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玻璃化冷冻时间对冻胚移植妊娠结局的影响
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作者 屈潇潇 哈灵侠 +1 位作者 杜玉冬 王金娟 《宁夏医学杂志》 CAS 2024年第2期108-112,共5页
目的探讨不同玻璃化冷冻时间对冻胚复苏及移植妊娠结局的影响。方法回顾性分析进行冻胚移植(FET)的550例患者的临床资料,根据胚胎不同玻璃化冷冻时间分为A、B、C、D、E共5组,A组239例,玻璃化冷冻时间≤3个月;B组138例,3个月<玻璃化... 目的探讨不同玻璃化冷冻时间对冻胚复苏及移植妊娠结局的影响。方法回顾性分析进行冻胚移植(FET)的550例患者的临床资料,根据胚胎不同玻璃化冷冻时间分为A、B、C、D、E共5组,A组239例,玻璃化冷冻时间≤3个月;B组138例,3个月<玻璃化冷冻时间≤6个月;C组74例,6个月<玻璃化冷冻时间≤1年;D组75例,1年<玻璃化冷冻时间≤5年;E组24例,玻璃化冷冻时间>5年。比较不同冷冻时间胚胎移植的一般临床资料、胚胎复苏结局及临床妊娠结局。结果相较于A、B、C组,D组胚胎存活率、胚胎完好率显著降低(P<0.05);相较于A、B组,E组的胚胎存活率、胚胎完好率及解冻后/冷冻前优质胚胎率均显著降低(P<0.05);E组的胚胎完好率较C组显著降低(P<0.05);E组的解冻后/冷冻前优质胚胎率显著低于D组(P<0.05)。各组间移植优质胚胎后的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率、流产率及早产率差异无统计学意义。移植优质卵裂期胚胎后,E组早产率较B组显著增高(P<0.05)。移植优质囊胚后,C组早产率较A组显著增高(P<0.05)。结论在冻胚移植周期中,较长的玻璃化冷冻时间对胚胎的复苏结局存在不利影响,但在移植至少一枚优质冷冻胚胎后,不同冷冻时间对胚胎移植临床妊娠结局并无影响。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 冻胚移植 复苏结局 妊娠结局
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甘氨酸对小鼠完整卵巢组织玻璃化冷冻的影响
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作者 张凯杰 杨升 +1 位作者 朱珍珍 刘大虎 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期249-255,共7页
本实验旨在探究与传统冷冻液相比,昆明小鼠完整卵巢组织玻璃化冷冻液中添加甘氨酸对组织内卵母细胞解冻后细胞形态、组织内凋亡基因表达的影响。选用15只7~8周龄雌性昆明小鼠,取卵巢分为3组,即冷冻液组、血清+冷冻液组、甘氨酸+冷冻液组... 本实验旨在探究与传统冷冻液相比,昆明小鼠完整卵巢组织玻璃化冷冻液中添加甘氨酸对组织内卵母细胞解冻后细胞形态、组织内凋亡基因表达的影响。选用15只7~8周龄雌性昆明小鼠,取卵巢分为3组,即冷冻液组、血清+冷冻液组、甘氨酸+冷冻液组(在冷冻液、解冻液中添加甘氨酸使其终浓度为1 mmol/L),每组10个卵巢。对解冻后卵巢组织分别体外恢复3 h以及体外培养4 d,采用western blot法检测各组凋亡蛋白(cleaved-caspase 3、Bcl-2、Bax)表达情况以及荧光定量PCR检测凋亡相关mRNA(GAPDH、Bcl-2、Bax)的表达情况。结果表明:甘氨酸+冷冻液组解冻体外恢复3 h后卵母细胞形态正常率高于冷冻液组(P<0.05),也高于血清+冷冻液组但差异不显著;甘氨酸+冷冻液组的cleaved-caspase 3表达情况低于其他2组(P<0.05),Bcl-2/Bax凋亡蛋白表达水平高于其他2组(P<0.05);甘氨酸+冷冻液组GAPDH基因相对表达量高于其他2组(P<0.05)。甘氨酸+冷冻液组Bcl-2/Bax基因比值高于血清+冷冻液组、冷冻液组(P<0.05)。结果表明,添加1 mmol/L甘氨酸可以保护解冻后卵母细胞的形态结构以及抑制卵巢组织内细胞凋亡水平。 展开更多
关键词 甘氨酸 卵巢组织 玻璃化冷冻 冷冻保护剂
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生育力保存中玻璃化冷冻载杆的研究趋势及监管挑战
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作者 张坤智 晁园 +3 位作者 孙晓晴 俞卉 王越 齐伟明 《医疗卫生装备》 CAS 2023年第1期81-86,共6页
阐述了生育力保存过程中关键医疗器械玻璃化冷冻载杆的演化历程,分析了现有的“开放式冷冻、开放式保存”“开放式冷冻、封闭式保存”及“封闭式冷冻、封闭式保存”3种玻璃化冷冻载杆的优势与弊端,提出了玻璃化冷冻载杆的改良趋势并提... 阐述了生育力保存过程中关键医疗器械玻璃化冷冻载杆的演化历程,分析了现有的“开放式冷冻、开放式保存”“开放式冷冻、封闭式保存”及“封闭式冷冻、封闭式保存”3种玻璃化冷冻载杆的优势与弊端,提出了玻璃化冷冻载杆的改良趋势并提供了研究思路,立足监管挑战剖析了玻璃化冷冻载杆监管关注点,为提升生育力保存的有效利用率及国产辅助生殖医疗器械的发展提供了助力。 展开更多
关键词 生育力保存 玻璃化冷冻 玻璃化冷冻载杆 辅助生殖 卵母细胞保存
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3种玻璃化冷冻系统在分裂期胚胎冷冻应用中的效果研究
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作者 梅玲珑 郭涛 +1 位作者 杨有 肖准 《中国妇幼健康研究》 2023年第11期82-86,共5页
目的比较银质封闭式玻璃化冷冻系统(SSCVS)、开放式冷冻薄膜(Cryotop)和传统封闭式麦管(CPS)对第3天分裂期胚胎的冷冻保存效果。方法选择2017年1月至2018年10月在四川大学华西第二医院行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕中由3原核(PN)发... 目的比较银质封闭式玻璃化冷冻系统(SSCVS)、开放式冷冻薄膜(Cryotop)和传统封闭式麦管(CPS)对第3天分裂期胚胎的冷冻保存效果。方法选择2017年1月至2018年10月在四川大学华西第二医院行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕中由3原核(PN)发育的废弃的优质胚胎300个,将胚胎随机分配到3个冷冻组:SSCVS组、Cryotop组和CPS组,每组为100个胚胎;通过胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率和囊胚形成率,比较SSCVS、Cryotop及CPS对分裂期胚胎冷冻的保存效果。结果SSCVS组和Cryotop组及CPS组的分裂期胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率和囊胚形成率比较,差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为26.190、9.028、24.129,P<0.05)。SSCVS组与Cryotop组的分裂期胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率和囊胚形成率比较差异均无统计学意义(P>0.05);SSCVS组的分裂期胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率和囊胚形成率均高于CPS组(χ^(2)值分别为13.455、6.792、18.755,P<0.05);Cryotop组的分裂期胚胎冻融后存活率、完整胚胎存活率、囊胚形成率均高于CPS组(χ^(2)值分别为15.457、5.498、15.153,P<0.05)。结论通过研究建立了适合应用于临床的人分裂期胚胎的新型封闭式玻璃化冷冻系统SSCVS,其将为提高冻融胚胎妊娠率,同时预防生物污染,并提高活产率和后代安全性提供了新的技术支持。 展开更多
关键词 封闭式玻璃化冷冻系统 分裂期胚胎 玻璃化冷冻 慢速冷冻
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玻璃化冷冻及慢速程序化冷冻对未成熟睾丸组织的保护效果分析
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作者 马朦惠 苏文龙 +4 位作者 吕林艳 陈海城 方丛 孙鹏 刘贵华 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期776-782,共7页
目的:探究比较目前常见主流睾丸组织冷冻方法学,即玻璃化冷冻与慢速程序化冷冻,筛选适宜的睾丸组织冷冻方法。方法:分别收集3周龄小鼠及<2岁龄青春期前食蟹猴的睾丸组织,将其剪碎至6~26 mm^(3),均分为3组:新鲜组、玻璃化冷冻组和慢... 目的:探究比较目前常见主流睾丸组织冷冻方法学,即玻璃化冷冻与慢速程序化冷冻,筛选适宜的睾丸组织冷冻方法。方法:分别收集3周龄小鼠及<2岁龄青春期前食蟹猴的睾丸组织,将其剪碎至6~26 mm^(3),均分为3组:新鲜组、玻璃化冷冻组和慢速程序化冷冻组,在冷冻5~7 d后复苏冷冻睾丸组织,使用HE染色、免疫荧光染色、TUNEL染色和Western印迹对冷冻-复苏睾丸组织进行评估。结果:①在C57BL6/J小鼠睾丸组织中,慢速程序化冷冻组精原干细胞标志物UCHL1表达量高于玻璃化冷冻组,凋亡细胞(TUNEL+细胞)含量低于玻璃化冷冻组。②食蟹猴睾丸组织中,慢速程序化冷冻组精原干细胞标志物UCHL1、细胞增殖标志物PCNA的表达量高于玻璃化冷冻组。结论:玻璃化冷冻和慢速程序化冷冻均可成功保存青春期前未成熟的小鼠及食蟹猴睾丸组织。但是在玻璃化冷冻保存中,对于冻存体积为6~26 mm^(3)的睾丸组织存在更多冷冻损伤区域,可能影响睾丸组织中精原干细胞的冷冻储存效果。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 慢速程序化冷冻 男性生育保存 精原干细胞
原文传递
固体表面玻璃化冷冻方法降温结晶特性数值研究
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作者 朱文欣 赵芷慧 +3 位作者 黄永华 程锦生 陈威 李铮 《制冷学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期160-166,共7页
固体表面玻璃化冷冻方法(SSV)及其变式在细胞冻存领域的应用越来越广泛,但多基于实验和经验,缺乏仿真分析和物理机理解释,影响相关技术的通用化设计和研发效率。本文以质量分数35%的丙二醇溶液为对象,考虑冷冻过程的非等温结晶特性,建... 固体表面玻璃化冷冻方法(SSV)及其变式在细胞冻存领域的应用越来越广泛,但多基于实验和经验,缺乏仿真分析和物理机理解释,影响相关技术的通用化设计和研发效率。本文以质量分数35%的丙二醇溶液为对象,考虑冷冻过程的非等温结晶特性,建立了耦合非等温结晶源项的SSV方法传热模型,研究了预冷温度、样品体积和形状对实施SSV方法的液体温度与结晶特性的影响。结果表明:该模型可以有效揭示冷冻过程中液滴样品内部的温度及结晶度变化规律。样品结晶危险区位于远离低温表面处,且最易结晶点不一定位于液滴顶点。预冷温度越低,冷冻样品体积越小,形状越扁平,样品降温速率越快,越容易实现玻璃化冷冻。 展开更多
关键词 细胞冻存 固体表面玻璃化冷冻 预冷 快速降温 非等温结晶
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抗冷冻蛋白Ⅲ对玻璃化冷冻猪GV期卵母细胞及其DNA的保护作用
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作者 董胤余 王勇杰 +4 位作者 刘可可 王欣雨 唐非台 杜倩笙 王晓丽 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期658-663,共6页
为了寻找冷冻液中最适合的抗冷冻蛋白Ⅲ(AFPⅢ)添加浓度,并探索AFPⅢ对玻璃化冷冻卵母细胞、活性氧(ROS)及其DNA损伤的保护作用进行评价。本研究分别在冷冻液中添加250、500、750、1000、1200 ng/m L AFPⅢ,通过冷冻液处理和冷冻-复苏... 为了寻找冷冻液中最适合的抗冷冻蛋白Ⅲ(AFPⅢ)添加浓度,并探索AFPⅢ对玻璃化冷冻卵母细胞、活性氧(ROS)及其DNA损伤的保护作用进行评价。本研究分别在冷冻液中添加250、500、750、1000、1200 ng/m L AFPⅢ,通过冷冻液处理和冷冻-复苏筛选出最合适的AFPⅢ添加浓度,荧光探针检测卵母细胞中活性氧的含量,彗星电泳检测卵母细胞DNA的变化。结果显示,冷冻液中添加500 ng/m L AFPⅢ对玻璃化冷冻猪GV期卵母细胞的保护效果最佳;冷冻液中添加AFPⅢ的冷冻组ROS含量显著低于冷冻对照组(P<0.05);添加AFPⅢ的冷冻组尾部DNA百分比(Tail DNA%)和Olive尾矩值(OTM)显著低于冷冻对照组(P<0.05)。结果表明,AFPⅢ可以提高玻璃化冷冻后卵母细胞的体外发育能力,降低冷冻-复苏后卵母细胞ROS含量,缓解玻璃化冷冻引起的卵母细胞DNA损伤。 展开更多
关键词 冷冻蛋白Ⅲ 卵母细胞 玻璃化冷冻 活性氧 DNA损伤
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胎牛血清在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用研究 被引量:1
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作者 相德才 李水英 +6 位作者 张斌 张彦 梁家充 吕春荣 洪琼花 权国波 吴国权 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期606-615,共10页
【目的】研究胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用。【方法】本试验以体外培养第5天的猪孤雌激活囊胚为材料,将新鲜和冷冻囊胚分别在含10%FBS(V/V)的胚胎培养液中继续培养48 h,即分为新鲜组(Fre... 【目的】研究胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用。【方法】本试验以体外培养第5天的猪孤雌激活囊胚为材料,将新鲜和冷冻囊胚分别在含10%FBS(V/V)的胚胎培养液中继续培养48 h,即分为新鲜组(Fresh)、新鲜+FBS组(Fresh+FBS)、冷冻组(Vitrified)、冷冻+FBS组(Vitrified+FBS)。观察各组囊胚的扩张和孵化能力,检测胚胎的细胞膜损伤、凋亡细胞数目、总细胞数目、胞内活性氧(ROS)水平、线粒体活性以及发育相关基因的表达水平。【结果】与Fresh和Vitrified组相比,Fresh+FBS和Vitrified+FBS组的完全扩张率、孵化率和囊胚细胞总数均显著提高(P<0.05),细胞膜损伤率和细胞凋亡率均显著降低(P<0.05)。与Fresh组相比,Vitrified组ROS水平显著升高(P<0.05),Fresh+FBS和Vitrified+FBS组ROS水平均显著降低(P<0.05)。Vitrified+FBS组的线粒体活性显著高于Vitrified组(P<0.05)、显著低于Fresh+FBS组(P<0.05),与Fresh组无显著差异(P>0.05)。相比于Fresh组,Vitrified组POU结构域与类转录因子1(POU5F1)表达水平显著上升(P<0.05)、过氧化氢酶(CAT)表达水平显著下降(P<0.05)。增殖细胞核抗原(PCNA)、DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、BCL2相关X蛋白(BAX)/BCL2L1的表达水平在Fresh和Vitrified组之间均无显著性差异(P>0.05)。Fresh+FBS和Vitrified+FBS组中PCNA、SOD 1和CAT的表达水平显著高于Fresh和Vitrified组(P<0.05)。【结论】体外培养第5天的新鲜和冷冻猪孤雌囊胚在10%FBS中继续培养,其发育能力及胚胎质量均得到明显改善。 展开更多
关键词 囊胚 玻璃化冷冻 胎牛血清 胚胎质量
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抗冷冻蛋白Ⅲ对玻璃化冷冻小鼠卵母细胞线粒体的影响
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作者 刘可可 薛梦琦 +4 位作者 唐非台 杜倩笙 王欣雨 董胤余 王晓丽 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3180-3188,共9页
【目的】探索抗冷冻蛋白Ⅲ(antifreeze proteinⅢ,AFPⅢ)对玻璃化冷冻小鼠卵母细胞线粒体的保护作用。【方法】以5~8周龄昆明雌性小鼠为试验材料,将收集的小鼠MⅡ期卵母细胞随机分为空白对照组、冷冻对照组(经过玻璃化冷冻-解冻过程)和... 【目的】探索抗冷冻蛋白Ⅲ(antifreeze proteinⅢ,AFPⅢ)对玻璃化冷冻小鼠卵母细胞线粒体的保护作用。【方法】以5~8周龄昆明雌性小鼠为试验材料,将收集的小鼠MⅡ期卵母细胞随机分为空白对照组、冷冻对照组(经过玻璃化冷冻-解冻过程)和AFPⅢ添加组(在冷冻平衡液及冷冻液中均添加500 ng/mL AFPⅢ),利用线粒体绿色荧光探针(Mito-Tracker green,MTG)检测线粒体分布及含量,JC-1荧光染色检测线粒体膜电位,溶酶体红色荧光探针(Lyso-Tracker red,LTR)检测线粒体与溶酶体共定位,二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)检测活性氧(ROS)水平,ATP Assay Kit检测线粒体ATP含量。【结果】与空白对照组相比,玻璃化冷冻后小鼠卵母细胞的线粒体含量显著降低,部分线粒体呈现异常的散点状分布,且线粒体-溶酶体共定位情况明显增多,线粒体膜电位显著降低(P<0.05);同冷冻对照组相比,AFPⅢ添加组的小鼠卵母细胞线粒体含量显著升高,异常分布的线粒体和线粒体-溶酶体共定位情况减少,线粒体膜电位显著升高(P<0.05)。与空白对照相比,玻璃化冷冻后小鼠卵母细胞的ROS含量显著升高而ATP含量显著降低(P<0.05);与冷冻对照组相比,AFPⅢ添加组ROS含量显著下降而ATP含量显著升高(P<0.05)。【结论】AFPⅢ有助于改善玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的氧化应激反应,对冻融卵母细胞线粒体具有保护作用。 展开更多
关键词 冷冻蛋白Ⅲ(AFPⅢ) 线粒体 卵母细胞 玻璃化冷冻
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添加HA纳米颗粒对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻后发育能力的影响
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作者 王晓静 赵世玉 +5 位作者 刘毅恒 刘家齐 徐志谦 李晓霞 栗颖华 禹学礼 《黑龙江动物繁殖》 2023年第1期7-13,共7页
为了探究羟基磷灰石(HA)纳米颗粒对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响,试验以牛卵巢中GV期卵母细胞作为试验材料,将不同粒径的HA纳米颗粒添加到玻璃化冷冻液中,进行超声分散检测。首先,以卵母细胞存活率和成熟率为指标,将0、0.01%、0.... 为了探究羟基磷灰石(HA)纳米颗粒对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响,试验以牛卵巢中GV期卵母细胞作为试验材料,将不同粒径的HA纳米颗粒添加到玻璃化冷冻液中,进行超声分散检测。首先,以卵母细胞存活率和成熟率为指标,将0、0.01%、0.05%、0.1%HA纳米颗粒分别添加到玻璃化冷冻液Ⅰ(VSⅠ)和玻璃化冷冻液Ⅱ(VSⅡ)中,不经冷冻直接进行毒性测试;然后,以形态正常率、成熟率、卵裂率和囊胚率为指标测定卵母细胞玻璃化冷冻后的发育能力;最后检测含有0.05%HA纳米颗粒的VSⅡ对冷冻后卵母细胞活性氧水平和线粒体膜电位水平的影响。结果表明:不同浓度HA纳米颗粒对牛GV期卵母细胞均无明显毒性;VSⅡ+0.05%HA纳米颗粒组卵母细胞冷冻后的形态正常率、成熟率、卵裂率、囊胚率显著高于VSⅠ+0.05%HA纳米颗粒组(P<0.05);VSⅡ+0.05%HA纳米颗粒组卵母细胞的活性氧水平显著低于VSⅡ组(P<0.05);VSⅡ+0.05%HA纳米颗粒组卵母细胞的线粒体膜电位水平显著高于VSⅡ组(P<0.05)。说明在VSⅡ中加入0.05%HA纳米颗粒能显著降低牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻后活性氧水平并提高其线粒体膜电位水平,从而可能降低了玻璃化冷冻对细胞的损伤。 展开更多
关键词 GV期卵母细胞 羟基磷灰石纳米颗粒 玻璃化冷冻 活性氧 线粒体活性
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囊胚玻璃化冷冻对小鼠及其子一代的行为学影响与发育评估
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作者 高原 王生存 +4 位作者 刘晓军 丁梦倩 曾旭辉 张小宁 郭丰 《南通大学学报(医学版)》 2023年第5期416-420,共5页
目的:观察C57BL/6小鼠囊胚的玻璃化冷冻对复苏移植后连续两代小鼠在生理发育、行为学特征以及生殖力方面的影响,探讨玻璃化冷冻技术的长期安全性。方法:超排卵4周龄C57BL/6雌鼠,与雄鼠交配后收集囊胚进行玻璃化冷冻,观察冷冻囊胚复苏移... 目的:观察C57BL/6小鼠囊胚的玻璃化冷冻对复苏移植后连续两代小鼠在生理发育、行为学特征以及生殖力方面的影响,探讨玻璃化冷冻技术的长期安全性。方法:超排卵4周龄C57BL/6雌鼠,与雄鼠交配后收集囊胚进行玻璃化冷冻,观察冷冻囊胚复苏移植出生的小鼠(冻胚组)和子一代小鼠生长发育、行为学特征和生殖力,以新鲜囊胚移植出生的小鼠为对照(鲜胚组)。结果:冻胚组和鲜胚组小鼠在生长发育、学习记忆、运动平衡、社交能力、生殖力及各器官发育上差异均无统计学意义(均P>0.05),两组的子一代各项检测指标差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论:小鼠囊胚玻璃化冷冻对子代生长发育和行为没有明显影响,可作为辅助生殖的安全胚胎冷冻方式。 展开更多
关键词 囊胚 玻璃化冷冻 生长发育 行为学 学习记忆 小鼠
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褪黑素对无渗透性冷冻保护剂的精子玻璃化冷冻影响
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作者 邵帅 石学颖 +3 位作者 王洋 丁涛 姜经航 江梅 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第5期498-502,共5页
目的探讨褪黑素在无渗透性冷冻保护剂微量精子玻璃化冷冻技术中的研究。方法选取2022年4-9月在荆门市人民医院生殖医学中心就诊的30例男性患者的精液样本。每份标本分为常规冷冻组、微滴冷冻组、无保护剂微滴冷冻组、褪黑素+无保护剂微... 目的探讨褪黑素在无渗透性冷冻保护剂微量精子玻璃化冷冻技术中的研究。方法选取2022年4-9月在荆门市人民医院生殖医学中心就诊的30例男性患者的精液样本。每份标本分为常规冷冻组、微滴冷冻组、无保护剂微滴冷冻组、褪黑素+无保护剂微滴冷冻组。通过计算机辅助精液分析法(CASA)观察冷冻前及冷冻后精子前向运动(PR),伊红-苯胺黑染色检测精子存活率,改良巴氏染色检测正常形态率以及顶体完整率,低渗肿胀试验检测质膜完整率,SCD法检测DNA完整性检测,试剂盒检测MDA、SOD、GSH-Px水平等。结果微滴冷冻组、无保护剂微滴冷冻组复苏后PR、复苏率及复苏后存活率高于常规冷冻组(P<0.05);褪黑素+无保护剂微滴冷冻组复苏后PR和复苏率高于无保护剂微滴冷冻组(P<0.05)。褪黑素+无保护剂微滴冷冻组复苏后正常形态率和顶体完整性明显高于其他3组(P<0.05)。微滴冷冻组、无保护剂微滴冷冻组复苏后质膜完整率高于常规冷冻组(P<0.05);褪黑素+无保护剂微滴冷冻组复苏后质膜完整率高于微滴冷冻组(P<0.05),而DFI明显低于微滴冷冻组(P<0.05)。与常规冷冻组相比,无保护剂微滴冷冻组、褪黑素+无保护剂微滴冷冻组MDA明显降低(P<0.05),SOD以及GSH-Px明显升高(P<0.01);与微滴冷冻组相比,褪黑素+无保护剂微滴冷冻组MDA明显降低(P<0.05)。褪黑素+无保护剂微滴冷冻组SOD、GSH-Px较其他3组明显升高(P<0.05)。结论无渗透性冷冻保护剂添加褪黑素能够提高复苏后精子的PR、活力、正常形态、DFI、质膜和顶体完整性,主要与降低MDA,增加SOD以及GSH-Px表达有关。 展开更多
关键词 褪黑素 精子 冷冻保护剂 玻璃化冷冻
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囊胚玻璃化冷冻预平衡时间对辅助生殖妊娠结局的影响
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作者 张留光 李宁 +1 位作者 李玉虎 蔡雪想 《中国现代医生》 2023年第19期4-8,14,共6页
目的探讨囊胚激光皱缩后缩短玻璃化冷冻预平衡时间对临床妊娠及新生儿结局的影响。方法回顾性分析2018年1月至2021年12月于海口玛丽医院进行囊胚复苏移植患者的临床资料,从中筛选501例患者518个移植周期。根据实验室囊胚玻璃化冷冻技术... 目的探讨囊胚激光皱缩后缩短玻璃化冷冻预平衡时间对临床妊娠及新生儿结局的影响。方法回顾性分析2018年1月至2021年12月于海口玛丽医院进行囊胚复苏移植患者的临床资料,从中筛选501例患者518个移植周期。根据实验室囊胚玻璃化冷冻技术标准操作程序修订前后的预平衡时间将其分为A组(9~10min)和B组(7~8min),比较两组间的妊娠结局和新生儿结局。结果两组患者的年龄、移植胚胎数、卵泡刺激素、体质量指数、不孕年限、原发不孕比例、移植日内膜厚度和内膜方案比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组的囊胚存活率、着床率、临床妊娠率、活产率、早期流产率、多胎妊娠率、母体并发症比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组的新生儿性别比、孕周、早产儿比例、出生体质量、低出生体重儿、巨大儿、剖宫产、出生缺陷比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论囊胚激光皱缩后,缩短玻璃化冷冻预平衡时间不影响囊胚复苏移植的妊娠结局。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 囊胚 时间 妊娠结局
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牙鲆胚胎玻璃化冷冻技术研究 被引量:12
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作者 田永胜 陈松林 严安生 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期105-110,共6页
对名优经济鱼类牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎的玻璃化冷冻技术方法进行了研究.筛选出了适合于牙鲆胚胎平衡和培养的基础液BS2,对牙鲆不同时期胚胎在玻璃化液VS2中的耐受能力进行了研究,随着平衡时间的延长,胚胎成活率逐渐降低,4-5... 对名优经济鱼类牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎的玻璃化冷冻技术方法进行了研究.筛选出了适合于牙鲆胚胎平衡和培养的基础液BS2,对牙鲆不同时期胚胎在玻璃化液VS2中的耐受能力进行了研究,随着平衡时间的延长,胚胎成活率逐渐降低,4-5对肌节期、16-20对肌节期、尾芽期表现出对玻璃化液较强的适应能力.对洗脱液的种类和浓度进行了筛选,结果显示0.125mol/L蔗糖洗脱成活率最高.在室温(21~22℃)和6℃下分别对牙鲆不同时期胚胎在VS1中的成活率进行了比较研究,结果显示出15-20对肌节期在室温下的成活率高于低温,其它时期胚胎低温下的成活率高于室温.利用VS4、VS2、VS3分别对牙鲆尾芽期、肌效应期、出膜前期胚胎进行玻璃化冷冻保存,取得了5粒成活胚,4粒孵化出膜,成活时间为14~67h. 展开更多
关键词 牙鲆 成活率 芽期 胚胎玻璃化冷冻技术 经济鱼类 玻璃化冷冻技术 不同时期 VS 筛选 洗脱液
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改良玻璃化冷冻法对小鼠卵母细胞影响的研究 被引量:1
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作者 朱元 艾丹 +1 位作者 钟丽珍 王长华 《江西医药》 CAS 2020年第1期19-21,共3页
目的探讨改良玻璃化冷冻法对小鼠卵母细胞复苏率和解冻后胚胎发育潜能的影响。方法以小鼠卵母细胞为实验材料,分别采用改良和传统玻璃化冷冻方法冻存小鼠卵母细胞,通过解冻后卵子复苏率、受精率、卵裂率及优胚率等分析判断冻存效果。结... 目的探讨改良玻璃化冷冻法对小鼠卵母细胞复苏率和解冻后胚胎发育潜能的影响。方法以小鼠卵母细胞为实验材料,分别采用改良和传统玻璃化冷冻方法冻存小鼠卵母细胞,通过解冻后卵子复苏率、受精率、卵裂率及优胚率等分析判断冻存效果。结果改良玻璃化冷冻组的复苏率、卵裂率及优胚率均高于传统玻璃化冷冻组(P<0.05),两组的受精率无显著性差异(P>0.05)。结论相较于传统玻璃化冷冻方法,改良玻璃化冷冻法更有优势,值得推广。 展开更多
关键词 改良玻璃化冷冻 传统玻璃化冷冻 小鼠卵母细胞 受精率 优胚率
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猪卵母细胞、胚胎玻璃化冷冻初步研究(续上期)
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作者 张德福 刘东 +3 位作者 王邵凯 王少兵 芮荣 汤琳琳 《中国畜禽种业》 2005年第12期45-47,共3页
关键词 猪卵母细胞 玻璃化冷冻保存 冷冻效果 体外受精 早期胚胎 冷冻过程 孵化囊胚 基础液 玻璃化冷冻 存活率
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OPS法玻璃化冷冻牛卵母细胞的研究 被引量:33
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作者 朱士恩 曾申明 +3 位作者 吴通义 孟庆刚 张忠诚 陈永福 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期700-704,T005,共6页
用自己现用现配的玻璃化溶液 (EFS4 0、EFS5 0和EDFS30、EDFS4 0 )对二步平衡后的牛体外培养的卵母细胞进行OPS(openpulledstraw)法冷冻保存研究。体外分别培养 6h或 2 2h的牛卵母细胞冷冻解冻后再经 18h或2h培养后 ,经体外受精 ,最高... 用自己现用现配的玻璃化溶液 (EFS4 0、EFS5 0和EDFS30、EDFS4 0 )对二步平衡后的牛体外培养的卵母细胞进行OPS(openpulledstraw)法冷冻保存研究。体外分别培养 6h或 2 2h的牛卵母细胞冷冻解冻后再经 18h或2h培养后 ,经体外受精 ,最高囊胚发育率分别达到 12 %和 17% ;经化学孤雌激活后 ,最高囊胚发育率分别达到2 2 %和 2 4 % ,与对照组 (33% )差异不显著 (P >0 .0 5 )。 展开更多
关键词 OPS法 玻璃化冷冻 牛卵母细胞
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绵羊体内外受精胚胎玻璃化冷冻保存 被引量:13
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作者 朱士恩 曾申明 +2 位作者 安晓荣 张忠诚 陈永福 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期302-305,共4页
用 EFS4 0溶液对绵羊体内外受精的早期囊胚进行了玻璃化冷冻保存的研究。经卵母细胞体外成熟、体外受精和体外培养获得的早期囊胚 ,分别作如下处理 :( A) 1 0 %EG中预处理 5min后 ,在 EFS4 0平衡 3 0 s(两步法 ) ;( B) EFS4 0中平衡 1 m... 用 EFS4 0溶液对绵羊体内外受精的早期囊胚进行了玻璃化冷冻保存的研究。经卵母细胞体外成熟、体外受精和体外培养获得的早期囊胚 ,分别作如下处理 :( A) 1 0 %EG中预处理 5min后 ,在 EFS4 0平衡 3 0 s(两步法 ) ;( B) EFS4 0中平衡 1 min(一步法 ) ;( C) EFS4 0中平衡 2 min(一步法 )。然后投入液氮中冷冻保存 ,解冻胚胎的继续发育率分别为 80 %、78%和 50 %,A、B2组的结果与对照组 ( 88%)无显著性差异 ( P >0 .0 5)。经超数排卵获得的体内受精早期囊胚用两步法冷冻保存 ,解冻后胚胎发育继续率为 89%,与对照组( 93 %)也无显著性差异 ( P >0 .0 5) 展开更多
关键词 体外受精 早期囊胚 玻璃化冷冻 绵羊 EFS40
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牛胚胎玻璃化冷冻保存研究初报 被引量:14
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作者 桑润滋 朱士恩 +2 位作者 郑德富 田树军 张忠诚 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 1999年第5期24-25,共2页
关键词 胚胎 冷冻保存 玻璃化冷冻
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玻璃化冷冻方法中冷冻保护剂及制冷速度对家兔卵母细胞纺锤体的影响 被引量:7
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作者 蔡学泳 陈贵安 +2 位作者 廉颖 郑晓英 彭红梅 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期566-570,共5页
目的:探讨玻璃化冷冻方法中冷冻保护剂及制冷速度对家兔第二次减数分裂中期卵母细胞纺锤体的影响。方法:以冷冻环为载体,单用乙二醇(ethylene glycol,EG)或乙二醇与二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide,DMSO)联合作冷冻保护剂,用直投... 目的:探讨玻璃化冷冻方法中冷冻保护剂及制冷速度对家兔第二次减数分裂中期卵母细胞纺锤体的影响。方法:以冷冻环为载体,单用乙二醇(ethylene glycol,EG)或乙二醇与二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide,DMSO)联合作冷冻保护剂,用直投液氮或使用玻璃化冷冻仪高速制冷冷冻家兔卵母细胞;解冻2h 后固定并免疫荧光法染色纺锤丝及染色体;用共聚焦扫描显微镜观察纺锤体形态。结果:在单用 EG 以及 EG 和 DMSO 联合直投液氮的方案中,纺锤体损伤较严重,但在 EG 和 DMSO 联合应用并采用玻璃化冷冻仪提高制冷速度的方案中,纺锤体形态正常的比例与对照组相似 结论:玻璃化冷冻方法中采用冷冻保护剂联合及采用玻璃化冷冻仪高速制冷对保持解冻后家兔卵母细胞纺锤体形态效果最好。 展开更多
关键词 冷冻保护剂 纺锤体 联合 家兔 玻璃化冷冻 单用 卵母细胞 体形 减数分裂 DMSO
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