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硒代甲硫氨酸对胃癌细胞蛋白表达谱的影响 被引量：1
1
作者 辛林 朱培谦 +1 位作者 曹家庆 沈威 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第16期1701-1704,共4页
目的:分析硒代甲硫氨酸对胃癌AGS细胞蛋白表达谱的影响.方法:应用Hoechst荧光染色法及流式细胞术观察硒代甲硫氨酸对胃癌AGS细胞凋亡的影响;应用双向凝胶电泳技术分析硒代甲硫氨酸对胃癌AGS细胞蛋白表达的影响.结果:胃癌AGS细胞在含硒... 目的:分析硒代甲硫氨酸对胃癌AGS细胞蛋白表达谱的影响.方法:应用Hoechst荧光染色法及流式细胞术观察硒代甲硫氨酸对胃癌AGS细胞凋亡的影响;应用双向凝胶电泳技术分析硒代甲硫氨酸对胃癌AGS细胞蛋白表达的影响.结果:胃癌AGS细胞在含硒代甲硫氨酸培养液中培养5d后,部分细胞的细胞核内出现凋亡小体,含硒代甲硫氨酸培养液中AGS细胞的凋亡率显著高于正常培养液组(53.98%±9.88%vs15.76%±9.03%,P<0.01).双向电泳技术筛选出12个表达差异的蛋白.结论:硒代甲硫氨酸可以影响胃癌AGS细胞蛋白的表达.这些差异表达的蛋白可能与胃癌细胞凋亡有关. 展开更多
关键词 硒代甲硫氨酸 胃癌细胞 双向凝胶电泳
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硒代甲硫氨酸对肉仔鸡胰腺外分泌部的影响 被引量：1
2
作者 周晓蕾 袁缨 +2 位作者 李建涛 李浩 曹宽仁 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2010年第13期43-46,共4页
选用1日龄AA肉仔鸡400只随机分成5个处理组,每个处理组4个重复,每个重复20只鸡,对照组添加0.30mg/kg的亚硒酸钠(Na2SeO3),4个实验组分别在基础日粮中添加0.15、0.3、0.45、0.60mg/kg4个水平的硒代甲硫氨酸(Se-Met),进行为期49d的生长试... 选用1日龄AA肉仔鸡400只随机分成5个处理组,每个处理组4个重复,每个重复20只鸡,对照组添加0.30mg/kg的亚硒酸钠(Na2SeO3),4个实验组分别在基础日粮中添加0.15、0.3、0.45、0.60mg/kg4个水平的硒代甲硫氨酸(Se-Met),进行为期49d的生长试验以研究不同水平的Se-Met对肉仔鸡胰腺外分泌部的影响。结果表明:添加Se-Met对胰腺脏器指数无显著影响;饲料中添加Se-Met与添加Na2SeO3相比能显著提高胰腺消化酶活性、且随着Se-Met添加量增加胰腺消化酶的活性有升高的趋势。电镜检测结果显示,各组胰腺腺泡结构基本健康正常。 展开更多
关键词 硒代甲硫氨酸 胰腺消化酶 胰腺腺泡 肉仔鸡
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硒代甲硫氨酸对肉仔鸡肉品质和抗氧化性能的影响
3
作者 王欣然 李建涛 +4 位作者 袁缨 姚玉园 刘胜男 李浩 曹宽仁 《饲料工业》 北大核心 2010年第24期5-9,共5页
试验采用单因子随机化设计，将400只AA肉仔鸡随机分为5个组，每个组设4个重复，每个重复20只鸡。第1组为对照组，饲喂玉米一豆粕型基础日粮，并添加亚硒酸钠0.30mg／kg；第2～5组为试验组，在基础日粮的基础上，分别添加0．15、0．30、0... 试验采用单因子随机化设计，将400只AA肉仔鸡随机分为5个组，每个组设4个重复，每个重复20只鸡。第1组为对照组，饲喂玉米一豆粕型基础日粮，并添加亚硒酸钠0.30mg／kg；第2～5组为试验组，在基础日粮的基础上，分别添加0．15、0．30、0．45、0．60mg／kg的硒代甲硫氨酸。通过42d的饲养试验和测试，综合日增重、采食量和料重比3项生长性能指标，当硒代甲硫氨酸添加量为0．30mg／kg时肉仔鸡生长性能最佳，且与对照组差异显著（P〈0．05）；与0．30mg／kg无机组相比，相同剂量的硒代甲硫氨酸在改善肉鸡的屠宰性能方面，可显著提高半净率、腿肌率（P〈0．05），对胴体率、全净率、胸肌率也有改善作用（P〉0．05），对改善肉品的滴水损失、嫩度和肉色作用显著（P〈0．05），但对屠宰24h后胸肌pH值差异不显著（P〉0．05）；硒代甲硫氨酸添加浓度为0．15mg／kg、0．30mg／kg时，对提高肉仔鸡机体抗氧化效应显著（P〈0．05）。综合各项指标，对于1～42日龄肉仔鸡最适的硒代甲硫氨酸添加量为0．30mg／kg。 展开更多
关键词 硒代甲硫氨酸 鸡肉品质 抗氧化能力 肉仔鸡
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硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物的制备 被引量：3
4
作者 何红珍 邵煜 +8 位作者 陈宇航 刘斌斌 曹振波 江凡 刘一苇 唐洪 刘进元 赵南明 饶子和 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第8期662-666,共5页
为利用硒原子的反常散射获取抗烟毒素蛋白晶体Ｘ射线衍射的相位信息，以质粒 ＰＱＥ－３０为表达载体，Ｅ．ｃｏｌｉ　Ｍ１５为宿主菌，在含有硒代甲硫氨酸的Ｍ９培养基中用ＩＰＴＧ诱导表达硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物．通过 Ｎｉ... 为利用硒原子的反常散射获取抗烟毒素蛋白晶体Ｘ射线衍射的相位信息，以质粒 ＰＱＥ－３０为表达载体，Ｅ．ｃｏｌｉ　Ｍ１５为宿主菌，在含有硒代甲硫氨酸的Ｍ９培养基中用ＩＰＴＧ诱导表达硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物．通过 Ｎｉ－ＮＴＡ金属亲合层析和 Ｍｏｎｏ Ｑ阴离子交换层析纯化目标蛋白．产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检验纯度达９５％以上，经 ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ和 ＥＳＩ－Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ质谱检测证实抗烟毒素蛋白硒代甲硫氨酸标记成功．采用与抗烟毒素蛋白晶体生长类似的条件，获得了衍生物可供衍射的晶体． 展开更多
关键词 硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物 晶体 表达 纯化 质谱 制备
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硒代甲硫氨酸联合5-氟尿嘧啶对人胃癌MKN-45细胞的协同抑制作用
5
作者 邓子清 韩曲 +4 位作者 曹家庆 胡小云 周智勇 辛林 毛盛勋 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期521-527,535,共8页
目的 :研究硒代甲硫氨酸(selenomethionine,Se Met)联合5-氟尿嘧啶(5-l uorouracil,5-FU)对人胃癌MKN-45细胞的抑制作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法 :采用不同浓度的Se Met与5-FU单独或联合作用于MKN-45细胞。细胞计数试剂盒-8(c... 目的 :研究硒代甲硫氨酸(selenomethionine,Se Met)联合5-氟尿嘧啶(5-l uorouracil,5-FU)对人胃癌MKN-45细胞的抑制作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法 :采用不同浓度的Se Met与5-FU单独或联合作用于MKN-45细胞。细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖的抑制率,并采用Chou-Talalay联合指数法分析两药之间的相互作用;FCM法检测细胞的凋亡率;细胞划痕实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室侵袭实验检测细胞的侵袭能力;蛋白质印迹法检测细胞中p53、p21、p27及细胞周期蛋白cyclin D1的表达水平。结果 :不同浓度的Se Met与5-FU单药或联合干预后,MKN-45细胞的增殖均明显受到抑制(P值均<0.01),并呈剂量依赖性,两药有协同作用。Se Met与5-FU联合用药组较空白对照组和各单药组细胞的凋亡率增加,迁移及侵袭能力降低(P值均<0.01)。联合用药组的p53、p21和p27蛋白的表达水平均较空白对照组和各单药组明显上调(P值均<0.01),而cyclin D1的表达水平明显下调(P值均<0.01)。结论 :Se Me联合5-FU能协同抑制人胃癌MKN-45细胞的增殖、迁移及侵袭,促进凋亡,其机制可能与调节MKN-45细胞中p53、p21、p27及cyclin D1蛋白的表达水平有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 硒代甲硫氨酸 5-氟尿嘧啶 抗肿瘤联合化疗方案
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鸡β2-微球蛋白及其硒代衍生物的制备和晶体学研究 被引量：3
6
作者 张建华 高峰 +2 位作者 彭浩 夏春 高福 《科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期38-41,共4页
禽流感的暴发使得禽类免疫系统的研究显得愈加迫切,而以其他种属的同源β2-微球蛋白作为模板进行结构解析,不能解析鸡β2-微球蛋白(Chβ2m)的晶体结构。为了利用硒原子的反常散射获取Chβ2m晶体X射线衍射的相位信息,本研究以pET21a为表... 禽流感的暴发使得禽类免疫系统的研究显得愈加迫切,而以其他种属的同源β2-微球蛋白作为模板进行结构解析,不能解析鸡β2-微球蛋白(Chβ2m)的晶体结构。为了利用硒原子的反常散射获取Chβ2m晶体X射线衍射的相位信息,本研究以pET21a为表达载体,E.coli BL21(DE3)为宿主菌,在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中,用IPTG诱导表达硒代甲硫氨酸Chβ2m。包涵体经提取和稀释复性法复性之后,通过分子筛层析和Resource Q阴离子交换层析进行纯化,产物经SDS-PAGE检验纯度达98%以上。利用悬滴气相扩散法采用与Chβ2m蛋白晶体生长相同的条件,获得了衍生物可供衍射的晶体。通过北京同步辐射装置收集数据,最高分辨率至1.9。 展开更多
关键词 鸡β2-微球蛋白 硒代甲硫氨酸 晶体衍射
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硒代蛋氨酸对中波紫外线致HaCaT细胞氧化损伤的保护作用 被引量：1
7
作者 刘赛君 郭梅艳 +4 位作者 邓列华 赵刚 胡云峰 易敏 吴实 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期490-493,共4页
目的研究硒代蛋氨酸对中波紫外线（UVB）致HaCaT细胞氧化损伤的影响及其可能机制。方法培养HacaT细胞，分为4组：①正常对照组，不做任何处理；②硒代蛋氨酸组：分别加入1、10、50、100、200nmol／L和1p,mol／L硒代蛋氨酸预孵育24h；③... 目的研究硒代蛋氨酸对中波紫外线（UVB）致HaCaT细胞氧化损伤的影响及其可能机制。方法培养HacaT细胞，分为4组：①正常对照组，不做任何处理；②硒代蛋氨酸组：分别加入1、10、50、100、200nmol／L和1p,mol／L硒代蛋氨酸预孵育24h；③uVB组：30、60、90mJ／cm2UVB照射；④硒代蛋氨酸＋UVB组：不同浓度硒代蛋氨酸预孵育24h后进行不同剂量UVB照射。采用噻唑蓝（MTr）法检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞凋亡率，比色法检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）活性及丙二醛（MDA）水平。采用析因设计方差分析、单因素方差分析对数据进行统计学分析，多重比较采用LSD法。结果析因设计方差分析结果显示，UVB照射对细胞增殖活性有抑制作用（F=128．04，P〈0．05），且随UVB强度增加，细胞增殖活性逐渐下降，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；硒代蛋氨酸预孵育对细胞增殖活性也有影响（F=5．95，P〈0．05），其中10nmol／L-1p,mol／L硒代蛋氨酸＋UVB组与UVB组比较，细胞增殖活性显著升高（P〈0．05）；UVB照射和硒代蛋氨酸对细胞增殖活性无明显交互作用（F=1．65，P〉0．05）。30mJ／era2UVB照射后，UVB组凋亡率（31．9％±2．67％）较正常对照组（4．1％±0．67％）显著升高（P〈0．05）；而10、50、100、200nmol／L和1μmol／L硒代蛋氨酸＋30mJ／cm。UVB组凋亡率[依次为：（21．9±3．72）％、（17．2±1．67）％、（4．6±0．85）％、（7．5±1．86）％、（13．5±1．95）％]均较30mJ／cm2UVB组凋亡率显著下降（P〈0．05）。30mJ／era2UVB组与正常对照组相比，SOD和GSH—Px活性降低，MDA含量升高（P〈0．05）；10nmol／L-μmol／L硒代蛋氨酸＋30mJ／cm2UVB组与30mJ／cm。UVB组比较，SOD和GSH—Px活性增高，MDA含量下降（P〈0．05）。结论硒代蛋氨酸可以减轻UVB诱导HaCaT细胞氧化损伤，其机制与增强抗氧化酶活性、减少氧自由基有关。 展开更多
关键词 紫外线 角蛋白细胞 硒代甲硫氨酸 HACAT细胞
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毕赤酵母含硫氨基酸生物合成途径
8
作者 张平平 喜多岛敏彦 +2 位作者 王宁 高晓冬 中西秀树 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期58-64,共7页
含硫氨基酸是所有生物生长繁殖不可缺少的氨基酸。尽管毕赤酵母在工业发酵中作为重要的表达菌株,但是其含硫氨基酸的生物合成途径尚未明了。作者采用生物信息学及表型分析的方法,阐明了毕赤酵母含硫氨基酸的生物合成途径。结果表明,毕... 含硫氨基酸是所有生物生长繁殖不可缺少的氨基酸。尽管毕赤酵母在工业发酵中作为重要的表达菌株,但是其含硫氨基酸的生物合成途径尚未明了。作者采用生物信息学及表型分析的方法,阐明了毕赤酵母含硫氨基酸的生物合成途径。结果表明,毕赤酵母可通过O-乙酰同丝氨酸及O-乙酰丝氨酸与无机硫元素合成含硫氨基酸,甲硫氨酸与半胱氨酸也可通过转硫途径实现相互转化。另外毕赤酵母cys3Δ突变菌株在未添加半胱氨酸的合成培养基中对硒代甲硫氨酸表现出显著的抗性。综上所述,未来有望应用毕赤酵母表达硒蛋白用于蛋白质三级结构的分析。 展开更多
关键词 毕赤酵母 O-乙酰同丝氨酸 O-乙酰丝氨酸 转硫途径 硒代甲硫氨酸
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水痘-带状疱疹病毒糖蛋白gE在昆虫细胞中的表达鉴定及其晶体培养 被引量：3
9
作者 姚巧缤 李婷婷 +9 位作者 荣芮 张玉云 李泽凯 薛文辉 李瑾瑾 朱瑞 程通 顾颖 夏宁邵 李少伟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第5期505-510,共6页
目的利用杆状病毒-昆虫表达系统建立纯化水痘带状疱疹病毒(VZV)包膜糖蛋白gE的方法,筛选gE蛋白的晶体培养条件,以期用于结构解析。方法将VZV糖蛋白gE基因序列克隆至杆状表达载体pAcgp67B载体中,利用High FiveTM昆虫细胞表达gE蛋白并进行... 目的利用杆状病毒-昆虫表达系统建立纯化水痘带状疱疹病毒(VZV)包膜糖蛋白gE的方法,筛选gE蛋白的晶体培养条件,以期用于结构解析。方法将VZV糖蛋白gE基因序列克隆至杆状表达载体pAcgp67B载体中,利用High FiveTM昆虫细胞表达gE蛋白并进行TALON亲和层析纯化;利用WAVE生物波浪反应器建立含硒代甲硫氨酸的gE蛋白方法,以便在晶体结构解析中利用单波长或多波长异常散射进行相位解析;通过分子排阻色谱、分析超离,差示扫描量热法和酶联免疫吸附试验等分析gE蛋白的理化性质;利用结晶试剂盒对gE498和gE354蛋白的结晶条件进行初筛。结果获得的gE498和gE354蛋白纯度约为90%、产量为8~10 mg/L。理化分析显示两种gE蛋白在溶液中主要以均一稳定的单体形式存在,并呈现出良好的反应原性。在gE354晶体初筛中获得3个结晶条件:CrystalH3、PEGH12和IndexB10。结论建立了VZV糖蛋白gE表达和纯化方法,制备的蛋白纯度高,且具有反应原性,并筛选出CrystalH3、PEGH12和IndexB10这3个结晶条件,为gE糖蛋白的结构与功能研究及新型疫苗开发奠定了基础。 展开更多
关键词 水痘-带状疱疹病毒 糖蛋白gE 杆状病毒-昆虫表达系统 晶体培养 硒代甲硫氨酸
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