辽宁沈阳株猫泛白细胞减少症病毒VP2基因扩增及生物信息学分析

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作者 刘琪 刘正伟 +4 位作者 梁琳 张利 郝春晖 李玥 赵福庆 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期23-32,共10页

【目的】通过生物信息学方法分析1株2022年辽宁沈阳地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus, FPV)LN3株VP2蛋白的分子特征。【方法】利用FPV胶体金试纸条对临床上表现呕吐、腹泻等症状的患病猫粪便进行检测,提取该病猫粪... 【目的】通过生物信息学方法分析1株2022年辽宁沈阳地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus, FPV)LN3株VP2蛋白的分子特征。【方法】利用FPV胶体金试纸条对临床上表现呕吐、腹泻等症状的患病猫粪便进行检测,提取该病猫粪便的病毒DNA进行FPV VP2基因PCR扩增及测序,使用Seqman软件对序列进行拼接。将所获序列与NCBI数据库中FPV和犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)的VP2基因进行相似性比对及遗传进化分析。使用生物信息学软件对该毒株VP2蛋白进行预测,包括理化性质、亲/疏水性、跨膜区、糖基化位点、亚细胞定位、二级结构、三级结构等。【结果】FPV LN3株VP2基因全长1 755 bp,编码584个氨基酸;与GenBank上登录的15株FPV同属一个大分支,相似性为98.9%~99.7%;与CPV处于不同分支上。生物信息学软件预测显示,FPV LN3株VP2蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构;含有7个潜在N-糖基化位点、86个O-糖基化位点和50个磷酸化位点;VP2蛋白在细胞质、细胞核、线粒体中的可能性分别为43.5%、34.8%和21.7%;VP2蛋白二级结构中无规则卷曲、α-螺旋、延伸链、β-转角分别占61.82%、8.90%、24.32%及4.97%,三级结构预测结果与其一致;VP2蛋白共有20个抗原表位。【结论】VP2是FPV遗传变异的关键基因,FPV LN3株VP2蛋白属于亲水性、非跨膜稳定蛋白,共存在20个抗原表位。试验结果为进一步研究FPV VP2蛋白功能及研发新型疫苗提供理论依据。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 VP2基因 生物信息学 蛋白结构

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猫泛白细胞减少症病毒研究进展 被引量：1

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作者 刘昱欣 李卓宸 +2 位作者 吕爽 吕文雪 赵传芳 《特产研究》 2023年第5期147-153,共7页

猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV),又称为猫瘟病毒、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)或猫传染性肠炎病毒,具有很强的传播性,变异快,分布广,会导致猫科和部分其他科的动物突然发病并且精神沉郁、体温上升、出... 猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV),又称为猫瘟病毒、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)或猫传染性肠炎病毒,具有很强的传播性,变异快,分布广,会导致猫科和部分其他科的动物突然发病并且精神沉郁、体温上升、出血性肠炎、腹泻、呕吐、白细胞显著减少等。各年龄的猫都能感染猫细小病毒,其中幼龄猫最为易感。猫瘟可以发生在各个季节,其中秋冬季节更常见。该病会造成猫养殖行业的严重经济损失。近年来,由于猫细小病毒导致严重疫情的相关报道越来越多,猫细小病毒也越发引起大家的关注。本文从病原学特征、流行病学、临床特征、病理特征、临床检测方法、治疗和预防等方面对FPV进行了综述,以期为猫泛白细胞减少症病毒疫苗的研制提供理论基础。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 病原学 流行病学 检测

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猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定及其结构蛋白VP2可溶性表达的调控

3

作者 刘丽春 徐国伟 +9 位作者 茹毅 李亚军 杨明星 梁超 刘晓飞 张世栋 李建喜 王学智 孙研 周雨霞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期706-714,共9页

为了研究猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的生物学特性,可溶性表达FPV结构蛋白,研发基于VP2的新型亚单位疫苗,采集40份疑似FPV阳性的中华田园猫粪便样本,通过qPCR对样本检测后利用细胞培养、血凝试验、PCR和电镜观察等试验鉴定分离株,并对其... 为了研究猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的生物学特性,可溶性表达FPV结构蛋白,研发基于VP2的新型亚单位疫苗,采集40份疑似FPV阳性的中华田园猫粪便样本,通过qPCR对样本检测后利用细胞培养、血凝试验、PCR和电镜观察等试验鉴定分离株,并对其VP2基因进行同源性比对。同时,构建pET-28a-VP2、pET-28a-SUMO-VP2和pET-22a-SUMO-VP2重组质粒并利用大肠杆菌进行表达。结果显示,成功分离出1株FPV毒株;生物信息学分析表明,该毒株的VP2基因与此前报道的毒株同源性高达99%。蛋白表达结果显示,单独使用SUMO标签对VP2蛋白的可溶性表达影响较低;然而,当带有SUMO标签的重组质粒与4个分子伴侣(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pTf16)分别共表达时,可溶性VP2的表达量可显著提高。该研究可为FPV亚单位疫苗研发提供数据和有效的生物材料。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 中华田园猫 SUMO标签 分子伴侣 亚单位疫苗

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F81细胞无血清悬浮驯化后培养猫泛白细胞减少症病毒的研究

4

作者 张久鑫 邵宝顺 +6 位作者 朱辉 贾浩苒 梁琳 汤新明 崔尚金 梁瑞英 王龙涛 《动物医学进展》 北大核心 2023年第1期48-53,共6页

为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^... 为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^(6)cells/mL时,培养48 h后细胞密度可达到7.02×10^(6)cells/mL。对培养猫泛白细胞减少症病毒工艺进行摸索,确定最佳接毒工艺为同步接毒法,初始接毒细胞密度为1×10^(6)cells/mL、MOI为3.5×10^(-2),培养72 h后收毒,病毒滴度可达到10^(7.25)TCID_(50)/0.1 mL。该方法使用同源细胞系且未添加动物血清,为猫泛白细胞减少症生物制品生产降低了下游生产纯化难度,同时降低了生产成本,可显著提高产品核心竞争力。研究结果可为其他猫用生物制品相关研究提供参考。 展开更多

关键词 F81细胞 细胞驯化 无血清悬浮培养 猫泛白细胞减少症病毒

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猫泛白细胞减少症病毒YB-1株的分离鉴定及其与疫苗株的差异性分析

5

作者 胡春意 薛皓文 +5 位作者 谢佳良 宋彦昊 祝昆儒 马浩原 付兢锋 高旭 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期649-653,共5页

为了解我国吉林省猫泛白细胞减少症病毒(FPV)VP2基因的特征及其与疫苗株的差异,本研究采集吉林省疑似患有猫泛白细胞减少症的猫肛门拭子样品,经PCR检测后将FPV阳性样品接种F81细胞,连续盲传至出现显著细胞病变(CPE),经电镜观察可见直径... 为了解我国吉林省猫泛白细胞减少症病毒(FPV)VP2基因的特征及其与疫苗株的差异,本研究采集吉林省疑似患有猫泛白细胞减少症的猫肛门拭子样品,经PCR检测后将FPV阳性样品接种F81细胞,连续盲传至出现显著细胞病变(CPE),经电镜观察可见直径约20 nm~24 nm的病毒粒子,与FPV形态一致,表明分离出一株FPV,命名为YB-1。经PCR扩增FPV YB-1株VP2全长基因,测序后比对分析并构建进化树,结果显示,该病毒株的VP2蛋白氨基酸序列与GenBank中选取的其他参考株的同源性为96.8%~99.8%;分离株与来自匈牙利的病毒株(933/07,EU360958)处于同一进化分支,与两个疫苗株(EU498681、EU498680)的遗传距离较远。进一步比对该分离株与GenBank中FPV疫苗株的VP2氨基酸序列差异性,发现存在3个氨基酸位点的突变:A^(91)S、I^(232)V、L^(562)V,其中有2个位点A^(91)S、I^(232)V正位于抗原位点结构位置,推测是该病毒株在本地区自然环境、动物宿主内环境中自然选择下逐渐出现的变异,这可能是疫苗造成免疫失败的原因之一。本研究在国内首次对FPV分离株与商品化疫苗株之间的基因差异进行了分析,丰富了国内FPV的资料,为后续FPV疫苗的研发以及风险防控提供了数据支持。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 分离鉴定 序列分析 疫苗

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猫泛白细胞减少症病毒、猫杯状病毒和猫疱疹病毒1型三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

6

作者 陈林文 冀伟 +5 位作者 曹龙龙 王莹 李秋燕 曹胜波 陈清秀 周登元 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1141-1147,1198,共8页

为建立一种能够快速检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫杯状病毒(FCV)和猫疱疹病毒1型(FHV-1)的三重荧光定量RT-PCR方法,本研究根据FPV VP2基因、FCV ORF2基因和FHV-1 TK基因分别设计引物与探针,采用上述引物经PCR分别扩增上述3种病原... 为建立一种能够快速检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫杯状病毒(FCV)和猫疱疹病毒1型(FHV-1)的三重荧光定量RT-PCR方法,本研究根据FPV VP2基因、FCV ORF2基因和FHV-1 TK基因分别设计引物与探针,采用上述引物经PCR分别扩增上述3种病原的目的基因并克隆至pMD18-T载体中,构建重组质粒标准品pMD18-T-FPV、pMD18-T-FCV和pMD18-T-FHV-1,并均经PCR和测序鉴定。将3种重组质粒标准品稀释到同一浓度1×10^(8)拷贝/μL,按体积比1∶1∶1混合后作为模板,采用方阵法优化各反应条件后,建立了检测上述病原的三重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。以FPV、FCV、FHV-1、猫博卡病毒、猫冠状病毒、猫支原体、猫白血病病毒、猫星状病毒的基因组为模板采用本研究建立的方法检测,评估该方法的特异性,结果显示,该方法仅能检测到FPV、FCV、FHV-1,而其他病原的检测结果均为阴性。选取1×10^(0)拷贝/μL~1×10^(6)拷贝/μL的混合质粒标准品和10^(-0.5) TCID_(50)/mL~10^(5.5) TCID_(50)/mL的混合病毒液分别作为模板,采用本研究建立的方法检测,评估该方法检测重组质粒和病毒的敏感性,结果显示,该方法对重组质粒标准品pMD18-T-FPV、pMD18-T-FCV和pMD18-T-FHV-1的检测限均为1.0×10^(1)拷贝/μL,对3种病毒的检测限均约为10^(0.5) TCID_(50)/mL;以1×10^(7)拷贝/μL、1×10^(5)拷贝/μL、1×10^(3)拷贝/μL质粒标准品混合物作为模板分别进行组内和组间的重复性试验,结果显示,组内和组间重复性试验的变异系数(CV)均低于3%。利用建立的该三重荧光定量RT-PCR和常规PCR对81份临床样品(77份猫的眼、鼻、咽、肛混合拭子样品和4份组织病料样品)分别检测,结果显示三重荧光定量RT-PCR检测出47份FPV、13份FCV和13份FHV-1阳性样品,而常规PCR分别检测出39份FPV、9份FCV和6份FHV-1阳性样品,该三重荧光定量RT-PCR与FPV、FCV、FHV-1常规PCR的总符合率分别为90.12%、95.06%、92.59%。本研究建立的三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,为FPV、FCV、FHV-1临床样品的快速鉴别检测提供了有力技术支持。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 猫杯状病毒 猫疱疹病毒1型 三重荧光定量RT-PCR

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虎源猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定 被引量：23

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作者 杨松涛 王立刚 +9 位作者 戈锐 刘丹 邹啸环 王玮 王铁成 周明 冯娜 黄耕 华育平 夏咸柱 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期170-174,共5页

利用细胞培养方法从中国某虎园送检的腹泻虎肠内容物中分离出1株细小病毒(TPV/HT-69),经系统的形态学、理化学、血清学试验、人工感染试验、PCR扩增和VP2基因序列分析,符合猫泛白细胞减少症病毒特征,证明该毒株为猫泛白细胞减少症病毒... 利用细胞培养方法从中国某虎园送检的腹泻虎肠内容物中分离出1株细小病毒(TPV/HT-69),经系统的形态学、理化学、血清学试验、人工感染试验、PCR扩增和VP2基因序列分析,符合猫泛白细胞减少症病毒特征,证明该毒株为猫泛白细胞减少症病毒强毒。 展开更多

关键词 虎 猫泛白细胞减少症病毒 分离鉴定

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一株猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定及其VP2和NS1基因的变异分析 被引量：8

8

作者 刘琪 史利军 +5 位作者 梁琳 张玲玲 袁维峰 梁瑞英 李金祥 崔尚金 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1106-1112,共7页

为分析当前猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)基因组遗传变异情况,对FPLV胶体金试纸条检测结果为阳性的猫粪进行病毒分离,通过血凝、分子生物学等试验对分离株进行鉴定。结果表明:病毒在CRFK细胞上盲传5代后产生明显细胞病变,电镜观察病毒粒... 为分析当前猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)基因组遗传变异情况,对FPLV胶体金试纸条检测结果为阳性的猫粪进行病毒分离,通过血凝、分子生物学等试验对分离株进行鉴定。结果表明:病毒在CRFK细胞上盲传5代后产生明显细胞病变,电镜观察病毒粒子直径约25 nm,分离病毒的血凝效价为1∶256,将分离株命名为FPLV BJ04。基因组扩增结果显示,FPLV BJ04基因组大小为5 118 bp。决定病毒宿主范围和抗原性的VP2蛋白系统进化树分析表明,FPLV BJ04株与2017年意大利分离株KX434462株位于同一分支;分离株的VP2、NS1基因与GenBank收录的FPLV VP2、NS1基因相似性分别为99.1%～99.5%和99.0%～99.5%。动物回归试验中攻毒组猫出现临床症状和病理变化。本研究对分离的FPLV北京流行株的VP2和NS1基因进行遗传变异分析,可为更好地预防和控制FPLV提供基础。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 病毒分离鉴定 序列分析

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虎源猫泛白细胞减少症病毒VP1、Vp2和NS1基因的克隆与序列分析 被引量：5

9

作者 于亚丽 华育平 +3 位作者 曾祥伟 田丽红 夏咸柱 刘丹 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期83-85,共3页

根据Genbank上发表的猫泛白细胞减少症基因序列数据，设计了3对引物，并采用PCR方法对从东北虎粪便中分离出的FPV-HLJ的结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1基因进行了扩增，将各片段克隆至pMD18-T载体，经PCR鉴定后进行了序列测定和分析... 根据Genbank上发表的猫泛白细胞减少症基因序列数据，设计了3对引物，并采用PCR方法对从东北虎粪便中分离出的FPV-HLJ的结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1基因进行了扩增，将各片段克隆至pMD18-T载体，经PCR鉴定后进行了序列测定和分析。结果显示：FPV-HU与GenBank上公布的FPV、CPV和MEV毒株相比，核苷酸序列同源率VP1为98.8％-99.8％，VP2为98.1％-99.4％，NS1为98.6％-99.7％。VP1氨基酸同源率为97.6％-99.2％，VP2、NS1氨基酸同源率与其核苷酸同源率相同。并且VP1、VP2和NS1上分别有4、3和9处氨基酸发生变异。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 VP1 VP2 NS1 基因 克隆 序列分析

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抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定 被引量：4

10

作者 钱建飞 陈溥言 +3 位作者 蔡宝祥 张振兴 凌雯 李银 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期339-342,共4页

用 PEG60 0 0沉淀和蔗糖密度梯度离心从细胞培养物中纯化猫泛白细胞减少症病毒 ( FPV) ,以纯化FPV免疫 BALB/c小鼠 ,运用淋巴细胞杂交瘤技术 ,获得了 4株抗 FPV的特异性单克隆抗体 ( Mc Ab)。其腹水 Mc Ab的 ELISA效价在 1 0 - 4～ 1 0 ... 用 PEG60 0 0沉淀和蔗糖密度梯度离心从细胞培养物中纯化猫泛白细胞减少症病毒 ( FPV) ,以纯化FPV免疫 BALB/c小鼠 ,运用淋巴细胞杂交瘤技术 ,获得了 4株抗 FPV的特异性单克隆抗体 ( Mc Ab)。其腹水 Mc Ab的 ELISA效价在 1 0 - 4～ 1 0 - 5之间 ,其中 1株具有血凝抑制能力。经 ELISA阻断试验及 ELISA交叉反应性试验测定 ,这 4株 Mc Ab可与 FPV、犬细小病毒 ( CPV)和水貂肠炎病毒 ( MEV)呈特异性反应 ,因此可作为检测 FPV、CPV和 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 单克隆抗体 生物学特性

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猫泛白细胞减少症病毒北京株NS1基因克隆与生物信息学分析 被引量：2

11

作者 刘琪 史利军 +3 位作者 袁维峰 梁瑞英 李金祥 崔尚金 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第12期3327-3336,共10页

为分析猫泛白细胞减少症病毒(FPV)北京株(FPV-BJ 05株)NS1基因的分子特征及其编码蛋白的生物学功能,本研究对FPV-BJ 05株NS1基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学软件分析FPV-BJ 05株与GenBank上登录的11株FPV参考株NS1基... 为分析猫泛白细胞减少症病毒(FPV)北京株(FPV-BJ 05株)NS1基因的分子特征及其编码蛋白的生物学功能,本研究对FPV-BJ 05株NS1基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学软件分析FPV-BJ 05株与GenBank上登录的11株FPV参考株NS1基因的同源性,并预测NS1蛋白理化性质、信号肽、跨膜结构、B细胞抗原表位、磷酸化位点、亚细胞定位及蛋白结构与功能、高级结构等。结果显示,NS1基因全长2 007bp,编码668个氨基酸,且与其他FPV分离株NS1基因核苷酸序列同源性为98.8%～99.3%,氨基酸序列同源性为97.9%～98.8%。系统进化树分析结果显示,FPV-BJ 05株NS1蛋白与GenBank上登录的3株FPV参考株处于同一大分支,但由于氨基酸的突变导致其属于独立的一小分支。NS1蛋白既无信号肽也无跨膜结构域,属于非分泌型的疏水性蛋白。B细胞抗原表位预测结果显示,NS1蛋白柔韧性较好,抗原性及表面可及性较高,预测该蛋白含有13个优势抗原位点。修饰结构预测表明,NS1蛋白含有62个潜在磷酸化位点,27个O-糖基化位点和2个N-糖基化位点。亚细胞定位结果显示,NS1蛋白在细胞质和细胞核的概率较高,分别为69.6%和17.4%。NS1蛋白二级结构中α-螺旋、延伸链、无规则卷曲和β-转角分别占39.37%、15.42%、39.37%和5.84%。应用在线软件SWISS-Modle对NS1蛋白进行建模,预测其三级结构,结果发现NS1蛋白主要以α-螺旋为主。本试验结果将为北京地区FPV免疫诊断及核酸疫苗研究提供理论依据。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒(FPV) NS1基因 生物信息学 蛋白结构预测

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虎源猫泛白细胞减少症病毒VP2基因主要抗原表位区的原核表达和蛋白纯化 被引量：2

12

作者 田丽红 华育平 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期97-100,共4页

利用PCR技术从FPV-HLJ株病毒细胞培养物中扩增VP2基因主要抗原表位区片段VP2’。扩增片段克隆至pMD18-T载体,经核苷酸序列测定确认后,亚克隆于pGEX-6p-1原核表达载体,构建pGEX-6p-VP2’重组原核表达质粒。将该质粒转化至表达菌BL21(DE3... 利用PCR技术从FPV-HLJ株病毒细胞培养物中扩增VP2基因主要抗原表位区片段VP2’。扩增片段克隆至pMD18-T载体,经核苷酸序列测定确认后,亚克隆于pGEX-6p-1原核表达载体,构建pGEX-6p-VP2’重组原核表达质粒。将该质粒转化至表达菌BL21(DE3)中用IPTG进行诱导表达。表达蛋白采用切胶法纯化,并用SDS-PAGE和Westernblot检测纯化蛋白纯度和抗原特异性。结果表明,VP2基因全长1200bp,编码400个氨基酸。重组菌可表达相对分子量约为66kD的融合蛋白,包括目的蛋白40kD和GST标签26kD。该蛋白以包涵体形式存在,且GST融合蛋白具有良好抗原特异性。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 VP2基因 抗原表位 原核表达 蛋白纯化 虎

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猫泛白细胞减少症病毒环介导等温扩增检测方法的建立 被引量：3

13

作者 马芹 闫文卓 +5 位作者 周洁 高诚 刘铁龙 赵丽丽 陈洪岩 陆涛峰 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第1期34-38,共5页

目的建立一种快速、简便检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的环介导等温扩增(LAMP)方法。方法针对Genbank中FPV基因组设计了4条LAMP扩增引物,通过优化反应温度和反应时间,确定高效的LAMP扩增条件。结果建立的LAMP方法在65℃水浴条件下反应6... 目的建立一种快速、简便检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的环介导等温扩增(LAMP)方法。方法针对Genbank中FPV基因组设计了4条LAMP扩增引物,通过优化反应温度和反应时间,确定高效的LAMP扩增条件。结果建立的LAMP方法在65℃水浴条件下反应60min可对FPV进行高效扩增,检测限量为5.01×10^2拷贝/μL,比常规PCR检测的敏感性高10倍,且与猫疱疹病毒1型(FHV-1),犬细小病毒(CPV)及犬腺病毒(CAV)均无交叉反应。结论建立的LAMP方法设备要求低、特异性好、灵敏度高,适用于FPV临床样品的快速检测。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒(FPV) 环介导等温扩增(LAMP) 检测方法

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一株猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定 被引量：1

14

作者 刘成倩 李红 +4 位作者 刘惠莉 梁洪宇 孙凤萍 高骏 易建中 《上海农业学报》 2022年第1期77-81,共5页

为分析现阶段猫泛白细胞减少症病毒(FPV)基因组变异情况,采集疑似FPV阳性的猫粪便样品,接种F81细胞进行病毒分离,通过PCR技术、间接免疫荧光试验对分离株进行鉴定。并对分离株全基因组进行分段扩增,克隆决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基... 为分析现阶段猫泛白细胞减少症病毒(FPV)基因组变异情况,采集疑似FPV阳性的猫粪便样品,接种F81细胞进行病毒分离,通过PCR技术、间接免疫荧光试验对分离株进行鉴定。并对分离株全基因组进行分段扩增,克隆决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因,与GenBank中相关的参考毒株序列VP2基因进行同源性比较。结果表明:成功获得1株猫泛白细胞减少症病毒,将其命名为FPV-SH05-2020。遗传分析表明,FPVSH05-2020株与中国MN908257株和MT614366株亲缘关系较近;VP2基因及全基因组与参考毒株的VP2基因及全基因组同源性分别为98.3%—99.9%和94.2%—98.8%。本研究可为更好地预防和控制FPV提供参考。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 病毒分离鉴定 变异分析

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猫泛白细胞减少症病毒的分离与鉴定

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作者 周珍辉 陈万荣 +3 位作者 付少才 周育森 向双云 曹授俊 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期43-44,共2页

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 鉴定 分离 接触性传染病 猫瘟热病毒 猫科动物 FPV 试纸条

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猫泛白细胞减少症病毒VP2基因快速检测方法的建立与应用 被引量：5

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作者 邱杰 温肖会 +3 位作者 翟少伦 吕殿红 宁章勇 魏文康 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2015年第2期21-25,共5页

为了调查猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)在猫群中的流行情况,根据Gen Bank已登录的FPV VP2基因序列设计PCR引物,建立了FPV PCR快速检测方法,并对3004份猫样品进行了检测。结果显示,该方法扩增的VP2基因片段为468... 为了调查猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)在猫群中的流行情况,根据Gen Bank已登录的FPV VP2基因序列设计PCR引物,建立了FPV PCR快速检测方法,并对3004份猫样品进行了检测。结果显示,该方法扩增的VP2基因片段为468 bp左右,检出的最小基因组DNA浓度为6.19×10-8μg/μL,检出DNA浓度低于1 fg/μL,从3004份样品中检测出13份猫泛白细胞减少症病毒核酸阳性样品。本研究针对FPV VP2基因建立的PCR快速检测方法可作为FPV临床早期诊断及快速筛查手段。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 VP2基因 PCR

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广州地区猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及全基因组遗传分析 被引量：3

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作者 洪马林 付橙 +3 位作者 黄三 周沛 粟硕 李守军 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期9-14,共6页

【目的】分析广州地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV)的自然重组、跨宿主传播以及流行变异情况。【方法】采集疑似感染猫泛白细胞减少症病毒的猫粪便样品进行细胞分离,并对阳性病料提取基因组DNA,PCR扩增获得... 【目的】分析广州地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV)的自然重组、跨宿主传播以及流行变异情况。【方法】采集疑似感染猫泛白细胞减少症病毒的猫粪便样品进行细胞分离,并对阳性病料提取基因组DNA,PCR扩增获得病毒的全基因组序列,并与Gen Bank中相关的参考毒株序列进行遗传进化分析,同时对VP2基因与NS1基因的主要氨基酸位点进行差异分析。【结果】成功获得2株猫泛白细胞减少症病毒及其全基因组序列。遗传进化分析显示,广州地区分离的猫泛白细胞减少症病毒FPLV-GZ01、FPLV-GZ02与我国其他分离毒株FPLV-XJ01、FPLV-HRB属同一分支,提示FPLV-GZ01、FPLV-GZ02由FPLV-XJ1进化而来;NS1基因系统进化树显示,FPLV存在与CPV-447重组的可能。主要氨基酸位点分析显示,FPLV在VP2基因中的主要氨基酸位点上的遗传变异比CPV保守;在NS1基因上发现FPLV-GZ01、FPLV-GZ02分别存在不同程度的氨基酸位点突变。【结论】广州地区分离的猫泛白细胞减少症病毒仍在不断地重组进化。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 细小病毒 分离鉴定 全基因组 遗传分析

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猫泛白细胞减少症病毒XJ1-05株的分离及鉴定 被引量：4

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作者 苏洁 姜骞 +5 位作者 李慕瑶 王静 刘家森 司昌德 刘倪虹 曲连东 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第4期65-67,共3页

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 犬细小病毒 鉴定 分离 猫科动物 急性传染病 保护动物 接触性

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成都市猫泛白细胞减少症病毒、星状病毒和肠道冠状病毒的分子流行病学调查 被引量：4

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作者 张梦薇 陈艳 +2 位作者 李妍 杨晓农 黄坚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期1447-1455,共9页

为了解成都市区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫星状病毒(FAstV)和猫肠道冠状病毒(FECoV)的分子流行情况,本试验采集了315份家养猫和34份社区流浪猫的肛门拭子,含228份临床发病猫样本和121份临床健康猫样本,采用PCR方法对所有样本进行病... 为了解成都市区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫星状病毒(FAstV)和猫肠道冠状病毒(FECoV)的分子流行情况,本试验采集了315份家养猫和34份社区流浪猫的肛门拭子,含228份临床发病猫样本和121份临床健康猫样本,采用PCR方法对所有样本进行病毒核酸检测。同时,根据动物年龄、生活状态和免疫情况等因素进行病原流行分析,并根据病毒基因片段序列构建遗传进化树。结果显示,FPV、FAstV和FECoV的检出率分别为38.4%(134/349)、23.2%(81/349)和19.5%(68/349)。在混合感染方面,以FPV/FAstV(9.5%,33/349)、FAstV/FECoV(4.6%,16/349)和FPV/FECoV(4.3%,15/349)双重感染为主。基于部分基因序列的分析结果显示,样本间FPV VP2基因序列的同源性为95.1%～100%,发病猫毒株分为两个分支,其中一支与葡萄牙毒株(GenBank登录号:KT240136)和加拿大毒株(GenBank登录号:MF069445)遗传关系较近;另一支与中国的CPV毒株(GenBank登录号:KY937664)关系较近。样本间FAstV ORF1b基因序列同源性为90.9%～99.7%,发病猫的毒株的两个分支中一支与葡萄牙毒株(GenBank登录号:KF374704)和美国毒株(GenBank登录号:KM017743)关系较近;另一分支与中国香港毒株(GenBank登录号:KF499111)关系紧密。样本间FECoV的N基因序列同源性范围为89.3%～100%,与美国毒株(GenBank登录号:FJ938059)、意大利毒株(GenBank登录号:GU017092/GU017107)和中国毒株(GenBank登录号:KT852997)关系密切。调查结果表明,成都市区猫携带病毒性腹泻病原的情况较为普遍,部分猫存在多病原混合感染,且病毒基因序列存在明显变异,增加了病原流行及带毒猫发病的风险,需积极地进行临床防控。 展开更多

关键词 病毒性腹泻 猫泛白细胞减少症病毒(FPV) 猫星状病毒(FAstV) 猫肠道冠状病毒(FECoV) 遗传进化

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猫泛白细胞减少症病毒的遗传变异 被引量：3

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作者 苏洁 姜骞 +1 位作者 刘家森 曲连东 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第7期25-26,共2页

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 遗传变异 犬细小病毒 感染对象 发病死亡 VIRUS 感染动物 致死率

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