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荧光PCR溶解曲线法在痰液标本中快速鉴定分枝杆菌的应用研究 被引量：1
1
作者 宋华峰 赵静 +1 位作者 宋翌琰 胥萍 《标记免疫分析与临床》 CAS 2023年第4期672-675,共4页
目的 分析荧光PCR溶解曲线检测技术在痰液标本中快速鉴定分枝杆菌的应用价值。方法 采用荧光PCR溶解曲线试剂盒进行快速菌种鉴定试验,采用罗氏固体培养管进行传统分枝杆菌分型鉴定。结果 研究发现159份痰标本中MTB复合群有114例,占到了7... 目的 分析荧光PCR溶解曲线检测技术在痰液标本中快速鉴定分枝杆菌的应用价值。方法 采用荧光PCR溶解曲线试剂盒进行快速菌种鉴定试验,采用罗氏固体培养管进行传统分枝杆菌分型鉴定。结果 研究发现159份痰标本中MTB复合群有114例,占到了71.7%;MTB+NTM有18例,占到了11.3%;NTM有27例,占到了17.0%。MTB+NTM组与NTM组的菌种存在显著差异。MTB+NTM组中以戈登分枝杆菌为主,而在NTM组中以胞内分枝杆菌及堪萨斯分枝杆菌检出为主。进一步与传统培养鉴定的结果比较发现,荧光PCR溶解曲线检出为MTB的114例标本中,分枝杆菌培养鉴定结果为99例MTB、1例NTM、14例阴性。荧光PCR溶解曲线法检出为MTB+NTM的18例标本中,分枝杆菌培养鉴定结果为14例MTB、1例NTM、3例阴性。荧光PCR溶解曲线检出为NTM的27例标本中,分枝杆菌培养的鉴定结果为5例MTB、19例NTM、3例阴性。结论 荧光PCR溶解曲线检测技术在痰液标本快速鉴定分枝杆菌的应用中具有较好的应用价值,能够为临床快速、精准诊断分枝杆菌病提供帮助。 展开更多
关键词 分枝杆菌 溶解曲线pcr 菌种鉴定
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不对称熔解曲线PCR法和DNA测序法检测HBV A1762T/G1764A结果分析
2
作者 刘京伟 赵安成 《医学检验与临床》 2013年第4期10-11,共2页
目的：以DNA测序法为标准，探讨不对称PCR熔解曲线法检测乙型肝炎病毒A1762T/G1764A基因变异的敏感性和特异性。方法：选取45例HBV阳性且经PCR熔解曲线法显示A1762T/G1764A变异的乙型肝炎患者血清，另选10例未发生HBV A1762T/G1764A变... 目的：以DNA测序法为标准，探讨不对称PCR熔解曲线法检测乙型肝炎病毒A1762T/G1764A基因变异的敏感性和特异性。方法：选取45例HBV阳性且经PCR熔解曲线法显示A1762T/G1764A变异的乙型肝炎患者血清，另选10例未发生HBV A1762T/G1764A变异的慢乙肝患者血清，用DNA测序法进行比较，分析两者检测结果。结果：55例测序样本中有51例两法结果完全一致,总符合率92.7%，另4例结果是：不对称PCR熔解曲线法检测显示为不完全变异型,而测序法则显示为完全变异型。结论：两法的相符率高，PCR熔解曲线法对A1762T/G1764A变异的检测是一简单易行较实用的方法，适用于临床基层开展。 展开更多
关键词 溶解曲线pcr A1762T G1764A DNA序列
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使用溶解曲线法检测结核病人耐药基因的结果分析 被引量：1
3
作者 郭珊珊 李树涛 +1 位作者 阿孜古丽.依明 郭倩茹 《新疆医学》 2017年第4期379-381,390,共4页
目的分析新疆维吾尔自治区胸科医院277例结核患者使用PCR探针溶解曲线法进行结核分枝杆菌基因扩增试验的结果。方法使用PCR探针溶解曲线法对2015年1-5月新疆维吾尔自治区胸科医院277例结核患者进行结核分枝杆菌基因扩增试验的结果,与结... 目的分析新疆维吾尔自治区胸科医院277例结核患者使用PCR探针溶解曲线法进行结核分枝杆菌基因扩增试验的结果。方法使用PCR探针溶解曲线法对2015年1-5月新疆维吾尔自治区胸科医院277例结核患者进行结核分枝杆菌基因扩增试验的结果,与结核分支杆菌基因扩增检测(mycobacterium tuberculosis gene amplification detection,mtd)960试验的结果进行对比,统计使用PCR探针溶解曲线法进行结核分枝杆菌基因扩增试验的阳性率、假阴性率,与mtd960试验的差异性。结果 2015年1-5月试验总人数诊断"结核"患者共277人,其中使用PCR探针溶解曲线法进行结核分枝杆菌基因扩增试验与mtd960试验结果均为阴性的病人数共115人(41.51%),使用PCR探针溶解曲线法进行结核分枝杆菌基因扩增试验与mtd960试验结果均为阳性且结果一致的病人共74人(26.71%)。仅使用PCR探针溶解曲线法进行结核分枝杆菌基因扩增试验结果阳性的病人共37人(13.36%)。结核分枝杆菌基因扩增试验与mtd960试验结果不一致的病人数共15人(5.42%)。对照组为诊断"非结核"患者共299人,使用PCR探针溶解曲线法进行结核分枝杆菌基因扩增试验与mtd960试验结果均为阴性,统计结果表明PCR探针溶解曲线法诊断阳性率高于mtd960试验。结论此论著用于探讨使用PCR探针溶解曲线法进行结核分枝杆菌基因扩增试验在结核病人提前诊断及指导用药的意义。 展开更多
关键词 结核 pcr探针溶解曲线法 mtd960试验
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荧光PCR溶解曲线法快速检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药突变 被引量：13
4
作者 徐费凡 顾德林 +1 位作者 瞿梅 施军卫 《热带医学杂志》 CAS 2016年第6期722-724,736,F0003,共5页
目的运用荧光PCR溶解曲线法快速检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药突变,并将其与传统药敏试验进行比较,从而评价其敏感性、特异性及应用价值。方法收集南通市第六人民医院2014年45株结核分枝杆菌临床分离株,运用荧光PCR溶解曲线... 目的运用荧光PCR溶解曲线法快速检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药突变,并将其与传统药敏试验进行比较,从而评价其敏感性、特异性及应用价值。方法收集南通市第六人民医院2014年45株结核分枝杆菌临床分离株,运用荧光PCR溶解曲线法和传统药敏法分别检测其对利福平和异烟肼的耐药性,评价两种方法检测的一致性。结果以传统药敏试验为金标准,荧光PCR溶解曲线法检测利福平耐药突变的灵敏度90.0%(9/10)、特异度93.9%(31/33)、阳性预测值81.8%(9/11)、阴性预测值96.9%(31/32)、符合率93.0%(40/43),其中有2例出现不均一突变,判为敏感;检测异烟肼耐药突变的灵敏度80.0%(12/15)、特异度96.4%(27/28)、阳性预测值92.3%(12/13)、阴性预测值90.0%(27/30)、符合率90.7%(39/43)。与传统药敏有很好的一致性。传统药敏试验和荣光PCR溶解曲线不符合的12株菌株经测序分析,结果荧光PCR溶解曲线法与测序结果保持高度一致性(除20、21号)。结论荧光PCR溶解曲线法能够快速、准确地检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药突变,并且有很好的灵敏性和特异性,可用于耐药结核分枝杆菌临床快速筛查。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 荧光pcr溶解曲线法 耐药突变 利福平 异烟肼
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荧光定量PCR熔解曲线分析技术检测MSM HIV感染者T细胞TCR β链CDR3谱序初探 被引量：1
5
作者 李志峰 曾艺 +3 位作者 张宏军 冷文杰 陈亮 李琴 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第15期2138-2140,共3页
目的监测HIV感染者的外周血样本TCRβ链互补决定区3(CDR3)谱系变化,发现HIV特异性TCR TRBV家族。方法用本实验室已建立的"荧光定量PCR溶解曲线法监测HIV感染者TCR CDR3谱系漂移技术",对22名健康男性、19名MSM HIV感染者的外... 目的监测HIV感染者的外周血样本TCRβ链互补决定区3(CDR3)谱系变化,发现HIV特异性TCR TRBV家族。方法用本实验室已建立的"荧光定量PCR溶解曲线法监测HIV感染者TCR CDR3谱系漂移技术",对22名健康男性、19名MSM HIV感染者的外周血样本TCRβ链CDR3变化进行监测。结果 MSM HIV感染者的TRBV 5.2,TRBV7,TRBV9和TRBV20的单(寡)性表达频率要高于健康男性人群(P<0.05),MSM HIV感染者的TRBV亚家族的缺失率(4.25%)高于对照男性健康人群的TRBV亚家族的缺失率(0.52%)(P<0.05)。结论在国内首次利用"荧光定量PCR溶解曲线法"监测HIV感染者TCRβ链CDR3漂移变化,发现MSM HIV感染者的TCR BV家族存在单(寡)性增生和缺失现象,非正态分布现象增加,多样性减少。 展开更多
关键词 荧光定量pcr溶解曲线法 互补决定区3 谱系漂移
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Gen-XpertMTB/RIF和荧光PCR熔解曲线法在耐药结核病快速诊断中的意义 被引量：1
6
作者 刘莉 张宁 +3 位作者 王科文 姚莎 杨康丽 马纪龙 《中华肺部疾病杂志（电子版）》 2022年第2期161-165,共5页
目的Gen-XpertMTB/RIF和荧光PCR熔解曲线法(MeltPro)在耐药结核病快速诊断中的意义。方法选取2019年1月至12月陕西省结核病防治院收治的TB患者850例,均行表型药敏和Gen-XpertMTB/RIF检测,对Gen-XpertMTB/RIF检测阳性样本中利福平(RFP)... 目的Gen-XpertMTB/RIF和荧光PCR熔解曲线法(MeltPro)在耐药结核病快速诊断中的意义。方法选取2019年1月至12月陕西省结核病防治院收治的TB患者850例,均行表型药敏和Gen-XpertMTB/RIF检测,对Gen-XpertMTB/RIF检测阳性样本中利福平(RFP)耐药患者行MeltPro。以药敏法为金标准,分析Gen-XpertMTB/RIF对TB患者RFP耐药的诊断价值、成本效果比(C/E)和检测时间;分析Gen-XpertMTB/RIF联合MeltPro对耐多药(MDR)和准广泛耐药(Pre-XDR)的诊断价值、C/E和检测时间。结果Gen-XpertMTB/RIF对TB患者RFP耐药的诊断准确率为94.59%(804/850)。Gen-XpertMTB/RIF和药敏法对TB初治和复治患者RFP耐药的诊断一致性均较好。Gen-XpertMTB/RIF联合MeltPro诊断TB患者MDR的准确率为98.71%(839/850),且和药敏法对TB初治和复治患者MDR的诊断一致性均较好。Gen-XpertMTB/RIF诊断RFP耐药的C/E和诊断时间均低于药敏法。Gen-XpertMTB/RIF联合MeltPro诊断MDR、Pre-XDR的C/E高于药敏法,诊断时间低于药敏法。结论Gen-XpertMTB/RIF应用于TB患者RFP耐药检测,Gen-XpertMTB/RIF联合MeltPro应用于TB患者MDR、Pre-XDR检测,与药敏法诊断一致性均较高,且能够明显缩短检测时间,为诊断和治疗耐药肺结核赢得时间,减少耐药结核菌的传播,降低耐药结核病的发生率。 展开更多
关键词 耐药肺结核 荧光pcr溶解曲线法 Gen-XpertMTB/RIF 表型药敏 成本效果比 快速诊断
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高血压患者ACE基因Insertion/Deletion多态性中的罕见突变1例
7
作者 李娅亨 王倩 +1 位作者 杨杉 李亚峰 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2024年第2期6069-6072,共4页
高血压是最强的心血管危险因素之一,目前我国高血压的患病人数已达约2.45亿[1]。《中国心血管健康与疾病报告2021》数据显示,我国≥18岁成人高血压知晓率41.0%,治疗率34.9%,控制率仅11.0%。在高血压的用药治疗方面,由于用药种类繁多,且... 高血压是最强的心血管危险因素之一,目前我国高血压的患病人数已达约2.45亿[1]。《中国心血管健康与疾病报告2021》数据显示,我国≥18岁成人高血压知晓率41.0%,治疗率34.9%,控制率仅11.0%。在高血压的用药治疗方面,由于用药种类繁多,且存在药物反应的个体差异,通常会导致抗高血压药物的疗效不佳或不良反应[2]。2015年,国家卫生和计划生育委员会发布的《药物代谢酶和药物作用靶点基因检测技术指南(试行)》[3]。 展开更多
关键词 高血压 血管紧张素转换酶(ACE)基因 pcr溶解曲线法 Insertion/Deletion多态性 一代测序
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三种分子方法检测结核分枝杆菌利福平耐药性的比较 被引量：13
8
作者 刘立宾 王静 +4 位作者 李浩 岳永宁 陈园园 鲍志坚 朱敏 《中华临床感染病杂志》 CSCD 2020年第4期270-275,共6页
目的评估Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术用于快速筛查利福平耐药结核病的临床价值。方法收集2016年9月3日至2019年8月11日在浙江省中西医结合医院收治的经Bactec MGIT 960液体培养药敏确诊为结核病,且具有Xpert MTB/RIF... 目的评估Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术用于快速筛查利福平耐药结核病的临床价值。方法收集2016年9月3日至2019年8月11日在浙江省中西医结合医院收治的经Bactec MGIT 960液体培养药敏确诊为结核病,且具有Xpert MTB/RIF和基因芯片技术结果的150例患者临床资料,对所有患者分离培养菌株行荧光PCR熔解曲线检测。以Bactec MGIT 960液体培养药敏结果为金标准,分析Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术对利福平耐药结核病的诊断效能。绘制受试者工作曲线(ROC)评估三种方法在利福平耐药结核病诊断中的价值。结果以Bactec MGIT 960药敏结果为金标准,Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术检测利福平耐药的敏感度分别为88.89%(16/18)、94.44%(17/18)、88.89%(16/18),特异度分别为96.21%(127/132)、96.21%(127/132)、95.45%(126/132)。三种检测方法的敏感度和特异度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。三种分子方法检测利福平耐药与Bactec MGIT 960药敏结果的一致性Kappa值分别为0.794、0.827、0.770。ROC曲线分析显示,Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术的ROC曲线下面积分别为0.926、0.953、0.922。三种检测方法对利福平耐药均具有较好的诊断价值(P<0.01),但三种方法比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。三种方法检测利福平耐药与Bactec MGIT 960药敏不一致结果共8例。结论Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术三种分子方法对利福平耐药性检测能力相当,均具有较高的敏感度和特异度,适合快速筛查利福平耐药结核病。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 利福平耐药 荧光pcr溶解曲线 Xpert MTB/RIF 基因芯片 ROC曲线
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温州地区新生儿G6PD缺乏症基因突变分析 被引量：14
9
作者 朱丽丹 丁红香 +3 位作者 倪莉 余坚 徐晓媛 杨啸 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2018年第7期509-513,共5页
目的分析温州地区出生新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency,G6PD)缺乏症发生率及基因突变特点。方法收集温州医科大学附属第二医院新生儿20 412例,应用滤纸荧光斑点法对新生儿进行G6PD缺乏症筛查... 目的分析温州地区出生新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency,G6PD)缺乏症发生率及基因突变特点。方法收集温州医科大学附属第二医院新生儿20 412例,应用滤纸荧光斑点法对新生儿进行G6PD缺乏症筛查、酶法复诊;复诊阳性病例用MMCA法检测基因突变,MMCA法检测基因突变为阴性的再用二代基因测序;另筛查时间段内初筛阴性的女性样本G6PD活性值最低的53例用MMCA法检测基因突变。结果20 412例新生儿G6PD缺乏症纸片荧光法筛查阳性率为0.30%(62/20 412),其中男性59例,占95.16%(59/62);62例筛查阳性的病例酶法复诊均阳性,而MMCA法测基因突变阳性为60例,2例酶法复诊阳性而MMCA法检测阴性的样本通过二代测序均为c.1311C>T突变;MMCA法基因突变以c.1376G>T、c.1388G>A、c.1024C>T最为常见;初筛阴性的女性样本G6PD活性值最低的53例用MMCA法检测出基因突变8例。温州地区患儿母亲籍贯最多为泰顺县,占32.50%(13/40),而非温州地区广西壮族自治区、贵州、江西为高发地带,占63.33%(19/30)。结论温州地区新生儿中G6PD缺乏症男性患者多于女性。随着外来人口的流入和通婚的增多,温州地区的G6PD基因突变也在发生变化,基因诊断是对该病分子水平的诊断,有利于杂合子的检测。 展开更多
关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 新生儿G6PD筛查 发生率 多色荧光pcr溶解曲线法 基因突变 分布特点
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