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荷斯坦牛κ-酪蛋白基因分型KASP检测方法的建立与应用
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作者 赵凤 刘林 +6 位作者 杨宇泽 吕小青 麻柱 赵春颖 路永强 张建聪 邹杨 《中国奶牛》 2023年第7期49-52,共4页
为筛选κ-酪蛋白优势基因型,本研究设计4个SNP位点,利用基因组检测已知CSN3基因型的13头牛,采集抗凝血,提取基因组DNA,采用竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)对样本进行分型,CSN3基因有AA、BB... 为筛选κ-酪蛋白优势基因型,本研究设计4个SNP位点,利用基因组检测已知CSN3基因型的13头牛,采集抗凝血,提取基因组DNA,采用竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)对样本进行分型,CSN3基因有AA、BB、EE、AB、AE、BE六种基因型。本研究实现了对北京地区213头荷斯坦种公牛及1003头母牛中CSN3三种常见变异体的全面筛选,从育种角度出发,基于κ-酪蛋白不同基因型与奶酪生产的产量和质量相关性,利用分子检测方法筛选与优良性状的优势基因型,发掘荷斯坦牛特色优质种质资源,为牧场选择合适的荷斯坦牛,提高乳蛋白率,从种源解决相关领域的技术瓶颈。 展开更多
关键词 荷斯坦 κ-酪蛋白 基因分型 检测方法
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山羊β-酪蛋白基因启动子指导的转基因小鼠乳汁高效表达人凝血因子Ⅸ 被引量:35
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作者 黄赞 颜景斌 +4 位作者 黄缨 孙琼 肖艳萍 黄英 曾溢滔 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期206-211,T001,共7页
为探讨应用转基因动物乳腺生物反应器高效表达人凝血因子IX(humanclottingfactorIX ,hFIX)的可行性 ,构建了包括山羊 β 酪蛋白基因启动子和外显子 1、内含子 1、外显子 2共约 6 .7kb片段以及hFIX全长cDNA序列和部分经改造的内含子 1的... 为探讨应用转基因动物乳腺生物反应器高效表达人凝血因子IX(humanclottingfactorIX ,hFIX)的可行性 ,构建了包括山羊 β 酪蛋白基因启动子和外显子 1、内含子 1、外显子 2共约 6 .7kb片段以及hFIX全长cDNA序列和部分经改造的内含子 1的乳腺表达载体 ,通过转基因技术获得 12个原代转基因小鼠 (9♀ ,3♂ ) ,整合率为 11.2 %。经ELISA和Westernblot鉴定 8只转基因母鼠乳汁中有hFIX的表达并拥有很高的凝血活性 ,其中一只的表达量高达5 2 .9mg/L ,其凝血活性亦高达 2 79.2 %。FISH实验表明不同的转基因小鼠外源基因整合于小鼠的不同染色体上。结果证明所构建的山羊 β 酪蛋白基因启动子乳腺表达载体能有效指导hFIX基因在小鼠乳腺中高效表达 ,并能保持hFIX的生物活性。 展开更多
关键词 山羊 β-酪蛋白基因启动子 人凝血因子Ⅸ 基因小鼠 表达
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β-酪蛋白A2A2基因型奶牛在黑龙江省某牛场中的分布及泌乳性能 被引量:1
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作者 李红宇 黄萌 +8 位作者 邵广 赵文江 刘文 郭春晖 王德香 阿晓辉 王树茂 姜兴刚 贾斌 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期147-150,共4页
为探究β-酪蛋白A2A2基因型奶牛在牛群中的分布及泌乳性能,本研究对黑龙江省某规模化奶牛场第1胎次314头荷斯坦牛的血液样本中β-酪蛋白基因进行测序和分型检测;比较β-酪蛋白A1/A2基因型奶牛的分布规律及泌乳性能。结果表明:牛群中A1A... 为探究β-酪蛋白A2A2基因型奶牛在牛群中的分布及泌乳性能,本研究对黑龙江省某规模化奶牛场第1胎次314头荷斯坦牛的血液样本中β-酪蛋白基因进行测序和分型检测;比较β-酪蛋白A1/A2基因型奶牛的分布规律及泌乳性能。结果表明:牛群中A1A1基因型频率为18.97%,A1A2基因型频率为48.41%,A2A2基因型频率为32.80%,A1基因频率为42.99%,A2基因频率为57.01%;β-酪蛋白不同基因型(A1A1、A1A2和A2A2)奶牛的泌乳量、乳脂和乳蛋白率等泌乳指标差异不显著。 展开更多
关键词 荷斯坦 β-酪蛋白 A1/A2基因 基因频率 泌乳性能
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高原娟姗牛β-酪蛋白A2纯合基因型的筛选鉴定 被引量:1
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作者 唐运萍 伏蓉 +6 位作者 李会民 孙蕊仙 司华新 王婧羽 杨发光 丁立 隋世燕 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第6期21-26,共6页
为了筛选出A2A2基因型娟姗牛,组建A2型奶牛育种核心群,为A2牛奶的开发应用奠定基础。从云南欧亚乳业公司鹤庆有机牧场核心群选取385头娟姗牛进行尾静脉采血,提取血液中基因组DNA,检测浓度和纯度后,将提取的DNA进行PCR扩增并送公司测序,... 为了筛选出A2A2基因型娟姗牛,组建A2型奶牛育种核心群,为A2牛奶的开发应用奠定基础。从云南欧亚乳业公司鹤庆有机牧场核心群选取385头娟姗牛进行尾静脉采血,提取血液中基因组DNA,检测浓度和纯度后,将提取的DNA进行PCR扩增并送公司测序,同时对血清中β-酪蛋白的含量进行检测。经不同公司各自使用不同引物进行检测,结果一致。在所有娟姗牛中,检测到3种基因型:A2A2基因型198头、A1A1基因型29头、A1A2基因型158头;3种基因型奶牛分别占51.43%、7.53%和41.04%,A2基因频率达71.95%。娟姗牛β-酪蛋白的平均含量为5.58μg/mL,A2A2型和A1A2型奶牛的β-酪蛋白含量均显著低于A1A1型奶牛(P<0.05),但是A2A2型和A1A2型奶牛之间则无统计学差异(P>0.05)。结果表明,通过DNA测序检测突变位点核苷酸能够鉴定出A2A2基因型娟姗牛,β-酪蛋白含量测定不能分辨出A2A2型和A1A2型娟姗牛。与ELISA蛋白检测方法相比,DNA测序法具有快速准确、成本较低等优点,可作为牛群分型的理想方法。 展开更多
关键词 高原娟姗 β-酪蛋白 A2基因 基因分型 鉴定
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山羊β-酪蛋白基因启动子指导人血清白蛋白基因在小鼠组织中的特异性表达 被引量:5
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作者 曹新 曾溢滔 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期518-520,共3页
对本所构建的pcDNA3.1- β6 .7hALBm表达载体行尾静脉注射直接转染哺乳期母鼠的活体组织。通过RT-PCR检测hALBm基因在小鼠几种组织中的表达来研究该构建体的组织特异性。结果 :构建体在受试鼠组织中的表达显示了较好的乳腺组织特异性。... 对本所构建的pcDNA3.1- β6 .7hALBm表达载体行尾静脉注射直接转染哺乳期母鼠的活体组织。通过RT-PCR检测hALBm基因在小鼠几种组织中的表达来研究该构建体的组织特异性。结果 :构建体在受试鼠组织中的表达显示了较好的乳腺组织特异性。说明构建具有较长 5′端上游乳蛋白调控区的乳腺特异性表达载体对组织特异性表达是必需的。 展开更多
关键词 启动子 表达载体 特异性表达 山羊β-酪蛋白基因 人血清白蛋白
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利用TALE-TFs在小鼠成纤维细胞中激活β-酪蛋白基因启动子表达载体
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作者 皮文辉 梁龙 +6 位作者 唐红 张译元 郭延华 王立民 向春和 周平 刘守仁 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第5期13-16,I0003,共5页
目的利用TALE-TFs,在小鼠成纤维细胞中激活β-酪蛋白基因启动子,为检测β-酪蛋白基因启动子—目的基因表达框的表达结果,提供一种检测途径。方法将构建的TALE-TFs和β-酪蛋白基因启动子—Red报告基因质粒电转染进入小鼠成纤维细胞,通过... 目的利用TALE-TFs,在小鼠成纤维细胞中激活β-酪蛋白基因启动子,为检测β-酪蛋白基因启动子—目的基因表达框的表达结果,提供一种检测途径。方法将构建的TALE-TFs和β-酪蛋白基因启动子—Red报告基因质粒电转染进入小鼠成纤维细胞,通过荧光显微镜直接观察报告基因表达情况。结果与结论利用TALE人工转录因子,在小鼠成纤维细胞中能够激活β-酪蛋白基因启动子表达框,为替代乳腺上皮细胞表达验证系统提供了新的途径。 展开更多
关键词 TALE-TFs 小鼠成纤维细胞 β-酪蛋白基因启动子 表达调控
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不同来源β-酪蛋白基因启动子调控人IFNα-2b基因的表达效率
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作者 李辉 刘庆友 石德顺 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期970-978,共9页
【目的】为获得高启动效率的乳腺特异启动子,对荷斯坦奶牛、娟姗牛和奶水牛的β-酪蛋白基因启动子进行比较研究。【方法】对Genbank中所收录的荷斯坦奶牛、娟姗牛和水牛β-酪蛋白基因启动子序列进行比对分析,按照保守序列分别设计启动... 【目的】为获得高启动效率的乳腺特异启动子,对荷斯坦奶牛、娟姗牛和奶水牛的β-酪蛋白基因启动子进行比较研究。【方法】对Genbank中所收录的荷斯坦奶牛、娟姗牛和水牛β-酪蛋白基因启动子序列进行比对分析,按照保守序列分别设计启动子区和3′端ploy A序列引物,同时设计人IFNα-2b基因和EGFP-Neo筛选序列引物并引入预先设计的酶切位点以方便载体构建。采集静脉血液,提取基因组DNA。PCR克隆β-酪蛋白基因启动子区和3′端ploy A区,同时以实验室保存质粒为模板克隆人IFNα-2b基因和EGFP-Neo筛选序列。测序正确后,将各片段按设计顺序依次插入p MD18-T骨架中,构建成p HSTBCNp-IFN,p JSBCNp-IFN和p SNBCNp-IFN乳腺特异表达载体。将各载体转染Bcap-37细胞,经G418筛选出稳定整合的转基因细胞系。用胰岛素(1 mg·L-1),转铁蛋白因子(1 mg·L-1),氢化可的松(1 mg·L-1)和PRL(250IU·L-1)联合对转基因细胞系进行诱导,然后用PCR、Western blotting、QRT-PCR技术和ELISA方法分别在m RNA水平和蛋白质水平检测IFNα-2b的表达。【结果】PCR后获得了荷斯坦奶牛、娟姗牛和水牛β-酪蛋白基因启动子区,长度分别为5 219、5 244和5 216 bp,其中包括了第一外显子,第一内含子和部分第二外显子,部分第二外显子的51个碱基编码17个氨基酸的信号肽序列。克隆了1 166 bp的ploy A区序列。最终将构建的3个乳腺特异表达载体转染Bcap-37细胞并经过G418筛选后,获得了3个转基因细胞系。经激素诱导后,PCR、Western blotting、QRT-PCR和ELISA检测发现3个转基因细胞系都表达了IFNα-2b基因,并且发现娟姗牛β-酪蛋白基因启动子在调控IFNα-2b基因的表达上效率较高,在m RNA水平和蛋白质水平上显著高于其他两个启动子(P<0.05)。【结论】娟姗牛β-酪蛋白基因启动子在调控外源基因表达上具有较高的效率,是具有应用前景的乳腺特异性启动子。所构建的表达载体为IFNα-2b转基因动物乳腺生物反应器的制备奠定基础。 展开更多
关键词 启动子 娟姗 干扰素Α-2B BCAP-37 基因
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西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因启动子区的克隆、生物信息学分析及活性研究
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作者 梁克明 朱婧 +2 位作者 童德文 陈南春 陈苏民 《生物技术通讯》 CAS 2005年第4期363-366,共4页
根据已发表的β-酪蛋白基因全序列设计合成引物,以西农萨能奶山羊乳腺组织基因组DNA为模板,通过长链PCR扩增β-酪蛋白基因组基因5'侧序列。将该序列克隆入pMD18-T载体,并对其进行序列测定。结果克隆得到西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因... 根据已发表的β-酪蛋白基因全序列设计合成引物,以西农萨能奶山羊乳腺组织基因组DNA为模板,通过长链PCR扩增β-酪蛋白基因组基因5'侧序列。将该序列克隆入pMD18-T载体,并对其进行序列测定。结果克隆得到西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因-4359至+2106共6465bp序列。该序列保留β-酪蛋白第一内含子、第一外显子和第二外显子及其信号肽部分。将该序列与已公布的其他山羊β-酪蛋白基因序列进行比较,其同源性为96%~98%。生物信息学分析显示,β-酪蛋白基因启动子区包含有TATA启动子序列和HOXF、Oct-1、AP1、CEBP、STAT、NFKB、GR、ER、PR和ETS等转录因子识别位点。将此6465bp片段插入荧光素酶报道基因载体pGL3-Basic中,构建重组质粒pGL3/B65,瞬时转染萨能奶山羊原代培养的乳腺上皮细胞48h后检测显示,该假设的启动子区确有启动子功能,对泌乳激素发生反应。本研究为进一步构建有效的乳腺生物反应器载体奠定了基础。 展开更多
关键词 β-酪蛋白基因 西农萨能奶山羊 启动子区域 转录调控
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中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因第4和第5外显子多态性与泌乳性状的关联分析 被引量:7
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作者 鞠志花 王洪梅 +6 位作者 李秋玲 黄金明 李建斌 安利国 杨桂文 仲跻峰 王长法 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期3279-3287,共9页
【目的】研究中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因第4和第5外显子多态性与泌乳性状的关联性,为培育高乳蛋白及高乳脂率奶牛提供参考依据。【方法】采用DNA测序、PCR-RFLP和CRS-PCR技术,对544头中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因的外显子4和5序列进行研究... 【目的】研究中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因第4和第5外显子多态性与泌乳性状的关联性,为培育高乳蛋白及高乳脂率奶牛提供参考依据。【方法】采用DNA测序、PCR-RFLP和CRS-PCR技术,对544头中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因的外显子4和5序列进行研究,通过SHEsis软件和PHASE软件进行配对连锁不平衡分析和单倍型分析。【结果】发现6个新的SNPs,包括外显子5上A12907G、G12950A、C12989T、A13028G、T12980C共5个SNP位点,证实前4个位点紧密连锁;外显子4上A10996T共1个SNP位点。单位点基因型与泌乳性状关联分析表明,A10996T突变位点的TT和AT基因型个体乳脂率显著高于AA基因型个体(P<0.05);T12980C突变位点的TC和CC基因型个体乳脂率、乳蛋白率分别极显著(P<0.01)、显著(P<0.05)高于TT基因型个体;紧密连锁的4个突变位点的DE基因型个体乳脂率极显著高于DD基因型个体(P<0.01)。与泌乳性状的关联分析表明,共构建出7种单倍型,发现16种单倍型组合;其中H6H6单倍型组合个体乳脂率最高,H1H4次之;H1H4单倍型组合个体乳蛋白率最高;H5H6单倍型组合个体乳蛋白率及乳脂率最低。【结论】H1H4单倍型组合在乳蛋白率和乳脂率方面为有利单倍型组合,可作为选择高乳蛋白高乳脂率牛群的分子标记。 展开更多
关键词 中国荷斯坦 Κ-酪蛋白基因 多态性 泌乳性状 单倍型
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人gdnf基因的克隆及牛β-酪蛋白基因座定位整合载体的构建 被引量:3
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作者 张学明 罗奋华 +1 位作者 苏慧敏 吴应积 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期113-118,共6页
用分子克隆技术构建人gdnf基因打靶牛β-casein基因座的正负筛选打靶载体,用于制备生产人GDNF的牛乳腺生物反应器。打靶载体以牛β-casein基因上游和下游5.7 kb序列为5′和3′同源臂;neo抗性基因为正筛选因子;HSV-tk基因和DsRed2基因为... 用分子克隆技术构建人gdnf基因打靶牛β-casein基因座的正负筛选打靶载体,用于制备生产人GDNF的牛乳腺生物反应器。打靶载体以牛β-casein基因上游和下游5.7 kb序列为5′和3′同源臂;neo抗性基因为正筛选因子;HSV-tk基因和DsRed2基因为双负筛选因子;人gdnf基因置于5′同源臂下游,SV40 polyA序列插入到人gdnf基因下游作为人gdnf基因转录终止信号。经PCR、限制性内切酶图谱及DNA测序分析鉴定,结果表明已成功地构建了人gdnf基因打靶牛β-casein基因座的正负筛选打靶载体,为研究人gdnf基因在牛β-casein基因座的定点整合及通过体细胞核移植法制备人GDNF牛乳腺生物反应器的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 基因打靶 人胶质细胞源性神经营养因子 牛β-酪蛋白基因 载体
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草原红牛κ-酪蛋白基因的多态性及与泌乳性状关联性分析 被引量:1
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作者 申瑞雪 郭将 +7 位作者 马倩 赵衍铜 李传民 邱峥艳 高妍 张国梁 赵志辉 张永宏 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期55-59,共5页
为研究草原红牛κ-酪蛋白基因的多态性及与泌乳性状相关性,采用PCR-RFLP方法检测κ-酪蛋白基因外显子5的遗传多态性。结果检测到TT、TC和CC三种基因型,统计分析表明,此多态位点与草原红牛乳蛋白和乳糖呈显著相关,乳蛋白:CC基因型极显著... 为研究草原红牛κ-酪蛋白基因的多态性及与泌乳性状相关性,采用PCR-RFLP方法检测κ-酪蛋白基因外显子5的遗传多态性。结果检测到TT、TC和CC三种基因型,统计分析表明,此多态位点与草原红牛乳蛋白和乳糖呈显著相关,乳蛋白:CC基因型极显著高于CT基因型和TT基因型(P<0.01),而CT基因型也极显著高于TT基因型(P<0.01)。乳糖:TT基因型和TC基因型极显著高于CC基因型(P<0.01),而TT和TC基因型之间差异不显著(P>0.01)。其他泌乳性状的基因型间差异不显著(P>0.01)。结果表明,κ-CN基因对草原红牛乳蛋白和乳糖具有较大的遗传效应,可初步推断κ-CN是控制这一性状的众多基因之一,是影响草原红牛乳蛋白和乳糖的一个主效基因或与主效基因相连锁,可作为选育草原红牛高乳蛋白及低乳糖奶牛的分子标记,用于标记辅助选择意义重大。 展开更多
关键词 草原红 Κ-酪蛋白基因 PCR-RFLP 泌乳性状
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牛β-酪蛋白基因的克隆及乳腺特异性表达载体的构建
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作者 杨瑞锋 刘金龙 +2 位作者 安志兴 李志艳 张涌 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B04期260-263,共4页
利用PCR技术分3段克隆了长约9.7kb的牛β-酪蛋白基因,分另4克隆在pGEM-T easy Vector的T位点。经NCBI Blastn分析,与牛β-酪蛋白基因相应区段的同源性为98%。这3段序 列包含完整的5’侧翼序列、前8个外显子及第8个内含子的部分序列。... 利用PCR技术分3段克隆了长约9.7kb的牛β-酪蛋白基因,分另4克隆在pGEM-T easy Vector的T位点。经NCBI Blastn分析,与牛β-酪蛋白基因相应区段的同源性为98%。这3段序 列包含完整的5’侧翼序列、前8个外显子及第8个内含子的部分序列。以此构建了两个乳腺特 异性表达栽体:利用第1段和第2段共有的酶切位点将两段融合,作为5’调控区(6.8kb),第3段 和实验室已有的600 bp的加尾信号通过重组PCR拼接作为3’调控区(3.4kb)构建了一乳腺特异 性表达栽体;以第一段作为5’调控区,实验室已有的600bp加尾信号作为3’为调控区构建了另一 乳腺特异性表达载体。可以应用于进一步乳腺生物反应器的研制。 展开更多
关键词 牛β-酪蛋白基因 克隆 载体构建
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牛α(1,3)-半乳糖转移酶基因片段的克隆及一种全新的无启动子打靶载体的构建
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作者 陈立栋 林爱星 +3 位作者 张雅丽 杨兴元 安晓荣 陈永福 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第9期25-29,共5页
利用La-PCR的方法,从牛的基因组中成功地获得分别约为2.4kb、15.0kb的两段扩增产物。两个片段分别克隆于pCR—XL—TOPO载体。测序结果表明所克隆的两片段均为牛α(1,3)GT基因的基因组序列。其中2.4kb片段位于5~7外显子之间,包括了完整... 利用La-PCR的方法,从牛的基因组中成功地获得分别约为2.4kb、15.0kb的两段扩增产物。两个片段分别克隆于pCR—XL—TOPO载体。测序结果表明所克隆的两片段均为牛α(1,3)GT基因的基因组序列。其中2.4kb片段位于5~7外显子之间,包括了完整的第五及第六内含子;15.0kb片段位于3~4外显子,包括了完整的第三内含子。15.0kb、2.4kb片段分别作为打靶载体的5’、3’同源臂,使用融合基因策略构建了一种全新的无启动子打靶载体7zf—neo17.4。电击转染牛胎儿成纤维细胞以期敲除牛的α(1,3)—GT基因。 展开更多
关键词 启动子 打靶载体 α(1 3)-半乳糖转移酶基因 克隆 基因打靶
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牛αS1-酪蛋白基因5′调控区的克隆与分析
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作者 张小辉 祁艳霞 王玉琴 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第11期41-42,共2页
关键词 调控区 克隆 αS1-酪蛋白 酪蛋白基因 第6号染色体 常染色体 β-酪蛋白
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绵羊成纤维细胞中TALE-TFs激活β酪蛋白基因启动子研究
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作者 皮文辉 《绿洲农业科学与工程》 2017年第2期3-9,共7页
针对绵羊β-酪蛋白基因启动子序列设计4个人工转录因子TALE-TFs。电转染TALE-TFs进入绵羊成纤维细胞中,通过实时荧光定量和Western blotting检测β-酪蛋白基因表达,筛选获得激活效果较好的TALE-TF1。将TALE-TF1和β-酪蛋白基因启动子... 针对绵羊β-酪蛋白基因启动子序列设计4个人工转录因子TALE-TFs。电转染TALE-TFs进入绵羊成纤维细胞中,通过实时荧光定量和Western blotting检测β-酪蛋白基因表达,筛选获得激活效果较好的TALE-TF1。将TALE-TF1和β-酪蛋白基因启动子、Red报告基因质粒电转染进入绵羊成纤维细胞,通过荧光显微镜直接观察报告基因Red表达。利用TALE人工转录因子,在绵羊成纤维细胞中能够激活β-酪蛋白基因启动子表达框,为替代乳腺上皮细胞表达验证系统提供了一种检测途径。 展开更多
关键词 TALE-TFs 绵羊成纤维细胞 β-酪蛋白基因启动子 表达调控
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用牛αS1-酪蛋白基因构建乳腺生物反应器表达载体的研究 被引量:2
16
作者 管晓斌 李春笑 赖松家 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第23期6140-6141,6190,共3页
牛αS1-酪蛋白基因是制备乳腺生物反应器常用的表达载体,可以指导外源基因在动物乳腺中高水平表达。对牛αS1-酪蛋白基因的结构、表达载体的各种调控元件及其研究应用进展等方面作一综述。
关键词 αS1-酪蛋白基因 表达载体 乳腺生物反应器 基因
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中国荷斯坦牛κ-酪蛋白基因外显子1的多态性研究 被引量:1
17
作者 郧亚宁 王晓薇 顾亚玲 《中国奶牛》 2012年第17期27-28,共2页
本试验以64头中国荷斯坦牛为研究对象,采用PCR-SSCP方法对κ-酪蛋白基因外显子1的多态性进行研究,结果显示外显子1在群体中存在多态性,此结果为荷斯坦牛标记辅助选择提供了理论依据。
关键词 荷斯坦 Κ-酪蛋白基因 外显子1 PCR-SSCP
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荷斯坦牛κ-酪蛋白基因5′和3′侧翼序列多态性研究 被引量:1
18
作者 黄亮 尚海彬 +3 位作者 魏蕊 宁素恒 杜文斌 张娟 《中国奶牛》 2014年第10期25-28,共4页
本试验采用PCR-SSCP技术检测了宁夏荷斯坦牛κ-酪蛋白(κ-casein protein,κ-CN)基因5′和3′侧翼区的遗传多态性。结果表明:κ-CN基因5′和3′侧翼区均存在遗传多态性,5′侧翼区有3种基因型(AA、BB和AB),等位基因频率分别为0.5345、0.4... 本试验采用PCR-SSCP技术检测了宁夏荷斯坦牛κ-酪蛋白(κ-casein protein,κ-CN)基因5′和3′侧翼区的遗传多态性。结果表明:κ-CN基因5′和3′侧翼区均存在遗传多态性,5′侧翼区有3种基因型(AA、BB和AB),等位基因频率分别为0.5345、0.4655;3′侧翼区有2种基因型(GG和GT),等位基因频率分别为0.8621、0.1379。κ-CN基因5′侧翼区基因型不符合Hardy-Weinberg平衡(P<0.01),3′侧翼区基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。5′和3′侧翼区的多态信息含量分别为0.3738、0.2095,分别表现为中度多态和低度多态;其杂合度、有效等位基因数分别为0.5019、0.2399和1.9905、1.3120。研究认为κ-CN基因5′侧翼区更适用于分析多态性与生产性能的关系,以及用于数量遗传座位的定位研究。 展开更多
关键词 荷斯坦 κ-酪蛋白-CN)基因 PCR-SSCP
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牛αS1-酪蛋白基因5’-调节区的分子克隆
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作者 杨卫民 沈孝宙 +3 位作者 孙雪茵 彭红 劳为德 陈受宜 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期108-111,共4页
用牛αSl-酪蛋白cDNA作探针,从牛基因组文库中筛选出一段αSl-酪蛋白基因序列。由限制内切酶图谱和Southern印迹分析可以确定其中含有完整的αSl-酪蛋白基因的5’调节区。
关键词 αS1-酪蛋白 基因 5'调节区 分子克隆
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三河牛β-乳球蛋白基因型及其启动子序列特点
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作者 王丽婷 郑艺娜 +2 位作者 金素钰 黄林 郑玉才 《生物技术》 CAS 2024年第1期1-5,75,共6页
[目的]分析三河牛β-乳球蛋白(β-Lg)的基因型,并探索其启动子序列与乳中含量的关系。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测乳中β-Lg遗传变异体及其相对表达量,并通过PCR扩增,比对不同遗传变异体启动子的序列差异。[结果]三河牛(n=... [目的]分析三河牛β-乳球蛋白(β-Lg)的基因型,并探索其启动子序列与乳中含量的关系。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测乳中β-Lg遗传变异体及其相对表达量,并通过PCR扩增,比对不同遗传变异体启动子的序列差异。[结果]三河牛(n=62)乳清中β-Lg有AA、AB和BB共3种基因型,频率依次为0.290、0.403和0.307,A和B两种等位基因频率接近;对37个纯合型β-Lg启动子的部分序列进行PCR扩增(636 bp)和测序,并与普通牛β-Lg基因序列(GenBank登录号:U31361.1)比对,共检测到6个突变位点,其中-430、-362、-216和-204位点基本上是等位基因特异的,且有3个突变点在3种转录因子结合基序中;建立了三河牛乳中β-Lg含量的高效液相色谱测定方法,发现β-Lg含量在AA型中极显著高于AB型(P<0.01),但AA、AB型与BB型之间均无显著差异。[结论]三河牛β-Lg A和B两种等位基因频率接近,其启动子-430、-362、-216和-204位点具有等位基因特异性,并可能影响等位基因表达。 展开更多
关键词 三河 β-乳球蛋白 高效液相色谱 启动子 等位基因表达 聚合酶链式反应 聚丙烯酰胺凝胶电泳
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