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姜黄素对爪蟾卵母细胞表达人低密度脂蛋白受体的影响 被引量：17
1
作者 范春雷 沃兴德 +2 位作者 罗艳 卢德赵 钱颖 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期432-435,共4页
目的在爪蟾卵母细胞中建立人低密度脂蛋白受体(lowdensitylipoproteinreceptor,LDL- R)表达系统,并研究姜黄素降脂作用的分子机理。方法将含人LDL R的表达质粒p3 7LDL导入细胞核中,用免疫荧光、配体荧光以及免疫胶体金标记透射电镜等方... 目的在爪蟾卵母细胞中建立人低密度脂蛋白受体(lowdensitylipoproteinreceptor,LDL- R)表达系统,并研究姜黄素降脂作用的分子机理。方法将含人LDL R的表达质粒p3 7LDL导入细胞核中,用免疫荧光、配体荧光以及免疫胶体金标记透射电镜等方法检测细胞膜上LDL- R的表达情况;用不同浓度的姜黄素对爪蟾卵母细胞人LDL- R基因的表达进行干预,并用酶联免疫吸附分析法测定LDL- R的表达量。结果人LDL -R基因在爪蟾卵母细胞膜上得到表达;姜黄素具有增强其表达的作用,且有明显的量效关系。结论姜黄素降血脂和抗动脉粥样硬化的作用途径之一可以是通过促进LDL- R基因的表达,增加细胞对低密度脂蛋白胆固醇的吸收,从而降低血清胆固醇。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白受体 姜黄素 细胞表达 爪蟾卵母细胞 酶联免疫吸附分析法 低密度脂蛋白胆固醇 receptor 抗动脉粥样硬化 LDL 胶体金标记 血清胆固醇 表达系统 分子机理 降脂作用 表达质粒 免疫荧光 表达情况 透射电镜 不同浓度
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川芎嗪对爪蟾卵母细胞外源清道夫受体基因表达的影响 被引量：15
2
作者 范春雷 高丽萍 +2 位作者 沃兴德 严瑾 宋家梁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期746-751,共6页
目的研究川芎嗪对SRAI基因表达的影响,从基因调控水平探讨其抗动脉粥样硬化作用的机制。方法将人SRAI基因构建在γ干扰素活性位点(GAS)调控元件的下游,并导入爪蟾卵母细胞,建立人类清道夫受体SRAI基因表达调控系统。分别用经oxLDL刺激... 目的研究川芎嗪对SRAI基因表达的影响,从基因调控水平探讨其抗动脉粥样硬化作用的机制。方法将人SRAI基因构建在γ干扰素活性位点(GAS)调控元件的下游,并导入爪蟾卵母细胞,建立人类清道夫受体SRAI基因表达调控系统。分别用经oxLDL刺激培养牛主动脉平滑肌细胞后制备的平滑肌细胞条件培养液(SCM)以及含有川芎嗪的SCM培养卵母细胞。3d后,对卵母细胞膜上的SRA1表达量检测。结果结果显示川芎嗪可抑制SCM诱导的SRAI表达,且有量效关系。结论说明川芎嗪和γ干扰素有类似的作用,可以通过干预GAS调控途经,阻止oxLDL诱导引起的SRA1过量表达。 展开更多
关键词 爪蟾卵母细胞 清道夫受体 γ-干扰素活性位点元件 氧化低密度脂蛋白 川芎嗪
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丹参酮对爪蟾卵母细胞外源清道夫受体-AⅠ基因表达的影响 被引量：8
3
作者 高丽萍 沃兴德 +3 位作者 范春雷 宋家梁 严瑾 李东成 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期744-747,共4页
目的从基因调控水平探讨丹参酮对清道夫受体AⅠ(SR-AⅠ)基因表达的影响以及抗动脉粥样硬化的作用机制。方法将人SR-AⅠ基因构建在其调控元件SRad-SRap的下游,并经显微核注射导入爪蟾卵母细胞,建立SRad-SRap元件调控的SR- AⅠ表达系统；... 目的从基因调控水平探讨丹参酮对清道夫受体AⅠ(SR-AⅠ)基因表达的影响以及抗动脉粥样硬化的作用机制。方法将人SR-AⅠ基因构建在其调控元件SRad-SRap的下游,并经显微核注射导入爪蟾卵母细胞,建立SRad-SRap元件调控的SR- AⅠ表达系统；氧化低密度脂蛋白(OXLDL)刺激培养牛主动脉平滑肌细胞,制备平滑肌细胞条件培养液(SCM)；分别用SCM和含有丹参酮的SCM培养注射后的卵母细胞,用荧光标记配体法和ABC-Elisa法定性、定量检测卵母细胞膜上SR-AⅠ的表达。结果丹参酮可以抑制卵母细胞膜SR-AⅠ表达,且有量效关系。结论OXLDL可通过诱导平滑肌细胞产生相关因子,经SRad-SRap调控途径的作用上调SR-AⅠ的表达；丹参酮可以阻止SR-AⅠ的过量表达,可能是治疗As的作用机制之一。 展开更多
关键词 爪蟾卵母细胞 清道夫受体AⅠ 调控元件 氧化低密度脂蛋白 丹参酮
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pH变化对非洲爪蟾卵母细胞ATP受体激活电流的影响 被引量：4
4
作者 张玉芹 王照宇 +2 位作者 聂辉 程剑侠 李之望 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1431-1433,共3页
目的:观察pH变化对非洲爪蟾卵母细胞ATP受体激活电流(IATP)的影响。方法:采用双极电压钳技术记录卵母细胞膜ATP受体介导的电流。结果:检测的绝大多数细胞对ATP敏感,pH为7.4的ATP引起细胞特征性膜电流,并呈浓度依赖性。该电流包括3个部分... 目的:观察pH变化对非洲爪蟾卵母细胞ATP受体激活电流(IATP)的影响。方法:采用双极电压钳技术记录卵母细胞膜ATP受体介导的电流。结果:检测的绝大多数细胞对ATP敏感,pH为7.4的ATP引起细胞特征性膜电流,并呈浓度依赖性。该电流包括3个部分:快内向电流(D1),慢内向电流(D2)和慢外向电流(H)。当细胞外pH降低到6.0、5.5时,10-3mol/L的ATP引起的IATP幅值明显被抑制,并以对D1电流抑制最明显。胞内应用G蛋白抑制剂阻断P2Y受体,对D1电流影响不大,D2电流明显减小。胞外应用P2X受体拮抗剂,对D1电流有明显的阻断作用。结论:pH值降低对爪蟾卵母细胞IATP的抑制主要通过对P2X受体的影响而实现。 展开更多
关键词 氢离子浓度 爪蟾卵母细胞 受体 嘌呤能P2
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人胎肝中肝细胞生长因子poly(A)^+mRNA在非洲爪蟾卵母细胞内的翻译 被引量：4
5
作者 贺福初 涂强 +1 位作者 邢桂春 吴祖泽 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1990年第4期298-302,共5页
采用SDS/氯仿/苯酚法和oligo(dT)纤维素亲和层析从人胎肝提取poly(A)^+mRNA,注入非洲爪蟾卵母细胞,翻译出肝细胞生长因子(HGF),产物能从卵母细胞中分泌。在9种细胞(包括人与小鼠的4种不同组织和5种细胞系)检测系统中,证明翻译的HGF与直... 采用SDS/氯仿/苯酚法和oligo(dT)纤维素亲和层析从人胎肝提取poly(A)^+mRNA,注入非洲爪蟾卵母细胞,翻译出肝细胞生长因子(HGF),产物能从卵母细胞中分泌。在9种细胞(包括人与小鼠的4种不同组织和5种细胞系)检测系统中,证明翻译的HGF与直接提取的HGF活性一致,应用滤膜超滤法估计分子量均在10～30kDa,可以初步认为两者是同一物质。从而,支持了人胎肝HGF是胎儿肝脏细胞基因表达的产物。 展开更多
关键词 胎肝 HGF 爪蟾卵母细胞 体外翻译
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表达在爪蟾卵母细胞上的大鼠P2X_4受体介导的ATP-激活电流特征 被引量：4
6
作者 朱凡 张玉芹 +1 位作者 程华 田卫华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期391-395,共5页
本研究应用显微注射和双电极电压钳技术对P2X4受体介导的三磷酸腺苷(ATP)-激活电流(IATP)的特征进行了研究。结果显示:(1)大鼠P2X4受体可高效表达于非洲爪蟾卵母细胞;(2)外加1μmol/L、10μmol/L和100μmol/LATP,IATP激活相的时间常数... 本研究应用显微注射和双电极电压钳技术对P2X4受体介导的三磷酸腺苷(ATP)-激活电流(IATP)的特征进行了研究。结果显示:(1)大鼠P2X4受体可高效表达于非洲爪蟾卵母细胞;(2)外加1μmol/L、10μmol/L和100μmol/LATP,IATP激活相的时间常数τon分别是3.58s±0.20s、2.30s±0.21s和1.3s±0.14s。IATP快失敏相的时间常数τdes分别是11.74s±0.11s、7.52s±0.24s和4.11s±0.18s。IATP慢失敏相的时间常数τoff分别为14.25s±2.30s、25.42s±4.45s和35.71s±5.92s;(3)ATP作用的量-效关系:EC50为(16.03±1.81)μmol/L,Hill系数为1.02±0.09;(4)100μmol/L的PPADS和suramin不改变IATP的幅值;(5)IATP呈电压依赖性和内向整流特性;(6)加药时间分别为20s、30s、45s和60s的情况下,IATP幅值并无显著性差异。以上结果说明了P2X4受体介导的ATP-激活电流的特征,为进一步研究P2X4受体的功能和调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 P2X4受体 离子通道 双电极膜片钳 爪蟾卵母细胞
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Zn^(2+)增强非洲爪蟾卵母细胞ATP-激活电流 被引量：4
7
作者 张玉芹 程剑侠 +4 位作者 王照宇 朱凡 聂辉 罗加烈 李之望 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第1期18-21,共4页
目的研究Zn2+对非洲爪蟾卵母细胞ATP激活电流(IATP)的调制作用。方法用双电极电压钳技术记录不同浓度Zn2+对IATP的影响。结果Zn2+对IATP(尤其是D1部分)的影响有明显的浓度依赖性。3×10-5mol/L(30μmol/L)Zn2+可使IATP幅值增加(117.... 目的研究Zn2+对非洲爪蟾卵母细胞ATP激活电流(IATP)的调制作用。方法用双电极电压钳技术记录不同浓度Zn2+对IATP的影响。结果Zn2+对IATP(尤其是D1部分)的影响有明显的浓度依赖性。3×10-5mol/L(30μmol/L)Zn2+可使IATP幅值增加(117.6±8.21)%,显著高于对照值(P<0.01);并使IATP量-效曲线左上移,但并不改变反应的最大幅值。结论Zn2+对ATP-激活电流调制效应可能是通过改变配体和受体的亲和力而实现的变构调制。 展开更多
关键词 ZN^2+ ATP-激活电流 爪蟾卵母细胞 双电极电压钳技术
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爪蟾卵母细胞表达的淋巴细胞mAch受体的氧应激损伤 被引量：2
8
作者 李玉珍 李文彬 +3 位作者 崔旭 张炳烈 张京立 倪彬 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期735-738,共4页
目的和方法：将羊外周血淋巴细胞ｍＲＮＡ注入非州爪蟾卵母细胞胞浆内，借助卵母细胞的翻译系统，表达淋巴细胞的Ｍ型Ａｃｈ受体（ｍＡｃｈＲ）并移植到卵母细胞膜上。电位箝位法检测受体电流，观察氧应激对电流的影响。电生理实验前，... 目的和方法：将羊外周血淋巴细胞ｍＲＮＡ注入非州爪蟾卵母细胞胞浆内，借助卵母细胞的翻译系统，表达淋巴细胞的Ｍ型Ａｃｈ受体（ｍＡｃｈＲ）并移植到卵母细胞膜上。电位箝位法检测受体电流，观察氧应激对电流的影响。电生理实验前，将注射ｍＲＮＡ后的卵母细胞暴露于次黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶或ＦｅＳＯ４－Ｈ２Ｏ２自由基反应系统，用电压箝位记录系统观察自由基对表达受体电流的作用。结果：随着自由基浓度增加，作用时间延长，表达的ｍＡｃｈＲ电流幅度下降；超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）或过氧化氢酶（ＣＡＴ）可分别对抗Ｏ－·２和·ＯＨ造成的电流下降。结论：自由基对表达的ｍＡｃｈＲ电流的损伤作用存在量效和时效关系，ＳＯＤ和ＣＡＴ能分别有效地消除Ｏ－·２、·ＯＨ。 展开更多
关键词 淋巴细胞 爪蟾卵母细胞 mAch受体 氧应激损伤
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利用爪蟾卵母细胞建立人类低密度脂蛋白受体基因表达系统 被引量：2
9
作者 沃兴德 范春雷 +3 位作者 罗艳 钱颖 卢德赵 唐利华 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第2期138-142,共5页
目的　在爪蟾卵母细胞中建立人类低密度脂蛋白受体基因的表达系统,此系统可被用于降血脂和抗动脉粥样硬化的研究。方法和结果　冰块麻醉爪蟾,切取卵巢,获得V、VI期卵母细胞,经用1g/L胶原酶孵育过夜除去卵母细胞外层的卵巢膜和滤泡膜,培... 目的　在爪蟾卵母细胞中建立人类低密度脂蛋白受体基因的表达系统,此系统可被用于降血脂和抗动脉粥样硬化的研究。方法和结果　冰块麻醉爪蟾,切取卵巢,获得V、VI期卵母细胞,经用1g/L胶原酶孵育过夜除去卵母细胞外层的卵巢膜和滤泡膜,培养3天后存活率仍可达95 %以上。用DiI标记的低密度脂蛋白荧光配体测定膜上结合荧光,发现V、VI期卵母细胞膜上未见有内源性低密度脂蛋白受体,如将人低密度脂蛋白受体的表达质粒p3.7低密度脂蛋白导入爪蟾卵母细胞核中,培养后用DiI标记的低密度脂蛋白配体测定可见膜上发出红色荧光,用抗低密度脂蛋白受体的抗体经免疫荧光检测法测定可见膜上有绿色荧光,免疫胶体金标记透射电镜检测可见膜上有内吞的胶体金颗粒。结论　外源性的人类低密度脂蛋白受体基因能在爪蟾V、VI期卵母细胞中表达,此低密度脂蛋白受体基因表达系统可用于中药降血脂抗动脉粥样硬化机理的研究。 展开更多
关键词 细胞生物学 低密度脂蛋白受体基因表达系统 细胞核显微注射 爪蟾卵母细胞 低密度脂蛋白 动脉粥样硬化 质粒构建
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乙酰胆碱受体α4β2亚型在非洲爪蟾卵母细胞中的表达 被引量：2
10
作者 于海鹏 李宝珠 +6 位作者 房立丛 沈立姿 朱晓鹏 胡远艳 张本 长孙东亭 罗素兰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期141-145,共5页
通过建立乙酰胆碱受体α4β2亚型(α4β2 nAChR)在非洲爪蟾卵母细胞中的表达模型,以便以α4β2 nAChR为作用靶点进行药物筛选。将乙酰胆碱受体亚基基因α4、β2体外转录获得的cRNA,通过显微注射的方法注入非洲爪蟾卵母细胞,并对该受体... 通过建立乙酰胆碱受体α4β2亚型(α4β2 nAChR)在非洲爪蟾卵母细胞中的表达模型,以便以α4β2 nAChR为作用靶点进行药物筛选。将乙酰胆碱受体亚基基因α4、β2体外转录获得的cRNA,通过显微注射的方法注入非洲爪蟾卵母细胞,并对该受体的表达情况进行检测。结果显示,乙酰胆碱受体α4β2亚型在蛙卵细胞中获得了有效表达,记录到典型的ACh配体门控的离子通道内向电流。 展开更多
关键词 乙酰胆碱受体亚型α4β2 非洲爪蟾卵母细胞 受体基因表达 配体门控离子通道
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非洲爪蟾卵母细胞内源性及外源性ATP和GABA受体介导的膜反应比较 被引量：1
11
作者 杨青 徐怡 +2 位作者 李之望 魏劲波 王钦文 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2002年第3期193-195,207,共4页
目的 :对非洲爪蟾卵母细胞表达的ATP和GABA激活电流进行比较。方法 :包括mRNA和cDNA的提取、卵母细胞的微量注射及双电极电压钳技术。结果 :①在表达P2X2 或P2X4 的卵母细胞上 ,外加ATP可分别诱导一被Zn2 + 增强的内向电流。②在表达鸡... 目的 :对非洲爪蟾卵母细胞表达的ATP和GABA激活电流进行比较。方法 :包括mRNA和cDNA的提取、卵母细胞的微量注射及双电极电压钳技术。结果 :①在表达P2X2 或P2X4 的卵母细胞上 ,外加ATP可分别诱导一被Zn2 + 增强的内向电流。②在表达鸡脑mRNA的卵母细胞上 ,可记录到GABA激活电流 ,且此电流可被bicucul line(一种GABAA 受体选择拮抗剂 )所阻断。③在表达了人视网膜 ρ1亚基cRNA的卵母细胞上 ,外加GABA可引起一不被bicuculline阻断的内向电流 ,后者可被I4AA(一种GABAC 受体特异性拮抗剂 )阻断。④在具有滤泡膜的卵母细胞上可记录到 3种形式的ATP激活电流和一外向的慢的GABA激活电流。⑤在除去滤泡膜的卵母细胞上均未记录到ATP和GABA激活电流。结论 :卵母细胞上存在内源性的嘌呤受体、GABAB 和GABAC 受体 ;且此内源性受体存在于滤泡膜上 ;P2X2 、P2X4 嘌呤受体及GABAA 和GABAC 受体均可在卵母细胞上表达 。 展开更多
关键词 膜反应 非洲爪蟾卵母细胞 GABA受体 双电极电压钳技术 受体通道 激活电流 内源性受体 外源性受体
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GABA_A受体在爪蟾卵母细胞的表达 被引量：1
12
作者 张献全 钱桂生 +1 位作者 顾全宝 赵剑星 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期149-150,共2页
目的　将鼠源γ 氨基丁酸A型 (GABAA)受体表达于爪蟾卵母细胞膜上并行功能测定。方法　微量注射仪将纯化的大鼠脑mRNA注入准备好的爪蟾卵母细胞内并于 19℃温浴 48h以上使其表达 ;使用常规双电极电压钳记录卵母细胞表达的受体特性。结... 目的　将鼠源γ 氨基丁酸A型 (GABAA)受体表达于爪蟾卵母细胞膜上并行功能测定。方法　微量注射仪将纯化的大鼠脑mRNA注入准备好的爪蟾卵母细胞内并于 19℃温浴 48h以上使其表达 ;使用常规双电极电压钳记录卵母细胞表达的受体特性。结果　爪蟾卵母细胞注射大鼠脑mRNA 48h后有GABAA 受体的表达 ,此受体具有天然GABAA 受体的氯通道特性。结论　爪蟾卵母细胞具有表达外源GABAA 受体的特性 ,是研究GABAA 受体生理和药理功能的一种重要工具。 展开更多
关键词 Γ-氨基丁酸受体 爪蟾卵母细胞 中枢神经系统 MRNA
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Zn^(2+)对爪蟾卵母细胞表达鲫鱼脑GABA受体的调制作用 被引量：1
13
作者 白小川 包永德 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期268-274,共7页
爪赡卵母细胞注射鲫鱼（Caressescaresses）脑mRNA后表达的CABA受体中约85％为GABAA受体。约15％的成分为GABAC受体。本文利用双电极电压箝方法结合药物灌流研究了Zn2＋对这两型受体的作用。我们观察到Zn2＋对它们的调制都是抑制性的、... 爪赡卵母细胞注射鲫鱼（Caressescaresses）脑mRNA后表达的CABA受体中约85％为GABAA受体。约15％的成分为GABAC受体。本文利用双电极电压箝方法结合药物灌流研究了Zn2＋对这两型受体的作用。我们观察到Zn2＋对它们的调制都是抑制性的、可逆的。然而，与GABAA受体相比，GABAC受体对Zn2＋不太敏感。其中Zn2＋抑制鲫鱼脑GABAA受体的IC50＝48．4±10．1μmol／L，而它调制GABAC受体的IC50却高达255．6±21．5μmol／L。 展开更多
关键词 锌离子 鲫鱼脑mRNA 爪蟾卵母细胞 GABA受体
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非洲爪蟾卵母细胞内的螺旋钙波和靶波 被引量：1
14
作者 施小民 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2003年第4期365-368,共4页
该文应用定态线性化的Atri模型方程,描述非洲爪蟾(XenopusLaevis)卵母细胞内钙波的生成和演化.在忽略细胞边界影响的近似下,得到了爪蟾卵母细胞内螺旋钙波和靶波的解析解.对于远离细胞中心的渐近情形,对应的螺旋波为Archimede型.由此得... 该文应用定态线性化的Atri模型方程,描述非洲爪蟾(XenopusLaevis)卵母细胞内钙波的生成和演化.在忽略细胞边界影响的近似下,得到了爪蟾卵母细胞内螺旋钙波和靶波的解析解.对于远离细胞中心的渐近情形,对应的螺旋波为Archimede型.由此得到的波速、波长和周期均与实验和数值模拟结果吻合.并指出IP3R失活常数必须大于2.43s,才能产生胞内周期钙波. 展开更多
关键词 非洲爪蟾卵母细胞 钙波 螺旋波 靶波
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爪蟾卵母细胞固醇调控报告系统的建立及中药调脂作用研究
15
作者 范春雷 钱颖 +3 位作者 卢德赵 沃兴德 高丽萍 严瑾 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期664-667,共4页
目的在爪蟾卵母细胞中建立低密度脂蛋白受体基因表达的固醇调控报告系统,通过中药的干预培养,从基因调控水平上阐明中药调脂作用的机制,并为药物筛选提供一个可靠的实验平台。方法将绿色荧光蛋白报告基因构建在调控低密度脂蛋白受体基... 目的在爪蟾卵母细胞中建立低密度脂蛋白受体基因表达的固醇调控报告系统,通过中药的干预培养,从基因调控水平上阐明中药调脂作用的机制,并为药物筛选提供一个可靠的实验平台。方法将绿色荧光蛋白报告基因构建在调控低密度脂蛋白受体基因表达的固醇调控元件的下游,经显微注射导入爪蟾卵母细胞,在分别用含姜黄素、茶多酚等中药的培养液中培养3d后,用荧光显微镜及荧光分析仪对绿色荧光蛋白的表达情况进行定性定量分析。结果姜黄素诱导了绿色荧光蛋白的表达。结论①姜黄素可以通过影响固醇调控元件的作用上调低密度脂蛋白受体基因的表达；②建立的固醇调控报告系统可作为降胆固醇药物筛选和作用机制研究的实验平台。 展开更多
关键词 爪蟾卵母细胞 固醇调控元件 低密度脂蛋白受体 绿色荧光蛋白 姜黄素
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大鼠背根神经节神经元瞬时外向钾电流与非洲爪蟾卵母细胞上表达的Kv4.2通道电流特性的比较
16
作者 聂辉 张玉芹 +4 位作者 李享元 余文静 罗加烈 胡霞敏 李之望 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期157-161,共5页
目的为最终揭示大鼠背根神经节神经元上天然瞬时外向钾通道的结构与功能调节提供依据。方法采用双极电压钳技术记录非洲爪蟾卵母细胞上表达的Kv4.2电流,用全细胞膜片钳技术记录大鼠背根神经节神经元上瞬间外向钾电流(IA),并对二者进行... 目的为最终揭示大鼠背根神经节神经元上天然瞬时外向钾通道的结构与功能调节提供依据。方法采用双极电压钳技术记录非洲爪蟾卵母细胞上表达的Kv4.2电流,用全细胞膜片钳技术记录大鼠背根神经节神经元上瞬间外向钾电流(IA),并对二者进行动力学特征的比较。结果背根神经节神经元上IA和Kv4.2通道电流①均具有明显的A型电流特征;②半数最大激活电位分别为(-29.5±3.1)mV和(-3.9±1.0)mV;③半数最大失活电位分别为(-78.5±3.4)mV和(-48.5±0.6)mV;④失活后再激活恢复时间常数(τ)分别为(32.0±4.8)ms和(71.4±13.2)ms。结论Kv4.2通道电流可能是背根神经节神经元上IA电流的主要成分,但不是唯一成分。 展开更多
关键词 非洲爪蟾卵母细胞 钾通道 Kv4.2钾通道 背根神经节 神经元
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HERG通道在爪蟾卵母细胞的持续表达与电流变化
17
作者 王宪沛 李璐 +2 位作者 邹安若 涂丹娜 廖玉华 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期329-333,共5页
目的:探索一个HERG通道在爪蟾卵母细胞持续稳定表达HERG通道的方法,研究表达培养不同时期卵母细胞膜静息电位和通道电流特性的变化。方法:用含HERG片段的pSP64载体质粒体外转录制备的mRNA注射表达于卵母细胞,用双电极电压钳技术记录通... 目的:探索一个HERG通道在爪蟾卵母细胞持续稳定表达HERG通道的方法,研究表达培养不同时期卵母细胞膜静息电位和通道电流特性的变化。方法:用含HERG片段的pSP64载体质粒体外转录制备的mRNA注射表达于卵母细胞,用双电极电压钳技术记录通道电流。结果:①本方法可成功在卵母细胞持续表达与HERG通道电生理特性一致的功能性通道,并可在10～15d内稳定用于电生理记录。②在培养的第3、6和9d细胞膜静息电位负值逐渐升高,在第12d又开始降低。异源表达的HERG通道内向整流的最大电位在第3、6和9d逐渐向正向转移,在第12d又回复,激活曲线的半最大激活电压(V1/2)在培养的第3、6和9d逐渐向负向转移,在第12d又逐渐回复,其改变和膜静息电位的变化趋势一致。结论:本研究提供了一种HERG基因在爪蟾卵母细胞长期持续表达的方法,并为HERG通道的分子位点和药物作用研究在不同实验条件电生理实验数据的差异提供依据。 展开更多
关键词 HERG 钾通道 爪蟾卵母细胞 通道表达
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乙酰胆碱对非洲爪蟾卵母细胞ATP-激活电流的调制作用
18
作者 程剑侠 王照宇 +1 位作者 朱凡 张玉芹 《武汉科技大学学报》 CAS 2007年第3期305-307,共3页
研究乙酰胆碱对爪蟾卵母细胞上ATP激活电流的影响及其机理。用双电极电压钳技术记录爪蟾卵母细胞的细胞外液加入乙酰胆碱对ATP激活电流(IATP)的影响。结果显示,乙酰胆碱对大多数细胞IATP具有增强作用,而对少数细胞IATP具有抑制作用,且... 研究乙酰胆碱对爪蟾卵母细胞上ATP激活电流的影响及其机理。用双电极电压钳技术记录爪蟾卵母细胞的细胞外液加入乙酰胆碱对ATP激活电流(IATP)的影响。结果显示,乙酰胆碱对大多数细胞IATP具有增强作用,而对少数细胞IATP具有抑制作用,且均呈现浓度依赖性;乙酰胆碱对IATP的调制作用是通过毒蕈碱样乙酰胆碱受体(M受体)激活实现的。 展开更多
关键词 M受体 爪蟾卵母细胞 ATP-激活电流 双极电压钳技术
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降脂中药对爪蟾卵母细胞存活率的影响
19
作者 罗艳 钱颖 +3 位作者 范春雷 严瑾 高丽萍 窦小兵 《温州医学院学报》 CAS 2003年第3期151-152,共2页
目的:探讨降脂中药对爪蟾卵母细胞存活率的影响。方法:用含降脂中药的培养液培养爪蟾卵母细胞,以孕酮成熟实验计算细胞的存活率。结果:用药组的存活率达到90％的培养液浓度为:山楂酸提物0.025mg/ml,川芎嗪0.4mg/ml,姜黄醇提物6.45×... 目的:探讨降脂中药对爪蟾卵母细胞存活率的影响。方法:用含降脂中药的培养液培养爪蟾卵母细胞,以孕酮成熟实验计算细胞的存活率。结果:用药组的存活率达到90％的培养液浓度为:山楂酸提物0.025mg/ml,川芎嗪0.4mg/ml,姜黄醇提物6.45×10^(-3)mg/ml。结论:姜黄醇提物、山楂醇提物、川芎嗪等降脂中药可在上述用药浓度范围内培养爪蟾卵母细胞。 展开更多
关键词 降脂中药 爪蟾卵母细胞 成熟实验
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爪蟾卵母细胞固醇调控通路的建立及姜黄素的作用
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作者 沃立科 范春雷 沃兴德 《浙江中医药大学学报》 CAS 2007年第3期288-290,共3页
[目的]在爪蟾卵母细胞中建立人类SCAP/SREBP固醇调控系统,利用此系统研究姜黄素对SCAP/SREBP调控通路的作用。[方法]构建带有绿色荧光报告蛋白基因的PLXRN-4SRE-fpa质粒,将构建质粒和其他几种质粒分别提取混和成实验组质粒和对照组质粒... [目的]在爪蟾卵母细胞中建立人类SCAP/SREBP固醇调控系统,利用此系统研究姜黄素对SCAP/SREBP调控通路的作用。[方法]构建带有绿色荧光报告蛋白基因的PLXRN-4SRE-fpa质粒,将构建质粒和其他几种质粒分别提取混和成实验组质粒和对照组质粒,通过微注射的方法分别共注射到Ⅴ、Ⅵ爪蟾卵母细胞核内,与不同浓度的姜黄素共孵育3天,使用荧光定量PCR检测荧光表达量。[结果]相同浓度的姜黄素对注射含有固醇调节元件质粒的卵母细胞荧光表达量要明显高于不含相应元件的质粒。[结论]构建的质粒pLXRN-4SRE-fPA能在爪蟾卵母细胞中有效地应答SCAP、SREBP调控因子;通过影响SCAP/SREBP调控通路调节SRE-1下游基因的表达可能是姜黄素调脂作用的机理之一;利用核内共注射的方法在爪蟾卵母细胞中建立的SCAP/SREBP调控系统可作为SCAP配体类药物快速筛选和作用机制研究的细胞模型。 展开更多
关键词 爪蟾卵母细胞 姜黄素 SCAP/SREBP固醇调控通路
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