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猪传染性胃肠炎病毒RT-CPA检测方法构建及初步应用
1
作者 赵子惠 陈伯祥 +3 位作者 王佳 成伟伟 杨明 李元新 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期65-71,共7页
为开发一种猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)RT-CPA快速且准确的检测方法。本试验根据TGEV S基因的D序列,设计了3对引物,使用构建的重组质粒作为标准阳性对照,通过优化筛选条件并应用可视化核酸试纸条,成... 为开发一种猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)RT-CPA快速且准确的检测方法。本试验根据TGEV S基因的D序列,设计了3对引物,使用构建的重组质粒作为标准阳性对照,通过优化筛选条件并应用可视化核酸试纸条,成功建立了一种一步法TGEV RT-CPA检测方法。本实验筛选最优条件为:Mg^(2+)浓度1.0 mmol/L,dNTP浓度0.8 mmol/L,Betaine浓度1.0 mol/L,BstDNA聚合酶浓度8.0 U,反应温度63℃,反应时间60 min,AMV逆转录酶5 U。本研究的扩增产物通过凝胶电泳显示出梯形条带,证明了其对TGEV的特异性检测和重复性良好,灵敏度高达10拷贝/μL。初步应用显示,该方法与TGEV抗原快速检测试剂盒的符合率超过90%,显示了高灵敏度。TGEV RT-CPA方法免去了RNA提取和cDNA合成的步骤,能够完成一步检测,且该方法不需要特殊仪器,适用于现场快速检测TGEV,为快速诊断和防控猪传染性胃肠炎提供了新的技术选择。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 RT-CPA S基因 检测方法
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猪传染性胃肠炎病毒S基因RAA检测方法的建立与初步应用
2
作者 吕林丹 牟豪 +5 位作者 胡霞 刘明妮 李绍梅 李星 宋振辉 杨柳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3590-3599,共10页
本研究旨在建立一种基于猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)S基因便捷、高效和特异的由重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase-aid amplification,RAA)检测方法。通过基因组序列比对,选择TGEV S基... 本研究旨在建立一种基于猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)S基因便捷、高效和特异的由重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase-aid amplification,RAA)检测方法。通过基因组序列比对,选择TGEV S基因中特定片段为检测靶标,构建重组质粒pUC57-S,设计并筛选RAA引物和探针;建立RAA检测方法;评价该方法灵敏度、特异性和重复性;运用该方法检测腹泻临床样品,与荧光定量PCR方法比较检测结果的符合率。结果确定最佳引物对F2/R1和探针PF2;该方法在40℃恒温条件下,30 min即可完成反应;荧光型RAA法最低检出限可达1.34×10^(1)copies·μL^(-1);与猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪呼吸道冠状病毒等常见猪源病毒核酸无交叉反应;采用该方法检测107份临床样本,阳性率为5.61%(6/107),与荧光定量PCR法相比较,检测结果一致。本研究成功建立了一种灵敏、特异、可视化的RAA检测方法,可摆脱对昂贵设备、专业人员和检测技术的依赖,为临床检测TGEV提供良好的技术基础。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 基础型RAA 荧光型RAA 可视化检测
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DEAD-box解旋酶21对猪传染性胃肠炎病毒复制的调控作用
3
作者 谢立兰 尹杰 +1 位作者 黄冬蛾 李么明 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期215-222,共8页
旨在探究DEAD-box解旋酶21(DDX21)对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)复制的调控作用。首先通过蛋白免疫印迹(Western Blot)分析了TGEV感染对DDX21表达的影响;进一步构建了猪DDX21真核表达质粒以及建立稳定敲低DDX21的PK-15细胞系,运用荧光定量... 旨在探究DEAD-box解旋酶21(DDX21)对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)复制的调控作用。首先通过蛋白免疫印迹(Western Blot)分析了TGEV感染对DDX21表达的影响;进一步构建了猪DDX21真核表达质粒以及建立稳定敲低DDX21的PK-15细胞系,运用荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹、间接免疫荧光(IFA)和半数细胞培养物感染量(TCID 50)探究外源过表达DDX21及敲低DDX21对TGEV体外复制的调控作用;构建一系列DDX21截短突变体真核表达质粒,鉴定了DDX21调控TGEV增殖的关键功能域。Western Blot分析显示,在TGEV WH-1株感染早期,PK-15细胞内源性DDX21蛋白的表达水平显著上调;RT-qPCR、Western Blot、IFA和TCID 50试验显示,超表达DDX21可以显著提高TGEV N基因的mRNA水平、N蛋白的表达及病毒滴度,且呈剂量依赖性,其601-784 aa区域是其影响TGEV复制的关键;与阴性对照相比,在相应DDX21敲低细胞系中TGEV的增殖显著被抑制,而回补试验逆转了DDX21敲低细胞系中TGEV的滴度。该研究首次揭示了猪DDX21对TGEV增殖的促进作用并鉴定了其调控TGEV复制的关键结构域,为今后研究DDX21蛋白的功能及TGEV的致病机理提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 DEAD-box解旋酶21 宿主蛋白 病毒复制
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抗猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒卵黄抗体的制备与应用
4
作者 陈亮 张蕾 +7 位作者 李丹 苗艳 兰世捷 冯万宇 沈思思 刘博超 朱中华 姚爽 《畜牧业环境》 2024年第9期116-117,共2页
本研究以猪传染性胃肠炎-猪流行性腹泻二联灭活苗免疫蛋鸡,制备出高免卵黄抗体,通过琼扩试验检测抗体效价。当效价达到1:32时,收集卵黄液采用硫酸铵法提纯卵黄抗体。临床试验表明,治疗组的平均病死率比对照组低41.1%,证实本试验制备的... 本研究以猪传染性胃肠炎-猪流行性腹泻二联灭活苗免疫蛋鸡,制备出高免卵黄抗体,通过琼扩试验检测抗体效价。当效价达到1:32时,收集卵黄液采用硫酸铵法提纯卵黄抗体。临床试验表明,治疗组的平均病死率比对照组低41.1%,证实本试验制备的高免卵黄抗体治疗效果显著。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 卵黄抗体
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猪传染性胃肠炎病毒分子检测方法研究进展
5
作者 申秋平 黄子惠 +2 位作者 王冉 刘晓明 庄林林 《中国猪业》 2024年第5期56-67,共12页
猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒引起的一种高度接触性肠道传染病,给全球养猪业造成了重大损失。精准检测传染性胃肠炎病毒对科学防控猪传染性胃肠炎具有重要的理论及现实意义。鉴于此,作者综述了近10年来猪传染性胃肠炎病毒分子... 猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒引起的一种高度接触性肠道传染病,给全球养猪业造成了重大损失。精准检测传染性胃肠炎病毒对科学防控猪传染性胃肠炎具有重要的理论及现实意义。鉴于此,作者综述了近10年来猪传染性胃肠炎病毒分子检测方法的研究进展,主要包括免疫学检测技术(酶联免疫吸附试验、免疫荧光方法、免疫酶组织化学法、免疫传感器系统)、基于逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的检测技术(常规RT-PCR、巢式RT-PCR、多重RT-PCR、荧光RT-PCR、多重荧光RT-PCR、纳米PCR)、核酸等温扩增技术(环介导等温扩增、重组酶聚合酶扩增、重组酶介导核酸等温扩增、恒温隔绝式RT-PCR)、芯片检测技术(液相芯片检测方法、多重液相芯片方法、cDNA芯片)等。此外,对这些方法的优缺点和传染性胃肠炎病毒分子检测方法未来发展方向进行了展望,以期为猪传染性胃肠炎的早期诊断和科学防控提供参考依据。 展开更多
关键词 猪 传染性胃肠炎 病毒 免疫学 逆转录聚合酶 链式反应 等温扩增技术 芯片技术
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微载体生物反应器培养猪传染性胃肠炎病毒最佳收获时间的研究
6
作者 叶晓慧 《福建畜牧兽医》 2024年第5期32-34,共3页
本试验旨在探讨使用微载体生物反应器培养猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的效果,对比不同时间段培养出的抗原效价,从而确定TGEV培养的最佳收获时间,提升抗原效价,为最终生产出高质量、品质稳定的TGEV活... 本试验旨在探讨使用微载体生物反应器培养猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的效果,对比不同时间段培养出的抗原效价,从而确定TGEV培养的最佳收获时间,提升抗原效价,为最终生产出高质量、品质稳定的TGEV活疫苗奠定基础。在生物反应器细胞上罐时每次接入细胞量达到1.2×10~9个,按相同的条件进行培养。当微载体上的细胞长至单层致密时,进行细胞接毒,接毒后4 h开始取样,接着每隔2 h留样,18 h后每隔1 h取样1次,直到载体上细胞总脱落面积达80%~85%结束取样,检测抗原效价。结果表明:在接毒后20~21 h病毒效价达到峰值,故确定在接毒后20~21 h为病毒最佳收获时间。 展开更多
关键词 微载体生物反应器 猪传染性胃肠炎病毒 最佳收获时间 抗原效价
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猪传染性胃肠炎与流行性腹泻的防控 被引量：2
7
作者 刘世娟 《吉林畜牧兽医》 2024年第2期31-33,共3页
养殖业生产中各种疾病的发生都是比较常见的生产情况,在生猪生产中也是一样的。猪传染性胃肠炎与流行性腹泻发生的情况较多,严重威胁着生猪业的快速发展。1流行病学。1.1病原体。引起猪传染性肠胃炎的病原体是传染性肠胃炎病毒;猪暴发... 养殖业生产中各种疾病的发生都是比较常见的生产情况,在生猪生产中也是一样的。猪传染性胃肠炎与流行性腹泻发生的情况较多,严重威胁着生猪业的快速发展。1流行病学。1.1病原体。引起猪传染性肠胃炎的病原体是传染性肠胃炎病毒;猪暴发流行性腹泻的病原体是猪流行性腹泻病毒。上述两种病毒都属于冠状病毒,并且只有一个血清类型,均对常见的消毒剂敏感,比如乙醚、氯仿等溶剂在自然环境下都能将病毒灭杀。传染性胃肠炎病毒呈圆形、椭圆形或类圆的多边形。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 流行性腹泻 猪流行性腹泻病毒 生猪生产 传染性胃肠炎病毒 传染性肠胃炎 流行病学 养殖业生产
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猪传染性胃肠炎的防制措施 被引量：1
8
作者 吴竞聪 《北方牧业》 2024年第12期37-37,共1页
近年来,养猪场受到环境、管理、卫生、引种等诸多因素的影响,导致各类猪病呈现出高发趋势,传染性胃肠炎就是其中之一。该病具有传染性强、传播速度快、危害性大、致死率高等特征,对猪场乃至养猪业威胁影响甚大。1病原学猪传染性胃肠炎... 近年来,养猪场受到环境、管理、卫生、引种等诸多因素的影响,导致各类猪病呈现出高发趋势,传染性胃肠炎就是其中之一。该病具有传染性强、传播速度快、危害性大、致死率高等特征,对猪场乃至养猪业威胁影响甚大。1病原学猪传染性胃肠炎是冠状病毒属的传染性胃肠炎病毒所引发的疾病,该病毒为单股RNA病毒,有囊膜,形态不一,有的呈多边形,有的呈椭圆形,直径最小约80纳米,最大120纳米。猪传染性胃肠炎病毒主要存在于病猪的病变脏器当中,如:肠系膜淋巴结、十二指肠、空肠等,均可发现有大量病毒。同时,病猪的粪便尿液等排泄物和体液当中也存在诸多病毒。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 防制措施 冠状病毒属 养猪业 RNA病毒 肠系膜淋巴结 传播速度 猪病
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传染性胃肠炎病毒感染PK-15细胞环状RNA表达谱分析
9
作者 杨玺望 杜芸莎 +3 位作者 刘瑞 梅彩秋 李文庭 刘骁 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4450-4464,共15页
【目的】分析传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)感染对猪肾上皮细胞(PK-15)中环状RNA(circRNA)表达的影响以及差异表达circRNA的潜在调控功能。【方法】利用Illumina HiSeq 4000测序平台对PK-15细胞(对照)和T... 【目的】分析传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)感染对猪肾上皮细胞(PK-15)中环状RNA(circRNA)表达的影响以及差异表达circRNA的潜在调控功能。【方法】利用Illumina HiSeq 4000测序平台对PK-15细胞(对照)和TGEV感染的PK-15细胞进行circRNA转录组测序,筛选差异表达circRNA。对差异表达circRNA来源基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,预测TGEV感染相关circRNA-miRNA-mRNA调控网络。随机挑选12种差异表达circRNAs通过实时荧光定量PCR验证其表达水平。【结果】转录组测序中共发现1029种circRNAs。相较于对照PK-15细胞,TGEV感染的PK-15细胞中共发现128种显著差异表达circRNAs,其中70种上调,58种下调。GO功能分析显示,TGEV感染的PK-15细胞中差异表达circRNAs来源基因主要富集在细胞大分子代谢过程和细胞代谢等生物过程;细胞内部分和胞内膜结合细胞器等细胞成分;有机环化合物结合和核酸结合等分子功能中。KEGG通路富集结果显示,TGEV感染的PK-15细胞中差异表达circRNAs来源基因主要富集在肌动蛋白细胞骨架调控、甲型流感、丙型肝炎、cAMP信号通路和mTOR信号通路等方面。circRNA-miRNA-mRNA调控网络显示,TGEV感染的PK-15细胞中存在庞大复杂的circRNA调控网络,多种circRNAs可通过miRNA靶向基因IFNAR1、IFNAR2和NHE3来调节先天免疫和跨膜离子转运,从而影响TGEV感染和症状。实时荧光定量PCR鉴定结果显示,12种差异表达circRNAs表达水平与测序结果基本趋势一致。【结论】TGEV改变了PK-15细胞中circRNA的表达。差异表达circRNA来源基因广泛参与细胞大分子代谢、病毒感染及cAMP信号通路等过程,与先天性免疫和TGEV发病机制相关的多个靶基因IFNAR1、IFNAR2和NHE3可能被circRNA调控。本研究结果揭示了circRNA在TGEV与宿主相互作用中的潜在功能。 展开更多
关键词 环状RNA(circRNA) 传染性胃肠炎病毒(tgev) PK-15细胞 转录组
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猪传染性胃肠炎的综合防治措施
10
作者 孙祎 《吉林畜牧兽医》 2024年第1期49-51,共3页
猪传染性胃肠炎是一种急性胃肠道传染病,是由传染性胃肠炎病毒引起的,典型的临床症状为不同程度的腹泻、呕吐、发热、脱水等。15日龄以内的仔猪发病率和死亡率比较高。无论任何日龄和品种的猪都可发生本病,仔猪感染后病死率较高。10日... 猪传染性胃肠炎是一种急性胃肠道传染病,是由传染性胃肠炎病毒引起的,典型的临床症状为不同程度的腹泻、呕吐、发热、脱水等。15日龄以内的仔猪发病率和死亡率比较高。无论任何日龄和品种的猪都可发生本病,仔猪感染后病死率较高。10日龄以内的哺乳仔猪病死率可达50%以上,成年猪感染本病14d后自动痊愈,很少死亡,但严重影响猪的生长和料肉比增加,给养猪业造成了严重的经济损失。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 仔猪病死率 料肉比 传染性胃肠炎病毒 养猪业 综合防治措施 临床症状 发病率和死亡率
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猪传染性胃肠炎的流行病学特征与综合防控策略
11
作者 张云军 刘明刚 李洪明 《畜牧业环境》 2024年第11期116-117,共2页
猪传染性胃肠炎是一种由猪传染性胃肠炎病毒引起的高度传染性消化道疾病,对猪只的健康和生长性能产生严重影响,并给养猪业带来巨大的经济损失。本文系统分析了猪传染性胃肠炎的病因,包括病毒的分子生物学特性、传播途径和易感因素,同时... 猪传染性胃肠炎是一种由猪传染性胃肠炎病毒引起的高度传染性消化道疾病,对猪只的健康和生长性能产生严重影响,并给养猪业带来巨大的经济损失。本文系统分析了猪传染性胃肠炎的病因,包括病毒的分子生物学特性、传播途径和易感因素,同时讨论了现有的防控措施及其局限性。在此基础上,提出了综合防控策略,包括生物安全管理、疫苗接种、环境控制及营养调控等,旨在为猪场提供科学的防控依据与指导。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 tgev 病因分析 防控 生物安全 疫苗接种
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猪传染性胃肠炎的RT-qPCR检测方法及防治措施
12
作者 王明珠 陈武 《畜牧业环境》 2024年第12期69-70,共2页
猪传染性胃肠炎是一种在仔猪中流行率较高的病毒性接触传染病,发病后常导致大量哺乳仔猪死亡,给养猪场(户)带来严重的经济损失。由于该病传播速度快,如不采取有效防范措施,势必对整个养殖业造成严重危害。因此,需要明确猪传染性胃肠炎... 猪传染性胃肠炎是一种在仔猪中流行率较高的病毒性接触传染病,发病后常导致大量哺乳仔猪死亡,给养猪场(户)带来严重的经济损失。由于该病传播速度快,如不采取有效防范措施,势必对整个养殖业造成严重危害。因此,需要明确猪传染性胃肠炎的流行病学特征,做到科学、有效地识别和诊断,结合临床症状制定针对性治疗方案,确保在短时间内缓解症状,提高治愈率。本研究探讨了猪传染性胃肠炎的RT-qPCR检测与防治措施,希望对广大养猪场(户)有所帮助。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 猪传染性胃肠炎病毒 RT-QPCR 诊断 治疗
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猪传染性胃肠炎的防治
13
作者 刘昊鹏 《现代农村科技》 2024年第1期70-70,共1页
猪传染性胃肠炎是由传染性胃肠炎病毒引起的一种急性肠道传染病。以呕吐、水泻、脱水为特征,被世界动物卫生组织列为B类动物疫病,此病可发于不同年龄阶段的猪群。1发病原因猪传染性肠胃炎病毒是冠状病毒的一种,其形态多样化,存在于猪各... 猪传染性胃肠炎是由传染性胃肠炎病毒引起的一种急性肠道传染病。以呕吐、水泻、脱水为特征,被世界动物卫生组织列为B类动物疫病,此病可发于不同年龄阶段的猪群。1发病原因猪传染性肠胃炎病毒是冠状病毒的一种,其形态多样化,存在于猪各个器官、排泄物以及体液中,其中空肠、十二指肠存量最多。该病毒耐低温,不耐光照,粪便中的病毒在强光下3~5 h即可失去毒性,紫外线光照下半小时可灭活。此病传染渠道有多种,主要通过直接或间接接触经消化道传播。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 急性肠道传染病 世界动物卫生组织 间接接触 动物疫病 传染性胃肠炎病毒 猪传染性肠胃炎 冠状病毒
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猪传染性胃肠炎的诊断与预防措施研究
14
作者 隋鸿园 吕宁 +1 位作者 王飞 廉家琨 《中国畜牧业》 2024年第11期67-68,共2页
在现代养猪业中,猪传染性胃肠炎是一种常见且严重的疾病,对猪只健康和养猪业的经济效益造成了显著影响。由于其高发性和传染性,养殖业者必须采取有效的诊断和预防措施,以确保猪只的健康和养殖场的生产效率。一、病原猪传染性胃肠炎主要... 在现代养猪业中,猪传染性胃肠炎是一种常见且严重的疾病,对猪只健康和养猪业的经济效益造成了显著影响。由于其高发性和传染性,养殖业者必须采取有效的诊断和预防措施,以确保猪只的健康和养殖场的生产效率。一、病原猪传染性胃肠炎主要由病毒感染引起,如猪流行性腹泻病毒和猪流感病毒,这些病毒会对猪的消化系统造成直接破坏,导致胃肠道细胞损伤,从而引发腹泻、脱水和营养不良。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 猪流行性腹泻病毒 猪流感病毒 养殖业者 细胞损伤 养猪业 病毒感染 高发性
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猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻的防治
15
作者 梁德干 《世界热带农业信息》 2024年第4期65-67,共3页
随着经济社会发展,人们的饮食习惯也逐渐发生变化,肉类需求骤增,这在一定程度上促进了养殖业的发展。猪养殖业是养殖业的重要组成部分,可以在满足市场需求的同时,增加经济效益。然而在养殖工作中,常常伴有猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻... 随着经济社会发展,人们的饮食习惯也逐渐发生变化,肉类需求骤增,这在一定程度上促进了养殖业的发展。猪养殖业是养殖业的重要组成部分,可以在满足市场需求的同时,增加经济效益。然而在养殖工作中,常常伴有猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻,这两种疾病是由病毒感染引起的,具有高度的传染性和致死性。猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis,简称TGE)和猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,简称PED)是目前猪场中常见的两种胃肠道疾病,都属于猪病毒性腹泻病。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 猪流行性腹泻 胃肠道疾病 病毒感染 饮食习惯 TGE 猪病毒性腹泻病 增加经济效益
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猪传染性胃肠炎的防制措施
16
作者 王润娥 《北方牧业》 2024年第18期32-32,共1页
传染性胃肠炎是一种常见的消化道传染病,其流行范围广、传染性强,在不同品种、性别和年龄的猪身上都有可能发生,并且发病后死亡率高,对养猪业的发展造成严重影响。1概述猪传染性胃肠炎是由冠状病毒引起的一种高度接触性传染病,该病毒可... 传染性胃肠炎是一种常见的消化道传染病,其流行范围广、传染性强,在不同品种、性别和年龄的猪身上都有可能发生,并且发病后死亡率高,对养猪业的发展造成严重影响。1概述猪传染性胃肠炎是由冠状病毒引起的一种高度接触性传染病,该病毒可通过多种方式进行传播,如:粪-口、口-口或鼻传播;动物、器具、衣物等传播;被污染的饲料、饮水等传播。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 接触性传染病 防制措施 消化道传染病 养猪业 死亡率高 冠状病毒 传染性
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猪传染性胃肠炎的诊断与防制措施
17
作者 裴莉媛 贾雅平 《北方牧业》 2024年第4期28-28,共1页
在生猪养殖的过程中,往往会产生各种疫病,猪传染性胃肠炎作为常见的一种病症,主要是由冠状病毒科的猪传染性胃肠炎病毒引起的一种急性、高度接触性的肠道传染病,冬、春季节是猪传染性胃肠炎的高发季节。该病于1945年在美国首次发现,并于... 在生猪养殖的过程中,往往会产生各种疫病,猪传染性胃肠炎作为常见的一种病症,主要是由冠状病毒科的猪传染性胃肠炎病毒引起的一种急性、高度接触性的肠道传染病,冬、春季节是猪传染性胃肠炎的高发季节。该病于1945年在美国首次发现,并于1956年在我国发生,近年来呈上升趋势。同时,与猪流行性腹泻的混合感染率也在逐年上升。猪传染性胃肠炎的传播不仅降低了养殖户的经济收益,同时阻碍了当地养猪业的健康稳定发展。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 猪流行性腹泻 冠状病毒科 养猪业 肠道传染病 生猪养殖 诊断与防制 混合感染率
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猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白的原核表达与纯化 被引量：1
18
作者 刘之睿 黄嘉瑶 +4 位作者 苏荣 陈濛濛 彭春婷 唐青海 唐斯萍 《湖南畜牧兽医》 2023年第5期30-36,共7页
为制备高致病性的TGEV毒株重组S蛋白,试验将重组质粒pET28a-TGEV-S2、pET28a-TGEV-S3,转化至E.coli BL21(DE3)表达菌株,设置不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时长对其进行表达条件的优化,并使用纯化试剂盒将其纯化,采用SDS-PAGE和Western... 为制备高致病性的TGEV毒株重组S蛋白,试验将重组质粒pET28a-TGEV-S2、pET28a-TGEV-S3,转化至E.coli BL21(DE3)表达菌株,设置不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时长对其进行表达条件的优化,并使用纯化试剂盒将其纯化,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果表明,重组TGEV毒株S蛋白的分子量分别约为28 kDa、30 kDa,在不同诱导条件下均以包涵体形式存在,在28℃条件下以终浓度为1 mmoL·L^(-1)IPTG诱导4 h表达量达到最高。结果表明:试验成功制备了TGEV重组S蛋白,为TGEV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗、检测试剂的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 原核表达 蛋白鉴定 纯化
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猪传染性胃肠炎病毒微胶囊疫苗的制备及其免疫效果评价 被引量：3
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作者 秦梓椋 陈少俊 +7 位作者 何鑫淼 王文涛 夏继桥 冯艳忠 奈子达 王超 刘娣 姜新鹏 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3790-3798,共9页
【目的】制备猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus, TGEV)灭活病毒包被的微胶囊,并评价其对新生仔猪口服黏膜免疫效果,以预防TGEV引起严重腹泻和造成经济损失。【方法】采用一步法以海藻酸钠和壳聚糖为微胶囊壁材,... 【目的】制备猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus, TGEV)灭活病毒包被的微胶囊,并评价其对新生仔猪口服黏膜免疫效果,以预防TGEV引起严重腹泻和造成经济损失。【方法】采用一步法以海藻酸钠和壳聚糖为微胶囊壁材,以灭活的TGEV为抗原制备TGEV微胶囊疫苗。以包封率、蛋白载量、体外释放速率为微胶囊质量评价指标,分别从成囊材料的配比及不同盐水溶液对微胶囊性能的影响方面对TGEV微胶囊的制备进行筛选,并评价TGEV微胶囊在不同环境的释放速率和室温储存耐受性。最后进行免疫学分析,对仔猪进行口服免疫,测定各项免疫指标,开展抗体效价检测和病毒中和试验。【结果】筛选出的制备微胶囊的最佳工艺条件为:海藻酸钠浓度1.5%,壳聚糖浓度1.2%,氯化钙浓度3.5%,灭活病毒抗原加入量为1~2 mL,在此工艺条件下制备的TGEV微胶囊在PBS和盐水溶液中第3天释放率均超过50%;第18天,释放率分别达到97%和88%。常温放置5个月最低释放率仍保持在80%以上。口服免疫仔猪,微胶囊高、低剂量组粪便样品中IgA抗体的D490 nm值分别为0.97和1.49,IgG的抗体的D490 nm值分别为1.03和1.75。病毒中和试验中,微胶囊高、低剂量组抗体IgG的病毒50%中和效价分别为1∶512和1∶256;微胶囊高、低剂量组抗体IgA的病毒50%中和效价分别为1∶128和1∶64。【结论】海藻酸钠-壳聚糖微胶囊不仅具有在肠道中释放灭活的TGEV抗原的缓释效果,且对于疫苗免疫具有佐剂辅助效果,可增加适应性黏膜免疫应答中的抗体效价,在肠道中释放灭活的TGEV可有效刺激黏膜和全身免疫反应。 展开更多
关键词 传染性胃肠炎病毒(tgev) 微胶囊 海藻酸钠 壳聚糖 黏膜免疫
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猪肠道组织RIG-I的表达及其在猪传染性胃肠炎病毒致病机制中作用的初步研究 被引量：4
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作者 王文哲 李亮 +2 位作者 何豪杰 薛美 冯力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期161-168,共8页
为探究天然免疫分子维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)在猪肠道组织中的表达情况,评价其在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)致病机制中的作用。本研究经原核表达重组RIG-I蛋白(rRIG-1)并采用SDS-PAGE切胶纯化该蛋白,将其免疫大白兔制备兔RIG-I多克隆抗体... 为探究天然免疫分子维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-I)在猪肠道组织中的表达情况,评价其在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)致病机制中的作用。本研究经原核表达重组RIG-I蛋白(rRIG-1)并采用SDS-PAGE切胶纯化该蛋白,将其免疫大白兔制备兔RIG-I多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价。结果显示获得了效价可达1∶64000的兔RIG-I多克隆抗体。利用该抗体经western blot检测SPF猪各肠道组织中RIG-I的表达。结果显示,制备的多克隆抗体可与猪各肠道中的RIG-I反应,且RIG-I在SPF猪空肠中的表达量最高。利用该抗体经western blot检测TGEV感染的ST细胞及猪空肠中RIG-I的表达水平。结果显示,TGEV感染后ST细胞中RIG-I的表达水平极显著高于空白对照细胞(P<0.01);与正常SPF猪空肠相比,TGEV感染的SPF猪空肠组织中RIG-I蛋白的表达水平明显提高。表明TGEV感染后能够刺激细胞内源性及感染猪肠道组织中RIG-I蛋白的表达水平。将本研究构建的重组质粒pCAGGS-RIG-I-flag和RIG-I干扰RNA(siRIG-I)分别转染ST细胞,采用western blot鉴定RIG-I的过表达和敲低效果后,再利用TGEV感染,24 h后采用qPCR检测RIG-I对上述ST细胞中IFN-β转录水平的影响;收集细胞上清,采用TCID50方法测定病毒滴度。qPCR及病毒滴度的测定结果显示,与转染空载体的对照组相比,RIG-I过表达的ST细胞中IFN-β的转录水平极显著升高(P<0.001),且细胞上清中的病毒滴度下降约75%;与转染NCsiRNA的对照组相比,敲低RIG-I的ST细胞中IFN-β的转录水平极显著下降(P<0.001),且细胞上清中的病毒滴度升高约4.8倍。表明,TGEV感染细胞中的RIG-I能够促进细胞中IFN-β的转录,提高宿主细胞的抗病毒免疫反应,从而抑制病毒的复制。本研究结果证实RIG-I在介导TGEV诱导宿主细胞产生IFN的过程中发挥重要作用,该结果为深入探究TGEV的致病机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 维甲酸诱导基因I(RIG-I) 多克隆抗体 猪传染性胃肠炎病毒 干扰素Β 致病机制
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