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益气解毒方对12 Gy^(60)Coγ射线诱导的支持细胞铁死亡的防护作用及机制研究
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作者 庄鑫丽 姜荟茜 +9 位作者 徐旻灏 叶一帆 徐文慧 王安 王磊 王舒冉 赵章弟 张文彦 张淑静 胡素敏 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 2024年第4期627-632,共6页
目的研究12 Gy^(60)Coγ射线对睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)铁死亡的影响,并探究益气解毒方干预对支持细胞铁死亡的防护机制。方法支持细胞分为空白(NC)组,模型(IR)组、铁死亡激动剂(Erastin)组、铁死亡抑制剂(Lip-1)组、益气解毒... 目的研究12 Gy^(60)Coγ射线对睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)铁死亡的影响,并探究益气解毒方干预对支持细胞铁死亡的防护机制。方法支持细胞分为空白(NC)组,模型(IR)组、铁死亡激动剂(Erastin)组、铁死亡抑制剂(Lip-1)组、益气解毒方高剂量(YQJD-H)组、益气解毒方低剂量(YQJD-L)组,分别按照相应的条件培养,除NC组和Erastin组外,其余各组细胞均使用12 Gy^(60)Coγ射线进行一次性照射,建立支持细胞辐射损伤模型。照射后24 h,用细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞活性;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;铁离子比色法检测细胞内Fe^(2+)水平;ELISA法检测细胞上清液高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein box-1,HMGB1)水平;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位改变;实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞GPX4、ACSL4、LPCAT3 mRNA的表达。结果照射后24 h,与NC组比较,Erastin组和IR组支持细胞活性及线粒体膜电位均显著下降(P<0.01),ROS、Fe^(2+)、HMGB1水平均明显升高(P<0.01),GPX4 mRNA表达水平下降(P<0.05);IR组ACSL4、LPCAT3 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与IR组比较,YQJD-H组、YQJD-L组、Lip-1组的细胞活性均显著升高(P<0.01),ROS、Fe^(2+)、HMGB1水平均明显降低(P<0.01);YQJD-H组GPX4 mRNA表达水平升高(P<0.05),ACSL4、LPCAT3 mRNA表达水平下降(P<0.05)。结论12 Gy^(60)Coγ射线诱导支持细胞发生铁死亡,而益气解毒方能减轻支持细胞铁死亡,起到辐射防护作用,其作用机制可能与GPX4/ACSL4/LPCAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 益气解毒方 电离辐射 支持细胞 铁死亡
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益气解毒方联合表皮生长因子受体络氨酸激酶抑制剂靶向治疗气阴两虚型非小细胞性肺癌患者的疗效观察
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作者 张楠 胡燕 +1 位作者 范建 邓治平 《世界中西医结合杂志》 2023年第2期401-405,共5页
目的探究益气解毒方联合表皮生长因子受体络氨酸激酶抑制剂(Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase Inhibitor,EGFR-TKI)靶向治疗对气阴两虚型非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的疗效。方法选取2018年2... 目的探究益气解毒方联合表皮生长因子受体络氨酸激酶抑制剂(Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase Inhibitor,EGFR-TKI)靶向治疗对气阴两虚型非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的疗效。方法选取2018年2月—2021年2月期间在自贡市第一人民医院住院治疗的100例NSCLC患者,按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各50例。对照组患者仅接受EGFR-TKI靶向治疗,治疗组患者接受益气养阴解毒方和EGFR-TKI联合治疗。治疗4周后,观察比较两组患者近期疗效、中医证候疗效、生活质量改善率、不良反应及无进展生存期。结果治疗后治疗组近期疗效总有效率84.0%(42/50)较对照组62.0%(31/50)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组中医证候有效率82.0%(41/50)较对照组60.0%(30/50)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组患者生活质量改善有效率92.0%(46/50)较对对照组74.0%(37/50)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组患者皮疹、腹泻不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后治疗组无进展生存期明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气解毒方联合EGFR-TKI靶向治疗临床疗效较好,可减少EGFR-TKI的副作用发生,改善临床症状,延长无进展生存期。 展开更多
关键词 非小细胞性肺癌 益气解毒方 EGFR-TLI 气阴两虚型
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益气解毒方对宫颈癌同步放化疗脾虚型患者治疗效果及对肿瘤标志物的影响
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作者 吕芸 施晓 +2 位作者 孙运明 周海华 谢琼燕 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第9期254-258,共5页
目的观察益气解毒方对宫颈癌同步放化疗脾虚型患者的治疗效果及其对肿瘤标志物的影响。方法选择2019年12月—2021年12月于舟山市妇女儿童医院进行同步放化疗的72例宫颈癌患者作为研究对象,用随机数表法分成对照组和观察组,对照组进行同... 目的观察益气解毒方对宫颈癌同步放化疗脾虚型患者的治疗效果及其对肿瘤标志物的影响。方法选择2019年12月—2021年12月于舟山市妇女儿童医院进行同步放化疗的72例宫颈癌患者作为研究对象,用随机数表法分成对照组和观察组,对照组进行同步放化疗,观察组在对照组的基础上采用益气解毒方治疗,并随证加减。观察比较两组患者治疗前后的生活质量、肿瘤标志物水平以及不良反应发生情况,评价该方治疗同步放化疗脾虚型患者的质量效果。结果治疗前两组患者的卡氏评分(Karnofsky,KPS)和生活质量评分(quality of life score,QOL)评分无明显差异。与对照组比较,治疗后5周观察组患者的KPS评分和QOL评分明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。治疗前两组患者的白细胞(white blood cell,WBC)、中性粒细胞(neutrophilic granulocyte,N)、血小板(platelet,PLT)和血红蛋白(hemoglobin,Hb)水平无明显差异。与对照组比较,治疗后5周观察组患者的WBC、N和Hb水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);PLT水平有上调趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前两组患者的鳞状上皮细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC-Ag)、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)、糖类抗原199(carbohydrate antigen,CA199)以及糖类抗原153(carbohydrate antigen,CA153)水平无明显差异。与对照组比较,治疗后5周观察组患者的SCC-Ag、CEA、CA199以及CA153水平明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与对照组比较,观察组患者骨髓抑制、泌尿系统反应的发生率明显降低(P<0.01),而胃肠道反应、慢性放射性膀胱炎以及慢性放射性肠炎发生率有下降趋势,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论益气解毒方能够提高宫颈癌同步放化疗脾虚患者的生活质量,降低肿瘤标志物水平,减轻不良反应,值得应用于临床推广。 展开更多
关键词 益气解毒方 宫颈癌 同步放化疗 脾虚型 临床效果 肿瘤标志物
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益气解毒方联合5-氟尿嘧啶介导NF-κB通路促进裸鼠结肠癌移植瘤凋亡效应的研究
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作者 魏行云 罗欢 +2 位作者 刘灵 曹蓉 江志超 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第21期2954-2960,2965,共8页
目的探讨益气解毒方联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)调节核转录因子-κB(NF-κB)通路对裸鼠结肠癌移植瘤凋亡效应的影响。方法采用HT-29细胞左侧腋窝后部皮下注射方法构建BALB/c裸鼠结肠癌移植瘤模型,将成模鼠随机分为4组,每组10只。模型组给予生... 目的探讨益气解毒方联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)调节核转录因子-κB(NF-κB)通路对裸鼠结肠癌移植瘤凋亡效应的影响。方法采用HT-29细胞左侧腋窝后部皮下注射方法构建BALB/c裸鼠结肠癌移植瘤模型,将成模鼠随机分为4组,每组10只。模型组给予生理盐水灌胃(1次/d),益气解毒方组给予15 g/kg益气解毒方灌胃(1次/d),5-Fu组给予5 mg/mL的5-Fu溶液腹腔注射(1次/2 d),联合组给予15 g/kg益气解毒方灌胃(1次/d)及5 mg/mL的5-Fu溶液腹腔注射(1次/2 d),均连续干预25 d。观察移植瘤生长情况,HE染色观察移植瘤病理形态,Western blot法检测移植瘤组织中凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)]和NF-κB信号通路相关蛋白(NF-κBp65、IκK、IκB)表达情况,免疫组化法检测移植瘤组织中Bax、NF-κBp65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达情况,RT-qPCR法检测移植瘤组织中Bax、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、NF-κBp65 mRNA表达情况。结果与模型组比较,各药物组移植瘤生长缓慢,移植瘤体积较小(P均<0.05),HE染色显示肿瘤组织发生不同程度的细胞破裂、坏死,瘤组织中Bax蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),Bcl-2、NF-κBp65、IκK、IκB蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05);益气解毒方组和联合组瘤组织中Bax表达平均光密度值均明显升高(P均<0.05),5-Fu组和联合组NF-κBp65、TNF-α表达平均光密度值均明显降低(P均<0.05);5-Fu组、联合组瘤组织中Bax mRNA相对表达量和各药物组瘤组织中Caspase-3 mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05),益气解毒方组、联合组瘤组织中NF-κBp65 mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05)。与益气解毒方组和5-Fu组比较,联合组移植瘤体积更小(P均<0.05),肿瘤组织破坏更明显,瘤组织中Bax蛋白相对表达量和Bax、Caspase-3 mRNA相对表达量均更高(P均<0.05),Bcl-2、NF-κBp65、IκK、IκB蛋白相对表达量均更低(P均<0.05);其中联合组瘤组织中Bax表达平均光密度值明显高于5-Fu组(P<0.05),NF-κBp65表达平均光密度值明显低于益气解毒方组(P<0.05),NF-κBp65 mRNA相对表达量明显低于5-Fu组(P<0.05)。结论益气解毒方与5-Fu联合使用可协同抑制结肠癌移植瘤的生长及诱导其凋亡,机制可能与下调Bcl-2、TNF-α表达,上调Bax、Caspase-3表达,抑制NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 益气解毒方 5-氟尿嘧啶 结肠癌 核转录因子-κB信号通路 凋亡
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益气解毒方治疗新型冠状病毒肺炎的临床研究
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作者 刘理 《实用中西医结合临床》 2023年第1期1-4,共4页
目的:探讨益气解毒方治疗新型冠状病毒肺炎的临床疗效。方法:选取医院2022年1~9月收治的60例新冠肺炎患者,按随机数字表法分为治疗组与对照组,各30例。治疗组给予益气解毒方治疗,对照组给予西医对症治疗。观察两组新型冠状病毒核酸QRF1a... 目的:探讨益气解毒方治疗新型冠状病毒肺炎的临床疗效。方法:选取医院2022年1~9月收治的60例新冠肺炎患者,按随机数字表法分为治疗组与对照组,各30例。治疗组给予益气解毒方治疗,对照组给予西医对症治疗。观察两组新型冠状病毒核酸QRF1ab基因及N基因Ct值变化情况、平均住院天数、平均住院费用、中医证候积分、治疗总有效率及不良反应发生情况。结果:治疗后,两组新型冠状病毒核酸QRF1ab基因及N基因Ct值均显著提高,且治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,治疗组平均住院天数明显减少,平均住院费用明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组中医证候积分均低于治疗前,且治疗组更低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗总有效率高于对照组(P<0.05);治疗组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论:益气解毒方治疗新型冠状病毒肺炎疗效显著,可提升新型冠状病毒核酸QRF1ab基因及N基因Ct值,缩短治疗周期,减少住院费用,改善临床症状,不良反应发生率低。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 益气解毒方 新型冠状病毒核酸基因CT值
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MAPK/ERK信号通路在益气解毒方水提物诱导鼻咽癌细胞凋亡中的作用 被引量:16
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作者 胡晶 刘洁 +7 位作者 徐冰雁 戴娜 胡梅 周芳亮 史红健 罗晶婧 蔺婷 何迎春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1613-1621,共9页
目的 研究益气解毒方水提物对鼻咽癌细胞凋亡的影响,并从MAPK/ERK信号通路探讨其诱导凋亡的作用机制。方法 CCK-8法检测益气解毒方水提物对CNE1、CNE2细胞增殖的影响;Hoechst 33342染色法、JC-10染色法、荧光双染流式细胞仪检测其对CNE1... 目的 研究益气解毒方水提物对鼻咽癌细胞凋亡的影响,并从MAPK/ERK信号通路探讨其诱导凋亡的作用机制。方法 CCK-8法检测益气解毒方水提物对CNE1、CNE2细胞增殖的影响;Hoechst 33342染色法、JC-10染色法、荧光双染流式细胞仪检测其对CNE1、CNE2细胞凋亡的影响;Western blot法检测其对CNE1、CNE2细胞蛋白表达的影响。结果 益气解毒方水提物能抑制CNE1、CNE2细胞增殖( P <0.05)、诱导凋亡( P <0.05);药物作用48 h后,Survivin、XIAP、Bcl-2表达下降,Bax表达上升,MAPK/ERK信号通路关键蛋白p-c-Raf、p-MEK、p-ERK表达下降( P <0.05);在此基础上,加入激活剂ISO和益气解毒方水提物后,与单用益气解毒方水提物相比,p-c-Raf、p-MEK、p-ERK1/2表达上调,Survivin、XIAP、Bcl-2表达增加,Bax表达下降,促凋亡效应也降低( P <0.05)。结论 益气解毒方水提物可诱导鼻咽癌细胞凋亡,该效应与其抑制MAPK/ERK信号通路关键蛋白p-c-Raf、p-MEK、p-ERK1/2表达,进而下调Survivin、XIAP、Bcl-2表达,上调Bax表达有关。 展开更多
关键词 益气解毒方 鼻咽癌 细胞凋亡 MAPK/ERK信号通路 Survivin XIAP
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益气解毒方提取物对CNE2细胞的体内外抑瘤作用 被引量:10
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作者 胡梅 田道法 +2 位作者 刘群良 何迎春 范婧莹 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2012年第11期41-43,共3页
目的观察益气解毒方提取物对鼻咽癌CNE2细胞及移植瘤的抑制作用。方法采用MTT法测定益气解毒方多糖提取物、乙酸乙酯提取物(EAE)、乙醇提取物对CNE2细胞体外增殖的影响。建立CNE2裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组、EAE组、顺铂(DDP)组和... 目的观察益气解毒方提取物对鼻咽癌CNE2细胞及移植瘤的抑制作用。方法采用MTT法测定益气解毒方多糖提取物、乙酸乙酯提取物(EAE)、乙醇提取物对CNE2细胞体外增殖的影响。建立CNE2裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组、EAE组、顺铂(DDP)组和联合治疗组,分别给予生理盐水、益气解毒方EAE、DDP注射液以及EAE联合DDP注射液,12 d后检测各治疗组的肿瘤抑制率。结果益气解毒方EAE对CNE2细胞具有明显的抑制作用,并呈明显的剂量效应关系(P<0.05)。联合治疗组能明显抑制裸鼠CNE2肿瘤的生长,抑瘤率高达56.7%,明显高于EAE组和DDP组(P<0.01)。结论 EAE是益气解毒方中的一种有效的抗鼻咽癌肿瘤成分,EAE联合DDP对裸鼠CNE2鼻咽癌移植瘤的生长具有协同抑制作用。 展开更多
关键词 益气解毒方 乙酸乙酯提取物 鼻咽癌 CNE2细胞 移植瘤 抑瘤
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益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响 被引量:13
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作者 江洁琼 贺安意 +2 位作者 田道法 何迎春 卢芳国 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第42期8201-8205,共5页
背景:益气解毒中药复方在体外能通过下调端粒酶的活性抑制细胞生长和诱导细胞凋亡,还可能通过抑制细胞内重要的核转录因子、细胞分裂增殖、细胞周期、DNA修复和诱导细胞凋亡、促进坏死等信号通路,从而抑制细胞增殖和诱导细胞死亡。目的... 背景:益气解毒中药复方在体外能通过下调端粒酶的活性抑制细胞生长和诱导细胞凋亡,还可能通过抑制细胞内重要的核转录因子、细胞分裂增殖、细胞周期、DNA修复和诱导细胞凋亡、促进坏死等信号通路,从而抑制细胞增殖和诱导细胞死亡。目的:实验拟观察益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及凋亡相关基因bax、bcl-2、增殖细胞核抗原和p53mt基因表达的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-01/2007-12在湖南中医药大学中西医结合学院基础研究室和中医五官重点学科实验室完成。材料:G4代8月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因阳性小鼠和阴性小鼠各24只,体质量(25.4±2.3)kg,用于制备鼻咽和鼻腔癌前病变模型;益气解毒颗粒方药液为自制。方法:48只小鼠随机分为4组,转基因阳性中药组和转基因阴性中药组小鼠灌胃益气解毒颗粒方药液,给药剂量为12.91g/(kg·d);转基因阳性生理盐水组和转基因阴性生理盐水组小鼠灌等体积生理盐水。主要观察指标:苏木精-伊红染色观察鼻腔和鼻咽黏膜病理组织学变化,免疫组织化学染色法检测其bax、bcl-2、增殖细胞核抗原和p53mt基因表达水平。结果:纳入转基因阳性小鼠和阴性小鼠各24只,转基因阳性生理盐水组和转基因阴性生理盐水组于实验结束前各死亡1只,转基因阴性中药组死亡1只,转基因阳性中药组死亡2只小鼠,共43只小鼠进入结果分析。①转基因阴性生理盐水组、转基因阴性中药组小鼠的鼻腔/鼻咽黏膜组织均无明显病变;转基因阳性中药组有1只小鼠表现中度非典型性增生,转基因阳性生理盐水组有10只小鼠鼻腔和/或鼻咽黏膜上皮细胞呈现中度或中度以上非典型增生或灶性鳞状化生。转基因阴性生理盐水组、转基因阴性中药组、转基因阳性中药组和转基因阳性生理盐水组小鼠鼻腔或鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为0、0、10%和90.9%,差异具有显著性意义(P<0.01)。②与转基因阳性生理盐水组相比,其他各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞中p53mt、bcl-2和增殖细胞核抗原表达水平均下降(P<0.01),bax表达水平显著增高,bcl-2/bax比值降低(P<0.01)。结论:益气解毒方中药可有效抑制或逆转TgN(p53mt-LMP1)/HT阳性小鼠鼻腔或鼻咽黏膜上皮的癌前病变表型,其作用机制之一可能通过下调p53mt基因和增殖细胞核抗原的表达,降低bcl-2/bax比值,使细胞增殖和凋亡速度达到平衡,进而促使鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞正常增长。 展开更多
关键词 益气解毒方 癌前病变 增殖细胞核抗原 p53mt基因
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益气解毒方主要三萜类化合物抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖效应的比较 被引量:11
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作者 刘洁 胡晶 +4 位作者 戴娜 徐冰雁 罗晶婧 胡梅 何迎春 《湖南中医药大学学报》 CAS 2019年第11期1315-1320,共6页
目的研究比较益气解毒方4种主要三萜类化合物齐墩果酸、熊果酸、茯苓酸、黄芪甲苷抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖的效应。方法实时无标记细胞功能分析技术(real-time unlabeled cell function analysis technique,RTCA)动态监测不同浓度的4种... 目的研究比较益气解毒方4种主要三萜类化合物齐墩果酸、熊果酸、茯苓酸、黄芪甲苷抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖的效应。方法实时无标记细胞功能分析技术(real-time unlabeled cell function analysis technique,RTCA)动态监测不同浓度的4种益气解毒方三萜类化合物对体外培养的人鼻咽癌CNE2细胞生长的影响,高通量细胞成像多功能检测系统Cytation5(C5)监测不同化合物对鼻咽癌CNE2细胞形态的影响,Western Blot法检测不同化合物对鼻咽癌CNE2细胞增殖相关蛋白表达的影响。结果RTCA结果显示齐墩果酸、熊果酸、茯苓酸、黄芪甲苷均能够不同程度地抑制鼻咽癌细胞增殖,呈剂量依赖性,不同单体发挥最佳药效的时间不同。茯苓酸和黄芪甲苷起效较快,茯苓酸在处理后24 h达到最佳药效,IC50值为7.51μmol/L,黄芪甲苷持续作用36 h,抑制效果达到最佳,熊果酸在刺激28 h后IC50值最低,为0.70μmol/L,齐墩果酸后期作用效果较好,且所需浓度低。C5结果显示,与对照组相比,4种三萜类化合物在作用36 h后,CNE2细胞数量及形态均发生明显变化。Western Blot结果显示,与对照组相比,齐墩果酸、熊果酸、茯苓酸、黄芪甲苷能明显抑制CNE2细胞中增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达。结论益气解毒方主要三萜类化合物均能抑制鼻咽癌细胞增殖,降低增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达水平,但药物的作用时间和浓度均有差异。 展开更多
关键词 益气解毒方 三萜类化合物 鼻咽癌 细胞增殖
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益气解毒方通过Wnt/β-catenin信号通路对鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响 被引量:11
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作者 范婧莹 刘洁 +6 位作者 刘晓丹 戴娜 何兰 王贤文 李丽鹏 邹韵 何迎春 《湖南中医药大学学报》 CAS 2020年第5期535-539,共5页
目的探讨益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将CNE2细胞用不同浓度(0.25、0.50、1.0 g/L)的益气解毒方水提物和阳性对照药(顺铂,4 mg/L)分别处理24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检... 目的探讨益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将CNE2细胞用不同浓度(0.25、0.50、1.0 g/L)的益气解毒方水提物和阳性对照药(顺铂,4 mg/L)分别处理24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测药物作用48 h后细胞周期分布情况;Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白Wnt5a/b、β-catenin及细胞周期蛋白CyclinD1的表达情况。结果MTT结果显示,益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞增殖具有明显抑制作用,且其抑制作用与作用时间、药物浓度呈正相关(P<0.05)。细胞周期结果显示,处理48 h后,G0/G1期比例降低,S期和G2/M期比例增加(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,水提物处理48 h后,Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白Wnt5a/b、β-catenin及细胞周期蛋白CyclinD1的表达量明显下降(P<0.01)。结论益气解毒方可通过下调Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白Wnt5a/b、β-catenin及细胞周期蛋白CyclinD1的表达,阻滞细胞周期,抑制人鼻咽癌CNE2细胞的增殖。 展开更多
关键词 益气解毒方 鼻咽癌 WNT/Β-CATENIN信号通路 细胞周期 细胞增殖
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益气解毒方对DNP诱导TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔/鼻咽上皮癌前病变及p16和c-jun基因表达的影响 被引量:8
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作者 何迎春 卢芳国 +1 位作者 田道法 刘刚 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第10期734-739,共6页
背景与目的:有研究表明,益气解毒方中药可通过抑制细胞端粒酶的激活而阻断二亚硝基哌嗪(DNP)诱导大鼠鼻咽癌变和人胚鼻咽上皮细胞转化。本研究探讨益气解毒方对经DNP诱导TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠的鼻腔和鼻咽黏膜上皮增殖及c-jun和p16基... 背景与目的:有研究表明,益气解毒方中药可通过抑制细胞端粒酶的激活而阻断二亚硝基哌嗪(DNP)诱导大鼠鼻咽癌变和人胚鼻咽上皮细胞转化。本研究探讨益气解毒方对经DNP诱导TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠的鼻腔和鼻咽黏膜上皮增殖及c-jun和p16基因表达的影响,为益气解毒方的疗效和可能作用机制提供新的证据。方法:G4代5月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠20只,随机分为2组:①TgN(p53mt-LMP1)/HT诱癌中药组[中药组,10只,以12.91g/(kg?d)剂量灌胃益气解毒方药液];②TgN(p53mt-LMP1)/HT诱癌0.9%氯化钠溶液对照组(氯化钠溶液对照组,10只,以15ml/kg氯化钠溶液灌胃)。另设阴性对照组(用野生型C57BL/6J小鼠10只,以15ml/kg氯化钠溶液灌胃)。用HE染色法观察各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织生物学表型特征,比较癌前病变率;免疫组织化学染色法检测各组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织c-jun和p16基因的表达水平,并采用Western印迹法验证。结果:阴性对照组、氯化钠溶液对照组和中药组鼻腔和(或)鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为0、90%和10%,差异有显著性(P<0.01)。与氯化钠溶液对照组比较,中药组小鼠鼻腔和鼻咽的p16基因表达水平显著上调(鼻腔:157±10vs132±10,鼻咽:155±12vs133±10,P值均<0.01),c-jun基因的表达水平显著下调(鼻腔:111±9vs161±10;鼻咽:110±10vs159±10,P值均<0.01),趋于正常水平,与阴性对照组(鼻腔和鼻咽的p16表达灰度值分别为130±12和129±12,c-Jun分别为164±13和164±9)的差异无显著性(P值均>0.05)。结论:中药益气解毒方可阻逆DNP对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织癌前病变发生和发展的诱导作用,其干预作用与下调c-jun表达和上调p16基因表达密切相关。 展开更多
关键词 鼻腔上皮 鼻咽上皮 癌前病变 益气解毒方 C-JUN P16
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益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响 被引量:7
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作者 胡晶 刘洁 +4 位作者 徐冰雁 范婧莹 罗晶婧 胡梅 何迎春 《湖南中医药大学学报》 CAS 2019年第8期943-947,共5页
目的研究益气解毒方抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖的效应。方法采用实时无标记细胞功能分析技术(real-time unlabeled cell function analysis technique,RTCA)动态监测不同浓度(0.125、0.250、0.500、1.000 mg/mL的益气解毒方水提物对人鼻咽... 目的研究益气解毒方抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖的效应。方法采用实时无标记细胞功能分析技术(real-time unlabeled cell function analysis technique,RTCA)动态监测不同浓度(0.125、0.250、0.500、1.000 mg/mL的益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响;采用CCK-8法检测不同浓度益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖能力的影响;通过高通量细胞成像多功能检测系统Cytation5监测不同浓度益气解毒方水提物对鼻咽癌CNE2细胞增殖形态的影响;采用Western Blot技术检测不同浓度益气解毒方水提物对鼻咽癌CNE2细胞增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA表达的影响。结果RTCA和CCK-8法实验结果显示,与空白对照组比较,益气解毒方水提物可以明显抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖,而且随着益气解毒方水提物的作用时间越长,其抑制效应越显著(P<0.05);Cytation5结果显示,与空白对照组比较,不同浓度益气解毒方水提物处理CNE2细胞后,细胞形态发生了明显变化,且浓度越高,作用时间越长,细胞膜皱缩,细胞核质浓缩、破碎更明显;Western Blot结果显示,与空白对照组比较,益气解毒方水提物能明显抑制CNE2细胞中增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达(P<0.05)。结论益气解毒方水提物能明显抑制鼻咽癌细胞增殖,该效应与其抑制增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达有关。 展开更多
关键词 益气解毒方 鼻咽癌 细胞增殖 SURVIVIN XIAP PCNA
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益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者CD4^+CD25^+调节性T细胞和Th17细胞的影响 被引量:10
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作者 江志超 田道法 范靖莹 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2014年第2期23-26,31,共5页
目的探讨益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞的影响。方法用流式细胞仪检测18例经益气解毒方加常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(观察组)及l5例常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(对照组)外周血CD4+CD25+调节性T细... 目的探讨益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞的影响。方法用流式细胞仪检测18例经益气解毒方加常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(观察组)及l5例常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(对照组)外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞比例,RT-PCR法检测Foxp3 mRNA和ROR-γt mRNA转录水平,ELISA法检测血清白细胞介素-6(IL-6)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果观察组患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例和Foxp3 mRNA的相对表达量均低于对照组(P<0.05),而Th17细胞占CD4+T细胞的数量比例和ROR-γt mRNA的相对表达量均高于对照组(P<0.05);观察组患者血清IL-6水平高于对照组(P<0.05),而TGF-β水平低于对照组(P<0.05)。结论益气解毒方可影响中晚期鼻咽癌CD4+CD25+调节性T细胞的比例与功能,增强Th17细胞的分化,其机制可能是通过调节IL-6和TGF-β水平而逆转鼻咽癌免疫耐受。 展开更多
关键词 益气解毒方 中晚期鼻咽癌 调节性T细胞 TH17细胞 细胞因子
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益气解毒方对大鼠鼻咽癌变过程中细胞凋亡和增殖的干预 被引量:5
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作者 成细华 田道法 +3 位作者 喻嵘 陈学东 胡伟 魏开春 《湖南中医药大学学报》 CAS 2009年第2期10-13,共4页
目的探讨益气解毒方对大鼠鼻咽癌变过程中细胞凋亡和增殖的干预作用。方法用二亚硝基哌嗪(DNP)诱导大鼠诱发鼻咽癌变模型,益气解毒方进行干预治疗。定期分批处死大鼠,取鼻咽组织做病理检测,TUNEL法检测细胞凋亡活性,免疫组织化学SABC法... 目的探讨益气解毒方对大鼠鼻咽癌变过程中细胞凋亡和增殖的干预作用。方法用二亚硝基哌嗪(DNP)诱导大鼠诱发鼻咽癌变模型,益气解毒方进行干预治疗。定期分批处死大鼠,取鼻咽组织做病理检测,TUNEL法检测细胞凋亡活性,免疫组织化学SABC法检测PCNA蛋白活性表达。结果益气解毒方组大鼠鼻咽上皮组织的癌变率为0%,明显低于生理盐水模型组(86.3%);维甲酸阳性对照组大鼠的癌变率为0%,但该组所有动物均于实验周期的第250~310天间逐渐死亡。在诱发性鼻咽上皮细胞癌变进程中的单纯性增生阶段,大鼠鼻咽上皮细胞凋亡活性和PCNA蛋白表达活性组间差异均无统计学意义(P>0.05);在异型增生阶段,益气解毒方组鼻咽上皮细胞凋亡活性明显高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),PCNA蛋白表达活性则显著低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论益气解毒方能有效阻逆大鼠鼻咽上皮细胞癌变进程,其作用与其有效诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖活性有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 细胞凋亡 细胞增殖 益气解毒方 大鼠 黄连 黄芪
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益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及细胞周期的影响 被引量:5
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作者 何迎春 田道法 +4 位作者 刘刚 卢芳国 范婧莹 吴新正 罗齐平 《湖南中医药大学学报》 CAS 2008年第5期17-20,共4页
目的探讨益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及细胞周期的影响。方法第4代8月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT阳性小鼠和阴性小鼠分别随机分为益气解毒方组和生理盐水组,即转基因阳性生理盐水组(TC)、转基因阳性益气... 目的探讨益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖及细胞周期的影响。方法第4代8月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT阳性小鼠和阴性小鼠分别随机分为益气解毒方组和生理盐水组,即转基因阳性生理盐水组(TC)、转基因阳性益气解毒方组(TM)、转基因阴性生理盐水组(NC)和转基因阴性益气解毒方组(NM),共4组,取鼻腔和鼻咽黏膜组织,H-E染色法观察病理组织学变化,流式细胞术测定细胞周期分布特点。结果TC组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞非典型性增生明显,TC、TM、NM和NC组小鼠鼻腔和或鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为90.9%、10%、0和0,组间比较差异具有统计学意义(P<0.01)。与NC组小鼠比较,TC组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮G0/G1期细胞量减少,S期、G2/M期细胞数量增多,细胞增殖指数(PI)增高,差异有统计学意义(P<0.01);与TC组比较,TM组小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织G0/G1期细胞量增多,S期、G2/M期细胞数量减少,细胞PI降低,差异有统计学意义(P<0.01),趋于正常水平,而与NC组的差异均无统计学意义。结论益气解毒方中药可有效逆转或阻止TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞的非典型性增生,其作用机制之一是阻止细胞进入S期而抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 益气解毒方 转基因小鼠 流式细胞术 癌前病变 鼻咽黏膜上皮 细胞增殖 细胞周期 黄芪 黄连
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益气解毒方对癌前病变鼻咽黏膜超微病理组织的逆转效应 被引量:3
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作者 吴新正 戴娜 +3 位作者 田道法 何迎春 刘刚 刘湘 《湖南中医药大学学报》 CAS 2012年第3期6-9,共4页
目的研究TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠癌前病变鼻咽黏膜超微结构特征并观察益气解毒方的干预效应。方法将模型鼠随机分为3组,每组24只,模型组(MG)、益气解毒方组(YG)、维A酸组(TG);同品系C57BL/6J鼠24只作正常对照组(NG)。各组均单用... 目的研究TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠癌前病变鼻咽黏膜超微结构特征并观察益气解毒方的干预效应。方法将模型鼠随机分为3组,每组24只,模型组(MG)、益气解毒方组(YG)、维A酸组(TG);同品系C57BL/6J鼠24只作正常对照组(NG)。各组均单用诱癌剂二亚硝基哌嗪73 mg/(kg.次),每周2次,连续14周。采用HE染色法和透射电镜观察各组小鼠鼻咽黏膜形态学变化。结果 MG组鼻咽黏膜异型性增生明显,TG、NG、YG鼻咽/鼻腔黏膜表现轻度增生。MG组细胞膜呈伪足样改变,线粒体变形、出现空泡样结构,YG、TG及NG上述改变不明显。结论线粒体的改变可能与鼻咽黏膜癌前病变相关,而益气解毒方可有效逆转转基因小鼠鼻咽黏膜癌前病变。 展开更多
关键词 鼻咽癌前病变 超微结构 益气解毒方 小鼠 干预
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益气解毒方阻断气虚染毒大鼠鼻咽上皮细胞癌变的研究 被引量:3
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作者 成细华 田道法 +3 位作者 喻嵘 胡梅 胡伟 陈舒华 《湖南中医药大学学报》 CAS 2009年第5期19-21,共3页
目的探讨益气解毒方调节NF-κB途径阻断气虚染毒大鼠鼻咽癌变的影响。方法大鼠腹腔注射二亚硝基哌嗪(DNP)和佛波醇酯(TPA),同时进行力竭游泳,诱导大鼠诱发鼻咽癌变模型,予以益气解毒方干预,定期分批处死大鼠,取鼻咽组织做病理检测,免疫... 目的探讨益气解毒方调节NF-κB途径阻断气虚染毒大鼠鼻咽癌变的影响。方法大鼠腹腔注射二亚硝基哌嗪(DNP)和佛波醇酯(TPA),同时进行力竭游泳,诱导大鼠诱发鼻咽癌变模型,予以益气解毒方干预,定期分批处死大鼠,取鼻咽组织做病理检测,免疫组织化学SABC法检测蛋白表达。结果在诱发鼻咽癌变进程的单纯性增生阶段,与模型组比较,益气解毒方组和维甲酸组大鼠鼻咽上皮细胞的NF-κB p65和IκBα蛋白表达活性均无统计学意义,但在异型增生阶段,益气解毒方组对鼻咽上皮细胞的NF-κB p65蛋白表达活性显著低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),而IκBα蛋白表达活性显著高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论益气解毒方能够有效阻断气虚染毒大鼠鼻咽上皮细胞癌变进程,其作用与其有效调节NF-κB途径关键基因NF-κBp65和IκBα的蛋白表达密切相关。 展开更多
关键词 益气解毒方 鼻咽癌 大鼠 NF-ΚB途径 气虚染毒 黄连 黄芪
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益气解毒方对小鼠免疫性肝损伤的保护作用 被引量:2
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作者 白山岭 胡爱萍 +2 位作者 刘建忠 李羚青 赵映前 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第6期1445-1447,I0014,共4页
目的:探讨益气解毒方对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)所致小鼠免疫性肝损伤模型的保护作用。方法:采用尾静脉注射卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)建立小鼠免疫性肝损伤模型,观察益气解毒方对小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及小... 目的:探讨益气解毒方对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)所致小鼠免疫性肝损伤模型的保护作用。方法:采用尾静脉注射卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)建立小鼠免疫性肝损伤模型,观察益气解毒方对小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及小鼠肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平的影响,并观察肝组织病理学改变。结果:益气解毒方能降低肝损伤小鼠血清中ALT、AST的水平,并能使肝组织匀浆中SOD、GSH-PX活性升高。病理检查结果显示可减轻肝组织坏死范围及程度,减少炎细胞浸润。结论:益气解毒方对BCG联合LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用。 展开更多
关键词 益气解毒方 卡介苗 脂多糖 免疫性肝损伤
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益气解毒方联合化疗治疗晚期三阴乳腺癌患者的效果 被引量:8
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作者 邱志敏 王玲 +2 位作者 郑智 王美鑑 苏永锋 《中国当代医药》 2020年第23期92-95,99,共5页
目的探讨益气解毒方联合化疗治疗晚期三阴乳腺癌患者的效果。方法选取2018年6月~2019年6月江西省肿瘤医院收治的56例晚期三阴乳腺癌患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组(28例)与研究组(28例)。对照组患者应用常规化疗方案... 目的探讨益气解毒方联合化疗治疗晚期三阴乳腺癌患者的效果。方法选取2018年6月~2019年6月江西省肿瘤医院收治的56例晚期三阴乳腺癌患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组(28例)与研究组(28例)。对照组患者应用常规化疗方案,研究组患者在此基础上应用中药益气解毒方。比较两组患者的近期疗效、T淋巴细胞亚群(CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+)水平、血清肿瘤标志物[癌抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原153(CA153)]、生活质量评分和不良反应发生情况。结果研究组患者的治疗总有效率为85.71%,高于对照组的53.57%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组患者的CD4^+、CD4^+/CD8^+水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);治疗后,研究组患者的CD8^+水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组患者的CEA、CA125与CA153水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组患者的KPS评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者的血小板减少、白细胞减少、恶心呕吐、脱发的发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气解毒方与化疗联合应用于晚期三阴乳腺癌患者中疗效确切,可以有效提高其免疫功能,抑制肿瘤标志物,强化生活质量,缓解不良反应,值得临床推广。 展开更多
关键词 益气解毒方 化疗 晚期 三阴乳腺癌
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益气解毒方水提物对RAW264.7细胞免疫功能的影响 被引量:11
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作者 廖雪 蔺婷 +5 位作者 罗晶婧 田道法 廖端芳 曾嵘 林丽美 何迎春 《肿瘤基础与临床》 2015年第6期473-476,共4页
目的研究益气解毒方水提物对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度益气解毒方水提物处理RAW264.7细胞,MTT法检测细胞增殖活性,ELISA法检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)... 目的研究益气解毒方水提物对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度益气解毒方水提物处理RAW264.7细胞,MTT法检测细胞增殖活性,ELISA法检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)、一氧化氮(NO)的分泌水平,Western blot法检测细胞核转录因子NF-κBp65蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,益气解毒方水提物在10~320mg·L^(-1)范围内明显促进RAW264.7细胞增殖,且10 mg·L^(-1)浓度效果最佳(P<0.05);与空白对照组比较,益气解毒方水提物能促进TNF-α、IL-12及NO的分泌(P<0.05),显著诱导细胞内NF-κBp65蛋白的表达(P<0.05)。结论益气解毒方水提物对RAW264.7细胞的免疫功能具有调节作用,其作用可能与激活NF-κBp65蛋白通路相关。 展开更多
关键词 益气解毒方 RAW264.7细胞 免疫功能 鼻咽癌
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