茄假单胞菌寄主花生特异性毒性基因的定位 被引量：3

1

作者 蓝乐夫 冯家勋 +2 位作者 段承杰 马庆生 唐纪良 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期440-445,共6页

通过对从茄假单胞菌中克隆的 p GX12 52进行亚克隆分析 ,发现含 p GX12 52右边4 .5kb K pn I/ Eco RI片段的亚克隆 p GX140 4仍象 p GX12 52一样能使对花生不致病菌株 T2 0 14在花生上致病 .用转座子 Tn5- lac对 p GX140 4进行了饱和插... 通过对从茄假单胞菌中克隆的 p GX12 52进行亚克隆分析 ,发现含 p GX12 52右边4 .5kb K pn I/ Eco RI片段的亚克隆 p GX140 4仍象 p GX12 52一样能使对花生不致病菌株 T2 0 14在花生上致病 .用转座子 Tn5- lac对 p GX140 4进行了饱和插入诱变 ,一共分离得到 6个在 p GX140 4上不同位置的独立插入突变 ,其中离 p GX140 4右末端约 1.4 kb、2 .2 kb的两个 Tn5- lac插入使p GX140 4丧失了扩大 T2 0 14寄主范围的能力 ,证实 hsv基因位于 p GX140 展开更多

关键词 茄假单胞菌 寄主特异性毒性基因 寄主 花生 定位

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白喉毒素(Gly_4Ser)_2-人表皮生长因子融合蛋白的纯化及其特异性细胞毒性研究 被引量：6

2

作者 张国利 吴广谋 +3 位作者 李俊植 岳玉环 李树民 朱平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期171-172,共2页

关键词 白喉毒素 人表皮生长因子融合蛋白 特异性细胞毒性 氨基酸 DT

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口蹄疫重组鸡痘病毒诱导猪特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性检测 被引量：6

3

作者 郑敏 金宁一 +4 位作者 秦晓冰 田明尧 费东亮 李萍 何敏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期50-54,共5页

目的:评价口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1诱导猪产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的能力。方法:用PCR方法亚克隆O型FMDVVP1基因C末端部分片段(第1 30～2 1 3AA)。将其插入真核表达载体pDisplay中,构建质粒pDisplay- mVP1。将pDis... 目的:评价口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1诱导猪产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的能力。方法:用PCR方法亚克隆O型FMDVVP1基因C末端部分片段(第1 30～2 1 3AA)。将其插入真核表达载体pDisplay中,构建质粒pDisplay- mVP1。将pDisplay -mVP1转染PK 1 5细胞,经3次G41 8加压筛选,并用RT- PCR和IFA鉴定,证明获得表达目的基因的PK 1 5 /pDisplay- mVP1细胞。最后,利用该细胞作为靶细胞,用LDH法检测口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1免疫猪的特异性CTL杀伤活性。结果:vUTAL3CP1免疫组在效靶比2 5∶1和5 0∶1时,CTL裂解活性分别达到42 . 84%±3 2. 1 %和61 . 94%±4 2. 8% ,显著高于灭活疫苗组与其它对照组(p <0 . 0 1 )。结论:vUTAL3CP1可以诱导猪产生高水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性,为进一步的FMDV基因工程疫苗的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 口蹄疫 重组鸡痘病毒 猪 特异性细胞毒性T淋巴细胞 杀伤活性 检测 活疫苗 细胞免疫

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DAB_(389)(Gly_4Ser)_2-αMSH重组蛋白的构建表达及特异性细胞毒性研究 被引量：3

4

作者 李泽鸿 岳玉环 +1 位作者 张国利 朱平 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期523-526,共4页

目的:构建重组毒素DAB389(Gly4Ser)2-αMSH,探讨其对过度表达αMSH受体的几种癌细胞的特异杀伤作用。方法:利用含有His.Tag和白喉毒素的基因序列作上游引物、含有αMSH全序列和(Gly4Ser)2的互补序列基因作下游引物,以pET28a-DAB389(Gly4... 目的:构建重组毒素DAB389(Gly4Ser)2-αMSH,探讨其对过度表达αMSH受体的几种癌细胞的特异杀伤作用。方法:利用含有His.Tag和白喉毒素的基因序列作上游引物、含有αMSH全序列和(Gly4Ser)2的互补序列基因作下游引物,以pET28a-DAB389(Gly4Ser)2-EGF为模板,PCR扩增得到DAB389(Gly4Ser)2-αMSH片段,插入原核表达载体pET28a的相应位点,构建重组表达载体并在大肠杆菌中表达重组融合蛋白DAB389(Gly4Ser)2-αMSH。用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组蛋白,用结晶紫法检测重组蛋白对几种癌细胞和正常细胞的毒性作用。结果:构建了含有His.Tag重组表达质粒pET28a-DAB389(Gly4Ser)2-αMSH;SDS-PAGE表明,重组蛋白相对分子质量为45.32×103,其表达量占菌体蛋白总量的29.2%;Western blot分析显示,重组蛋白能特异地与抗白喉抗体结合;细胞活性检测表明重组蛋白对SP2/0,HeLa,A549,A375这4种癌细胞有明显的杀伤作用,4种癌细胞的IC50值分别是3.138,2.736,7.243和4.672μg.mL-1。结论:成功构建了具有生物学活性的重组蛋白DAB389(Gly4Ser)2-αMSH,为进一步的靶向性药物研究奠定了基础。 展开更多

关键词 DAB389(Gly4Ser)2-αMSH 重组蛋白 表达 特异性细胞毒性

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丙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞功能的研究 被引量：3

5

作者 孙丽杰 于建武 +1 位作者 李树臣 李明荣 《肝脏》 2007年第2期87-90,共4页

目的研究慢性丙型肝炎患者丙型肝炎病毒(HCV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的功能及其与临床疾病状态的关系。方法表达HCV核心蛋白的真核表达质粒pcDNA3.1-core通过Lipofecta-mineTM基因转染法转染HepG2细胞,经G418筛选获得稳定转染HepG... 目的研究慢性丙型肝炎患者丙型肝炎病毒(HCV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的功能及其与临床疾病状态的关系。方法表达HCV核心蛋白的真核表达质粒pcDNA3.1-core通过Lipofecta-mineTM基因转染法转染HepG2细胞,经G418筛选获得稳定转染HepG2细胞(Hep-core),经Western blot证实有HCV核心蛋白表达;分离患者外周血单个核细胞,经体外诱导扩增获得HCV特异性CTL(HCV-CTL),以Hep-Core细胞和HepG2细胞作靶细胞,乳酸脱氢酶释放法检测HCV-CTL活性,用酶联免疫吸附法检测培养上清液中干扰素-γ(IFN-γ)含量,以正常人作为对照。结果慢性丙型肝炎患者组HCV-CTL活性值为(23.9±4.8)%,明显低于对照组(42.6±6.5)%(t=7.22,P=0.011)。高病毒载量组HCV-CTL活性值(18.9±4.8)%,明显低于低病毒载量组的(33.7±3.2)%(t=8.22,P=0.003);基因1型患者HCV-CTL活性值(20.8±2.1)%明显低于基因2或3型的(32.4±2.5)%(t=11.7,P=0.001);ALT升高患者HCV-CTL活性值(29.3±3.1)%与ALT正常患者(25.7±3.4)%相比无统计学差异(t=0.93,P>0.05)。慢性丙型肝炎患者培养上清液中的IFN-γ量(957±241)pg/ml明显低于对照组的(3117±673)pg/ml(t=8.87,P=0.001)。结论慢性丙型肝炎患者HCV-CTL活性降低,CTL的免疫功能低下与病毒水平和基因型相关而与ALT水平无关。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 特异性细胞毒性T淋巴细胞 干扰素-Γ

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中国HIV-1感染者病毒特异性细胞毒性T细胞定量研究 被引量：1

6

作者 赵春惠 徐克沂 +8 位作者 陈新月 吴昊 闫惠平 张永宏 伦文辉 徐小宁 ndrew Mc Michael Sarah Rowland-Jones 董涛 《首都医科大学学报》 CAS 2006年第2期143-146,共4页

目的对8例HIV长期感染不进展(LTNP)及病程进展缓慢(SP)患者的病毒特异性细胞毒性T细胞(CTL)特征进行研究。方法设立队列研究,从中随机选出8例患者(4例LTNPs,4例SP)。通过采用重叠肽技术组建HIV-1B亚型全序列肽段,组建成三维肽库进行ELIS... 目的对8例HIV长期感染不进展(LTNP)及病程进展缓慢(SP)患者的病毒特异性细胞毒性T细胞(CTL)特征进行研究。方法设立队列研究,从中随机选出8例患者(4例LTNPs,4例SP)。通过采用重叠肽技术组建HIV-1B亚型全序列肽段,组建成三维肽库进行ELISPOT分析8例患者的HIV-1特异性细胞免疫反应。结果在大多数患者中存在较强的T细胞反应,特别对HIV-1病毒的pol、gag、nef蛋白的免疫反应比其他蛋白强。结论病毒特异性CTL免疫反应在HIV-1 LTNPs有较强并且很广泛的反应,这对于有效抑制病毒在人体内的生存有可能起到很大的作用,很可能是这些LTNPs及SP病程进展缓慢的主要原因之一。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒 艾滋病 病毒特异性细胞毒性T细胞 HIV-1长期感染不进展者

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EBV特异性细胞毒性T淋巴细胞体外诱导培养及杀伤效果鉴定

7

作者 陈广华 顾斌 +7 位作者 陈峰 王荧 乔曼 刘慧文 冯宇锋 戴丽君 朱子玲 吴德沛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1597-1601,共5页

本研究旨在探讨EB病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(EBV-CTL)体外诱导和扩增培养的方法,并检测其特异性杀伤的效果。采集EBV血清抗体阳性的6例正常供体的外周血单个核细胞(PBMNC),用EBV转化的B淋巴细胞系(BLCL)作为抗原递呈细胞及抗原刺激剂... 本研究旨在探讨EB病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(EBV-CTL)体外诱导和扩增培养的方法,并检测其特异性杀伤的效果。采集EBV血清抗体阳性的6例正常供体的外周血单个核细胞(PBMNC),用EBV转化的B淋巴细胞系(BLCL)作为抗原递呈细胞及抗原刺激剂,经辐照灭活后不断刺激培养自体PBMNC,诱导产生EBV-CTL,并将其扩增培养;采用流式细胞仪鉴定其免疫表型,然后检测不同效靶细胞比例条件下EBV-CTL对自体BLCL(autoBLCL)、自体植物血凝素培养的B淋巴母细胞(PHA-blast)、HLA不合供体的BLCL(alloBLCL)、K562细胞株的杀伤效果。结果表明,6例EBV血清抗体阳性正常供体来源的PBMNC在体外成功筛选并扩增培养了EBV-CTL,扩增效率为PBMNC数的18.6-55.0倍。刺激10次培养后的EBV-CTL对autoBLCL在20∶1、10∶1、5∶1三种效靶细胞比例条件下特异性杀伤效率的平均值分别为59.4%、43.2%、29.0%;对PHA-blast、alloBLCL、K562的非特异性杀伤率在上述三种效靶细胞比例下平均值依次为7.1%、9.4%、10.3%(P<0.05),6.6%、8.3%、8.1%(P<0.05),5.4%、7.3%、6.3%(P<0.05)。结论:EBV-CTL能有效在体外筛选培养并扩增,并能有效杀伤HLA相合的BLCL,可望成为EBV相关性移植后淋巴细胞增殖性疾病的过继免疫治疗的有效方法。 展开更多

关键词 EB病毒 特异性细胞毒性T淋巴细胞 移植后淋巴细胞增殖性疾病

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慢性HBV感染者特异性细胞毒性T淋巴细胞及HLA-A2的变化研究

8

作者 吴玉兰 黄书明 +1 位作者 陈琳 邵建国 《交通医学》 2013年第6期604-606,共3页

目的:探讨慢性HBV感染者特异性细胞毒性T淋巴细胞(specific cytotoxic T lymphocyte,CTL)及人类白细胞抗原-A2(human leucocyte antigen-A2,HLA-A2)的变化,并分析CTL与血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)水平和病毒载... 目的:探讨慢性HBV感染者特异性细胞毒性T淋巴细胞(specific cytotoxic T lymphocyte,CTL)及人类白细胞抗原-A2(human leucocyte antigen-A2,HLA-A2)的变化,并分析CTL与血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)水平和病毒载量的关系,以了解慢性HBV感染者特异性细胞免疫功能的状态。方法:采用HLA-A2限制的HBVcore18-27抗原表位肽五聚体(MHC Pentamers)法结合流式细胞技术,分析CHB组慢性乙型肝炎46例、LC组乙型肝炎肝硬化29例和NC组23例正常对照健康体检者,外周血HBV特异性CTL及HLA-A2的变化,并分析CTL与ALT水平和病毒载量的关系。结果:CHB组、LC组HLA-A2检出率均明显高于NC组;ALT水平和病毒载量与HBV特异性的CTL有一定的关系。结论:采用HLA-A2限制的HBVcore18-27抗原表位肽五聚体(MHC Pentamers)法结合流式细胞技术可以检测到低水平的HBV特异性CTL;HLA-A2是乙型肝炎肝硬化的易感基因之一;ALT水平和病毒载量与HBV特异性CTL有一定的关系。 展开更多

关键词 慢性乙型肝炎 乙型肝炎肝硬化 特异性细胞毒性T淋巴细胞 流式细胞技术 人类白细胞抗原-A2

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人类免疫缺陷病毒感染与特异性细胞毒性T淋巴细胞反应

9

作者 蒋卫民 潘孝彰 康来仪 《国外医学（微生物学分册）》 2002年第6期16-18,23,共4页

特异性细胞毒性T淋巴细胞是一种能直接杀伤病毒及抗细胞内感染的效应细胞。大多数细胞毒性T淋巴细胞为CD8细胞,其反应是控制人类免疫缺陷病毒感染的重要免疫反应,但细胞毒性T淋巴细胞不能完全清除人类免疫缺陷病毒,这与病毒在体内的高... 特异性细胞毒性T淋巴细胞是一种能直接杀伤病毒及抗细胞内感染的效应细胞。大多数细胞毒性T淋巴细胞为CD8细胞,其反应是控制人类免疫缺陷病毒感染的重要免疫反应,但细胞毒性T淋巴细胞不能完全清除人类免疫缺陷病毒,这与病毒在体内的高度变异及病毒攻击人体免疫系统导致免疫功能改变有关。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒感染 特异性细胞毒性T淋巴细胞 病毒载量 CTL 免疫反应

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特异性细胞毒性T淋巴细胞体外检测方法的进展

10

作者 王锦彤 卢贤瑜 《国外医学（微生物学分册）》 2005年第3期17-21,共5页

抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞在免疫反应中起着重要作用,本文就近年来抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞反应的体外检测方法的原理及评价进行综述.

关键词 特异性细胞毒性 T淋巴细胞 体外检测 免疫反应 细胞因子

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脑胶质瘤患者血清黑色素瘤相关抗原-A3特异性细胞毒性T淋巴细胞免疫反应水平及临床意义 被引量：1

11

作者 李俊 孙继程 杜国新 《癌症进展》 2020年第22期2295-2299,共5页

目的探讨脑胶质瘤组织中黑色素瘤相关抗原-A3(MAGE-A3)蛋白表达和甲基化状态,血清中特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫应答及临床意义。方法采用蛋白质印迹(Western blot)法和甲基化特异性聚合酶链反应(MSP-PCR)技术检测56例脑胶质瘤组... 目的探讨脑胶质瘤组织中黑色素瘤相关抗原-A3(MAGE-A3)蛋白表达和甲基化状态,血清中特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫应答及临床意义。方法采用蛋白质印迹(Western blot)法和甲基化特异性聚合酶链反应(MSP-PCR)技术检测56例脑胶质瘤组织和15例正常脑组织中MAGE-A3蛋白表达和基因甲基化状态,采用Gultured酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测患者外周血单个核细胞(PBMC)中MAGE-A3特异性CTL免疫反应,并明确二者之间的关系,以及与患者临床特征的关系。结果56例脑胶质瘤组织中MAGE-A3蛋白的表达量为(2.26±1.09),明显高于15例正常脑组织中的(0.44±0.18)(P﹤0.01)。脑胶质瘤组织中MAGE-A3基因启动子甲基化率为55.36%(31/56),明显低于正常脑组织的100%(15/15)(P﹤0.01)。脑胶质瘤患者血清MAGE-A3特异性CTL免疫应答阳性率为33.93%(19/56),平均反应强度为(2301.70±560.33)SFC/106 PBMC。同一患者脑胶质瘤组织中MAGE-A3基因启动子甲基化状态与MAGE-A3蛋白高表达结果一致性一般(Kappa=0.679,P﹤0.01)。同一患者血清MAGE-A3特异性CTL免疫应答阳性与组织中MAGE-A3蛋白高表达结果一致性一般(Kappa=0.464,P﹤0.01)。脑胶质瘤患者血清中MAGE-A3特异性CTL免疫反应强度与组织中MAGE-A3蛋白表达量呈正相关(r=0.788,P﹤0.01)。不同肿瘤大小及临床分期的脑胶质瘤患者血清MAGE-A3特异性CTL免疫反应频率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论脑胶质瘤组织中MAGE-A3基因启动子区DNA去甲基化导致MAGE-A3蛋白表达量升高,进而刺激机体产生MAGE-A3特异性CTL免疫应答反应,参与肿瘤生长和恶性进展。 展开更多

关键词 黑色素瘤相关抗原-A3 脑胶质瘤 基因甲基化 特异性细胞毒性T淋巴细胞免疫应答 临床特征

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利用经修饰的survivin短肽体外诱导对胃癌细胞系具有限制性杀伤作用的特异性细胞毒性T细胞

12

作者 孙婷 魏立梅 丁刚 《科学技术与工程》 北大核心 2012年第35期9461-9465,共5页

采用一种简单有效的方法体外诱导经修饰的survivin短肽特异性细胞毒性T细胞,并观察其对胃癌细胞的杀伤作用。选取对HLA-A2分子亲和力更高的survivin短肽(96—104,LLLGEFLKL,HLA-A2限制性)以更有效地诱导特异性T细胞。选取正常志愿者外... 采用一种简单有效的方法体外诱导经修饰的survivin短肽特异性细胞毒性T细胞,并观察其对胃癌细胞的杀伤作用。选取对HLA-A2分子亲和力更高的survivin短肽(96—104,LLLGEFLKL,HLA-A2限制性)以更有效地诱导特异性T细胞。选取正常志愿者外周血单核细胞,筛选其中HLA-A2+者,利用HLA-A2/survivin短肽有效诱导特异性细胞毒性T细胞。Pentamer实验检测特异性细胞毒性T细胞比率。Elispot实验检测细胞毒性T细胞IFN-γ分泌能力。选取胃癌细胞系MKN28、SGC7901及KATO Ⅲ,检测其HLA-A2和survivin表达情况。检测特异性细胞毒性T细胞对三种细胞系的杀伤效果。Pentamer实验结果显示,HLA-A2/survivin短肽刺激之前短肽/HLA Pentamer和CD8双阳性细胞仅为0.06%,接受刺激后双阳性细胞增加到27.5%。Elispot实验结果显示HLA-A2/survivin短肽刺激后IFN-γ分泌细胞比率明显强于阴性对照组。PCR结果显示,KATO Ⅲ为HLA-A2+,MKN28和SGC7901为HLA-A2-。Western Blotting结果显示KATO III和SGC7901为survivin阳性,MKN28为survivin阴性。特异性细胞毒性T细胞杀伤结果显示,细胞能有效杀伤KATO III细胞,但对其他两种细胞杀伤效果不明显。p<0.01。经修饰的survivin短肽能够有效诱导特异性细胞毒性T细胞,并对胃癌细胞系有HLA-A2/survivin限制性杀伤。 展开更多

关键词 SURVIVIN 经修饰肽段 HLA-A2 外周血单核细胞 特异性细胞毒性T细胞 胃癌细胞系

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不同化疗药物和特异性细胞对MCF-7细胞系中CD55^(high)亚群杀伤作用的比较 被引量：1

13

作者 杨超 崔志超 +2 位作者 郭庆军 刘运江 王士杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1133-1136,共4页

目的探讨化疗药物、细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)、特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对乳腺癌MCF-7细胞CD55high亚群的杀伤效果。方法用不同血药浓度的化疗药物多西他赛、表阿霉素和氟尿嘧啶杀伤乳腺癌MCF-7细胞;抽取人外周血诱导培养... 目的探讨化疗药物、细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)、特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对乳腺癌MCF-7细胞CD55high亚群的杀伤效果。方法用不同血药浓度的化疗药物多西他赛、表阿霉素和氟尿嘧啶杀伤乳腺癌MCF-7细胞;抽取人外周血诱导培养CIK细胞,杀伤CD55high细胞和CD55low细胞;术中取患者腋下淋巴结体外诱导培养肿瘤特异性CTL,检测CTL对CD55high细胞和CD55low细胞体外杀伤活性,分析化疗药物、CIK细胞、特异性CTL对CD55high亚群细胞的杀伤效果。结果多西他赛、表阿霉素和氟尿嘧啶对CD55high亚群细胞杀伤率明显低于其对MCF-7细胞杀伤率;CIK细胞CD55high亚群细胞杀伤率(42.72±4.36)%;特异性CTL对CD55high、CD55low和MCF-7细胞杀伤率分别为(52.86±4.45)%、(22.41±2.83)%、(21.67±4.15)%,CD55high组明显高于CD55low和MCF-7组细胞的杀伤率(P<0.01)。特异性CTL组与CIK细胞组和多西他赛(0.4μg/mL)组3组比较,有显著性差异(P<0.01)。结论特异性CTL对CD55high细胞具有特异性杀伤效果。 展开更多

关键词 乳腺癌 CD55high细胞 化疗药物 CIK 特异性细胞毒性T淋巴细胞

原文传递

PTD-HBcAg融合蛋白诱导特异性CTL抑制转基因小鼠HBV复制 被引量：2

14

作者 陈小华 潘庆春 +2 位作者 汤正好 余永胜 臧国庆 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第29期2972-2977,共6页

目的:探讨经PTD-HBcAg融合蛋白体内诱导的特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对HBV转基因小鼠病毒的抑制作用.方法:20只HBV转基因小鼠随机分组,融合蛋白PTD-HBcAg及对照蛋白HBcAg经皮下免疫小鼠,每周1次,共3次.流式细胞仪检测脾细胞中胞内细胞... 目的:探讨经PTD-HBcAg融合蛋白体内诱导的特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对HBV转基因小鼠病毒的抑制作用.方法:20只HBV转基因小鼠随机分组,融合蛋白PTD-HBcAg及对照蛋白HBcAg经皮下免疫小鼠,每周1次,共3次.流式细胞仪检测脾细胞中胞内细胞因子水平;微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)水平;荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HBVDNA水平;肝脏HE染色及免疫组织化学方法检测HBsAg表达.结果:PTD-HBcAg融合蛋白免疫转基因小鼠后,能有效上调特异性CTL数量,肝组织中炎性细胞的数量明显增多,同时对小鼠血清中HBsAg及HBVDNA水平有明显的抑制作用.肝组织HBsAg免疫组织化学蛋白平均吸光度分析显示,50μg和100μgPTD-HBcAg融合蛋白组中平均吸光度值与空白组和50μgHBcAg组相比明显降低(127.77±4.92,117.71±5.18vs156.84±4.94,138.70±5.92,均P<0.05),且组间比较差异有统计学意义.结论:PTD-HBcAg融合蛋白免疫HBV转基因小鼠后能增加特异性CTL数量,显著降低血清中HBsAg及HBVDNA水平,同时抑制肝脏中HBsAg的表达,在HBV免疫治疗中具有抗病毒作用. 展开更多

关键词 蛋白转导域-乙肝病毒核心抗原 特异性细胞毒性T淋巴细胞 乙型肝炎病毒 转基因小鼠

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EBV特异性CTL可预防移植术后淋巴细胞增生症

15

作者 曹振环（编译） 《传染病网络动态》 2007年第2期2-3,共2页

据Medscape．com12月7日报道（原载Blood 2006；108：2942—2949），病人在实质性器官移植术后易并发EBV感染，而在活体外试验中发现。

关键词 EBV感染 移植术后 特异性CTL 细胞增生症 特异性细胞毒性 淋巴 预防 实质性器官

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人卵巢癌细胞特异CTL系的免疫学特性初步研究

16

作者 葛海良 马安伦 +2 位作者 王颖 张惠珍 王树军 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期639-641,共3页

目的　探讨人卵巢癌细胞体外刺激、诱导的肿瘤特异细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)对靶细胞的杀伤活性。方法　应用建株的人卵巢癌细胞 (OVA 319) ,在体外定期刺激、诱导肿瘤患者外周血淋巴细胞 ,经微量淋巴细胞毒试验和流式细胞术分别测定扩... 目的　探讨人卵巢癌细胞体外刺激、诱导的肿瘤特异细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)对靶细胞的杀伤活性。方法　应用建株的人卵巢癌细胞 (OVA 319) ,在体外定期刺激、诱导肿瘤患者外周血淋巴细胞 ,经微量淋巴细胞毒试验和流式细胞术分别测定扩增的淋巴细胞组织相容性白细胞抗原 (HLA)I类分子表型和膜表面免疫标志物 ,并通过 4 甲基偶氮唑盐 (MTT)法分析其对肿瘤细胞的杀伤活性。结果　经卵巢癌细胞刺激、诱导 3周后扩增的淋巴细胞主要为T细胞抗原受体 (TCR) α、β及CD8阳性的CTL ,具有明显特异性杀伤肿瘤细胞的作用 ,并发现经OVA 319细胞刺激、诱导后不同个体的卵巢癌患者CTL的杀伤活性与效靶细胞的HLA A、B位点相同数成正比。结论　肿瘤细胞体外激活的CTL具有特异杀伤靶细胞作用 ,提示CTL特异杀伤作用与刺激细胞、靶细胞及本身CTL表型的HLA A。 展开更多

关键词 免疫学特性 卵巢癌 特异性细胞毒性T淋巴细胞系 组织相容性白细胞抗原表型

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细胞毒性T淋巴细胞在乙型肝炎中的作用研究 被引量：1

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作者 杨淑艳 《医学综述》 2007年第23期1773-1775,共3页

乙型肝炎病毒(HBV)感染后,决定病情严重程度及病程转归的一个主要因素是机体的免疫反应能力。由于患者体内抗病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在清除病毒方面发挥重要功能,CTL通过非细胞裂解机制控制HBV感染,本文就CTL在乙型肝炎中作用... 乙型肝炎病毒(HBV)感染后,决定病情严重程度及病程转归的一个主要因素是机体的免疫反应能力。由于患者体内抗病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在清除病毒方面发挥重要功能,CTL通过非细胞裂解机制控制HBV感染,本文就CTL在乙型肝炎中作用,针对HBV的主要组织相容性复合体Ⅰ类分子的CTL反应特异性,CTL的细胞效应机制以及慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL反应低下的原因等几方面的研究近况进行了综述。 展开更多

关键词 乙型肝炎 乙型肝炎病毒 特异性细胞毒性T淋巴细胞 穿孔素

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巨细胞病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞治疗造血干细胞移植后难治复发性巨细胞病毒感染的临床分析 被引量：12

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作者 徐郑丽 黄晓军 +11 位作者 孙于谦 王峰蓉 闫晨华 张晓辉 韩伟 陈育红 王景枝 陈欢 王昱 张圆圆 刘开彦 许兰平 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期101-105,共5页

目的 探讨体外扩增的巨细胞病毒（CMV）特异性细胞毒性T淋巴细胞（CMV-CTL）在难治复发性巨细胞病毒感染患者中的疗效及安全性.方法 给予28例难治复发性CMV感染患者输注CMV-CTL,其中19例患者CMV-CTL来自造血干细胞移植原供者,9例来自第... 目的 探讨体外扩增的巨细胞病毒（CMV）特异性细胞毒性T淋巴细胞（CMV-CTL）在难治复发性巨细胞病毒感染患者中的疗效及安全性.方法 给予28例难治复发性CMV感染患者输注CMV-CTL,其中19例患者CMV-CTL来自造血干细胞移植原供者,9例来自第三方供者.第1疗程输注1～2次,观察疗效和副作用;第1疗程完全缓解（CR）后复发的患者给予第2疗程治疗,输注1～2次.结果 21例CMV血症患者和7例CMV病患者接受CMV-CTL治疗,首次输注CTL中位治疗时间为移植后76（39 ～321）d,CTL输注中位细胞数为1.0（0.5～10.0）×10^ 7.第1疗程后,21例CMV血症患者和4例CMV病患者获得CR,CMV血症CR率为100％,CMV病CR率为4/7;获得CR的中位时间分别为首次CTL输注后9（3～23）d和7（4～18）d.6例CMV血症患者和1例CMV病患者CR后复发而给予第2疗程治疗,其中4例CMV血症患者和1例CMV病患者获得CR.5例次患者输注后出现移植物抗宿主病,均为轻中度皮肤受累.随访中6例死于CMV感染,2例死于其他移植后并发症.结论 初步结果显示,体外扩增的CMV-CTL输注治疗难治复发性CMV感染安全有效,但输注方案有待进一步完善. 展开更多

关键词 造血干细胞移植 难治复发性巨细胞病毒感染 巨细胞病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞

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淋巴细胞缺乏状态对白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞体内抗白血病效应的影响 被引量：2

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作者 楼敬伟 杨建民 +3 位作者 陈莉 贾新颜 章卫平 王健民 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期465-468,共4页

目的探讨淋巴细胞缺乏状态对白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体内增殖和抗白血病作用的影响。方法采用6 Gy照射C57BL/6小鼠诱导淋巴细胞缺乏状态,分别经尾静脉注射EGFP+C57BL/6小鼠脾T淋巴细胞和白血病特异性CTL,随后皮下接种1×... 目的探讨淋巴细胞缺乏状态对白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体内增殖和抗白血病作用的影响。方法采用6 Gy照射C57BL/6小鼠诱导淋巴细胞缺乏状态,分别经尾静脉注射EGFP+C57BL/6小鼠脾T淋巴细胞和白血病特异性CTL,随后皮下接种1×106FBL3白血病细胞。用流式细胞仪分析小鼠外周血EGFP+细胞及T淋巴细胞亚群比例,同时观察脾T淋巴细胞和白血病特异性CTL对随后接种的FBL3白血病细胞的杀伤作用。结果在淋巴细胞缺乏状态下输入的脾T淋巴细胞和白血病特异性CTL均可得到有效扩增(第18天输注脾T淋巴细胞组和输注CTL组外周血中EGFP+细胞比例分别为28.81%和42.24%),但脾T淋巴细胞对随后接种的白血病细胞生长无抑制作用,而白血病特异性CTL在淋巴细胞缺乏受体小鼠体内扩增速度更快,扩增的倍数更高,并具有显著增强的抗白血病作用。结论诱导受体淋巴细胞缺乏可显著增强外源性CTL输注的疗效。 展开更多

关键词 淋巴细胞缺乏 白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞 抗白血病效应 治疗 白血病

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检测Epstein-Barr病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞方法的建立及其初步研究 被引量：8

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作者 刘海鹰 周玲 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CSCD 1998年第4期357-360,共4页

目的建立一种非放射性、简便易行的可检测特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞的方法，并且初步应用于Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒的细胞免疫应答。方法用重组的ＥＢＶ－ＬＭＰ１痘苗病毒、ＴＫ＋痘苗病毒和杆状病毒系统表达的ＥＢＶ－ＬＭＰ１蛋... 目的建立一种非放射性、简便易行的可检测特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞的方法，并且初步应用于Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒的细胞免疫应答。方法用重组的ＥＢＶ－ＬＭＰ１痘苗病毒、ＴＫ＋痘苗病毒和杆状病毒系统表达的ＥＢＶ－ＬＭＰ１蛋白分别免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，用Ｐ８１５细胞和乳酸脱氢酶法检测ＥＢ病毒特异性细胞毒性Ｔ细胞的杀伤效应。结果重组ＥＢＶ－ＬＭＰＩ痘苗病毒免疫组原发ＣＴＬ水平和体外诱生的二次ＣＴＬ水平均高于ＴＫ＋痘苗病毒免疫组和正常组；杆状病毒系统表达的ＥＢＶ－ＬＭＰ１蛋白免疫组的ＣＴＬ水平也明显高于正常鼠。结论本法可以较好的反映ＥＢ病毒特异性细胞毒性Ｔ细胞的水平，而且再一次说明ＬＭＰ１基因能够诱发特异性的细胞免疫。 展开更多

关键词 特异性细胞毒性 T淋巴细胞 EB病毒 乳酸脱氢酶

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