环状RNA_0124644调控微小RNA-136对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

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作者 蔡莉 侯保健 贺映侠 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2024年第5期444-450,共7页

目的:探讨环状RNA_0124644(circ_0124644)对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤的影响。方法:收集29例糖尿病肾病患者及41例健康体检者的血浆,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测circ_0124644和微小RNA(miR)-136的表达;验证circ_0... 目的:探讨环状RNA_0124644(circ_0124644)对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤的影响。方法:收集29例糖尿病肾病患者及41例健康体检者的血浆,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测circ_0124644和微小RNA(miR)-136的表达;验证circ_0124644和miR-136的靶向关系。将HK-2细胞随机分为正常糖(NG)组、HG组、HG+si-circ_0124644组、HG+si-NC组、HG+si-circ_0124644+anti-miR-136组、HG+si-circ_0124644+anti-miR-NC组。甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞抑制率;检测细胞凋亡率和活化的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)蛋白水平以及白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)水平。结果:与健康体检者相比,糖尿病肾病患者血浆中circ_0124644表达升高,miR-136表达降低(P<0.05)。HG可诱导的HK-2细胞中circ_0124644表达升高,miR-136表达降低,细胞抑制率、凋亡率、Cleaved caspase-3蛋白、Cleaved caspase-3平均荧光强度、IL-6、IL-1β、LDH和MDA水平及ROS活性升高,IL-10水平和SOD活性降低(P<0.05)。沉默circ_0124644后,HK-2细胞抑制率、凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达、Cleaved caspase-3平均荧光强度降低,IL-6、IL-1β水平降低,IL-10水平升高,SOD活性升高,LDH水平和MDA含量及ROS活性降低(P<0.05)。下调miR-136逆减弱了沉默circ_0124644对HG诱导的HK-2细胞的作用。结论:沉默circ_0124644可能通过调控miR-136抑制HG诱导的肾小管上皮细胞损伤。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 环状rna_0124644 微小rna-136 肾小管上皮细胞 炎症因子 氧化应激 凋亡

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环状RNA_0032131靶向微小RNA-145-5p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭

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作者 陶蕊 韩文朝 +1 位作者 丁天祥 范重山 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第11期53-57,62,共6页

目的探讨环状RNA_003213(hsa_circ_003213)靶向微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLSs)增殖、迁移和侵袭的影响。方法检测RA患者和健康体检者外周血、RA-FLSs、人正常滑膜成纤维细胞中hsa_circ_0032131和miR-... 目的探讨环状RNA_003213(hsa_circ_003213)靶向微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLSs)增殖、迁移和侵袭的影响。方法检测RA患者和健康体检者外周血、RA-FLSs、人正常滑膜成纤维细胞中hsa_circ_0032131和miR-145-5p的水平。将RA-FLSs分为对照(NC)组、si-NC组、si-hsa_circ_0032131组、miR-NC组、miR-145-5p组、anti-miR-NC+si-hsa_circ_0032131组、anti-miR-145-5p+si-hsa_circ_0032131组、pcDNA组、pcDNA-hsa_circ_0032131组。采用CCK-8和Transwell法检测RA-FLSs活力、迁移和侵袭数。通过双荧光素酶报告实验确定hsa_circ_0032131与miR-145-5p的靶向关系。结果与健康体检者相比,RA患者外周血中hsa_circ_0032131表达增加,miR-145-5p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与人正常滑膜成纤维细胞相比,RA-FLSs中hsa_circ_0032131表达增加,miR-145-5p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,si-hsa_circ_0032131组RA-FLSs的活力和迁移、侵袭数目降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-145-5p组RA-FLSs的活力和迁移、侵袭数目降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与anti-miR-NC+si-hsa_circ_0032131组比较,anti-miR-145-5p+si-hsa_circ_0032131组RA-FLSs的活力和迁移、侵袭数目增高,差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-hsa_circ_0032131组RA-FLSs中miR-145-5p水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-145-5p是hsa_circ_0032131的直接靶点。结论敲低hsa_circ_0032131通过上调miR-145-5p抑制RA-FLSs的增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 类风湿关节炎滑膜成纤维细胞 环状rna_003213 微小rna-145-5p 细胞活力 迁移 侵袭

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环状RNA_0015278与甲状腺乳头状癌及预后的相关性

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作者 丁华杰 那磊 +3 位作者 杨绍石 李莎 史华宁 龚雪 《安徽医学》 2023年第4期378-382,共5页

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)患者环状RNA_0015278(circ_0015278)表达与甲状腺癌及预后的相关性。方法回顾性分析2016年6月至2021年12月承德医学院附属医院收治的甲状腺切除术后PTC患者206例,通过逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PT... 目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)患者环状RNA_0015278(circ_0015278)表达与甲状腺癌及预后的相关性。方法回顾性分析2016年6月至2021年12月承德医学院附属医院收治的甲状腺切除术后PTC患者206例,通过逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PTC及癌旁组织中circ_0015278的表达,以病理结果为金标准,使用受试者工作特征(ROC)曲线评价circ_0015278在PTC及癌旁组织中的诊断价值;circ_0015278表达按照分位数划分四等级,使用Spearman相关分析,分析不同等级分位数circ_0015278表达与PTC 5年复发率、死亡率的相关性。使用KM曲线对数秩检验对不同等级分位数circ_0015278表达患者随访5年的无病生存率(DFS)和总生存率(OS)进行比较。通过单变量和多变量Cox比例风险回归模型分析影响PTC患者预后的因素。结果PTC组织中circ_0015278表达与癌旁组织相比明显降低,差异有统计学意义(Z=-14.146,P<0.001);以病理结果为金标准建立PTC及癌旁组织circ_001527表达的ROC曲线,以表达量0.740为截断值时对鉴别PTC及癌旁组织有较好价值(AUC:0.903,95%CI:0.847~0.932),灵敏度为76.7%,特异度为89.2%;较高的circ_0015278表达与肿瘤复发率降低相关(r=-0.162,P=0.011),与死亡率无关(r=-0.102,P=0.110);不同等级分位数circ_0015278表达的DFS之间差异有统计学意义(χ^(2)=3.268,P=0.017),利于DFS延长。OS之间差异无统计学意义(χ^(2)=5.551,P=0.136);多因素Cox回归分析表明,较高肿瘤circ_0015278表达与有利的DFS独立相关(HR=0.529,P=0.026)。结论PTC组织中circ_0015278表达明显降低,对PTC有较好的诊断价值,其高表达与肿瘤复发率降低及患者DFS延长相关。 展开更多

关键词 环状rna_0015278 甲状腺 乳头状癌 预后

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环状RNA_0005273对食管癌细胞生物学行为的影响及可能机制 被引量：2

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作者 姜哲 韩佳慧 +2 位作者 吴婷 万卢 童强 《实用临床医药杂志》 CAS 2023年第9期46-52,共7页

目的探讨环状RNA_0005273(circ_0005273)对食管癌细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白质印迹法(Western blot)检测食管癌组织、癌旁组织、人食管癌细胞EC109中circ_0005273、微... 目的探讨环状RNA_0005273(circ_0005273)对食管癌细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白质印迹法(Western blot)检测食管癌组织、癌旁组织、人食管癌细胞EC109中circ_0005273、微小RNA-1200(miR-1200)基因表达量与信号转导与转录活化因子3(STAT3)蛋白表达量。正常培养EC109细胞并设为对照组,另将si-NC、si-circ_0005273、miR-NC、miR-1200、si-circ_0005273+anti-miR-1200分别转染至EC109细胞并设为si-参照组、si-circ组、miR-参照组、miR-1200组、si-circ+anti组。分别采用噻唑蓝(MTT)法、平板克隆形成实验、流式细胞术和Transwell实验检测各组细胞增殖抑制率、集落形成数、细胞凋亡率和迁移细胞数;采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-1200与circ_0005273、STAT3间的靶向调控关系。结果食管癌组织中circ_0005273、STAT3蛋白表达量高于癌旁组织,miR-1200表达量低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);si-circ组miR-1200表达量、细胞增殖抑制率、凋亡率均高于对照组、si-参照组,circ_0005273表达量、STAT3蛋白表达量、集落形成数和迁移细胞数均低于或少于对照组、si-参照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-1200组STAT3蛋白表达量、集落形成数、迁移细胞数均低于对照组、miR-参照组,miR-1200表达量、细胞增殖抑制率、凋亡率均高于对照组、miR-参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。circ_0005273可靶向调控miR-1200,且miR-1200可靶向调控STAT3。si-circ+anti组STAT3蛋白表达、集落形成数、迁移细胞数高于si-circ组,细胞增殖抑制率、凋亡率低于si-circ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论circ_0005273在食管癌组织中呈高表达,干扰circ_0005273表达可通过上调miR-1200表达和下调STAT3表达而发挥抑制食管癌细胞增殖、迁移的作用,并诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 食管癌 环状rna_0005273 微小rna-1200 信号转导与转录活化因子3 细胞增殖 迁移 凋亡

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人环状RNA_0114428对脂多糖诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的作用及其机制 被引量：2

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作者 王亚静 贾宝辉 +4 位作者 韩方方 韩迎东 赵兰兰 石莹 张华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期101-109,共9页

目的:探讨人环状RNA_0114428(circ_0114428)对脂多糖(LPS)诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的作用,阐明circ_0114428通过调节微小RNA-139-5p(miR-139-5p)/转化生长因子β受体2(TGFBR2)轴改善HK-2细胞损伤的可能分子机制。方法:体外培养H... 目的:探讨人环状RNA_0114428(circ_0114428)对脂多糖(LPS)诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的作用,阐明circ_0114428通过调节微小RNA-139-5p(miR-139-5p)/转化生长因子β受体2(TGFBR2)轴改善HK-2细胞损伤的可能分子机制。方法:体外培养HK-2细胞,双荧光素酶报告基因实验验证miR-139-5p与circ_0114428和TGFBR2的靶向调控关系,CCK-8法筛选合适的LPS干预浓度和时间。给予10 mg·L^(-1) LPS干预12 h构建HK-2细胞损伤模型,HK-2细胞分为对照组、LPS组、LPS+circ_0114428沉默对照(LPS+si-NC)组、LPS+circ_0114428沉默(LPS+si-circ_0114428)组、LPS+circ_0114428沉默+miR-139-5p抑制剂对照(LPS+si-circ_0114428+in-NC)组和LPS+circ_0114428沉默+miR-139-5p抑制剂(LPS+si-circ_0114428+in-miR-139-5p)组,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中circ_0114428、miR-139-5p和TGFBR2 mRNA表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中TGFBR2、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL^(-1)β)水平。结果:双荧光素酶报告基因实验,miR-139-5p与circ_0114428和TGFBR2存在靶向调控关系(t=10.171,P<0.05;t=7.682,P<0.05)。CCK-8法检测LPS干预的最佳浓度为10 mg·L^(-1),最佳干预时间为12 h。与对照组比较,LPS组HK-2细胞中circ_0114428表达水平、TGFBR2 mRNA和蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL^(-1)β水平均明显升高(P<0.05),miR-139-5p表达水平和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与LPS+si-NC组比较,LPS+si-circ_0114428组HK-2细胞中circ_0114428表达水平、TGFBR2 mRNA和蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL^(-1)β水平均明显降低(P<0.05),miR-139-5p表达水平和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与LPS+si-circ_0114428+in-NC组比较,LPS+si-circ_0114428+in-miR-139-5p组HK-2细胞中circ_0114428表达水平、TGFBR2 mRNA和蛋白表达水平、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞上清液中IL-6、TNF-α和IL^(-1)β水平均明显升高(P<0.05),miR-139-5p表达水平和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:circ_0114428能减轻LPS诱导的HK-2细胞损伤,其作用机制可能与调节miR-139-5p/TGFBR2轴有关。 展开更多

关键词 环状rna_0114428 miR-139-5p 转化生长因子β受体2 脂多糖 人肾小管上皮细胞

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环状RNA_000926通过靶向miR-411-5p调控宫颈癌细胞的增殖和凋亡 被引量：1

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作者 王娜 张霞 +2 位作者 李淼 张华林 王玉净 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期189-194,共6页

目的:探讨环状RNA_000926(circ_000926)对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:收集2019年5月至2020年9月河北医科大学第一医院手术切除的30例宫颈癌患者的癌及癌旁组织标本,以及人宫颈癌细胞HeLa、SiHa和正常宫颈细胞Ect1/E6... 目的:探讨环状RNA_000926(circ_000926)对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:收集2019年5月至2020年9月河北医科大学第一医院手术切除的30例宫颈癌患者的癌及癌旁组织标本,以及人宫颈癌细胞HeLa、SiHa和正常宫颈细胞Ect1/E6E7,用qPCR法检测组织和细胞中circ_000926和miR-411-5p的表达水平。将circ_000926过表达质粒及空白质粒、circ_000926小干扰RNA及阴性对照寡核苷酸、miR-411-5p mimic和阴性对照质粒分别转染HeLa和SiHa细胞,分为pc-circ_000926组、pc-NC组、si-circ_000926组、si-NC组、miR-411-5p mimic组和miR-NC组。通过CCK-8法检测转染细胞的增殖活力,TUNEL法检测细胞的凋亡水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证circ_000926与miR-411-5p之间的靶向关系,WB法检测细胞中Ki67、BAX、Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达。结果:与癌旁组织和Ect1/E6E7细胞相比,宫颈癌组织和He La、SiHa细胞中circ_000926表达显著升高、miR-411-5p表达显著降低(均P<0.01)。与pc-NC组相比,pc-circ_000926组细胞增殖活力显著增强、细胞凋亡率显著降低(均P<0.01),细胞中miR-411-5p表达显著降低、Ki67蛋白表达显著升高,BAX、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达显著降低(均P<0.01)。与si-NC组相比,si-circ_000926组细胞增殖活力显著降低、细胞凋亡率显著升高(均P<0.01),细胞中miR-411-5p表达显著升高、Ki67蛋白表达显著降低,BAX、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达显著升高(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果证实circ_000926靶向负向调控miR-411-5p表达,过表达miR-411-5p可逆转过表达circ_000926对宫颈癌细胞增殖和凋亡的作用。结论:circ_000926通过靶向吸附miR-411-5p促进宫颈癌细胞的增殖,并抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 环状rna_000926 miR-411-5p 宫颈癌 HELA细胞 SIHA细胞 增殖 凋亡

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上调环状RNA_8199表达对食管鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响 被引量：2

7

作者 王伟 燕迪迪 +2 位作者 丁爽 倪凯园 姜国忠 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2021年第3期380-385,共6页

目的:探讨上调环状RNA_8199表达对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:RT-PCR检测ESCC细胞系KYSE520中环状RNA_8199的表达;Sanger测序对环状RNA_8199反向剪接位点的PCR产物进行验证;将KYSE520细胞中提取的RNA分... 目的:探讨上调环状RNA_8199表达对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:RT-PCR检测ESCC细胞系KYSE520中环状RNA_8199的表达;Sanger测序对环状RNA_8199反向剪接位点的PCR产物进行验证;将KYSE520细胞中提取的RNA分为RNase R处理组与对照组,RNase R处理组用20 U RNase R处理,对照组用等量双蒸水替代,qRT-PCR法分别检测两组环状RNA_8199和ATXN10 mRNA的表达情况;采用细胞免疫荧光法和核浆分离法观察环状RNA_8199在ESCC细胞系KYSE520和KYSE270中的亚定位;将高表达环状RNA_8199的质粒载体(环状RNA_8199-OE)或阴性对照(环状RNA_8199-NC)分别转染到KYSE30和KYSE70细胞中,采用CCK-8和平板克隆形成实验测定细胞增殖能力,Transwell实验测定细胞迁移和侵袭能力。结果:RT-PCR实验证明环状RNA_8199通过发散引物只能扩增出细胞的反转录产物cDNA,而线性转录本通过聚合引物能同时扩增出cDNA和基因组DNA;Sanger测序证实环状RNA_8199反向剪接位点;RNase R处理后环状RNA_8199的表达水平与对照组相比无改变(P=0.184),而ATXN10 mRNA的表达水平与对照组相比下降(P=0.003);细胞免疫荧光显示环状RNA_8199主要定位于细胞浆中,核浆分离实验显示环状RNA_8199在细胞浆水平高于细胞核水平(P<0.001);与环状RNA_8199-NC组相比,环状RNA_8199-OE组ESCC细胞OD值、克隆形成数、迁移细胞数和侵袭细胞数均下降(P<0.05)。结论:环状RNA_8199在ESCC细胞中表达,主要定位于细胞浆中且高度稳定。上调环状RNA_8199表达可抑制ESCC细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 环状rna_8199 食管鳞状细胞癌 增殖 迁移 侵袭

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环状RNA_0003028靶向微小RNA-498调控生殖器形成抑制基因-1/p53信号通路对人肝癌细胞系Huh7的影响 被引量：4

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作者 谢宇端 董国伟 +1 位作者 韩艳 何生奇 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期600-606,共7页

目的探讨环状RNA(circ)_0003028对人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法人肝癌细胞系Huh7分为小干扰RNA(si)-NC组、si-circ_0003028组、微小RNA(miR)-NC组、miR-498模似物(mimics)组、si-circ_0003028+anti-miR-NC组、si-c... 目的探讨环状RNA(circ)_0003028对人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法人肝癌细胞系Huh7分为小干扰RNA(si)-NC组、si-circ_0003028组、微小RNA(miR)-NC组、miR-498模似物(mimics)组、si-circ_0003028+anti-miR-NC组、si-circ_0003028+anti-miR-498组;Real-time PCR检测肝癌组织及各组细胞中circ_0003028和miR-498表达水平;MTT检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移和侵袭数;Western blotting检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0003028和miR-498的靶向调控关系。结果肝癌组织中circ_0003028表达水平升高(0.98±0.02 vs 1.36±0.01),miR-498表达水平降低(0.98±0.02 vs 0.63±0.02)(P<0.05)。抑制circ_0003028表达或miR-498过表达后,Huh7细胞中Ki-67(0.85±0.02 vs 0.41±0.02或0.95±0.11 vs 0.37±0.02)、基质金属蛋白酶(MMP)-2(0.71±0.02 vs 0.43±0.03或0.83±0.02 vs 0.41±0.03)、MMP-9(0.74±0.02 vs 0.37±0.02或0.78±0.02 vs 0.39±0.02)蛋白表达水平降低,细胞活性(1.53±0.03 vs 1.05±0.02或1.68±0.02 vs 1.11±0.02)降低;迁移(111.40±2.12 vs 77.22±2.38或108.90±2.30 vs 78.44±1.46)和侵袭(87.89±2.18 vs 49.78±1.98或80.22±1.79 vs 38.22±1.52)细胞数减少,生殖器形成抑制基因-1(SMG-1)(0.76±0.02 vs 1.39±0.02或0.79±0.02 vs 1.39±0.02)、p53(0.77±0.02 vs 1.24±0.03或0.82±0.03 vs 1.45±0.03)、p53-ser15(0.78±0.03 vs 1.50±0.02或0.82±0.02 vs 1.49±0.04)蛋白表达水平升高(P<0.05)。Circ_0003028靶向调控miR-498,沉默miR-498逆转了抑制circ_0003028表达对Huh7细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论抑制circ_0003028表达通过靶向miR-498影响SMG-1/p53信号通路而抑制人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 环状rna_0003028 微小rna-498 生殖器形成抑制基因-1/p53信号通路 肝癌细胞系Huh7 免疫印迹法 人

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沉默环状RNA_单酰甘油酯酶促进睾丸支持细胞增殖而抑制凋亡 被引量：3

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作者 史圣甲 贾一凡 +2 位作者 季兴哲 周梁 张洲 《西部医学》 2022年第2期185-189,194,共6页

目的探讨沉默环状RNA_单酰甘油酯酶(Circular RNA_monoglyceride lipase,circ_MGLL)表达对睾丸支持细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法应用siRNA沉默睾丸支持细胞中circ_MGLL和MGLL的表达。应用CCK-8和EdU检测沉默circ_MGLL对支持细... 目的探讨沉默环状RNA_单酰甘油酯酶(Circular RNA_monoglyceride lipase,circ_MGLL)表达对睾丸支持细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法应用siRNA沉默睾丸支持细胞中circ_MGLL和MGLL的表达。应用CCK-8和EdU检测沉默circ_MGLL对支持细胞增殖能力的影响。应用流式细胞术检测沉默circ_MGLL对支持细胞周期和凋亡的影响。应用生信网站预测与circ_MGLL具有结合潜能的miRNA。应用荧光素酶报告实验检测circ_MGLL与相关miRNAs的结合能力。结果沉默circ_MGLL的表达后,支持细胞增殖速度加快、增殖细胞比例和S期细胞比例升高(均P<0.05),而凋亡细胞比例和G1期细胞比例降低(P<0.05)。机制方面研究显示,circ_MGLL可结合miR-1228、miR-1233、miR-149和miR-924。结论circ_MGLL可结合miR-1228/miR-1233/miR-149/miR-924,并促进睾丸支持细胞增殖而抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 支持细胞 环状rna_单酰甘油酯酶 无精子症 微小rna 细胞增殖

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circ RNA_0017178对戊四氮致癫痫小鼠模型的影响

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作者 毛戬 温萍萍 +3 位作者 孙洪英 张舒雅 孟晨曦 张佳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期2081-2088,共8页

目的探究环状RNA(circ RNA)在癫痫发病中的可能作用机制。方法利用circRNA基因芯片检测癫痫患者与健康对照者外周静脉血中circRNA表达谱筛选出差异表达的circRNA。利用circPrimer、circMir、TargetScan对circ_0017178与癫痫进行生物信... 目的探究环状RNA(circ RNA)在癫痫发病中的可能作用机制。方法利用circRNA基因芯片检测癫痫患者与健康对照者外周静脉血中circRNA表达谱筛选出差异表达的circRNA。利用circPrimer、circMir、TargetScan对circ_0017178与癫痫进行生物信息学分析并构建相关腺病毒载体。将30只雄性成年C57BL/6小鼠随机分为对照组、空载体组、circ_0017178过表达组(10只/组),分别向3组小鼠海马内注射生理盐水、空质粒腺病毒载体、circ_0017178过表达腺病毒载体,构建戊四唑癫痫模型后观察各组小鼠的动物行为学变化,用Tunel染色法分析各组小鼠海马组织细胞凋亡情况。结果基因芯片结果表明,与对照组比较,癫痫组中circ_0069272、circ_0033065、circ_0017178、circ_0073442、circ_0033063、circ_0049415上调,circ_0083773、circ_0088262、circ_0016396下调。其中circ_0017178可能与癫痫密切相关,通过生信分析circ_0017178可能结合20个miRNA调控39个癫痫基因,并具备潜在m6A、IRES、ORF1结合位点。在动物实验中,相比空载体组及对照组,circ_0017178过表达组癫痫的潜伏期缩短(P<0.05)、发作时间延长(P<0.05)、发作次数增加(P<0.05);空载体组及对照组间无统计学意义(P>0.05)。相比空载体组及对照组,circ_0017178过表达组癫痫小鼠海马组织细胞凋亡程度明显增加(P<0.05),空载体组及对照组间无统计学意义(P>0.05)。结论Circ_0017178在癫痫患者外周血单个核细胞表达谱中升高,Circ_0017178可能充当miRNA的“分子海绵”在癫痫中发挥作用,并具备m6A甲基化和翻译蛋白质的潜能。Circ_0017178可能通过促进戊四唑癫痫小鼠的细胞凋亡增加癫痫的易感性和严重程度。 展开更多

关键词 环状rna_0017178 癫痫 差异性表达 生物信息学分析 细胞凋亡

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沉默环状RNA_胚胎致死异常视觉样蛋白2(circELAVL2)抑制小鼠睾丸TM4支持细胞增殖并促进其凋亡

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作者 史圣甲 季兴哲 +1 位作者 孙建华 张洲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1005-1010,共6页

目的观测沉默环状RNA_胚胎致死异常视觉样蛋白2(circELAVL2)对小鼠睾丸TM4支持细胞增殖和凋亡的影响,并探索潜在机制。方法应用小干扰RNA技术沉默小鼠睾丸TM4细胞circELAVL2的表达,沉默circELAVL2后,采用CCK-8法和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧... 目的观测沉默环状RNA_胚胎致死异常视觉样蛋白2(circELAVL2)对小鼠睾丸TM4支持细胞增殖和凋亡的影响,并探索潜在机制。方法应用小干扰RNA技术沉默小鼠睾丸TM4细胞circELAVL2的表达,沉默circELAVL2后,采用CCK-8法和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷染色评估TM4细胞增殖能力,流式细胞术和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测TM4细胞的凋亡。生物信息学方法预测微小RNA-382-3p(miR-382-3p)与circELAVL2的结合位点,荧光素酶报告实验检测circELAVL2与miR-382-3p的结合能力。实时定量PCR检测circEALVL2和miR-382-3p表达水平。结果沉默circELAVL2的表达后,TM4细胞增殖速度和EdU阳性细胞比例降低,凋亡细胞比例增加。机制研究结果显示circELAVL2可结合并下调miR-382-3p表达。结论circELAVL2可通过结合并抑制miR-382-3p表达促进小鼠TM4支持细胞增殖能力并抑制其凋亡。 展开更多

关键词 支持细胞 环状rna(circrna) 环状rna_胚胎致死异常视觉样蛋白2(circELAVL2) 微小rna(mirna) 细胞增殖 细胞凋亡

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沉默环状RNA_0084043对高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤的影响

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作者 张林波 庞紫蕊 《临床肾脏病杂志》 2022年第9期762-768,共7页

目的探讨沉默环状RNA_0084043(circular RNA_0084043,circ_0084043)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞炎性反应、氧化应激及凋亡的影响及其对微小RNA-142-5p(micro RNA-145-5p,miR-142-5p)的靶向调控作用。方法肾小管上皮细胞HK-2按照随机... 目的探讨沉默环状RNA_0084043(circular RNA_0084043,circ_0084043)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞炎性反应、氧化应激及凋亡的影响及其对微小RNA-142-5p(micro RNA-145-5p,miR-142-5p)的靶向调控作用。方法肾小管上皮细胞HK-2按照随机数字表法随机分为Con组、HG组、HG+si-NC组、HG+si-circ_0084043组、HG+miR-NC组、HG+miR-142-5p组、HG+si-circ_0084043+anti-miR-NC组、HG+si-circ_0084043+anti-miR-142-5p组;qRT-PCR法检测circ_0084043与miR-142-5p的表达量;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素8(interleukin8,IL-8)的水平;试剂盒检测丙二醛(malondialedhyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0084043与miR-142-5p的靶向关系;Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)蛋白表达量。结果与Con组比较,HG组circ_0084043的表达水平升高[(1.00±0.04)比(3.57±0.49)](P<0.05),miR-142-5p的表达水平降低[(1.00±0.05)比(0.34±0.06)](P<0.05),TNF-α、IL-8、MDA的水平升高[(18.43±2.06)mg/mL比(49.55±2.65)mg/mL;(11.74±0.83)mg/mL比(27.62±2.25)mg/mL;(0.23±0.08)nmol/mg比(2.86±0.37)nmol/mg](P<0.05),凋亡率[(6.74±0.95)%比(23.15±2.49)%]与Bax蛋白水平升高(P<0.05),SOD的活性降低[(40.05±3.07)U/mg比(17.35±1.54)U/mg](P<0.05),Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05);与HG组、HG+si-NC组比较,HG+si-circ_0084043组TNF-α、IL-8、MDA的水平降低[(49.55±2.65)/(48.42±4.04)mg/mL比(34.90±4.95)mg/mL;(27.62±2.25)/(27.76±3.53)mg/mL比(19.14±1.02)mg/mL;(2.86±0.37)/(2.81±0.43)nmol/mg比(0.89±0.12)nmol/mg](P<0.05),凋亡率[(23.15±2.49)/(23.73±3.28)%比(14.47±0.93)%]与Bax蛋白水平降低(P<0.05),SOD的活性[(17.35±1.54)/(17.40±0.63)U/mg比(28.54±2.56)U/mg]升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平升高(P<0.05);circ_0084043可靶向调控miR-142-5p;与HG+miR-NC组比较,HG+miR-142-5p组TNF-α、IL-8、MDA的水平降低[(48.78±4.56)mg/mL比(35.18±3.93)mg/mL;(27.98±1.64)mg/mL比(18.31±1.11)mg/mL;(2.81±0.32)nmol/mg比(0.96±0.08)nmol/mg](P<0.05),凋亡率[(22.27±2.68)%比(16.01±0.48)%]与Bax蛋白水平降低(P<0.05),SOD的活性升高[(17.40±1.09)U/mg比(25.22±1.67)U/mg](P<0.05),Bcl-2蛋白水平升高(P<0.05);与HG+si-circ_0084043+anti-miR-NC组比较,HG+si-circ_0084043+anti-miR-142-5p组TNF-α、IL-8、MDA的水平升高[(34.74±1.51)mg/mL比(46.31±2.65)mg/mL;(19.03±0.66)mg/mL比(23.07±1.19)mg/mL;(0.89±0.06)nmol/mg比(1.43±0.11)nmol/mg](P<0.05),凋亡率[(14.69±0.49)%比(18.37±0.89)%]与Bax蛋白水平升高(P<0.05),SOD的活性降低[(28.38±1.03)U/mg比(19.56±0.83)U/mg](P<0.05),Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05)。结论沉默circ_0084043可通过负向调控miR-142-5p而抑制细胞炎性反应、氧化应激及凋亡,从而减轻高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤。 展开更多

关键词 环状rna_0084043 微小rna-142-5p 人肾小管上皮细胞 凋亡 氧化应激

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环状RNA102272通过miR-1258调控肝癌细胞增殖

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作者 蒋磊 李玉强 +4 位作者 李男 赵明洲 李岩 杨微微 吴刚 《锦州医科大学学报》 CAS 2023年第4期27-32,共6页

目的明确circRNA_102272在肝癌中的表达及作用机制。方法通过分析GEO数据库数据以及收集锦州医科大学附属第一医院肝癌患者组织标本,通过qPCR方法检测患者组织中circRNA_102272的表达情况,通过CCK-8分析其对肝癌细胞增殖的影响,分析circ... 目的明确circRNA_102272在肝癌中的表达及作用机制。方法通过分析GEO数据库数据以及收集锦州医科大学附属第一医院肝癌患者组织标本,通过qPCR方法检测患者组织中circRNA_102272的表达情况,通过CCK-8分析其对肝癌细胞增殖的影响,分析circRNA_102272的表达与临床病例参数之间的关系,通过在线数据库分析其作用机制,通过体外荧光素酶报告基因实验以及CCK-8明确其发挥作用的机制。结果肝癌患者组织中circRNA_102272表达较癌旁正常组织中的表达升高显著。同时,circRNA_102272的表达与分化程度、转移、TNM分期相关(P<0.05)。miR-1258能够逆转circRNA_102272对肝癌细胞增殖的调控作用。结论circRNA_102272通过miR-1258调控肝癌细胞增殖。 展开更多

关键词 肝癌 环状rna_102272 miR-1258 增殖

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2型糖尿病来源外泌体转运circ_001895对高糖胁迫下内皮祖细胞功能的影响

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作者 张洁 张丽 +1 位作者 王晨菲 罗荔 《河北医学》 CAS 2024年第10期1592-1597,共6页

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)来源的外泌体(EXO)中转运环状RNA_001895(circ_001895)对高糖胁迫下内皮祖细胞的增殖、凋亡、迁移及血管生成标志物的影响。方法:从T2DM患者中获取血清样本,分为血清组和EXO组。采用RT-qPCR技术检测血清和EXO中... 目的:探讨2型糖尿病(T2DM)来源的外泌体(EXO)中转运环状RNA_001895(circ_001895)对高糖胁迫下内皮祖细胞的增殖、凋亡、迁移及血管生成标志物的影响。方法:从T2DM患者中获取血清样本,分为血清组和EXO组。采用RT-qPCR技术检测血清和EXO中circ_001895的表达水平。将T2DM患者血清来源的EXO中circ_001895表达显著升高的EXO命名为EXO-circ。使用武汉普诺赛公司提供的内皮祖细胞进行培养,并分为以下3组:Ctrl组:常规培养24h,不进行额外处理。高糖(HG)组:以30mmoL/L葡萄糖处理细胞24h。HG+EXO-circ组:以30mmoL/L葡萄糖联合100μg/mL的EXO-circ处理细胞24h。采用RT-qPCR技术检测各组细胞中circ_001895的表达。使用CCK-8法检测细胞增殖活力。通过流式细胞术检测细胞凋亡情况。利用Western blot技术检测血管生成标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达。通过Transwell细胞迁移实验检测细胞的迁移能力。结果:与血清组相比,EXO组中circ_001895的相对表达量显著上调(P<0.05)。与Ctrl组相比,HG组中circ_001895和E-cadherin的相对表达量及细胞凋亡率均显著上调(均P<0.05),而细胞增殖活力、迁移能力以及N-cadherin和Vimentin的相对表达量均显著下调(均P<0.05)。与HG组相比,HG+EXO-circ组中circ_001895和E-cadherin的相对表达量及细胞凋亡率均显著上调(均P<0.05),而细胞增殖活力、迁移能力以及N-cadherin和Vimentin的相对表达量均显著下调(均P<0.05)。结论:T2DM来源的EXO转运circ_001895抑制高糖胁迫下内皮祖细胞的增殖、迁移以及血管生成,并促进细胞的凋亡。 展开更多

关键词 2型糖尿病 外泌体 环状rna_001895 内皮祖细胞 迁移 血管生成

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circ_0009910对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响及机制 被引量：1

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作者 何明璇 王鹏 +1 位作者 冯娜欣 刘锦燕 《山东医药》 CAS 2021年第19期44-48,共5页

目的探讨环状RNA_0009910(circ_0009910)对结直肠癌细胞(SW620)增殖、凋亡的影响及机制。方法常规培养SW620细胞,将细胞随机分组并进行转染,si-NC组转染si-NC、si-circ_0009910组转染si-circ_0009910、pcDNA组转染pcDNA、pcDNA-circ_000... 目的探讨环状RNA_0009910(circ_0009910)对结直肠癌细胞(SW620)增殖、凋亡的影响及机制。方法常规培养SW620细胞,将细胞随机分组并进行转染,si-NC组转染si-NC、si-circ_0009910组转染si-circ_0009910、pcDNA组转染pcDNA、pcDNA-circ_0009910组转染pcDNA-circ_0009910、miR-NC组转染miR-NC、miR-198组转染miR-198 mimic、si-circ_0009910+anti-miR-NC组共转染si-circ_0009910和anti-miR-NC、si-circ_0009910+anti-miR-198组共转染si-circ_0009910和miR-198 inhibitor。转染48 h,用qRT-PCR检测细胞中circ_0009910、miR-198表达,用MTT法检测细胞增殖能力,用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡能力,用Western blotting法检测细胞核相关抗原Ki-67(Ki-67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,采用双荧光素酶报告实验验证circ_0009910的靶基因。结果与si-NC组比较,si-circ_0009910组细胞增殖能力低,细胞凋亡率高,Ki-67、Bcl-2蛋白相对表达量低,Bax蛋白相对表达量高(P均<0.05)。Circular RNA Interactome软件预测出circ_0009910的部分碱基序列可与miR-198形成互补配对。与miR-NC组比较,miR-198组转染WT-circ_0009910后荧光素酶活性低(P<0.05);而两组转染MUT-circ_0009910后荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-circ_0009910组miR-198相对表达量低(P<0.05);与si-NC组比较,si-circ_0009910组miR-198相对表达量高(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-198组SW620细胞增殖能力低,细胞凋亡率高,Ki-67、Bcl-2蛋白相对表达量低,Bax蛋白相对表达量高(P均<0.05);与si-circ_0009910+anti-miR-NC组比较,si-circ_0009910+anti-miR-198组细胞增殖能力高,细胞凋亡率低,Ki-67、Bcl-2蛋白相对表达量高,Bax蛋白相对表达量低(P均<0.05)。结论circ_0009910低表达通过靶向调控miR-198的表达抑制SW620细胞增殖,促进其促凋亡。 展开更多

关键词 结直肠癌 环状rna_0009910 细胞增殖 细胞凋亡 SW620细胞

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环状RNA_0054633对过氧化氢诱导的心肌细胞氧化损伤的影响

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作者 王艳炜 吴变稳 +2 位作者 曹磊 马杰 封亚丽 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1560-1564,共5页

目的考察环状RNA(circRNA)circ_0054633是否靶向miR-375调控过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞氧化损伤。方法将H9C2心肌细胞分为对照组(正常培养,未进行任何处理)、H_(2)O_(2)组(150μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理心肌细胞6 h)、H_... 目的考察环状RNA(circRNA)circ_0054633是否靶向miR-375调控过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞氧化损伤。方法将H9C2心肌细胞分为对照组(正常培养,未进行任何处理)、H_(2)O_(2)组(150μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理心肌细胞6 h)、H_(2)O_(2)+si-NC组、H_(2)O_(2)+si-circ_0054633组、H_(2)O_(2)+miR-NC组、H_(2)O_(2)+miR-375组、H_(2)O_(2)+si-circ_0054633+anti-miR-NC组、H_(2)O_(2)+si-circ_0054633+anti-miR-375组(在心肌细胞中分别转染si-NC、si-circ_0054633、miR-NC、miR-375模拟物、si-circ_0054633+anti-miR-NC、si-circ_0054633+anti-miR-375,转染24 h后,用150μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理心肌细胞6 h)。用实时荧光定量聚合酶链反应法测定miR-375的表达水平,用试剂盒测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,用流式细胞术测定细胞凋亡情况。结果对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+si-NC组、H_(2)O_(2)+si-circ_0054633组、H_(2)O_(2)+miR-NC组、H_(2)O_(2)+miR-375组、H_(2)O_(2)+si-circ_0054633+anti-miR-NC组、H_(2)O_(2)+si-circ_0054633+anti-miR-375组的心肌细胞miR-375表达量分别为1.00±0.00、0.42±0.05、0.40±0.06、0.69±0.08、1.00±0.00、3.41±0.28、1.00±0.00和0.26±0.02,MDA含量分别为(3.19±0.32)、(13.46±1.27)、(15.39±1.04)、(5.26±0.51)、(16.05±1.36)、(9.18±0.85)、(4.89±0.44)和(10.05±0.92)nmol·L^(-1),SOD活性分别为(64.69±5.81)、(18.23±1.33)、(17.07±1.41)、(55.74±5.13)、(17.12±1.64)、(47.66±4.59)、(56.77±4.71)和(27.95±2.47)U·mL^(-1),凋亡率分别为(6.21±0.59)%、(29.22±2.19)%、(30.94±2.85)%、(10.05±0.92)%、(31.14±2.83)%、(13.74±1.24)%、(10.39±0.88)%和(21.31±1.92)%。H_(2)O_(2)组的上述指标与对照组比较,H_(2)O_(2)+si-circ_0054633组的上述指标与H_(2)O_(2)+si-NC组比较,H_(2)O_(2)+miR-375组的上述指标与H_(2)O_(2)+miR-NC组比较,H_(2)O_(2)+si-circ_0054633+anti-miR-375组的上述指标与H_(2)O_(2)+si-circ_0054633+anti-miR-NC组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论干扰circ_0054633表达可通过靶向调控miR-375表达,减轻H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡,从而保护心肌细胞免受氧化损伤。 展开更多

关键词 环状rna_0054633 微小rna-375 过氧化氢 心肌细胞 氧化应激 凋亡

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circRNA_100395通过结合miR-31-5p抑制心肌细胞肥大相关基因的表达 被引量：4

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作者 郭晶 陈丽文 +7 位作者 温艺红 黄智琪 陈泽润 刘彦俊 朱杰宁 方咸宏 徐金东 单志新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期56-64,共9页

目的:探讨环状RNA(circRNA)_100395对心肌细胞肥大表型的影响及其作用机制。方法:通过RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=8)与心衰患者(n=14)心肌组织中circRNA_100395及其宿主基因Kelch蛋白样家族成员20(KLHL20)的表达水平。原代分离、培养... 目的:探讨环状RNA(circRNA)_100395对心肌细胞肥大表型的影响及其作用机制。方法:通过RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=8)与心衰患者(n=14)心肌组织中circRNA_100395及其宿主基因Kelch蛋白样家族成员20(KLHL20)的表达水平。原代分离、培养乳小鼠心室肌细胞(NMVCs),分别感染对照病毒(rAd-GFP)和circRNA_100395重组腺病毒(rAd-circRNA_100395)24 h,探究circRNA_100395对心肌肥大相关的β-肌球蛋白重链(β-MHC)、骨骼肌α-肌动蛋白(ACTA1)及心房钠尿肽(ANP)表达的影响。采用鬼笔环肽染色检测circRNA_100395对血管紧张素II(AngII)处理的NMVCs肥大反应的影响。通过双萤光素酶报告基因实验及RNApull-down实验验证微小RNA-31-5p(miR-31-5p)与circRNA_100395的结合作用。通过转染miR-31-5p mimic至NMVCs中,检测miR-31-5p对circRNA_100395抑制心肌肥大相关基因表达的影响。结果:在心衰患者心肌组织中,circRNA_100395表达水平及其宿主基因KLHL20的mRNA表达水平显著增加(P<0.05)。过表达circRNA_100395可以降低NMVCs中心肌肥大相关基因Myh7(编码β-MHC蛋白)、Acta1及Anp的表达,抑制AngII的促NMVCs肥大反应(P<0.01)。双萤光素酶报告基因实验和RNApull-down实验结果表明miR-31-5p与circRNA_100395存在相互结合作用。过表达miR-31-5p可减弱circRNA_100395对心肌细胞肥大的抑制作用。结论:circRNA_100395通过结合miR-31-5p发挥抑制心肌细胞肥大的作用。 展开更多

关键词 心肌细胞肥大 环状rna_100395 微小rna-31-5p

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circRNA_0000994通过翻译蛋白抑制心肌细胞肥大相关基因表达 被引量：2

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作者 郭继深 丰嘉欣 +7 位作者 温艺红 陈泽润 李艺 朱杰宁 李晖 徐金东 方咸宏 单志新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1756-1764,共9页

目的:研究环状RNA(circRNA)_0000994对心肌细胞肥大表型的调控作用及机制。方法:通过RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=18)与心力衰竭(HF)病人(n=28)心肌组织中circRNA_0000994及其宿主基因溶质载体家族8成员A1(SLC8A1)的表达水平。通过分... 目的:研究环状RNA(circRNA)_0000994对心肌细胞肥大表型的调控作用及机制。方法:通过RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=18)与心力衰竭(HF)病人(n=28)心肌组织中circRNA_0000994及其宿主基因溶质载体家族8成员A1(SLC8A1)的表达水平。通过分离和培养新生小鼠心室肌细胞(NMVCs),利用重组腺病毒载体介导circRNA_0000994过表达并检测其对NMVCs肥大表型的影响。采用鬼笔环肽染色检测circRNA_0000994对血管紧张素II(Ang II)诱导的NMVCs肥大反应的影响。人AC16心肌细胞过表达circRNA_0000994后,利用质谱shotgun技术鉴定circRNA_0000994预期翻译蛋白(简称SLC8A1-605aa)的特征性肽段序列。利用NMVCs先后过表达circRNA_0000994及转染siRNA-SLC8A1-605aa,检测SLC8A1-605aa表达对circRNA_0000994抑制NMVCs肥大表型的影响。结果:在HF病人心肌组织中,circRNA_0000994及SLC8A1 mRNA的表达显著增加。过表达circRNA_0000994可降低NMVCs中心脏肥大相关基因肌球蛋白重链7(MYH7)、骨骼肌肌动蛋白α1(ACTA1)和心房钠尿肽(ANP)的表达,抑制Ang II诱导的NMVCs肥大反应(P<0.01)。Western blot及质谱shot-gun分析结果显示,circRNA_0000994可翻译SLC8A1-605aa蛋白。过表达circRNA_0000994和SLC8A1-605aa可一致地抑制NMVCs中心脏肥大相关基因表达,而抑制SLC8A1-605aa表达则可逆转circRNA_0000994对NMVCs肥大表型的抑制作用。结论:circRNA_0000994通过翻译SLC8A1-605aa蛋白发挥抑制心肌细胞肥大的作用。 展开更多

关键词 心脏肥大 环状rna_0000994 溶质载体家族8成员A1

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敲低环状RNA类网格蛋白重链1(circ_CLTCL1)表达抑制人睾丸支持细胞增殖 被引量：1

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作者 史圣甲 孙建华 +2 位作者 刘项 王磊 张洲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期828-834,共7页

目的检测环状RNA_类网格蛋白重链1(circ_CLTCL1)在梗阻性和非梗阻性无精子症患者睾丸组织中的表达,评估敲低circ_CLTCL1表达对支持细胞增殖和凋亡的影响,探索其调控细胞增殖的潜在机制。方法采用一步法实时定量PCR检测梗阻性和非梗阻性... 目的检测环状RNA_类网格蛋白重链1(circ_CLTCL1)在梗阻性和非梗阻性无精子症患者睾丸组织中的表达,评估敲低circ_CLTCL1表达对支持细胞增殖和凋亡的影响,探索其调控细胞增殖的潜在机制。方法采用一步法实时定量PCR检测梗阻性和非梗阻性无精子症患者睾丸组织及其来源支持细胞circ_CLTCL1和呈线性结构的CLTCL1表达。利用小干扰RNA技术沉默睾丸支持细胞中circ_CLTCL1的表达。采用CCK-8法和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法检测支持细胞增殖能力、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。采用生物信息学软件筛选与circ_CLTCL1具有结合潜能的微小RNA(miRNA)。荧光素酶报告实验检测circ_CLTCL1与miR-202结合能力。结果梗阻性无精子症睾丸组织及其来源支持细胞中circ_CLTCL1表达高于非梗阻性组,而CLTCL1在两组间表达水平无明显差异。敲低circ_CLTCL1的表达后,支持细胞增殖能力降低,凋亡水平升高、S期细胞比例减少。circ_CLTCL1可吸附结合miR-202。结论circ_CLTCL1在非梗阻性无精子症患者睾丸组织及支持细胞中低表达,可通过结合miR-202促进支持细胞增殖而抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 支持细胞 环状rna_类网格蛋白重链1(circ_CLTCL1) 无精子症 微小rna 细胞增殖

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氧化苦参碱调控肝细胞癌进展枢纽基因的筛选及其作用机制 被引量：3

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作者 钟国强 林岩 +3 位作者 黄桂柳 潘丽英 韦丽军 黄赞松 《山东医药》 CAS 2023年第11期31-36,共6页

目的基于生物信息学方法筛选氧化苦参碱调控肝细胞癌(HCC)进展的枢纽基因,并分析其circ_0031450相关的内源竞争RNA(ceRNA)机制。方法通过circBANK、miRMAP及miRWALK等多个数据库预测并下载整理circ_0031450的miRNA靶点,利用Cytoscape软... 目的基于生物信息学方法筛选氧化苦参碱调控肝细胞癌(HCC)进展的枢纽基因,并分析其circ_0031450相关的内源竞争RNA(ceRNA)机制。方法通过circBANK、miRMAP及miRWALK等多个数据库预测并下载整理circ_0031450的miRNA靶点,利用Cytoscape软件构建ceRNA网络。通过STRING网站构建蛋白—蛋白互作(PPI)网络文件,并导入Cytoscape软件进行可视化,利用MCODE插件筛选关键基因并创建其子网络。利用R软件基于CIBERSORT算法,筛选免疫浸润相关性最显著的基因LCK作为枢纽基因。对LCK进行免疫检查点相关性分析及基因集富集分析(GSEA分析);通过GEPIA2数据库预测与LCK相关的前150个基因,通过R软件对其进行基因本体论(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析;比较LCK高、低表达组的总生存期(OS),对氧化苦参碱及LCK进行分子对接。结果共得到3个miRNA(miR-548c-5p、miR-548d-5p及miR-648)作为circ_0031450的靶点,得到28个mRNA作为miRNA及氧化苦参碱的靶点,并成功构建ceRNA网络、PPI网络及关键基因子网络。LCK表达与HCC免疫微环境中多个免疫细胞及免疫检查点的表达具有相关性(P均<0.05)。GSEA分析及GO、KEGG富集分析结果显示,LCK主要参与T、B淋巴细胞的激活、分化及其受体信号、免疫应答、细胞因子相互作用及趋化因子信号等生物学过程或通路。LCK高表达组OS高于LCK低表达组(P<0.05),氧化苦参碱与LCK具有良好的结合活性。结论氧化苦参碱可能通过作用于LCK并间接调控circ_0031450相关ceRNA机制,参与改变HCC的免疫微环境,从而影响HCC的发生与进展。 展开更多

关键词 氧化苦参碱 内源竞争rna LCK 环状rna_0031450 微小rna-548c-5p 免疫微环境 肝细胞癌

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