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大刺鳅生长分化因子2(GDF2)基因克隆及表达分析
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作者 华宝玉 林月华 +2 位作者 张晓婷 郭昌 傅明骏 《龙岩学院学报》 2023年第2期84-90,共7页
研究大刺鳅生长分化因子2(growth differentiation factor 2,GDF2)基因与大刺鳅生长发育之间的关系。利用RT-PCR对大刺鳅生长发育相关基因GDF2进行了克隆并对其进行生物信息学分析;通过实时荧光定量PCR研究大刺鳅GDF2基因在肝、性腺、脑... 研究大刺鳅生长分化因子2(growth differentiation factor 2,GDF2)基因与大刺鳅生长发育之间的关系。利用RT-PCR对大刺鳅生长发育相关基因GDF2进行了克隆并对其进行生物信息学分析;通过实时荧光定量PCR研究大刺鳅GDF2基因在肝、性腺、脑等9种组织中的表达情况;通过注射促黄体素释放激素(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)以及地欧酮(DOM)三种激素,研究大刺鳅GDF2基因在肝组织中表达量的变化。结果表明:大刺鳅GDF2基因cDNA长2053 bp,其中5’非编码区序列长145 bp,3’非编码区序列长645 bp,编码区(ORF)序列长1263 bp,编码420个氨基酸的多肽序列,通过生物信息学分析得出GDF2蛋白属于膜外蛋白,蛋白预测理论等电点(p I)为5.38,分子量(Mw)为47.97 kDa,存在潜在N-糖基化位点5个,在线分析软件预测GDF2氨基酸序列N端为信号肽序列。系统进化树分析表明,大刺鳅GDF2与黄鳝GDF2聚为一支,亲缘关系最为接近。实时荧光定量PCR结果显示GDF2基因在肝组织中表达量最高,其次为心、鳃、肠、脾,在脑组织中的表达量最低。LHRH-A2、DOM、HCG三种外源激素注射后,对大刺鳅GDF2 mRNA在肝组织中表达均具有一定的促进作用。研究结果表明GDF2基因主要参与大刺鳅的肝脏组织生长发育调控,基因表达量还受不同类型催产激素的诱导的影响。 展开更多
关键词 大刺鳅 生长分化因子2 基因克隆 表达分析
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青藤碱对家兔骨质疏松压缩性骨折模型骨生长分化因子2和血清白介素-1β及白介素-17的影响 被引量:4
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作者 黄明 胡熙耀 +1 位作者 彭敏 朱克刚 《实用药物与临床》 CAS 2017年第11期1253-1256,共4页
目的研究青藤碱对骨质疏松压缩性骨折模型家兔骨生长分化因子2(GDF2)和血清白介素-1β(IL-1β)及IL-17的影响,并探讨其作用机制。方法先将36只雌性家兔去卵巢建立骨质疏松模型,4周后再采用剪断L1-L5节段椎体前缘的方法建立骨质疏松压缩... 目的研究青藤碱对骨质疏松压缩性骨折模型家兔骨生长分化因子2(GDF2)和血清白介素-1β(IL-1β)及IL-17的影响,并探讨其作用机制。方法先将36只雌性家兔去卵巢建立骨质疏松模型,4周后再采用剪断L1-L5节段椎体前缘的方法建立骨质疏松压缩性骨折模型,成模后分为模型组,青藤碱A组、B组。青藤碱A组、B组用10%青藤碱分别按2、4 m L/(kg·d)剂量灌胃,模型组灌胃等体积生理盐水,三组均治疗1个月。采用双抗体夹心法检测耳缘静脉炎性因子IL-1β/IL-17的含量;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测椎间盘组织GDF2表达水平;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测椎间盘组织GDF2 m RNA表达。结果青藤碱可提高青藤碱A组、B组家兔GDF2、GDF2 m RNA表达水平,降低血清IL-1β/IL-17含量,与模型组和同组治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05),但青藤碱A组、B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论青藤碱可改善低IL-1β/IL-17介导的炎性反应及骨退行性变,提高GDF2诱导成骨分化和骨形成能力,加速骨折愈合。 展开更多
关键词 青藤碱 骨质疏松压缩性骨折 生长分化因子2 IL-1β/IL-17 家兔
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青藤碱对骨质疏松性压缩骨折家兔血清白细胞介素-1β及白细胞介素-17和骨生长分化因子2的影响 被引量:1
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作者 胡熙耀 万超 +2 位作者 许明军 刘敏娟 陈德森 《现代中西医结合杂志》 CAS 2018年第19期2058-2061,共4页
目的观察青藤碱对骨质疏松性压缩骨折家兔血清白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-17和骨生长分化因子2(GDF2)的影响,探讨其作用机制。方法先将36只雌性家兔去卵巢建立骨质疏松模型,4周后再采用剪断L1-5椎体前缘的方法建立骨质疏松性压缩骨折模... 目的观察青藤碱对骨质疏松性压缩骨折家兔血清白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-17和骨生长分化因子2(GDF2)的影响,探讨其作用机制。方法先将36只雌性家兔去卵巢建立骨质疏松模型,4周后再采用剪断L1-5椎体前缘的方法建立骨质疏松性压缩骨折模型,成模后分为模型组、青藤碱A组和青藤碱B组。青藤碱A组和青藤碱B组分别用10%青藤碱按2 m L/(kg·d)和4 m L/(kg·d)剂量灌胃,模型组灌等体积生理盐水,均1次/d,连续灌胃1个月。于灌胃10,20,30 d拍摄骨痂X射线片对骨痂生长情况进行评分;灌胃前后采用双抗体夹心法检测耳缘静脉血IL-1β、IL-17水平;灌胃结束后采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测骨折处骨痂组织中GDF2表达水平,采用RT-PCR法检测骨折处骨痂组织中GDF2 mRNA表达水平。结果灌胃20,30 d后,青藤碱A组和青藤碱B组骨痂生长良好,断层边缘逐渐模糊或消失,骨密度增大,综合评分均明显高于同期模型组(P均<0.05),青藤碱A组和青藤碱B组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。灌胃结束后,青藤碱A组和青藤碱B组血清IL-1β、IL-17水平均明显低于模型组(P均<0.05),GDF2、GDF2 mRNA表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),青藤碱A组和青藤碱B组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论青藤碱可通过抑制IL-1β、IL-17介导的炎性反应,提高GDF2诱导成骨分化和骨形成能力,从而促进骨痂生长而加速骨折愈合。 展开更多
关键词 青藤碱 骨质疏松性压缩骨折 生长分化因子2 白细胞介素-1Β 白细胞介素-17
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