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抗死亡受体-5单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量：11
1
作者 白慧玲 赵粤萍 +1 位作者 刘广超 马远方 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期514-516,520,共4页
目的：研制抗DR5单克隆抗体（mAb），并鉴定其特性。方法：以纯化的DR5免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术制备抗DR5mAb。用Ig亚类ELISA试剂盒鉴定抗DR5mAb的亚类。用ELISA法测定sDR5对抗DR5 mAb与DR5结合的阻断作用及流式细胞术检测与Jur... 目的：研制抗DR5单克隆抗体（mAb），并鉴定其特性。方法：以纯化的DR5免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术制备抗DR5mAb。用Ig亚类ELISA试剂盒鉴定抗DR5mAb的亚类。用ELISA法测定sDR5对抗DR5 mAb与DR5结合的阻断作用及流式细胞术检测与Jurkat细胞膜上DR5结合的阻断作用。以鉴定mAb的特异性。用间接ELISA法检测腹水mAb的效价、亲和常数并进行表位分析。结果：获得4株可分泌抗DR5 mAb的的杂交瘤细胞系YM366EC、YM366ED、YM369F5和YM369E6。4株mAb的Ig亚类均为IgG1；腹水mAb效价为1×10^-4-5×10^-6；亲和常数为1×10^9水平，4株mAb可识别2种不同的抗原表位。结论：获得4株抗DR5的mAb，为进一步用于临床诊断和实验研究创造了条件。 展开更多
关键词 DR5 单克隆抗体 特性鉴定 亲和常数
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幽门螺杆菌27 kDa外膜蛋白的基因克隆和特性鉴定 被引量：15
2
作者 庞智 朱红音 +1 位作者 徐蔚文 萧树东 《胃肠病学》 2002年第5期265-269,共5页
背景:幽门螺杆菌（H.Pylori）是全球人群中感染范围最广的致病菌,现己被公认为慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子,并与胃腺癌和胃淋巴瘤的形成密切相关。而H.Pylori疫苗可能成为控制这一全球范围感染的有效措施,其研制和开发已成为目... 背景:幽门螺杆菌（H.Pylori）是全球人群中感染范围最广的致病菌,现己被公认为慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子,并与胃腺癌和胃淋巴瘤的形成密切相关。而H.Pylori疫苗可能成为控制这一全球范围感染的有效措施,其研制和开发已成为目前研究的热点。目的:探索研制H.Pylori疫苗的新途径,对H.Pylori27kDa外膜蛋白（OMP27）进行基因克隆和特性鉴定。方法:培养和收集H.Pylori菌株NCTC11637,采用酚:氯仿抽提和纯化基因组DNA。分别设计引物P1和P2,并以该基因组DNA为模板,以聚合酶链反应（PCR）方法扩增OMP27基因片段。构建pQE30-OMP27重组表达载体时,pQE30质粒载体和纯化的PCR产物均用限制性内切酶Kpnl和HindⅢ双酶切,再用T4 DNA连接酶将双酶切后的目的基因片段OMP27重组于pQE30的相应酶切位点之间,连接产物转化大肠杆菌XL1-Blue。挑选转化克隆、提取质粒,并进行Kpnl和HindⅢ双酶切和PCR方法鉴定,1％琼脂糖凝胶电泳观察酶切和PCR扩增结果,经测序分析确认后,筛选出插入目的基因的阳性克隆,命名为pQE30-OMP27。挑取单个含重组质粒PQE30-OMP27的工程菌（XL1-Blue）阳性克隆,进行培养和IPTG诱导表达后,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和Western blot进行蛋白表达和抗原性鉴定。 展开更多
关键词 PCR 基因表达 幽门螺杆菌27kDa 外膜蛋白 基因克隆 特性鉴定
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抗MDV-1 VP22羧基端单克隆抗体的制备与免疫学特性鉴定 被引量：10
3
作者 宋翠萍 陈鸿军 +1 位作者 秦爱建 张晨飞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期249-252,共4页
目的:制备抗血清I型马立克氏病病毒(MDV-1)VP22的单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性。方法:在原核系统中表达VP22羧基端区域(94-243aa),获得融合表达产物GST-VP22C。将该表达产物切胶免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备抗MDV-1 VP22C的mAb,... 目的:制备抗血清I型马立克氏病病毒(MDV-1)VP22的单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性。方法:在原核系统中表达VP22羧基端区域(94-243aa),获得融合表达产物GST-VP22C。将该表达产物切胶免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备抗MDV-1 VP22C的mAb,并通过ELISA、间接免疫荧光(IFA)、Western blot鉴定其特性。结果:获得了2株可稳定分泌抗MDV-1 VP22C的mAb的杂交瘤细胞,命名为3F7、4E4。IFA鉴定表明,两株mAb均能与感染MDV-1的成纤维细胞反应,其中,3F7 mAb染色呈现MDV空斑,而4E4mAb呈现整个单层的细胞核荧光。ELISA和Western blot分析表明,3F7能与杆状病毒表达的VP22反应,4E4不具备该特性。对3F7 mAb进一步鉴定,确定了该mAb针对的具体位置在94-193aa处,是蛋白转导域的预测位置。结论:成功地制备了抗MDV-1 VP22C的mAb,为深入研究VP22蛋白的转导功能提供了有用的试剂。 展开更多
关键词 马立克氏病病毒 VP22羧基端 单克隆抗体 特性鉴定
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日本血吸虫(中国大陆株)信号蛋白14-3-3在原核细胞的高效融合表达和特性鉴定 被引量：22
4
作者 李德发 沈继龙 +4 位作者 祖莹 汪学龙 王维 郭泽坤 余龙 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期50-53,共4页
目的　构建重组质粒pET2 8a -Sj14 - 3- 3,并在大肠杆菌中表达 ,检测表达产物的免疫活性。 方法　用亚克隆技术把Sj14 - 3- 3基因克隆至 pET2 8aT7启动子下游 ,转化大肠杆菌DH5α和BL2 1感受态细胞 ,经IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE和Western... 目的　构建重组质粒pET2 8a -Sj14 - 3- 3,并在大肠杆菌中表达 ,检测表达产物的免疫活性。 方法　用亚克隆技术把Sj14 - 3- 3基因克隆至 pET2 8aT7启动子下游 ,转化大肠杆菌DH5α和BL2 1感受态细胞 ,经IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE和Westernblot分析。结果　获得pET2 8a -Sj14 - 3- 3重组表达载体 ,SDS -PAGE和Westernblot显示Sj14 - 3- 3基因在 pET2 8a中表达的融合蛋白约为 32 4kDa ,与天然 14 - 3- 3蛋白具有相同的免疫活性。 结论　日本血吸虫信号蛋白14 - 3- 3在原核细胞中得以高效表达 ,表达产物具有免疫活性 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 14-3-3蛋白质 原核细胞 融合表达 特性鉴定 信号转导 免疫保护
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抗肠出血性大肠杆菌O157:H7 EspA单克隆抗体的制备及其特性鉴定 被引量：5
5
作者 余抒 罗萍 +2 位作者 陈洪章 李海侠 毛旭虎 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期657-659,共3页
目的:制备抗肠出血性大肠杆菌O157:H7EspA单克隆抗体(mAb)。方法:以重组EspA蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术并且联合间接ELISA筛选只针对EspA的杂交瘤细胞株。以Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类,ELISA、Western blot... 目的:制备抗肠出血性大肠杆菌O157:H7EspA单克隆抗体(mAb)。方法:以重组EspA蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术并且联合间接ELISA筛选只针对EspA的杂交瘤细胞株。以Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类,ELISA、Western blot及免疫荧光技术鉴定抗体的免疫学特性。结果:获得3株稳定分泌抗EspA杂交瘤细胞的mAb,Ig亚型分别为IgG1κ型、IgG2aκ型、IgG2bκ型。Western blot和免疫荧光分析表明,3株杂交瘤细胞制备的mAb腹水都能特异地结合重组EspA蛋白和识别O157:H7的EspA成分。结论:成功地制备了抗肠出血性大肠杆菌O157:H7EspA的mAb,并证明了该mAb的生物学活性,为深入研究肠出血性大肠杆菌O157:H7的致病机制提供新的手段。 展开更多
关键词 EspA 单克隆抗体 特性鉴定
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抗瓜类细菌性果斑病菌单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量：4
6
作者 曾海娟 王广彬 +6 位作者 郭慧琴 邱实 李建武 翟绪昭 丁承超 宋春美 刘箐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第23期228-232,共5页
以瓜类细菌性果斑病菌燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)野生型菌株SD01免疫BALB/c小鼠,间接酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法筛选获得4株稳定分泌抗SD01菌株的单克隆杂交瘤细胞株6F... 以瓜类细菌性果斑病菌燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)野生型菌株SD01免疫BALB/c小鼠,间接酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法筛选获得4株稳定分泌抗SD01菌株的单克隆杂交瘤细胞株6F、6D、7E、4F,腹水抗体效价分别为1∶102 400、1∶102 400、1∶25 600、1∶51 200。采用饱和硫酸铵沉淀及Protein-G亲和层析法纯化腹水,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)显示纯化后的单克隆抗体(m Ab)纯度较高,纯化后单克隆抗体(2 mg/m L)效价分别为1∶12 800、1∶6 400、1∶3 200、1∶6 400,亚型鉴定结果表明4种单克隆抗体均为Ig G2 a。间接ELISA结果表明,4种单克隆抗体对8种果斑病菌结合能力不同:6F可以结合6种,6D、4F可以结合8种,7E可以结合5种。与3种非Aac近源种植物病原菌交叉反应情况为:6F、4F与2种非Aac近源种植物病原菌存在交叉反应,6D、7E与3种非Aac近源种植物病原菌均无交叉反应。 展开更多
关键词 细菌性果斑病菌 单克隆抗体 制备 特性鉴定
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抗HCV HVR1模拟合成肽单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量：3
7
作者 孙杰 戚扬 +5 位作者 迟淑萍 由莉越 李瑞生 刘佳 朱雷 程云 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期542-544,共3页
目的:制备抗-HCV高变区1(HVR1)合成肽单克隆抗体(mAb),并对其特性进行鉴定。方法:以固相合成的HCV HVR1合成肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联后,免疫8周龄的BALB/c小鼠。采用杂交瘤技术,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,制备抗-HCV HVR1 ... 目的:制备抗-HCV高变区1(HVR1)合成肽单克隆抗体(mAb),并对其特性进行鉴定。方法:以固相合成的HCV HVR1合成肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联后,免疫8周龄的BALB/c小鼠。采用杂交瘤技术,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,制备抗-HCV HVR1 mAb。经HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化后,用相关的试剂盒鉴定小鼠mAb的Ig亚类;经中和抑制后用ELISA法检测mAb的特异性;用间接ELISA法检测mAb腹水的效价及相对亲和常数。结果:获得1株可分泌抗-HCV HVR1合成肽特异性mAb的杂交瘤细胞1A9G9F11。该株mAb的Ig亚类为IgG3;腹水效价为3.125×10-5;相对亲和常数为1.0×106L/mol。该株mAb与HBsAg、HBeAg、HBcAg、HAAg、牛血清白蛋白、酪蛋白和胸腺5肽均无交叉反应,与HCV HVR1合成肽-牛血清白蛋白出现特异性反应。结论:成功地建立了1株可分泌抗-HCV HVR1 mAb的杂交瘤细胞1A9G9F11,为进一步的实验研究提供了重要的制剂。 展开更多
关键词 HCVHVR1 合成肽 单克隆抗体 特性鉴定
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重组人血管生长素及其单克隆抗体的特性鉴定 被引量：3
8
作者 张宏斌 江悦华 +3 位作者 王捷 武婕 杨太成 吴锦银 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期277-279,共3页
目的鉴定自制重组人血管生长素(rhANG)及其单克隆抗体(mAb)。方法采用凝胶扫描法分析rhANG的纯度;ELISA等方法检测抗rhANGmAb的特异性,鸡胚绒毛尿囊膜实验检测rhANG及其mAb的生物学活性,并与商品化标准品的免疫结合性进行对比研究。结果... 目的鉴定自制重组人血管生长素(rhANG)及其单克隆抗体(mAb)。方法采用凝胶扫描法分析rhANG的纯度;ELISA等方法检测抗rhANGmAb的特异性,鸡胚绒毛尿囊膜实验检测rhANG及其mAb的生物学活性,并与商品化标准品的免疫结合性进行对比研究。结果rhANG的纯度达96%,具有促进血管生长的生物学活性;抗ANGmAb具有很好的特异性和抑制血管生长的活性;而且二者较标准品均具有良好的免疫结合活性。结论该rhANG及其mAb可用于进一步的实验和临床应用研究。 展开更多
关键词 重组人血管生长素 单克隆抗体 特性鉴定
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废水特性鉴定的批量OUR法试验研究 被引量：10
9
作者 黄勇 李勇 《上海环境科学》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 2001年第7期322-325,共4页
对活性污泥法过程模型化应用的重要课题-废水特性鉴定进行了理论和试验研究,提出利用批量反应器OUR测定,进行废水有机组分鉴定试验的数据分析方法,并对取自两个城市污水处理厂的初沉后污水进行了测定。结果表明,应用批量OUR方法能够对... 对活性污泥法过程模型化应用的重要课题-废水特性鉴定进行了理论和试验研究,提出利用批量反应器OUR测定,进行废水有机组分鉴定试验的数据分析方法,并对取自两个城市污水处理厂的初沉后污水进行了测定。结果表明,应用批量OUR方法能够对废水中的可生物降解的有机组分,直接进行试验测定和估值;初始OUR控制技术有助于产生适宜的OUR动态响应,以方便和较为精确地进行数据分析处理。利用试验测定结果作为模型输入,比较模型模拟和实测的OUR动态,得到了较好的吻合。 展开更多
关键词 活性污泥法 耗氧速率 OUR 废水监测 数学模型 废水特性鉴定
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抗人层黏连蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量：5
10
作者 姚敏捷 黄汉朝 攸连秀 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期84-85,共2页
目的:制备抗人层黏连蛋白(laminin,LN)单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:以人LN免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗人的mAb;同时采用间接ELISA法柃测mAb的腹水效价及mAb的相对亲和力;采用ELISA法鉴定mAb的Ig亚类、进行表位分析及特... 目的:制备抗人层黏连蛋白(laminin,LN)单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:以人LN免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗人的mAb;同时采用间接ELISA法柃测mAb的腹水效价及mAb的相对亲和力;采用ELISA法鉴定mAb的Ig亚类、进行表位分析及特异性鉴定。结果:获得4株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞2A3、2C6、3G7和4H2,其腹水mAb 的效价为3.6 × 104～2.1×106;4株mAb的Ig亚类为IgG1,轻链均属κ型;相对亲和力2C6在1012以上,2A3、3G7和4H2在106以上;其中2株与1个表位结合,另2株与另外的1个表位结合。结论:成功地制备出抗人LN的mAb,为进一步研究LN在一些疾病中的作用提供了工具。 展开更多
关键词 抗人层黏连蛋白单克隆抗体 制备 特性鉴定
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抗志贺样毒素Ⅱ型变异体单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量：2
11
作者 杨健美 高崧 +4 位作者 林矫矫 刘金明 陈兆国 傅志强 刘秀梵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期807-808,共2页
志贺样毒素Ⅱ变异体(SLT-Ⅱe)是猪水肿病的主要致病因子之一,为了制备SLT-Ⅱe单克隆抗体(mAb),我们从TB1菌中用多粘菌素诱导提取了SLT-Ⅱe蛋白,并且用硫酸铵盐析沉淀法对该蛋白进行了提纯,以提纯蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤细胞技术... 志贺样毒素Ⅱ变异体(SLT-Ⅱe)是猪水肿病的主要致病因子之一,为了制备SLT-Ⅱe单克隆抗体(mAb),我们从TB1菌中用多粘菌素诱导提取了SLT-Ⅱe蛋白,并且用硫酸铵盐析沉淀法对该蛋白进行了提纯,以提纯蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤细胞技术制备mAb。细胞融合后,培养上清经间接ELISA检测,共得到3株阳性杂交瘤细胞2E11、2H9和4F3,ELISA效价分别为1∶213、1∶213和1∶28,3株杂交瘤细胞培养上清分泌的mAb在Westernblot试验中均与提纯的毒素蛋白反应,在Vero细胞中和试验中均能够中和毒素对Vero细胞的毒性作用,从而为临床分离株SLT-Ⅱe产生的免疫学检测方法奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 SLT—Ⅱe 单克隆抗体 特性鉴定
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链霉素金标单克隆抗体快速检测试纸的研制及其特性鉴定 被引量：2
12
作者 刘庆堂 职爱民 +4 位作者 邓瑞广 杨艳艳 杨继飞 柴书军 张改平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期85-89,共5页
建立了分泌抗链霉素单克隆抗体(STRmAb)杂交瘤细胞株并生产了STRmAb,采用胶体金免疫层析试验(GICA)技术成功研制出STR残留快速检测试纸(STR-Strip),并对其性能进行了鉴定。结果显示,目测检测限为12.5μg/kg;与氯霉素等药物无交叉反应;... 建立了分泌抗链霉素单克隆抗体(STRmAb)杂交瘤细胞株并生产了STRmAb,采用胶体金免疫层析试验(GICA)技术成功研制出STR残留快速检测试纸(STR-Strip),并对其性能进行了鉴定。结果显示,目测检测限为12.5μg/kg;与氯霉素等药物无交叉反应;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%。研制的快速检测试纸可以在10min内显示结果,具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合STR残留的现场快速检测。 展开更多
关键词 链霉素 金标快速检测试纸 单克隆抗体 特性鉴定
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抗吗啡疫苗抗体的制备及其特性鉴定 被引量：2
13
作者 马丽霞 周起 +1 位作者 郑海波 李生斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期368-370,共3页
目的制备高效价的抗吗啡疫苗的抗体,并对其特性进行鉴定。方法将人工合成的6-琥珀酰吗啡(M-6-S)与BSA在pH9.0碳酸盐缓冲液中交联成M-6-S-BSA。经凝胶柱过滤和硫酸铵法纯化后,用两种不同方案免疫BALB/c小鼠和SD大鼠,用ELISA法和中和抑制... 目的制备高效价的抗吗啡疫苗的抗体,并对其特性进行鉴定。方法将人工合成的6-琥珀酰吗啡(M-6-S)与BSA在pH9.0碳酸盐缓冲液中交联成M-6-S-BSA。经凝胶柱过滤和硫酸铵法纯化后,用两种不同方案免疫BALB/c小鼠和SD大鼠,用ELISA法和中和抑制试验分别测定抗体的滴度和进行特异性鉴定;用辐射热甩尾(TF)反射试验检测M-6-S-BSA疫苗的免疫效果。结果用合成的M-6-S-BSA疫苗连续免疫小鼠8次,所获抗血清的效价可达1∶200000,大鼠免疫4次后抗血清的效价超过1∶20000。中和抑制试验表明,抗M-6-S抗体对吗啡和与吗啡有共同母环结构的6-单乙酰吗啡、海洛因及可待因具有较高的特异性。免疫大鼠腹腔注射2mg/kg的吗啡后,其甩尾(TF)反射受到明显抑制,最大效应百分率(%MPE)减少了74.7%,TF潜伏期回到基线水平的时间明显快于对照组。结论成功地制备M-6-S-BSA疫苗,用其免疫小鼠和大鼠均可产生高滴度和特异性抗吗啡抗体。该抗体可明显减低大鼠对吗啡的抗伤害感受,为进一步研究吗啡疫苗抗体对抗吗啡的成瘾作用奠定了基础。 展开更多
关键词 吗啡疫苗 抗体制备 特性鉴定
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猪链球菌2型广西分离株的生物学特性鉴定 被引量：3
14
作者 陈泽祥 禤雄标 +3 位作者 郑列丰 谢永平 许力干 潘艳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期21-23,共3页
关键词 猪链球菌2型 广西分离株 特性鉴定 生物学 致病性试验 凝集试验 2型猪链球菌 断奶仔猪
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紫肉甘薯新品种‘莆紫薯3号’选育及特性鉴定 被引量：2
15
作者 崔纪超 余金姜 +2 位作者 中奕 钟玉扬 郑建扬 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第8期1482-1487,共6页
莆紫薯3号是以日清1号和台引2号为亲本,经杂交选育而成的紫肉甘薯新品种,2005年通过国家甘薯新品种鉴定(鉴定编号:国品鉴甘薯2015016)。对莆紫薯3号的形态特征、品质、抗病性、生产力和产量形成的生理特点等进行了研究,结果表明:莆紫薯... 莆紫薯3号是以日清1号和台引2号为亲本,经杂交选育而成的紫肉甘薯新品种,2005年通过国家甘薯新品种鉴定(鉴定编号:国品鉴甘薯2015016)。对莆紫薯3号的形态特征、品质、抗病性、生产力和产量形成的生理特点等进行了研究,结果表明:莆紫薯3号地上部长势平稳,茎叶不易早衰,生育期应保持在150 d以上;鲜薯和薯干产量分别比对照宁紫薯1号增产7.51%和14.35%;薯块干率27.73%,比对照高1.88%;食味评分75.4分(对照为70分),优于对照;薯块粗蛋白和可溶性糖高于对照,还原糖低于对照;中抗蔓割病,中感薯瘟Ⅰ型,感薯瘟Ⅱ型。 展开更多
关键词 紫肉甘薯 莆紫薯3号 选育 特性鉴定
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抗人IgG和抗人IgM单克隆抗体的特性鉴定及应用 被引量：3
16
作者 封青 郭春艳 +3 位作者 王珍 李研 梁导艳 胡军 《生物技术通讯》 CAS 2018年第4期511-515,共5页
目的:制备特异性高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,并应用于临床血清学检测试剂盒,为其提供优质的二抗。方法:以人Ig G和Ig M为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体;经体内诱生法制备... 目的:制备特异性高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,并应用于临床血清学检测试剂盒,为其提供优质的二抗。方法:以人Ig G和Ig M为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体;经体内诱生法制备腹水并纯化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹进行交叉筛选和特异性鉴定,并对筛选出的单抗进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,再与市售的检测病原微生物抗体试剂盒中对应的HRP标记的二抗(抗人Ig G和抗人Ig M)做对比分析。结果:筛选到2株可稳定分泌抗人Ig G单抗和2株抗人Ig M单抗,经交叉反应、Western印迹及对比实验分析,证明这4株单抗效价高、特异性好,比临床试剂盒中的酶标二抗特异性强、敏感度高。结论:获得4株特异性强、敏感度高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,可为各种病原微生物血清学的检测提供二抗试剂,具有良好的应用价值。 展开更多
关键词 人IGG 人IgM 单克隆抗体 特性鉴定 应用
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抗白念珠菌芽管单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量：1
17
作者 孙仁美 宋秋荷 +2 位作者 唐玮 王鲁 叶庆佾 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期350-352,共3页
目的制备抗白念珠菌芽管的单克隆抗体mAb03.2C1-C2,并对其特性进行分析,以探讨其应用于实验室检测的可行性。方法利用杂交瘤技术制备分泌抗白念珠菌芽管胞壁外膜抗原mAb的杂交瘤细胞株,对mAb的Ig亚类进行鉴定。用间接免疫荧光(IIF)法对... 目的制备抗白念珠菌芽管的单克隆抗体mAb03.2C1-C2,并对其特性进行分析,以探讨其应用于实验室检测的可行性。方法利用杂交瘤技术制备分泌抗白念珠菌芽管胞壁外膜抗原mAb的杂交瘤细胞株,对mAb的Ig亚类进行鉴定。用间接免疫荧光(IIF)法对mAb的抗体活性及特异性进行测定。在白念珠菌芽管形成条件下,加入mAb,观察其对白念珠菌芽管诱导的抑制及白念珠菌对上皮细胞、内皮细胞黏附的抑制。复苏冻存的杂交瘤细胞株,分析其持续分泌mAb的能力。结果获得1株mAb03.2C1-C2,其Ig亚类为IgG1。该mAb仅与白念珠菌芽管特异性结合,并能显著降低白念珠菌芽管的生成率以及在芽管形成条件下对上皮细胞、内皮细胞的黏附,其抑制作用与该mAb的浓度呈正比。结论制备的mAb03.2C1-C2抗体效价高,在体外能抑制白念珠菌芽管的形成,降低白念珠菌的侵袭力。而且其对白念珠菌芽管具有高度的特异性,可用于白念珠菌和都柏林念珠菌的快速鉴别。 展开更多
关键词 白念珠菌 芽管 单克隆抗体 特性鉴定
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H9N2亚型禽流感病毒上海分离株生物学特性鉴定 被引量：2
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作者 刘健 葛菲菲 +3 位作者 鞠厚斌 张维谊 杨德全 周锦萍 《中国家禽》 北大核心 2011年第21期55-56,共2页
本研究采用HA试验、HI试验、EID50试验及抗原差异R值的测定比较分析了上海地区2002-2008年间分离的7株H9N2亚型禽流感病毒（AIV）的抗原性，探讨H9N2亚型AIV上海分离株的抗原性变化和进化关系，为流感疫苗株的合理选择、流感疫情的扑灭... 本研究采用HA试验、HI试验、EID50试验及抗原差异R值的测定比较分析了上海地区2002-2008年间分离的7株H9N2亚型禽流感病毒（AIV）的抗原性，探讨H9N2亚型AIV上海分离株的抗原性变化和进化关系，为流感疫苗株的合理选择、流感疫情的扑灭提供理论上的指导。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 上海地区 分离株 特性鉴定 生物学 HA试验 EID50 抗原性
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抗豌豆白蛋白1b单克隆抗体的制备与特性鉴定 被引量：1
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作者 王建和 顿新鹏 +2 位作者 曲丽娜 杨唐斌 陈正望 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期208-210,共3页
关键词 豌豆白蛋白 单克隆抗体 纯化 特性鉴定
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抗人白细胞单克隆抗体的特异性及其特性鉴定 被引量：1
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作者 杨斌 何杨 +3 位作者 赵益明 沈文红 李佩霞 阮长耿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期158-160,共3页
目的制备抗人白细胞单克隆抗体（ｍＡｂ），并对其识别抗原及组织的特异性进行鉴定。方法采用分离的人全白细胞悬液免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０细胞常规融合，用间接ＥＬＩＳＡ筛选ｍＡｂ，流式细胞仪及免疫组化染色Ｓ... 目的制备抗人白细胞单克隆抗体（ｍＡｂ），并对其识别抗原及组织的特异性进行鉴定。方法采用分离的人全白细胞悬液免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与Ｓｐ２／０细胞常规融合，用间接ＥＬＩＳＡ筛选ｍＡｂ，流式细胞仪及免疫组化染色ＳＰ法鉴定其组织特异性。　结果成功地制备１株抗人白细胞　ｍＡｂ，命名为ＳＺ－１０５。ＥＬＩＳＡ法测定其腹水效价为１×１０－５。琼脂糖双扩散鉴定为ＩｇＧ１类。流式细胞仪间接免疫荧光技术及免疫组化ＳＰ法测定表明，ｍＡｂ　ＳＺ－１０５可选择性地与外周血液的粒细胞、单核细胞和淋巴细胞呈强阳性反应，而与红细胞及血小板不出现反应。该ｍＡｂ还可与正常人骨髓的白细胞前体起反应。另外，在肝、肺、脾、胸腺及淋巴结正常组织中的巨噬细胞表面，也有ＳＺ－１０５抗原表达。ＳＺ－１０５抗原经亲和层析纯化，再经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ　和Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ证实，ｍＡｂ　ＳＺ－１０５识别的抗原是相对分子质量（Ｍｒ）为７５　０００左右的单链蛋白多肽。结论　获得１株具有高度免疫学活性和组织特异性的抗人白细胞ｍＡｂ　ＳＺ－１０５，其对研究白细胞的分化、免疫功能，以及隐匿性急、慢性炎症疾病的放免显像诊断都具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 抗人白细胞单克隆抗体 特异性 特性鉴定 免疫组织化学
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