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结合态PC645组分的分离纯化和性质
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作者 王宇涵 任靖文 陈敏 《烟台大学学报(自然科学与工程版)》 CAS 2024年第3期281-292,共12页
采用蔗糖密度梯度离心方法从蓝隐藻(Chroomonas placoidea)中分离得到了含有结合态藻蓝蛋白PC645的Chl-蛋白条带BandⅢ;硫酸铵分级沉淀显示,50%硫酸铵可最有效去除其中大部分Chl-蛋白且有效避免PC645的损失。光谱和多肽分析表明,含量最... 采用蔗糖密度梯度离心方法从蓝隐藻(Chroomonas placoidea)中分离得到了含有结合态藻蓝蛋白PC645的Chl-蛋白条带BandⅢ;硫酸铵分级沉淀显示,50%硫酸铵可最有效去除其中大部分Chl-蛋白且有效避免PC645的损失。光谱和多肽分析表明,含量最丰富的BandⅠ的亚基主要为1型,说明PC645占主导的α1α2β1β2异二聚体形式主要以游离态存在于类囊体腔中;而BandⅢ中富含的2型亚基参与形成的异二聚体很可能为α1α2β1β2,其疏水性更强,更易于被盐析沉淀。硫酸铵分级沉淀后的BandⅢ经疏水层析得到的疏水程度较低的组分1同时含有PC645和Chl a-蛋白;疏水程度最高的组分4,为基本不含叶绿素的、充分纯化的PC645,且很可能是BandⅢ中与Chl-蛋白处于结合态的PC645组分。结果为今后隐藻两套捕光系统结构和相互作用机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝隐藻 PC645-Chl-蛋白复合物 蔗糖密度梯度离心 硫酸铵分级沉淀 疏水层析
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辣木籽凝乳酶的提取分离条件优化
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作者 吴改转 庄玺 +1 位作者 王雪峰 黄艾祥 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期137-142,152,共7页
为给辣木籽凝乳酶的开发利用提供理论依据,以脱脂辣木籽粉为原料,采用盐法提取、硫酸铵(AS)分级沉淀和离子交换色谱法提取分离凝乳酶。通过单因素试验和正交试验对辣木籽凝乳酶的盐法提取条件进行优化,采用单因素试验对离子交换色谱法... 为给辣木籽凝乳酶的开发利用提供理论依据,以脱脂辣木籽粉为原料,采用盐法提取、硫酸铵(AS)分级沉淀和离子交换色谱法提取分离凝乳酶。通过单因素试验和正交试验对辣木籽凝乳酶的盐法提取条件进行优化,采用单因素试验对离子交换色谱法分离纯化条件进行优化,并采用SDS-PAGE和RP-HPLC对分离得到的辣木籽凝乳酶的分子质量和纯度进行分析。结果表明:盐法提取的最佳条件为料液比1∶10、提取温度30℃、pH 7.15、NaCl浓度0.3 mol/L、提取时间0.5 h;在20%~40%AS饱和度下的沉淀蛋白凝乳活性最好且蛋白质总占有率达61.71%;离子交换色谱法的最佳分离条件为进样质量浓度30 mg/mL、流动相pH 5.15、流速1.68 mL/min、流动相组成为0.05 mol/L醋酸钠+0.05 mol/L氯化钠,在此条件下辣木籽凝乳酶的凝乳比活力值达到24 SU/mg;该凝乳酶的分子质量主要分布在35~45 kDa,纯度达到90%以上。采用该方法能有效提取分离辣木籽凝乳酶,且能很好地保持其凝乳活性。 展开更多
关键词 辣木籽 凝乳酶 硫酸铵分级沉淀 离子交换色谱法 凝乳活性 SDS-PAGE
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植物乳杆菌亚油酸异构酶的分离纯化及其性质研究 被引量:20
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作者 苗士达 张中义 +3 位作者 刘萍 柴秋儿 胡锦荣 孙君社 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期12-15,共4页
经硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤,由植物乳杆菌(LactobacillusplantarumL 2 9)分离纯化得到亚油酸异构酶,分子量为4 3ku。对其酶学性质进行研究,结果表明,温度37℃、pH 6 0时酶活性较高;Co2 + 、Fe2 + 可提高酶的活性,Cu2... 经硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤,由植物乳杆菌(LactobacillusplantarumL 2 9)分离纯化得到亚油酸异构酶,分子量为4 3ku。对其酶学性质进行研究,结果表明,温度37℃、pH 6 0时酶活性较高;Co2 + 、Fe2 + 可提高酶的活性,Cu2 + 、Zn2 + 则对酶活力有抑制作用;该酶作用于亚油酸的Km=2 5 3×10 -5mol/L ,Vmax=2 5 7×10 -8mol/ (min·mg)。 展开更多
关键词 亚油酸异构酶 植物乳杆菌 分离纯化 性质研究 硫酸铵分级沉淀 阴离子交换层析 CO^2+ FE^2+ Cu^2+ ZN^2+ 凝胶过滤 酶学性质 抑制作用 分子量 酶活力 酶作用 活性
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骆驼蓬种子凝集素粗品活性的初步研究 被引量:8
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作者 唐海淑 宁雪飞 +4 位作者 陈亮亮 殷晓丽 罗晶晶 马晓瑾 孙素荣 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期813-820,共8页
采用硫酸铵分级沉淀法提取骆驼蓬种子凝集素粗品,并进行凝血活性和抗菌活性检测。凝血实验结果表明:(1)50%-60%硫酸铵饱和度下提取骆驼蓬种子的凝集素粗品对鸡红细胞的凝集活力最强,最低凝集浓度为0.6 mg/L,且其凝集素粗品的活力受... 采用硫酸铵分级沉淀法提取骆驼蓬种子凝集素粗品,并进行凝血活性和抗菌活性检测。凝血实验结果表明:(1)50%-60%硫酸铵饱和度下提取骆驼蓬种子的凝集素粗品对鸡红细胞的凝集活力最强,最低凝集浓度为0.6 mg/L,且其凝集素粗品的活力受温度、pH值、金属离子及糖溶液的影响。(2)不同硫酸铵饱和度沉淀获得的凝集素粗品对6种人体致病细菌及5种能引起水果腐烂和粮食霉变的真菌均有不同程度的抑制作用,其中50%-60%硫酸铵饱和度下提取的凝集素粗品抑菌活性最强,其浓度为1.071 mg/mL时对鲍曼不动杆菌和意大利青霉菌的抑菌环半径分别可达8.1 mm和4.9 mm。 展开更多
关键词 骆驼蓬 硫酸铵分级沉淀 凝集素粗品 凝血活性 抑菌活性
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长白山药用真菌树舌凝集素的纯化及生化特性 被引量:5
5
作者 张春玉 黄国辉 +3 位作者 林景卫 孙非 许守民 刘立侠 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期84-88,共5页
用硫酸铵分级沉淀、离子交换和HPLC层析等方法,从长白山药用真菌树舌的菌丝体中分离纯化了一种凝集素(Ganoderma applanatum lectin,简称GAL),SDS-PAGE检测其为单一蛋白条带。经过SDS-PAGE测得其亚基分子量为15kDa左右,HPLC分析分子量为... 用硫酸铵分级沉淀、离子交换和HPLC层析等方法,从长白山药用真菌树舌的菌丝体中分离纯化了一种凝集素(Ganoderma applanatum lectin,简称GAL),SDS-PAGE检测其为单一蛋白条带。经过SDS-PAGE测得其亚基分子量为15kDa左右,HPLC分析分子量为58kDa左右,表明GAL由4个亚基组成。氨基酸组成分析表明,GAL中甘氨酸含量较高,不含蛋氨酸和色氨酸,中性糖含量约11.2%。圆二色CD谱显示其含有3.6%的α螺旋、46.8%的β转角和49.6%无规则卷曲,不含有β折叠。GAL可以凝集供试的2种动物血和3种血型人血的血红细胞,但对不同来源的血红细胞凝集滴度不同。糖抑制实验表明,只有棉籽糖和D-松三糖部分抑制GAL的凝血活性。GAL具有较好的热稳定性且其凝血活性不受Ca2+、Mg2+和Zn2+等二价阳离子的影响。 展开更多
关键词 树舌 凝集素 生化特性 血凝集活性 药用真菌 分离纯化 长白山 HPLC分析 硫酸铵分级沉淀 亚基分子量
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异养硝化菌Alcaligenes faecalis strain NR的硝化性能及其酶活性 被引量:5
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作者 安强 赵彬 何义亮 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期774-779,共6页
从膜生物反应器的活性污泥中分离出一株异养硝化细菌Alcaligenes faecalis strain NR,采用柠檬酸三钠为碳源、氯化铵为氮源研究其硝化性能,通过超声波破碎法对调控其硝化过程的2个关键酶——氨单加氧酶(AMO)和羟胺氧化酶(HAO)进行粗提,... 从膜生物反应器的活性污泥中分离出一株异养硝化细菌Alcaligenes faecalis strain NR,采用柠檬酸三钠为碳源、氯化铵为氮源研究其硝化性能,通过超声波破碎法对调控其硝化过程的2个关键酶——氨单加氧酶(AMO)和羟胺氧化酶(HAO)进行粗提,考察影响其提取率的主要因素(功率、工作与间歇时间、菌液浓度和总工作时间),并采用正交实验进行优化.结果表明:菌株NR具有产生亚硝酸盐和硝酸盐的能力;在30℃和120 r/min的好氧条件下,当NH_4^+-N浓度为20、40和60 mg/L时,菌株NR在24 h内对NH_4^--N的去除率分别为94.8%、93.5%和94.5%;粗酶提取的最佳工作条件为菌液光密度1.876,总工作时间600 s,工作和间歇时间4、6 s,功率300 W;在好氧条件下,测得AMO和HAO的酶比活力分别为0.011和0.016 U/mg protein. 展开更多
关键词 异养硝化 氨单加氧酶 羟胺氧化酶 超声波破碎 硫酸铵分级沉淀
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南美白对虾虾头蛋白酶提取工艺的研究 被引量:3
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作者 庄志凯 陈康玉 +6 位作者 彭珩 曹文红 高加龙 卢虹玉 池岸英 蓝尉冰 吉宏武 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期227-230,共4页
以南美白对虾虾头为原料,对提取条件进行优化设计。通过单因素实验研究pH、温度和料液比对内源蛋白酶活力的影响,然后设计正交实验确定内源蛋白酶的最佳提取条件,初步研究内源蛋白酶硫酸铵分级沉淀的最佳饱和度。结果表明:内源蛋白酶在p... 以南美白对虾虾头为原料,对提取条件进行优化设计。通过单因素实验研究pH、温度和料液比对内源蛋白酶活力的影响,然后设计正交实验确定内源蛋白酶的最佳提取条件,初步研究内源蛋白酶硫酸铵分级沉淀的最佳饱和度。结果表明:内源蛋白酶在pH为2和8时酶活力较高。通过正交实验得出酸性蛋白酶最佳提取条件为缓冲溶液pH3,料液比1:2,温度30℃;碱性蛋白酶最佳提取条件为缓冲溶液pH8,料液比1:3,温度50℃。酸性蛋白酶进行初步分离的结果是硫酸铵一级沉淀饱和度10%,硫酸铵二级沉淀饱和度50%;碱性蛋白酶进行初步分离的结果是硫酸铵一级沉淀饱和度20%,硫酸铵二级沉淀饱和度80%。 展开更多
关键词 南美白对虾 内源蛋白酶 提取工艺 参数优化 硫酸铵分级沉淀
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猪心肌乳酸脱氢酶的提纯工艺及酶反应最适条件 被引量:3
8
作者 王立艳 汪建军 +1 位作者 杨海麟 王武 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2004年第2期70-73,共4页
研究了适合于工业化生产的猪心肌乳酸脱氢酶的初步提取工艺 ,经硫酸铵分级沉淀得到酶的比活为86 5U/mg ,再经DEAE离子交换层析比活可达 5 2 5 0U/mg ,酶活总收率为 5 4 5 % .并对酶促反应的最适条件进行了研究 ,其最适反应pH为 7 6~ 7... 研究了适合于工业化生产的猪心肌乳酸脱氢酶的初步提取工艺 ,经硫酸铵分级沉淀得到酶的比活为86 5U/mg ,再经DEAE离子交换层析比活可达 5 2 5 0U/mg ,酶活总收率为 5 4 5 % .并对酶促反应的最适条件进行了研究 ,其最适反应pH为 7 6~ 7 8,最适反应底物浓度分别为NADH 5mg/mL和丙酮酸钠 2 5mmol/L . 展开更多
关键词 心肌 乳酸脱氢酶 提纯工艺 硫酸铵分级沉淀 纯化 离子交换层析
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酵母醇脱氢酶的分离纯化 被引量:5
9
作者 柳畅先 吴士筠 李志勇 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第2期11-12,共2页
报道了酵母醇脱氢酶的分离纯化 .使用硫酸铵分级沉淀 ,Sephadex G- 1 0 0凝胶层析技术 ,从啤酒酵母提取液中分离出醇脱氢酶 .收得率为 1 0 .9% ,纯化倍数达 5 3.
关键词 醇脱氢酶 分离纯化 酵母 硫酸铵分级沉淀 凝胶层析
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红色荧光蛋白在毕赤酵母中的高效表达 被引量:2
10
作者 杨坤宇 刘如石 +3 位作者 林鉴 张智洪 张军 夏宁邵 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期410-415,共6页
报道了红色荧光蛋白(DsRFP)在毕赤酵母中的高水平表达.利用PCR技术从YEpFLAG- 1 -DsRFP扩增出DsRFP编码序列,克隆到毕赤酵母胞内表达载体pPIC3. 5K构建重组表达载体pPIC3. 5K- DsRFP,电击转化进毕赤酵母,G418 RDB平板双重筛选后获得重... 报道了红色荧光蛋白(DsRFP)在毕赤酵母中的高水平表达.利用PCR技术从YEpFLAG- 1 -DsRFP扩增出DsRFP编码序列,克隆到毕赤酵母胞内表达载体pPIC3. 5K构建重组表达载体pPIC3. 5K- DsRFP,电击转化进毕赤酵母,G418 RDB平板双重筛选后获得重组转化子,经MM/MD平板培养与PCR鉴定,重组子全部为HIS+MUT+表型.重组菌株诱导表达48h后获得了高效表达,摇瓶中表达水平达到细胞内总蛋白的12%,表达量达到1. 8g/L.经硫酸铵分级沉淀,DEAE- 5PW阴离子交换柱层析与S- HyperD阳离子交换柱层析后获得电泳纯蛋白.说明我们建立的毕赤酵母表达应用平台具有高效表达外源蛋白的能力. 展开更多
关键词 红色荧光蛋白 毕赤酵母 高效表达 离子交换柱层析 硫酸铵分级沉淀 重组表达载体 PCR鉴定 PCR技术 诱导表达 重组菌株 平板培养 电击转化 编码序列 外源蛋白 应用平台 酵母表达 表达量 总蛋白 细胞内 重组子 转化子 水平
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一步法提取鸭血清转铁蛋白 被引量:3
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作者 秦晓蓉 伍林 +3 位作者 易德莲 张铭金 魏飞 王立立 《武汉科技大学学报》 CAS 2006年第6期614-617,共4页
一步法提取鸭血清转铁蛋白是利用热变性沉淀去除鸭血清中的杂蛋白,在微碱性(pH值为8.0)条件下,75℃保温25 m in,转铁蛋白的纯化倍数为1.11,收率为96%,而硫酸铵分级沉淀法的纯化倍数为1.03,收率为51%。一步法与硫酸铵分级沉淀法相比,方... 一步法提取鸭血清转铁蛋白是利用热变性沉淀去除鸭血清中的杂蛋白,在微碱性(pH值为8.0)条件下,75℃保温25 m in,转铁蛋白的纯化倍数为1.11,收率为96%,而硫酸铵分级沉淀法的纯化倍数为1.03,收率为51%。一步法与硫酸铵分级沉淀法相比,方法简单,成本低廉,适宜工业化生产。 展开更多
关键词 鸭血清 转铁蛋白 热变性沉淀 硫酸铵分级沉淀
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孕牛血清中早孕因子的生化特性研究 被引量:2
12
作者 孙文东 吴瑞英 +2 位作者 邓雁如 赵明 努尔.波拉提 《新疆医科大学学报》 CAS 2003年第3期222-223,226,共3页
目的 :探讨孕牛血清中早孕因子 (EPF)的生化特性。方法:对孕牛 (妊娠 4~ 5个月 )血清进行标准化处理 ,采用硫酸铵分级沉淀、DEAE- Sepharose、CM- Sepharose柱层析、玫瑰花环抑制滴度试验、SDS- PAGE和等电聚焦等技术对 EPF进行生化特... 目的 :探讨孕牛血清中早孕因子 (EPF)的生化特性。方法:对孕牛 (妊娠 4~ 5个月 )血清进行标准化处理 ,采用硫酸铵分级沉淀、DEAE- Sepharose、CM- Sepharose柱层析、玫瑰花环抑制滴度试验、SDS- PAGE和等电聚焦等技术对 EPF进行生化特性的研究。 结果 :在孕牛血清中分离出分子量分别为 2 1、6 7k D两条区带的蛋白质 ,以 2 1k D区带蛋白质活性最强 ,其等电点为 6 .80。结论 :孕牛血清中存在着分子量为 2 1、6 7k D的蛋白质 ,均具有EPF特性 ,2 1k D蛋白等电点为 6 .80。 展开更多
关键词 孕牛 血清 早孕因子 生化特性 研究 硫酸铵分级沉淀
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反胶团法提取红芸豆植物血凝素的比较研究 被引量:2
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作者 侯玉芳 李继昌 侯玉宝 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期259-261,共3页
目的:为了找到一种操作简便、省时、高效的提取植物血凝素的方法。方法:采用AOT/异辛烷反胶团体系提取植物血凝素,考察了pH、萃取时间和离子强度对反胶团萃取的影响,并与传统的水溶液浸提、硫酸铵沉淀法进行了比较,通过蛋白提取率和血... 目的:为了找到一种操作简便、省时、高效的提取植物血凝素的方法。方法:采用AOT/异辛烷反胶团体系提取植物血凝素,考察了pH、萃取时间和离子强度对反胶团萃取的影响,并与传统的水溶液浸提、硫酸铵沉淀法进行了比较,通过蛋白提取率和血凝效价来评价提取效果。结果:反胶团对植物血凝素的萃取率约为7·23%,而传统的3种浸提方法中最高提取率为5·49%,反胶团法提取液的血凝效果也较好。结论:AOT/异辛烷反胶团体系提取率高,操作简便,是提取植物血凝素的一种很好的方法。 展开更多
关键词 植物血凝素 反胶团体系 影响因素 水溶液浸提 硫酸铵分级沉淀
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利用曲霉sp. HX-1发酵稻草秸秆制备纤维素酶
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作者 刘彪 马娟 +3 位作者 谭玲 林永慧 王海燕 刘任成 《吉首大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第4期95-100,共6页
以稻草秸秆原料,利用曲霉sp. HX-1固态发酵生产纤维素酶,研究了不同发酵时间、不同氮源和氮源浓度对曲霉sp. HX-1纤维素酶系的影响,并最终用硫酸铵分级沉淀和低温冷冻干燥的方法得到混合纤维素酶干品.结果表明,发酵6d后稻草秸秆产生的... 以稻草秸秆原料,利用曲霉sp. HX-1固态发酵生产纤维素酶,研究了不同发酵时间、不同氮源和氮源浓度对曲霉sp. HX-1纤维素酶系的影响,并最终用硫酸铵分级沉淀和低温冷冻干燥的方法得到混合纤维素酶干品.结果表明,发酵6d后稻草秸秆产生的纤维素酶活力单位最大,分别为CMC酶307U/mL,C1酶841U/mL、β-葡萄糖苷酶205U/mL.以不同氮源优化发酵条件时发现,NH4NO3质量浓度为1g/L时CMC酶活力达到1 652 U/mL,且失重率也到达最大值17.42%;NH4Cl质量浓度为0.5g/L时,C1酶活力达到1 807U/mL;尿素(UREA)质量浓度为2.0g/L时,β-葡萄糖苷酶活力为2 033U/mL,这表明氮源对曲霉sp.HX-1纤维素酶系的影响很大.最后在NH4NO3质量浓度为1.0g/L的条件下,将120g稻草秸秆发酵6d,从发酵液中提取得到8.851 7g混合纤维素酶的干品.此实验为以后探讨碳源或者其他因素的影响提供方法借鉴,也可以为获得纤维素酶混合酶干品的获得提供参考方法. 展开更多
关键词 曲霉sp. HX-1 稻草秸秆 纤维素酶 氮源 硫酸铵分级沉淀 低温冷冻干燥
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木瓜凝乳蛋白酶的分离纯化 被引量:1
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作者 邓静 丁玉兰 赵树进 《化工中间体》 2005年第1期34-37,共4页
采用硫酸铵分级沉淀与离子交换相结合的方法从市售的木瓜蛋白酶干粉中分离纯化木瓜凝乳蛋白酶。结果表明Macro-PrepHighSSupport离子交换树脂比SP-SepharoseFastFlow离子交换树脂能更好的分离纯化木瓜凝乳蛋白酶,经Macro-PrepHighSSupp... 采用硫酸铵分级沉淀与离子交换相结合的方法从市售的木瓜蛋白酶干粉中分离纯化木瓜凝乳蛋白酶。结果表明Macro-PrepHighSSupport离子交换树脂比SP-SepharoseFastFlow离子交换树脂能更好的分离纯化木瓜凝乳蛋白酶,经Macro-PrepHighSSupport交换树脂二次纯化的木瓜凝乳蛋白酶已达到了与标准品同样的纯度。 展开更多
关键词 木瓜凝乳蛋白酶 分离纯化 市售 标准品 SP 离子交换树脂 干粉 硫酸铵分级沉淀 纯度 相结合
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乌梢蛇(Z.dhumnades)血清中抗尖吻蝮(A.acutus)毒因子的初步分离
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作者 王玉珍 许贞玉 《Zoological Research》 SCIE CAS 1981年第S01期149-151,共3页
蛇血清中存在抗毒因子,有不少工作报道。经测定,乌梢蛇(Zaocys dhumnades)血清中含有能抗尖吻蝮(Agkistrodon acutus)蛇毒的因子。我们初步从中分离得到抗毒因子。其分离过程和结果如下:一、乌梢蛇血清分离步骤1.硫酸铵分级沉淀乌梢蛇血... 蛇血清中存在抗毒因子,有不少工作报道。经测定,乌梢蛇(Zaocys dhumnades)血清中含有能抗尖吻蝮(Agkistrodon acutus)蛇毒的因子。我们初步从中分离得到抗毒因子。其分离过程和结果如下:一、乌梢蛇血清分离步骤1.硫酸铵分级沉淀乌梢蛇血清56℃灭活30′后,按体积加入固体硫酸铵,取40~50%饱和硫酸铵沉淀部分。 展开更多
关键词 乌梢蛇 尖吻蝮 抗毒 硫酸铵分级沉淀 饱和硫酸铵沉淀
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毛栓菌木聚糖酶的纯化
17
作者 柏玉洁 朱启忠 +2 位作者 陈晚华 王旭 任延刚 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第19期7961-7962,7964,共3页
[目的]进一步研究毛栓菌木聚糖酶的酶学性质。[方法]对毛栓菌木聚糖酶的粗酶液进行硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析S、ephadexG100柱层析3步纯化,探讨木聚糖酶的产酶曲线及纯化方法。[结果]毛栓菌在最适培养基中培养时,木聚... [目的]进一步研究毛栓菌木聚糖酶的酶学性质。[方法]对毛栓菌木聚糖酶的粗酶液进行硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析S、ephadexG100柱层析3步纯化,探讨木聚糖酶的产酶曲线及纯化方法。[结果]毛栓菌在最适培养基中培养时,木聚糖酶活力从第2天迅速提升,第8天达高峰,随后下降。经饱和度为30%~70%的硫酸铵分级沉淀后,酶活力回收率为84.931%,蛋白质含量为粗酶液的24.640%,纯化倍数为3.445。经DEAE-纤维素离子交换层析后,酶活力回收率为44.345%,酶蛋白纯化倍数为11.772。经SephadexG100柱层析后,酶活力回收率为20.201%,酶蛋白纯化倍数为16.123。[结论]毛栓菌木聚糖酶的粗酶液经过3步纯化后,酶活力回收率达20.201%,酶蛋白纯化倍数达16.123。 展开更多
关键词 毛栓菌 木聚糖酶 纯化 硫酸铵分级沉淀 DEAE-纤维素离子交换柱层 SephadexG100柱层析
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产碱假单胞菌精氨酸脱亚胺酶的纯化
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作者 操凤 刘雪冰 曹献英 《热带生物学报》 2015年第4期491-496,共6页
提取精氨酸脱亚胺酶粗酶液,采用硫酸铵分级沉淀法初步分离精氨酸脱亚胺酶,然后通过DEAESephadex A 50柱色谱层析和Sephadex G-100柱色谱层析进一步分离纯化精氨酸脱亚胺酶,并利用SDS-PAGE电泳法来鉴定其纯度,最终达到纯化产碱假单胞菌... 提取精氨酸脱亚胺酶粗酶液,采用硫酸铵分级沉淀法初步分离精氨酸脱亚胺酶,然后通过DEAESephadex A 50柱色谱层析和Sephadex G-100柱色谱层析进一步分离纯化精氨酸脱亚胺酶,并利用SDS-PAGE电泳法来鉴定其纯度,最终达到纯化产碱假单胞菌来源的精氨酸脱亚胺酶(ADI)的目的。结果表明:分离纯化过程中,粗酶液的总酶活为424.43 U,比酶活为0.42 U·mg^(-1);盐析透析酶液的总酶活是222.10 U,比酶活为2.05 U·mg^(-1);离子交换分析活性部位的总酶活为105.83 U,比酶活是5.61 U·mg^(-1);凝胶渗透分析活性部位的总酶活为17.94 U,比酶活为11.80 U·mg^(-1)。纯化得到了电泳纯级别的ADI,其相对纯度为96%。因此,本研究方法可以得到较高纯度和酶活的精氨酸脱亚胺酶。 展开更多
关键词 精氨酸脱亚胺酶 分离纯化 硫酸铵分级沉淀 柱色谱层析
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明胶文摘
19
《明胶科学与技术》 CAS 2014年第1期52-54,共3页
硫酸铵分级沉淀对鳙鱼明胶凝胶强度及其特性的影响 Sha XM, et al. Food Hydrocolloids 2014, 36 : 173 - 180. 从鳙鱼中提取的明胶凝胶强度为415.7±9.9g。不同硫酸铵饱和度(20%,25%,30%,35%,40%)的硫酸铵分级沉... 硫酸铵分级沉淀对鳙鱼明胶凝胶强度及其特性的影响 Sha XM, et al. Food Hydrocolloids 2014, 36 : 173 - 180. 从鳙鱼中提取的明胶凝胶强度为415.7±9.9g。不同硫酸铵饱和度(20%,25%,30%,35%,40%)的硫酸铵分级沉淀(简称ASFP)分别得到不同凝胶强度(469.7±12.0g,419.7±9.9g,181.9±17.7g,83.9±9.9g,15.3±2.1g)的鱼明胶。 展开更多
关键词 鱼明胶 硫酸铵分级沉淀 文摘 凝胶强度 FOOD Sha 饱和度 鳙鱼
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Production of Amylase from Saccharomyces diastaticus sp. and Hydrolysis of Cassava Pulps for Alcohol Production 被引量:1
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作者 Jirasak Kongkiattikajom 《Journal of Agricultural Science and Technology(B)》 2012年第8期909-918,共10页
Amylolytic enzymes are currently investigated to improve industrial processes of starch degradation. Saccharomyces diastaticus 2047 isolated from cassava waste showed amylase and glucoamylase production, using starch ... Amylolytic enzymes are currently investigated to improve industrial processes of starch degradation. Saccharomyces diastaticus 2047 isolated from cassava waste showed amylase and glucoamylase production, using starch medium, and the highest rate was obtained in the initial growth phase, after incubation for 24 h at pH 5.5. Maximum amylase and glucoamylase activities (483.62 U mg^-1 protein and 290.85 U mg^-1 protein) were obtained at pH 5.5. The isolated enzymes exhibited thermostable properties as indicated by retention of 100% of residual activity at 55 ℃ for 45 min with total inhibition at 100 ℃. Extracellular enzyme from S diastaticus 2047 was partially purified by fractionated precipitation with ammonium sulphate. After 40% saturation produced 2,197.00 and 1,192.83 U/mg protein, and yield was 40% with purification 4.54 and 4.1 fold, respectively. This study presents feasibility on ethanol production from cassava pulps pretreated with diluted sulfuric acid by simultaneous saccharification and fermentation (SSF) with S. diastaticus 2047. The results indicated that the culture was able to produce ethanol with high yield without amylolytic enzyme adding by using cassava pulps pretreated with distilled water at 135 ℃ under pressure of 15 lb/inch^2 to produce ethanol yield as high as the cassava pulps pretreated with diluted sulfuric acid under the same condition. This suggests that S diastaticus with enzyme produced has potential for industrial applications. 展开更多
关键词 Ethanol cassava pulp FERMENTATION amylase.
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