目的：探讨从微量福尔马林固定石蜡包埋组织（formalinfixation and paraffin embeddedtissues,FFPET）中提取DNA的简单而高效的方法。方法：采用Chelex-100提取法、酚氯仿抽提法、单纯消化法、水煮法4种方法提取组织DNA;应用聚合酶链...目的：探讨从微量福尔马林固定石蜡包埋组织（formalinfixation and paraffin embeddedtissues,FFPET）中提取DNA的简单而高效的方法。方法：采用Chelex-100提取法、酚氯仿抽提法、单纯消化法、水煮法4种方法提取组织DNA;应用聚合酶链反应扩增100500bp长度DNA片段,然后进行电泳分析,1年后重复PCR电泳分析。结果：小于200bp长度DNA片段扩增,Chelex-100提取法、单纯消化法阳性率分别为88.8%、78.8%,明显优于酚氯仿抽提法（15.0%）（P〈0.01）及水煮法（21.3%）（P〈0.01）。随着扩增长度的增加,PCR扩增效率逐渐降低,Chelex-100提取法PCR反应总阳性率为82.5%,单纯消化法为66.5%,水煮法为13.4%,酚氯仿抽提法为13.4%。1年后重复PCR总阳性率分别为80.1%、31.7%、2.5%、9.2%。结论：Chelex-100提取法方便简单,适用于微量石蜡组织DNA扩增分析;单纯消化法及水煮法在一定条件下适用于微量石蜡组织短片段DNA的扩增。展开更多
文摘目的：探讨从微量福尔马林固定石蜡包埋组织（formalinfixation and paraffin embeddedtissues,FFPET）中提取DNA的简单而高效的方法。方法：采用Chelex-100提取法、酚氯仿抽提法、单纯消化法、水煮法4种方法提取组织DNA;应用聚合酶链反应扩增100500bp长度DNA片段,然后进行电泳分析,1年后重复PCR电泳分析。结果：小于200bp长度DNA片段扩增,Chelex-100提取法、单纯消化法阳性率分别为88.8%、78.8%,明显优于酚氯仿抽提法（15.0%）（P〈0.01）及水煮法（21.3%）（P〈0.01）。随着扩增长度的增加,PCR扩增效率逐渐降低,Chelex-100提取法PCR反应总阳性率为82.5%,单纯消化法为66.5%,水煮法为13.4%,酚氯仿抽提法为13.4%。1年后重复PCR总阳性率分别为80.1%、31.7%、2.5%、9.2%。结论：Chelex-100提取法方便简单,适用于微量石蜡组织DNA扩增分析;单纯消化法及水煮法在一定条件下适用于微量石蜡组织短片段DNA的扩增。
