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肠道菌群通过去乙酰化酶3激活单磷酸腺苷活化的蛋白激酶/雷帕霉素信号通路对脓毒症心肌炎和心肌细胞线粒体损伤的影响 被引量:2
1
作者 林爽 翟京宇 罗彬 《临床内科杂志》 CAS 2024年第4期278-281,共4页
目的探讨正常肠道粪菌移植(FMT)对脓毒症心肌炎和心肌细胞线粒体损伤的改善作用与机制。方法将40只SD大鼠随机分为盲肠结扎穿孔术(CLP)建立的脓毒症模型组(CLP组)、假手术对照组(sham组)、FMT治疗组(CLP+FMT组)及FMT联合去乙酰化酶3(SIR... 目的探讨正常肠道粪菌移植(FMT)对脓毒症心肌炎和心肌细胞线粒体损伤的改善作用与机制。方法将40只SD大鼠随机分为盲肠结扎穿孔术(CLP)建立的脓毒症模型组(CLP组)、假手术对照组(sham组)、FMT治疗组(CLP+FMT组)及FMT联合去乙酰化酶3(SIRT3)抑制剂(3-TYP)治疗组(CLP+FMT+3-TYP组),每组各10只。采用HE染色观察大鼠心肌组织的病理变化,采用ELISA检测大鼠血液中IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平,采用Western blot检测大鼠心肌组织中IL-1β、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、去乙酰化酶3(SIRT3)、单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、雷帕霉素(mTOR)及p-mTOR表达水平,采用透射电镜观察大鼠心肌细胞线粒体形态,采用流式细胞术分析大鼠心肌细胞的线粒体膜电位变化。结果与sham组比较,CLP组、CLP+FMT组、CLP+FMT+3-TYP组心肌组织SIRT3和p-mTOR表达水平均显著降低,而心肌组织p-AMPK和血液中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达水平均显著增加;与CLP组比较,CLP+FMT组心肌组织SIRT3和p-mTOR的表达水平均显著增加,而心肌组织p-AMPK和血液中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达水平均显著降低;与CLP+FMT组比较,CLP+FMT+3-TYP组心肌组织SIRT3和p-mTOR的表达水平均显著降低,而心肌组织中p-AMPK和血液中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达水平均显著增加;与sham组比较,CLP组线粒体膜电位的红/绿荧光强度比值显著下降;与CLP组比较,CLP+FMT组线粒体膜电位的红/绿荧光强度比值显著增加;与CLP+FMT组比较,CLP+FMT+3-TYP组线粒体膜电位的红/绿荧光强度比值显著下降(P<0.05)。结论肠道菌群通过SIRT3激活AMPK/mTOR信号通路对脓毒症心肌炎和心肌细胞线粒体损伤均有改善作用。 展开更多
关键词 肠道粪菌移植 脓毒症心肌炎 线粒体损伤 去乙酰化酶3 磷酸活化的蛋白激酶/雷帕霉素信号通路
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柴归汤调控环磷酸腺苷/蛋白激酶B信号通路干预原发性高血压大鼠作用机制
2
作者 许欣颖 胡小海 朱红俊 《陕西中医》 CAS 2024年第3期313-317,共5页
目的:探讨柴归汤对原发性高血压大鼠环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶B(AKT)通路表达的影响,分析其降压机制。方法:Wistar-Kyoto大鼠作为空白组。将原发性高血压大鼠随机分为模型组、贝那普利组,柴归汤入肠成分组、柴归汤高剂量组、柴归汤中... 目的:探讨柴归汤对原发性高血压大鼠环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶B(AKT)通路表达的影响,分析其降压机制。方法:Wistar-Kyoto大鼠作为空白组。将原发性高血压大鼠随机分为模型组、贝那普利组,柴归汤入肠成分组、柴归汤高剂量组、柴归汤中剂量组、柴归汤低剂量组,并进行对应药物的灌胃治疗。给药28 d,检测各组大鼠血压;采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中cAMP水平及主动脉组织蛋白激酶B(AKT)、蛋白激酶A(PKA);应用PEX100磷酸化抗体芯片进行磷酸化检测分析。结果:给药后,柴归汤高剂量组、柴归汤中剂量组、柴归汤低剂量组、柴归汤入肠成分组及贝那普利组在干预4周后的收缩压、舒张压均降低(P<0.01)。与空白组相比,柴归汤入肠成分组cAMP、柴归汤低剂量组、柴归汤中剂量组PKA及贝那普利组AKT均有所升高(均P<0.05)。与模型组相比,柴归汤入肠成分组血清cAMP水平,柴归汤高剂量组、柴归汤中剂量组主动脉组织AKT水平,柴归汤中剂量组主动脉组织PKA水平均升高(均P<0.05)。结论:柴归汤可降低原发性高血压大鼠血压,上调大鼠血清cAMP、主动脉组织AKT、PKA水平,其降压机制可能与cAMP/AKT、cAMP/PKA级联介导信号相关。 展开更多
关键词 高血压 柴归汤 磷酸 蛋白激酶B 蛋白激酶A 一氧化氮合酶
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虫草素调节环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号通路对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡的影响
3
作者 李娟 赵宗寒 胡纯厚 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2024年第12期1489-1494,共6页
目的探讨虫草素对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌细胞凋亡及环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信号通路的影响。方法采用10μmol/L的ISO处理H9c2细胞,再用1、5、10、15μg... 目的探讨虫草素对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌细胞凋亡及环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信号通路的影响。方法采用10μmol/L的ISO处理H9c2细胞,再用1、5、10、15μg/ml的虫草素处理H9c2细胞,检测细胞增殖情况。将H9c2细胞分为对照组、ISO组、低虫草素组、高虫草素组、联合组。流式细胞术检测细胞凋亡率;鬼笔环肽染色检测心肌细胞表面积;定量聚合酶链反应检测肥大相关基因心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、B型钠尿肽(brain natriuretic peptide,BNP)、β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)表达。酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β以及cAMP表达;Western blot法检测B淋巴细胞瘤(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、PKA表达。结果与对照组比较,ISO组细胞凋亡率[(33.89±3.68)%vs(2.57±0.26)%]、细胞表面积、TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3、ANP、BNP、β-MHC表达明显升高,Bcl-2、cAMP、PKA表达明显降低(P<0.05)。与ISO组比较,低虫草素组和高虫草素组细胞凋亡率[(20.58±1.93)%、(7.58±0.76)%vs(33.89±3.68)%]、细胞表面积、TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3、ANP、BNP、β-MHC表达明显降低,Bcl-2、cAMP、PKA表达明显升高(P<0.05)。与高虫草素组比较,联合细胞凋亡率[(28.69±2.82)%vs(7.58±0.76)%]、细胞表面积、TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3、ANP、BNP、β-MHC表达明显升高,Bcl-2、cAMP、PKA表达明显降低(P<0.05)。结论虫草素通过激活cAMP/PKA信号通路抑制ISO诱导的心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 虫草素 细胞凋亡 异丙肾上 肌细胞 环磷酸腺苷/蛋白激酶a信号通路
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牡荆素调节环磷酸腺苷激活的交换蛋白1/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ信号对大鼠心肌梗死后心肌肥大与纤维化的作用
4
作者 赵天昊 袁慧 +3 位作者 麻祖青 陶星宇 张宇 董六一 《心脑血管病防治》 2024年第2期10-15,共6页
目的探讨牡荆素调控环磷酸腺苷激活的交换蛋白1(Epac1)/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路抑制大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞肥大与纤维化的作用。方法24只SD大鼠随机分为:假手术组、MI组、牡荆素组。大鼠进行心脏左前降支结扎建... 目的探讨牡荆素调控环磷酸腺苷激活的交换蛋白1(Epac1)/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路抑制大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞肥大与纤维化的作用。方法24只SD大鼠随机分为:假手术组、MI组、牡荆素组。大鼠进行心脏左前降支结扎建立MI模型,假手术组只穿线不结扎。检测大鼠心功能变化;苏木精-伊红(HE)染色观察心脏病理学变化,天狼星红染色观察心脏纤维化,电镜观察心肌线粒体损伤情况;Western Blot检测Epac1、CaMKⅡ等蛋白变化。结果(1)大鼠MI 4周后,与假手术组比较MI组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)和左心室射血分数(LVEF)均降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室舒张末期内径(LVIDd)和舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)增加(P<0.01),牡荆素组大鼠心脏LVIDs、LVIDd、LVPWs和LVPWd较MI组降低,LVFS和LVEF均升高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)牡荆素可降低大鼠心脏重量指数(P<0.01),并减小MI组大鼠心肌细胞横截面积,同时减轻大鼠左心室壁心肌纤维化程度(P<0.01),牡荆素组大鼠心肌胞浆内线粒体肿胀较MI组减轻,线粒体形态较完整,空泡形成较少;(3)Western Blot结果显示牡荆素抑制大鼠MI后Epac1激活(P<0.01),抑制其下游CaMKⅡ激活与细胞外调节激酶的磷酸化(P<0.01),同时可抑制B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)上调(P<0.05),上调Bcl-2(P<0.01),抑制凋亡蛋白裂解半胱天冬酶3(Cleaved-Caspase 3)的活化(P<0.05)。结论牡荆素可通过抑制Epac1/CaMKⅡ通路,改善大鼠MI后心脏功能,抑制心肌肥大和纤维化。 展开更多
关键词 牡荆素 心肌缺血 凋亡 磷酸激活的交换蛋白1 钙/钙调素依赖性蛋白激酶
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腺苷酸活化蛋白激酶信号通路介导巨噬细胞功能参与动脉粥样硬化调节作用的研究进展
5
作者 华成俊 陈玉善 +3 位作者 王婷婷 宗永华 靳博远 李世龙 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期842-845,共4页
机体的细胞始终处于新陈代谢的过程中,以此来满足自身对能量的需求,并对营养的摄取和利用做出相应响应。如今,绝大多数真核生物已经进化出了一种高度适应性的复合体,即腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK),用来感知细胞的三磷酸腺苷(ATP)水平[1]... 机体的细胞始终处于新陈代谢的过程中,以此来满足自身对能量的需求,并对营养的摄取和利用做出相应响应。如今,绝大多数真核生物已经进化出了一种高度适应性的复合体,即腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK),用来感知细胞的三磷酸腺苷(ATP)水平[1]。该通路参与许多重要的生理反应,当能量不足时,一磷酸腺苷或二磷酸腺苷会与AMPK结合,然后激活该通路。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 巨噬细胞 磷酸 酸活化蛋白激酶 信号通路
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环磷酸鸟苷-腺苷合成酶和干扰素基因刺激因子信号通路与缺血性脑卒中相关性的研究进展
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作者 王亚敏 吕转 +4 位作者 陈露露 安雨琦 高静 张钰涵 冯晓东 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期110-112,共3页
缺血性脑卒中(IS)是一种常见的神经系统损伤疾病,其特征是局部脑血流暂时或永久减少,其高发病率、高致残率和不良预后给社会带来了沉重负担[1]。迄今为止,治疗急性IS的方法主要是静脉注射重组组织型纤溶酶原激活剂,然而由于重组组织型... 缺血性脑卒中(IS)是一种常见的神经系统损伤疾病,其特征是局部脑血流暂时或永久减少,其高发病率、高致残率和不良预后给社会带来了沉重负担[1]。迄今为止,治疗急性IS的方法主要是静脉注射重组组织型纤溶酶原激活剂,然而由于重组组织型纤溶酶原激活剂的治疗窗口狭窄,只有少数患者接受溶栓治疗. 展开更多
关键词 卒中 免疫系统 磷酸-合成酶 干扰素基因刺激因子 信号通路
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奥氮平介导环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子/酪氨酸蛋白激酶受体B通路对精神分裂模型大鼠的神经修复作用
7
作者 姚素华 鄢骏 +2 位作者 谢芳 林春华 黄争春 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期660-667,共8页
目的 探讨奥氮平通过对环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)通路的影响对精神分裂模型大鼠的神经修复作用。方法 将60只大鼠纳入对照组、模型组、奥氮平低、中、高剂量组,各组均10只... 目的 探讨奥氮平通过对环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)通路的影响对精神分裂模型大鼠的神经修复作用。方法 将60只大鼠纳入对照组、模型组、奥氮平低、中、高剂量组,各组均10只。模型组、奥氮平低、中、高剂量组大鼠进行MK-801腹腔注射0.2 mg/(kg·d),对照组注射等量生理盐水。模型建立成功24 h后,奥氮平低、中、高剂量组分别以0.5、1.0、1.5 mg/(kg·d)奥氮平溶液灌胃,对照组、模型组同剂量生理盐水灌胃。按照共济失调和刻板行为标准对大鼠行为学进行评分;Morris水迷宫实验评定大鼠认知功能及学习能力;ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;观察海马组织病理学变化;检测海马区细胞凋亡及CREB/BDNF/TrkB通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠共济失调、刻板行为评分、TNF-α、IL-6表达、细胞凋亡率极显著增加(P<0.01),奥氮平低、中剂量组显著增加(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠跨越平台次数、目标象限停留时间、CREB、磷酸化CREB(p-CREB)、磷酸化TrkB(p-TrkB)、TrkB、BDNF蛋白相对表达极显著减少(P<0.01),奥氮平低、中剂量组显著减少(P<0.05)。与模型组比较,奥氮平低、中剂量组跨越平台次数、目标象限停留时间显著增加(P<0.05),奥氮平高剂量组极显著增加(P<0.01)。模型组以及奥氮平低剂量组中海马细胞肿大明显、细胞核破碎分裂、固缩,组织排列杂乱;奥氮平中、高剂量组大鼠海马细胞中少见破碎分裂以及核固缩现象,整体组织与对照组大鼠相似。结论 奥氮平对精神分裂症模型大鼠的神经修复作用机制涉及到改善大鼠认知功能受损、保护大鼠海马神经细胞以及激活CREB/BDNF/TrkB信号通路的表达。 展开更多
关键词 奥氮平 磷酸反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子/酪氨酸蛋白激酶受体B通路 精神分裂 神经修复 酶联免疫吸附测定 大鼠
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电针对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱尿流动力学及逼尿肌垂体腺苷酸环化酶激活肽/环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号通路的影响 被引量:31
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作者 艾坤 刘琼 +5 位作者 许明 刘继生 祁芳 易细芹 瞿启睿 张泓 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期728-734,741,共8页
目的:观察电针对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱尿流动力学及逼尿肌组织中垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)/环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路的影响,探讨电针改善骶上脊髓损伤休克期后逼尿肌反射亢进型膀胱功能的可能机制。方法:60... 目的:观察电针对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱尿流动力学及逼尿肌组织中垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)/环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路的影响,探讨电针改善骶上脊髓损伤休克期后逼尿肌反射亢进型膀胱功能的可能机制。方法:60只雌性SD大鼠按随机数字表法分为空白组12只、假手术组12只、造模组36只。造模组采用改良胸(T)10脊髓横断法制作神经源性膀胱模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组12只、电针治疗组12只。电针治疗组造模后第19天于"次髎""中极""三阴交"给予电针干预,20 min/次,1次/d,连续治疗7 d。干预结束后各组行尿流动力学检测,HE染色法观察膀胱逼尿肌组织病理形态学变化,免疫组织化学法检测逼尿肌PACAP38的表达,Western blot法检测逼尿肌PACAP38蛋白的相对表达量,PCR法测定PACAP mRNA表达,ELISA法测定逼尿肌cAMP、PKA含量。结果:与空白组和假手术组比较,模型组大鼠膀胱最大容量及膀胱顺应性均显著降低(P<0.01),膀胱基础压力和漏尿点压力显著升高(P<0.01);膀胱逼尿肌PACAP38阳性表达、蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.01,P<0.05), cAMP、PKA含量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,电针治疗组大鼠膀胱最大容量及膀胱顺应性明显升高(P<0.01);膀胱基础压力和漏尿点压力降低(P<0.05);膀胱逼尿肌PACAP38阳性表达、蛋白及mRNA表达水平明显升高(P<0.01,P<0.05),cAMP、PKA含量显著升高(P<0.05)。结论:电针"次髎""中极""三阴交"可改善脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱功能,其机制可能与电针上调膀胱逼尿肌中PACAP38、cAMP、PKA表达,激活PACAP/cAMP/PKA信号通路,从而促进逼尿肌舒张有关。 展开更多
关键词 电针 神经源性膀胱 垂体化酶激活肽 磷酸 蛋白激酶A 逼尿肌
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脑钠肽通过环磷酸鸟苷/蛋白激酶G信号通路对高血压降压效果及左心室肥厚逆转作用的机制研究
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作者 马宏恩 王鑫 +2 位作者 季朝红 张圆 魏文扬 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第10期1308-1312,1318,共6页
目的:探讨脑钠肽对高血压的降压效果以及左心室肥厚的改善作用,探究其可能的作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠被分为对照组、模型组、脑钠肽组、脑钠肽+PKG抑制剂(KT5823)组。其中对照组大鼠分离腹主动脉,但并不进行缩窄腹主动脉;其余... 目的:探讨脑钠肽对高血压的降压效果以及左心室肥厚的改善作用,探究其可能的作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠被分为对照组、模型组、脑钠肽组、脑钠肽+PKG抑制剂(KT5823)组。其中对照组大鼠分离腹主动脉,但并不进行缩窄腹主动脉;其余组大鼠均采用腹主动脉缩窄法构建高血压左心室肥厚大鼠模型;脑钠肽组每天通过微型泵以0.05μg/(kg·min)的速率连续静脉输注脑钠肽;脑钠肽+KT5823组通过微型泵输注相同剂量脑钠肽的同时以0.01μg/(kg·min)的速率连续静脉输注PKG抑制剂KT5823。各组大鼠造模前,以及造模(给药)后2、4周时,使用血压计测量大鼠的收缩压,并在造模(给药)后4周处死大鼠,分离心肌组织,称取左心室质量(LVW),测量左胫骨长度(TL),计算LVW/TL比值。使用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠心肌组织cGMP依赖性蛋白激酶Ⅰ(PKG-Ⅰ)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达情况;使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、Smad家族成员3(Smad3)、Ⅲ型胶原、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;使用马松实验(MASSON)检测各组大鼠心肌组织形态学变化。结果:与对照组比较,模型组大鼠收缩压、LVW/TL比值、心肌组织中TGF-β1、AngⅡ、Smad3、Ⅲ型胶原、ROS、MDA水平显著增加(均P<0.05),而PKG-Ⅰ、SOD水平显著降低(均P<0.05);与模型组比较,脑钠肽组大鼠收缩压、LVW/TL比值、心肌组织中TGF-β1、AngⅡ、Smad3、Ⅲ型胶原、ROS、MDA水平显著减少(均P<0.05),而PKG-Ⅰ、SOD水平显著上升(均P<0.05);与脑钠肽组比较,脑钠肽+KT5823组大鼠收缩压、LVW/TL比值、心肌组织中TGF-β1、AngⅡ、Smad3、Ⅲ型胶原、ROS、MDA水平显著增加(均P<0.05),而PKG-Ⅰ、SOD水平显著降低(均P<0.05)。同时KT5823可逆转脑钠肽对模型组大鼠心肌纤维化的改善作用。结论:脑钠肽可通过调控环磷酸鸟苷(cGMP)/环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶(PKG)信号通路降低高血压左心室肥厚大鼠血压,减轻其氧化应激水平,同时改善其左心室肥厚程度。 展开更多
关键词 高血压 左心室肥厚 脑钠肽 磷酸/蛋白激酶G信号通路 氧化应激
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蛋白质翻译后修饰对环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶功能的调控
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作者 申梦阳 路晨 +3 位作者 王怡 裴金勇 王洁 杨波 《新乡医学院学报》 CAS 2024年第8期701-705,共5页
环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子信号通路是细胞感知细胞质中异常存在的双链DNA的主要效应器,对于该信号通路的调节,可以通过调控细胞质内DNA识别受体环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶的功能来完成。近年来研究发现,蛋白质翻译后修... 环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子信号通路是细胞感知细胞质中异常存在的双链DNA的主要效应器,对于该信号通路的调节,可以通过调控细胞质内DNA识别受体环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶的功能来完成。近年来研究发现,蛋白质翻译后修饰,包括磷酸化、乙酰化、泛素化、甲基化、类泛素修饰等在固有免疫信号通路的调节中具有重要功能。本文就蛋白质翻译后修饰如何通过不同的机制对环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶的功能及其下游的信号通路产生多种多样的影响进行阐述。 展开更多
关键词 蛋白质翻译后修饰 磷酸-合成酶 信号转导 固有免疫
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环磷酸鸟苷/蛋白激酶G信号通路的激活与再灌注损伤挽救激酶信号通路的关系 被引量:5
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作者 潘国焰 林荣 +3 位作者 吴兵 洪美满 陈乘波 黄雪娥 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1438-1444,共7页
目的:观察脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)激活环磷酸鸟苷/蛋白激酶G(cyclic guanosine monophosphate/protein kinase G,cGMP/PKG)信号通路的心肌保护作用是否与细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase1... 目的:观察脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)激活环磷酸鸟苷/蛋白激酶G(cyclic guanosine monophosphate/protein kinase G,cGMP/PKG)信号通路的心肌保护作用是否与细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase1/2,ERK1/2)、磷酸酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)蛋白激酶的激活有关。方法:将84只新西兰兔随机分为7组(n=12):假手术组;对照组;BNP组;BNP+LY294002组(LY294002为PI3K抑制剂);LY294002组;BNP+PD98059组(PD98059为ERK1/2抑制剂);PD98059组。除了假手术组只开胸不结扎冠状动脉外,其余6组均于结扎左回旋支45 min后恢复左回旋支血流,进行再灌注180 min。全程观察血流动力学及心电变化;实验终末,各组随机抽取6只兔子心脏做左室梗死面积测定,采用伊文思蓝和氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积;每组另外6只兔子心脏取梗死边缘区组织,Western blot方法测定PAkt/Akt、P-ERK1/2/ERK1/2的表达。结果:心率(heart rate,HR)和平均动脉压(mean arterial blood pressure,MABP)在基线水平上无明显差异(P>0.05)。与基线水平相比,HR和MABP在缺血以及再灌注时期有明显下降(P<0.05),而在再灌注时期维持较稳定的水平。各组之间HR、MABP差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,BNP组心律失常发生率明显减少(P<0.003 125)。与BNP组比较,BNP+LY294002组、LY294002组、BNP+PD98059组及PD98059组心律失常明显增加(P<0.003 125),BNP+LY294002组和LY294002组,BNP+PD98059组和PD98059组差异无统计学意义(P>0.003 125);假手术组无心肌梗死。与对照组比较,BNP组心肌梗死范围明显减少(P<0.05)。与BNP组比较,BNP+LY294002组、LY294002组、BNP+PD98059组及PD98059组梗死面积明显增加(P<0.05)。BNP+LY294002组和LY294002组,BNP+PD98059组和PD98059组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,BNP组Akt、ERK1/2的磷酸化水平明显增加(P<0.05)。与BNP组相比,BNP+LY294002组Akt的磷酸化水平及BNP+PD98059组ERK1/2的磷酸化水平分别明显降低(P<0.05)。BNP+LY294002组和LY294002组Akt的磷酸化水平,BNP+PD98059组和PD98059组ERK1/2的磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BNP激活cGMP/PKG信号通路,对心肌缺血再灌注损伤产生保护作用,且该通路的激活与再灌注损伤挽救激酶通路的激活有关。 展开更多
关键词 心肌缺血再灌注损伤 磷酸 蛋白激酶G信号通路 再灌注损伤挽救激酶信号通路 磷酸酰肌醇-3-激酶 蛋白 酶B 细胞外调节蛋白激酶1 2
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从环磷酸腺苷-蛋白激酶A信号通路探讨复健片对脑梗死大鼠颈髓水平皮质脊髓束重塑的作用机制 被引量:2
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作者 刘维 张霞 +4 位作者 吴君璇 逄薛云 孙平 李雪 刘伟 《成都中医药大学学报》 2018年第2期4-7,126,共5页
目的:通过观测大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠颈髓水平cAMP-PKA通路分子表达变化,探讨MCAO模型大鼠颈髓水平皮质脊髓束重塑内源性启动机制及复健片可能的作用机制。方法:制备大脑中动脉闭塞(MACO)大鼠模型。通过横木行走实验(BWT)评定各... 目的:通过观测大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠颈髓水平cAMP-PKA通路分子表达变化,探讨MCAO模型大鼠颈髓水平皮质脊髓束重塑内源性启动机制及复健片可能的作用机制。方法:制备大脑中动脉闭塞(MACO)大鼠模型。通过横木行走实验(BWT)评定各组大鼠运动功能;ELISA法检测大鼠颈髓水平cAMP的表达变化;RT-qPCR检测复健片干预下模型大鼠颈髓不同时间点PKA-C mRNA的表达变化。结果:大鼠术后1 w、2 w末,与假手术相比,模型组和药物组均可高表达cAMP、PKA-C水平,且药物组表达高于模型组。同时,模型组和药物组BWT评分也有显著改善,药物组改善更为明显。结论:复健片可增加脑梗死大鼠颈髓水平cAMP、PKA-C表达水平,以更大限度地促进受损神经再生,这可能是其对脑梗死后神经功能恢复有促进作用的机制之一。 展开更多
关键词 磷酸 磷酸依赖性蛋白激酶A 皮质脊髓束重塑 复健片 大脑中动脉闭塞模型大鼠
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芍药苷调控环磷酸腺苷/蛋白激酶A/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白通路对脑卒中大鼠的影响 被引量:7
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作者 陈敬君 马贤聪 +2 位作者 杨泉 赵雯 王日升 《安徽医药》 CAS 2022年第6期1073-1078,I0001,共7页
目的探讨芍药苷调控环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路对脑卒中大鼠的影响。方法该研究起止时间为2019年12月至2020年12月。40只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、芍药苷组(灌胃30 mg/k... 目的探讨芍药苷调控环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路对脑卒中大鼠的影响。方法该研究起止时间为2019年12月至2020年12月。40只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、芍药苷组(灌胃30 mg/kg芍药苷)、H89组[腹腔注射1 mg/kg H89(PKA抑制剂)]、芍药苷+H89组(灌胃芍药苷后腹腔注射H89),除假手术组仅进行动脉分离,其余各组均构建缺血性脑卒中模型,模型构建成功后进行药物干预,持续给药2周,模型组、假手术组以生理盐水代替。根据Zea Longa评分法对各组大鼠进行神经功能缺损评分,Morris水迷宫测定大鼠记忆行为学能力,酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测大鼠血清炎性因子水平,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织病理学变化,蛋白质印迹法检测大鼠脑组织cAMP/PKA/CREB通路相关蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组脑组织受损严重,大鼠神经功能缺损评分、血清中炎性因子水平显著升高(P<0.05),记忆行为学能力、脑组织中cAMP[(0.31±0.05)比(1.03±0.23)]、PKA[(0.30±0.06)比(1.05±0.24)]、磷酸化CREB[(0.29±0.08)比(1.02±0.23)]蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,芍药苷组脑组织受损得到缓解,神经功能缺损评分、血清中炎性因子水平显著降低(P<0.05),记忆行为学能力、脑组织中cAMP[(0.79±0.20)比(0.31±0.05)]、PKA[(0.75±0.19)比(0.30±0.06)]、磷酸化CREB[(0.77±0.23)比(0.29±0.08)]蛋白表达显著升高(P<0.05);与芍药苷组相比,芍药苷+H89组大鼠脑组织受损加重,神经功能缺损评分、血清中炎性因子水平显著升高(P<0.05),记忆行为学能力、脑组织中cAMP[(0.60±0.13)比(0.79±0.20)]、PKA[(0.53±0.12)比(0.75±0.19)]、磷酸化CREB[(0.55±0.14)比(0.77±0.23)]蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论芍药苷可保护脑卒中大鼠的神经功能,可能是通过激活cAMP/PKA/CREB通路实现的。 展开更多
关键词 芍药属 磷酸/蛋白激酶A/磷酸反应元件结合蛋白 卒中 大鼠 Sprague-Dawley
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慢性铅染毒致雄性小鼠肾损伤的机制:基于环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号通路 被引量:2
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作者 刘端亚 余君 +3 位作者 樊勇胜 李聪 汪春红 苏键镁 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期616-621,共6页
[背景]铅染毒可引起肾脏损伤。研究表明环磷酸腺苷/蛋白激酶A(cAMP/PKA)信号通路可通过调节氧化酶活性介导活性氧过量产生,进而引起氧化应激和细胞凋亡。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)途径是肾脏活性氧的主要来源之一。[目的]探讨铅... [背景]铅染毒可引起肾脏损伤。研究表明环磷酸腺苷/蛋白激酶A(cAMP/PKA)信号通路可通过调节氧化酶活性介导活性氧过量产生,进而引起氧化应激和细胞凋亡。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)途径是肾脏活性氧的主要来源之一。[目的]探讨铅是否通过cAMP/PKA途径调节肾脏中NADPH氧化酶4(NOX4)活性引起肾脏损伤。[方法]30只SPF级ICR雄性小鼠随机分为对照组和铅暴露组,每组15只。通过自由饮水的方式进行铅暴露,乙酸铅浓度分别为0、200 mg·L^-1。连续染毒90 d后麻醉小鼠进行心脏采血,取肾脏、称重,计算脏器系数。采用石墨炉原子吸收分光光度仪检测血液和肾脏中铅含量,HE染色观察肾脏组织形态学改变,TUNEL法检测肾细胞凋亡水平;通过试剂盒检测肾组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)活力,谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和cAMP含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法测定PKA、NOX4以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax和caspase3 mRNA相对表达水平。[结果]两组小鼠体重和日饮水量差异无统计学意义。铅暴露组小鼠肾脏系数[(0.89±0.02)%]、血铅[(100.13±17.23)μg·L^-1]和肾铅[(2.58±0.21)μg·g^-1]水平均高于对照组[(0.78±0.02)%、(1.88±0.50)μg·L^-1、(0.04±0.01)μg·g^-1](均P<0.05)。铅暴露组小鼠肾脏近曲小管和肾小球形态学损伤明显,细胞凋亡率高于对照组[(0.013±0.003)%、(0.006±0.002)%];肾脏中GSH水平、T-SOD和Cu/Zn-SOD活性降低(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05);Bcl-2 mRNA相对表达量及Bcl-2/Bax值下降,caspase3 mRNA相对表达量则增高(P<0.05);肾组织中cAMP含量、PKA和NOX4 mRNA相对表达量均升高,且NOX4 mRNA相对表达量与cAMP含量之间呈正相关(r=0.486,P<0.05)。[结论]铅可改变小鼠氧化酶NOX4活性,引起肾脏组织损伤,可能与cAMP/PKA信号通路有关。 展开更多
关键词 肾脏 磷酸/蛋白激酶A NADPH氧化酶4 氧化损伤
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羧甲基壳聚糖对体外培养许旺细胞环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路的影响
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作者 贺斌 陶海鹰 +2 位作者 卫爱林 李孝海 陈任 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第43期6930-6934,共5页
背景:已有研究证实羧甲基壳聚糖对许旺细胞增殖、分泌具有促进作用,但其对许旺细胞内环磷腺苷介导蛋白激酶A信号通路的影响仍需要进一步研究。目的:观察羧甲基壳聚糖对大鼠许旺细胞内环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路的影响。方法:取第2代新... 背景:已有研究证实羧甲基壳聚糖对许旺细胞增殖、分泌具有促进作用,但其对许旺细胞内环磷腺苷介导蛋白激酶A信号通路的影响仍需要进一步研究。目的:观察羧甲基壳聚糖对大鼠许旺细胞内环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路的影响。方法:取第2代新生大鼠许旺细胞,以1×109 L-1的细胞浓度接种于6孔板,分4组培养,空白对照组加入PBS,实验组分别加入50,100,200 mg/L的羧甲基壳聚糖溶液培养。培养24 h后,检测许旺细胞内环磷腺苷浓度、蛋白激酶A活性及环磷腺苷反应元件结合蛋白m RNA的表达。结果与结论:与空白对照组比较,羧甲基壳聚糖呈剂量依赖性提高许旺细胞内环磷腺苷浓度(P<0.05),呈剂量依赖性增强许旺细胞内蛋白激酶A活性(P<0.05),呈剂量依赖性提高许旺细胞内环磷腺苷反应元件结合蛋白m RNA的表达(P<0.05)。表明羧甲基壳聚糖可增加许旺细胞内环磷腺苷浓度、促进蛋白激酶A活性,从而激活环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路。 展开更多
关键词 壳聚糖 许旺细胞 细胞增殖 AMP依赖性蛋白激酶 组织工程 生物材料 材料相容性 羧甲基壳聚糖 /蛋白激酶a信号通路 反应元件结合蛋白 国家自然科学基金
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宰后羊肉中环腺苷酸依赖蛋白激酶活性变化和影响因子研究
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作者 宋旭博 摆玉蔷 +5 位作者 王振宇 李欣 侯成立 方菲 余群力 张德权 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1210-1217,共8页
为解析不同品质肉中环腺苷酸依赖蛋白激酶(PKA)活性随宰后时间的变化,以羊背最长肌为试验材料,根据宰后1 d的剪切力、a^(*)值和蒸煮损失将样品分为高、低品质组,每组9个样本。研究不同品质组在宰后1 h、12 h、1 d、3 d、5 d时PKA活性、... 为解析不同品质肉中环腺苷酸依赖蛋白激酶(PKA)活性随宰后时间的变化,以羊背最长肌为试验材料,根据宰后1 d的剪切力、a^(*)值和蒸煮损失将样品分为高、低品质组,每组9个样本。研究不同品质组在宰后1 h、12 h、1 d、3 d、5 d时PKA活性、钠离子含量、环磷酸腺苷(cAMP)含量、三磷酸腺苷(ATP)含量和肌浆蛋白磷酸化水平的变化。结果表明,宰后1 h和12 h低品质组PKA活性显著高于高品质组;宰后12 h和3 d高品质组的ATP含量显著高于低品质组;宰后1 d低品质组ATP含量显著高于高品质组;高品质组cAMP含量显著高于低品质组;宰后1、3、5 d低品质组肌浆蛋白磷酸化水平显著低于高品质组(P<0.05)。PKA活性在宰后1 h、12 h、1 d时显著低于5 d(P<0.05)。相关性分析结果表明,PKA活性与钠离子含量、肌浆蛋白磷酸化水平呈正相关,与cAMP、ATP含量呈显著负相关。以上结果表明,PKA活性受肉品质和宰后时间影响,PKA活性随宰后时间延长而增强,低品质组肉样PKA活性较高,PKA活性与钠离子含量呈显著正相关。本研究结果为肉品加工过程中通过改变钠离子浓度调控PKA活性,进而改善肉品质提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 酸依赖蛋白激酶 钠离子 磷酸 磷酸
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术前应用乌司他丁对小鼠肝大部分切除术后肝功能及一磷酸腺苷活化蛋白激酶信号通路的影响 被引量:1
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作者 訾雪剑 姚辉 +2 位作者 伏晓 仇毓东 贾文俊 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第15期2363-2372,共10页
目的:探讨术前应用乌司他丁对小鼠70%肝切除术后肝功能及一磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)信号通路的影响.方法:♂ICR小鼠48只,体质量25-30 g,随机均分为70%肝切除对照组和乌司他丁组.... 目的:探讨术前应用乌司他丁对小鼠70%肝切除术后肝功能及一磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)信号通路的影响.方法:♂ICR小鼠48只,体质量25-30 g,随机均分为70%肝切除对照组和乌司他丁组.检测术后第1、3、5、7天肝功能指标,残肝组织病理学改变以及AMPK蛋白活化情况.结果:与对照组比较,乌司他丁组术后第1、3天谷草转氨酶水平较低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,乌司他丁组术后第3天乳酸脱氢酶水平有所降低,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,Western blot结果显示乌司他丁组肝切除术后早期AMPK磷酸化较晚;与对照组比较,Western blot结果显示乌司他丁组肝切除术后胆盐输出泵蛋白(bile salt export protein,BSEP)水平较高.结论:术前应用乌司他丁可以保护术后肝功能,降低肝损伤,促进术后肝功能的恢复.其机制可能与维持肝细胞能量供应以及促进肝细胞极化有关. 展开更多
关键词 肝切除 乌司他丁 肝功能 磷酸活化蛋白激酶信号通路
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骨癌痛吗啡耐受疼痛模型大鼠脊髓缝隙连接蛋白43的表达情况及其对环磷酸腺苷/蛋白激酶A通路、炎症的影响 被引量:2
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作者 冯鹏玖 张爱民 +3 位作者 苏明 蔡海 赵秀霞 冉娅 《广西医学》 CAS 2019年第23期3017-3022,共6页
目的探讨骨癌痛吗啡耐受疼痛(BPT)模型大鼠脊髓缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达情况及其对环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路、炎症的影响。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、骨癌痛组、BPT组、BPT+阴性对照-小干扰RNA(siRNA)组(BPT-CS... 目的探讨骨癌痛吗啡耐受疼痛(BPT)模型大鼠脊髓缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达情况及其对环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路、炎症的影响。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、骨癌痛组、BPT组、BPT+阴性对照-小干扰RNA(siRNA)组(BPT-CS组)、BPT+Cx43-siRNA组(BPT-CXS组)。在大鼠左后肢胫骨上端进行穿刺后,假手术组骨髓腔内注射生理盐水,其余4组髓腔内注射鼻咽癌HONE1细胞建立骨癌痛模型。机械刺激回缩阈值(MWT)显著改变后,BPT组、BPT-CS组和BPT-CXS组大鼠给予皮下注射吗啡建立BPT模型,而骨癌痛组皮下注射等体积的生理盐水。MWT显著改变后,BPT组、BPT-CXS组、BPT-CS组大鼠分别鞘内注射生理盐水、Cx43-siRNA、阴性对照-siRNA。MWT显著改变后处死各组大鼠取L4~6脊髓组织,检测Cx43、cAMP、PKA蛋白表达水平,以及白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果(1)骨癌痛建模后7 d,其他4组大鼠的MWT均低于假手术组(均P<0.05);在建立BPT模型后9 d起,BPT-CXS组、BPT组、BPT-CS组大鼠的MWT均低于骨癌痛组(均P<0.05);在siRNA干预后6~9 d,BPT-CXS组的MWT低于骨癌痛组,但高于BPT组和BPT-CS组(均P<0.05),而BPT组和BPT-CS组之间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)与假手术组比较,其余4组大鼠脊髓Cx43、cAMP、PKA蛋白表达水平以及TNF-α、IL-1β水平增加(均P<0.05);与骨癌痛组比较,BPT组、BPT-CS组和BPT-CXS组以上指标表达水平增加(均P<0.05);与BPT组比较,BPT-CXS组的以上指标表达水平降低(均P<0.05)。结论BPT模型大鼠脊髓Cx43蛋白表达上调,抑制其表达可能是逆转BPT的重要途径;脊髓Cx43通过调节cAMP/PKA通路进而促进促炎性因子IL-1β和TNF-α表达,可能是BPT发生的关键机制之一。 展开更多
关键词 骨癌痛 吗啡耐受 缝隙连接蛋白43 磷酸 蛋白激酶A 炎症 小干扰核糖核酸 大鼠
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电针对骶上脊髓损伤后逼尿肌亢进大鼠逼尿肌中环腺苷酸和蛋白激酶A含量及肌球蛋白轻链激酶磷酸化的影响 被引量:12
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作者 艾坤 许明 +6 位作者 刘琼 邓石峰 刘继生 祁芳 易细芹 瞿启睿 张泓 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2021年第2期137-144,共8页
目的探讨电针改善骶上脊髓损伤休克期后逼尿肌反射亢进的可能机制。方法60只雌性Sprague-Dawley大鼠按随机数字表抽取12只作为空白组,12只作为假手术组,剩余36只采用改良T10脊髓横断法制作神经源性膀胱模型,从符合要求的模型大鼠中二次... 目的探讨电针改善骶上脊髓损伤休克期后逼尿肌反射亢进的可能机制。方法60只雌性Sprague-Dawley大鼠按随机数字表抽取12只作为空白组,12只作为假手术组,剩余36只采用改良T10脊髓横断法制作神经源性膀胱模型,从符合要求的模型大鼠中二次随机抽取12只作为模型组,12只作为电针组。造模术后第19天取次髎、中极、三阴交行电针干预,连续治疗7 d后行尿流动力学检测,ELISA法测定逼尿肌环腺苷酸(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)含量、Western blotting法测定逼尿肌磷酸化肌球蛋白轻链激酶(p-MLCK)水平。结果与空白组和假手术组比较,模型组膀胱最大容量及膀胱顺应性明显降低(P<0.01),膀胱基础压和漏尿点压明显升高(P<0.01);逼尿肌cAMP和PKA含量明显降低(P<0.01),逼尿肌p-MLCK水平明显降低(P<0.01)。与模型组比较,电针组膀胱最大容量及膀胱顺应性明显增加(P<0.01),膀胱基础压和漏尿点压降低(P<0.05);逼尿肌内cAMP和PKA含量升高(P<0.05),逼尿肌p-MLCK水平升高(P<0.05)。结论电针次髎、中极、三阴交穴可改善完全性脊髓损伤后逼尿肌亢进大鼠膀胱功能,其作用机制可能与电针上调逼尿肌中cAMP、PKA表达,使MLCK磷酸化而失活,从而促进逼尿肌舒张有关。 展开更多
关键词 电针 骶上脊髓损伤 神经源性膀胱 磷酸 蛋白激酶A 肌球蛋白轻链激酶 逼尿肌亢进 大鼠
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蛋白激酶A部分通过环磷腺苷效应元件结合蛋白信号防止足细胞凋亡 被引量:2
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作者 向芃 谢可炜 +2 位作者 姜金星 倪兆慧 顾乐怡 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期6-12,共7页
目的 探讨转录因子环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)在蛋白激酶A(PKA)信号防止足细胞损伤中的作用。方法 使用条件永恒的小鼠足细胞株(5P12)14~25代分化的足细胞进行研究,细胞分为对照组、阿霉素(ADR)处理组(ADR组)和PKA特异... 目的 探讨转录因子环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)在蛋白激酶A(PKA)信号防止足细胞损伤中的作用。方法 使用条件永恒的小鼠足细胞株(5P12)14~25代分化的足细胞进行研究,细胞分为对照组、阿霉素(ADR)处理组(ADR组)和PKA特异性激动剂(pCPT-cAMP)预孵育+ADR刺激组(pCPT-cAMP+ADR组)。CCK-8法检测细胞毒性;Western blotting检测足细胞内被切割的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)表达;siRNA抑制细胞内CREB表达,免疫荧光共聚焦显微镜和Western blotting检测磷酸化CREB(p-CREB)的定位和表达。结果 ADR诱导足细胞内cleaved caspase-3表达升高,pCPT-cAMP预孵育可显著降低ADR诱导的cleaved caspase-3表达上升。ADR使足细胞减少为原来的(40.45±6.78)%,pCPT-cAMP预孵育使细胞数量恢复为原来的(69.8±5.48)%。Western blotting检测结果显示:pCPT-cAMP分别预孵育5、15 min可使足细胞总蛋白中p-CREB表达分别上升(105.64±38.21)%和(98.61±41.03)%,细胞核内p-CREB的表达上升(114.52±11.28)%和(118.84±14.44)%。免疫荧光共聚焦显微镜检测显示pCPT-cAMP主要引起细胞核内p-CREB表达上升。siRNA可使足细胞CREB蛋白表达下降为原来的(25.1±2.44)%,且pCPT-cAMP预孵育不能防止ADR诱导的cleaved caspase-3表达升高。结论 转录因子CREB介导了PKA信号对足细胞的保护作用。 展开更多
关键词 足细胞 磷酸 蛋白激酶A 效应元件结合蛋白 凋亡
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