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活性氧响应的纳米颗粒对炎性环境下牙龈成纤维细胞功能的影响及机制
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作者 邱心一 宋璐彤 +1 位作者 任双双 苗雷英 《口腔疾病防治》 2024年第4期257-265,共9页
目的 探讨在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis-lipopolysaccharide,P.g-LPS)诱导的牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)炎症环境下,活性氧(reactive oxygen species,ROS)响应型纳米颗粒PssL-NAC对HGFs内ROS... 目的 探讨在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis-lipopolysaccharide,P.g-LPS)诱导的牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)炎症环境下,活性氧(reactive oxygen species,ROS)响应型纳米颗粒PssL-NAC对HGFs内ROS、炎症因子、胶原蛋白生成、细胞迁移功能以及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路蛋白表达的影响。方法 本研究已通过单位伦理委员会审查批准。通过响应ROS的硫缩酮键(thioketal,TK)连接聚己内酯(polycaprolactone,PCL)的疏水端和聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)的亲水端,水相油相自主装的方式得到内部包裹油溶性的抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine-NAC)的PssL-NAC微球,制备NAC水溶液,并使用透射电镜观察验证纳米粒子合成成功。在提取的HGFs中分别加入P.g-LPS(0、5、10μg/mL),P.g-LPS(0、5、10μg/mL)+NAC,P.g-LPS(0、5、10μg/mL)+PssL-NAC,共聚焦显微镜观察不同组别细胞内ROS水平,确定后续实验使用的P.g-LPS浓度。将HGFs随机分为空白对照组(对照组,不做处理),P.g-LPS组(P.g-LPS处理细胞),NAC组(P.g-LPS+NAC处理细胞),PssL-NAC组(P.g-LPS+PssL-NAC处理细胞)。通过细胞增殖与毒性实验验证PssL-NAC的生物安全性。使用2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐探针与细胞共孵育通过荧光实时定量检测细胞内炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和Ⅰ型胶原蛋白(collagen 1,COL1)、Ⅲ型胶原蛋白(collagen 3,COL3)的基因水平;通过划痕实验观察PssL-NAC对牙龈成纤维细胞的迁移功能的影响;通过免疫印迹法检测TLR4-NFκB信号通路相关蛋白的表达。结果 PssL-NAC具有良好生物相容性,对HGFs的细胞增殖能力无显著影响(P>0.05);在P.g-LPS浓度升高的条件下,PssL-NAC能维持细胞内大约两倍对照组的ROS水平(P<0.001);PssL-NAC能显著降低P.g-LPS诱导升高的IL-6(P<0.001)、TNF-α基因水平(P<0.001),上调COL1基因水平(P<0.001);P.g-LPS刺激后,PssL-NAC能将细胞迁移能力恢复至对照组水平(P>0.05),并降低TLR4-NF-κB通路中TLR4(P<0.001)、p65(P=0.006)、p-p65(P=0.017)蛋白的表达。结论PssL-NAC维持细胞内适宜浓度ROS,通过TLR4-NF-κB通路减轻P.g-LPS诱导的细胞炎症,并恢复炎症条件下的细胞胶原生成和细胞迁移功能。 展开更多
关键词 牙龈成纤维细胞 活性氧 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖 炎症 细胞迁移 纳米颗粒 胶原
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电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞的影响
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作者 蔡东轩 李毅 +3 位作者 王岚 张燕 李广文 张玉梅 《口腔疾病防治》 2024年第3期169-177,共9页
目的探讨电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)的影响,为种植基台表面改性设计提供实验依据。方法根据试样不同表面进行分组:NC组(阴性对照,光滑表面无其他处理)、NM-1组(纳米网-1,1 mol/L NaO... 目的探讨电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)的影响,为种植基台表面改性设计提供实验依据。方法根据试样不同表面进行分组:NC组(阴性对照,光滑表面无其他处理)、NM-1组(纳米网-1,1 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)、NM-2组(纳米网-2,5 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)。扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观察不同试样表面形貌及HGFs在其表面的黏附状态,接触角测量仪测定试样表面亲水性。CCK-8评估HGFs在不同试样表面的增殖情况;qRT-PCR检测HGFs在不同试样表面Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL1A1)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,COL3A1)、纤连蛋白1(fibronectin 1,FN1)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、黏着斑蛋白(vinculin,VCL)、整合素α2(integrinα2,ITGA2)、整合素β1(integrinβ1,ITGB1)等黏附相关基因表达水平;免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)观察HGFs在不同试样表面vinculin蛋白表达情况;天狼猩红染色评价HGFs在不同试样表面胶原纤维分泌合成情况。结果SEM观察到NM-1组和NM-2组表面形成有序均一的三维网状结构,网格直径NM-1组约为30 nm,NM-2组约为150 nm;NM-1组和NM-2组对比NC组,水接触角显著下降(P<0.0001);NM-1组细胞增殖能力较NC组显著提高(P<0.01),NM-1组和NM-2组的水接触角及细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。SEM镜下可见HGFs黏附24 h后在各组试样表面均黏附良好,NM-1组和NM-2组细胞与NC组对比伸展面积更大,形态纤长,细胞伪足更发达。qRTPCR结果显示NM-1组中COL1A1、COL3A1、FN1、FAK、VCL等黏附相关基因表达水平显著高于NC组和NM-2组(P<0.01)。vinculin蛋白免疫荧光结果表明,NM-1组vinculin蛋白表达水平最高,单个细胞黏着斑数量最多(P<0.01)。天狼猩红染色结果显示NM-1组胶原纤维分泌合成量最高(P<0.0001)。结论Ti6Al4V经电化学脱合金改性后所构建的三维纳米网状结构有促进HGFs黏附增殖和胶原分泌合成的作用,其中网格直径约为30 nm的NM-1组对HGFs的促进作用明显。 展开更多
关键词 电化学脱合金 TI6AL4V 种植体基台 表面改性 三维网状结构 牙龈成纤维细胞 细胞黏附 细胞增殖 黏着斑
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灯盏花素对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞损伤的影响
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作者 晁晓芹 赵国廷 +2 位作者 董振耀 马民英 姚毅章 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第1期63-68,共6页
目的探讨灯盏花素(breviscapine,BVP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(porphyromonas gingivalis,Pg-LPS,简称LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)损伤的影响。方法体外培养HGFs细胞,分为对照组、LPS组、LPS+BVP低、... 目的探讨灯盏花素(breviscapine,BVP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(porphyromonas gingivalis,Pg-LPS,简称LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)损伤的影响。方法体外培养HGFs细胞,分为对照组、LPS组、LPS+BVP低、中、高剂量组。CCK-8法检测细胞增殖;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、IL-6水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;蛋白质印迹法检测细胞中细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素B1(Cyclin B1)及凋亡相关B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平;TBA比色法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;二氢荧光素二乙酸酯(dichloro-dihydro-fluorescein diacetate,DCFH-DA)法测定细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与对照组比较,LPS组HGFs细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+BVP低、中、高剂量组细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著降低(P<0.05)。结论BVP可通过抗炎、抗氧化作用减轻LPS诱导的HGFs细胞损伤。 展开更多
关键词 灯盏花素 牙龈卟啉单胞菌脂多糖 牙龈成纤维细胞 细胞损伤
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臭氧水对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性
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作者 徐超 何亚兰 +1 位作者 张娜娜 陈新民 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期655-660,共6页
目的:探讨不同浓度臭氧水(OW)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)的细胞毒性。方法:体外培养HGFs,按干预臭氧水浓度分为5组:1、2、4、6 mg/L和空白对照组,在作用的不同时点(1、5、10、20 min)采用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态变化,MTT法测... 目的:探讨不同浓度臭氧水(OW)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)的细胞毒性。方法:体外培养HGFs,按干预臭氧水浓度分为5组:1、2、4、6 mg/L和空白对照组,在作用的不同时点(1、5、10、20 min)采用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态变化,MTT法测定细胞的相对增殖率,采用SPSS软件进行统计分析。结果:浓度为1和2 mg/L的OW在20 min内对HGFs的细胞毒性为1级,4 mg/L作用1 min,细胞毒性为1级,作用5~20 min,细胞毒性为2级;6 mg/L作用1~20 min,细胞毒性为2~3级。结论:臭氧水的细胞毒性与其浓度和作用时间有关,低浓度臭氧水(≤2 mg/L)可应用于临床治疗和消毒中,在保证作用效果的情况下,应尽量减小臭氧水的作用时间和浓度。 展开更多
关键词 臭氧水 牙龈成纤维细胞 四甲基偶氮唑盐 相对增殖率
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黄芪甲苷通过miR-126/NF-κB信号通路调控人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的分子机制
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作者 陈亚琼 高鹏 沈慧 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期921-925,共5页
目的 探讨黄芪甲苷对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖、凋亡的影响及其对miR-126/核转录因子(NF)-κB信号通路的调控作用。方法 采用不同浓度的黄芪甲苷处理HGFs细胞,miR-NC、miR-126 mimics、anti-miR-NC、anti-miR-126转染入HGFs;anti-miR... 目的 探讨黄芪甲苷对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖、凋亡的影响及其对miR-126/核转录因子(NF)-κB信号通路的调控作用。方法 采用不同浓度的黄芪甲苷处理HGFs细胞,miR-NC、miR-126 mimics、anti-miR-NC、anti-miR-126转染入HGFs;anti-miR-NC、anti-miR-126分别转染入HGFs后加入黄芪甲苷处理细胞;anti-miR-126转染入HGFs后加入NF-κB抑制剂PDTC与黄芪甲苷共同处理细胞;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-126的表达量;采用Western印迹检测p-p65、磷酸化抑制蛋白κBα(p-IкBα)蛋白表达量。结果 不同浓度的黄芪甲苷可明显提高细胞活力与周期素(Cyclin)D1蛋白水平及miR-126的表达水平明显降低凋亡率及Cleaved-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白水平(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-126组细胞活力明显升高,凋亡率明显降低(P<0.05),而转染anti-miR-126对细胞增殖与凋亡的作用与之相反;抑制miR-126表达可明显逆转黄芪甲苷对细胞增殖、凋亡及NF-κB信号通路的作用;添加PDTC处理后可明显提高细胞活力,明显降低凋亡率(P<0.05)。结论 黄芪甲苷可通过调控miR-126/NF-κB信号通路从而促进HGFs增殖及抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 MIR-126 核转录因子(NF)-κB信号通路 牙龈成纤维细胞 增殖 凋亡
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人参皂苷Rg1促进人牙龈成纤维细胞增殖、迁移及成骨分化的研究
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作者 张昕 李长顺 +4 位作者 刘浩 朱绍跃 周猛 冯岩 张光东 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第5期812-819,共8页
目的探讨人参皂苷Rg1(GsRg1)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖、迁移及成骨分化的影响及分子机制。方法采用组织块法分离培养HGFs,并进行形态学和免疫荧光鉴定;取第3代HGFs,CCK-8法检测6种浓度的GsRg1(0、6.25、12.5、25、50、100 mg/L)对H... 目的探讨人参皂苷Rg1(GsRg1)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖、迁移及成骨分化的影响及分子机制。方法采用组织块法分离培养HGFs,并进行形态学和免疫荧光鉴定;取第3代HGFs,CCK-8法检测6种浓度的GsRg1(0、6.25、12.5、25、50、100 mg/L)对HGFs增殖的影响;Transwell实验检测不同浓度GsRg1对HGFs迁移能力的影响;碱性磷酸酶(ALP)染色检测成骨能力;茜素红染色观察并定量钙结节;qRT-PCR检测COL-Ⅰ、OCN和OPN成骨基因表达;Western blot检测OCN、OPN和COL-Ⅰ以及PI3K/AKT信号通路相关分子的蛋白表达情况。结果与对照组比较,浓度为12.5、25、50、100mg/L GsRg1可明显提高HGFs增殖能力(P<0.05),其中100 mg/L GsRg1促增殖作用最强,6.25 mg/L GsRg1组与对照组比较差异无统计学意义;GsRg1处理后HGFs迁移能力增强,且呈浓度依赖。与对照组比较,100 mg/L GsRg1组ALP活性明显增加(P<0.01);茜素红染色钙结节定量明显增多(P<0.01);成骨相关基因OCN、OPN和COL-Ⅰ的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平随时间上调明显(P<0.05),而PI3K、AKT蛋白表达水平无明显变化。结论GsRg1可以促进HGFs增殖和迁移,100 mg/L GsRg1能够促进HGFs的成骨分化,可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 牙龈成纤维细胞 人参皂苷RG1 细胞增殖 细胞迁移 骨分化
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LncRNA NEAT1调控miR-22-3p对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞生物学活性影响
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作者 范晶 高一曼 +3 位作者 郑圆 郭丹妮 胡金龙 雷小朋 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第6期506-511,共6页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)核富集转录本1(nuclear-enriched abundant transcript 1,Neat1)调控微小RNA miR-22-3p对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)核富集转录本1(nuclear-enriched abundant transcript 1,Neat1)调控微小RNA miR-22-3p对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)生物学活性的影响。方法取对数生长期的HGFs细胞分为对照组、LPS组、si-NC组、si-Neat1组、si-Neat1+inhibitor NC组、si-Neat1+miR-22-3p inhibitor组。RT-qPCR检测Neat1、miR-22-3p表达水平;双荧光素酶验证Neat1、miR-22-3p的靶向关系;流式细胞仪、CCK-8、ELISA法分别检测细胞凋亡、细胞活力及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;蛋白质印迹检测Caspase-3、磷酸化核转录因子-κB(phosphorylated nuclear factor-κB,p-NF-κB)P65/NF-κB P65水平。结果与对照组比较,LPS组细胞活力、miR-22-3p表达显著降低,TNF-α、IL-1β、细胞凋亡率、p-NF-κB P65/NF-κB P65、Neat1、Caspase-3表达显著增加(P<0.05);与LPS组、si-NC组比较,si-Neat1组细胞活力、miR-22-3p表达显著增加,TNF-α、IL-1β、细胞凋亡率、p-NF-κB P65/NF-κB P65、Neat1、Caspase-3表达显著降低(P<0.05);下调miR-22-3p表达逆转了沉默Neat1对LPS诱导HGFs生物学活性的影响(P<0.05)。结论沉默Neat1可以抑制LPS诱导HGFs的细胞凋亡、炎症反应,可能与上调miR-22-3p表达有关。 展开更多
关键词 LncRNA Neat1 miR-22-3p 脂多糖 牙龈成纤维细胞 生物学活性
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牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性 被引量:1
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作者 石俊 关振群 +1 位作者 王训霞 张为新 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期365-370,共6页
目的 探讨牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性。方法 选取阻生齿拔除患者10例,取其周围正常牙龈组织作为研究样本,分析牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性。结果 人牙龈成纤维细胞有突起,胞体呈纺锤形或梭形,存在明显细胞轮廓... 目的 探讨牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性。方法 选取阻生齿拔除患者10例,取其周围正常牙龈组织作为研究样本,分析牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性。结果 人牙龈成纤维细胞有突起,胞体呈纺锤形或梭形,存在明显细胞轮廓,核呈卵圆形,细胞体及细胞核均较大,有明显核仁,着色浅;人牙龈成纤维细胞经染色显示为vimentin表达阳性,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、人微管相关蛋白(MAP)-2表达阴性;神经样细胞呈三角形或星形,存在3个及以上突起,细胞核变圆,突起细长,出现轴突样和树突样结构,且互相连接,呈现网状结构;经染色显示神经样细胞为vimentin表达、GFAP表达、MAP-2表达均为阳性;诱导组乙酰胆碱及多巴胺含量均明显高于对照组(均P<0.05),诱导组乙酰胆碱及多巴胺浓度均明显高于对照组(均P<0.05)。结论 对牙龈成纤维细胞进行诱导处理可获得神经样细胞,诱导后细胞不仅具有神经细胞结构、形态,同样具有神经细胞的分泌功能,分泌大量的乙酰胆碱及多巴胺等神经递质。 展开更多
关键词 神经细胞 牙龈成纤维细胞 诱导分化 多巴胺 乙酰胆碱
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改良型与可注射型富血小板纤维蛋白对人牙龈成纤维细胞增殖及分化的影响 被引量:1
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作者 唐一月 曹春花 常尧仁 《北京口腔医学》 CAS 2023年第1期6-11,共6页
目的 探究改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin, A-PRF)和可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin, i-PRF)对人牙龈成纤维细胞增殖及分化的影响,为两种血小板纤维蛋白制品促进软组织愈合的表观差... 目的 探究改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin, A-PRF)和可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin, i-PRF)对人牙龈成纤维细胞增殖及分化的影响,为两种血小板纤维蛋白制品促进软组织愈合的表观差异及临床效能评估提供实验数据参考。方法 观察A-PRF及iPRF显微及超微结构,测定血小板浓缩物生长因子(PDGF-BB,TGF-β1,EGF)的释放情况,将A-PRF及i-PRF作用于人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts, HGFs),观察两者对HGFs的增殖影响及HGFs I型胶原蛋白(COL1)的表达情况,通过qRT-PCR进一步检测I型胶原蛋白α2(COL1α2)、纤连蛋白I (FN1)、转移生长因子β(TGF-β)、血小板衍生生长因子(PDGF)基因的表达。结果 i-PRF中白细胞层较A-PRF更宽,且白细胞数量更多,而A-PRF的纤维网状结构更为致密。A-PRF、i-PRF中的细胞因子随着时间的延长,在各时间点释放量逐渐降低,A-PRF中TGF-β1在第1天及EGF在第7天释放量低于i-PRF,其余各个时间点A-PRF生长因子的释放量均高于i-PRF (P<0.05), A-PRF及i-PRF均对HGFs的增殖具有显著促进作用,差异无统计学意义。A-PRF对TGF-β、PDGF基因的上调作用更加明显,而i-PRF对HGFs I型胶原蛋白及COL1a2、FN1基因的上调作用更为明显。结论 A-PRF、i-PRF均对HGFs的增殖具有明显的促进作用,且二者对HGFs I型胶原蛋白的表达起到了显著促进作用,在同一时间段A-PRF可分泌更多的软组织愈合相关生长因子,提示A-PRF在促进软组织修复愈合方面表现更优。 展开更多
关键词 改良型富血小板纤维蛋白 可注射型富血小板纤维蛋白 牙龈成纤维细胞
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鸢尾苷元通过miR⁃449a调控JAK/STAT信号通路对人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的影响
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作者 杜姣 张梦婕 黄联杰 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3073-3076,共4页
目的探讨鸢尾苷元对人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法原代培养人牙龈成纤维细胞(HGFs),使用不同浓度(50、100、200μmol/L)鸢尾苷元处理HGFs细胞,分别将miR-449a寡核苷酸模拟物(miR-449a mimics)及其阴性对照mimic NC序列(miR-NC... 目的探讨鸢尾苷元对人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法原代培养人牙龈成纤维细胞(HGFs),使用不同浓度(50、100、200μmol/L)鸢尾苷元处理HGFs细胞,分别将miR-449a寡核苷酸模拟物(miR-449a mimics)及其阴性对照mimic NC序列(miR-NC)、miR-449a特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-449a)及其阴性对照(anti-miR-NC)转染至HGFs细胞。采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-qPCR法检测miR-449a表达,Western blot法检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、磷酸化Janus激酶(p-JAK)、磷酸化信号转导子和转录激活子(p-STAT)蛋白表达量。结果与对照组比较,鸢尾苷元可降低细胞活力及Cyclin D1、p-JAK、p-STAT蛋白表达(P<0.05),提高凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达及miR-449a表达(P<0.05)。与miR-NC组比较,转染miR-449a mimics可降低细胞活力及Cyclin D1蛋白表达(P<0.05),提高凋亡率及cleaved caspase-3蛋白表达(P<0.05)。与anti-miR-NC组比较,转染anti-miR-449a可逆转鸢尾苷元对HGFs细胞增殖、凋亡及JAK/STAT信号通路的作用(P<0.05)。结论鸢尾苷元可通过上调miR-449a表达抑制JAK/STAT信号通路的活化,从而抑制牙龈成纤维细胞增殖及促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 鸢尾苷元 牙龈成纤维细胞 增殖 凋亡 miR-449a JAK/STAT信号通路
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岩黄连总碱下调miR-223表达调控人牙龈成纤维细胞增殖与凋亡的分子机制研究
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作者 谢陆莉 李鲲 邓琳 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第11期1493-1497,共5页
目的:探讨岩黄连总碱对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞增殖与凋亡的影响及其可能作用机制。方法:体外培养人牙龈成纤维细胞,分为对照组(NC组)、Pg-LPS组、5μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS组、10μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS... 目的:探讨岩黄连总碱对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞增殖与凋亡的影响及其可能作用机制。方法:体外培养人牙龈成纤维细胞,分为对照组(NC组)、Pg-LPS组、5μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS组、10μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS组、20μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS组、miR-NC+Pg-LPS组、miR-223+Pg-LPS组、anti-miR-NC+Pg-LPS组、anti-miR-223+Pg-LPS组、20μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS+miR-NC组、20μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS+miR-223组。采用EDU、流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡;RT-qPCR法检测miR-223的表达量;ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blot检测剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)、pro-caspase-3、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)蛋白表达。结果:岩黄连总碱(5、10、20μg/ml)和下调miR-223表达可显著升高Pg-LPS诱导的人牙龈成纤维细胞增殖活力和pro-caspase-3蛋白表达水平,降低细胞凋亡率、IL-1β和TNF-α水平以及Cleaved-caspase-3、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达水平(均P<0.05)。过表达miR-223可逆转岩黄连总碱对Pg-LPS诱导的人牙龈成纤维细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT通路的作用。结论:岩黄连总碱可通过下调miR-223表达而抑制PI3K/AKT信号通路从而促进Pg-LPS诱导的人牙龈成纤维细胞增殖,并抑制细胞凋亡和炎性反应。 展开更多
关键词 岩黄连总碱 微小RNA-223 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路 牙龈成纤维细胞 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖
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新型牙髓治疗材料iRoot BP Plus对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性 被引量:15
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作者 史爽 包志凡 +1 位作者 陈旭 张丹丹 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期681-684,共4页
目的:比较新型牙髓治疗材料i Root BP Plus与矿物三氧化物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性。方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl-thiazol-tetrazolium,MTT)法测定上述2种材料不同浸提时间(1、3... 目的:比较新型牙髓治疗材料i Root BP Plus与矿物三氧化物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性。方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl-thiazol-tetrazolium,MTT)法测定上述2种材料不同浸提时间(1、3、7 d)的浸提液原液及不同浓度稀(1:2、1:5)释液对体外培养的人牙龈成纤维细胞增殖的影响。细胞增殖率以x±s表示,采用SPSS20.0软件包对数据进行析因设计的方差分析。结果:i Root BP Plus和MTA的浸提液原液及不同浓度稀释液作用后的细胞增殖率界于77.31%~113.82%,细胞毒性分级为0或1级,评价结果为无细胞毒性。不同时间点、不同稀释度下,2种材料对体外培养的人牙龈成纤维细胞增殖率的影响无显著差异(F浓度*时间*材料=1.393,P=0.256)。结论 :i Root BP Plus与MTA均对体外培养的人牙龈成纤维细胞无细胞毒性。 展开更多
关键词 iRoot BP PLUS 矿物三氧化物凝聚体 细胞毒性 牙龈成纤维细胞
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人牙龈成纤维细胞和牙周膜成纤维细胞的培养和生物学特征 被引量:19
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作者 徐燕 李颂 +2 位作者 程继光 胡勇 王明丽 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2002年第6期375-377,共3页
目的 :探讨采用不同方法建立体外培养人牙龈成纤维细胞和人牙周膜成纤维细胞并对其生物学特性作初步探讨。方法 :分别采用消化培养法和组织块培养法培养人的牙龈和牙周膜成纤维细胞。通过倒置显微镜活体观察 ,以及光镜、透射电镜、免疫... 目的 :探讨采用不同方法建立体外培养人牙龈成纤维细胞和人牙周膜成纤维细胞并对其生物学特性作初步探讨。方法 :分别采用消化培养法和组织块培养法培养人的牙龈和牙周膜成纤维细胞。通过倒置显微镜活体观察 ,以及光镜、透射电镜、免疫组化和生长曲线等方法对其生物学特性作初步观察。结果 :消化培养法成功率低于组织块培养法。光镜下和透射电镜下观察两种细胞在形态和结构上相似。免疫组化染色证实此两种细胞均来源于中胚层的纤维母细胞。生长曲线表明牙龈成纤维细胞的倍增时间比牙周膜成纤维细胞稍短 ,而牙周膜成纤维细胞的增殖活性比牙龈成纤维细胞高。结论 :组织块培养法适用于此二种细胞的培养。细胞生物学特征方面有许多相似形 。 展开更多
关键词 牙龈成纤维细胞 牙周膜纤维细胞 培养 生物学特征
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尼古丁和烟草浸提液对人牙龈成纤维细胞生长和贴附能力的影响 被引量:7
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作者 徐燕 袁萍 +2 位作者 李颂 胡勇 王明丽 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2004年第1期16-18,共3页
目的 :体外观察尼古丁和烟草浸提液 (ST)对人牙龈成纤维细胞的生长和贴附影响。方法 :用不同浓度的尼古丁和ST作用于人牙龈成纤维细胞 ,用MTT法检测细胞的生长和贴附情况。结果 :随尼古丁和ST浓度的增加 ,细胞的生长率逐渐下降 ,尼古丁... 目的 :体外观察尼古丁和烟草浸提液 (ST)对人牙龈成纤维细胞的生长和贴附影响。方法 :用不同浓度的尼古丁和ST作用于人牙龈成纤维细胞 ,用MTT法检测细胞的生长和贴附情况。结果 :随尼古丁和ST浓度的增加 ,细胞的生长率逐渐下降 ,尼古丁和ST对细胞生长半抑制浓度 (IC50 )分别为 0 .0 95 g/L和 11.88g/L ;与对照组相比 ,当尼古丁及ST浓度分别大于 0 .0 1g/L和 6 .2 g/L时差异有显著意义。而对细胞贴附的影响表明 ,随着尼古丁和ST浓度的增加 ,细胞的贴附率逐渐下降 ,尼古丁和ST对细胞贴附的IC50 分别是 0 .6 g/L和 10 .33g/L ;与对照组相比 ,当尼古丁及ST浓度分别大于 0 .1g/L和 12 .4 g/L时差异有显著意义。结论 :尼古丁和浸提取液均可抑制人牙龈成纤维细胞的生长和贴附 。 展开更多
关键词 尼古丁 烟草浸提液 牙龈成纤维细胞 细胞生长 细胞贴附能力
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内毒素对牙龈成纤维细胞增殖活性及分泌基质金属蛋白酶的影响 被引量:12
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作者 于艳玲 许丽华 +2 位作者 王俊霞 尤红煜 杨冬茹 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期60-63,共4页
目的观察内毒素对牙龈成纤维细胞增殖活性及分泌基质金属蛋白酶-1,3量的影响,探讨基质金属蛋白酶在牙周炎致病机制中的可能作用。方法通过改良酶消化组织块法进行牙龈成纤维细胞的原代培养,用内毒素对其进行刺激,运用MTT法观察内毒素对... 目的观察内毒素对牙龈成纤维细胞增殖活性及分泌基质金属蛋白酶-1,3量的影响,探讨基质金属蛋白酶在牙周炎致病机制中的可能作用。方法通过改良酶消化组织块法进行牙龈成纤维细胞的原代培养,用内毒素对其进行刺激,运用MTT法观察内毒素对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响,通过免疫组化法检测内毒素对牙龈成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1,3的影响。结果MTT结果显示,低浓度内毒素在短期内可以促进牙龈成纤维细胞的增殖,但随着时间的延长,也表现为对细胞的毒性作用,抑制其增殖;高浓度内毒素抑制牙龈成纤维细胞的增殖;免疫组化研究结果表明,未受LPS刺激的牙龈成纤维细胞MMP-1,3表达弱阳性,受刺激后阳性表达增强,在12h时达到顶峰,且MMP-3的整体表达较MMP-1弱。结论LPS可以影响牙龈成纤维细胞的增殖活性;LPS可以促进牙龈成纤维细胞对基质金属蛋白酶的分泌,加快牙周细胞外基质的降解,加速牙周炎的进程。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 牙龈成纤维细胞 内毒素 细胞原代培养 牙周炎
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人转化生长因子β1基因转染人牙龈成纤维细胞及其稳定表达 被引量:7
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作者 储庆 吴织芬 +3 位作者 何海丽 谢光远 王鑫 刘玲侠 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2004年第2期136-138,共3页
目的 :探讨人转化生长因子 - β1(hTGF - β1)基因转染人牙龈成纤维细胞 (GF)的表达能力。 方法 :体外培养人GF ,传代培养后以阳离子脂质体 (Lipofectamine) :pcDNA3-hTGF - β1为 3μL∶1μg的比例转染。通过免疫组织化学染色的方法及... 目的 :探讨人转化生长因子 - β1(hTGF - β1)基因转染人牙龈成纤维细胞 (GF)的表达能力。 方法 :体外培养人GF ,传代培养后以阳离子脂质体 (Lipofectamine) :pcDNA3-hTGF - β1为 3μL∶1μg的比例转染。通过免疫组织化学染色的方法及图像分析检测hTGF - β1表达水平 ;利用水貂肺上皮细胞生长抑制法检测TGF - β1的生物学活性。结果 :转染后的GF呈强阳性表达 ,并持续 4周以上。图像分析显示转染细胞hTGF - β1表达显著增强 ,与对照组比较差异显著 (P <0 .0 1)。转染后细胞上清可有效的抑制水貂肺上皮细胞的生长。结论 :hTGF - β1基因转染可使牙龈成纤维细胞有效而稳定的表达活性hTGF - 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 基因转染 牙龈成纤维细胞 免疫组织化学 生物学活性 脂质体 真核表达载体
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蜂胶对牙龈卟啉单胞菌及牙龈成纤维细胞的影响 被引量:6
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作者 蒋琳 林居红 +1 位作者 张红梅 朱立芬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第16期1538-1540,共3页
目的了解蜂胶对牙龈卟啉单胞菌(porphyromonas gingival,Pg)生长的抑制作用及对人牙龈成纤维细胞的毒性作用。方法采用液体稀释法测定蜂胶对Pg的最小杀菌浓度(MBC),用MTT法测定不同浓度蜂胶作用24h后牙龈成纤维细胞的细胞相对增... 目的了解蜂胶对牙龈卟啉单胞菌(porphyromonas gingival,Pg)生长的抑制作用及对人牙龈成纤维细胞的毒性作用。方法采用液体稀释法测定蜂胶对Pg的最小杀菌浓度(MBC),用MTT法测定不同浓度蜂胶作用24h后牙龈成纤维细胞的细胞相对增殖率(RGR),了解蜂胶作用24h后细胞连续7d的增殖回复情况。结果蜂胶对取的MBC为1.56g/L,相当于0.125~0.25mg/L的奥硝唑。蜂胶浓度为MBC时RGR达到70%以上;4g/L蜂胶组的RGR为52.1%,作用细胞24h后,连续7d细胞数持续增加,吸光度逐渐接近阴性对照组。结论蜂胶对Pg的生长有显著抑制作用,且细胞毒性较小,毒性作用可逆。 展开更多
关键词 蜂胶 牙龈卟啉单胞菌 生长 牙龈成纤维细胞 细胞毒性
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一氧化碳对肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β共同诱导的人牙龈成纤维细胞黏附分子表达的影响 被引量:5
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作者 赵华强 魏玲玲 +4 位作者 侯萌 穆萍萍 魏奉才 宋晖 杨丕山 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期304-307,313,共5页
目的研究一氧化碳对炎性环境下人牙龈成纤维细胞黏附分子表达的影响。方法以50 ng.mL-1的肿瘤坏死因子(TNF)-α和10 ng.mL-1的白细胞介素(IL)-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子(CORM)的人牙龈成纤维细胞,用Western blo... 目的研究一氧化碳对炎性环境下人牙龈成纤维细胞黏附分子表达的影响。方法以50 ng.mL-1的肿瘤坏死因子(TNF)-α和10 ng.mL-1的白细胞介素(IL)-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子(CORM)的人牙龈成纤维细胞,用Western blot法检测细胞间黏附分子(ICAM)-1、血管细胞黏附分子(VCAM)-1的蛋白表达,用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测黏附分子的mRNA表达,用瞬时转染和报告基因测定法分析NF-κB的活性。结果TNF-α和IL-1β共同刺激后,人牙龈成纤维细胞ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达和蛋白表达均显著增强。CORM的加入可显著抑制ICAM-1和VCAM-1的表达。CORM可显著降低ICAM-1和VCAM-1诱导的NF-κB的活性。结论一氧化碳有可能成为牙周病治疗的一种极具潜力的新物质。 展开更多
关键词 牙龈成纤维细胞 牙周炎 黏附分子 一氧化碳
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钙拮抗剂对牙龈成纤维细胞作用的体外实验研究 被引量:12
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作者 孙卫斌 蒋春梅 +1 位作者 郑仕中 俞未一 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2001年第1期7-9,共3页
目的 :探讨钙拮抗剂硝苯地平对牙龈成纤维细胞的作用。方法 :体外培养牙龈成纤维细胞 ,细胞在不同浓度硝苯地平作用下计数观察。结果 :细胞计数在实验第 6、7天出现组间非常显著性差异。主要表现为硝苯地平 12 0 0 μg/L和 36 0 μg/L... 目的 :探讨钙拮抗剂硝苯地平对牙龈成纤维细胞的作用。方法 :体外培养牙龈成纤维细胞 ,细胞在不同浓度硝苯地平作用下计数观察。结果 :细胞计数在实验第 6、7天出现组间非常显著性差异。主要表现为硝苯地平 12 0 0 μg/L和 36 0 μg/L组 ,细胞计数明显高于低剂量组。 结论 展开更多
关键词 牙龈增生 硝苯地平 牙龈成纤维细胞
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人牙龈成纤维细胞原代培养及冻存和复苏 被引量:4
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作者 惠敏 倪莹 +3 位作者 郑静 刘健 王帅 张晓明 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第46期8620-8624,共5页
背景:牙龈成纤维细胞是牙龈固有结缔组织层中主要的细胞,在许多生理和病理过程中起着重要作用。目的:对人牙龈成纤维细胞进行原代培养、鉴定、冻存及复苏。方法:采用组织块培养法培养人牙龈成纤维细胞,并进行形态学和免疫学鉴定。对人... 背景:牙龈成纤维细胞是牙龈固有结缔组织层中主要的细胞,在许多生理和病理过程中起着重要作用。目的:对人牙龈成纤维细胞进行原代培养、鉴定、冻存及复苏。方法:采用组织块培养法培养人牙龈成纤维细胞,并进行形态学和免疫学鉴定。对人牙龈成纤维细胞进行冻存与复苏,倒置显微镜下观察细胞形态变化。结果与结论:人牙龈成纤维细胞原代培养成功率为86.7%,细胞呈梭形或纺锤形。免疫组织化学鉴定抗波性蛋白抗体染色阳性,抗角蛋白抗体染色阴性,为中胚层来源的成纤维细胞。牙龈成纤维细胞冻存与复苏成功,细胞经2次传代后生物学性状与原代相似。提示采用组织块培养法培养原代人牙龈成纤维细胞及冻存与复苏方法可行。 展开更多
关键词 牙龈成纤维细胞 细胞培养 冻存 复苏 鉴定 组织构建
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