤酒生产带来了巨大的变化,同时也冲击了传统的啤酒生产工艺。起初,人们轻视它的存在,并从传统工艺以及经济性方面否定它。但是不久人们就认识到锥型罐工艺的优越性和经济性。的确,科学研究结果已无可辩驳地证明:传统的酿酒耗时太长,如果把时间缩短1/4,啤酒质量就急速下降,而采用锥形发酵罐,即使没有理想控制,啤酒质量却能在较短的时间内达到非常高的水平,这是前所未有的。 展开更多
关键词 酵母数 罐发酵 啤酒质量 经济性 回收 发酵温度 锥型 啤酒生产工艺 液氮保藏 锥形发酵罐
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去甲基万古霉素菌种低温冷冻、冷干保藏条件优化及10年菌种保藏效果 被引量:2
16
作者 王耀耀 朱研研 +3 位作者 郝惠云 付美红 王亚莉 张雪霞 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1627-1634,共8页
【目的】针对去甲基万古霉素产生菌不耐保藏的问题,改进菌种保藏方法,对超低温液氮保藏、-80°C低温冷冻保藏、冷干保藏方法跟踪考察10年保藏稳定性,评价不同保藏方法对去甲基万古霉素产生菌的保藏适用性。【方法】采用甘油作基础... 【目的】针对去甲基万古霉素产生菌不耐保藏的问题,改进菌种保藏方法,对超低温液氮保藏、-80°C低温冷冻保藏、冷干保藏方法跟踪考察10年保藏稳定性,评价不同保藏方法对去甲基万古霉素产生菌的保藏适用性。【方法】采用甘油作基础保护剂进行超低温液氮保藏和-80°C低温冷冻保藏,采用脱脂牛奶作基础保护剂进行冷干保藏,针对超低温液氮保藏进行降温速率考察,研究非渗透性冷冻保护剂海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等对3种保藏方法的冻存影响,对优选出的保藏方法进行10年跟踪考察。【结果】3种保藏方法冻后菌种存活率依次为:-80°C低温冷冻保藏>超低温液氮保藏>冷干保藏。液氮保藏最适降温速率为快速冷冻。优选出最佳保护剂配方:超低温液氮保藏为甘油8.0%,海藻糖3.5%;-80°C低温冷冻保藏为甘油6.0%,PVP 5.0%;冷干保藏为脱脂牛奶,6.0%海藻糖。采用优化保藏条件,液氮保藏10年存活率稳定在70.6%,菌种发酵水平为入藏水平的92.9%。【结论】在优化条件下,尤以超低温液氮保藏适合于去甲基万古霉素产生菌长期保藏。 展开更多
关键词 去甲基万古霉素产生菌 超低温液氮保藏 -80°C低温冷冻保藏 冷干保藏 海藻糖 聚乙烯吡咯烷酮
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