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β-谷甾醇对猪卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响
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作者 蓝昕蕊 赵宝宝 +3 位作者 张碧菡 林晓语 马会明 王勇胜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1629-1637,共9页
旨在探索一种自然植物提取的抗氧化分子——β-谷甾醇(β-sitosterol,SITO)对猪卵母细胞体外成熟效率和早期胚胎体外发育质量的影响。本研究以在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加不同浓度SITO为试验组,不添加SITO(含0.16%DMSO)的培养基... 旨在探索一种自然植物提取的抗氧化分子——β-谷甾醇(β-sitosterol,SITO)对猪卵母细胞体外成熟效率和早期胚胎体外发育质量的影响。本研究以在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加不同浓度SITO为试验组,不添加SITO(含0.16%DMSO)的培养基为对照组,对屠宰场所得猪卵巢中收集到的卵母细胞进行体外培养,试验组浓度分别为10、20、40μmol·L~(-1),不同浓度各重复3次,每组培养卵母细胞150~200枚。培养46 h后,对卵母细胞成熟率进行统计,并收集成熟卵母细胞进行活性氧、细胞凋亡、线粒体膜电位染色以及相关基因的实时荧光定量PCR;对成熟卵母细胞进行孤雌激活,2 d后统计卵裂率,7 d后统计囊胚率,并统计囊胚细胞总数。结果发现,20μmol·L~(-1)SITO处理显著提高了猪卵母细胞的体外成熟率,且促进了孤雌激活后囊胚的形成并增加了囊胚细胞数,降低了卵母细胞中ROS含量,提高了抗氧化应激基因SOD和CAT的表达;同时,SITO降低卵母细胞的凋亡水平,增加抗凋亡基因BCL-2的表达,降低促凋亡基因Caspase 3和BAX的表达。此外,SITO可增强线粒体膜电位(ΔΨm),增加TFAM基因的表达。综上所述,本研究结果表明,在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加20μmol·L^(-1)SITO能够显著促进猪卵母细胞的体外成熟率、提高胚胎的体外发育能力和胚胎质量。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 猪卵母细胞 胚胎发育 ROS 凋亡
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猪卵母细胞冷冻保存技术优化研究进展
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作者 戴建军 李婉君 +1 位作者 蔡绍莉 张德福 《上海畜牧兽医通讯》 2023年第1期1-9,F0002,共10页
目前获得冷冻猪卵母细胞的存活后代仍是一个世界性的难题。实现冷冻猪卵母细胞技术在猪种质资源收集保存和体外胚胎生产中的应用,还需对影响其冷冻保存效率的因素进行优化。本文介绍了猪卵母细胞不同发育阶段特性、冷冻方法、冷冻保护... 目前获得冷冻猪卵母细胞的存活后代仍是一个世界性的难题。实现冷冻猪卵母细胞技术在猪种质资源收集保存和体外胚胎生产中的应用,还需对影响其冷冻保存效率的因素进行优化。本文介绍了猪卵母细胞不同发育阶段特性、冷冻方法、冷冻保护剂等影响冷冻效率的主要因素,综述了降低冷源温度、去脂或降脂处理、稳定细胞骨架、软化透明带、诱导抗性、抗氧化与抗凋亡等技术优化的研究进展,为提高猪卵母细胞冷冻效率及后续解决相关瓶颈问题提供参考。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 冷冻保存 软化透明带 抗氧化 线粒体损伤
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毛喉素对猪卵母细胞降脂及冷冻保护效果研究 被引量:2
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作者 蔡绍莉 徐皆欢 +7 位作者 何孟纤 张德福 孙玲伟 张树山 李婉君 吴彩凤 主性 戴建军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期178-188,共11页
猪卵母细胞脂质含量高被认为是其冷冻效率低下的重要因素之一。本文通过在猪卵母细胞体外成熟过程中添加化学降脂剂毛喉素(forskolin),检测冷冻前后成熟卵母细胞的脂滴含量、脂滴超微结构、线粒体膜电位、活性氧水平、早期凋亡指标、冻... 猪卵母细胞脂质含量高被认为是其冷冻效率低下的重要因素之一。本文通过在猪卵母细胞体外成熟过程中添加化学降脂剂毛喉素(forskolin),检测冷冻前后成熟卵母细胞的脂滴含量、脂滴超微结构、线粒体膜电位、活性氧水平、早期凋亡指标、冻后存活率及发育潜能变化等,研究其对猪卵母细胞降脂和冷冻保护的效果。结果显示,成熟过程中毛喉素处理可部分提高卵母细胞成熟率,但差异不显著(P>0.05)。尼罗红荧光染色显示,毛喉素处理后卵母细胞内脂滴数量及面积在冷冻前后均极显著低于未处理组(P<0.01);超微结构观察发现,经毛喉素处理的卵母细胞中非均质脂滴数量与均质脂滴数量的比例扩大,且比均质脂滴面积更大;冷冻后,卵母细胞中以非均质脂滴为主,脂滴变小变少,分布不均匀,毛喉素处理后非均质与均质间的脂滴数量比例进一步增加。毛喉素处理极显著上调冻后卵母细胞线粒体膜电位(1.04 vs. 0.51,P<0.01),减轻氧化应激,降低早期凋亡率(68.30%vs. 86.03%,P<0.01),从而有效提高了冷冻后卵母细胞的存活率(71.17%vs. 51.47%,P<0.01)和孤雌激活卵裂率(16.63%vs. 8.23%,P<0.05)。本研究表明,在猪卵母细胞体外成熟过程中添加毛喉素可有效降低细胞内脂质含量,并通过降低氧化损伤和改善线粒体功能,达到提高冻后存活率和发育能力的目的。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 冷冻保存 脂质 毛喉素 线粒体功能
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TET去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响
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作者 黎明国 李清春 +14 位作者 陈鑫 卢世豪 何凡 祁梦凡 张化鹏 任玉军 张庆泽 符彬彬 徐梦思 艾子凯 闫坤 冯赟 华再东 黄涛 毕延震 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1907-1917,共11页
【目的】研究TET(ten-eleven translocation)去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响。【方法】将收集的猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)置于不同浓度(0(对照组)、100、200和400μmol/L)Bobcat339抑制剂的体外成熟培养液中培养42 h,测量卵丘扩... 【目的】研究TET(ten-eleven translocation)去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响。【方法】将收集的猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)置于不同浓度(0(对照组)、100、200和400μmol/L)Bobcat339抑制剂的体外成熟培养液中培养42 h,测量卵丘扩展直径,统计成熟率,确定最小有效浓度。在体外成熟培养液中培养27 h后,利用免疫荧光(IF)检测5-甲基胞嘧啶(5mC)与5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)信号强度以及纺锤体组装情况;利用DCFH-DA染料检测卵母细胞活性氧(ROS)水平;利用JC-1染色法检测线粒体膜电位水平(MMP);利用ATP检测试剂检测卵母细胞ATP水平;利用实时荧光定量PCR检测42 h时COCs卵丘扩展相关基因表达水平和27 h时卵母细胞抗氧化相关基因表达水平。【结果】与对照组相比,100、200和400μmol/L组卵丘细胞扩展水平均极显著降低(P<0.01),100、200和400μmol/L组成熟率显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),确定最小有效浓度为100μmol/L,后续试验均用该浓度。IF检测结果显示,与对照组相比,27 h时100μmol/L组卵母细胞中5mC信号强度显著升高(P<0.05),而5hmC信号强度没有显著降低(P>0.05)。与对照组相比,27 h时100μmol/L组卵母细胞纺锤体排列紊乱,组装异常。与对照组相比,ROS水平极显著升高(P<0.01),MMP和ATP水平极显著降低(P<0.01)。与对照组相比,42 h时100μmol/L组COCs中卵丘扩展相关基因透明质酸合成酶2(Has2)表达水平显著降低(P<0.05),穿透素3(Ptx3)基因表达量极显著降低(P<0.01),27 h时100μmol/L组卵母细胞中抗氧化相关基因超氧化物歧化酶1(Sod1)与Sod 2表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】TET去甲基化酶通过清除猪卵母细胞中的5mC,降低ROS水平,提高MMP水平来指导纺锤体正常组装排列,维持COCs的正常扩展,保证猪卵母细胞正常成熟。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 TET去甲基化酶 甲基化 纺锤体 活性氧 线粒体膜电位
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敲低TPX2对猪卵母细胞纺锤体组装及凋亡的影响
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作者 贺依静 李桥 +5 位作者 彭磊 李佳 初亚婕 林其昕 芮荣 剧世强 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期92-98,共7页
[目的]本研究旨在探究Xklp2靶蛋白(TPX2)在猪卵母细胞减数分裂过程中的表达定位及其潜在功能。[方法]采集猪卵丘-卵母细胞复合体(COC)并随机分组后进行体外成熟培养,通过间接免疫荧光染色与蛋白免疫印迹等方法检测TPX2在卵母细胞减数分... [目的]本研究旨在探究Xklp2靶蛋白(TPX2)在猪卵母细胞减数分裂过程中的表达定位及其潜在功能。[方法]采集猪卵丘-卵母细胞复合体(COC)并随机分组后进行体外成熟培养,通过间接免疫荧光染色与蛋白免疫印迹等方法检测TPX2在卵母细胞减数分裂过程中的亚细胞定位与动态表达情况;通过生发泡期(germinal vesicle, GV)显微注射特异性siRNA以敲低TPX2,研究其对卵母细胞减数分裂进程、纺锤体结构以及早期凋亡的影响。[结果]TPX2在第一次减数分裂中期(metaphaseⅠ,MⅠ)表达量显著上升,其亚细胞定位与α-微管蛋白(α-tubulin)的分布特点相似,并主要富集在纺锤体两极。TPX2被敲低后卵母细胞第一极体(PB1)排出率显著下降(P<0.05),且大多数细胞被阻滞在生发泡破裂期(GVBD)和第一次减数分裂后末期(ATⅠ),同时纺锤体结构异常比例显著升高(P<0.05),并伴随染色体排列紊乱。与对照组相比,敲低TPX2后卵母细胞早期凋亡率急剧增加(P<0.05),凋亡相关基因Caspase 3表达量以及Bax/Bcl2值显著升高(P<0.05)。[结论]TPX2与猪卵母细胞减数分裂过程中的纺锤体组装及细胞周期调控密切相关,敲低TPX2引起卵母细胞纺锤体结构异常,并诱导早期细胞凋亡,最终导致卵母细胞成熟失败。 展开更多
关键词 Xklp2靶蛋白(TPX2) 猪卵母细胞 减数分裂 纺锤体组装 凋亡
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N-乙酰半胱氨酸对不同直径卵泡来源猪卵母细胞体外成熟效果的影响
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作者 肖十雨 卢畅 +3 位作者 马娟 王闯 亓美玉 姚玉昌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1046-1057,共12页
旨在在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加N-乙酰半胱氨酸(NAC),揭示NAC对不同直径卵泡来源卵母细胞体外成熟效果的影响,解析其对氧化还原平衡的调控作用。本研究收集猪卵巢上大腔(4~6 mm)、中腔(2~4 mm)、小腔(1~2 mm)卵泡中的卵母细胞,... 旨在在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加N-乙酰半胱氨酸(NAC),揭示NAC对不同直径卵泡来源卵母细胞体外成熟效果的影响,解析其对氧化还原平衡的调控作用。本研究收集猪卵巢上大腔(4~6 mm)、中腔(2~4 mm)、小腔(1~2 mm)卵泡中的卵母细胞,在以上3种卵泡来源猪卵母细胞的体外成熟培养液中,均分别添加0、1、2、4 mmol·L^(-1)浓度的NAC处理,评价卵丘扩展指数、第一极体排出率等成熟指标,检测卵母细胞中ROS水平、谷胱甘肽(GSH)含量和抗氧化基因的表达水平。结果表明,NAC处理对大腔卵泡来源卵母细胞的卵丘扩展指数和ROS水平无显著影响(P>0.05),对大、中腔卵泡来源卵母细胞的第一极体排出率无显著作用(P>0.05);而适量浓度的NAC(2 mmol·L^(-1))处理可显著提高中、小腔卵泡来源卵母细胞的卵丘扩展指数(P<0.05),降低ROS水平(P<0.05),提升小腔卵泡来源卵母细胞的第一极体排出率(P<0.05)。同时,NAC处理对大、中腔卵泡来源卵母细胞中的GSH含量和抗氧化基因SOD、CAT、Prdx2、Prdx6的表达水平无显著影响(P>0.05),而适量浓度的NAC(2 mmol·L^(-1))处理可显著提高小腔卵泡来源卵母细胞中的GSH含量(P<0.05),上调抗氧化基因SOD、CAT的表达水平(P<0.05)。综上所述,适当浓度的NAC(2 mmol·L^(-1))处理可以通过缓解氧化应激提高小腔卵泡来源卵母细胞的体外成熟效果。 展开更多
关键词 N-乙酰半胱氨酸 不同直径卵泡 猪卵母细胞 体外成熟 氧化应激
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钙离子水平对猪卵母细胞体外成熟与早期胚胎发育的影响
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作者 张畅 余思聪 +3 位作者 吴昊 高乐鹏 孙小晴 李所 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期164-167,194,共5页
维持细胞内钙离子(Ca^(2+))稳态对维护卵母细胞成熟及植入前胚胎正常发育至关重要。本实验旨在研究Ca^(2+)水平变化对猪卵母细胞体外成熟发育的影响。收集的猪卵丘卵母细胞复合体(COCs),随机分为3组,即对照组、100 nmol/L毒胡萝卜素(TG... 维持细胞内钙离子(Ca^(2+))稳态对维护卵母细胞成熟及植入前胚胎正常发育至关重要。本实验旨在研究Ca^(2+)水平变化对猪卵母细胞体外成熟发育的影响。收集的猪卵丘卵母细胞复合体(COCs),随机分为3组,即对照组、100 nmol/L毒胡萝卜素(TG)组和100 nmol/L TG+300 nmol/L光溜海绵素C(XeC)组,体外培养,分别统计卵丘扩散情况、体外成熟率、胞内Ca^(2+)水平,随后进行孤雌激活(PA)统计各组卵裂率、囊胚率及细胞总数。结果表明:添加XeC可显著改善由TG引起的猪卵丘细胞扩散不完全,卵母细胞体外成熟率、卵裂率和囊胚率降低,以及细胞数减少等现象,并显著降低由TG诱导的胞内Ca^(2+)水平。综上,胞内Ca^(2+)水平对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 体外成熟 Ca^(2+)水平 胚胎发育
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猪卵母细胞体外成熟过程中添加铜蓝蛋白对成熟率和孤雌胚胎发育能力的影响
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作者 荆焕松 周荣 +5 位作者 罗绿花 麦然标 苏巧云 纪红美 余婉娴 石俊松 《广东畜牧兽医科技》 2023年第6期28-33,共6页
猪卵母细胞的体外培养受氧化应激影响,降低了成熟率及胚胎发育效率。铜蓝蛋白具有抗氧化作用,但其在哺乳动物卵母细胞成熟中的作用,研究甚少。本研究旨在探究新型抗氧化剂铜蓝蛋白对猪卵母细胞体外培养成熟率及孤雌胚胎发育的影响。方法... 猪卵母细胞的体外培养受氧化应激影响,降低了成熟率及胚胎发育效率。铜蓝蛋白具有抗氧化作用,但其在哺乳动物卵母细胞成熟中的作用,研究甚少。本研究旨在探究新型抗氧化剂铜蓝蛋白对猪卵母细胞体外培养成熟率及孤雌胚胎发育的影响。方法:采集猪卵巢并抽取卵丘-卵母细胞复合体体外培养,在成熟培养液中添加不同浓度的铜蓝蛋白(0、1.25、2.5、5.0和10.0μg/mL),统计卵母细胞成熟率,检测卵母细胞内ROS水平。孤雌激活后体外培养至囊胚,统计孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率及囊胚总细胞数。结果:试验表明,猪卵母细胞体外成熟过程中添加2.5μg/mL的铜蓝蛋白可显著提高卵母细胞成熟率并降低了胞质内的ROS含量(P<0.05),显著提高了孤雌胚胎的囊胚率(P<0.05)。结论:在猪卵母细胞体外培养中添加铜蓝蛋白,降低了卵母细胞的氧化应激,促进卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育。 展开更多
关键词 铜蓝蛋白 ROS 体外培养 猪卵母细胞 胚胎发育
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IGF-I、TGF-α、bFGF对猪卵母细胞体外成熟和卵裂的影响 被引量:15
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作者 刘珠果 尚书江 +2 位作者 阎新龙 吴晓洁 邓继先 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期2111-2116,共6页
研究了IGF-I、bFGF、TGF-α3种细胞因子单独或者联合作用对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后卵裂的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,3种细胞因子对卵母细胞的成熟和激活后卵裂呈现双重效应(1)20ng·ml-1的IGF-I... 研究了IGF-I、bFGF、TGF-α3种细胞因子单独或者联合作用对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后卵裂的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,3种细胞因子对卵母细胞的成熟和激活后卵裂呈现双重效应(1)20ng·ml-1的IGF-I的成熟率和卵裂率显著的高于对照组和10、30、40、50、100ng·ml-1组[(85.3±2.11)%,(85.4±2.81)%;(71.1±1.91)%,(62.5±0.98)%;(77.5±2.5)%,(59.1±3.93)%;(61.9±1.72)%,(54.3±3.48)%;(58.6±4.26)%,(53.1±1.23)%;(44.4±5.10)%,(49.8±3.55)%;(33.9±3.48)%,(46.1±3.59)%,P<0.05),当IGF-I的浓度达到100ng·ml-1时,成熟率(33.9±3.48)%和卵裂率(46.1±3.59)%降低,与其它各组相比差异显著(P<0.05)。(2)20ng·ml-1的bFGF的成熟率(85.0±1.70)%和卵裂率(85.0±2.82)%最高,和其它各组相比,差异显著(P<0.05)。(3)15ng·ml-1的TGF-α的成熟率(86.9±0.46)%和卵裂率(86.3±2.01)%最高,和其它各组相比,差异显著(P<0.05)。(4)15ng·ml-1TGF-α和20ng·ml-1bFGF联用组,卵母细胞成熟率和分裂率显著高于20ng·ml-1bFGF和20ng·ml-1IGF-I联合组;15ng·ml-1TGF-α和20ng·ml-1IGF-I联合组;与20ng·ml-1bFGF、20ng·ml-1IGF-I和15ng·ml-1TGF-α三者联用组。[(89.2±1.44)%和(88.8±0.17)%.(75.6±0.98)%和(78.3±1.65)%;(77.2±2.54)%和(80.2±2.26)%;(76.4±1.28)%和(77.4±3.73)%,P<0.05]。 展开更多
关键词 IGF—I BFGF TGF-Α 卵母细胞 体外成熟 胚胎分裂 IGF-I 猪卵母细胞 卵裂率
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Spindle-view系统在猪卵母细胞去核中的应用 被引量:8
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作者 杨宇 戴建军 +4 位作者 张廷宇 吴华莉 陈学进 张德福 马恒东 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1140-1145,共6页
应用Spindle—view对体外成熟培养36、42、44和45h的猪体外成熟卵母细胞减数分裂纺锤体进行去核操作,并与传统去核方法(McGrath—Solter去核法,挤压去核法)相比较,结果表明:①在42~48h之间利用Spindle—view得到的猪卵纺锤体影... 应用Spindle—view对体外成熟培养36、42、44和45h的猪体外成熟卵母细胞减数分裂纺锤体进行去核操作,并与传统去核方法(McGrath—Solter去核法,挤压去核法)相比较,结果表明:①在42~48h之间利用Spindle—view得到的猪卵纺锤体影像与极体的相对位置没有明显的变化;②Spindle—view适合用于猪体外成熟卵母细胞减数分裂纺锤体的观察及去核;去核效率与其他两种方法相比差异极显著(95.5%,42.1%,74.2%,P〈0.01);③纺锤体成像是否清晰可用于猪卵母细胞的质量监控。 展开更多
关键词 Spindle—view 猪卵母细胞 去核 减数分裂纺锤体
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不同洗卵液对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后早期发育的影响 被引量:9
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作者 莫品方 仇恒滨 +3 位作者 何若钢 蓝海恩 黄敏瑞 卢晟盛 《广西农业科学》 CAS CSCD 2007年第5期562-564,共3页
探讨不同洗卵液对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后早期发育的影响,以便开发出简易、经济的洗卵液。结果表明,使用TL-Hepes液、DPBS液、TCM-199()液和TCM-199()液作为洗卵液,对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后的早期发育没有显著影响,说... 探讨不同洗卵液对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后早期发育的影响,以便开发出简易、经济的洗卵液。结果表明,使用TL-Hepes液、DPBS液、TCM-199()液和TCM-199()液作为洗卵液,对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后的早期发育没有显著影响,说明4种洗卵液均可用于猪卵母细胞的洗涤,但DPBS液配制较简易且价格便宜,是最佳的选择。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 体外成熟 体外受精 洗卵液
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促卵泡素与促黄体素对猪卵母细胞体外成熟的影响(英文) 被引量:5
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作者 李晟阳 罗光彬 +4 位作者 张晓华 何丽华 姚汝强 纪英卓 郭建华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第1期63-67,共5页
探讨了促性腺激素(FSH、LH)对猪卵母细胞体外成熟的影响,最终找到了其合理的使用剂量。在成熟液中添加LH浓度分别为1,5,10 IU/mL时,与没有添加FSH与LH的对照组(15.9%)相比,成熟率有显著提高,成熟率分别为49.1%,30.0%,36.3%。LH浓度为1 I... 探讨了促性腺激素(FSH、LH)对猪卵母细胞体外成熟的影响,最终找到了其合理的使用剂量。在成熟液中添加LH浓度分别为1,5,10 IU/mL时,与没有添加FSH与LH的对照组(15.9%)相比,成熟率有显著提高,成熟率分别为49.1%,30.0%,36.3%。LH浓度为1 IU/mL的实验组成熟率最高,显著高于对照组(p<0.05);然后以成熟液中只添加1 IU/mL LH为对照组,实验组分别添加1,5,10 IU/mL FSH。试验结果表明:添加FSH浓度为5和10 IU/mL时其成熟率分别为40.1%,27.6%,低于对照组(49.0%)。添加FSH浓度为1 IU/mL时其成熟率(49.1%)高于对照组(49.0%),但差异不显著。两组试验同时得出,随着LH与FSH添加浓度逐渐增加,成熟率呈下降趋势。通过本试验结果得出,在体外成熟培养猪卵母细胞时,各添加1 IU/mL LH与FSH时,得到最佳的成熟效果。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 体外成熟 FSH LH
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精子不同处理和胰岛素不同浓度对猪卵母细胞胞质内单精子显微受精的影响 被引量:8
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作者 罗龙兴 卢晟盛 +1 位作者 许丹娜 卢克焕 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期669-672,共4页
探讨了分别使用新鲜、冷冻和超声波断尾精子以及在胚胎培养液中分别添加不同浓度胰岛素对猪卵母细胞胞质内单精子显微受精(ICSI)胚胎早期发育的影响。结果:(1)使用冷冻解冻精子与新鲜精子相比对猪卵母细胞ICSI后的卵裂率和囊胚率均无显... 探讨了分别使用新鲜、冷冻和超声波断尾精子以及在胚胎培养液中分别添加不同浓度胰岛素对猪卵母细胞胞质内单精子显微受精(ICSI)胚胎早期发育的影响。结果:(1)使用冷冻解冻精子与新鲜精子相比对猪卵母细胞ICSI后的卵裂率和囊胚率均无显著影响(P>0.05);(2)精子断尾与否对猪卵母细胞ICSI后的分裂率和囊胚率没有显著影响(P>0.05);(3)在胚胎培养液中添加5mg/L胰岛素与对照组相比可显著提高猪ICSI胚胎的囊胚发育率(18.22%vs3.60%,P<0.05)。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 胞质内精子注射 胰岛素
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小檗碱和川芎嗪对猪卵母细胞体外成熟中一氧化氮生成量的影响 被引量:4
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作者 李冬冬 赵菊 +2 位作者 张志刚 沈月娥 高建明 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2008年第5期11-14,共4页
试验以mTCM-199添加抗生素为对照组,以分别添加0.1μg/mL小檗碱(berberine,BR)和0.5μg/mL川芎嗪(ligustrazine,Lig)为试验组,比较各组卵母细胞体外成熟中一氧化氮(NO)生成量和卵母细胞的成熟效果,从而探讨中药单体成分对猪卵母细胞体... 试验以mTCM-199添加抗生素为对照组,以分别添加0.1μg/mL小檗碱(berberine,BR)和0.5μg/mL川芎嗪(ligustrazine,Lig)为试验组,比较各组卵母细胞体外成熟中一氧化氮(NO)生成量和卵母细胞的成熟效果,从而探讨中药单体成分对猪卵母细胞体外成熟过程中NO生成量的影响。结果表明:体外成熟前22 hNO生成量,对照组与Lig组差异极显著(P<0.01)、与BR组差异显著(P<0.05),Lig组与BR组差异显著(P<0.05);体外成熟后22 h NO生成量,对照、Lig及BR三组间均无显著差异(P>0.05),但Lig组的NO生成量少于BR组和对照组;体外成熟培养0~44 h不同组别NO生成量整体呈下降趋势,Lig组与BR组卵母细胞成熟率显著高于对照组(P<0.05)。结果表明卵母细胞体外成熟培养过程中,NO生成量随体外培养时间增加呈递减趋势,中药单体成分BR和Lig对卵母细胞成熟均起到一定的促进作用。低浓度NO代谢量可能对卵母细胞成熟有一定促进作用。 展开更多
关键词 体外成熟 NO 猪卵母细胞 小檗碱 川芎嗪
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猪卵母细胞线粒体分布及线粒体DNA拷贝数变化 被引量:3
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作者 成文敏 霍金龙 +4 位作者 信吉阁 潘伟荣 黄言 魏红江 曾养志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期635-640,共6页
本研究旨在观察猪卵母细胞线粒体分布及线粒体DNA拷贝数变化,以期作为判定哺乳动物卵母细胞胞质成熟的指标,同时也为今后克隆技术的发展和相关基因表达调控的研究提供基础。运用线粒体分子探针标记技术检测体外成熟不同时期卵母细胞中... 本研究旨在观察猪卵母细胞线粒体分布及线粒体DNA拷贝数变化,以期作为判定哺乳动物卵母细胞胞质成熟的指标,同时也为今后克隆技术的发展和相关基因表达调控的研究提供基础。运用线粒体分子探针标记技术检测体外成熟不同时期卵母细胞中线粒体的分布变化,运用实时荧光定量PCR技术检测其线粒体DNA拷贝数的变化趋势,揭示线粒体分布、线粒体DNA拷贝数变化与卵母细胞发育潜能的关系。结果表明,猪卵母细胞成熟前后,线粒体分布由未成熟的周边分布变为成熟后的均匀分布,并且线粒体簇变大,着色变深。卵母细胞成熟0、11、22h的mtDNA拷贝数分别为(2 519.52±940.39)、(3 421.47±345.71)和(9 747.58±1 928.24),他们之间无显著性差异(P>0.05)。卵母细胞成熟33h的mtDNA拷贝数为(39 913.61±1 180.26),显著高于成熟0、11和22h的mtDNA拷贝数(P<0.05)。卵母细胞成熟44h的mtDNA拷贝数为(130 074.30±78 119.45),显著高于成熟33h的mtDNA拷贝数(P<0.05)。由此可见,随着卵母细胞成熟进程的推进,线粒体活性增强,线粒体DNA拷贝数明显增加。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 体外成熟 线粒体分布 线粒体DNA拷贝数.
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套皿法在猪卵母细胞体外成熟培养中的应用 被引量:7
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作者 李俊 田永祥 +2 位作者 曹斌云 谷习文 郑新民 《湖北农业科学》 北大核心 2004年第6期74-76,共3页
试验表明,套皿无矿物油组卵母细胞成熟率与套皿矿物油组、单皿矿物油组差异不显著,单皿无矿物油组没有卵母细胞成熟;将各组成熟的卵母细胞分别进行体外受精,结果套皿无矿物油组卵母细胞的穿卵率、单精入卵率与套皿矿物油组、单皿矿物油... 试验表明,套皿无矿物油组卵母细胞成熟率与套皿矿物油组、单皿矿物油组差异不显著,单皿无矿物油组没有卵母细胞成熟;将各组成熟的卵母细胞分别进行体外受精,结果套皿无矿物油组卵母细胞的穿卵率、单精入卵率与套皿矿物油组、单皿矿物油组差异不显著,但雄原核形成率和卵裂率显著高于套皿矿物油组和单皿矿物油组(P<0.05)。套皿法有利于卵母细胞胞质成熟,促进胚胎生长发育,能够替代传统的单皿矿物油覆盖培养法。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 套皿法 体外成熟 发育能力
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生长激素和胰岛素对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚卵裂的影响 被引量:2
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作者 刘永 王星 +2 位作者 姜午旗 冷义福 罗光彬 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2009年第3期12-15,共4页
本研究探讨了生长激素(STH)和胰岛素对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后卵裂的影响。结果表明:在mNCSU-23液中,添加0.15μg/mLSTH组的成熟率(73.83%)和卵裂率(64.76%)显著高于对照组和添加0.01、0.05、0.1、0.2μg/mLSTH组(P<0.05);添... 本研究探讨了生长激素(STH)和胰岛素对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后卵裂的影响。结果表明:在mNCSU-23液中,添加0.15μg/mLSTH组的成熟率(73.83%)和卵裂率(64.76%)显著高于对照组和添加0.01、0.05、0.1、0.2μg/mLSTH组(P<0.05);添加5μg/mL和8μg/mL胰岛素组的成熟率(66.25%、60.64%)显著高于添加0、0.5、2μg/mL及10μg/mL组(P<0.05);添加5μg/mL胰岛素组的卵裂率(61.63%)显著高于添加0、0.5、2、8、10μg/mL组(P<0.05);最佳的联合添加组为0.15μg/mLSTH+2μg/mL胰岛素,其体外成熟率为79.37%、卵裂率为72.31%。 展开更多
关键词 生长激素 胰岛素 猪卵母细胞 体外成熟 卵裂
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促卵泡素与促黄体素对猪卵母细胞体外成熟的影响 被引量:2
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作者 罗光彬 张晓华 +2 位作者 李东全 朱增娟 袁水桥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2007年第7期41-42,共2页
关键词 卵母细胞体外成熟 猪卵母细胞 促黄体素 促卵泡素 体外成熟培养 卵母细胞成熟 蛋白质激素 促性腺激素
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猪卵母细胞冷冻损伤的研究进展 被引量:2
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作者 李健 胡建宏 +2 位作者 韩增胜 杨海 李青旺 《中国农学通报》 CSCD 2005年第10期21-24,共4页
卵母细胞冷冻保存技术的发展为体外受精、核移植以及转基因动物生产等胚胎工程技术提供了极大的灵活性,同时为家畜保种及珍稀濒危动物的保护提供了新的技术途径。在此,综述了以猪为主的家畜卵母细胞的冷冻保存的原理及冷冻保存对卵母细... 卵母细胞冷冻保存技术的发展为体外受精、核移植以及转基因动物生产等胚胎工程技术提供了极大的灵活性,同时为家畜保种及珍稀濒危动物的保护提供了新的技术途径。在此,综述了以猪为主的家畜卵母细胞的冷冻保存的原理及冷冻保存对卵母细胞超微结构和发育潜力的影响,以期为猪卵母细胞的冷冻保存研究提供一定的理论参考,从而提高猪卵母细胞冷冻后的成活率和体外受精生产效率。 展开更多
关键词 卵母细胞 冷冻原理 超微结构 发育潜力 猪卵母细胞 冷冻损伤 冷冻保存技术 胚胎工程技术 珍稀濒危动物 细胞超微结构 体外受精 动物生产 技术途径
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CB·氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养中的作用 被引量:3
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作者 信吉阁 卿玉波 +3 位作者 成文敏 潘伟荣 魏红江 曾养志 《安徽农业科学》 CAS 2012年第22期11330-11332,共3页
[目的]研究CB、氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养体系中的作用,为优化相关技术体系提供依据。[方法]卵母细胞经体外成熟培养,采用不同孤雌激活方法(Ele.+CB组、CB组、Ele.组、对照组),研究CB在激活中的作用。激活后采用PZM3培养液... [目的]研究CB、氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养体系中的作用,为优化相关技术体系提供依据。[方法]卵母细胞经体外成熟培养,采用不同孤雌激活方法(Ele.+CB组、CB组、Ele.组、对照组),研究CB在激活中的作用。激活后采用PZM3培养液,并去除氨基酸成分,探索氨基酸对体外培养胚胎的作用。[结果]CB+Ele.组的卵裂率显著地高于其他3组(P<0.05),囊胚率为32.7%,囊胚细胞数为61.4,而其他3组均未出现囊胚。电激活(脉冲电压100 V/mm,脉冲时程100μs,脉冲次数1次)联合CB处理,可激活卵母细胞体外发育至囊胚,CB有助于提高卵裂率、囊胚率。添加氨基酸的培养液中的卵母细胞的卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数显著提高(P<0.05),表明氨基酸能提高猪孤雌激活胚胎培养效果。[结论]添加CB、氨基酸在猪卵母细胞孤雌激活及体外培养体系中能提高胚胎的培养效果。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 孤雌激活 体外培养 CB 氨基酸
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