慢性心力衰竭患者血清环状RNA同源域相互作用激酶3和转录因子GATA结合蛋白4与心室重构及心功能的相关性 被引量：4

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作者 解乔木 李影 杨喜山 《中国心血管病研究》 CAS 2023年第11期982-987,共6页

目的探究慢性心力衰竭(CHF)患者血清环状RNA同源域相互作用激酶3(circHIPK3)和转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)与心室重构及心功能的相关性。方法选取2021年6月至2023年6月河南科技大学第一附属医院收治的152例慢性心力衰竭(CHF)患者为观... 目的探究慢性心力衰竭(CHF)患者血清环状RNA同源域相互作用激酶3(circHIPK3)和转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)与心室重构及心功能的相关性。方法选取2021年6月至2023年6月河南科技大学第一附属医院收治的152例慢性心力衰竭(CHF)患者为观察对象,作为CHF组,选取同期健康体检者110例,作为对照组,参照纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级标准将CHF患者分为Ⅰ~Ⅱ级(53例)、Ⅲ级(50例)、Ⅳ级(49例),采用实时荧光定量PCR法检测血清样本中circHIPK3表达水平,酶联免疫吸附法检测血清中GATA4蛋白水平,彩色多普勒超声心动图检测心室重构及心功能指标:左心室质量指数(LVMI)、左心室重构指数(LVRI)、左心室后壁厚度(LVPW)、左室舒张内径(LVEDD)、左心室短轴缩短率(LVFS)、心输出量(CO)、左心室射血分数(LVEF),多因素logistic回归分析CHF患者心功能分级的影响因素,Pearson法分析CHF患者血清circHIPK3、GATA4与LVMI、LVRI、LVPW、LVEDD、LVFS、CO、LVEF的相关性。结果与对照组比较,CHF患者血清中circHIPK3[(1.14±0.25)比(1.89±0.59)]、GATA4[(17.26±2.52)pg/ml比(26.94±4.24)pg/ml]水平显著升高,差异存在统计学意义(t=12.538、21.363;P<0.05),circHIPK3、GATA4水平随心功能分级的增加而升高。circHIPK3、GATA4、LVMI是心功能分级为Ⅲ~Ⅳ级的独立危险因素,CO、LVEF是保护因素(P<0.05)。CHF患者血清中circHIPK3、GATA4水平与LVMI、LVPW、LVEDD呈正相关,与LVRI、LVFS、CO、LVEF呈负相关(P<0.05);CHF患者血清中circHIPK3与GATA4呈正相关(P<0.05)。结论circHIPK3、GATA4在CHF患者血清中呈现高表达,与心室重构、心功能指标存在一定关联性,可能对该病的诊治、预后评估有重要参考价值。 展开更多

关键词 慢性心力衰竭 环状rna同源域相互作用蛋白激酶3 转录因子GATA结合蛋白4 心室重构 心功能

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转录通读环状RNA rt-circ-HS促进低氧诱导因子1α表达和肾癌细胞增殖与侵袭

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作者 许云屹 苏征征 +8 位作者 郑林茂 张孟尼 谭珺娅 杨亚蓝 张梦鑫 徐苗 陈铌 陈雪芹 周桥 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期217-227,共11页

目的:鉴定肾癌细胞中由染色体14q23上相邻基因低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF1α)和小核RNA激活复合多肽(small nuclear RNA activating complex polypeptide 1,SNAPC1)形成的转录通读RNA及转录通读环状RNA(read-thr... 目的:鉴定肾癌细胞中由染色体14q23上相邻基因低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF1α)和小核RNA激活复合多肽(small nuclear RNA activating complex polypeptide 1,SNAPC1)形成的转录通读RNA及转录通读环状RNA(read-through circular RNA HIF1α-SNAPC1,rt-circ-HS),研究rt-circ-HS在肾癌细胞及组织样本中的表达、对肾癌细胞生物学行为的影响以及对其亲本分子HIF1α的调控机制。方法:逆转录PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Sanger测序检测不同肿瘤细胞中由HIF1α-SNAPC1形成的转录通读RNA和rt-circ-HS的表达。构建不同类型的肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)组织芯片共437例,用原位杂交检测rt-circ-HS表达。采用小干扰RNA(small interference RNA,si-RNA)和人工过表达质粒干预rt-circ-HS,用细胞计数实验(cell counting kit 8,CCK8)、EdU掺入实验、Transwell细胞迁移和细胞侵袭实验分别检测rt-circ-HS对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。用RT-PCR和Western blot验证干预rt-circ-HS对亲本分子HIF1α和SNAPC1表达的影响。构建包含rt-circ-HS、HIF1α3′端非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)与微小RNA 539(microRNA 539,miR-539)结合序列的野生型和突变型质粒,用双荧光素酶报告基因系统检测rt-circ-HS、HIF1α3′UTR与miR-539的结合。结果:发现一个新的rt-circ-HS,由HIF1α外显子(exon)6-SNAPC1 exon 2转录通读本产生,在肾癌细胞786-O中高表达。Sanger测序证实rt-circ-HS全长1144 nt,包括HIF1αexon 2-exon 6和SNAPC1 exon 2-exon 4,是一个新的转录通读环状RNA。原位杂交结果显示,rt-circ-HS在RCC中阳性表达率为67.5%(295/437),在不同类型RCC中表达率不同。发现miR-539是HIF1α的转录后负调控分子;rt-circ-HS作为分子海绵与miR-539结合,竞争性抑制miR-539与HIF1α3′UTR的结合,解除其对HIF1α的转录后负调控作用,促进亲本分子HIF1α表达及肾癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论:rt-circ-HS作为分子海绵结合miR-539,抑制其对HIF1α的负调控作用,促进亲本分子HIF1α表达及肾癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 转录通读环状rna HIF1α-SNAPC1 肾细胞癌 低氧诱导因子1Α 小核rna激活复合多肽1 微小rna 539

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乳腺癌组织环状RNA ANKS1B及上游转录因子1的表达及临床意义 被引量：2

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作者 林小龙 黄心瑜 周一智 《实用临床医药杂志》 CAS 2023年第5期55-60,共6页

目的 探讨乳腺癌组织中环状RNA ANKS1B(CircANKS1B)及上游转录因子1(USF1)的表达及其临床意义。方法 选取90例乳腺癌患者作为研究对象。采用免疫组织化学检测组织中USF1蛋白表达。采用荧光定量聚合酶链反应检测组织中CircANKS1B及USF1 m... 目的 探讨乳腺癌组织中环状RNA ANKS1B(CircANKS1B)及上游转录因子1(USF1)的表达及其临床意义。方法 选取90例乳腺癌患者作为研究对象。采用免疫组织化学检测组织中USF1蛋白表达。采用荧光定量聚合酶链反应检测组织中CircANKS1B及USF1 mRNA的表达。分析癌组织中CircANKS1B与USF1 mRNA的相关性。分析CircANKS1B及USF1 mRNA表达与乳腺癌临床病理特征的关系。分析CircANKS1B及USF1 mRNA的表达与乳腺癌预后的关系。利用单因素及多因素COX比例风险模型分析乳腺癌预后的独立影响因素。结果 乳腺癌组织中USF1棕黄色阳性表达主要位于细胞核。乳腺癌组织中USF1蛋白表达阳性率为86.67%(78/90),高于癌旁组织的15.56%(14/90),差异有统计学意义(P<0.001)。乳腺癌组织中CircANKS1B与USF1 mRNA的相对表达量分别为(4.12±0.68)、(6.35±1.21),高于癌旁组织的(1.23±0.46)、(1.57±0.59),差异有统计学意义(P<0.001)。乳腺癌组织CircANKS1B与USF1 mRNA表达呈显著正相关(r=0.604,P<0.001)。CircANKS1B与USF1 mRNA表达在不同肿瘤分期、淋巴结转移及是否三阴性乳腺癌方面比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。CircANKS1B高表达患者中位生存时间为52.62个月(95%CI:49.44~56.35),短于CircANKS1B低表达患者的56.78个月(95%CI:52.46~57.05),差异有统计学意义(P=0.045)。USF1 mRNA低表达患者中位生存时间为52.53个月(95%CI:48.83~56.23),短于USF1 mRNA低表达患者的56.75个月(95%CI:54.07~59.43),差异有统计学意义(P=0.014)。CircANKS1B高表达、USF1 mRNA高表达、肿瘤分期Ⅲ期及合并淋巴结转移是乳腺癌预后的独立影响因素。结论 乳腺癌组织中CircANKS1B及USF1表达升高,二者与肿瘤TNM分期、淋巴结转移有关,可作为新的乳腺癌预后标志物。 展开更多

关键词 乳腺癌 环状rna ANKS1B 上游转录因子1 生物标志物

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circRNA TCF25靶向miR-128b对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

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作者 夏书官 王声 +2 位作者 任阳光 田艳艳 左永刚 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期198-206,共9页

目的探究环状RNA(circRNA)转录因子25(TCF25)靶向微RNA-128b(miR-128b)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法收集人乳腺癌细胞MCF-7培养至对数生长期,将MCF-7细胞随机分为空白组(未转染)、si-NC组(转染si-NC)、si-circRNA TCF25组... 目的探究环状RNA(circRNA)转录因子25(TCF25)靶向微RNA-128b(miR-128b)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法收集人乳腺癌细胞MCF-7培养至对数生长期,将MCF-7细胞随机分为空白组(未转染)、si-NC组(转染si-NC)、si-circRNA TCF25组(转染si-circRNA TCF25)、pcDNA-circRNA TCF25组(转染pcDNA-circRNA TCF25)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-128b mimic组(转染miR-128b模拟物)、miR-128b inhibitor组(转染miR-128b抑制剂)、pcDNA-circRNA TCF25+miR-128b mimic组(转染pcDNA-circRNA TCF25和miR-128b模拟物),每组6个复孔。转染48 h后,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中circRNA TCF25、miR-128b表达;RNase R酶消化实验进行环状RNA鉴定;核浆分离法检测circRNA TCF25的亚细胞定位;噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;RT-qPCR检测磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)、细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)mRNA表达;Western blotting检测PTEN、Ki-67、caspase-3、活化的caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告实验分析circRNA TCF25与miR-128b的靶向关系。结果与对照组比较,circRNA TCF25的相对表达量在RNase R酶处理后并无显著变化(P>0.05),而线性TCF25的相对表达量在经RNase R酶处理后降低(P<0.05);circRNA TCF25在胞质中的相对表达量高于细胞核(P<0.05)。与空白组和si-NC组比较,si-circRNA TCF25组细胞增殖活力降低,凋亡率升高,Ki-67 mRNA及蛋白表达降低,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达升高;pcDNA-circRNA TCF25组细胞增殖活力升高,凋亡率降低,Ki-67 mRNA及蛋白表达升高,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与空白组和miR-NC组比较,miR-128b mimic组细胞增殖活力降低,凋亡率升高,Ki-67 mRNA及蛋白表达降低,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达升高,miR-128b inhibitor组细胞增殖活力升高,凋亡率降低,Ki-67 mRNA及蛋白表达升高,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与pcDNA-circRNA TCF25组比较,pcDNA-circRNA TCF25+miR-128b mimic组细胞增殖活力降低,凋亡率升高,Ki-67 mRNA及蛋白表达降低,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。双荧光素酶实验结果证实了circRNA TCF25可靶向调控miR-128b。结论circRNA TCF25可能通过靶向抑制miR-128b表达,促进Ki-67表达,抑制PTEN、caspase-3、活化的caspase-3表达,发挥促进人乳腺癌细胞MCF-7增殖,抑制其凋亡的作用。 展开更多

关键词 环状rna转录因子25 微rna-128b 乳腺癌 增殖 凋亡

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环状RNA调节微RNA轴在过敏性鼻炎中的研究进展

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作者 闫敏 牛瑞兵 段宝生 《中国医药导报》 CAS 2023年第32期51-55,共5页

环状RNA是一类具有基因表达和调控功能的新型、稳定的非编码RNA,近年来研究发现环状RNA的异常表达与过敏性鼻炎的发病密切相关,环状RNA主要通过与微RNA结合来调控基因表达,影响过敏性鼻炎的免疫应答反应。本文就环状RNA通过调控微RNA轴... 环状RNA是一类具有基因表达和调控功能的新型、稳定的非编码RNA,近年来研究发现环状RNA的异常表达与过敏性鼻炎的发病密切相关,环状RNA主要通过与微RNA结合来调控基因表达,影响过敏性鼻炎的免疫应答反应。本文就环状RNA通过调控微RNA轴来调节固有免疫细胞、适应性免疫应答反应、转录因子及炎症因子的表达,进而调节过敏性鼻炎中炎症介质产生的研究现状和进展进行综述,以期为未来治疗过敏性鼻炎提供新思路。 展开更多

关键词 环状rna 微rna 过敏性鼻炎 固有免疫细胞 适应性免疫应答反应 转录因子 炎症因子

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过表达环状RNA circTCF25经miR-128靶向VEGF-C对膀胱癌细胞生物学行为的影响 被引量：6

6

作者 陈旭轮 王帅 +4 位作者 宋明欣 张丹丹 王丽丽 宋歌 迟宝进 《中国实验诊断学》 2022年第1期77-80,共4页

目的本文旨在分析过表达环状RNA circTCF25对膀胱癌细胞生物学行为的影响,明确环状RNA circTCF25是否与膀胱癌相关。方法取于佳木斯大学附属第一医院病理科保存的未经放化疗治疗且经临床确诊的20例膀胱癌患者膀胱癌组织及癌旁组织,并培... 目的本文旨在分析过表达环状RNA circTCF25对膀胱癌细胞生物学行为的影响,明确环状RNA circTCF25是否与膀胱癌相关。方法取于佳木斯大学附属第一医院病理科保存的未经放化疗治疗且经临床确诊的20例膀胱癌患者膀胱癌组织及癌旁组织,并培养膀胱癌细胞株T24。分析miR-128、VEGF-C在膀胱癌组织及癌旁组织中的表达情况,膀胱癌细胞做环状RNA circTCF25过表达和空载转染。分析过表达环状RNA circTCF25对miR-128、VEGF-C表达、膀胱癌细胞生长、增殖活性、克隆形成能力、迁移、侵袭的影响。结果膀胱癌组织中miR-128表达量低于癌旁组织,VEGF-C表达量、阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。过表达组环状RNA circTCF25表达量高于空载组(P<0.05)。过表达组miR-128表达量低于空载组,VEGF-C表达量高于空载组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因显示,环状RNA circTCF25靶向结合miR-128,miR-128靶向结合VEGF-C。过表达组细胞生长数、增殖活性、克隆形成能力均高于空载组(P<0.05)。过表达组细胞迁移、侵袭能力均高于空载组(P<0.05)。结论过表达环状RNA circTCF25可促进膀胱癌细胞生长、增殖活性、克隆形成能力、迁移、侵袭,其可能经miR-128靶向VEGF-C发挥上述作用。 展开更多

关键词 环状rna circTCF25 miR-128 血管内皮生长因子-C 膀胱癌

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沉默环状RNA溴域PHD手指转录因子通过靶向miR-15a-5p对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞损伤影响的研究 被引量：1

7

作者 黄德磊 傅宏 王梗 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期284-290,共7页

目的探讨沉默环状RNA溴域PHD手指转录因子(circBPTF)对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(hRMEC)损伤的影响及其可能作用机制。方法取对数生长期hRMEC加入浓度为5.5 mmol/L葡萄糖培养基处理24 h为正常对照(Con)组,加入浓度为25 mmol/L... 目的探讨沉默环状RNA溴域PHD手指转录因子(circBPTF)对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(hRMEC)损伤的影响及其可能作用机制。方法取对数生长期hRMEC加入浓度为5.5 mmol/L葡萄糖培养基处理24 h为正常对照(Con)组,加入浓度为25 mmol/L葡萄糖培养基处理24 h为HG组。将si-NC、si-circBPTF、miR-NC、miR-15a-5p mimic、si-circBPTF和miR-15a-5p inhibitor(共转染)分别转染至hRMEC,转染成功后加入浓度为25 mmol/L葡萄糖培养基处理24 h,分别为HG+si-NC组、HG+si-circBPTF组、HG+miR-NC组、HG+miR-15a-5p mimic组、HG+si-circBPTF+miR-15a-5p inhibitor组。qRT-PCR法检测circBPTF、miR-15a-5p表达,试剂盒检测丙二醛(MDA)与超氧化物歧化酶(SOD)活性,细胞计数试剂盒8法与流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡率,双荧光素酶报告实验检测circBPTF与miR-15a-5p的靶向关系,Western blot法检测活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达。结果与Con组比较,HG组MDA、凋亡率、circBPTF表达升高(P<0.05),SOD、细胞活力、miR-15a-5p表达降低(P<0.05)。与HG+si-NC组比较,HG+si-circBPTF组MDA、凋亡率、circBPTF表达降低(P<0.05),SOD、细胞活力、miR-15a-5p表达升高(P<0.05)。与HG+miR-NC组比较,HG+miR-15a-5p mimic组MDA、凋亡率降低(P<0.05),SOD、细胞活力、miR-15a-5p表达升高(P<0.05)。与HG+si-circBPTF组比较,HG+si-circBPTF+miR-15a-5p inhibitor组MDA、凋亡率升高(P<0.05),SOD、细胞活力、miR-15a-5p表达降低(P<0.05)。Starbase预测显示,circBPTF与miR-15a-5p存在互补序列,上调miR-15a-5p表达可抑制转染野生型载体WT-circBPTF的细胞相对荧光素酶活性(P<0.05)。结论沉默circBPTF可通过靶向调控miR-15a-5p表达促进细胞增殖及抑制细胞氧化应激、凋亡,减轻高糖诱导的hRMEC损伤。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 人视网膜微血管内皮细胞 环状rna溴域PHD手指转录因子 miR-15a-5p 细胞增殖 凋亡 氧化应激

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长链非编码RNA SLC25A25-AS1对喉癌细胞侵袭和迁移的影响及其机制 被引量：1

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作者 孙倩 刘盛力 +1 位作者 马钰 杜莉 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期324-328,共5页

目的探讨长链非编码RNA SLC25A25的反义RNA1(SLC25A25-AS1)对喉癌细胞侵袭和迁移的影响及其机制。方法采用实时荧光定量PCR检测人鼻咽上皮细胞NP69和喉癌细胞(TU-212、TU-177和Hep-2)的SLC25A25-AS1水平,分别采用MTT法、划痕实验和Trans... 目的探讨长链非编码RNA SLC25A25的反义RNA1(SLC25A25-AS1)对喉癌细胞侵袭和迁移的影响及其机制。方法采用实时荧光定量PCR检测人鼻咽上皮细胞NP69和喉癌细胞(TU-212、TU-177和Hep-2)的SLC25A25-AS1水平,分别采用MTT法、划痕实验和Transwell实验检测细胞的增殖活性、迁移能力和侵袭能力。采用Western blotting检测信号转导及转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)和血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达水平。结果喉癌细胞的SLC25A25-AS1表达水平低于NP69细胞且差异有统计学意义(P<0.05)。过表达SLC25A25-AS1使Hep-2细胞增殖活性显著降低(P<0.05),并显著抑制Hep-2细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05)。过表达SLC25A25-AS1的Hep-2细胞中,p-STAT3和VEGF的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论SLC25A25-AS1过表达可抑制喉癌Hep-2细胞的增殖、迁移和侵袭,其抑癌机制可能与STAT3/VEGF通路有关。 展开更多

关键词 喉癌 长链非编码rna SLC25A25-AS1 信号转导及转录激活因子3 血管内皮生长因子

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circRNA-ZNF532、circRNA-HIPK3与糖尿病视网膜病变的相关性研究 被引量：1

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作者 隋源 张成森 +2 位作者 王爽 李雪丽 勾晓梅 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第9期993-997,共5页

目的探讨环状RNA(circRNA)-锌指蛋白532(ZNF532)、circRNA-同源域相互作用蛋白激酶3(HIPK3)与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性。方法纳入109例DR患者(DR组)、110例单纯糖尿病患者(DM组)和65例健康体检志愿者(对照组)。实时荧光定量聚合酶... 目的探讨环状RNA(circRNA)-锌指蛋白532(ZNF532)、circRNA-同源域相互作用蛋白激酶3(HIPK3)与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性。方法纳入109例DR患者(DR组)、110例单纯糖尿病患者(DM组)和65例健康体检志愿者(对照组)。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测血清circRNA-ZNF532、circRNA-HIPK3表达,酶联免疫吸附试验检测血清血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6水平。Pearson分析DR患者血清circRNA-ZNF532、circRNA-HIPK3表达与血清VEGF、IL-1β、TNF-α、IL-6水平相关性。单因素和多因素Logistic回归分析DR危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析circRNA-ZNF532、circRNA-HIPK3诊断DR的价值。结果DR组血清circRNA-ZNF532、circRNA-HIPK3表达以及VEGF、IL-1β、TNF-α、IL-6水平高于DM组和对照组(P<0.05)。DR组血清circRNA-ZNF532、circRNA-HIPK3表达与VEGF、IL-1β、TNF-α、IL-6水平均呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示高水平circRNA-ZNF532、circRNA-HIPK3及VEGF是糖尿病患者发生DR的独立危险因素(P<0.05)。三者诊断糖尿病患者发生DR的曲线下面积分别为0.736、0.740和0.864,联合诊断高于单独诊断(P<0.05)。结论糖尿病患者血清中circRNA-ZNF532、circRNA-HIPK3表达上调与DR发生有关,两者可以作为DR辅助诊断的潜在指标。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 rna 环状 转录激活因子类 tristetraprolin蛋白 同源盒结构域蛋白质类 炎症 血管内皮生长因子类 同源域相互作用蛋白激酶3

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CircFoxo3调节miR-130a-5p/TEAD1轴对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡影响的实验研究

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作者 曹彦花 乐金海 +4 位作者 陈新宇 刘建和 刘越美 李俊 李苏 《中国临床新医学》 2024年第1期65-73,共9页

目的探讨环状RNA叉头框蛋白O3(CircFoxo3)调节miR-130a-5p/TEA域转录因子1(TEAD1)轴对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠分为对照组、HF组、si-NC组、si-CircFoxo3组、agomir NC组、miR-130a-5p agomir组、si-CircFoxo3... 目的探讨环状RNA叉头框蛋白O3(CircFoxo3)调节miR-130a-5p/TEA域转录因子1(TEAD1)轴对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠分为对照组、HF组、si-NC组、si-CircFoxo3组、agomir NC组、miR-130a-5p agomir组、si-CircFoxo3+antagomir NC组、si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组,每组18只。除对照组外,其他组大鼠均通过腹腔注射盐酸阿霉素的方法构建HF大鼠模型。建模成功后进行药物处理,每3 d给药一次,持续3周。应用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测心肌组织中CircFoxo3、miR-130a-5p表达水平。应用彩色多普勒超声仪检测大鼠左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清人基质裂解素2(ST_(2))、N端脑钠肽前体(NT-pro BNP)水平。应用HE染色、Masson染色检测大鼠心肌组织病理变化和心肌纤维化情况。通过TUNEL染色检测心肌细胞凋亡水平。应用Western blot法检测大鼠心肌组织TEA域转录因子1(TEAD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1的关系。结果与对照组比较,HF组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化严重,LVESD、LVEDD水平上升,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p和Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、si-NC组比较,si-CircFoxo3组大鼠心肌组织病理损伤减轻,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、agomir NC组比较,miR-130a-5p agomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化有所改善,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-CircFoxo3组、si-CircFoxo3+antagomir NC组比较,si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化加剧,LVESD、LVEDD水平升高,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p、Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1存在靶向关系。结论沉默CircFoxo3可能通过海绵化上调miR-130a-5p来抑制TEAD1表达,进而抑制HF大鼠心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 环状rna叉头框蛋白O3 miR-130a-5p TEA域转录因子1 心力衰竭 凋亡

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环状RNA CDR1as靶向抑制微小RNA-135a-5p调控人肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和侵袭的机制

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作者 张岩伟 魏志潘 +2 位作者 郑家永 胡小松 付庆林 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期686-691,共6页

目的探讨环状RNA小脑变性相关蛋白1反义转录物(circCDR1as)对人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法体外培养HPASMC,缺氧诱导后干扰circCDR1as表达、抑制或过表达微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)以及过表达Janu... 目的探讨环状RNA小脑变性相关蛋白1反义转录物(circCDR1as)对人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法体外培养HPASMC,缺氧诱导后干扰circCDR1as表达、抑制或过表达微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)以及过表达Janus激酶2(JAK2)。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中circCDR1as、miR-135a-5p表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中JAK2、信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达。组间差异比较采用t检验。结果缺氧组circCDR1as表达水平和磷酸化JAK2(p-JAK2)/JAK2、磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3比值高于常氧组(1.98±0.07比1.01±0.05、0.62±0.06比0.18±0.04、0.56±0.05比0.15±0.03),miR-135a-5p表达水平低于常氧组(0.52±0.05比1.00±0.04),差异有统计学意义(t=27.620、14.946、17.223、18.362,P<0.05)。si-circCDR1as组circCDR1as表达水平、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值和细胞活力、迁移细胞数、侵袭细胞数低于si-NC组(0.41±0.05比1.02±0.06、0.41±0.05比0.61±0.05、0.38±0.03比0.54±0.04、0.42±0.04比0.73±0.06、75.64±17.95比145.38±26.42、68.96±16.82比121.05±24.80),miR-135a-5p表达水平高于si-NC组(1.73±0.06比1.03±0.05),差异有统计学意义(t=19.131、6.928、7.838、10.530、5.348、4.258、21.954,P<0.05)。结论circCDR1as通过靶向抑制miR-135a-5p表达激活JAK2/STAT3信号通路,促进缺氧诱导的HPASMC增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 环状rna CDR1as 微小rna-135a-5p JANUS激酶2 信号转导和转录激活因子3 人肺动脉平滑肌细胞

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血清circSHKBP1、SOX3 mRNA表达与晚期胃癌患者临床病理特征及化疗疗效的关系

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作者 刘鑫佳 王凯瑞 +2 位作者 杨光 杨静 张燕 《疑难病杂志》 CAS 2024年第12期1460-1465,共6页

目的研究环状RNA SH3结构域激酶结合蛋白1(circSHKBP1)、SRY-box转录因子3(SOX3)mRNA表达与晚期胃癌患者化疗疗效和预后的关系。方法选取2019年1月—2021年2月空军军医大学唐都医院肿瘤科收治的晚期胃癌患者104例为研究组,根据化疗疗效... 目的研究环状RNA SH3结构域激酶结合蛋白1(circSHKBP1)、SRY-box转录因子3(SOX3)mRNA表达与晚期胃癌患者化疗疗效和预后的关系。方法选取2019年1月—2021年2月空军军医大学唐都医院肿瘤科收治的晚期胃癌患者104例为研究组,根据化疗疗效分为化疗敏感亚组64例和化疗抵抗亚组40例;选取同期健康体检者50例为健康对照组。采用实时荧光定量PCR检测各组血清circSHKBP1、SOX3 mRNA水平;分析血清circSHKBP1、SOX3 mRNA表达与晚期胃癌患者临床病理特征的关系;多因素Logistic回归分析影响化疗疗效的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circSHKBP1、SOX3 mRNA对晚期胃癌患者化疗疗效的评估价值。结果研究组血清circSHKBP1、SOX3 mRNA表达高于健康对照组(t/P=65.118/<0.001、51.471/<0.001)。肿瘤分期Ⅳ期、低分化晚期胃癌患者血清circSHKBP1、SOX3 mRNA表达高于肿瘤分期ⅢB期、高中分化的患者(circSHKBP1:t/P=37.283/<0.001、31.545/<0.001;SOX3:t/P=19.169/<0.001、26.334/<0.001)。化疗抵抗亚组肿瘤分期Ⅳ期百分比,血清circSHKBP1、SOX3 mRNA表达高于化疗敏感亚组(t/P=10.037/0.002,48.609/<0.001,26.775/<0.001)。肿瘤分期Ⅳ期及血清circSHKBP1、SOX3 mRNA高表达是影响晚期胃癌化疗抵抗的危险因素[OR(95%CI)=1.594(1.252~2.028),1.306(1.144~1.492),1.603(1.190~2.160)]。circSHKBP1、SOX3 mRNA及二者联合预测晚期胃癌患者化疗疗效的AUC分别为0.844、0.851、0.922,二者联合优于各自单独预测效能(Z/P=4.745/<0.001、4.310/<0.001)。结论晚期胃癌患者血清circSHKBP1、SOX3 mRNA表达升高,且均与肿瘤分化程度,肿瘤分期及化疗疗效有关,两者联合对晚期胃癌患者化疗疗效有较好的评估价值。 展开更多

关键词 胃癌晚期 环状rna SH3结构域激酶结合蛋白1 SRY-box转录因子3 化疗疗效

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CRISPR/Cas9技术在感染性疾病中的应用 被引量：2

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作者 张雨超 郝瑞栋 徐建青 《微生物与感染》 2016年第5期317-320,共4页

成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9〔clustered regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9),CRISPR/Cas9〕是一种新兴的基因编辑技术,与以前的三大基因编辑技术——归巢核... 成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9〔clustered regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9),CRISPR/Cas9〕是一种新兴的基因编辑技术,与以前的三大基因编辑技术——归巢核酸内切酶、锌指核酸酶和转录激活因子样效应物核酸酶技术相比,其在靶向特异性、操作简便性、治疗彻底性、应用广泛性等方面具有更大的优势和发展潜力。艾滋病、乙型肝炎、疟疾等感染性疾病的治疗一直是医学上的重大难题,科学家正努力尝试利用CRISPR/Cas9技术解决这些医学难题。本文主要综述了CRISPR/Cas9技术在这些感染性疾病中应用的研究进展。 展开更多

关键词 成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9 共价闭合环状DNA 锌指核酸酶 转录激活因子样效应物核酸酶 单导向rna

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Circ_0000218通过调节miR-139-3p/SOX2分子轴促进肾癌发展 被引量：3

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作者 林其玲 陈畅 《临床与病理杂志》 2020年第9期2231-2240,共10页

目的:探究环状RNA(circRNA)0000218(circ_0000218)/miR-139-3p/SRY盒转录因子2(SOX2)分子轴在调节肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)细胞增殖和转移的作用及其机制。方法:采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌组织和细胞中circ_... 目的:探究环状RNA(circRNA)0000218(circ_0000218)/miR-139-3p/SRY盒转录因子2(SOX2)分子轴在调节肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)细胞增殖和转移的作用及其机制。方法:采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌组织和细胞中circ_0000218和miR-139-3p的表达水平,以及肾癌细胞中二者的调控关系,并对43例肾癌患者组织中circ_0000218和miR-139-3p的表达水平进行相关性分析。采用CCK-8和Transwell实验分别检测过表达circ_0000218或miR-139-3p模拟物在细胞中增殖和迁移侵袭的作用。采用StarBase数据库预测miR-139-3p在肾癌样本中的表达与其生存预后信息。采用蛋白质印迹法检测肾癌细胞中circ_0000218或miR-139-3p对SOX2表达水平的影响。最后采用CircInteractome和TargetScan预测,双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000218与miR-139-3p,miR-139-3p和SOX2之间的靶向关系。结果:Circ_0000218在肾癌患者癌组织以及细胞系中均显著上调,同时其高表达水平和T分期级别增加,局部淋巴结转移和远处转移显著相关。过表达circ_0000218促进肾癌细胞增殖和转移。而miR-139-3p在肾癌组织和细胞中低表达,且StarBase数据库预测其低表达与肾癌患者生存期呈正相关。Circ_0000218与miR-139-3p表达呈负相关,潜在的机制表明circ_0000218通过调节miR-139-3p/SOX2轴促进肾癌增殖和转移。结论:在RCC中,circ_0000218通过调节miR-139-3p/SOX2轴促进RCC细胞的增殖和转移,并有可能作为诊断性生物标志物和治疗靶点。 展开更多

关键词 肾细胞癌 环状rna 0000218 miR-139-3p SRY盒转录因子2

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CircHIPK3低表达调控miR-124/STAT3轴抑制Aβ诱导的海马神经元凋亡的机制研究 被引量：1

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作者 陈莹 邓炎尧 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期22-29,共8页

目的探讨环状RNA同源域相互作用蛋白激酶3(circ HIPK3)低表达对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的海马神经元凋亡的影响。方法采用生物信息学软件预测和双荧光素酶报告基因实验验证微小RNA-124(mi R-124)与HIPK3、信号转导和转录激活因子3(STAT3... 目的探讨环状RNA同源域相互作用蛋白激酶3(circ HIPK3)低表达对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的海马神经元凋亡的影响。方法采用生物信息学软件预测和双荧光素酶报告基因实验验证微小RNA-124(mi R-124)与HIPK3、信号转导和转录激活因子3(STAT3)的靶向关系;将体外培养的原代海马神经元分为对照组(正常培养)、Aβ组(给予Aβ刺激)、Aβ+si STAT3-NC组(转染si STAT3-NC后给予Aβ刺激)、Aβ+si HIPK3组(转染si HIPK3后给予Aβ刺激)、Aβ+si HIPK3+antimi R-NC组(共转染si HIPK3和inhibitor-NC后给予Aβ刺激)、Aβ+si HIPK3+antimi R-124组(共转染si HIPK3和mi R-124 inhibitor后给予Aβ刺激)、Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3-NC组(共转染si HIPK3、mi R-124 inhibitor和si STAT3-NC后给予Aβ刺激)和Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3组(共转染si HIPK3、mi R-124 inhibitor和si STAT3后给予Aβ刺激)。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测HIPK3和mi R-124表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测STAT3蛋白表达水平,噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测海马神经元存活率和凋亡率,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)活性检测试剂盒检测Caspase-3活性。结果生物信息学软件预测、双荧光素酶报告基因实验证实HIPK3可与mi R-124靶向结合;生物信息学软件预测、双荧光素酶报告基因实验和Western blot实验证实,mi R-124可靶向调控STAT3蛋白表达。与对照组比较,Aβ组海马神经元中HIPK3表达水平、STAT3蛋白表达水平、凋亡率和Caspase-3活性明显升高,而海马神经元存活率和mi R-124表达水平明显降低(P<0.05);与Aβ+si HIPK3-NC组比较,Aβ+si HIPK3组中上述各指标明显逆转(P<0.05);与Aβ+si HIPK3+antimi R-NC组比较,Aβ+si HIPK3+antimi R-124组中各指标呈明显变化(P<0.05),且趋势与Aβ+si HIPK3组相反;与Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3-NC组比较,Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3组中各指标呈明显变化(P<0.05),且趋势与Aβ+si HIPK3+antimi R-124组相反;而Aβ组与Aβ+si HIPK3-NC组之间、Aβ+si HIPK3组与Aβ+si HIPK3+antimi R-NC组之间以及Aβ+si HIPK3+antimi R-124组与Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3-NC组之间各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论Circ HIPK3低表达可抑制Aβ诱导的海马神经元凋亡,其作用机制与调控mi R-124/STAT3轴有关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 环状rna HIPK3 微小rna-124/信号转导和转录激活因子3轴 海马神经元 Β-淀粉样蛋白

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消退素D1治疗系统性红斑狼疮模型小鼠的分子机制

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作者 王鸣军 周玲 +4 位作者 武剑 尹玉峰 曹晶 黄龄 程韬 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第19期1721-1727,共7页

目的探讨消退素D1(RvD1)治疗系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠的分子机制。方法选取8周龄雌性MRL/lpr小鼠(SLE小鼠模型,12只)和ICR小鼠(健康对照小鼠,6只),将MRL/lpr小鼠按照随机数字表法随机分为磷酸缓冲溶液(PBS)组和RvD1组(每组各6只),... 目的探讨消退素D1(RvD1)治疗系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠的分子机制。方法选取8周龄雌性MRL/lpr小鼠(SLE小鼠模型,12只)和ICR小鼠(健康对照小鼠,6只),将MRL/lpr小鼠按照随机数字表法随机分为磷酸缓冲溶液(PBS)组和RvD1组(每组各6只),尾静脉分别注射0.2 ml PBS和5μg/kg RvD1,8周后检测PBS组和RvD1组小鼠血清抗双链DNA(dsDNA)抗体、尿蛋白和滤泡辅助T细胞(Tfh)比例。处死小鼠后分离PBS组小鼠脾脏CD4^(+)T细胞,按随机数字表法将细胞分为CD4^(+)T细胞+二甲基亚砜(DMSO)(A组)、CD4^(+)T细胞+RvD1(B组)、初始CD4^(+)T细胞+DMSO(C组)、初始CD4^(+)T细胞+RvD1(D组),检测各组细胞E26转录因子1(ETS1)mRNA的表达水平和Tfh比例和分化情况。将miR-338-3p抑制剂与PBS组脾脏CD4^(+)T细胞或初始CD4^(+)T细胞共培养,检测细胞ETS1 mRNA的表达水平和Tfh的分化情况。用shRNA-circ_0006779慢病毒或空载慢病毒感染ICR组小鼠的脾脏CD4^(+)T细胞,检测各组细胞miR-338-3p mRNA、ETS1 mRNA的水平和Tfh的分化情况(细胞实验的筛孔数均为5)。结果RvD1组小鼠脾脏CD4^(+)T细胞ETS1 mRNA表达量高于PBS组(1.00±0.33比0.34±0.13,P=0.014);RvD1组小鼠脾重、血清抗dsDNA抗体水平、尿蛋白水平、Tfh细胞比例均低于PBS组(均P<0.05)。RvD1与CD4^(+)T细胞体外共培养结果发现:B组CD4^(+)T细胞ETS1 mRNA表达量高于A组(1.00±0.08比0.25±0.05,P<0.001)、Tfh比例低于A组(16.06%±3.06%比21.76%±3.42%,P=0.020);RvD1与初始CD4^(+)T细胞体外共培养结果发现:D组初始CD4^(+)T ETS1 mRNA表达量高于C组(1.00±0.25比0.21±0.16,P<0.001)、Tfh分化程度低于C组(8.81%±1.01%比12.60%±1.86%,P=0.011)。与不加miR-338-3p抑制剂相比,miR-338-3p抑制剂可以增加PBS组CD4^(+)T细胞ETS1 mRNA表达量(1.00±0.24比0.10±0.01,P<0.001),降低Tfh细胞分化程度(9.56%±1.53%比13.60%±1.32%,P<0.001);与空载慢病毒组相比,shRNA-circ_0006779慢病毒可以增加ICR组CD4^(+)T细胞miR-338-3p水平(1.00±0.22比1.38±0.21,P=0.002),降低ETS1 mRNA水平(0.76±0.13比1.00±0.14,P=0.005),提高Tfh细胞分化程度(4.00%±0.65%比1.68%±0.60%,P<0.001)。结论RvD1通过circ_0006779/miRNA-3384-3p/ETS1轴抑制Tfh细胞分化,治疗小鼠的SLE。 展开更多

关键词 红斑狼疮 系统性 消退素D1 辅助性T细胞 E26转录因子1 小rna 338-3p 环状rna 0006779

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