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奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)的临床应用评估 被引量:1
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作者 胡秀花 王子华 +5 位作者 黄鹏成 刘园园 毛君杰 王桂琴 马翀 王少林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第11期61-69,共9页
为了评估商品化的奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)(后文简称为“检测试剂盒”)在临床应用中的适用性,本试验采用传统细菌分离培养、检测试剂盒、16S rRNA基因扩增子测序和药物敏感性试验对宁夏回族自治区9个牧... 为了评估商品化的奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)(后文简称为“检测试剂盒”)在临床应用中的适用性,本试验采用传统细菌分离培养、检测试剂盒、16S rRNA基因扩增子测序和药物敏感性试验对宁夏回族自治区9个牧场155份奶牛乳房炎奶样分别进行菌株鉴定和耐药性检测,并将检测试剂盒与其他3种检测结果进行比较和分析。结果显示,检测试剂盒与传统细菌分离培养在病原菌检出情况上基本保持一致,均主要检出了大肠杆菌、芽孢杆菌属和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)等;检测试剂盒与16S rRNA基因扩增子测序结果在菌属组成上一致性较高,均主要检出了假单胞菌属、链球菌属和葡萄球菌属等;药物敏感性试验结果显示,检出率较高的66株病原菌分离株对β-内酰胺类抗菌药物的耐药率普遍偏高;奶样中β-内酰胺酶耐药基因blaZ的检测试剂盒检出结果与同一奶样中分离菌株的药物敏感性试验结果一致率达58%(7/12)。综上所述,该检测试剂盒具有较高的准确度和病原覆盖率,可为牧场奶牛乳房炎主要病原的快速诊断和耐药基因(blaZ)监测提供有效的技术支持,从而降低抗菌药物的使用量,以减少牧场经济损失。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 细菌分离培养 16S rRNA基因扩增子测序 药物敏感性试验
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CRISPR-Cas系统在病原微生物检测中的应用
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作者 莫秋菊 李欢 韦唯 《临床医学进展》 2024年第12期1254-1261,共8页
快速、灵敏和特异性地检测病原微生物,在临床诊断和传染病控制中具有重要意义。早期准确检测是快速控制疫区疫情的有效措施,尤其是在缺乏有效治疗和疫苗的情况下。聚合酶链式反应(PCR)作为常用的核酸检测技术和疾病诊断的“金标准”,有... 快速、灵敏和特异性地检测病原微生物,在临床诊断和传染病控制中具有重要意义。早期准确检测是快速控制疫区疫情的有效措施,尤其是在缺乏有效治疗和疫苗的情况下。聚合酶链式反应(PCR)作为常用的核酸检测技术和疾病诊断的“金标准”,有着高灵敏度的优势,但同时也存在以牺牲特异性为代价的现象。酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种快速、特异性强的蛋白质和小分子诊断工具。然而,灵敏度低和样品预处理复杂的操作步骤极大地限制了该方法现场检测的应用。因此,快速、灵敏和特异性的检测技术成为了急需解决的要点,随着技术的应用和发展,基于CRISPR-Cas的生物传感系统的优异性能在开发病原微生物诊断技术方面引起了人们的关注。本文综述了CRISPR/Cas系统在病原微生物检测的作用机制及原理,总结了新型检测技术的优缺点并对应用发展前景进行展望。Rapid, sensitive, and specific detection of pathogenic microorganisms is crucial for clinical diagnosis and infectious disease control. Early and accurate detection is an effective measure to quickly control epidemic outbreaks, especially in the absence of effective treatments and vaccines. Polymerase Chain Reaction (PCR) is a commonly used nucleic acid testing technology and the “gold standard” for disease diagnosis with high sensitivity. However, it often sacrifices specificity. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) is a rapid and highly specific diagnostic tool for proteins and small molecules. Nevertheless, its low sensitivity and complex sample preprocessing steps greatly limit its application in on-site testing. Therefore, the development of rapid, sensitive, and specific detection technologies has become an urgent need. With the application and advancement of technology, the excellent performance of CRISPR-Cas based biosensing systems has attracted attention in the development of pathogenic microorganism diagnostic techniques. This article reviews the mechanisms and principles of CRISPR/Cas systems in pathogenic microorganism detection, summarizes the advantages and disadvantages of novel detection technologies, and provides an outlook on their future applications. 展开更多
关键词 CRISPR-Cas系统 病原微生物核酸检测 微流体纸基分析装置mPAD CRISPR相关蛋白质类 逆转录聚合酶链式反应
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