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EB病毒潜伏膜蛋白LMP-1在鼻咽癌中的表达及临床意义 被引量：4
1
作者 林锦 郭巧娟 +4 位作者 韩露 陈奇松 宗井凤 潘建基 林少俊 《实用癌症杂志》 2010年第6期564-567,共4页
目的观察EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)在鼻咽癌(NPC)鼻咽拭子中的表达,探讨LMP-1表达与NPC临床病理特征的关系。方法纳入2007年～2008年福建省肿瘤医院放疗科收治的经病理检查确诊为NPC且同意参加该试验的初治患者129例,均在治疗前应... 目的观察EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)在鼻咽癌(NPC)鼻咽拭子中的表达,探讨LMP-1表达与NPC临床病理特征的关系。方法纳入2007年～2008年福建省肿瘤医院放疗科收治的经病理检查确诊为NPC且同意参加该试验的初治患者129例,均在治疗前应用鼻咽拭子法取鼻咽部黏膜脱落细胞,提取DNA,采用PCR法检测LMP-1基因的表达。结果 129例患者中有114例患者LMP-1呈阳性表达,另15例呈阴性表达,阳性率为88.37%(114/129);对照组中无1例呈阳性表达。LMP-1阳性表达率有颈部淋巴结转移组明显高于无颈部淋巴结转移组。LMP-1表达与患者年龄、性别、临床分期、T分期及M分期无相关性。结论 PCR法检测鼻咽拭子中LMP-1的检出率高于免疫组化法,LMP-1表达与鼻咽癌患者颈部淋巴结转移密切相关,临床中可预测鼻咽癌患者的转移潜能,LMP-1可能做为抗肿瘤转移靶向治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 鼻咽癌 EB病毒 潜伏膜蛋白lmp-1
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靶向EBV潜伏膜蛋白1的单克隆抗体促进HIV相关EBV阳性伯基特淋巴瘤细胞凋亡的分子机制
2
作者 涂小云 陈宇 +3 位作者 熊玉红 邓爱花 孙春枝 刘阳 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第6期467-472,共6页
目的制备和筛选抑制伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma,BL)的抗EBV潜伏膜蛋白1(latent membrane protein-1,LMP1)单克隆抗体。方法人工合成EBV潜伏膜蛋白1的跨膜结构域5(transmembrane domain 5,TMD5),并以此为抗原,采用杂交瘤法制备抗TMD... 目的制备和筛选抑制伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma,BL)的抗EBV潜伏膜蛋白1(latent membrane protein-1,LMP1)单克隆抗体。方法人工合成EBV潜伏膜蛋白1的跨膜结构域5(transmembrane domain 5,TMD5),并以此为抗原,采用杂交瘤法制备抗TMD5单抗。ELISA法测定小鼠腹水中的抗体效价。7-氨基放线菌素D(7-Aminoactinomycin D,7-AAD)/Annexin V-PE双标记流式细胞术和JC-1染色联合流式细胞术测定线粒体膜电势评估单抗对BL细胞系Daudi细胞的促凋亡活性。蛋白质印迹法测定Daudi细胞内促存活信号通路p38-MAPK/IKK/NF-κB相关蛋白的表达水平。结果经过2轮筛选,获得R2-2-5E-6C和R2-2-8D-3A两种单抗,这2种单抗均能与TMD5发生抗体-抗原特异性结合,而与GAPDH无免疫反应。与NC组相比,R2-2-5E-6C组和R2-2-8D-3A组处理后的Daudi细胞中Annexin V+7-AAD+细胞所占百分比增加;JC-1荧光强度<104的细胞所占百分比增加;胞内p38-MAPK、IKK和NF-κB的表达水平降低(P<0.05)。结论筛选获得的抗TMD5单抗R2-2-5E-6C和R2-2-8D-3A可通过抑制LMP1介导的p38-MAPK/IKK/NF-κB信号通路的活性促进BL凋亡。 展开更多
关键词 跨膜结构域5 潜伏膜蛋白1 HIV-相关EBV-阳性伯基特淋巴瘤 单克隆抗体
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潜伏膜蛋白(LMP-1)源短肽对周围血单个核细胞增殖的影响 被引量：1
3
作者 陈文静 廖伟娇 +1 位作者 马桂璋 杨英 《广州医药》 2005年第1期62-64,共3页
目的　探讨LMP 1来源的LALLFWL短肽对人外周血单个核细胞的免疫抑制作用。方法　利用MTT比色法进行检测体外培养人外周血单个核细胞在此短肽作用下的转化情况。结果　LALLFWL短肽对人外周血单个核细胞转化有明显抑制作用 ,测定组与对照... 目的　探讨LMP 1来源的LALLFWL短肽对人外周血单个核细胞的免疫抑制作用。方法　利用MTT比色法进行检测体外培养人外周血单个核细胞在此短肽作用下的转化情况。结果　LALLFWL短肽对人外周血单个核细胞转化有明显抑制作用 ,测定组与对照组有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,并呈剂量依赖关系。结论　LMP 1来源的LALLFWL短肽具有抑制人外周血单个核细胞转化的作用 ,能抑制机体的细胞免疫功能。 展开更多
关键词 潜伏膜蛋白 lmp-1 周围血单个核细胞增殖 疏水短肽 免疫抑制作用
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鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白1活化cyclinD1的表达 被引量：27
4
作者 赵晓荣 王承兴 +7 位作者 罗非君 顾焕华 唐敏 夏林庆 邓琳 易薇 邓锡云 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期704-710,共7页
为了探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(EBV LMP1)促进细胞增殖 ,参与EBV相关疾病致瘤的分子机制 ,研究了LMP1在鼻咽癌细胞中调节cyclinD1表达 ,进而影响细胞周期行进及细胞恶性表型改变 ,并初步确定了LMP1发挥该功能的结构域 .利用已建株的... 为了探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(EBV LMP1)促进细胞增殖 ,参与EBV相关疾病致瘤的分子机制 ,研究了LMP1在鼻咽癌细胞中调节cyclinD1表达 ,进而影响细胞周期行进及细胞恶性表型改变 ,并初步确定了LMP1发挥该功能的结构域 .利用已建株的Tet on LMP1 HNE2鼻咽癌细胞系 ,蛋白质印迹实验分析LMP1诱导cyclinD1蛋白质表达的表达动力学 ,包括时间效应及剂量效应 ;利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1,以载体型细胞为对照 ,确定LMP1活化cyclinD1表达的结构域 .同时结合基因诱导表达及反义寡聚核酸技术阻断基因表达的实验方法 ,进一步确定LMP1上调的cyclinD1功能 ,即对细胞周期行进及细胞恶性表型的影响 .结果表明LMP1确实可以诱导cyclinD1的表达 (2～ 4倍 ) ,且诱导具有时间依赖性及剂量依赖性 ;利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1,以载体型细胞为对照 ,结合报道基因分析法 ,确定与空白载体细胞系比较 ,野生型LMP1从转录水平可反式激活cyclinD1报道基因活性约 11 2倍 ,其中CTAR1及CTAR2均可活化cyclinD1表达 ,但以CTAR2为主 ,与野生型LMP1诱导cyclinD1反式激活活性比较 ,CTAR1缺失导致cyclinD1报道基因活性下降 2 3 6 % ,CTAR2缺失导致cyclinD1活性下降约 80 7% ,C端均缺失时cyclinD1活性只? 展开更多
关键词 EB病毒 潜伏膜蛋白1 周期蛋白D1 鼻咽癌细胞
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EB病毒潜伏膜蛋白1通过TRAF/TRADD激活JNK信号途径 被引量：10
5
作者 胡智 曾亮 +5 位作者 陶永光 唐发清 王海 罗非君 易薇 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期562-566,共5页
为了探讨在鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)激活c Jun氨基端激酶 (JNK)信号途径的分子机制 ,利用可调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系L7,蛋白质印迹检测 ,发现LMP1能够促进JNK的活化 ;利用稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1... 为了探讨在鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)激活c Jun氨基端激酶 (JNK)信号途径的分子机制 ,利用可调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系L7,蛋白质印迹检测 ,发现LMP1能够促进JNK的活化 ;利用稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1及其三种突变体HNE2 LMP1ΔCTAR 1、HNE2 LMP1ΔCTAR2、HNE2 LMP1ΔCTAR 1,2及LMP1阴性的HNE2 为材料 ,采用蛋白质印迹和报告基因法分析JNK和活化蛋白 1(AP1)活化情况 ,结果显示HNE2 LMP1和HNE2 LMP1ΔCTAR1中磷酸化JNK蛋白表达量和AP1活性都无显著差异 ,而与HNE2 LMP1ΔCTAR2、HNE2 LMP1ΔCTAR1,2、阴性对照HNE2及空白载体转染细胞的JNK蛋白表达和AP1活性具有显著差异 ;进一步比较转染TRAF、TRADD显性负性突变体鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1中磷酸化的JNK量和AP1活性 ,结果显示 :TRAF DN和TRADD DN的导入使活化的JNK蛋白和AP 1活性显著降低 ,二者间无显著差异 ,提示TRAF和TRADD可能参与了LMP1对JNK和AP 1的活化 .以上结果提示在鼻咽癌细胞系中LMP1功能结构域CTAR2通过结合TRAF/TRADD激活JNK从而活化重要的转录因子AP1. 展开更多
关键词 EB病毒 潜伏膜蛋白1 TRAF/TRADD 激活 JNK信号途径 鼻咽癌
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EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌细胞中通过STAT3促进VEGF表达 被引量：13
6
作者 谭运年 陶永光 +4 位作者 李力力 刘素芳 唐敏 顾焕华 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期427-431,共5页
探讨了EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过STAT3调控诱导血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的表达 .利用蛋白质印迹的方法对HNE2、HNE2 LMP1以及瞬时转染STAT3显性负性突变体STAT3β的HNE2 LMP1细胞中VEGF含量进行检测 ,发现LMP1可以... 探讨了EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过STAT3调控诱导血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的表达 .利用蛋白质印迹的方法对HNE2、HNE2 LMP1以及瞬时转染STAT3显性负性突变体STAT3β的HNE2 LMP1细胞中VEGF含量进行检测 ,发现LMP1可以上调VEGF的表达 ,而STAT3β可以抑制VEGF的上调 ;利用LMP1可控表达细胞系tet on LMP1 HNE2进行LMP1时间和剂量诱导表达研究 ,发现VEGF可以随LMP1的动态表达而表达 ;将VEGF野生型报告基因和VEGF潜在的STAT3转录因子突变体报告基因与LMP1表达载体分别共转染研究发现 ,LMP1可以激活VEGF的转录 ,这种转录通过VEGF启动子区STAT3转录因子的结合位点发挥作用 ;电泳迁移率变动分析 (EMSA)确证了STAT3的这种DNA位点的特异性活性 .结果表明 :EB病毒编码的LMP1在鼻咽癌细胞中可以增加VEGF的转录和表达 。 展开更多
关键词 EB病毒 潜伏膜蛋白1(LMP1) STAT3 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 鼻咽癌
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EB病毒编码的潜伏膜蛋白1参与鼻咽癌恶性演进的转录调控实验研究 被引量：9
7
作者 罗非君 胡智 +4 位作者 曾亮 唐发清 顾焕华 唐敏 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期567-571,共5页
探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)激活激活蛋白 1(AP1) ,和核转录因子 (NF κB)在鼻咽癌细胞SUNE 1及亚细胞株恶性演进中的作用 .运用报告基因法和凝胶电泳迁移率法 (EMSA)分析AP1和NF κB反式激活活性和DNA结合活性 ,蛋白质印迹检测蛋白... 探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)激活激活蛋白 1(AP1) ,和核转录因子 (NF κB)在鼻咽癌细胞SUNE 1及亚细胞株恶性演进中的作用 .运用报告基因法和凝胶电泳迁移率法 (EMSA)分析AP1和NF κB反式激活活性和DNA结合活性 ,蛋白质印迹检测蛋白质表达 ;裸鼠致瘤实验结合组织制片研究瘤细胞的成瘤和转移能力 .结果显示恶性程度不同的SUNE 1亚细胞株的反式激活活性、DNA结合活性、LMP1蛋白表达及c Jun氨基端激酶 (JNK)活性均存在明显差异 ,且与细胞恶性程度正相关 .这些结果提示LMP1活化AP1和NF κB的信号通路参与了鼻咽癌细胞SUNE 1的恶性演进过程 . 展开更多
关键词 EB病毒 编码 潜伏膜蛋白1 鼻咽癌 恶性演进 转录调控 实验研究 转录因子 转移
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EB病毒潜伏膜蛋白1通过Survivin介导细胞增殖和抑制细胞凋亡 被引量：6
8
作者 唐发清 顾焕华 +4 位作者 胡智 唐敏 翁新宪 易薇 曹亚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期646-652,共7页
利用间接免疫荧光、基因转染、抗体剔除 (Ab knock out)、细胞平板集落形成、流式细胞术以及半胱氨酸天冬酰胺酶 (caspase3)活性检测等方法 ,从survivin核移位、Rb磷酸化、细胞周期演进、细胞克隆形成和细胞凋亡等方面 ,探讨EB病毒潜伏... 利用间接免疫荧光、基因转染、抗体剔除 (Ab knock out)、细胞平板集落形成、流式细胞术以及半胱氨酸天冬酰胺酶 (caspase3)活性检测等方法 ,从survivin核移位、Rb磷酸化、细胞周期演进、细胞克隆形成和细胞凋亡等方面 ,探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)调控细胞增殖和细胞凋亡双重效应的分子机制 .结果发现 ,LMP1表达介导survivin核移位 ,促进细胞Rb磷酸化增加 ,S期细胞数显著增加 ;LMP1通过survivin促进细胞克隆形成 .用Ab knock out阻断survivin核移位和survivin反义核酸抑制survivin表达时 ,Rb磷酸化水平降低 ,S期细胞减少 ,抑制LMP1介导的细胞增殖 ,活化细胞caspase 3,诱导细胞凋亡 .结果提示 。 展开更多
关键词 EB病毒 潜伏膜蛋白1 介导 细胞增殖 细胞凋亡
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EB病毒潜伏膜蛋白1多态性与鼻咽癌的关系 被引量：5
9
作者 张晓实 宋坤华 +3 位作者 麦海强 张如华 陈剑经 曾益新 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期103-107,共5页
为了分析广东地区鼻咽癌病人和非鼻咽癌病人携带的Epstein Barr病毒 (EBV)潜伏膜蛋白 1(LMP1)基因多态性 ,探讨LMP1基因羧基端缺失 30个碱基的EBV是否与华南地区鼻咽癌高发有关。为此收集了初治的 10 7例鼻咽癌病人和 10 6例非鼻咽癌肿... 为了分析广东地区鼻咽癌病人和非鼻咽癌病人携带的Epstein Barr病毒 (EBV)潜伏膜蛋白 1(LMP1)基因多态性 ,探讨LMP1基因羧基端缺失 30个碱基的EBV是否与华南地区鼻咽癌高发有关。为此收集了初治的 10 7例鼻咽癌病人和 10 6例非鼻咽癌肿瘤病人的漱口液 ,用巢式PCR扩增LMP1羧基端 ,观察缺失型LMP1的构成比。同时 ,测序分析缺失型LMP1编码区序列 ,了解缺失型LMP1多态性与鼻咽癌的关联度。结果 :在 5 0 %的样品中可检出LMP1基因 ,缺失型LMP1在鼻咽癌病人和非鼻咽病人的构成比相似 ,约占 70 % ,原型和缺失型LMP1混合感染少见 (0～ 6 % )。另外 ,广州地区的缺失型LMP1序列与上海、台湾、香港地区的缺失型LMP1基因高度同源 ,鼻咽癌病人是和非鼻咽癌病人携带的缺失型LMP1基因序列基本相同。此结果表明 ,广州地区流行的LMP1基因羧基端缺失 30个碱基的EBV株 ,漱口液中检测出的缺失型与原型LMP1构成比约为 7:3,在鼻咽癌病人和非鼻咽癌病人此分布情况相似。 展开更多
关键词 潜伏膜蛋白1 多态性 鼻咽癌 EB病毒
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重组腺相关病毒介导RNA干扰抑制EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞影响的动物试验 被引量：4
10
作者 刘雄 李刚 +3 位作者 张宝 王路 李晓华 李湘平 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期611-614,618,共5页
目的探讨EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)对于鼻咽癌细胞在体内增殖及转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA(shRNA)干扰序列,构建2种重组腺相关病毒(rAAV)载体:(增强型绿色荧光蛋白,EGFP)rAAV-EGFP和rAAV-shRNA-LMP-1... 目的探讨EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)对于鼻咽癌细胞在体内增殖及转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA(shRNA)干扰序列,构建2种重组腺相关病毒(rAAV)载体:(增强型绿色荧光蛋白,EGFP)rAAV-EGFP和rAAV-shRNA-LMP-1,以不同滴度rAAV-EGFP转染鼻咽癌C666-1细胞确定最佳转染复数(MOI),rAAV-shRNA-LMP-1按MOI转染C666-1,RT-PCR鉴定抑制效率,将体外转染RNA干扰后的C666-1细胞注入裸鼠肝脏包膜下制作鼻咽癌异位肝种植的肝肺转移模型,观察肝脏成瘤及肝内、肺转移情况,分析LMP-1基因沉默在动物水平对鼻咽癌细胞成瘤及转移能力的影响。结果rAAV-EGFP以5×104v.g(virus genome,病毒基因组数)/细胞转染C666-1细胞,转染效率大于95%,RT-PCR鉴定rAAV-shRNA-LMP-1以5×104v.g/细胞转染C666-1后目的基因抑制效率大于90%,动物试验结果显示rAAV-shRNA-LMP-1组肝脏成瘤体积与对照组rAAV-EGFP无显著差异,但显著减少了种植肿瘤的肝内及肺转移率。结论通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达,可在动物水平抑制鼻咽癌细胞转移,但对鼻咽癌细胞生长无显著影响。 展开更多
关键词 鼻咽癌 重组腺相关病毒 RNA干扰 EB病毒潜伏膜蛋白1 转移
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EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1筛选鼻咽癌的初步结果 被引量：3
11
作者 林少俊 郭巧娟 +3 位作者 林锦 宗井凤 韩露 潘建基 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期435-439,共5页
背景与目的:早期诊断鼻咽癌是提高疗效的重要途径,而目前临床上用于鼻咽癌早期诊断的指标存在灵敏度及特异度不理想的问题,EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1是目前被证实的具有转化功能的蛋白质之一,本研究旨在探讨LMP-1作为鼻咽癌筛选指标的价值... 背景与目的:早期诊断鼻咽癌是提高疗效的重要途径,而目前临床上用于鼻咽癌早期诊断的指标存在灵敏度及特异度不理想的问题,EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1是目前被证实的具有转化功能的蛋白质之一,本研究旨在探讨LMP-1作为鼻咽癌筛选指标的价值。方法:收集2007—2008年期间以耳鼻咽喉症状到福建省肿瘤医院放疗科就诊并同意参加本试验的患者300例,利用鼻咽拭子法取鼻咽部黏膜脱落细胞,提取DNA,聚合酶链反应法(PCR法)检测LMP-1基因的表达,所有入组患者均行鼻咽组织病理活检明确诊断。结果:300份鼻咽拭子标本提取了有效DNA样本数243份,合格率81%。非鼻咽癌的患者及健康者中,LMP-1的阳性表达率为3.70%(4/108),明显低于鼻咽癌患者(P<0.05)。LMP-1诊断鼻咽癌的灵敏度为88.15%(119/135),特异度为96.30%(104/108),阳性预测值为96.75%(119/123),阴性预测值为86.67%(104/120),正确率为91.77%,Youden指数为84.45%。结论:利用PCR法检测鼻咽拭子中鼻咽黏膜脱落细胞EB病毒膜潜伏蛋白LMP-1的表达作为鼻咽癌筛选的指标可重复性好,具有较高的灵敏度和特异度,适合作为高危人群的筛查指标。 展开更多
关键词 鼻咽癌 EB病毒 膜潜伏蛋白lmp-1 早期诊断
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EB病毒潜伏膜蛋白1通过结合TRAFs调控NF-κB 被引量：3
12
作者 王承兴 李晓艳 +2 位作者 顾焕华 邓锡云 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期240-245,共6页
为了探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)的致瘤机制 ,对鼻咽癌中LMP1激活重要的核转录因子NF κB机制进行了研究 .首先 ,采用免疫共沉淀 蛋白质印迹在稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1中证实LMP1与TRAF1,2 ,3结合形成免疫共沉淀复合物 ... 为了探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)的致瘤机制 ,对鼻咽癌中LMP1激活重要的核转录因子NF κB机制进行了研究 .首先 ,采用免疫共沉淀 蛋白质印迹在稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1中证实LMP1与TRAF1,2 ,3结合形成免疫共沉淀复合物 ,进一步以野生型LMP1及其三种突变体的鼻咽癌细胞系LMP1(野生型 ,wt)、HNE2 LMP1del187～ 35 1(CTAR1缺失型 )、HNE2 LMP1(1～ 2 31) (CTAR2缺失型 )、HNE2 LMP1(1～ 187) (羧基端胞浆区缺失型 )、HNE2 pSG5 (空白载体型 )为材料 ,结合NF κB报道基因质粒(pGL2 NF κB luc)的荧光素酶活性表达分析NF κB的活性 ,证实 :较之母细胞 ,野生型LMP1活化NF κB达13 8倍 ,LMP1(1～ 187)几乎不活化NF κB ,LMP1(1～ 2 31)活化NF κB达 4 9倍 ,LMP1(del187～ 35 1)活化NF κB达 9 1倍 ;TRAF1过表达升高LMP1(wt)及LMP1(1～ 2 31)介导的NF κB活性 ,而对LMP1(del187～ 35 1)活化NF κB无影响 ;TRAF3过表达或TRAF3负显性突变体抑制LMP1(wt)及LMP1(1～ 2 31)介导的NF κB活性 ,而不影响LMP1(del 187～ 35 1)活化NF κB ;TRAF2过表达升高LMP1(wt)、LMP1(1～2 31)及LMP1(del 187～ 35 1)介导的NF κB活性 .这些结果表明 :鼻咽癌中LMP1通过TRAF1、TRAF2或TRAF3调控NF κB 。 展开更多
关键词 鼻咽癌 潜伏膜蛋白1 肿瘤坏死因子受体相关因子 NF-ΚB EB病毒
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EB病毒潜伏性膜蛋白1促原代MEF细胞永生化的作用及机制 被引量：7
13
作者 贺智敏 张志伟 +3 位作者 杨芳 余艳辉 欧阳咏梅 陈主初 《中国病毒学》 CSCD 2006年第1期16-20,共5页
为了探讨EB病毒潜伏性膜蛋白1(LMP1)促原代小鼠胚胎成纤维(MEF)细胞增殖规律及作用机制,构建包含野生型LMP1和其TNFR相关死亡区(TRADD)结合区即羧基末端384～386氨基酸置换(YYD→ID)的突变型LMP1逆转录病毒,感染原代培养的MEF细胞,动态... 为了探讨EB病毒潜伏性膜蛋白1(LMP1)促原代小鼠胚胎成纤维(MEF)细胞增殖规律及作用机制,构建包含野生型LMP1和其TNFR相关死亡区(TRADD)结合区即羧基末端384～386氨基酸置换(YYD→ID)的突变型LMP1逆转录病毒,感染原代培养的MEF细胞,动态观察各细胞在传代培养过程中细胞动力学和形态学变化。发现对照细胞(MEF-LNSX)传至P8～P10时出现明显的生长阻滞;携突变型LMP1的细胞(MEF-LMP1TRADD)自P10起倍增时间逐渐延长,P19时出现明显生长阻滞;而携野生型LMP的细胞(MEF-LMP1)倍增时间逐渐降低并发生了永生化。Westernblot检测发现MEF-LNSX细胞CyclinA表达自P4起明显降低,MEF-LMP1TRADD细胞自P10显著增高后快速降低,MEF-LMP1自P10显著增高后一直维持在较高水平。结果表明:LMP1能促进MEF细胞增殖并诱导体外永生;LMPTRADD则仅能诱导MEF细胞的早期增殖。提示羧基末端区(TRADD)是LMP1促MEF细胞永生的重要活性部位,上调CyclinA表达可能是其作用机制之一。 展开更多
关键词 EB病毒 潜伏性膜蛋白1 突变 MEF细胞 永生化
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EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌细胞中通过ERK介导Ets-1表达 被引量：2
14
作者 曾亮 李敏 +4 位作者 宋鑫 陶永光 唐敏 李嵬 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期574-578,共5页
为了探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)对核转录因子Ets 1表达和活化的影响 ,并证实细胞外信号调节激酶 1/ 2 (ERK1/ 2 )参与了该过程 ,选用可调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系L7,应用蛋白质印迹法检测Ets 1、p ERK蛋白质表达 ,免疫共沉淀 ... 为了探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)对核转录因子Ets 1表达和活化的影响 ,并证实细胞外信号调节激酶 1/ 2 (ERK1/ 2 )参与了该过程 ,选用可调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系L7,应用蛋白质印迹法检测Ets 1、p ERK蛋白质表达 ,免疫共沉淀 蛋白质印迹法检测Ets 1磷酸化状态 ,使用ERK1/ 2特异性小分子阻断物PD980 5 9作用后 ,蛋白质印迹法检测 p ERK、Ets 1表达及磷酸化变化 .结果显示 :在L7细胞中诱导性LMP1可促进p ERK、Ets 1蛋白质表达及其苏氨酸残基磷酸化 ,在一定范围呈时间和剂量效应 ;通过PD980 5 9对诱导性LMP1作用的干预发现 ,p ERK大部分表达被阻断 ,而Ets 1表达及其苏氨酸磷酸化也被部分阻断 ,以上结果提示ERK部分介导了LMP1诱导Ets 展开更多
关键词 EB病毒 潜伏膜蛋白1 鼻咽癌细胞 ERK介导 胞外信号调节激酶
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鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1的表达诱发转基因小鼠鼻咽不典型增生 被引量：3
15
作者 蓝轲 乔贵林 +3 位作者 沈新民 张玲 吕丽春 姚开泰 《动物医学进展》 CSCD 2002年第5期46-48,54,共4页
为建立鼻咽癌来源潜伏膜蛋白 1 ( N-L MP1 )转基因小鼠模型 ,从整体的角度研究 N-L MP1的功能 ,进一步阐明 EB病毒在鼻咽癌变过程中的作用 ,应用 DNA重组技术将角质细胞特异性启动子 EDL2与 N-L MP1连接 ,构建转基因 EDL2 -N-L MP1 ;并... 为建立鼻咽癌来源潜伏膜蛋白 1 ( N-L MP1 )转基因小鼠模型 ,从整体的角度研究 N-L MP1的功能 ,进一步阐明 EB病毒在鼻咽癌变过程中的作用 ,应用 DNA重组技术将角质细胞特异性启动子 EDL2与 N-L MP1连接 ,构建转基因 EDL2 -N-L MP1 ;并用显微注射技术 ,将转基因 EDL2 -N-L MP1注射入小鼠受精卵前核 ,再将注射后的受精卵植入假孕母鼠 ,获得转基因鼠 ,然后观察目的基因在鼻咽部的表达和病理变化。本实验共获得 53只转基因鼠 ,PCR法证明其中 6只小鼠有 N-L MP1基因扩增带 ,Southern杂交显示 PCR阳性小鼠有特异的杂交信号 ,整合率为 1 1 .3 % ;1只 4月龄的转基因鼠出现了鼻咽部不典型增生。说明 N-L MP1单独就能诱发小鼠鼻咽部发生癌前病变 ,为 EB病毒可能是鼻咽癌的主要病因提供了有力的证据。 展开更多
关键词 鼻咽癌 潜伏膜蛋白1 表达 诱发 转基因小鼠 鼻咽不典型增生
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EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌中结合磷酸化的TRAFs 被引量：2
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作者 王承兴 李晓艳 +2 位作者 顾焕华 邓锡云 曹亚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期110-114,共5页
对鼻咽癌中潜伏膜蛋白 1 (LMP1 )是否结合磷酸化的肿瘤坏死因子受体相关因子 (tumornecrosis factor receptor- associated factors,TRAFs)信号分子进行探讨 .首先应用 CSA/SP双染色法在 30例鼻咽癌活检组织中发现 1 6例 (52 % ) LMP1与... 对鼻咽癌中潜伏膜蛋白 1 (LMP1 )是否结合磷酸化的肿瘤坏死因子受体相关因子 (tumornecrosis factor receptor- associated factors,TRAFs)信号分子进行探讨 .首先应用 CSA/SP双染色法在 30例鼻咽癌活检组织中发现 1 6例 (52 % ) LMP1与 TRAF1、TRAF2和 TRAF3共表达于癌细胞胞膜及胞浆同一部位 .这提示 EB病毒 LMP1在鼻咽癌中可能结合 TRAF1、TRAF2或TRAF3发挥作用 .进一步以导入载体 p SG5的鼻咽癌细胞系 HNE2 - p SG5为对照 ,建立了稳定表达 LMP1的鼻咽癌细胞系 HNE2 - LMP1 ,利用这两种细胞系 ,以免疫共沉淀 - Western印迹方法 ,证实了 LMP1可与磷酸化的 TRAF1、TRAF2或 TRAF3直接或间接作用形成免疫共沉淀复合物 . 展开更多
关键词 鼻咽癌 潜伏膜蛋白1 肿瘤坏死因子受体相关因子 信号转导 EB病毒 TRAFs
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潜伏期膜蛋白1与疾病关系的研究进展 被引量：4
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作者 商蕾 赵鹏翔 +1 位作者 杨林麒 马雪梅 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期912-916,共5页
EB病毒(EBV)是一种普遍存在的致癌病毒,是高度相关的淋巴和上皮肿瘤的来源和发展,包括伯基特淋巴瘤和鼻咽癌(NPC)等,EBV基因几乎可以在所有细胞中。EBV感染通常与少数潜伏病毒功能的蛋白质表达,包括潜伏膜蛋白LMP1和LMP2A等和巴尔核抗原... EB病毒(EBV)是一种普遍存在的致癌病毒,是高度相关的淋巴和上皮肿瘤的来源和发展,包括伯基特淋巴瘤和鼻咽癌(NPC)等,EBV基因几乎可以在所有细胞中。EBV感染通常与少数潜伏病毒功能的蛋白质表达,包括潜伏膜蛋白LMP1和LMP2A等和巴尔核抗原1(EBNA1)。LMP1是肿瘤坏死因子受体超家族的成员,被认为是EBV的主要致瘤蛋白。在EB病毒中通过2个C末端结构域编码基因蛋白LMP1信号来驱动细胞生长,存活和转化。LMP1蛋白目前是惟一已被证实的EB病毒的癌基因,LMP1的表达参与了肿瘤的发生与发展,是目前癌症方面研究的重点。 展开更多
关键词 潜伏期膜蛋白1(LMP1) EB病毒(EBV) 肿瘤
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EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞体外转移能力影响 被引量：3
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作者 刘雄 彭英 +4 位作者 李刚 张宝 李晓华 周立辉 李湘平 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2008年第11期615-619,共5页
目的探讨EB病毒（epstein-barr virus,EBV）潜伏膜蛋白1（Iatent membrane protein1，LMP-1）对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）细胞体外转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA（small hairpin RNA，shRNA... 目的探讨EB病毒（epstein-barr virus,EBV）潜伏膜蛋白1（Iatent membrane protein1，LMP-1）对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）细胞体外转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA（small hairpin RNA，shRNA）干扰序列，构建2种重组腺相关病毒（recombinant adeno—associated virus，rAAV）载体：rAAV-增强型绿色荧光蛋白（enhance green fluorescent protein，EGFP）和rAAV-shRNA—LMP-1，以不同滴度rAAV-EGFP转染鼻咽癌C666—1细胞确定最佳转染效率（multiplicity of infection，MOI），rAAV-shRNA-LMP-1按MOI转染C666-1，RT-PCR鉴定抑制效率，划痕试验和基底膜穿透试验检验细胞转移能力的变化。结果以rAAV-EGFP5×10^4v．g（virus genome，病毒基因组数），细胞转染C666—1细胞，转染效率大于95％，RT-PCR鉴定rAAV-shRNA—LMP-1以5×10^4v．g／细胞转染C666-1后目的基因抑制效率大于90％，划痕试验显示在相同的时间内，越过划痕边缘移动到空白处的细胞数明显减少（P〈0．01），基底膜穿透试验提示细胞穿透能力显著下降（P〈0．001）。结论通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达，并显著抑制了肿瘤细胞的运动及穿透转移能力。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 依赖病毒 RNA干扰 肿瘤转移 潜伏膜蛋白1
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EB病毒潜伏膜蛋白1的研究进展 被引量：2
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作者 高俊 陈文静 +1 位作者 廖伟娇 马桂璋 《广东医学》 CAS CSCD 2004年第10期1225-1227,共3页
关键词 EB病毒基因组 LMP1 潜伏膜蛋白1 感染者 研究进展 单纯疱疹病毒 体内 跨膜蛋白 结构域 双链DNA
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EB病毒编码的潜伏膜蛋白1参与鼻咽癌侵袭和转移的研究进展 被引量：6
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作者 刘文斌 罗非君 曹亚 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2010年第6期484-488,共5页
鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一种高转移的肿瘤,其侵袭转移是一个多步骤、多因素参与的极其复杂的过程。Epstein-Barr病毒(EBV)编码的潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)见于多数鼻咽癌细胞中,其调控的多条信号通... 鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一种高转移的肿瘤,其侵袭转移是一个多步骤、多因素参与的极其复杂的过程。Epstein-Barr病毒(EBV)编码的潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)见于多数鼻咽癌细胞中,其调控的多条信号通路都与鼻咽癌的侵袭和转移密切相关。研究发现,LMP1通过诱导产生一系列与细胞侵袭和转移相关的因子,包括基质金属蛋白酶类(matrix metalloproteinases,MMPs),c-Met,Ets1,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),Ezrin,MUC1和Twist等,参与鼻咽癌的侵袭和转移过程。本文阐述LMP1与鼻咽癌侵袭转移关系研究的新进展。 展开更多
关键词 鼻咽癌 潜伏膜蛋白1 侵袭 转移
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