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低浓度氟化钠对人牙髓细胞的成骨/成牙本质分化的影响
1
作者 李莉芬 韩俊力 江龙 《口腔疾病防治》 2024年第1期22-28,共7页
目的探讨低浓度氟化钠对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)成骨/成牙本质分化的影响。方法本研究已通过单位伦理委员会审查批准。原代培养hDPCs,采用MTT法检测不同浓度氟化钠对hDPCs增殖的影响;选取合适浓度的氟化钠加入成骨/... 目的探讨低浓度氟化钠对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)成骨/成牙本质分化的影响。方法本研究已通过单位伦理委员会审查批准。原代培养hDPCs,采用MTT法检测不同浓度氟化钠对hDPCs增殖的影响;选取合适浓度的氟化钠加入成骨/成牙本质分化诱导培养液中,对hDPCs进行体外诱导,通过茜素红染色检测hDPCs成骨/成牙本质分化能力的变化,RT⁃qPCR检测分化相关基因的mRNA表达;同时通过RT⁃qPCR和Western blot检测hDPCs成骨/成牙本质分化过程中内质网应激相关基因的表达。结果低浓度氟化钠(0.1 mmol/L)在体外可刺激hDPCs增殖,高浓度氟化钠(5~10 mmol/L)可抑制hDPCs增殖(P<0.05)。选取0.1 mmol/L氟化钠体外混合成骨/成牙本质分化诱导培养后hDPCs的茜素红染色增加,成骨/成牙本质分化相关基因牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)mRNA表达水平升高(P<0.05)。同时在此过程中RT⁃qPCR检测出mRNA水平hDPCs内质网应激相关基因:剪切x盒结合蛋白1(splicing x⁃box binding protein⁃1,sXBP1)、葡萄糖调节蛋白78(glucose⁃regulated protein 78,GRP78)以及活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)表达升高(P<0.05);Western blot检测出氟化钠混合成骨/成牙本质分化培养后细胞磷酸化真核起始因子⁃2α(phosphorylated eukary⁃otic initiation factor⁃2α,p⁃eIF2α)、磷酸化蛋白激酶样内质网激酶(phosphorylated the RNA⁃activated protein kinase⁃like ER⁃resident kinase,p⁃PERK)和ATF4蛋白表达增加(P<0.05)。结论低剂量氟化钠促进人牙髓细胞的成骨/成牙本质分化并伴有内质网应激水平的升高。 展开更多
关键词 人牙髓细胞 氟化钠 增殖 成骨/成牙本质分化 内质网应激 剪切X盒结合蛋白1 活化转录因子4 葡萄糖调节蛋白78 蛋白激酶样内质网激酶 真核起始因子⁃2α
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体外氧糖剥夺培养条件促进人牙髓细胞内质网应激的研究 被引量：1
2
作者 李莉芬 朱亚琴 江龙 《口腔疾病防治》 2022年第4期245-250,共6页
目的通过氧糖剥夺(oxygen⁃glucose deprivation,OGD)体外模拟细胞缺血缺氧,观察人牙髓细胞(hu⁃man dental pulp cells,hDPCs)内质网应激变化,为缺血缺氧条件调控hDPCs的机制研究提供依据。方法应用无糖DMEM培养液联合低氧培养(体积分数2... 目的通过氧糖剥夺(oxygen⁃glucose deprivation,OGD)体外模拟细胞缺血缺氧,观察人牙髓细胞(hu⁃man dental pulp cells,hDPCs)内质网应激变化,为缺血缺氧条件调控hDPCs的机制研究提供依据。方法应用无糖DMEM培养液联合低氧培养(体积分数2%O2)构建hDPCs OGD模型,体外模拟hDPCs缺血缺氧,设置对照组和实验组。对照组:常规培养;实验组:OGD处理0、2、4、8 h。MTT检测hDPCs OGD处理0、2、4、8 h后细胞存活率;qRT⁃PCR检测hDPCs内质网应激关键分子:剪切X盒结合蛋白1(splicing x⁃box binding protein 1,sXBP1)、活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,chop)mRNA水平,Western blot检测内质网应激关键蛋白:磷酸化蛋白激酶样内质网激酶(phosphorylated RNA⁃activated protein kinase⁃like ER⁃resident kinase,p⁃perk)、磷酸化真核起始因子⁃2α(phosphorylated eukaryotic initia⁃tion factor⁃2α,p⁃eIF2α)表达水平。结果相较于OGD处理0 h,OGD培养hDPCs 2、4、8 h后,死亡细胞增多,细胞存活率显著下降(P<0.05)。与对照组相比,OGD处理4 h后,hDPCs内质网应激关键信号分子sXBP1、ATF4、CHOP mRNA表达水平升高;内质网应激关键蛋白p⁃perk、p⁃eIF2α表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论hDPCs OGD培养条件下内质网应激水平明显升高。 展开更多
关键词 人牙髓细胞 氧糖剥夺 内质网应激 剪切X盒结合蛋白1 活化转录因子4 C/EBP同源蛋白 蛋白激酶样内质网激酶 真核起始因子⁃2α
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