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人原代呼吸道上皮细胞培养及抗呼吸道合胞病毒活性
1
作者 丁惠如 赵敏 +5 位作者 程宁宁 付远辉 彭向雷 虞结梅 郑妍鹏 何金生 《生物学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期20-25,共6页
为建立人原代呼吸道上皮细胞(Human airway epithelial cell,hAEC)的培养方法,并在hAEC体系上探讨3-硫代吲哚类化合物RSV-A-4和免疫抑制剂代谢产物6-MMPr的抗呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)活性及其机制,从而构建可用... 为建立人原代呼吸道上皮细胞(Human airway epithelial cell,hAEC)的培养方法,并在hAEC体系上探讨3-硫代吲哚类化合物RSV-A-4和免疫抑制剂代谢产物6-MMPr的抗呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)活性及其机制,从而构建可用于RSV药物筛选及药效评价的细胞模型。采集人呼吸道上皮细胞样本,分离细胞后建立hAEC的培养方法,并进行细胞形态和活力鉴定;在hAEC体系上检测小分子化合物RSV-A-4和6-MMPr的抗RSV活性及其细胞毒性;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)与Time-of-addition assay技术,探讨RSV-A-4和6-MMPr的抑制RSV复制的作用机制。培养的hAEC经鉴定:其体外培养存活率可达93.51%;RSV-A-4和6-MMPr的半数抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别为(207.30±4.77)μmol/L和(3191.00±6.11)μmol/L,6-MMPr的半数细胞毒性浓度(Half maximal cytotoxic concentration,CC_(50))为(95526.00±10.97)μmol/L,而RSV-A-4对hAEC未见明显细胞毒性;RSV-A-4和6-MMPr均在RSV病毒基因组复制阶段抑制RSV复制。成功建立可用于抗RSV药物筛选及体外评价的hAEC培养体系,RSV-A-4和6-MMPr在细胞水平均能有效抑制RSV复制。 展开更多
关键词 人原代呼吸道上皮细胞 呼吸道合胞病毒 抗病毒化合物 抗病毒活性 抗病毒机制
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黄芩、猫眼草、连翘单味中药体外抗HIV-1病毒活性的研究
2
作者 李承乘 张清燕 +4 位作者 刘真 邓博文 杨瑶瑶 沈俊岭 李强 《中医研究》 2024年第1期78-82,共5页
目的:构建抗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)-1假病毒药物筛选平台,在此基础上观察黄芩、猫眼草、连翘单味中药对HIV假病毒感染MAGI-CCR5细胞系的影响,评价其抗病毒作用。方法:选用重组质粒PLAI(含HIV包膜蛋白基因... 目的:构建抗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)-1假病毒药物筛选平台,在此基础上观察黄芩、猫眼草、连翘单味中药对HIV假病毒感染MAGI-CCR5细胞系的影响,评价其抗病毒作用。方法:选用重组质粒PLAI(含HIV包膜蛋白基因)和重组质粒JRFC(含HIV骨架基因)共转染293T细胞制备假病毒,建立假病毒筛选平台;采用MTT法检测药物对MAGI-CCR5细胞增殖的影响,筛选出对细胞无毒性的最合适浓度。通过药物体外对假病毒感染MAGI-CCR5的抑制实验,观察3种单味中药水煎液体外抗HIV-1病毒的活性。结果:3种单味中药均有体外抗HIV假病毒作用,且抗病毒作用与药物质量分数呈明显的剂量效应关系,2.17 mg/L黄芩、3.45 mg/L猫眼草、2.50 mg/L连翘表现出最高抑制率,依次是41.87%、37.38%、14.12%。结论:单味中药黄芩、猫眼草具有较好的体外抗HIV病毒的作用,连翘的抗HIV病毒作用相对较弱。 展开更多
关键词 黄芩 猫眼草 连翘 HIV-1 假病毒 抗HIV-1病毒活性
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猪IFN-α8的原核表达及抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性研究
3
作者 方剑玉 张青娴 +6 位作者 郎利敏 徐彬 王改利 席燕燕 冯现明 王克领 李绍钰 《河南农业科学》 北大核心 2023年第9期141-147,共7页
为确定猪干扰素α8(poIFN-α8)蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗病毒作用,合成poIFN-α8基因,克隆入pCSMH大肠杆菌表达载体,将重组表达载体转化DH5α感受态细胞,进行温度诱导表达后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳。将表达的目的蛋... 为确定猪干扰素α8(poIFN-α8)蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗病毒作用,合成poIFN-α8基因,克隆入pCSMH大肠杆菌表达载体,将重组表达载体转化DH5α感受态细胞,进行温度诱导表达后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳。将表达的目的蛋白利用Ni-琼脂糖凝胶纯化柱纯化后,采用Western blot试验检测重组poIFN-α8的反应原性,利用猪肺泡巨噬细胞(PAM)检测0.01、0.05、0.1、1 ng/mL的重组poIFN-α8蛋白对PRRSV的抗病毒活性,并检测重组poIFN-α8蛋白对下游干扰素刺激基因(ISG)Mx1、OAS1、ISG15的诱导激活作用。结果表明,成功构建了pCSMH-IFN-α8表达载体,实现了poIFN-α8在大肠杆菌中的包涵体表达,且重组poIFN-α8蛋白具有良好的反应原性;0.05 ng/mL的重组poIFN-α8蛋白可显著抑制PRRSV在PAM中的复制,poIFN-α8的抗病毒效果显著优于猪干扰素α2(poIFN-α2)、猪干扰素α5(poIFN-α5),且重组poIFN-α8能有效激活ISG的表达。综上,表达的重组poIFN-α8蛋白能有效抑制PRRSV的复制,且能激活ISG的表达。 展开更多
关键词 猪干扰素α8 大肠杆菌表达 猪繁殖与呼吸综合征病毒 干扰素刺激基因 抗病毒活性
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重组猪干扰素β在CHO细胞中的表达及其抗口蹄疫病毒活性的研究 被引量：3
4
作者 王凌云 郝荣增 +10 位作者 茹毅 常辉 杨洋 李亚军 张丽伟 卢炳州 刘艳红 龚真莉 井波 齐萌 郑海学 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期143-149,共7页
构建猪IFN-β重组真核表达质粒pcDNA3.1-PoIFN-β,转染悬浮培养的CHO细胞,进行上清分泌表达;通过CHO细胞表达系统,成功分泌表达和制备纯化的rPoIFN-β。通过CCK-8试验,分析rPoIFN-β对细胞的毒性,结果显示纯化的rPoIFN-β对细胞无明显毒... 构建猪IFN-β重组真核表达质粒pcDNA3.1-PoIFN-β,转染悬浮培养的CHO细胞,进行上清分泌表达;通过CHO细胞表达系统,成功分泌表达和制备纯化的rPoIFN-β。通过CCK-8试验,分析rPoIFN-β对细胞的毒性,结果显示纯化的rPoIFN-β对细胞无明显毒性;采用VSV/PK-15系统检测rPoIFN-β抗病毒活性效价,结果显示其抗病毒活性效价为4.54×10^(7)U/mg;制备的rPoIFN-β可显著抑制O型和A型FMDV在PK-15细胞的复制,表现出较强的抗病毒活性;通过分析rPoIFN-β对细胞ISGs的诱导作用,发现rPoIFN-β能够显著刺激12种ISGs的表达。研究结果表明,本试验制备纯化的rPoIFN-β具有较低的细胞毒性和较高的抗病毒活性效价,为口蹄疫防控制剂的开发和研究提供了基础数据。 展开更多
关键词 猪IFN-β CHO细胞 蛋白表达 抗病毒活性 口蹄疫病毒
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IFN-α对山羊副流感病毒3型的抗病毒活性 被引量：1
5
作者 孙敏 郝飞 +5 位作者 张纹纹 李文良 杨蕾蕾 毛立 程子龙 刘茂军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期736-743,共8页
旨在探讨原核表达纯化的山羊α干扰素(IFN-α)对山羊副流感病毒3型(CPIV3)的抗病毒活性。通过分析山羊IFN-α的序列特点,比对不同种属IFN-α的同源性,进而构建山羊IFN-α成熟蛋白编码基因(去除信号肽基因序列)的原核表达载体pET-30a-gI... 旨在探讨原核表达纯化的山羊α干扰素(IFN-α)对山羊副流感病毒3型(CPIV3)的抗病毒活性。通过分析山羊IFN-α的序列特点,比对不同种属IFN-α的同源性,进而构建山羊IFN-α成熟蛋白编码基因(去除信号肽基因序列)的原核表达载体pET-30a-gIFN-α,将其转化至感受态细胞Rosetta(DE3),IPTG诱导后镍柱及亲和纯化获得山羊IFN-α。利用RT-qPCR测定山羊IFN-α作用于牛肾细胞(Madin-Darby bovine kidney cell,MDBK cell)后6种干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)的相对表达水平;同时,利用TCID50及Western blot测定其对CPIV3的抗病毒活性。结果表明,原核表达的山羊IFN-α蛋白含量为0.20 mg·mL^(-1),Western blot结果表明表达产物相对分子质量约为20 ku,与预期结果相符。RT-qPCR结果显示,山羊IFN-α孵育MDBK细胞后,可显著刺激RSAD2、STAT1及ISG15等6种ISGs基因的转录上调。与对照组细胞相比,山羊IFN-α显著下调MDBK细胞中CPIV3的病毒滴度,Western blot结果显示,山羊IFN-α孵育显著下调CPIV3非结构蛋白C的表达水平。山羊IFN-α对CPIV3在MDBK细胞中的增殖具有显著抑制作用。本研究扩展了I型干扰素的研究范围,为CPIV3等反刍动物疫病的防控提供新的思路。 展开更多
关键词 山羊IFN-α 原核表达 ISGs 山羊副流感病毒3型 抗病毒活性
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异绿原酸A体外抗小反刍兽疫病毒活性及其作用机制研究 被引量：3
6
作者 焦豪杰 陈绍红 刘铀 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2023年第1期125-135,共11页
【目的】研究异绿原酸A(isochlorogenic acid A,IAA)体外抗小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminant virus,PPRV)的效果及其作用机制。【方法】采用MTT法测定IAA对非洲绿猴肾细胞(verda reno,Vero)的最大无毒质量浓度、半数细胞毒性... 【目的】研究异绿原酸A(isochlorogenic acid A,IAA)体外抗小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminant virus,PPRV)的效果及其作用机制。【方法】采用MTT法测定IAA对非洲绿猴肾细胞(verda reno,Vero)的最大无毒质量浓度、半数细胞毒性质量浓度(50%cytotoxic mass concentration,CC_(50));空斑形成试验测定IAA的半数有效质量浓度(median effect mass concentration,EC_(50))并计算治疗指数(therapeutic index,TI);MTT法观察IAA对PPRV感染的Vero细胞活性的影响;采用空斑形成试验、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)、免疫印迹试验和间接免疫荧光试验观察IAA对PPRV增殖和分布的影响;采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光探针、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)比色法和羟胺比色法分别检测IAA对PPRV感染细胞内ROS、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性的影响;采用免疫印迹试验检测IAA对PPRV感染细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(B cell lymphoma-2 protein,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达水平的影响。【结果】IAA对Vero细胞的最大无毒质量浓度、CC_(50)、EC_(50)分别为7.81、125.60、21.02 mg·L^(-1),TI值为5.98;IAA处理能显著抑制PPRV诱导的细胞病变及病毒在Vero细胞中的增殖;细胞活力显著高于病毒感染细胞;病毒噬斑形成数量、病毒F和N基因表达水平显著降低;宿主细胞胞浆内病毒分布显著减少。IAA能显著提高PPRV感染细胞SOD活性,清除病毒感染细胞内的ROS和MDA。经IAA处理的PPRV感染细胞中PI3K、AKT表达水平极显著提高,p-AKT表达水平显著降低,Bax/Bcl-2比值显著降低。【结论】IAA通过调节宿主细胞PI3K/AKT通路及其下游细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达水平来缓解PPRV感染引起的氧化应激反应,从而发挥其抗PPRV活性。 展开更多
关键词 异绿原酸A 小反刍兽疫病毒 抗病毒活性 作用机制 信号通路
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朱砂七化学成分及其体外细胞毒性、抗病毒活性研究
7
作者 王冯瑞 王薇 +6 位作者 刘辰旺 但林蔚 李玉泽 姜祎 张化为 张东东 宋小妹 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1537-1543,共7页
目的研究朱砂七Fallopia multiflora var.ciliinervis(Nakai)Yonekura&H.Ohashi化学成分及其体外细胞毒性、抗病毒活性。方法朱砂七75%乙醇提取物采用硅胶柱层析、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的... 目的研究朱砂七Fallopia multiflora var.ciliinervis(Nakai)Yonekura&H.Ohashi化学成分及其体外细胞毒性、抗病毒活性。方法朱砂七75%乙醇提取物采用硅胶柱层析、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法测定体外细胞毒活性,CCK-8法测定体外抗病毒活性。结果从中分离得到20个化合物,分别鉴定为3-acetyl-4,5-dimethoxy-benzoic acid(1)、没食子酸甲酯(2)、没食子酸(3)、对羟基苯甲醛(4)、原儿茶酸(5)、3,4-二羟基苯甲醛(6)、丁香酸(7)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(8)、p-hydroxyphenethyl-O-β-D-glucoside(9)、2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-ethyl-O-β-D-glucoside(10)、反式-白藜芦醇(11)、顺式-白藜芦醇(12)、白藜芦醇-3-O-β-D-(2′-O-反式-肉桂酰基)-葡萄糖苷(13)、白藜芦醇-3-O-β-D-(2′-O-顺式-肉桂酰基)-葡萄糖苷(14)、白藜芦醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(15)、N-反式阿魏酰-3-甲氧基酪胺(16)、poke-weed cerebroside(17)、何首乌乙素(18)、9,10,13-三羟基十八烷酸(19)、正丁基-β-D-吡喃果糖苷(20)。化合物11对HCT116、SW620细胞的IC 50值分别为(30.87±2.7)、(56.11±0.49)μmol/L,化合物12对EV-A71病毒的抑制率为50.21%。结论化合物1为新天然产物,化合物9~10为首次从蓼科植物中分离得到,化合物8、12、14、17、19为首次从何首乌属植物中分离得到,化合物2、4~7、11、18为首次从该植物中分离得到。化合物11具有细胞毒性,化合物12具有抗病毒活性。 展开更多
关键词 朱砂七 化学成分 分离鉴定 细胞毒性 抗病毒活性
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百里香酚体外抗伪狂犬病毒活性评价及其作用方式
8
作者 宋天浩 庞莲凤 +5 位作者 陈凌霜 邓惠丹 徐志文 朱玲 任志华 邓俊良 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期41-49,共9页
采用细胞体外培养技术,以BHK-21细胞为研究模型,探讨不同质量浓度的百里香酚在体外抗伪狂犬病毒(PRV)的活性及其作用方式。使用CCK-8法检测百里香酚对BHK-21细胞的最大无害浓度(MNTC),计算得出其半数抑制浓度(IC50)为(212.789±1.6... 采用细胞体外培养技术,以BHK-21细胞为研究模型,探讨不同质量浓度的百里香酚在体外抗伪狂犬病毒(PRV)的活性及其作用方式。使用CCK-8法检测百里香酚对BHK-21细胞的最大无害浓度(MNTC),计算得出其半数抑制浓度(IC50)为(212.789±1.652)μg·mL^(-1),对PRV的半数有效浓度(EC50)为(30.710±0.303)μg·mL^(-1),对PRV的治疗指数(TI)为6.929,说明百里香酚属于高效低毒类抗PRV药物。使用CPE观察法检测百里香酚对PRV病毒滴度和病毒一步生长曲线的影响,结果显示,百里香酚能够剂量依赖性显著降低PRV的病毒滴度,并降低PRV在BHK-21中增殖后的毒力。采用荧光定量PCR方法检测不同处理下PRV感染的BHK-21细胞的PRV-gE基因的拷贝量,研究百里香酚体外抗PRV的作用方式,结果显示,百里香酚主要是通过抑制PRV在BHK-21细胞中的增殖来发挥抗病毒活性的,同时能够直接杀灭部分PRV病毒粒子。 展开更多
关键词 百里香酚 伪狂犬病毒 体外抗病毒活性 作用方式
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八仙草化学成分及其抗病毒活性
9
作者 曾瑜 黄海宁 +2 位作者 蒋莉 唐炳兰 陈路 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3290-3296,共7页
目的研究八仙草Galium aparine L.的化学成分及其抗病毒活性。方法八仙草60%乙醇提取物采用D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、TLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT比色法对其抗病毒活性进行测定... 目的研究八仙草Galium aparine L.的化学成分及其抗病毒活性。方法八仙草60%乙醇提取物采用D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、TLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT比色法对其抗病毒活性进行测定。结果从中分离得到17个化合物,分别鉴定为槲皮素(1)、山柰酚(2)、芦丁(3)、异鼠李素(4)、香叶木素(5)、表没食子儿茶素(6)、表儿茶素没食子酸酯(7)、异牡荆素-2″-O-α-L-鼠李糖苷(8)、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(10)、异鼠李素-3-O-芸香糖苷(11)、异鼠李素-3-O-芸香糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(12)、β-谷甾醇(13)、β-胡萝卜苷(14)、丁香酸(15)、3,4-二羟基苯甲酸(16)、车叶草苷(17)。化合物7抗H5N1病毒半数有效浓度为(0.06±0.01)mmol/L。结论化合物12为首次从拉拉藤属植物中分离得到,化合物4~11、15~16为首次从该植物中分离得到。化合物7具有较强的抗H5N1病毒活性。 展开更多
关键词 八仙草 化学成分 分离鉴定 抗病毒活性 H5N1
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山羊α-干扰素基因克隆、原核表达及其抗病毒活性研究
10
作者 徐菁昱 刘艳芬 +1 位作者 陈绍红 刘铀 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1151-1158,共8页
为研究雷州山羊α-干扰素基因的遗传变异及重组α-干扰素的抗病毒活性,采用RT-PCR扩增雷州山羊α-干扰素基因,分析其核苷酸序列;采用PCR方法扩增山羊α-干扰素基因成熟肽编码序列,构建原核表达载体pET-mIFN-α,并在大肠杆菌BL21(DE3)诱... 为研究雷州山羊α-干扰素基因的遗传变异及重组α-干扰素的抗病毒活性,采用RT-PCR扩增雷州山羊α-干扰素基因,分析其核苷酸序列;采用PCR方法扩增山羊α-干扰素基因成熟肽编码序列,构建原核表达载体pET-mIFN-α,并在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达;采用SDS-PAGE和Western-blot检测重组蛋白rG-mIFN-α;通过细胞病变抑制法测定其抗小反刍兽疫病毒(PPRV)和山羊痘病毒(GPV)活性。结果表明,雷州山羊α-干扰素全基因由570个核苷酸组成,编码189个氨基酸;与GenBank上发表的山羊、林麝、弯角大羚羊、黄牛、瘤牛、绵羊、猪、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为99.8%、95.6%、96.8%、94.7%、94.7%、96.8%、81.6%、77.8%和70.0%;氨基酸序列同源性分别为100%、92.6%、94.7%、92.1%、93.2%、93.7%、67.9%、61.6%和55.3%,提示反刍动物α-干扰素基因的核苷酸和氨基酸序列高度保守;rG-IFNα主要以包涵体形式存在,分子质量约32 ku;重组山羊α-干扰素能显著抑制PPRV和GPV感染引起的细胞病变,其抗PPRV和GPV效价分别为1.6×10^(4)U/mg和1.35×10^(4)U/mg。 展开更多
关键词 雷州山羊 α-干扰素(IFN-α) 序列分析 原核表达 抗病毒活性
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千里光化学成分及抗烟草花叶病毒活性研究
11
作者 符滔 李雅丽 +5 位作者 张威 吴江梅 刘洋 罗新香 闫晓慧 胡世俊 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2023年第9期1554-1561,共8页
对千里光(Senecio scandens)化学成分及其抗烟草花叶病毒(TMV)活性进行研究,为开发新型植物病毒抑制剂提供理论依据。综合运用硅胶、凝胶、MCI等多种柱层析方法对千里光地上部分乙酸乙酯萃取物化学成分进行分离,利用NMR、MS鉴定其结构;... 对千里光(Senecio scandens)化学成分及其抗烟草花叶病毒(TMV)活性进行研究,为开发新型植物病毒抑制剂提供理论依据。综合运用硅胶、凝胶、MCI等多种柱层析方法对千里光地上部分乙酸乙酯萃取物化学成分进行分离,利用NMR、MS鉴定其结构;采用活体半叶枯斑法测定化合物对TMV的抑制活性。从千里光乙酸乙酯萃取物中共分离得到13个化合物,根据其理化性质以及波谱数据分别鉴定为24-烯-环阿尔廷酮(1)、3β-羟基-7β-甲氧基-5-豆甾烯(2)、正三十二烷(3)、乌索酸(4)、豆甾醇(5)、(22 E)-ergosta-6,22-diene-3β,5β,8α-triol(6)、山柰酚(7)、3-吲哚甲醛(8)、泽兰黄酮(9)、槲皮素(10)、紫杉叶素(11)、jacaranone(12)、叶绿醇(13)。除化合物7和化合物10外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。活性测定结果表明,化合物8和化合物13具有较强的抗TMV活性。 展开更多
关键词 千里光 化学成分 抗烟草花叶病毒活性 半叶枯斑法
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大孔树脂纯化青蒿多酚的工艺设计及其体外抗病毒活性研究
12
作者 王云雨 王健 +3 位作者 张丽 万新焕 牛凤菊 周长征 《山东农业科学》 北大核心 2023年第9期173-180,共8页
本试验比较了AB-8、NKA-9、HPD-100、DM130、D101及X-5六种大孔树脂对青蒿总多酚的纯化效果,筛选出富集青蒿多酚的最佳大孔树脂型号为HPD-100。采用单因素试验确定其最佳工艺参数:上样液pH值为2.0,质量浓度为50 mg/mL,上样量为13 BV,静... 本试验比较了AB-8、NKA-9、HPD-100、DM130、D101及X-5六种大孔树脂对青蒿总多酚的纯化效果,筛选出富集青蒿多酚的最佳大孔树脂型号为HPD-100。采用单因素试验确定其最佳工艺参数:上样液pH值为2.0,质量浓度为50 mg/mL,上样量为13 BV,静态吸附2 h;洗脱液是体积分数为70%乙醇溶液,用量为5 BV。纯化后的青蒿总多酚纯度较纯化前增加了1.63倍。纯化后的青蒿总多酚对RSV、HSV-1和HSV-2均表现出显著的体外抗病毒活性,而对EV71未表现出较好的抑制效果。 展开更多
关键词 大孔树脂 青蒿 多酚 抗病毒活性
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海藻多糖的抗病毒活性及其机制的研究进展
13
作者 高星熠 张诗悦 +4 位作者 张伟 张亮 陈九 闫滨 杨宏军 《中南药学》 2023年第7期1852-1858,共7页
海藻多糖是海藻的主要组成成分,近年来受到国内外学者的高度重视,研究发现,海藻多糖结构复杂,具有多种生理活性,尤其具备显著的抗病毒活性。本文主要对国内外海藻多糖的抗病毒活性和相关作用机制研究进展进行总结,并对海藻多糖混合物的... 海藻多糖是海藻的主要组成成分,近年来受到国内外学者的高度重视,研究发现,海藻多糖结构复杂,具有多种生理活性,尤其具备显著的抗病毒活性。本文主要对国内外海藻多糖的抗病毒活性和相关作用机制研究进展进行总结,并对海藻多糖混合物的分离纯化方式进行总结和整理,以期为海藻多糖抗病毒活性的研究提供发展方向,并对关键性问题提供建议,促进海藻多糖在抗病毒新药研发方面发挥更重要的作用。 展开更多
关键词 海藻多糖 抗病毒活性 机制 研究进展
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干热处理对南瓜种子发芽及CGMMV病毒活性的影响
14
作者 杜忠佩 陈星伊 +2 位作者 金卫杰 李兰华 张玉宝 《寒旱农业科学》 2023年第9期839-844,共6页
黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)可借助种子远距离传播,对葫芦科植物的生长和发展造成严重威胁。为有效防控黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)在南瓜上的侵染,在保证南瓜种子发芽及子叶生长不受影响的同时能够有效降低黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)的... 黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)可借助种子远距离传播,对葫芦科植物的生长和发展造成严重威胁。为有效防控黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)在南瓜上的侵染,在保证南瓜种子发芽及子叶生长不受影响的同时能够有效降低黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)的活性的前提下,寻找南瓜种子干热处理的最适温度和时间条件。我们对南瓜新种子和旧种子进行干热处理,比较了处理温度、持续时间及处理后保存时间对南瓜种子发芽率的影响,并采用实时荧光定量RT-PCR检测病毒的表达量。试验结果表明,处理温度和持续时间及其互作效应都对南瓜种子的发芽率有显著或极显著影响。恒温干热法处理南瓜新种子,处理时间为72 h,处理温度为80℃和86℃时,种子发芽率不会显著降低,且CGMMV全部灭活。保存1 a的南瓜旧种子,用低于80℃的温度处理72 h,发芽率没有显著变化,但当处理温度为86℃时,种子发芽率显著降低。变温干热法处理南瓜旧种子,由于累计处理时间长达7 d,当变温中最高温度达到72℃以上时,将显著影响南瓜种子的发芽。由此可见,干热处理种子是防治南瓜CGMMV病毒的有效方法之一。 展开更多
关键词 南瓜种子 干热处理 发芽率 黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV) 病毒活性
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多酚类化合物及其衍生物抗乙肝病毒活性及作用机制研究进展
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作者 王亚茹 蔡文涛 《湖北大学学报（自然科学版）》 CAS 2023年第3期339-348,共10页
乙型肝炎病毒(乙肝病毒)作为一种嗜肝DNA病毒,是引起乙型病毒性肝炎(乙肝)的病原体.人体感染乙肝病毒后机体会产生持续的免疫应答,很大程度上会造成慢性乙肝,进而发展成肝硬化甚至肝癌,严重威胁患者的生命健康.天然产物是药物发现的宝库... 乙型肝炎病毒(乙肝病毒)作为一种嗜肝DNA病毒,是引起乙型病毒性肝炎(乙肝)的病原体.人体感染乙肝病毒后机体会产生持续的免疫应答,很大程度上会造成慢性乙肝,进而发展成肝硬化甚至肝癌,严重威胁患者的生命健康.天然产物是药物发现的宝库.从天然产物中分离得到的多酚类化合物因含有大量羟基,使其具有抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老等功能,目前已成为研究热点之一.多酚类化合物及其衍生物(如表没食子儿茶素没食子酸酯、迷迭香酸、没食子酸等)可通过不同的作用机制发挥抗乙肝病毒活性,如抑制病毒吸附、靶向病毒cccDNA,抑制病毒复制转录过程,调控病毒诱导的细胞自噬、细胞凋亡、细胞相关信号通路及氧化应激反应等.对多酚类化合物及其衍生物抗乙肝病毒活性及作用机制研究进行综述,以期为今后抗乙肝病毒新药研发提供一定的参考. 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 多酚类化合物 衍生物 抗病毒活性 作用机制
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α-羟基-γ-丁内酯类衍生物的设计、合成及抗植物病毒活性
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作者 贺宏伟 徐丹 徐功 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1261-1269,共9页
为寻找具有高活性抗病毒化合物,开发绿色抗植物病毒剂,设计合成了21个α-羟基-γ-丁内酯类化合物,其结构经过核磁共振氢谱、碳谱以及高分辨质谱确认,并初步测定了它们对烟草花叶病毒(TMV)的钝化活性、保护活性和治疗活性。结果表明:该... 为寻找具有高活性抗病毒化合物,开发绿色抗植物病毒剂,设计合成了21个α-羟基-γ-丁内酯类化合物,其结构经过核磁共振氢谱、碳谱以及高分辨质谱确认,并初步测定了它们对烟草花叶病毒(TMV)的钝化活性、保护活性和治疗活性。结果表明:该类化合物具有较好的抗TMV活性,其中化合物8o表现出显著的钝化活性,其EC_(50)值为226.2μg/mL,优于对照药剂病毒唑(EC_(50)值308.4μg/mL)。 展开更多
关键词 天然产物 Γ-丁内酯 合成 抗植物病毒活性 烟草花叶病毒
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红树木榄生境中可培养细菌物种多样性及其体外抗乙肝病毒活性研究
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作者 候师师 梁考云 +4 位作者 高程海 蒋翠萍 唐倩倩 刘永宏 易湘茜 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期616-625,共10页
红树生境中微生物菌群丰富,其次生代谢产物结构新颖,是挖掘新型药物的重要来源。该研究利用纯培养技术和16S rRNA分子生物学技术确定细菌种属,并进行物种多样性分析;以HepG2.2.15细胞株为模型,通过MTT和PCR技术测试细菌代谢产物的抗乙... 红树生境中微生物菌群丰富,其次生代谢产物结构新颖,是挖掘新型药物的重要来源。该研究利用纯培养技术和16S rRNA分子生物学技术确定细菌种属,并进行物种多样性分析;以HepG2.2.15细胞株为模型,通过MTT和PCR技术测试细菌代谢产物的抗乙肝病毒活性;使用LC-HRMS技术对活性菌株代谢产物进行初步分析,初步评价木榄沉积物、根、叶以及胚轴的可培养细菌多样性以及细菌代谢物生物活性,寻找抗乙肝病毒的药源菌株。结果表明:(1)共获得细菌59种,分属于4门5纲14目23科36属,其中芽孢杆菌为优势菌属;菌株GXIMD07402、GXIMD07665、GXIMD07384分别为Pseudooceanicola属、Thioclava属和Aestuariibaculum属的潜在新种。(2)抗乙肝病毒活性结果显示GXIMD07366、GXIMD07616、GXIMD07384、GXIMD07550、GXIMD07445X提取物能显著降低HepG2.2.15细胞上清液中HBV DNA水平(P<0.05),抑制率分别为51%、47%、63%、52%、47%。(3)初步鉴定强活性菌株GXIMD07384的4个主要代谢产物有adenosine、cyclo(L-Pro-L-OMet)、acremine G和7,8-dimethylbenzo[g]pteridine-2,4(1H,3H)-dione。综上认为,木榄生境中可培养细菌物种多样性丰富且含有能产生抗乙肝病毒活性化合物的菌株。该研究结果为后续海洋微生物资源的应用提供了基础。 展开更多
关键词 木榄 可培养细菌 物种多样性 代谢产物 抗乙肝病毒活性
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紫地榆的化学成分及其抗艾滋病病毒活性 被引量：33
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作者 杨国红 陈道峰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期352-354,共3页
关键词 抗艾滋病病毒活性 化学成分 紫地榆 抗艾滋病毒活性 老鹳草属 药用部位 活性筛选 化合物
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喷昔洛韦体外抗疱疹病毒活性的研究 被引量：7
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作者 肖春惠 杨占秋 +4 位作者 肖红 熊增慧 文利 侯炜 刘红 《中国病毒学》 CSCD 2002年第2期102-105,共4页
为评价新合成的喷昔洛韦的细胞毒性和抗疱疹病毒活性 ,通过观察病毒感染细胞的CPE、病毒滴度、抗病毒指数 ,从而判定喷昔洛韦的抗疱疹病毒作用。结果发现喷昔洛韦对HEL细胞、Hep 2细胞的半数中毒浓度 (TD50 )分别为 10 5 .2 μg/mL和 85... 为评价新合成的喷昔洛韦的细胞毒性和抗疱疹病毒活性 ,通过观察病毒感染细胞的CPE、病毒滴度、抗病毒指数 ,从而判定喷昔洛韦的抗疱疹病毒作用。结果发现喷昔洛韦对HEL细胞、Hep 2细胞的半数中毒浓度 (TD50 )分别为 10 5 .2 μg/mL和 85 .1μg/mL ;对HSV 1、HSV 2、VZV、HSV 1吴株的平均半数抑制浓度 (IC50 )分别为2 1.78μg/mL、2 0 .15 μg/mL、2 3.19μg/mL和 17.87μg/mL ,对各毒株的治疗指数分别为 5 .84、6 .31、5 .49和 7.11。 展开更多
关键词 喷昔洛韦 体外抗疱疹病毒活性 抗病毒药物 抗病毒活性
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广谱抗病毒抗生素17997体内外抗病毒活性研究 被引量：42
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作者 陶佩珍 娄志贤 +5 位作者 姚天爵 张兴权 线素文 姚恩泰 刘玉珍 王淑琴 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期368-372,391,共6页
从我国云南省土壤中分离到１株放线菌，其产生的抗生素１７９９７具有广谱抗病毒作用。在细胞培养内对单纯疱疹病毒１型、单纯疱疹病毒２型、人免疫缺陷病毒１型、水疱性口炎病毒及柯萨奇病毒Ｂ３均有显著抑制活性，ＩＣ５０在μｍｏｌ... 从我国云南省土壤中分离到１株放线菌，其产生的抗生素１７９９７具有广谱抗病毒作用。在细胞培养内对单纯疱疹病毒１型、单纯疱疹病毒２型、人免疫缺陷病毒１型、水疱性口炎病毒及柯萨奇病毒Ｂ３均有显著抑制活性，ＩＣ５０在μｍｏｌ／Ｌ水平。其在小鼠体内对单纯疱疹病毒１型及２型所致疱疹性脑炎有确切治疗效果，对死亡保护率及平均生存日与对照组相比有统计意义的显著差别。 展开更多
关键词 抗病毒抗生素 抗生素 17997 抗病毒活性
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