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甲型流感病毒H1N1型灭活病毒标准物质研究
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作者 许丽 乐丽欢 +6 位作者 杨雪 王炤坤 李兰英 闻艳丽 陶晴 胡轶红 刘刚 《计量学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期294-299,共6页
以人工培养真实病毒为原料,研制了一种甲型流感病毒H1N1型灭活病毒标准物质。该标准物质经化学灭活及灭活效果验证后,联合多家实验室采用数字PCR定量检测方法对拷贝数浓度进行定值,对标准物质的均匀性、稳定性及不确定度进行了评估。结... 以人工培养真实病毒为原料,研制了一种甲型流感病毒H1N1型灭活病毒标准物质。该标准物质经化学灭活及灭活效果验证后,联合多家实验室采用数字PCR定量检测方法对拷贝数浓度进行定值,对标准物质的均匀性、稳定性及不确定度进行了评估。结果显示该标准物质均匀性良好,在-80~-70℃保存条件下稳定保存5个月,标准物质最终定值结果为(1384.5±249.3)copies/μL(k=2)。该标准物质可为H1N1型甲型流感病毒检测的全过程提供计量溯源和质量控制支撑,有助于提升相关核酸检测结果的准确性和可靠性。 展开更多
关键词 生物计量学 甲型流感病毒 H1N1 灭活病毒 标准物质 数字PCR
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高效化学偶联的H1N1灭活病毒核酸适配体比色传感器
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作者 潘雅杰 张巧巧 +1 位作者 王峥 娄新徽 《首都师范大学学报(自然科学版)》 2024年第3期87-96,共10页
以A型H1N1灭活流感病毒为例,建立一种高灵敏、高特异、便于产业化和高生物安全性的快速检测高传染性病原体的方法——磁交联沉淀-纳米金联用(MCP-GNP)比色法。首先,利用磁珠上活化的羧基与灭活病毒表面上蛋白质的一级胺基之间高效的化... 以A型H1N1灭活流感病毒为例,建立一种高灵敏、高特异、便于产业化和高生物安全性的快速检测高传染性病原体的方法——磁交联沉淀-纳米金联用(MCP-GNP)比色法。首先,利用磁珠上活化的羧基与灭活病毒表面上蛋白质的一级胺基之间高效的化学偶联实现对灭活病毒的捕获;其次,将核酸适配体与捕获了灭活病毒的磁珠进行孵育,核酸适配体特异性识别H1N1灭活病毒,磁性分离后热洗脱磁珠上结合的核酸适配体;再次,对热洗脱的核酸适配体进行聚合酶链式反应(PCR)扩增;最后,利用纳米金对单链引物和双链扩增产物吸附能力的差异,实现对H1N1灭活病毒的比色检测。以H5N1灭活病毒为阴性对照组,检出限(S/N=3)为1 ng/L,是本课题组之前报道的特异性电化学阻抗传感器检出限的1/900。利用上述方法首次实现了对低病毒载量临床H1N1灭活病毒阳性咽拭子样本的比色检测。未经优化的条件下,从灭活病毒捕获到检测的全流程在3 h内完成,初步展示了其临床应用价值。此外,文中所有比色检测结果均与荧光定量PCR技术的测量结果一致,证实了方法的可靠性。本文的核心创新点是利用化学偶联进行超低质量浓度灭活病毒捕获,无需对病毒核酸进行提取和富集,更加便捷。此外,本研究利用H1N1灭活病毒的DNA核酸适配体实现病毒的特异性检测,不直接检测活病毒,具有高生物安全性。 展开更多
关键词 H1N1灭活病毒 核酸适配体 化学偶联 纳米金 比色检测 荧光实时定量PCR
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我国与WHO血液制品去除/灭活病毒技术方法与验证指导原则的比较研究 被引量:1
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作者 徐宏山 岳广智 +2 位作者 杨立宏 刘欣玉 李玉华 《中国药事》 CAS 2023年第4期367-375,共9页
目的:比较我国现行《血液制品病毒去除/灭活验证指导原则》[国药监注(2002)160号]与世界卫生组织(WHO)《血液制品病毒去除/灭活验证指南》,旨在推动我国血液制品病毒风险控制与管理水平的提高及血液制品的合理应用。方法:从去除/灭活病... 目的:比较我国现行《血液制品病毒去除/灭活验证指导原则》[国药监注(2002)160号]与世界卫生组织(WHO)《血液制品病毒去除/灭活验证指南》,旨在推动我国血液制品病毒风险控制与管理水平的提高及血液制品的合理应用。方法:从去除/灭活病毒方法的选择、常用去除/灭活病毒方法评价、特定的去除/灭活病毒方法验证、生产工艺去除/灭活病毒能力、去除/灭活病毒方法再验证、临床试验、输血用病毒灭活血浆和正在开发的新型病毒灭活方法等几个方面进行比较,对血浆及其制品生产工艺中病毒灭活/去除的相关方法及其验证进行研究。结果与结论:我国现行《血液制品病毒去除/灭活验证指导原则》与WHO《血液制品病毒去除/灭活验证指南》总体要求基本一致,对我国血液制品去除/灭活病毒技术方法与验证工作仍具有适用性和指导性。 展开更多
关键词 血液制品 世界卫生组织 病毒去除/ 病毒安全性 指导原则 方法与验证
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SARS灭活病毒免疫兔后IgG特异抗体应答 被引量:6
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作者 刘新建 王一飞 +11 位作者 熊盛 张美英 张传海 刘石生 李久香 李贵生 陆家海 万卓越 鄢心革 郑焕英 顾为望 孟民杰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期289-292,共4页
将灭活的SARS冠状病毒抗原每隔两周多点注射免疫兔,共免疫3次,以观察SARS灭活病毒免疫兔后兔血清中IgG特异性抗体的应答变化。免疫前及第一次免疫后第8、14、21、28、35天耳静脉取血,分离血清。间接ELISA法测得血清中特异性IgG抗体持续... 将灭活的SARS冠状病毒抗原每隔两周多点注射免疫兔,共免疫3次,以观察SARS灭活病毒免疫兔后兔血清中IgG特异性抗体的应答变化。免疫前及第一次免疫后第8、14、21、28、35天耳静脉取血,分离血清。间接ELISA法测得血清中特异性IgG抗体持续升高,并表现出一定的剂量依赖性。第35天G1、G2、G3组血清IgG抗体滴度分别为1∶51200、1∶49600、1∶25600;中和试验测得G1组第28天血清样品中和抗体效价为1∶2560;蛋白芯片测得M、N、3CL、S1、S2、S3、S4等病毒蛋白抗原都可特异性结合抗血清中的IgG抗体,但是不同蛋白抗原结合能力有差别。因此可认为SARS灭活病毒经皮下注射免疫兔后,可诱导全身性IgG抗体应答,产生SARS冠状病毒特异性抗体。 展开更多
关键词 SARS灭活病毒 IGG ELISA 中和抗体 蛋白芯片 严重急性呼吸综合症
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灭活病毒诱导牙鲆传代细胞差减cDNA文库的构建及分析 被引量:2
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作者 杜昌升 张奇亚 +2 位作者 董彩文 苗大利 桂建芳 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期79-82,共4页
以灭活大鳞鲆弹状病毒诱导的牙鲆(Paralichthys olivaceus)传代细胞作为检测子(tester),正常对照细胞作为驱赶子(driver),分别提取mRNA,逆转录合成双链cDNA.经两轮差减杂交,两轮抑制性PCR扩增后,取正向差减的PCR产物与T载体连接,构建抑... 以灭活大鳞鲆弹状病毒诱导的牙鲆(Paralichthys olivaceus)传代细胞作为检测子(tester),正常对照细胞作为驱赶子(driver),分别提取mRNA,逆转录合成双链cDNA.经两轮差减杂交,两轮抑制性PCR扩增后,取正向差减的PCR产物与T载体连接,构建抑制差减cDNA文库,随机挑取7400余个克隆,对其中4200多个克隆进行PCR扩增鉴定,发现近4000个克隆中均含有插入片段,大小在250~1000bps之间,进一步对含有插入片段的近4000个克隆进行了斑点杂交筛选,得到近668个可能含有抗病毒或与免疫相关的阳性克隆.初步的结果表明所建立的差减cDNA文库适合进一步克隆鱼类抗病毒相关新基因. 展开更多
关键词 灭活病毒 诱导 克隆 cDNA文库 病毒 传代细胞 免疫相关 牙鲆 差减杂交 PCR扩增
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采用S/D法灭活病毒的新型凝血酶原复合物中试研制的初探 被引量:4
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作者 余蓉 赵青蓉 +1 位作者 许淑清 周宇 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1997年第3期112-115,共4页
以冰冻血浆为原料,按100L血浆/批中试规模采用有机溶剂/表面活性剂病毒灭活法制备凝血酶原复合物,并按《中国生物制品规程》(1990版)进行全面质检,结果显示在共计16个检测项目中,凝血酶活性、无菌、安全、抗HCV、抗HIV等10项指... 以冰冻血浆为原料,按100L血浆/批中试规模采用有机溶剂/表面活性剂病毒灭活法制备凝血酶原复合物,并按《中国生物制品规程》(1990版)进行全面质检,结果显示在共计16个检测项目中,凝血酶活性、无菌、安全、抗HCV、抗HIV等10项指标合格率为100%(n=6~8),热原、外观、水分合格率均为75%(n=8),效价回收率(%)为62.56±11.56(n=8),磷酸三丁酯和Tween80残留量分别小于10×10-6和100×10-6(n=8)。初步提示实验室规模所建的新型凝血酶原复合物工艺用于大批量实际生产是可行的。 展开更多
关键词 凝血酶原复合物 有机溶剂 表面性剂 灭活病毒
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亚甲蓝光化学法灭活病毒的研究——抗坏血酸对血浆凝血因子的保护作用 被引量:2
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作者 蒋仁举 贾文祥 +4 位作者 王泓 陈琪 曾蔚 张再蓉 马巨辉 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期21-24,共4页
目的 探讨抗坏血酸对亚甲蓝光化学法处理血浆时指示病毒灭活的效果 ,以及对部分凝血因子的保护作用。方法 采用CPE法评价病毒的灭活效果 ,用Clauss法测定纤维蛋白原的含量和一期法判定FⅧ :C的凝血活性。结果 在单采人血浆中加入 1μ... 目的 探讨抗坏血酸对亚甲蓝光化学法处理血浆时指示病毒灭活的效果 ,以及对部分凝血因子的保护作用。方法 采用CPE法评价病毒的灭活效果 ,用Clauss法测定纤维蛋白原的含量和一期法判定FⅧ :C的凝血活性。结果 在单采人血浆中加入 1μmol·L-1亚甲蓝和 2 4 0 μmol·L-1抗坏血酸 ,再给以 4 0 0 0 0lx荧光强度照射 6 0min ,VSV滴度下降 >8lgTCID50 ·ml-1,并且纤维蛋白原和FⅧ :C的回收率分别为 83.5 5 %和 81.6 7% ,比常规亚甲蓝 /荧光光化学法显著提高 (P <0 .0 1) ,而且凝血酶原时间延长值在正常允许值范围 ,活化部分凝血酶时间延长值也接近正常允许值范围。加入抗坏血酸和色氨酸可灭活病毒 ,而甘露醇不能。结论 在亚甲蓝光化学法中 ,抗坏血酸不影响病毒的灭活 ,而且对部分凝血因子有保护作用。因此 ,抗坏血酸可以有效提高单份冷冻新鲜人血浆的质量。 展开更多
关键词 亚甲蓝 光化学法 灭活病毒 抗坏血酸 血浆凝血因子 保护作用
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铜银离子协同游离氯灭活病毒的作用部位 被引量:3
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作者 骆文静 张文清 +2 位作者 侯悦 张进 胡艳冰 《第四军医大学学报》 1997年第5期439-441,共3页
目的:探讨铜银离子协同氯化消毒灭活病毒的作用位点.方法:用透射电子显微镜(TEM)观察了协同消毒前后的病毒形态,并用逆转录PCR的方法检测协同消毒前后病毒的核酸.结果:消毒前后f2的外形没有变化,f2对大肠杆菌的吸附... 目的:探讨铜银离子协同氯化消毒灭活病毒的作用位点.方法:用透射电子显微镜(TEM)观察了协同消毒前后的病毒形态,并用逆转录PCR的方法检测协同消毒前后病毒的核酸.结果:消毒前后f2的外形没有变化,f2对大肠杆菌的吸附力没有改变;协同消毒后脊髓灰质炎病毒I型(PVI)为圆形颗粒,蛋白衣壳内结构被破坏;RT-PCR检测显示协同消毒前PVI的特异条带为阳性,协同消毒后的为阴性.结论:结果提示铜银离子协同氯化消毒灭活水中病毒的作用位点可能在病毒的核酸. 展开更多
关键词 水卫生 水消毒 协同消毒 铜银离子 灭活病毒
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经S/D灭活病毒处理的高纯度凝血因子Ⅸ研制初探 被引量:1
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作者 肖小璞 闻欣 +4 位作者 余蓉 赵青蓉 林芳昭 王海龄 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期181-183,共3页
凝血因子Ⅸ(FⅨ)制品是治疗乙型血友病的主要制剂,但一般方法制备的FⅨ浓缩物,如凝血酶原复合物(PCC),因含有较多的其他凝血因子(凝血因子Ⅱ、Ⅶ、X以及蛋白C等),易导致血栓的形成。若制品未经有效病毒灭活,还可造成... 凝血因子Ⅸ(FⅨ)制品是治疗乙型血友病的主要制剂,但一般方法制备的FⅨ浓缩物,如凝血酶原复合物(PCC),因含有较多的其他凝血因子(凝血因子Ⅱ、Ⅶ、X以及蛋白C等),易导致血栓的形成。若制品未经有效病毒灭活,还可造成患者输用后感染病毒。这两种情况又因... 展开更多
关键词 凝血因子 研制 S/D灭活病毒 纯度
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灭活病毒血浆对围手术期患者T淋巴细胞亚群的影响 被引量:1
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作者 蔡明 胡亚男 +1 位作者 陈怡然 楚君 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第32期51-51,共1页
关键词 T淋巴细胞亚群 围手术期 灭活病毒 血浆 内分泌系统疾病 光化学法 亚甲基蓝 脊柱手术
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过敏原检测的光化学灭活病毒液态质控物的制备及稳定性观察 被引量:1
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作者 明德松 邱晓东 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第10期1035-1035,1038,共2页
目的制备过敏原检测光化学灭活病毒液体质控物。方法收集外观清晰、无溶血的标本每次测试完后剩余的新鲜血清,用复合保护剂及光化学灭活病毒法制备过敏原检测的液体质控物并观察其稳定性。结果用复合保护剂及光化学灭活病毒法制备过敏... 目的制备过敏原检测光化学灭活病毒液体质控物。方法收集外观清晰、无溶血的标本每次测试完后剩余的新鲜血清,用复合保护剂及光化学灭活病毒法制备过敏原检测的液体质控物并观察其稳定性。结果用复合保护剂及光化学灭活病毒法制备过敏原检测的液体质控物与人血清的性状相近,不需复溶,储存时间长,在4~8℃及-20℃的条件下至少可达85周。结论该液体质控物不需复溶,且稳定时间长。 展开更多
关键词 观察 液体质控物 制备 光化学灭活病毒
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九孔鲍接种灭活病毒的免疫效果分析
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作者 纪荣兴 邹文政 +2 位作者 鄢庆枇 陈政强 何腾飞 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2008年第4期315-320,共6页
通过注射灭活病毒,研究接种免疫对九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)非特异性免疫机能和免疫保护效果的影响.试验结果表明:九孔鲍接种灭活病毒7 d后,体液抗菌活力、溶菌活力和酚氧化酶活性都有显著提高(P<0.01);35 d后体液... 通过注射灭活病毒,研究接种免疫对九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)非特异性免疫机能和免疫保护效果的影响.试验结果表明:九孔鲍接种灭活病毒7 d后,体液抗菌活力、溶菌活力和酚氧化酶活性都有显著提高(P<0.01);35 d后体液抗菌活力和酚氧化酶活性回落至本底水平,与对照组差异不明显(P>0.05),溶菌活力则仍然高于对照组水平(P<0.01).注射灭活病毒A的免疫效果好于灭活病毒B,九孔鲍接受灭活病毒后引起的免疫应答强度、产生的非特异性抗感染免疫能力和特异性抗感染免疫保护效果都是前者高于后者,且免疫35 d后九孔鲍获得的抗特异性病毒感染免疫保护率,灭活病毒A为30%、灭活病毒B为20%. 展开更多
关键词 九孔鲍 灭活病毒 抗菌 溶菌 酚氧化酶 免疫保护率
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胆酸钠对山羊鼻腔相关扁桃体黏膜上皮吸收灭活病毒的影响
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作者 李正平 杨倩 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期94-98,共5页
为研究胆酸钠促进山羊鼻腔相关扁桃体黏膜上皮吸收禽流感灭活病毒的形态学机制,经鼻腔接种胆酸钠和禽流感灭活病毒后,用组织学光镜和电镜制片技术研究山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体上皮结构的变化以及灭活病毒的吸收情况。结果表明:单独... 为研究胆酸钠促进山羊鼻腔相关扁桃体黏膜上皮吸收禽流感灭活病毒的形态学机制,经鼻腔接种胆酸钠和禽流感灭活病毒后,用组织学光镜和电镜制片技术研究山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体上皮结构的变化以及灭活病毒的吸收情况。结果表明:单独应用灭活病毒后扁桃体黏膜上皮结构完整;而应用胆酸钠或胆酸钠配合灭活病毒后扁桃体中可观察到较多脱离黏膜上皮的细胞,脱落的细胞大部分是上皮细胞和淋巴细胞,上皮细胞间间隙增大,紧密连接被打开。应用胆酸钠配合灭活病毒后可观察到部分细胞内含有病毒的囊泡。鼻腔接种后第3天,应用胆酸钠的扁桃体黏膜上皮结构基本恢复,几乎没有观察到脱离上皮的细胞。结论:胆酸钠通过打开山羊鼻腔相关扁桃体黏膜上皮细胞之间的紧密连接来促进灭活病毒的吸收;虽然胆酸钠可引起部分上皮脱落,但这种副作用是短暂的并是可修复的。 展开更多
关键词 胆酸钠 山羊 扁桃体 灭活病毒
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口蹄疫灭活病毒配合枯草芽胞杆菌鼻腔免疫增强牛呼吸道黏膜免疫应答 被引量:5
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作者 李乙江 朱明旺 +5 位作者 普仕华 郭云然 杨永幸 李世钰 创向辉 杨倩 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期412-421,共10页
口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)主要通过呼吸道传播,切断呼吸道传播途径能有效的防御口蹄疫。本研究应用O型口蹄疫灭活病毒配合枯草芽胞杆菌通过喷鼻气雾免疫牛来探讨对牛呼吸道黏膜免疫应答及系统免疫应答的影响。结... 口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)主要通过呼吸道传播,切断呼吸道传播途径能有效的防御口蹄疫。本研究应用O型口蹄疫灭活病毒配合枯草芽胞杆菌通过喷鼻气雾免疫牛来探讨对牛呼吸道黏膜免疫应答及系统免疫应答的影响。结果显示,免疫后牛鼻黏膜与肺内支气管黏膜中的IgA分泌细胞的数量极显著增多(P<0.01),而常规口蹄疫灭活苗对IgA分泌细胞数量的影响不大(P>0.05);同时,ELISA结果显示鼻、气管、肺和肺内支气管中IL-12、TNF-α水平均极显著增加(P<0.01),尤其是在气管和肺内支气管中最为明显,但IL-6无明显差异(P>0.05)。从免疫第3天开始牛鼻液、唾液中口蹄疫特异性抗体SIgA以及血清中O型口蹄疫病毒特异性抗体均显著增加(P<0.01或P<0.05),且维持至3个月。本研究结果表明O型口蹄疫灭活病毒配合枯草芽胞杆菌喷鼻后可刺激牛呼吸道局部体液免疫和细胞免疫,同时还可诱导全身系统免疫应答,本研究为口蹄疫灭活病毒鼻腔免疫提供理论基础和应用前景。 展开更多
关键词 口蹄疫灭活病毒 枯草芽胞杆菌 鼻腔免疫 黏膜免疫应答
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口蹄疫灭活病毒配合枯草芽孢杆菌对提高牛呼吸道先天免疫力的研究 被引量:3
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作者 李乙江 张泉鹏 +11 位作者 苗海生 段体祥 张应国 杨柱昌 李世钰 冯德正 陈德寿 雷锦文 高花英 鲍晓伟 李作生 杨倩 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期934-939,共6页
本研究采用O型口蹄疫灭活病毒配合枯草芽孢杆菌喷鼻气雾免疫健康牛,并设单独使用枯草芽孢杆菌组、灭活病毒、常规疫苗免疫组和空白对照组,评价O型口蹄疫灭活病毒配合免疫增强剂枯草芽孢杆菌通过喷鼻气雾免疫健康牛对其呼吸道先天免疫力... 本研究采用O型口蹄疫灭活病毒配合枯草芽孢杆菌喷鼻气雾免疫健康牛,并设单独使用枯草芽孢杆菌组、灭活病毒、常规疫苗免疫组和空白对照组,评价O型口蹄疫灭活病毒配合免疫增强剂枯草芽孢杆菌通过喷鼻气雾免疫健康牛对其呼吸道先天免疫力的影响。通过免疫组织化学染色显示,免疫后灭活病毒配合免疫增强剂试验组牛鼻黏膜与肺内支气管黏膜中TLR7的表达和CD3^+淋巴细胞呈极显著增多(p<0.01);而常规口蹄疫灭活苗对其TLR7的表达和CD3^+淋巴细胞数量的影响不显著(p>0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组相比,灭活病毒配合免疫增强剂试验组牛呼吸道组织中IL-12水平呈极显著增加(p<0.01),IL-4和IL-10水平无明显差异(p>0.05);而常规口蹄疫灭活苗对牛呼吸道组织中IL-4、IL-10和IL-12的影响不明显(p>0.05)。表明O型口蹄疫灭活病毒配合枯草芽孢杆菌能够提高牛呼吸道先天免疫力。本研究为研发口蹄疫灭活病毒的鼻腔疫苗提供重要的试验数据和参考。 展开更多
关键词 O型口蹄疫灭活病毒 枯草芽孢杆菌 鼻腔免疫 呼吸道黏膜 TLR7 CD3^+淋巴细胞 细胞因子
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亚甲蓝/光化学灭活病毒方法对血浆成分的影响 被引量:13
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作者 周锡鹏 许金波 +3 位作者 孙萍 闫舫 王全立 卜凤荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期305-307,共3页
亚甲蓝 /光化学法可有效地灭活血浆中的病毒。为进一步观察该法对灭活血浆中诸成分的免疫活性及生化指标的影响 ,本研究用灭活病毒的条件处理单采血浆。将含有 1μmol/L亚甲蓝的血浆置于照度为 4 0 0 0 0lux的可见光下 ,在室温条件下处... 亚甲蓝 /光化学法可有效地灭活血浆中的病毒。为进一步观察该法对灭活血浆中诸成分的免疫活性及生化指标的影响 ,本研究用灭活病毒的条件处理单采血浆。将含有 1μmol/L亚甲蓝的血浆置于照度为 4 0 0 0 0lux的可见光下 ,在室温条件下处理 1小时。结果表明 ,除凝血因子Ⅷ ,PT和APTT有一定程度降低外 ,其它血浆蛋白活性未见明显变化 ,血浆中的白蛋白、葡萄糖、多种无机盐含量及血浆 pH值未受影响。处理后的血浆经不同电泳及免疫化学技术分析 ,未见新的抗原产生 ,电泳迁移率与未处理组相同。结论 :亚甲蓝 展开更多
关键词 病毒 亚甲蓝 血浆成分
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亚甲蓝/光化学法灭活病毒对血浆成分的影响 被引量:9
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作者 焦红亮 关方霞 +4 位作者 杨波 李建斌 单泓 杜英 胡祥 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期100-102,共3页
背景:对血液进行病毒灭活是保障安全输血的措施之一,亚甲蓝/光化学法灭活人血浆中病毒的效果已被证实,但其对血浆成分影响的报道很少。目的:观察亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆对血液成分结构和功能的影响。方法:随机选择40份采血后6h内40... 背景:对血液进行病毒灭活是保障安全输血的措施之一,亚甲蓝/光化学法灭活人血浆中病毒的效果已被证实,但其对血浆成分影响的报道很少。目的:观察亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆对血液成分结构和功能的影响。方法:随机选择40份采血后6h内400mL全血制备的新鲜血浆称质量留样,然后与亚甲蓝病毒灭活过滤器无菌连接,亚甲蓝的终浓度在0.9~1.3μmol/L。将加入亚甲蓝的血浆置入4℃病毒灭活箱的搁架上,摆动频率60次/min,利用32000~38000Lx光照强度的可见光4℃照射35min,将光照后的血浆通过病毒灭活过滤器滤除亚甲蓝和残余白细胞,混匀后留样10mL,立即置于-80℃冰箱冻存。检测照射前后样品的血浆量、亚甲蓝浓度、FⅧ∶C、FⅤ∶C、VWF、Fib含量的变化。结果与结论:血浆病毒灭活后血浆容量、FⅧ∶C、FⅤ∶C、VWF、Fib的回收率分别为(96.39±1.73)%、(82.55±9.25)%、(81.03±15.27)%、(93.25±6.17)%、(81.61±14.25)%。亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆中大多数成分的影响不明显,可以满足临床安全输血的需求。 展开更多
关键词 亚甲蓝 输血 凝血因子 病毒 血浆
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亚甲蓝光化学法灭活病毒的分子生物学机制 被引量:21
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作者 倪小菊 郑岚 钱开诚 《临床输血与检验》 CAS 2007年第1期85-88,共4页
用模型病毒进行的基本反应机制研究表明,亚甲蓝(Methylene blue,MB)光化学法灭活病毒时形成的病毒RNA-蛋白交联是导致病毒灭活的主要损伤。此外,氧,特别是亚甲蓝被光激活后通过II型途径所产生的单线态氧,对亚甲蓝光化学法灭活病毒也起... 用模型病毒进行的基本反应机制研究表明,亚甲蓝(Methylene blue,MB)光化学法灭活病毒时形成的病毒RNA-蛋白交联是导致病毒灭活的主要损伤。此外,氧,特别是亚甲蓝被光激活后通过II型途径所产生的单线态氧,对亚甲蓝光化学法灭活病毒也起到重要作用。 展开更多
关键词 血液成分 病毒 亚甲蓝 光化学法
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纤维蛋白原制剂灭活病毒工艺的初步研究
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作者 王小良 韩剑秋 +3 位作者 郭伟明 刁武萍 陈延 张天仁 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1993年第3期118-121,共4页
在纤维蛋白原(简称纤原)常规生产工艺中增加“有机溶剂/表面活性剂(S/D)”灭活病毒步骤·TNBP及Tween-80浓度分别为0.3%及1%,在24℃处理6小时,能有效灭活标志病毒VSV(7.31g_(10))及Sindbis V(6.831g_(10))。残余的TNBP及Tween-80... 在纤维蛋白原(简称纤原)常规生产工艺中增加“有机溶剂/表面活性剂(S/D)”灭活病毒步骤·TNBP及Tween-80浓度分别为0.3%及1%,在24℃处理6小时,能有效灭活标志病毒VSV(7.31g_(10))及Sindbis V(6.831g_(10))。残余的TNBP及Tween-80可通过两次8%乙醇沉淀去除。病毒灭活后纤原的可凝固蛋白纯度由原来的70.9±8.5%提高至85.5±6.0%,回收率可保持在64.7±3.8%。PAGE电泳显示来出现新的蛋白区带。 展开更多
关键词 纤维蛋白原 灭活病毒 制剂
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长链PCR技术评价^(60)Co-γ射线灭活病毒的研究 被引量:5
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作者 肖云贵 张艳宇 +5 位作者 陈明 赵晓明 马平 周锡鹏 吕丽萍 许金波 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2006年第5期368-371,共4页
目的探讨用长链PCR技术评价60Co-γ射线辐照灭活伪狂犬病毒(pseudorabies virusPRV),后残余病毒感染性的可行性。方法针对PRV糖蛋白gD基因前后的保守区设计预计产物长短不一的5对引物,用PCR扩增经不同剂量60Co-γ射线照射后的PRV核酸,... 目的探讨用长链PCR技术评价60Co-γ射线辐照灭活伪狂犬病毒(pseudorabies virusPRV),后残余病毒感染性的可行性。方法针对PRV糖蛋白gD基因前后的保守区设计预计产物长短不一的5对引物,用PCR扩增经不同剂量60Co-γ射线照射后的PRV核酸,并同时以细胞感染法做平行对照。结果60Co-γ射线辐射对PRV核酸的破坏有剂量依赖性,随着60Co-γ射线剂量的增加,PRV核酸被破坏程度增加,剂量≥20kGy时完全被灭活。5条不同长度PCR扩增产物中,只有长片段3.9kb的检出与细胞培养结果一致。结论γ射线对PRV核酸的损伤程度随γ射线剂量增加而增大;用长链PCR(3.9kb)来评价经60Co-γ射线辐照灭活病毒后残余病毒的感染性是可行的。 展开更多
关键词 Γ射线 病毒 长链PCR感染性
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