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甘薯卷叶病毒复制相关蛋白部分基因克隆及分析 被引量:3
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作者 张成玲 赵永强 +3 位作者 孙厚俊 杨冬静 徐振 谢逸萍 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期298-303,共6页
为明确甘薯卷叶病毒基因的分子特性及其变异,从江苏省徐州市表现卷叶、黄化等症状的甘薯上获得5个分离物(SPLCV1-1、SPLCV2-2、SPLCV3-1、SPLCV3-2、SPLCV4-1),利用PCR方法扩增克隆了这5个分离物的AC1部分基因序列,进行分析。结果表明... 为明确甘薯卷叶病毒基因的分子特性及其变异,从江苏省徐州市表现卷叶、黄化等症状的甘薯上获得5个分离物(SPLCV1-1、SPLCV2-2、SPLCV3-1、SPLCV3-2、SPLCV4-1),利用PCR方法扩增克隆了这5个分离物的AC1部分基因序列,进行分析。结果表明,扩增到的5个分离物基因序列均为452个碱基,核苷酸序列一致率较高,为91.8%~99.8%,氨基酸序列一致率为94.0%~100.0%,且氨基酸序列的变异集中在143~166位点。在构建的系统进化树上,SPLCV分离物分为2个组,其中组Ⅰ包括日本、韩国、印度、巴西、美国及中国的部分分离物,本研究所得到的4个分离物也位于该组中,其中SPLCV2-2、SPLCV3-1和本研究室2012年得到的江苏省邳州港上分离物SPLCV5-1聚为一簇;组Ⅱ分离物均为中国分离物,且本研究得到的分离物SPLCV3-2也位于该组中。 展开更多
关键词 甘薯卷叶病毒 AC1基因 克隆 序列分析
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甘薯卷叶病毒江苏分离物基因组全长序列测定及其外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达 被引量:8
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作者 乔贞贞 秦艳红 +4 位作者 乔奇 张德胜 田雨婷 高洁 张振臣 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第4期86-89,共4页
为了制备甘薯卷叶病毒(SPLCV)的特异性抗体,克隆了甘薯卷叶病毒江苏分离物SPLCV(JS∶XZ∶3-2)的全长基因,并对其基因结构及分子变异情况进行分析,同时对外壳蛋白(CP)基因进行了克隆和表达。利用PCR方法扩增并克隆了SPLCV(JS∶XZ∶3-2)... 为了制备甘薯卷叶病毒(SPLCV)的特异性抗体,克隆了甘薯卷叶病毒江苏分离物SPLCV(JS∶XZ∶3-2)的全长基因,并对其基因结构及分子变异情况进行分析,同时对外壳蛋白(CP)基因进行了克隆和表达。利用PCR方法扩增并克隆了SPLCV(JS∶XZ∶3-2)的全基因组,测序分析表明,SPLCV(JS∶XZ∶3-2)基因组全长为2 834bp,含有6个开放阅读框架,与已发表的SPLCV其他分离物相比,全基因组核苷酸序列相似性为82.7%~94.4%。其中,CP基因由765个核苷酸组成,共编码254个氨基酸残基。SPLCV CP基因核苷酸序列与其他分离物的相似性在89.2%~90.6%,其中与SPLCV美国分离物(HQ333135)的相似性最高,为90.6%;与日本分离物(AB433788)的相似性最低,为89.2%;与中国大陆分离物(FJ515896)CP基因的核苷酸序列相似性为90.2%。将SPLCV CP基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-3上,获得重组质粒,经IPTG诱导表达、SDS-PAGE分析得到了大小约为54.3kD的融合蛋白条带,说明CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达。 展开更多
关键词 甘薯卷叶病毒 基因组序列 外壳蛋白基因 原核表达
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甘薯卷叶病毒对甘薯生长特性及产量的影响 被引量:3
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作者 张成玲 孙厚俊 +2 位作者 杨冬静 马居奎 谢逸萍 《北方农业学报》 2020年第4期94-99,共6页
【目的】明确甘薯卷叶病毒对甘薯生长特性和产量影响,从而加强甘薯抗病资源高效利用。【方法】利用田间小区试验方法,研究了病毒对不同甘薯品种致病性、生长特性及产量的影响。【结果】甘薯卷叶病毒对所测试甘薯品种均有致病性,但引起... 【目的】明确甘薯卷叶病毒对甘薯生长特性和产量影响,从而加强甘薯抗病资源高效利用。【方法】利用田间小区试验方法,研究了病毒对不同甘薯品种致病性、生长特性及产量的影响。【结果】甘薯卷叶病毒对所测试甘薯品种均有致病性,但引起症状的严重程度不同。其中,蜂蜜罐、济紫薯1号等品种叶片明显向上卷曲、黄化等,而龙薯9号、商薯19号等品种极少数植株表现卷曲。对不同品种造成的产量损失为4.93%~43.30%。甘薯卷叶病毒降低了郑红22和徐薯32两个品种叶绿素含量指数、叶面积、叶片鲜重,缩短蔓长,减少了郑红22的分枝数和叶片数;薯块鲜重在90、120 d,健康苗比病毒苗增加0.09~0.19 kg/株。【结论】在甘薯卷叶病毒高发区可推广应用龙薯9号、商薯19及徐薯32等抗耐性品种。 展开更多
关键词 甘薯 甘薯卷叶病毒 生长特性 产量
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3种甘薯病毒多重PCR检测方法的建立与应用 被引量:1
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作者 李文宗 梁鑫 +2 位作者 杨露露 王润豪 王磊 《安徽农业科学》 CAS 2022年第22期89-93,126,共6页
针对甘薯卷叶病毒(SPLCV)、甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)、甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)的外壳蛋白(CP)基因序列,设计了3种病毒的3对特异性引物,扩增大小分别为180、295、774 bp,通过对引物添加量、退火温度、循环数等反应条件的优化,完善了能... 针对甘薯卷叶病毒(SPLCV)、甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)、甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)的外壳蛋白(CP)基因序列,设计了3种病毒的3对特异性引物,扩增大小分别为180、295、774 bp,通过对引物添加量、退火温度、循环数等反应条件的优化,完善了能同时扩增出SPLCV、SPFMV、SPCSV 3种病毒的多重PCR体系,可以实现同时对甘薯3种病毒104拷贝水平的检测,并具有良好的特异性。利用该技术体系,对不同田间样品进行了检测,PCR产物测序表明,3种病毒序列与已知的参考序列同源率一致性分别达到94%、94%、97%及以上。建立能够同时进行3种病毒检测的多重PCR检测技术体系,可以快速准确地进行甘薯脱毒苗病毒检测和田间样品的诊断。 展开更多
关键词 甘薯 甘薯卷叶病毒(SPLCV) 甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV) 甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV) 多重PCR
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甘薯高产栽培茎尖组培快繁方法 被引量:1
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作者 王颖 《乡村科技》 2018年第13期96-98,共3页
甘薯卷叶病毒是限制全球甘薯产量的重要甘薯病毒病害之一。为了降低甘薯病毒病带来的损失,本文研究建立脱毒苗快繁体系,为脱毒苗的获得及甘薯病毒检测提供理论依据。其中,以商薯19茎尖作为外植体,芽诱导的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+... 甘薯卷叶病毒是限制全球甘薯产量的重要甘薯病毒病害之一。为了降低甘薯病毒病带来的损失,本文研究建立脱毒苗快繁体系,为脱毒苗的获得及甘薯病毒检测提供理论依据。其中,以商薯19茎尖作为外植体,芽诱导的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,苗增殖的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+CW 2.0 g/L,根诱导的最适培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg/L。 展开更多
关键词 甘薯卷叶病毒 组织快繁 茎尖
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湖南省番茄和牵牛花上双生病毒的分子鉴定 被引量:8
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作者 班一云 丁波 周雪平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期134-138,共5页
双生病毒是一类在全世界范围内广泛发生的单链环状DNA病毒。本文对从湖南采集到的6例(洋姜、番茄、萝卜、赛葵、甘薯、牵牛花)疑似双生病毒侵染的植物叶片进行了分子鉴定。利用滚环扩增技术(RCA)对样品DNA进行扩增,分别对其RCA产物进行... 双生病毒是一类在全世界范围内广泛发生的单链环状DNA病毒。本文对从湖南采集到的6例(洋姜、番茄、萝卜、赛葵、甘薯、牵牛花)疑似双生病毒侵染的植物叶片进行了分子鉴定。利用滚环扩增技术(RCA)对样品DNA进行扩增,分别对其RCA产物进行酶切,并将酶切得到的片段测序后进行BLAST比对,结果显示番茄样品中的病毒分离物与番茄黄化曲叶病毒相似性最高(99%),牵牛花样品中的病毒分离物与甘薯卷叶病毒相似性最高(99%),证明这两个分离物是单组分DNA-A双生病毒。这是在湖南省首次发现并报道双生病毒的全核酸序列。 展开更多
关键词 番茄黄化曲病毒 甘薯卷叶病毒 DNA-A
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