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DNA甲基转移酶类在大鼠神经病理性疼痛发病机制中的作用 被引量:7
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作者 王英 郭曲练 +3 位作者 鄢建勤 杨明华 林艳 林智平 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期578-585,共8页
目的:探索DNA甲基转移酶类(DNA methyltransferases,DNMTs)在坐骨神经慢性缩窄性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)发病机制中的作用。方法:腰段鞘内置管成功的27只成年雄性Sprague-Dawle... 目的:探索DNA甲基转移酶类(DNA methyltransferases,DNMTs)在坐骨神经慢性缩窄性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)发病机制中的作用。方法:腰段鞘内置管成功的27只成年雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为假手术组+生理盐水组(sham+NS组)、CCI+NS组及CCI+5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-AZA)组(CCI+5-AZA组),每组9只。CCI术后第3天至第14天,sham+NS组和CCI+NS组每天鞘内注射1次NS,CCI+5-AZA组每天鞘内注射1次10μmol/L 5-AZA。分别于术前及术后第3,5,7,10,14天测定各组大鼠术侧后足机械痛阈和热痛阈。术后第14天各组大鼠于深麻醉下处死,取脊髓腰膨大,采用RT-PCR,Western印迹和免疫组织化学测定DNMT1,DNMT3a和DNMT3b的表达。结果:术后第3天至第14天,CCI+NS组的机械痛阈和热痛阈均较sham+NS组明显下降(均P<0.05)。术后第5天至第14天,CCI+5-AZA组的机械痛阈和热痛阈均较CCI+NS组明显上升(均P<0.05),但仍低于sham+NS组(均P<0.05)。DNMT1,DNMT3a和DNMT3b在大鼠脊髓腰膨大背角处有致密表达,且以胞核分布为主。术后第14天CCI+NS组的DNMT1,DNMT3a和DNMT3b表达较sham+NS组均明显上升(均P<0.05)。CCI+5-AZA组的DNMT1,DNMT3a和DNMT3b表达均较CCI+NS组明显下降(均P<0.05),但仍高于sham+NS组(均P<0.05)。结论:DNMTs在脊髓腰膨大处的表达上调很可能在CCI大鼠NPP发病机制中起重要作用。DNMTs抑制剂5-AZA可下调DNMTs的表达和缓解CCI诱导的NPP,可能成为NPP的潜在治疗药物。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 慢性缩窄性损伤 DNA甲基转移酶类 5-氮杂胞苷
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组蛋白甲基转移酶2在常见肿瘤中的机制及临床研究进展
2
作者 王宇 郭彩瑶 +2 位作者 王莹 刘圣兰 戴伟 《赣南医学院学报》 2024年第2期111-118,共8页
组蛋白甲基转移酶2(SET and MYND domain-containing proteins 2, SMYD2)是SMYD家族成员,其功能是对组蛋白和非组蛋白进行甲基化修饰,调节下游的靶基因和信号通路,广泛参与肿瘤、炎症及免疫失调等疾病。近年来,恶性肿瘤的发病率呈逐年... 组蛋白甲基转移酶2(SET and MYND domain-containing proteins 2, SMYD2)是SMYD家族成员,其功能是对组蛋白和非组蛋白进行甲基化修饰,调节下游的靶基因和信号通路,广泛参与肿瘤、炎症及免疫失调等疾病。近年来,恶性肿瘤的发病率呈逐年增高的趋势,严重影响患者的生活质量,给家庭和社会带来极大的经济负担。肿瘤发生的潜在机制在很大程度上仍不清楚,但越来越多的证据表明甲基化的异常调节与肿瘤发生密切相关。SMYD2参与多个信号通路的调控进而影响肿瘤干细胞、肿瘤细胞增殖与转移以及耐药等生物学特征。因此,本文对SMYD2在常见肿瘤中的作用机制进行综述,以期为SMYD2的机制研究及其抑制剂用于肿瘤治疗提供理论基础。 展开更多
关键词 组蛋白甲基转移酶类 肿瘤 机制
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炎症性肠病患者硫嘌呤甲基转移酶与嘌呤类药物毒副反应的关系 被引量:4
3
作者 董显文 王天蓉 +2 位作者 郑青 黄美兰 冉志华 《胃肠病学》 2011年第8期464-468,共5页
背景:嘌呤类药物广泛用于炎症性肠病(IBD)患者的诱导缓解和维持治疗,然而毒副反应的频繁发生使其临床应用受到限制。有研究显示检测硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性和基因型能预测硫唑嘌呤(AZA)相关的毒副反应。目的:评价TPMT活性和基因型与... 背景:嘌呤类药物广泛用于炎症性肠病(IBD)患者的诱导缓解和维持治疗,然而毒副反应的频繁发生使其临床应用受到限制。有研究显示检测硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性和基因型能预测硫唑嘌呤(AZA)相关的毒副反应。目的:评价TPMT活性和基因型与AZA治疗IBD的毒副反应的关系。方法:收集2008年10月~2010年12月于上海仁济医院确诊并接受AZA治疗(每日1(?)kg)的78例IBD患者。采用高效液相色谱法(HPLC)检测TPMT活性,以直接测序和PCR法检测TPMT基因型。分析TPMT活性和基因型与AZA毒副反应的关系。结果:共19例患者发生毒副反应,包括4例血液学毒副反应。78例IBD患者的平均TPMT活性为(36.10±10.11)nmol 6-MTG·gHb^(-1)·h^(-1)。低TPMT活性组与高TPMT活性组发生总毒副反应和血液学毒副反应的OR值分别为6.82(95%CI:0.58~79.91)和12.00(95%CI:0.84~172.22),但差异均无统计学意义。仅1例患者发生TPMT*3C杂合子突变,突变率为1.3%,且该例患者发生了血液学毒副反应。结论:IBD患者的TPMT活性降低和基因突变与嘌呤类药物的总毒副反应和血液学毒副反应可能相关,但其临床实际应用价值有待进一步研究。 展开更多
关键词 甲基转移酶类 炎症性肠病 硫唑嘌呤 毒副反应 基因型
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m6a甲基转移酶METTL3调控KAI1/CD82表达介导垂体神经内分泌肿瘤细胞生物学行为的机制研究
4
作者 郑锴 罗秀玲 +3 位作者 张玮豪 刘宇利 李玉明 廖尚高 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第8期785-790,共6页
目的研究m6a甲基转移酶METTL3调控KAI1/CD82表达介导垂体神经内分泌肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的机制。方法通过实时荧光聚合酶链反应(qPCR)和蛋白免疫印迹测定大鼠垂体细胞、大鼠垂体神经内分泌肿瘤细胞系GH3和MMQ中的METTL3与KAI1/CD8... 目的研究m6a甲基转移酶METTL3调控KAI1/CD82表达介导垂体神经内分泌肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的机制。方法通过实时荧光聚合酶链反应(qPCR)和蛋白免疫印迹测定大鼠垂体细胞、大鼠垂体神经内分泌肿瘤细胞系GH3和MMQ中的METTL3与KAI1/CD82表达水平。体外培养GH3细胞,将其随机分为对照组、METTL3过表达质粒组、METTL3空质粒组、METTL3 siRNA组、METTL3 siRNA阴性对照组,经分组转染后,通过qPCR和蛋白免疫印迹检测各组细胞METTL3与KAI1/CD82表达;通过CCK-8实验检测各组细胞活力;通过细胞划痕、Transwell侵袭实验检测各组细胞迁移侵袭情况;通过甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)实验检测各组细胞KAI1/CD82 m6A甲基化修饰情况。结果相比大鼠垂体细胞,大鼠垂体神经内分泌肿瘤细胞系GH3及MMQ中的METTL3蛋白及mRNA表达水平明显升高,KAI1/CD82蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。与对照组相比,METTL3空质粒组、METTL3 siRNA阴性对照组细胞各指标差异无统计学意义;与对照组、METTL3空质粒组相比,METTL3过表达质粒组细胞活力、迁移距离、侵袭细胞数、METTL3蛋白及mRNA表达水平、KAI1/CD82 m6A甲基化水平升高(P<0.05),KAI1/CD82蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05);与对照组、METTL3 siRNA阴性对照组相比,METTL3 siRNA组细胞活力、迁移距离、侵袭细胞数、METTL3蛋白及mRNA表达水平、KAI1/CD82 m6A甲基化水平降低(P<0.05),KAI1/CD82蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05)。结论下调METTL3表达可降低KAI1/CD82 m6A甲基化水平,促进KAI1/CD82mRNA转录表达,抑制垂体神经内分泌肿瘤细胞增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 垂体肿瘤 神经内分泌瘤 甲基转移酶类 Kangai-1蛋白质 甲基 m6a甲基转移 甲基转移样3
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茶树类黄酮O-甲基转移酶基因的克隆及原核表达分析 被引量:11
5
作者 马成英 吕海鹏 +3 位作者 林智 张悦 郭丽 谭俊峰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期325-333,共9页
【目的】克隆茶树(Camellia sinensis)的一个类黄酮O-甲基转移酶基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,为进一步研究其酶学特性和调控茶树中甲基化类黄酮物质的代谢机理奠定基础。【... 【目的】克隆茶树(Camellia sinensis)的一个类黄酮O-甲基转移酶基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,为进一步研究其酶学特性和调控茶树中甲基化类黄酮物质的代谢机理奠定基础。【方法】采用同源克隆法,以从茶树叶片中提取的总RNA为模板,结合RT-PCR与RACE克隆技术获得该基因cDNA全长,测序正确后将该基因片段连接到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21并诱导表达。【结果】该基因cDNA全长为1 246 bp,其开放阅读框为1 077 bp,编码358个氨基酸,推测的蛋白分子量为40.2 kD,理论等电点为5.62;其核苷酸编码序列与葡萄和毛果杨的类黄酮O-甲基转移酶基因相似性分别为80%和81%;经IPTG诱导和SDS-PAGE检测,所构建的原核表达载体表达的融合蛋白与预期蛋白相符合。【结论】利用RT-PCR与RACE克隆技术从茶树叶片中克隆得到了一个类黄酮O-甲基转移酶基因,成功构建了原核表达载体,并使其在大肠杆菌中得到了高效表达。 展开更多
关键词 茶树 黄酮O-甲基转移 克隆 原核表达
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植物类黄酮O-甲基转移酶研究进展 被引量:10
6
作者 张传丽 仲月明 +1 位作者 沈丹红 陈鹏 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1274-1281,共8页
植物类黄酮O-甲基转移酶(flavonoid O-methyltransferase,FOMT)属转移酶类的甲基转移酶家族,是一类可催化S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)中的-CH3基团转移到类黄酮-OH上的蛋白质酶。甲基化是类黄酮物质最基本、最主要的... 植物类黄酮O-甲基转移酶(flavonoid O-methyltransferase,FOMT)属转移酶类的甲基转移酶家族,是一类可催化S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)中的-CH3基团转移到类黄酮-OH上的蛋白质酶。甲基化是类黄酮物质最基本、最主要的修饰反应之一,不仅可以降低类黄酮的化学反应活性,而且增加了其脂溶性,赋予了类黄酮更多的生理生化特性。该文对近年来国内外有关类黄酮甲基化对植物中FOMT催化的生理生化代谢反应、FOMT的分类、FOMT酶蛋白结构域、生物学功能以及FOMT基因克隆与表达调控等方面的研究进展进行综述,为植物类黄酮更广泛、更深入的研究提供新的思路与途径。 展开更多
关键词 黄酮O-甲基转移 结构域 基因克隆与表达 生物学功能
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银杏类黄酮O-甲基转移酶活性的高效液相色谱分析 被引量:1
7
作者 仲月明 张传丽 +3 位作者 陈鹏 沈丹红 吴秋月 周长远 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期95-98,116,共5页
首次明确了银杏叶片类黄酮生物代谢关键酶O-甲基转移酶(flavonoid O-methyltransferase,FOMT)活性的HPLC测定技术与方法。采集扬州大学银杏种质资源圃银杏雄株成熟叶片,提取粗酶液,根据FOMT催化反应生成S-腺苷-L-高半胱氨酸(SAH)的原理... 首次明确了银杏叶片类黄酮生物代谢关键酶O-甲基转移酶(flavonoid O-methyltransferase,FOMT)活性的HPLC测定技术与方法。采集扬州大学银杏种质资源圃银杏雄株成熟叶片,提取粗酶液,根据FOMT催化反应生成S-腺苷-L-高半胱氨酸(SAH)的原理,以山奈酚、槲皮素和异鼠李素等3种黄酮苷元为反应底物,采用优化的HPLC体系检测样品中FOMT催化反应生成的SAH峰面积,通过标准曲线求得不同反应底物的FOMT相对活性。FOMT活性反应生成物SAH在1.5~20μg/mL内呈良好的线性关系,RSD为2.1%(n=5),建立了FOMT活性测定优化体系。不同反应底物的FOMT活性表现不同,山奈酚与异鼠李素显著高于槲皮素。FOMT活性HPLC测定方法准确、快速、可靠、灵敏度高。 展开更多
关键词 银杏 雄株 叶片 黄酮O-甲基转移(FOMT)活性 高效液相色谱
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DNA甲基转移酶与早期胚胎发育 被引量:6
8
作者 赵冬梅 金帆 黄荷凤 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第3期281-284,共4页
 哺乳动物胚胎中存在两种类型的DNA甲基转移酶(DnmT):一种是维持型的DnmT1,用于保持子代细胞与母细胞相同的DNA特异性甲基化模式;另一种是新发型的Dnmt3,主要负责建立胚胎发育分化过程中的组织特异性甲基化模式,在卵母细胞中母本印记...  哺乳动物胚胎中存在两种类型的DNA甲基转移酶(DnmT):一种是维持型的DnmT1,用于保持子代细胞与母细胞相同的DNA特异性甲基化模式;另一种是新发型的Dnmt3,主要负责建立胚胎发育分化过程中的组织特异性甲基化模式,在卵母细胞中母本印记基因的建立等方面也起一定作用。DnmT对胚胎的正常发育至关重要,其表达缺失或异常表达均可导致胚胎、胎儿的发育异常。 展开更多
关键词 DNA甲基 DNA甲基转移酶类 胎儿发育
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肝癌组织中HBV感染与甲基化转移酶表达的关系 被引量:2
9
作者 张吉才 余宗涛 +2 位作者 吕军 李海平 高波 《临床肝胆病杂志》 CAS 2013年第8期620-623,共4页
目的检测肝癌患者癌组织、肝癌旁组织、肝硬化相关组织中甲基化转移酶(DNMT)的表达情况,分析HBV感染与DN-MT表达之间的关系。方法根据是否存在HBV感染,将44例标本分成两组。HBV感染相关组:血液或组织中至少可检测出一种HBV感染相关的标... 目的检测肝癌患者癌组织、肝癌旁组织、肝硬化相关组织中甲基化转移酶(DNMT)的表达情况,分析HBV感染与DN-MT表达之间的关系。方法根据是否存在HBV感染,将44例标本分成两组。HBV感染相关组:血液或组织中至少可检测出一种HBV感染相关的标志物;非HBV感染相关组:血液或组织中未检测出HBV感染相关标志物。应用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测分期及分化程度不同的肝癌患者癌组织、肝癌旁组织、肝硬化组织中DNMT基因mRNA的表达水平。不同组间DNMTs表达水平的差异采用ANOVA分析;非参数检验方法为Spearman等级相关分析。结果 HBV感染相关组中癌组织的DNMT1、3A和3B mRNA表达水平明显高于非HBV感染相关组(P=0.001、0.006、0.02);HBV感染相关组中肝硬化组织的DNMT1、3A和3B mRNA表达水平也明显高于非HBV感染相关组(P=0.007、0.008、0.045);即使在癌旁组织,HBV感染相关组织中DNMT1、3A mRNA表达水平明显高于非HBV感染相关组织(P=0.01、0.04)。HBV感染与DNMTs表达相关分析结果显示:HBV感染与DNMT表达相关(P=0.009、0.006、0.03);HBV感染有关指标中HBsAg、HBeAg、HBV-DNA与DNMT1表达密切相关(P=0.008、0.032、0.006)。结论(1)HBV感染相关组中癌组织及肝硬化组织的DNMT1、3A和3B mRNA表达水平明显高于非HBV感染相关组。(2)HBV感染可能刺激DNMT的表达,尤其是DNMT1、3A和3B,进而促进部分抑癌基因甲基化。 展开更多
关键词 肝肿瘤 甲基转移酶类 肝炎病毒 乙型 基因表达
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成人急性淋巴细胞白血病巯嘌呤甲基转移酶基因多态性研究 被引量:3
10
作者 葛健 夏瑞祥 +5 位作者 卜丽佳 左艳 左莉 周青 汪渊 曾庆曙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第2期185-188,共4页
目的研究我国成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者及健康汉族人群巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)基因多态性。方法从78例成人ALL患者和154例健康汉族人外周血提取白细胞基因组DNA,采用等位基因特异性PCR(ASPCR)和PCR结合限制性片断长度多态性(PCRR... 目的研究我国成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者及健康汉族人群巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)基因多态性。方法从78例成人ALL患者和154例健康汉族人外周血提取白细胞基因组DNA,采用等位基因特异性PCR(ASPCR)和PCR结合限制性片断长度多态性(PCRRFLP)技术对TPMT2、TPMT3A、TPMT3B和TPMT3C的等位基因频率进行分析。结果在成人ALL患者和健康汉族人中仅检测到6例TPMT3C杂合子,没有检到TPMT2、TPMT3A和TPMT3B。成人ALL患者TPMT总的突变型等位基因频率(1.28%)与健康汉族人群(1.30%)相近。结论TPMT3C可能是中国成人ALL和健康汉族人群最主要的突变型等位基因,预先检测TPMT基因型对使用巯嘌呤类药物治疗的中国成人ALL患者有临床裨益。 展开更多
关键词 白血病 淋巴细胞 急性/遗传学 甲基转移酶类 巯嘌呤 多态现象(遗传学)
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DNA甲基转移酶1蛋白在人胃癌黏膜组织中的表达及其临床意义 被引量:3
11
作者 丁雯瑾 房静远 +1 位作者 陈晓宇 彭延申 《胃肠病学》 2007年第4期200-203,共4页
背景:肿瘤组织存在DNA甲基化紊乱,包括与细胞增殖周期密切相关的癌基因低甲基化和抑癌基因高甲基化等。DNA甲基转移酶(Dnmt)参与甲基化的形成(主要是Dnmt3a和Dnmt3b)和维持(主要是Dnmt1),但目前对胃癌Dnmt蛋白的表达情况仍知之甚少,更... 背景:肿瘤组织存在DNA甲基化紊乱,包括与细胞增殖周期密切相关的癌基因低甲基化和抑癌基因高甲基化等。DNA甲基转移酶(Dnmt)参与甲基化的形成(主要是Dnmt3a和Dnmt3b)和维持(主要是Dnmt1),但目前对胃癌Dnmt蛋白的表达情况仍知之甚少,更缺乏其与肿瘤生物学行为和临床参数关系的研究。目的:探讨癌区、癌旁和外周正常黏膜组织中Dnmt1蛋白表达的差异及其临床意义。方法:收集38例胃癌患者标本,取癌区、癌旁和外周正常黏膜组织各1~2块,应用免疫组化SP法分析各黏膜组织中Dnmt1蛋白的表达,并探讨其与胃癌浸润和转移的关系。结果:在38例胃癌黏膜组织中,Dnmt1蛋白的表达阳性率为81.6%,显著高于相应癌旁(39.5%)和正常黏膜组织(10.5%)(P<0.001)。阳性切片中可见Dnmt1蛋白表达弥散分布于肿瘤或腺体的细胞质和细胞核,染色较均匀。Dnmt1蛋白表达与胃癌患者的年龄、肿瘤分化程度和有无淋巴结转移无明显相关性(P>0.05),与性别呈一定的相关性(P=0.007)。结论:Dnmt1蛋白过表达在人胃癌的发生和发展中起一定作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤 甲基转移酶类 免疫组织化学
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组蛋白甲基转移酶SETD2对P53介导细胞凋亡的调控 被引量:2
12
作者 谢萍 田春艳 +1 位作者 张令强 贺福初 《军事医学》 CAS 2011年第1期30-34,共5页
目的探讨组蛋白甲基转移酶SETD2对P53功能的调控。方法 PCR扩增人源SETD2并重组入真核表达载体;通过间接免疫荧光鉴定SETD2的亚细胞定位;通过GST Pull-down实验寻找P53结合SETD2的区域;流式细胞术分析SETD2对P53参与细胞凋亡的影响。结... 目的探讨组蛋白甲基转移酶SETD2对P53功能的调控。方法 PCR扩增人源SETD2并重组入真核表达载体;通过间接免疫荧光鉴定SETD2的亚细胞定位;通过GST Pull-down实验寻找P53结合SETD2的区域;流式细胞术分析SETD2对P53参与细胞凋亡的影响。结果成功克隆了人源SETD2的全长,并将其成功构建到真核表达载体中;SETD2以胞核定位为主;体外直接相互作用实验证实SETD2和P53存在相互作用,SETD2分子中部的SET结构域和C端都可以结合P53;流式细胞分析结果表明SETD2对于P53参与的细胞凋亡具有明显的促进作用。结论本研究揭示P53正向调控因子SETD2对P53介导的细胞凋亡具有促进效应,从而将组蛋白表遗传学修饰与P53转录因子活性调控关联起来,研究结果对肿瘤、免疫等疾病的防治具有一定的科学意义。 展开更多
关键词 蛋白甲基转移酶类 SETD2 肿瘤抑制蛋白质P53 聚合链反应 真核表达 细胞凋亡 流式细胞术
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硫基嘌呤甲墓转移酶活性对嘌呤类药物作用的影响 被引量:1
13
作者 王太森 刘菊先 《国外医学(儿科学分册)》 1999年第2期88-90,共3页
硫基嘌呤甲基转移酶(TPMT)是嘌呤类药物代谢的关键酶。TPMT基因的突变、酶活性表达的遗传多态性,对此类药物疗效与毒副作用至关重要。对于高TPMT活性的患者,可能治疗强度不足;酶活性低者易产生严重毒副作用。
关键词 硫嘌呤 甲基转移酶类 白血病 ALL 药物疗法
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巯嘌呤甲基转移酶检测在炎症性肠病治疗中的作用
14
作者 董显文 郑青 冉志华 《胃肠病学》 2009年第9期555-557,共3页
巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)是硫唑嘌呤(AZA)/6-巯基嘌呤(6-MP)代谢的关键酶之一,而AZA/6-MP广泛用于难治性炎症性肠病(IBD)的治疗。TPMT的活性/基因型与AZA/6-MP的疗效和不良反应相关,进行TPMT活性/基因型检测有可能预测骨髓抑制等不良反... 巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)是硫唑嘌呤(AZA)/6-巯基嘌呤(6-MP)代谢的关键酶之一,而AZA/6-MP广泛用于难治性炎症性肠病(IBD)的治疗。TPMT的活性/基因型与AZA/6-MP的疗效和不良反应相关,进行TPMT活性/基因型检测有可能预测骨髓抑制等不良反应的发生,并能指导个体化治疗。 展开更多
关键词 甲基转移酶类 炎性肠疾病 治疗
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大肠杆菌表达类黄酮O-甲基转移酶合成槲皮素甲基化衍生物
15
作者 田苗苗 郭佳婧 +1 位作者 刘娟 单杨 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期111-119,共9页
槲皮素是一种重要的柑橘类黄酮,具有抗菌、抗炎和抗氧化等生物学活性,但水溶性和脂溶性较差,研究表明可通过甲基化提高其代谢稳定性和生物利用度,目前微生物转化法是获得甲基化槲皮素的良好方法。作者筛选了11种不同来源的类黄酮O-甲基... 槲皮素是一种重要的柑橘类黄酮,具有抗菌、抗炎和抗氧化等生物学活性,但水溶性和脂溶性较差,研究表明可通过甲基化提高其代谢稳定性和生物利用度,目前微生物转化法是获得甲基化槲皮素的良好方法。作者筛选了11种不同来源的类黄酮O-甲基转移酶(FOMT),并根据甲基化位点进行分类构建相应的大肠杆菌工程菌,以槲皮素为底物进行发酵分别合成了4种单O-甲基槲皮素(柽柳黄素、鼠李素、异鼠李素和3-O-甲基槲皮素),最高产量分别为31.17、11.17、8.90、52.95 mg/L。随后构建了大肠杆菌共培养体系,分步添加含有MpOMT4和OsNOMT的重组大肠杆菌全细胞催化剂,并通过调整体系中两种菌体的比例和生物量,最终确定菌体细胞质量浓度为24 g/L(以细胞干质量计)、两种菌体质量比为1∶2时,4′,7-二甲氧基槲皮素的最高产量为21.56 mg/L。 展开更多
关键词 槲皮素 黄酮O-甲基转移(FOMT) 槲皮素甲基化衍生物 生物合成
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DNA甲基转移酶在宫颈癌组织中的表达及其与HPV的相关性分析 被引量:12
16
作者 黄团明 王婉 +1 位作者 闫晓欢 郑英如 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第13期1752-1755,共4页
目的探讨5种DNA甲基转移酶(DNMTs)在宫颈癌组织中的表达情况及其与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法应用荧光定量PCR、Western blotting、免疫组化检测40例宫颈癌组织、对应癌旁组织及20例正常宫颈组织中DNMT1、DNMT2、DNMT3a、... 目的探讨5种DNA甲基转移酶(DNMTs)在宫颈癌组织中的表达情况及其与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法应用荧光定量PCR、Western blotting、免疫组化检测40例宫颈癌组织、对应癌旁组织及20例正常宫颈组织中DNMT1、DNMT2、DNMT3a、DNMT3b和DNMT3l的表达情况,应用质谱法检测HPV感染情况。结果宫颈癌组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、DNMT3l的阳性表达率分别为90.0%、85.0%、70.0%、80.0%,在癌旁组织内的阳性表达率分别为87.5%、85.0%、72.5%、77.5%,均明显高于正常宫颈组织内的阳性表达率(分别为25.0%、15.0%、20.0%和30.0%),而DNMT2在宫颈癌和癌旁组织中阳性表达率仅为12.5%和17.5%,明显低于正常宫颈组织(约85.0%),且DNMT1、DNMT3a、DNMT3b与HPV阳性呈显著正相关(r值分别为0.709、0.538和0.536,P<0.05)。结论宫颈癌组织中DNMT的表达谱发生明显改变,且HPV高危亚型感染与DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的表达升高密切相关。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 甲基转移酶类 人乳头瘤病毒
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类甲基化转移酶3(METTL3)在免疫细胞和造血干细胞中的作用研究进展
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作者 邓丽娇 张纪岩 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期557-562,共6页
腺嘌呤第6位氮原子上发生的甲基化修饰(m6A)是真核生物mRNA中最常见的甲基化修饰,m6A作为一种动态可逆修饰,参与众多生物学过程.类甲基化转移酶3(METTL3)是构成m6A甲基转移酶复合体的核心组分,负责催化RNA发生m6A修饰.近年的研究发现,ME... 腺嘌呤第6位氮原子上发生的甲基化修饰(m6A)是真核生物mRNA中最常见的甲基化修饰,m6A作为一种动态可逆修饰,参与众多生物学过程.类甲基化转移酶3(METTL3)是构成m6A甲基转移酶复合体的核心组分,负责催化RNA发生m6A修饰.近年的研究发现,METTL3通过调控m6A水平,调节T淋巴细胞的分化和功能的维持、巨噬细胞的活化和极化以及树突状细胞的激活等过程,进而调控免疫反应和有关疾病的发生和发展;同时很多研究也报导,METTL3在内皮造血转化、造血干细胞的自我更新、增殖分化以及细胞周期调控方面也具有重要作用,这为临床上治疗血液系统的有关疾病提供了新思路. 展开更多
关键词 腺嘌呤第6位氮原子甲基化修饰(m6A) 甲基转移3(METTL3) 免疫细胞 造血干细胞 综述
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DNA甲基转移酶基因干扰对HepG2细胞癌-睾丸抗原再表达的影响
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作者 李宏涛 梁后杰 +1 位作者 李文梅 肖文华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1434-1438,共5页
目的探讨抑制甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a和DNMT3b)对肝细胞癌细胞中癌-睾丸抗原表达的影响及相关机制。方法分别采用针对DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3a+3b),针对DNMT1和DNMT3a的siRNA(DNMT1+3a),针对DNMT1和DNMT3b的siRNA(DNMT1... 目的探讨抑制甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a和DNMT3b)对肝细胞癌细胞中癌-睾丸抗原表达的影响及相关机制。方法分别采用针对DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3a+3b),针对DNMT1和DNMT3a的siRNA(DNMT1+3a),针对DNMT1和DNMT3b的siRNA(DNMT1+3b)以及针对DNMT3a和DNMT3b的siRNA(DNMT3a+3b)转染HepG2细胞,并以使用5-杂氮脱氧胞嘧啶(5-Aza-dC)处理的细胞作为阳性对照,采用RT-PCR、实时定量PCR和Western blotting检测细胞中DN-MT及癌-睾丸抗原的表达情况,并采用甲基化特异PCR(MSP)检测部分癌-睾丸抗原基因启动子的甲基化状态。结果经siRNA干扰后,细胞中DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达量均明显降低。癌-睾丸抗原CT10和SSX1在转染DNMT1+3a和DNMT1+3b的细胞中出现再表达,而MAGE1及MAGE3在各siRNA转染细胞中均有表达,且无明显差异。CT10的启动子区发生了去甲基化,但MAGE1启动子区处于非甲基化状态。结论在HepG2细胞中,干扰DNMT可使癌-睾丸抗原基因的启动子区发生去甲基化,后者可使由甲基化导致的不能表达的癌-睾丸抗原基因发生再表达。 展开更多
关键词 甲基转移酶类 癌-睾丸抗原 肝细胞
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特异性敲低海马RNA甲基转移酶Pcif1对空间学习记忆的影响与机制研究
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作者 孙祖浩 所信君 +3 位作者 夏贤友 赵爽 窦妍 于春水 《天津医药》 CAS 北大核心 2022年第8期802-809,共8页
目的探索RNA甲基转移酶Pcif1对海马相关空间学习记忆的影响及分子机制。方法选择27只8周龄的雄性C57BL/6J Nifdc小鼠进行动物实验,随机分为3组(每组9只):Pcif1敲低组(对小鼠海马立体定位注射1μL的腺相关病毒包装的靶向Pcif1的shRNA)、... 目的探索RNA甲基转移酶Pcif1对海马相关空间学习记忆的影响及分子机制。方法选择27只8周龄的雄性C57BL/6J Nifdc小鼠进行动物实验,随机分为3组(每组9只):Pcif1敲低组(对小鼠海马立体定位注射1μL的腺相关病毒包装的靶向Pcif1的shRNA)、假手术组(对小鼠海马立体定位注射1μL的对照腺相关病毒)、野生组(不做处理)。3周后,Morris水迷宫实验用于测试小鼠的空间学习记忆能力,Western blot检测小鼠海马组织中相关蛋白的表达。选择小鼠海马神经元来源的HT22细胞系进行体外实验,细胞分为2组:HT22-shPcif1组(通过慢病毒包装的靶向Pcif1的shRNA实现细胞Pcif1的敲低)和HT22-Ctrl组(通过对照慢病毒感染细胞),通过全转录组测序(RNA-seq)、细胞毒性实验(CCK-8)、细胞划痕和流式细胞术研究敲低Pcif1影响学习记忆的机制。结果与野生组和假手术组相比,敲低组小鼠的空间学习记忆能力增强,小鼠海马中的抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调。与HT22-Ctrl组相比,HT22-shPcif1组差异表达的基因富集到凋亡、迁移和增殖通路,细胞迁移能力增强,在400μmol/L H_(2)O_(2)条件下细胞增殖能力提高,凋亡水平下降。结论选择性敲低海马Pcif1可以促进小鼠的空间学习记忆,其机制可能与抗凋亡蛋白上调,促进细胞迁移和增殖有关。 展开更多
关键词 tRNA甲基转移酶类 海马 空间学习 空间记忆 细胞凋亡 细胞增殖 Pcif1
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组蛋白甲基化转移酶2与顺铂致慢性肾脏病炎症反应的相关性研究
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作者 张妮 简久莹 +4 位作者 王笑笑 余婷 陈思羽 郭兵 刘丽荣 《天津医药》 CAS 北大核心 2021年第10期1048-1052,共5页
目的探讨组蛋白甲基化转移酶2(SMYD2)与顺铂致慢性肾脏病(CKD)炎症反应的相关性,为临床防治顺铂致CKD提供新方向。方法将16只小鼠分为对照组和顺铂组,每组8只。顺铂组小鼠给予10 mg/kg顺铂腹腔注射,对照组给予相同体积顺铂溶媒,1次/周,... 目的探讨组蛋白甲基化转移酶2(SMYD2)与顺铂致慢性肾脏病(CKD)炎症反应的相关性,为临床防治顺铂致CKD提供新方向。方法将16只小鼠分为对照组和顺铂组,每组8只。顺铂组小鼠给予10 mg/kg顺铂腹腔注射,对照组给予相同体积顺铂溶媒,1次/周,连续注射3周,第4周处死小鼠后收集血清和肾组织。全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr);HE和Masson染色观察肾组织病理学改变;Western blot检测肾组织SMYD2、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏素蛋白(E-cadherin)、纤维粘连蛋白(Fibronectin)、胶原蛋白3(Collagen-Ⅲ)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达。结果与对照组相比,顺铂组小鼠BUN和Scr水平均明显升高(P<0.05),肾组织中部分肾小球出现系膜细胞增生,肾小管发生颗粒变性和空泡样变,肾间质纤维增生明显,SMYD2、α-SMA、Vimentin、Fibronectin、Collagen-Ⅲ、STAT3、p-STAT3、TNF-α、IL-6蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达下降(P<0.05);SMYD2与E-cadherin表达呈负相关,与α-SMA、Vimentin、Fibronectin、Collagen-Ⅲ、STAT3、p-STAT3、TNF-α、IL-6表达呈正相关(P<0.05)。结论SMYD2在顺铂致CKD小鼠肾组织中表达上调,推测其可能与STAT3信号通路共同介导炎症反应参与顺铂致CKD的发生发展。 展开更多
关键词 慢性病 肾疾病 顺铂 蛋白甲基转移酶类 STAT3转录因子 组蛋白甲基转移2 肾脏纤维化 炎症反应
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