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花旗松素调节MCP-1/CCR2轴对急性淋巴细胞白血病细胞恶性进展的影响
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作者 王瑞娟 李超 +2 位作者 段丽娟 秦凡 冯金梁 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第5期799-804,共6页
目的:研究花旗松素(Taxifolin)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞恶性进展的影响及单核细胞趋化蛋白-1(CCL2)/CC趋化因子受体2(CCR2)轴发挥的作用。方法:体外培养ALL-T淋巴细胞CCRF-CEM;CCK-8法检测不同浓度Taxifolin对CCRF-CEM细胞活力影... 目的:研究花旗松素(Taxifolin)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞恶性进展的影响及单核细胞趋化蛋白-1(CCL2)/CC趋化因子受体2(CCR2)轴发挥的作用。方法:体外培养ALL-T淋巴细胞CCRF-CEM;CCK-8法检测不同浓度Taxifolin对CCRF-CEM细胞活力影响,筛选本实验用Taxifolin浓度;将CCRF-CEM细胞分为control组、Taxifolin-L组、Taxifolin-M组、Taxifolin-H组、Taxifolin+rCCL2组;EDU法检测各组CCRF-CEM细胞增殖;流式细胞术检测各组CCRF-CEM细胞凋亡;Transwell检测各组CCRF-CEM细胞侵袭能力;平板克隆形成实验检测各组CCRF-CEM细胞集落形成能力;RT-PCR检测各组CCRF-CEM细胞CCL2、CCR2基因表达水平;Western blot检测各组CCRF-CEM细胞CCL2、CCR2、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果:选择25、50、100μmol/L三个Taxifolin浓度进行后续实验;与control组相比,Taxifolin-L、M、H组CCRF-CEM细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著升高,CCRF-CEM细胞EDU阳性细胞率、侵袭细胞数量、细胞克隆集落数、CCL2、CCR2基因表达水平、CCL2、CCR2、Bcl-2蛋白表达水平均显著性降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);与Taxifolin-H组相比,Taxifolin+rCCL2组CCRF-CEM细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著性降低,CCRF-CEM细胞EDU阳性细胞率、侵袭细胞数量、细胞克隆集落数、CCL2、CCR2基因表达水平、CCL2、CCR2、Bcl-2蛋白表达水平均显著性升高(P<0.05)。结论:Taxifolin可能通过抑制CCL2/CCR2轴,从而抑制CCRF-CEM细胞恶性进展。 展开更多
关键词 花旗松素 CCL2/CCR2轴 急性淋巴细胞白血病细胞 恶性进展
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槲皮素对白血病细胞增殖、凋亡的影响
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作者 陈瑜 陶石 +4 位作者 胡敏 徐璐 王娇 符才波 周威伦 《中国老年学杂志》 2024年第3期688-691,共4页
目的 探讨槲皮素对白血病细胞增殖、凋亡的影响。方法 人原髓细胞白血病细胞(HL-60)加入10、20、40μmol/L浓度的槲皮素100μl,分别记为槲皮素10、20、40μmol/L组,另加入RPMI1640培养液100μl为空白组。比较各组细胞增殖、凋亡、黏附... 目的 探讨槲皮素对白血病细胞增殖、凋亡的影响。方法 人原髓细胞白血病细胞(HL-60)加入10、20、40μmol/L浓度的槲皮素100μl,分别记为槲皮素10、20、40μmol/L组,另加入RPMI1640培养液100μl为空白组。比较各组细胞增殖、凋亡、黏附能力、迁移能力、侵袭情况;检测各组HL-60细胞中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase)家族蛋白8、9、3的表达情况。结果 槲皮素抑制白血病细胞的增殖活力,其活力随槲皮素浓度和作用时间的增加而加强。槲皮素各组凋亡指数较空白组增加,黏附率、迁移率、侵袭数较空白组降低,差异有统计学意义(P<0.05),且槲皮素各组呈显著浓度依赖性(P<0.05)。40μmol/L槲皮素能够显著上调caspase9、3蛋白表达(P<0.05)。结论 槲皮素能够抑制白血病HL-60细胞的增殖、迁移和侵袭,促进凋亡,对其具有较强的杀伤作用,凋亡机制与细胞中caspase9、3蛋白有关。 展开更多
关键词 槲皮素 白血病细胞 增殖 凋亡 杀伤
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过表达CASP1诱导人急性髓系白血病细胞THP-1的G_(0)/G_(1)细胞周期阻滞和NLRP3炎性小体介导的焦亡
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作者 艾克拜尔·阿布都热衣木 徐丽 +2 位作者 阿孜古丽·麦麦提 阿依姆妮萨·阿卜杜热合曼 帕提古力·苏力坦 《河北医学》 CAS 2024年第2期204-210,共7页
目的:探讨半胱天冬酶1(Caspase1,CASP1)对人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞THP-1的细胞周期和细胞焦亡的影响。方法:培养THP-1细胞,将细胞分为对照组(正常培养的THP-1细胞),pcDNA3.1-null组(过表达CASP1的阴性对照,用... 目的:探讨半胱天冬酶1(Caspase1,CASP1)对人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞THP-1的细胞周期和细胞焦亡的影响。方法:培养THP-1细胞,将细胞分为对照组(正常培养的THP-1细胞),pcDNA3.1-null组(过表达CASP1的阴性对照,用5.0μg/mL的pcDNA3.1-null质粒转染THP-1细胞24h)、pcDNA3.1-CASP1组(过表达CASP1,用5.0μg/mL的pcDNA3.1-CASP1质粒转染THP-1细胞24h)。用CCK-8法检测各组细胞的增殖活力。用流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期的变化。用qRT-PCR法检测细胞中CASP1、白细胞介素(interleukin,IL)-1β,IL-18的mRNA表达水平。用Western blot法检测细胞增殖相关蛋白Ki67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nod-like receptor heat protein domain associated protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白((apoptosis-associated speck-like protein,ASC)、CASP1、切割半胱天冬酶1(cleaved-caspase 1,cleaved-CASP1)、IL-1β,IL-18、cleaved-Gasdermin D的相对表达水平。结果:与对照组比,pcDNA3.1-null组的细胞增殖活力、细胞凋亡、细胞周期变化均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比,pcDNA3.1-CASP1组的细胞凋亡变化无统计学意义(P>0.05),细胞的增殖活力减少,G_(0)/G_(1)细胞周期被阻滞,Ki67、PCNA、cyclin D1的相对表达水平均减少(P<0.05),NLRP3、ASC、CASP1、cleaved-CASP1、IL-1β,IL-18、cleaved-Gasdermin D的相对表达水平均增加(P<0.05)。与pcDNA3.1-null组比,pcDNA3.1-CASP1组的细胞凋亡变化无统计学意义(P>0.05),细胞的增殖活力减少,G_(0)/G_(1)细胞周期被阻滞,Ki67、PCNA、cyclin D1的相对表达水平均减少(P<0.05),NLRP3、ASC、CASP1、cleaved-CASP1、IL-1β,IL-18、cleaved-Gasdermin D(30 kDA)的相对表达水平均增加(P<0.05)。结论:过表达CASP1诱导AML细胞THP-1的G_(0)/G_(1)细胞周期阻滞和NLRP3炎性小体介导的焦亡。 展开更多
关键词 人急性髓系白血病细胞 半胱天冬酶1 细胞周期 细胞焦亡
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RNA结合蛋白RBPMS调控急性髓系白血病细胞系THP-1增殖与迁移
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作者 赵羚延 何浏 +1 位作者 马艳妮 余佳 《基础医学与临床》 CAS 2024年第5期619-625,共7页
目的研究具有多重剪接功能的RNA结合蛋白(RBPMS)对携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系THP-1功能的影响。方法使用GEO数据库分析造血系统中RBPMS的表达情况;通过慢病毒感染THP-1细胞,RT-qPCR和Western blot检测RBPMS过表达效率;... 目的研究具有多重剪接功能的RNA结合蛋白(RBPMS)对携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系THP-1功能的影响。方法使用GEO数据库分析造血系统中RBPMS的表达情况;通过慢病毒感染THP-1细胞,RT-qPCR和Western blot检测RBPMS过表达效率;通过高通量测序检测RBPMS过表达后对THP-1细胞转录组的影响。分别用CCK-8法和流式细胞仪检测RBPMS过表达对白血病细胞增殖以及迁移能力的影响。结果RBPMS在携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病干细胞中异常低表达。RBPMS过表达后THP-1细胞的增殖和迁移能力显著降低(P<0.0001,P<0.05)。结论RBPMS可以抑制携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系的细胞增殖与迁移。 展开更多
关键词 RBPMS MLL-AF9 急性髓系白血病 急性髓系白血病细胞系(THP-1)
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miR-141-5p/ZNF705A对慢性粒细胞白血病细胞源外泌体调控骨髓间充质干细胞黏附作用的机制
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作者 鲍静 许晗 +3 位作者 汪万杰 许婷婷 戴霁菲 夏瑞祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 2024年第3期506-514,共9页
目的探讨慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞源外泌体(exosome,Exo)中miR-141-5p/ZNF705A对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)黏附作用的影响。方法电镜和NTA粒径分析检测CML患者外周血和K... 目的探讨慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞源外泌体(exosome,Exo)中miR-141-5p/ZNF705A对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)黏附作用的影响。方法电镜和NTA粒径分析检测CML患者外周血和K562细胞中的Exo形态大小;qRT-PCR和Western blot检测转染前后K562细胞的Exo、BMSCs标记分子及黏附蛋白的表达情况;细胞黏附实验检测BMSCs的黏附能力;CCK-8法检测BMSCs活性、萤光素酶实验检测miR-141-5p与ZNF705A结合情况等。结果qRT-PCR结果显示,miR-141-5p表达在CML患者和K562细胞源Exo中均明显降低;qRT-PCR和Western blot等结果表明,CML患者中BMSCs的黏附蛋白CD44和CXCL12表达明显降低,且能够吞噬K562细胞源Exo。进一步发现,与CD34^(+)细胞相比,K562源性Exo能够降低Exo促进的BMSCs中CD44和CXCL12表达和黏附作用;同时,双萤光素酶基因报告等验证miR-141-5p与ZNF705A靶向结合;最后发现通过上调K562细胞源Exo中miR-141-5p的表达,靶向抑制ZNF705A,进而促进BMSCs的活性和黏附功能。结论K562细胞下调Exo中miR-141-5p表达,减少对ZNF705A的靶向抑制,进而抑制BMSCs的黏附功能,从而调控CML患者的骨髓造血功能。 展开更多
关键词 miRNA-141-5p K562细胞 骨髓间充质干细胞 ZNF705A 外泌体 慢性粒细胞白血病
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miR-155对慢性髓细胞白血病细胞凋亡及热休克蛋白表达的影响
6
作者 任影丽 陈治东 +3 位作者 孙蓓蓓 姚杰 马凡 周强 《安徽医科大学学报》 CAS 2024年第1期34-39,共6页
目的探讨微小RNA-155(miR-155)对慢性髓细胞白血病(CML)细胞凋亡情况和对热休克蛋白(HSP)27、HSP60及HSP70表达的影响。方法采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)分别检测miR-155在CML耐伊马替尼(IM)细胞株K562-G和CML细胞株K562中的表... 目的探讨微小RNA-155(miR-155)对慢性髓细胞白血病(CML)细胞凋亡情况和对热休克蛋白(HSP)27、HSP60及HSP70表达的影响。方法采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)分别检测miR-155在CML耐伊马替尼(IM)细胞株K562-G和CML细胞株K562中的表达水平。以携带miR-155的慢病毒和阴性对照慢病毒感染K562-G细胞,分别命名为miR-155组和对照组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测miR-155对耐药细胞增殖的影响。RT-qPCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-155对HSP27、HSP60、HSP70表达的影响。流式细胞术检测miR-155组和对照组细胞的凋亡比例。结果与K562细胞相比,K562-G细胞中miR-155呈低表达(P<0.05)。miR-155组细胞的增殖情况与对照组相比从第36 h开始降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-155组HSP60、HSP70升高(P<0.05),而HSP27降低(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,miR-155组细胞的凋亡率高于其对照组(P<0.05)。结论miR-155促进CML细胞的凋亡,并使细胞中的HSP60、HSP70表达升高,HSP27表达降低。 展开更多
关键词 MIR-155 慢性髓细胞白血病 耐药 热休克蛋白 细胞增殖 凋亡
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紫草素对人早幼粒细胞白血病细胞自噬和凋亡的影响
7
作者 陈燕 谢雪梅 +1 位作者 张晓林 张晓玲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2024年第2期416-421,共6页
目的:探讨紫草素对人早幼粒细胞白血病细胞自噬和凋亡的影响及可能的机制。方法:取对数生长期的人早幼粒细胞白血病细胞NB4,将其分为对照组(未处理的NB4细胞)、紫草素组(0.3μmol/L紫草素处理)、740Y-P组(15μmol/L PI3K/Akt/m TOR通路... 目的:探讨紫草素对人早幼粒细胞白血病细胞自噬和凋亡的影响及可能的机制。方法:取对数生长期的人早幼粒细胞白血病细胞NB4,将其分为对照组(未处理的NB4细胞)、紫草素组(0.3μmol/L紫草素处理)、740Y-P组(15μmol/L PI3K/Akt/m TOR通路激活剂740Y-P处理)、紫草素+740Y-P组(0.3μmol/L紫草素与15μmol/L 740Y-P共同处理),处理24 h后,用于后续实验,CCK-8法检测各组细胞活力,单丹磺酰戊二酸染色检测细胞自噬囊泡的聚集情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测各组细胞中Beclin1、LC3、p62、Bax、cleaved caspase-3、Bcl-2及PI3K/Akt/m TOR通路相关蛋白的表达。结果:与对照组比较,紫草素组NB4细胞内紫色点状荧光强度、细胞凋亡率及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、cleaved caspase-3、Bax蛋白相对表达量升高,OD_(450)值(24、48 h)及Bcl-2、p62蛋白相对表达量降低(均P<0.05);与对照组比较,740Y-P组NB4细胞内紫色点状荧光强度、细胞凋亡率及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、cleaved caspase-3、Bax蛋白相对表达量降低,OD_(450)值(24、48 h)及Bcl-2、p62蛋白相对表达量升高(均P<0.05);与紫草素组比较,紫草素+740Y-P组NB4细胞内紫色点状荧光强度、细胞凋亡率及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、cleaved caspase-3、Bax蛋白相对表达量降低,OD_(450)值(24、48 h)及Bcl-2、p62蛋白相对表达量升高(均P<0.05)。与对照组比较,紫草素组NB4细胞中PI3K/Akt/m TOR通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt、p-m TOR蛋白表达显著降低,而740Y-P组显著升高(均P<0.05);与紫草素组比较,紫草素+740Y-P组NB4细胞中p-PI3K、p-Akt、p-m TOR蛋白表达显著升高(均P<0.05)。结论:紫草素可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路促进NB4细胞自噬与凋亡。 展开更多
关键词 紫草素 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 早幼粒细胞白血病 自噬 细胞凋亡
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低浓度丁酸和白细胞介素5诱导人嗜酸性粒细胞白血病细胞系细胞分化的初步研究
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作者 王晶 闫冰 +2 位作者 任益民 王成硕 张罗 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2023年第7期443-447,共5页
目的 探究低浓度丁酸和白细胞介素5(IL-5)诱导人嗜酸性粒细胞白血病细胞系(EoL-1)分化为嗜酸性粒细胞的最优时间。方法 使用50μM丁酸和1 ng/ml IL-5诱导EoL-1细胞分化,分别在第0、3、6、9 d时,通过倒置显微镜观察细胞生长状态,并拍照... 目的 探究低浓度丁酸和白细胞介素5(IL-5)诱导人嗜酸性粒细胞白血病细胞系(EoL-1)分化为嗜酸性粒细胞的最优时间。方法 使用50μM丁酸和1 ng/ml IL-5诱导EoL-1细胞分化,分别在第0、3、6、9 d时,通过倒置显微镜观察细胞生长状态,并拍照记录。通过实时定量荧光聚合酶链式反应(Q-PCR)技术检测第0、3、5、6、9 d时,嗜酸性粒细胞相关因子的相对表达情况。HE染色观察细胞核形态变化及胞浆中嗜酸性颗粒蛋白染色情况。结果 低浓度丁酸和IL-5刺激后,光镜下可见随着刺激天数增加,细胞增殖速度降低,成团生长减少,细胞数量降低。Q-PCR结果显示,嗜酸性粒细胞相关因子IL-5、IL-10、IL-13、IL-17A、干扰素γ(IFN-γ)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、趋化因子26(CCL-26)的表达水平在第5天、第6天高于其他天数。HE染色结果显示,刺激6 d时,细胞核由椭圆形变为双叶核,细胞质中嗜酸性颗粒增多,胞浆被染为红色。结论 低浓度丁酸和IL-5诱导EoL-1细胞分化为嗜酸性粒细胞,6 d左右为最优时间。 展开更多
关键词 嗜酸细胞 细胞分化 嗜酸性粒细胞白血病细胞 丁酸
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氯普噻吨调节Akt/mTOR通路对人急性髓系白血病细胞自噬和凋亡的影响
9
作者 王瑞娟 李超 +2 位作者 段丽娟 尚淼 杨如玉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第20期2584-2590,共7页
目的探讨氯普噻吨通过调节蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对人急性髓系白血病(AML)细胞自噬和凋亡的影响。方法以SKNO-1、MOLM-13两个细胞系为研究对象,0、20、40、60μmol/L氯普噻吨分别处理SKNO-1、MOLM-13细胞6、1... 目的探讨氯普噻吨通过调节蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对人急性髓系白血病(AML)细胞自噬和凋亡的影响。方法以SKNO-1、MOLM-13两个细胞系为研究对象,0、20、40、60μmol/L氯普噻吨分别处理SKNO-1、MOLM-13细胞6、12、24 h,CCK-8检测细胞增殖情况。实验分为4组,对照组正常培养、SC79组用5 mg/L SC79处理细胞2 h,氯普噻吨组用40μmol/L氯普噻吨处理细胞12 h,氯普噻吨+SC79组在SC79组基础上添加40μmol/L氯普噻吨处理细胞12 h。单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测自噬的发生情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质免疫印迹检测自噬相关蛋白SQSTM1/p62、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B),凋亡相关蛋白聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)、激活型caspase3(cleaved caspase3)以及Akt/mTOR信号通路相关蛋白Akt、磷酸化(p)-Akt、mTOR、p-mTOR表达情况。结果在SKNO-1、MOLM-13细胞中,6、12、24 h时,与0μmol/L氯普噻吨相比,20、40、60μmol/L氯普噻吨处理后细胞增殖抑制率升高(P<0.05);在同一时间点,随着氯普噻吨浓度的升高,细胞增殖抑制率升高,40μmol/L氯普噻吨处理细胞12 h进行接下来研究。在SKNO-1、MOLM-13细胞中,与对照组相比,SC79组细胞凋亡率、自噬小体阳性率,LC3B、PARP、cleaved caspase3/caspase3蛋白表达水平降低(P<0.05),SQSTM1/p62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平升高(P<0.05);而氯普噻吨组表现出相反趋势(P<0.05);在SC79组基础上添加氯普噻吨,与氯普噻吨组相比,细胞凋亡率、自噬小体阳性率,LC3B、PARP、cleaved caspase3/caspase3蛋白表达水平降低(P<0.05),SQSTM1/p62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论氯普噻吨能够抑制Akt/mTOR通路促进人AML细胞自噬和凋亡。 展开更多
关键词 氯普噻吨 蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 人急性髓系白血病细胞 自噬 凋亡
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二甲双胍抑制急性髓系白血病细胞增殖
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作者 饶佳 吴霞 曾琳红 《南昌大学学报(医学版)》 2023年第4期25-29,共5页
目的探讨降糖药物二甲双胍对人急性髓系白血病细胞系U937细胞增殖的作用。方法将浓度梯度的二甲双胍(0、5、10、20、40、60 mmol·L^(-1))分别作用于U937细胞24、48 h,采用CCK-8试剂盒检测U937细胞活力,Annexin-V/PI assay试剂盒检... 目的探讨降糖药物二甲双胍对人急性髓系白血病细胞系U937细胞增殖的作用。方法将浓度梯度的二甲双胍(0、5、10、20、40、60 mmol·L^(-1))分别作用于U937细胞24、48 h,采用CCK-8试剂盒检测U937细胞活力,Annexin-V/PI assay试剂盒检测U937细胞凋亡率,JC-1检测U937细胞线粒体膜电位下降水平。同时基于细胞活力试验检测结果,将上述浓度梯度的二甲双胍分别作用于U937细胞48 h,采用Western blot检测Bcl-2蛋白表达水平。结果二甲双胍作用24 h对U937细胞增殖抑制作用较弱、无明显杀伤作用;作用48 h对U937细胞有抑制细胞生长、促进凋亡、降低线粒体膜电位作用,同时显著降低U937细胞Bcl-2蛋白水平。结论二甲双胍可杀伤人急性髓系白血病细胞系U937细胞。二甲双胍抗白血病作用可能与其下调线粒体膜电位、抑制Bcl-2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 二甲双胍 人急性髓系白血病细胞 U937细胞 增殖 线粒体 BCL-2
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氧化铁纳米颗粒对静止状态白血病细胞的作用研究
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作者 李宛清 张雪 +3 位作者 温涛 刘健 孟洁 许海燕 《北京生物医学工程》 2023年第1期52-56,60,共6页
目的研究二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒(DMSA-Fe3O4NPs)对静止状态白血病细胞的作用及机制。方法利用透射电镜观察纳米颗粒形貌;用低血清培养基诱导细胞进入静止状态,采用普鲁士蓝染色法与邻二氮菲铁定量法检测DMSA-Fe3O4NPs进... 目的研究二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒(DMSA-Fe3O4NPs)对静止状态白血病细胞的作用及机制。方法利用透射电镜观察纳米颗粒形貌;用低血清培养基诱导细胞进入静止状态,采用普鲁士蓝染色法与邻二氮菲铁定量法检测DMSA-Fe3O4NPs进入Kasumi-1细胞的情况;通过乳酸脱氢酶法、细胞氧化应激荧光探针和凋亡检测试剂分析DMSA-Fe3O4NPs对Kasumi-1细胞的作用。结果DMSA-Fe3O4NPs可进入静止状态的Kasumi-1细胞,细胞内铁含量与DMSA-Fe3O4NPs浓度成正比;与此同时,细胞活性降低,细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)与脂质过氧化物水平升高,细胞发生凋亡。正常培养的Kasumi-1细胞活性和氧化应激水平不受DMSA-Fe3O4NPs的影响。结论DMSA-Fe3O4NPs可进入静止状态的白血病细胞并引起细胞凋亡。 展开更多
关键词 氧化铁纳米颗粒 白血病细胞 静止 氧化应激 凋亡
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川楝子提取物抑制白血病细胞增殖的机制研究 被引量:1
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作者 朱大诚 刘振帅 +3 位作者 吴慧婷 徐笑明 康林之 常娜 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第4期4-8,I0011,I0012,I0013,共8页
目的探讨川楝子提取物对白血病CEM细胞生长抑制作用及其机制。方法CEM细胞培养至对数生长期,采用不同浓度川楝子提取物(16μg/mL、80μg/mL、400μg/mL、2 mg/mL、10 mg/mL)进行干预,MTT检测细胞抑制率并推算半数抑制浓度;吖啶橙染色观... 目的探讨川楝子提取物对白血病CEM细胞生长抑制作用及其机制。方法CEM细胞培养至对数生长期,采用不同浓度川楝子提取物(16μg/mL、80μg/mL、400μg/mL、2 mg/mL、10 mg/mL)进行干预,MTT检测细胞抑制率并推算半数抑制浓度;吖啶橙染色观察细胞结构改变;罗丹明123染色检测线粒体膜电位(ΔΨm)变化;流式细胞术检测细胞凋亡率和周期阻滞;免疫细胞化学检测Cyclin D1和CDK4蛋白表达;Western blot实验检测Bcl-XL、Bak、Cyt-C、Caspase-9和Caspase-3蛋白的表达。结果川楝子提取物能抑制CEM细胞的生长,在一定范围内对药物剂量和作用时间呈正向关联;吖啶橙染色可见给药后细胞核固缩及凋亡小体;川楝子提取物作用CEM细胞后,同对照组比较OD值显著增大(P<0.05或P<0.01),ΔΨm下降;流式细胞术检测给药组细胞凋亡率同对照组比较差异有显著统计学意义(P<0.01),随着药物浓度增加,G_(0)/G_(1)期细胞比例也逐渐加大,且细胞内Cyclin D1和CDK4表达逐渐减少,与对照组相比差异有显著统计学意义(P<0.01);各浓度川楝子提取物作用CEM细胞48 h后Cyt-C、Caspase-9和Caspase-3蛋白明显上调(P<0.05或P<0.01),Bcl-XL/Bak比值减小。结论川楝子提取物能抑制CEM细胞的增殖,其机制可能与以下两方面有关:①阻滞CEM细胞在G_(0)/G_(1)期;②抑制线粒体介导的凋亡途径中Bcl-XL蛋白的表达,同时上调Bak、Cyt-C、Caspase-9和Caspase-3蛋白的表达,从而促进CEM细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 川楝子 白血病CEM细胞 周期阻滞 线粒体 凋亡 以毒攻毒
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舒尼替尼诱导耐药白血病细胞K562/ADR焦亡的作用及其通路研究
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作者 林艳凤 黄莹莹 +3 位作者 洪小颖 吴玮 林东红 薛龑 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1272-1277,共6页
目的:探讨舒尼替尼(SU11248)对耐药白血病细胞K562/ADR死亡的诱导作用及其相关信号通路。方法:使用不同浓度舒尼替尼干预K562/ADR细胞,分别于24、48、72、96 h收集各组细胞,采用MTS法检测舒尼替尼对K562/ADR细胞增殖能力的影响,确定适... 目的:探讨舒尼替尼(SU11248)对耐药白血病细胞K562/ADR死亡的诱导作用及其相关信号通路。方法:使用不同浓度舒尼替尼干预K562/ADR细胞,分别于24、48、72、96 h收集各组细胞,采用MTS法检测舒尼替尼对K562/ADR细胞增殖能力的影响,确定适当的舒尼替尼干预时间和浓度。通过qPCR和Western blot检测舒尼替尼干预后K562/ADR细胞的凋亡相关基因mRNA和蛋白表达水平变化。使用4种不同细胞死亡抑制剂Nec-1、VX-765、CQ、Fer-1检测舒尼替尼干预后K562/ADR细胞的死亡方式。通过qPCR和Western blot检测舒尼替尼干预后K562/ADR细胞的焦亡相关基因mRNA和蛋白表达水平变化。结果:舒尼替尼可明显抑制K562/ADR细胞的增殖,抑制效果呈一定的时间及浓度依赖性(r_(48 h)=0.9579、r_(4μg/ml)=0.9740),其48 h的IC_(50)为(3.96±0.14)μg/ml;舒尼替尼干预后K562/ADR细胞凋亡相关基因Bax、BCL-2、Caspase-3、Caspase-9的mRNA和蛋白表达水平均无明显变化;4种不同细胞死亡抑制剂处理后,仅焦亡抑制剂VX-765能够明显逆转舒尼替尼对K562/ADR细胞的增殖抑制作用(P<0.01);舒尼替尼干预后K562/ADR细胞焦亡相关基因Caspase-1、Caspase-4、Caspase-5、NLRP3、GSDMD、IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。结论:舒尼替尼可诱导耐药白血病细胞K562/ADR发生焦亡,深入研究细胞焦亡相关信号通路有望为耐药白血病治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 舒尼替尼 耐药白血病细胞 K562/ADR 焦亡 信号通路
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LINC00284通过miR-3127/STAT3轴促进急性T淋巴细胞白血病细胞增殖、迁移和侵袭
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作者 张欢 王月娇 吴斌 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第17期3159-3165,共7页
目的:探讨LINC00284在急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)进展中的调节作用和潜在机制。方法:通过RT-qPCR检测T-ALL细胞系中LINC00284、miR-3127和STAT3的表达。将干预LINC00284、miR-3127或STAT3表达的... 目的:探讨LINC00284在急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)进展中的调节作用和潜在机制。方法:通过RT-qPCR检测T-ALL细胞系中LINC00284、miR-3127和STAT3的表达。将干预LINC00284、miR-3127或STAT3表达的质粒载体转染至MOLT-4细胞,通过MTT和流式细胞术测定细胞增殖和凋亡,通过Transwell测定细胞迁移和侵袭。通过生物信息网站分析和双荧光素酶报告基因检测验证miR-3127和LINC00284或STAT3之间的靶向关系。结果:T-ALL细胞系中LINC00284和STAT3表达上调,miR-3127表达下调。下调LINC00284或上调miR-3127显著抑制T-ALL细胞的增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡。LINC00284充当miR-3127的分子海绵抑制其表达,miR-3127靶向负调控STAT3表达。上调STAT3可以逆转下调LINC00284对T-ALL细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用和对细胞凋亡的促进作用。结论:这些发现表明LINC00284通过调控miR-3127/STAT3轴促进T-ALL细胞增殖、迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,这可能为T-ALL治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 LINC00284 miR-3127 STAT3 急性T淋巴细胞白血病 生物学行为
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真核细胞表达的重组蛋白VEGF-C对白血病细胞增殖与凋亡的影响 被引量:4
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作者 丁凯阳 白霞 +2 位作者 戴兰 董宁征 阮长耿 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1037-1042,共6页
背景与目的:VEGF-C/VEGFR-2,3信号通路可诱导血管/淋巴管新生,促进实体肿瘤浸润和转移。近年来研究表明VEGF-C及其受体也在血液肿瘤细胞中表达,但其对白血病细胞的作用尚不清楚。本文拟探讨转染VEGF-C的CHO细胞(CHO/VEGF-C细胞)分泌的... 背景与目的:VEGF-C/VEGFR-2,3信号通路可诱导血管/淋巴管新生,促进实体肿瘤浸润和转移。近年来研究表明VEGF-C及其受体也在血液肿瘤细胞中表达,但其对白血病细胞的作用尚不清楚。本文拟探讨转染VEGF-C的CHO细胞(CHO/VEGF-C细胞)分泌的重组蛋白VEGF-C对VEGFR-3+白血病细胞的增殖及化疗药物诱导的凋亡的影响。方法:利用鸡胚绒毛尿囊膜观察CHO/VEGF-C细胞培养上清中重组VEGF-C诱导血管新生的作用。用RT-PCR和流式细胞术检测血液肿瘤细胞株中VEGF-C受体表达水平。采用噻唑蓝(MTT)法检测VEGF-C对白血病细胞株(NB4及K562)增殖的影响;AnnexinV/PI双染流式细胞术检测凋亡细胞以观察VEGF-C对化疗药物(Etoposide,DNR,AS2O3)诱导的VEGFR-3+阳性白血病细胞株的凋亡的作用。结果:CHO/VEGF-C细胞上清中的重组蛋白VEGF-C可以诱导鸡胚绒毛尿囊膜的血管新生。9例血液肿瘤细胞株中,NB4、HEL和RPMI8226表达VEGFR-3,HEL和TF-1表达VEGFR-2。与对照组(CHO/pcDNA3.1细胞上清)相比,重组蛋白VEGF-C可以促进VEGFR-3+白血病细胞NB4增殖(P24h=0.006,P48h=0.018),而对VEGRR-3-白血病细胞K562则没有明显作用;重组蛋白VEGF-C还具有抑制化疗药物(Etoposide、DNR、As2O3)诱导的NB4细胞凋亡的作用(P=0.019,0.013,0.042)。结论:重组蛋白VEGF-C不仅可诱导血管新生,而且可能通过VEGFR-3信号途径促进白血病细胞增殖及抗凋亡;推测VEGF-C/VEGFR-3信号途径可望作为白血病治疗的靶点。 展开更多
关键词 重组蛋白 VEGF-C 血管新生 细胞增殖 凋亡 白血病细胞 白血病细胞 凋亡细胞 真核细胞表达 流式细胞术检测
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多克隆细胞系的研究价值——J6-1人白血病细胞系30年研究评述 被引量:11
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作者 吴克复 郑国光 马小彤 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期909-912,共4页
J6-1细胞系是我国建立的第一株人白血病细胞系,是EBV和HHV-6双重感染的多克隆细胞系。J6-1细胞系建系30年来,从J6-1细胞克隆了许多细胞因子、受体及其他基因,提供了许多有关白血病细胞性质和功能的信息,从而衍生出多项研究课题,而所有... J6-1细胞系是我国建立的第一株人白血病细胞系,是EBV和HHV-6双重感染的多克隆细胞系。J6-1细胞系建系30年来,从J6-1细胞克隆了许多细胞因子、受体及其他基因,提供了许多有关白血病细胞性质和功能的信息,从而衍生出多项研究课题,而所有这些显示出多克隆细胞系特有的研究价值。本文就30年来J6-1人白血病细胞系的研究作一评述,包括J6-1细胞系的异质性和多克隆性,J6-1细胞群体的生存机制和J6-1细胞系的异常细胞间通讯及其意义,以及J6-1细胞系的启示。 展开更多
关键词 白血病细胞 多克隆细胞 疱疹病毒感染 白血病细胞性质
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骨髓白血病细胞下降指数在评估急性非淋巴细胞白血病预后中的意义 被引量:2
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作者 刘伟红 吴日荷 +1 位作者 方炳木 李琳洁 《实用医学杂志》 CAS 2007年第3期378-380,共3页
目的:探讨化疗后骨髓白血病细胞数及骨髓白血病细胞下降指数(MBCDI)在急性非淋巴细胞白血病预后评估中的意义。方法:回顾性分析120例初发急性非淋巴细胞白血病(除外急性早幼粒细胞白血病),建立MBCDI,分别比较持续缓解组、复发组、未缓... 目的:探讨化疗后骨髓白血病细胞数及骨髓白血病细胞下降指数(MBCDI)在急性非淋巴细胞白血病预后评估中的意义。方法:回顾性分析120例初发急性非淋巴细胞白血病(除外急性早幼粒细胞白血病),建立MBCDI,分别比较持续缓解组、复发组、未缓解组和早期死亡组的初发骨髓白血病细胞数、化疗后白血病细胞数和MBCDI,分析初发时骨髓白血病细胞数、化疗后骨髓白血病细胞数、MBCDI与总生存时间、无病生存时间的相关性。结果:化疗前的骨髓白血病细胞数与总生存时间、无病生存时间均不相关(P值分别为0.6200和0.2451),持续缓解组、复发组、未缓解组和早期死亡组化疗前的骨髓白血病细胞数差异无显著性(P=0.2778);化疗后的骨髓白血病细胞数与总生存时间、无病生存时间均相关(P值均为0.0001),并成负相关(相关系数分别为-0.33298和-0.34373),持续缓解组、复发组、未缓解组和早期死亡组的化疗后骨髓白血病细胞数差异有显著性(P=0.0001);化疗后MBCDI与总生存时间、无病生存时间均相关(P值均为0.0001),并成正相关(相关系数分别为0.35869和0.38607),持续缓解组、复发组、未缓解组和早期死亡组的MBCDI依次下降,相互之间差异有显著性(P=0.0001)。结论:急性非淋巴细胞白血病化疗前的骨髓白血病细胞数与预后无关,化疗后的骨髓白血病细胞数和MBCDI均可用于预测患者完全缓解、持续缓解及长期生存的可能性,MBCDI的相关性更强。 展开更多
关键词 白血病 非淋巴细胞 急性 预后 骨髓白血病细胞 骨髓白血病细胞下降指数
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miR-1294靶向SOX15调节Wnt/β-catenin信号通路促进小儿急性淋巴细胞白血病细胞增殖的机制研究 被引量:1
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作者 岑红霞 蔡思铭 +2 位作者 姜虹羽 廖赵妹 韩栋光 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期344-351,共8页
目的:探讨miRNA异常表达对小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞增殖能力的影响及其相关机制。方法:收集2018年7月至2021年3月于海南医学院第二附属医院就诊的ALL患儿和健康受试者各15例,对其骨髓细胞进行miRNA测序,并使用qRT-PCR进行验证。... 目的:探讨miRNA异常表达对小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞增殖能力的影响及其相关机制。方法:收集2018年7月至2021年3月于海南医学院第二附属医院就诊的ALL患儿和健康受试者各15例,对其骨髓细胞进行miRNA测序,并使用qRT-PCR进行验证。将miR-1294和miR-1294抑制分子(miR-1294-inhibitor)转染至Nalm-6细胞,通过CCK-8和集落形成实验检测Nalm-6细胞增殖情况,Western blot和ELISA检测Nalm-6细胞凋亡情况。对miR-1294进行生物学预测,寻找靶基因,使用荧光素酶报告实验进行验证。将si-SOX15转染至Nalm-6细胞,Western blot检测Wnt信号通路相关蛋白表达情况,并验证si-SOX15对Nalm-6细胞增殖和凋亡的影响。结果:与健康受试者相比,ALL患者骨髓细胞中有22个miRNA显著上调,其中miR-1294上调最为显著。此外,在ALL患者骨髓细胞中SOX15基因表达水平显著降低。与NC组相比,miR-1294组Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平升高、细胞增殖速度增加、集落形成数量增多,而caspase-3蛋白表达水平和细胞凋亡率降低。与NC组相比,miR-1294-inhibitor组Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平降低、细胞增殖速度减慢、集落形成数量减少,而caspase-3蛋白表达水平增加,细胞凋亡率升高。miR-1294与SOX15的3'UTR区存在碱基互补对,miR-1294直接靶向SOX15。在ALL细胞中,miR-1294和SOX15的表达呈负相关。与si-NC组相比,si-SOX15组Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平升高、细胞增殖速度增加,而caspase-3蛋白表达水平和细胞凋亡率降低。结论:miR-1294能够靶向抑制SOX15表达,从而激活Wnt/β-catenin信号通路,促进ALL细胞增殖、抑制细胞凋亡,最终影响疾病进程。 展开更多
关键词 小儿急性淋巴细胞白血病 MIRNA WNT/Β-CATENIN信号通路 增殖
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小檗胺对NB4白血病细胞生长的影响
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作者 赵小英 何智文 +2 位作者 张晓红 吴东 徐荣臻 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1207-1210,共4页
目的:探讨小檗胺对 NB4白血病细胞生长的影响及其机制。方法:体外培养 NB4人白血病细胞,经不同浓度小檗胺处理不同时间后,MIT 法检测药物对 NB4细胞增殖的抑制作用;细胞形态学观察和 DNA 琼脂糖电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪检测 DNA 含... 目的:探讨小檗胺对 NB4白血病细胞生长的影响及其机制。方法:体外培养 NB4人白血病细胞,经不同浓度小檗胺处理不同时间后,MIT 法检测药物对 NB4细胞增殖的抑制作用;细胞形态学观察和 DNA 琼脂糖电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪检测 DNA 含量及周期;巢式 PCR 检测 PML/RARα融合基因表达。结果:NB4细胞经不同浓度小檗胺处理不同时间后细胞生长受抑,并呈时间剂量依赖性,48 h IC_(50)为3.86μg·mL^(-1);细胞形态学观察到细胞凋亡特征,DNA 琼脂糖电泳显示典型的凋亡梯形图,经12μg·mL^(-1)的小檗胺处理48 h 后流式细胞仪检测发现细胞凋亡率明显增加,从2.83%增加58.44%;但未发现药物作用后 NB4细胞 PML/RARα基因表达水平的改变。结论:小檗胺能抑制 NB4细胞生长,其机制之一可能是诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 小檗胺 白血病细胞 凋亡 白血病细胞 细胞生长 NB4 DNA琼脂糖电泳 PML/RARΑ 流式细胞仪检测 细胞凋亡率
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鼠髓样白血病细胞株NFS-60不依赖细胞的克隆
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作者 苏明 孟令战 +4 位作者 刘卫京 张永康 倪祥文 周超 王勇 《中国卫生工程学》 CAS 2005年第5期295-297,共3页
目的构建诱导型表达载体pTKS3-CAT,并转染入表达G-CSF受体的NFA-60不依赖细胞,将粒细胞集落刺激因子(G-CSF)依赖的细胞株鼠髓样白血病细胞株NFS-60,筛选为NFS-60不依赖细胞的克隆.方法在培养体系中加入0.5~10 ng/ml浓度的rhG-CSF,培养... 目的构建诱导型表达载体pTKS3-CAT,并转染入表达G-CSF受体的NFA-60不依赖细胞,将粒细胞集落刺激因子(G-CSF)依赖的细胞株鼠髓样白血病细胞株NFS-60,筛选为NFS-60不依赖细胞的克隆.方法在培养体系中加入0.5~10 ng/ml浓度的rhG-CSF,培养、传代.结果得到NFS-60不依赖细胞株的克隆,其细胞表面包含G-CSF相应受体,而增殖曲线不依赖于G-CSF因子浓度.结论克隆NFS-60不依赖细胞作为工程细胞用于G-CSF样活性化合物发现的研究. 展开更多
关键词 鼠髓样白血病细胞 NFS-60 细胞集落刺激因子 筛选 增殖曲线 工程细胞 白血病细胞 克隆 G-CSF受体 髓样
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