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人SET基因RNA干扰重组质粒载体的构建及其在肝细胞中的表达
被引量：
1
1
作者
黄新凤
刘建军
+2 位作者
蒋英芝
席仁荣
杨亮
《热带医学杂志》
CAS
2011年第3期291-294,共4页
目的建立真核质粒载体介导的人SET基因RNA干扰表达体系,并检测其在肝细胞中对SET蛋白表达的影响,为研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性的作用打下基础。方法设计并合成2对人SET基因特异性短发夹RNA(short hair-pin RNA,shRNA)寡核苷酸链...
目的建立真核质粒载体介导的人SET基因RNA干扰表达体系,并检测其在肝细胞中对SET蛋白表达的影响,为研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性的作用打下基础。方法设计并合成2对人SET基因特异性短发夹RNA(short hair-pin RNA,shRNA)寡核苷酸链,退火形成双链DNA后插入到真核表达质粒psiRNA-hH1 neo中产生shRNA重组质粒载体,经酶切和测序鉴定成功后,转染至L-02肝细胞中,48h后收集细胞提取总蛋白,Western blotting检测干扰后SET蛋白的表达。结果 shRNA重组质粒的酶切和测序鉴定均正确,Western blotting结果显示重组质粒psiRNA1组的干扰效果较好,对SET蛋白表达的抑制率达60%左右,与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建针对人SET基因的RNA干扰真核质粒载体,其能有效地抑制肝细胞内SET蛋白的表达,为深入研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性中的作用奠定了基础。
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关键词
RNA干扰
SET基因
真核质粒载体
WESTERN
BLOTTING
原文传递
核酸疫苗的研究进展
被引量：
5
2
作者
郑兰艳
罗恩杰
《日本医学介绍》
2004年第4期185-187,共3页
关键词
核酸疫苗
研究进展
外源基因
真
核质
粒
表达
载体
基因重组
下载PDF
职称材料
DNA疫苗的作用机制及影响因素
被引量：
1
3
作者
张洪利
王金香
康大力
《现代医药卫生》
2008年第11期1651-1652,共2页
DNA疫苗（DNA vaccine）是1990年从基因治疗（genetic therapy）研究领域发展起来的一种全新疫苗，也称核酸疫苗（nucleicacid vaccine）。DNA疫苗是把含有编码某种抗原蛋白的外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组质粒直接导...
DNA疫苗（DNA vaccine）是1990年从基因治疗（genetic therapy）研究领域发展起来的一种全新疫苗，也称核酸疫苗（nucleicacid vaccine）。DNA疫苗是把含有编码某种抗原蛋白的外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组质粒直接导人动物细胞内。并通过宿主细胞的转录系统使外源基因在动物体内表达抗原蛋白，从而诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答．以达到预防和治疗疾病的目的。DNA疫苗可激起机体特异性免疫应答，免疫期长，具有生产成本低。易于大规模生产和保存等优点，是具有应用前景的新一代疫苗。但相对于传统疫苗而言。DNA疫苗所激发的免疫反应强度相对较弱。不足以引起足够的免疫保护效果，尤其对人类以及大动物的免疫试验Ⅲ。因此研究DNA疫苗的作用机制、影响因素对该疫苗的发展应用至关重要。
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关键词
DNA疫苗
特异性免疫应答
真
核质
粒
表达
载体
外源基因克隆
抗原蛋白
免疫保护效果
基因治疗
宿主细胞
下载PDF
职称材料
免疫刺激序列与DNA疫苗
4
作者
赵松
朱荫昌
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期122-125,共4页
关键词
免疫刺激序列
DNA疫苗
真
核质
粒
表达
载体
基因克隆
保护性抗原
下载PDF
职称材料
题名
人SET基因RNA干扰重组质粒载体的构建及其在肝细胞中的表达
被引量：
1
1
作者
黄新凤
刘建军
蒋英芝
席仁荣
杨亮
机构
深圳市疾病预防控制中心毒理检验科
出处
《热带医学杂志》
CAS
2011年第3期291-294,共4页
基金
国家自然科学基金(30972454)
深圳市科技计划重点项目(200801010)
文摘
目的建立真核质粒载体介导的人SET基因RNA干扰表达体系,并检测其在肝细胞中对SET蛋白表达的影响,为研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性的作用打下基础。方法设计并合成2对人SET基因特异性短发夹RNA(short hair-pin RNA,shRNA)寡核苷酸链,退火形成双链DNA后插入到真核表达质粒psiRNA-hH1 neo中产生shRNA重组质粒载体,经酶切和测序鉴定成功后,转染至L-02肝细胞中,48h后收集细胞提取总蛋白,Western blotting检测干扰后SET蛋白的表达。结果 shRNA重组质粒的酶切和测序鉴定均正确,Western blotting结果显示重组质粒psiRNA1组的干扰效果较好,对SET蛋白表达的抑制率达60%左右,与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建针对人SET基因的RNA干扰真核质粒载体,其能有效地抑制肝细胞内SET蛋白的表达,为深入研究SET蛋白在三氯乙烯致肝细胞毒性中的作用奠定了基础。
关键词
RNA干扰
SET基因
真核质粒载体
WESTERN
BLOTTING
Keywords
RNA interference
SET gene
eukaryotic plasmid vector
Western Blotting
分类号
Q522.2 [生物学—生物化学]
原文传递
题名
核酸疫苗的研究进展
被引量：
5
2
作者
郑兰艳
罗恩杰
机构
中国医科大学病原微生物教研室
出处
《日本医学介绍》
2004年第4期185-187,共3页
关键词
核酸疫苗
研究进展
外源基因
真
核质
粒
表达
载体
基因重组
分类号
R979.5 [医药卫生—药品]
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
下载PDF
职称材料
题名
DNA疫苗的作用机制及影响因素
被引量：
1
3
作者
张洪利
王金香
康大力
机构
广东食品药品职业学院
出处
《现代医药卫生》
2008年第11期1651-1652,共2页
文摘
DNA疫苗（DNA vaccine）是1990年从基因治疗（genetic therapy）研究领域发展起来的一种全新疫苗，也称核酸疫苗（nucleicacid vaccine）。DNA疫苗是把含有编码某种抗原蛋白的外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组质粒直接导人动物细胞内。并通过宿主细胞的转录系统使外源基因在动物体内表达抗原蛋白，从而诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答．以达到预防和治疗疾病的目的。DNA疫苗可激起机体特异性免疫应答，免疫期长，具有生产成本低。易于大规模生产和保存等优点，是具有应用前景的新一代疫苗。但相对于传统疫苗而言。DNA疫苗所激发的免疫反应强度相对较弱。不足以引起足够的免疫保护效果，尤其对人类以及大动物的免疫试验Ⅲ。因此研究DNA疫苗的作用机制、影响因素对该疫苗的发展应用至关重要。
关键词
DNA疫苗
特异性免疫应答
真
核质
粒
表达
载体
外源基因克隆
抗原蛋白
免疫保护效果
基因治疗
宿主细胞
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R512.62 [医药卫生—内科学]
下载PDF
职称材料
题名
免疫刺激序列与DNA疫苗
4
作者
赵松
朱荫昌
机构
江苏省血吸虫病防治研究所
出处
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期122-125,共4页
关键词
免疫刺激序列
DNA疫苗
真
核质
粒
表达
载体
基因克隆
保护性抗原
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人SET基因RNA干扰重组质粒载体的构建及其在肝细胞中的表达
黄新凤
刘建军
蒋英芝
席仁荣
杨亮
《热带医学杂志》
CAS
2011
1
原文传递
2
核酸疫苗的研究进展
郑兰艳
罗恩杰
《日本医学介绍》
2004
5
下载PDF
职称材料
3
DNA疫苗的作用机制及影响因素
张洪利
王金香
康大力
《现代医药卫生》
2008
1
下载PDF
职称材料
4
免疫刺激序列与DNA疫苗
赵松
朱荫昌
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
下载PDF
职称材料
已选择
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