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犀牛源性成分PCR检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
邵建宏
赵福振
+4 位作者
罗宝正
薄清如
沙才华
廖秀云
徐海聂
《野生动物学报》
北大核心
2016年第4期316-320,共5页
为了对犀牛源性成分进行有效鉴定,根据犀科(Rhinocerotidae)动物线粒体DNA(mitochondrial DNA)序列,使用分子生物学软件Oligo 7.0设计了特异性引物,用来建立PCR检测犀牛源性成分的方法。结果显示,建立的PCR方法可以对犀牛阳性样品进行扩...
为了对犀牛源性成分进行有效鉴定,根据犀科(Rhinocerotidae)动物线粒体DNA(mitochondrial DNA)序列,使用分子生物学软件Oligo 7.0设计了特异性引物,用来建立PCR检测犀牛源性成分的方法。结果显示,建立的PCR方法可以对犀牛阳性样品进行扩增,凝胶电泳呈现特异性条带。方法特异性好,13份其他物种的样品均为阴性结果。方法灵敏度较高,可检测到100拷贝重组质粒DNA模板。对5份送检样品检测发现2份犀牛样品,与测序结果一致。结果表明,新建立的方法可应用于样品中犀牛源性成分的检测。
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关键词
犀牛源性成分
PCR
检测
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职称材料
基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术
2
作者
王瑛
张冲
+4 位作者
蔡一村
王鑫杰
林颖峥
冯之航
潘良文
《野生动物学报》
北大核心
2023年第4期798-806,共9页
野生犀牛(Rhinocerotidae)种群的生存正面临极大威胁,包括栖息地减少、碎片化及偷猎等,在对打击犀牛角等非法贸易的努力中,物种的特异性检测至关重要,为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定,将酶促重组等温扩增(enzymatic recombina...
野生犀牛(Rhinocerotidae)种群的生存正面临极大威胁,包括栖息地减少、碎片化及偷猎等,在对打击犀牛角等非法贸易的努力中,物种的特异性检测至关重要,为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定,将酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条(lateral flow dipstick,LFD)技术相结合,研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法。结果表明:该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸,与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应,最低检测下限可达100拷贝/孔,具有较好的特异性和灵敏度。该方法可以在36.5~40.0℃条件下,27~30 min完成特异性识别,无需高规格的实验室环境和精密仪器,从而提供更快、更准确和更灵敏的检测方案。
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关键词
犀牛源性成分
CRISPR/Cas12a
酶促重组等温扩增
侧向流试纸条
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职称材料
题名
犀牛源性成分PCR检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
邵建宏
赵福振
罗宝正
薄清如
沙才华
廖秀云
徐海聂
机构
珠海出入境检验检疫局
出处
《野生动物学报》
北大核心
2016年第4期316-320,共5页
基金
国家质检总局科技项目(项目编号2014IK234)资助
文摘
为了对犀牛源性成分进行有效鉴定,根据犀科(Rhinocerotidae)动物线粒体DNA(mitochondrial DNA)序列,使用分子生物学软件Oligo 7.0设计了特异性引物,用来建立PCR检测犀牛源性成分的方法。结果显示,建立的PCR方法可以对犀牛阳性样品进行扩增,凝胶电泳呈现特异性条带。方法特异性好,13份其他物种的样品均为阴性结果。方法灵敏度较高,可检测到100拷贝重组质粒DNA模板。对5份送检样品检测发现2份犀牛样品,与测序结果一致。结果表明,新建立的方法可应用于样品中犀牛源性成分的检测。
关键词
犀牛源性成分
PCR
检测
Keywords
Rhinoceros-derived ingredients
PCR
Detecting
分类号
Q953.5 [生物学—动物学]
下载PDF
职称材料
题名
基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术
2
作者
王瑛
张冲
蔡一村
王鑫杰
林颖峥
冯之航
潘良文
机构
上海科技大学免疫化学研究所
昆明海关技术中心
上海海关动植物与食品检验检疫技术中心
岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心
出处
《野生动物学报》
北大核心
2023年第4期798-806,共9页
基金
上海市2021年度“科技创新行动计划”技术标准项目(21DZ2208100)
上海市2021年度“科技创新行动计划”农业科技领域项目(21N31900400)。
文摘
野生犀牛(Rhinocerotidae)种群的生存正面临极大威胁,包括栖息地减少、碎片化及偷猎等,在对打击犀牛角等非法贸易的努力中,物种的特异性检测至关重要,为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定,将酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条(lateral flow dipstick,LFD)技术相结合,研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法。结果表明:该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸,与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应,最低检测下限可达100拷贝/孔,具有较好的特异性和灵敏度。该方法可以在36.5~40.0℃条件下,27~30 min完成特异性识别,无需高规格的实验室环境和精密仪器,从而提供更快、更准确和更灵敏的检测方案。
关键词
犀牛源性成分
CRISPR/Cas12a
酶促重组等温扩增
侧向流试纸条
Keywords
Rhinoceros-derived ingredients
CRISPR/Cas12a
Enzymatic recombinase amplification(ERA)
Lateral flow dipstick(LFD)
分类号
Q953 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
犀牛源性成分PCR检测方法的建立
邵建宏
赵福振
罗宝正
薄清如
沙才华
廖秀云
徐海聂
《野生动物学报》
北大核心
2016
1
下载PDF
职称材料
2
基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术
王瑛
张冲
蔡一村
王鑫杰
林颖峥
冯之航
潘良文
《野生动物学报》
北大核心
2023
0
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